JPS59171849A - 電気泳動用媒体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、蛋白質等の生体高分子の電気泳動分析に使用
する水性ゲル電気泳動用媒体に関するものであり、さら
に詳しくは、酸素存在下でも製造可能なアクリルアミド
系水性ゲル電気泳動用媒体に関するものである。

電気泳動分析は、ガラス板、透明プラスチック等の支持
体に寒天、セルロース、セルロースアセテート、デンプ
ン、シリカゲル、ポリアクリルアミドゲル等の膜形成材
料を塗布又は流延して製造した電気泳動膜に緩衝液をし
みこませ、またはこれらの電気泳動膜を緩衝液に浸し、
次いで分析対象の物質（試料）を上記の電気泳動膜上に
付着させ、支持体の両端に電圧をかけ、支持体の表面ま
たは内部で展開（移動）させた後、染色し、この染色し
た試料の（透過）光学濃度を測定して物質の各成分の定
量分析を行なうものである。

なお、電気泳動分析および電気泳動膜の詳細については
、電気泳動実験法「電気泳動実験法（改訂第５版）」（
文光堂、１９７５年発行）、青水、永井祐著「最新電気
泳動法」　（床用書店、１９７３年発行）等に記載され
ている。

近年においては、電気泳動法による生体成分の分析法が
確立される一方、生体蛋白分析は病気診断に用いる生化
学検査において頻繁に用いられており、電気泳動分析の
用途はますますその重要性を増し、その用途も広がって
いる。

ところで、電気泳動用膜またはシートとしては古くから
、濾紙が用いられていたが、性能上の面から最近はアガ
ロース膜やポリアクリルアミドゲル膜が用いられるよう
になり、特に分子ふるい効果を有するポリアクリルアミ
ドゲル膜は現在最も多く利用されている。ポリアクリル
アミドゲル膜は、水の存在下にアクリルアミドのような
単量体を重合触媒の存在下、Ｎ、Ｎ’−メチレンビスア
クリルアミドのような二官能性の架橋剤でもって除酸素
条件下で重合架橋させることによって得られている。

ポリアクリルアミドｎりは、一定厚み（例えば０．３ｍ
ｍ〜１ｍｍ）のスペーサーでカラス板上に「せき」を作
り、この「せき」の中にアクリルアミド、架橋剤および
重合触媒を含む水溶液（ゲル形成液またはゲル原液）を
流し込んだ後、ガラス板で上からおさえてシールし、酸
素を遮断し、架橋重合させてゲル化することによりゲル
膜を作っている。

このようにして作成したポリアクリルアミドケル膜は、
水平あるいは垂直のスラブ電気泳動にかけられる。そし
て所定条件で一定時間電気泳動を行なったのち、ゲル膜
を染色（例えば、デンソ３Ｒ染色、クマシーブリリアン
トブルーＧ−２５０染色、銀染色等がある）処理し、生
体成分の分析を行なう。

」二連のように従来のポリアクリルアミドゲル膜の製造
に際しては、除酸素操作が必要なため、ゲル膜の量産化
が阻まれていた。

そこで本発明者は、酸素の存在に無関係に調製でき、し
かも、分離能、泳動速度等の電気泳動特性が良好であり
、総合的に従来のゲル膜より著しく優れた分子ふるい効
果を有するポリアクリルアミドゲル系媒体を提供する事
を目的に、鋭意検討した結果、本発明に到達した。

本発明は、水の存在下で架橋重合された特定の一般式に
より表される構成繰返し単位を有するアクリルアミド系
コポリマーを含む水性ゲルからなる電気泳動用媒体にあ
る。

次に本発明の詳細な説明する。

本発明の水性ゲルからなる電気泳動用媒体としては、下
記の一般式（１）乃至（３）のいずれかにより表わされ
る構成繰返し単位を含むアクリルアミド系コポリマーを
含有するゲル媒体が用いられる。特に一般式（１）で表
わされるポリマーが好ましい。

［一般式（１）において、 Ｒ１１は水素原子または１から６個の炭素原子を有する
アルキル基である； 　ＩＩ Ｑｌは−ＣＯＯ−１−ＣＯＮ−１または６から１０個の
炭素原子を有するアリーレン基、　１１ ■ Ｌｌは、−ＣＯＯ−あるいは−ＣＯＮ−（７）結合のい
ずれかを少なくとも１個含み、がっ３から１５個の炭素
原子を有する二価の基、または、ＲＩＩ −０−１−Ｎ−１−ＣＯ−１−ＳＯ−１ＲＩＩ −ＳＯ□−１−ＳＯ３−１−８０２Ｎ−１−ＮＣＯＮ−
１あるいは−ＮＣＯＯ−の結合のいずれかを少なくとも
１個含み、かつ１から１２個の炭素原子を有する二価の
基である（ただしＲＩ＋は前述と同義である）； Ｒ１２は−ＣＨ＝　ＣＨ２又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ１のい
ずれかである（ただし、ｘｌは求核基により置換される
基、あるいは塩基によってＨＸｌの形で脱離しうる基を
表わす）： Ａ１はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和モ／マーから誘導された二価の基であ
る； ｘ　１　、　　ｙ　１およびｚｌはモル百分率を表わし
、Ｘｌは５０〜９９、ｙｌは１〜５０．２１は残余の値
をとる（　ｚ　ｉはＯであってもよい）］：上記の一般
式（１）において、 Ｒ＋ｔの例にはメチル基、エチル基、ブチル基、ｎ−ヘ
キシル基が含まれる。

Ｑｌの例には次のような基が含まれる。

ＣＨ３ −ＣＯＯ−１−ＣＯＮＨ−１−ＣＯＮ−１Ｌ１の例には
次のような基が含まれる。なお、これらの二価の基の一
般式（Ｉ）　４こおける結合の方向は、ＱｌとＳ　Ｏｚ
との結合が可能なかぎり、いずれの方向をもとることが
できる。

ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２− ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２− −ＣＨ２ＣＨｚ　Ｃ００ＣＨ２− 子ＣＨ２升ｓ　ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２− ’：　ＣＨ２＋　ｔｏ　ＣＯＯＣＨｚ　ＣＨ２−−ＣＨ
２ＣＨ２ＣＨ２− ＣＨｚ　Ｎ　ＨＣＯＣＨ２ＣＨｚ− ＋　ＣＨ２）　３Ｎ　ＨＣＯＣＨｚ　ＣＨｚ−＋　ＣＨ
ｚ　）　５　Ｎ　ＨＣＯＣＨｚ　ＣＨ２−＋ＣＨ２）　
ｔｏ　Ｎ　ＨＣＯＣＨｚ　ＣＨ２−−ＣＨ２０ＣＨ２− −ＣＨｚ　ＣＨ２０ＣＨ２ＣＨ２ＣＨｚ　−−Ｃ０ＣＨ
２ＣＨ２− −ＣＨ２ＣＯＣＨ２ＣＨ２− 一　Ｓ　ＯＣＨ２ＣＨ２− ＣＨ２Ｓ　　ＯＣＨ２ＣＨ２− −ＳＯ。ＣＨ２ＣＨ２− 一５Ｏ８ＣＨｚ　ＣＨｚ　Ｓ　Ｏｚ　ＣＨ２ＣＨ２−−
Ｓ　Ｏ２ＣＨ２ＣＨｚ　Ｓ　Ｏ２ＣＨｚ　ＣＨＣＨ２Ｈ １ Ｓ　　　ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２− １ Ｓ　Ｏ３ＣＨ２ＣＯＯＣＨｚ　ＣＨ２−３Ｏ３ＣＨｚ　
ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨｚ−３Ｏ２Ｎ　ＨＣＨ２ＣＯＯ
ＣＨ２ＣＨ２−３Ｏ２Ｎ　ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＣＨｚ
　ＣＨ２−Ｎ　ＨＣＯＮ　ＨＣＨ２ＣＨｚ　　−−ＣＨ
２Ｎ　ＨＣＯＮ　ＨＣＨ２ＣＨｚ−−ＮＨＣＯＯＣＨ２
ＣＨ２− −ＣＨｚ　Ｎ　ＨＣＯＯＣＨ２ＣＨｚ−Ｒ１２は前記の
ように、−ＣＨ＝　ＣＨ，、２あるいは−ＣＨ２ＣＨ２
Ｘ”のいずれかであるが、このＸｉの例には、次のよう
な基が含まれる。

ハロゲン原子（塩素、臭素など）：ヒドロキシル基；ア
ルキルスルホニルオキシ（例、メチルス１ ルホニルオキシＨ３Ｃ−３−０−、エチルスルホ１ ニルオキシ、プロピルスルホニルオキシなど）；アリー
ルスルホニルオキシ（例、フェニルスルホリ スルホニルオキシなど）：アルキルカルボニルオキシ（
例、アセトキシ、プロピオニルオキシ、１・ルフルオロ
メチル力ルポニルオキシ、ジクロロメチルカルボニルオ
キシなど） 従って、Ｒ１２の例には、次のような基が含まれる。

−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２０文。

ＣＨ２ＣＨ２Ｂ　ｒ　。

１ −ＬＣＨ２ＣＨ２−０−３−ＣＨ３、 １ ＣＨ２ＣＨ２０Ｈｌ ＣＨ２ＣＨｚ　ＯＯＣＣＨ３、 ＣＨ２ＣＨｚ　ＯＯＣＣＦ　３、 −ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＨＣ文３、 Ａ１で表わされる二価の基の例としては、下記のような
エチレン性不飽和七ツマ−から誘導された基を挙げるこ
とができる。

エチレン、プロピレン、１−ブテン、インブテン、スチ
レン、クロロメチルスチレン、ヒドロキシメチルスチレ
ン、ビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ビニルベン
ジルスルホン酸ナトリウム、Ｎ、’Ｎ、Ｎ−）リフチル
−Ｎ−ビニルベンジルアンモニウムクロリド、Ｎ、Ｎ−
ジメチル−Ｎ−ヘンシル−Ｎ−ビニルベンジルアンモニ
ウムクロリド、α−メチルスチレン、ビニルトルエン、
４−ビニルピリジン、２−ビニルピリジン、ベンジルビ
ニルピリジニウムクロリド、Ｎ−ビニルアセトアミド、
Ｎ−ビニルピロリドン、ｌ−ビニル−２−メチルイミタ
ゾール、脂肪族酸のモノエチレン性不飽和エヌテル（例
えば酢酸ビニル、酢酸アリル）、エチレン性不飽和のモ
ノカルボン酸もしくはジカルボン酸およびその塩（例え
ばアクリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、マレイン酸
、アクリル酸ナトリウム、アクリル酸カリウム、メタク
リル酸ナトリウム）、無水マレイン酸、エチレン性不飽
和のモノカルボン酸もしくはジカルボン酸のエステル（
例えばｎ−ブチルアクリレート、ｎ−へキシルアクリレ
ート、ヒドロキシエチルアクリレート、シアンエチルア
クリレート、（ジエチルアミノ）エチルアクリレート、
メチルメタクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、ペ
ンシルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレー
ト、クロロエチルメタクリレート、メトキシエチルメタ
クリレート、（ジエチルアミノ）エチルメタクリレート
、Ｎ、Ｎ、Ｎ−１リエチルーＮ−メタクリロイルオキシ
エチルアンモニウムＰ−トルエンスルホナート、Ｎ、Ｎ
−ジエチル−Ｎ−メチル−Ｎ−メタクリロイルオキシエ
チルアンモニウムＰ−）ルエンスルホナート、イタコン
酸ジメチル、マレイン酸モノベンジルエステル）、エチ
レン性不飽和のモノカルボン酸もしくはジカルボン酸の
アミド（例えばＮ、Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−
メチロールアクリルアミド、Ｎ−［（ジメチルアミノ）
プロピルコアクリルアミド、Ｎ、Ｎ、Ｎ−）リメチルー
Ｎ−（アクリロイルプロピル）アンモニウムＰ−）ルエ
ンスルホナート、２−アクリルアミド−２−メチルプロ
パンスルホン酸ナトリウム、アクリロイルモルホリン、
メタクリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎｏ−アクリロ
イルプロパンジアミンプロピオナートベタイン、Ｎ、Ｎ
−ジメチル−Ｎｏ−メタクリロイルプロパンジアミンア
セテートベタイン）。

また本発明の重合体を架橋されたラテックスとして用い
る場合には、ＡＩとして上記のエチレン性不飽和千ツマ
−から誘導された基のほかに、少なくとも共重合可能な
エチレン性不飽和基を２個以上もつモノマー（例えばジ
ビニルベンゼン、メチレンビスアクリルアミド、エチレ
ングリコールジアクリレート、トリメチレングリコール
ジアクリレ−１・、エチレングリコールジメタクリレー
ト、トリメチレングリコールジメタクリレート、ネオペ
ンチルグリコールジメタクリレート等）から誘導された
基を用いることができる。

以下全白 ［一般式（２）において、 Ｒ”は水素原子または１から６個の炭素原子を有するア
ルキル基である； Ｒ”　バー　ＣＨ＝　ＣＨ２又バー　ＣＨ２ＣＨ２Ｘ　
”である（ただし、ｘ２は求核基によって置換されうる
基、または塩基によってＨＮ３の形で脱離しうる基を表
わす）； Ｌ２は、１から６個の炭素原子を有するアルキレン基（
例、メチレン、エチレン、インブチレン）、６から１２
個の炭素原子を有するアリーレン基（例、フェニレン、
トリレン、ナフタレン）、−ＣＯＺ２−で表わされる基
、および−ＣＯＺ　２　Ｒ２３−で表わされる基（ただ
し、Ｒ２３は１から６個の炭素原子を有するアルキレン
基、あるいは６から１２個の炭素原子を有するアリーレ
ン基であり、そしてＺ２は酸素原子あるいはＮＨである
）から選ばれる二価の基である； Ａ２はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和モノマーから誘導された二価の基であ
る； ｘ２、ｙ２およびｚ２はモル百分率を表わし、Ｘ２は５
０〜９５、ｙ２は５〜５０．２２は残余の値をとる（ｚ
２はＯであってもよい）］：なお、上記一般式（２）の
Ｒ”、Ｒ”、およびＡ２の例には、それぞれ前記一般式
（１）のＲＩＩ、Ｒ１２、およびＡｌと同じ例が含まれ
る。

［一般式（３）において、 Ｒ３１は水素原子、または１から６個の炭素原子を有す
るアルキル基である； Ｌ３は１から２０個の炭素原子を有する二価の連結基（
さらに好ましくは、−ＣＯＮＨ−又は−Ｃ〇−結合のう
ち少なくとも一つを含む炭素数１〜２の二価の基）であ
る； Ｘ３は活性エステル基である； Ａ３はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和モノマーから誘導された二価の基であ
る； Ｘ３、ｙ３およびＺ３はモル百分率を表わし、Ｘ３は５
０〜９９、ｙ３は１〜５０、ｚ３は残余の値をとる（　
ｚ　３はＯであってもよい）；ｍはＯあるいはｌである
］ 上記一般式（３）のＲ３１およびＡ３にはそれぞれ、前
記一般式（１）のＲ１１およびＡ１の例と同じものが含
まれる。

一般式（３）のＬ３には次のような基が含まれる。−〇
〇〇Ｈ２− ＣＯＣＨ２ＣＨ２０ＣＯＣＨ２ＣＨ２−−ＣＯＮ　ＨＧ
　Ｈｚ− −Ｃ０ＮＨＣＨ２ＣＨ２− ＣＯＮ　ＨＣＨｚ　ＣＨ２ＣＨ２− ＣＯＮ　ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＨｚ　ＣＨ２ＣＨ２−−ＣＯ
Ｎ　ＨＣＨ２ＣＯＮ　ＨＣＨ２−ＣＯＮＨＣＨ２Ｃ０Ｎ
ＨＣＨ２Ｃ０ＮＨＣ：Ｈｚ　−ＣＯＨＨＣｆ４２ＮＨＣ
ＯＣＨｚ　ＧＨｚ　ＣＨｚ　Ｓ　ＣＨｚ　ＧＨｚ　−Ｃ
ＯＮＨＣＨ２０ＣＯＯＨ２ＣＨ２−など式（３）のｘ３
には次のような基が含まれる。

−ＣＯＯＣＲ２ＣＮ −ＣＯＯＣＨ２Ｃ００Ｃ２Ｈｓ −ＣＯＯＣＨ２ＣＯＮＨ２ −ＣＯＯＣＨ２ＣＯＣＨ５ −ＣＯ０ＣＨ２ＣＯＯＣＨ＝ＣＨ２ −ＣＯＯＮ　＝　ＣＨＣＨ３ −ＣＯＯＮ　＝　Ｃ（ＣＨ３）　　２ −ＣＯ０Ｃ＝ＣＨＣＯＣＨ３ Ｈ３ ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２Ｂ　ｒ −ＣＯＯＣＨｔＣ）！二ＣＮ ■ Ｈ３ 以下に、上記の一般式（１）乃至（３）のいずれかによ
り表わされる構成繰返し単位を有するポリマーの合成に
用いることができる代表的なビニルスルホニル基あるい
はその前駆体となる官能基を有するエチレン性不飽和七
ツマ−の合成法を具体的に示す。

ｊ：、１、下余白 ［合成Ｎｔ、］　２−　［３−（２−クロロエチルスル
ホニル）プロピオニルオキシコニチルアクリレートの合
成 ＣＨ＝ＣＨ２ Ｃ＝０ 反応容器にテトラヒドロフラン６００　ｍ　ｌ、ヒドロ
キシエチルアクリレート４５．８ｇ・　３−（２−クロ
ロエチルスルホニル）プロピオン酸クロリド７２ｇを加
え、氷水により冷却しながら、５℃以下で、ピリジン３
１．２ｇをテトラヒドロフラン１００　ｍ　ｌに溶解し
たものを１．７５時間で滴下した。その後室温で２時間
攪拌を続け、反応試料を２．５文の氷水中に注ぎ込み、
クロロホルム３００　ｍ　ｌにより４回抽出した。有機
層を硫醇ナトリウムにより乾燥後、濃縮して、２−［３
−（２−クロロエチルスルホニル）プロピオニルオキシ
コニチルアクリレート８７ｇを得た。

（収率８８％） ［合成例２］　Ｎ−［３−（２−クロロエチル、スルホ
ニル）プロパンアミドメチルコアクリルアミドの合成 ＣＨ＝ＣＨ２ Ｃ＝０ ２Ｍの反応容器に蒸留水１．４００ｍ１、亜硫酸ナトリ
ウム２４４ｇ、炭酸水素ナトリウム２２０ｇを加え、攪
拌して溶解させた後、氷水により冷却しながら約５℃で
、クロロエタンスルホニルクロリド２６０ｇを１．５時
間で滴下した。その後４９％硫＄１６０ｇを約１５分で
滴下し、５℃で１時間はど撹拌を続けて、析出した結晶
を濾過した後、結晶を４００ｍ文の蒸留水で洗浄し、濾
液と洗浄液とを一緒にして３文の反応容器に入れた。こ
の中にメチレンビスアクリルアミド２４６ｇを蒸留水４
８０　ｍ　ｌ、エタノール１，４８０ｍ１に溶解させた
ものを、氷冷しながら約５°Ｃで、３０分間で滴下した
後、全体を冷蔵庫に５日間装置して反応を完結させた。

析出した結晶を濾取した後、冷却した蒸留水８００ｍＭ
で洗浄し、２．０００１の５０％エタノール水溶液から
再結晶して、２１９ｇのモノマーを得た。収率は４９％
であった。（分析結果、Ｈ：５．１７、Ｃ：３７．９０
、Ｎ：９．４Ｂ、Ｃ，Ｑ、：１２．５８） ［合成例３］（［：３−（２−クロロエチルスルボニル
）プロパンアミドコメチル）スチレンの合成反応容器に
テトラヒドロフランｌｏＯｍＭ、ビニルベンジルアミン
２０．１ｇ、トリエチルアミン１６．７ｇ、ヒドロキノ
ン０．１ｇを入れ、氷水により冷却しながらβ−クロロ
エチルスルホニルプロピオン酸クロリド３６．１ｇを２
００ｍＭのテトラヒドロフランに溶解させたものを３０
分で滴下した。その後室温で一夜放置し、反応試料を濃
硫酸１６．５ｇを氷水１．５１で希釈した溶液中に注ぎ
込み、生成する沈澱を濾取した。この沈澱をエタノール
２００ｍＭ、水２００ｍＭの混合溶媒から再結晶するこ
とにより、２６．８ｇの（［３−（２−クロロエチルス
ルホニル）プロパンアミドコメチル）スチレンを得た。

収率は５７％であった。（分析結果、Ｈ：５．７４、Ｃ
：５３．４７　　、　　Ｎ：４．８３　　、　　Ｃｆｉ
　　、　　　ｌ　　０　　、　　９９、Ｓ：１０．４９
） ［合成例４］　１−　［２−（４−ビニルフェニルスル
ホニル）エチルスルホこル］　−３−（２−クロロエチ
ル）スルホニル−２−プロパツールの合成Ｈ 以下余白 反応容器に１，３−ビス（２−クロロエチル）スルホニ
ル−２−プロパツール１５７ｇ（特開昭５３−５７２５
７公報に開示の方法により合成した化合物）、メタノー
ル１文および蒸留水１文を加え、４６℃に加熱しながら
ビニルベンゼンスルフィン酸カリウム５２ｇをメタノー
ル１００ｍＭと蒸留水１００ｍＪ１に溶解させたものを
１時間で滴下した。その後４６°Ｃに保ったまま５．５
詩間攪拌を続け、生成する沈諏を濾取して５５ｇの１−
［２−（４−ビニルフェニルスルホニル）エチルスルホ
ニル］−３−（２−クロロエチル）スルホニル−２−プ
ロパツールを得た。収率は４９％であった。（分析結果
、Ｈ：４．６７、Ｃ：３９．８９、Ｓ・２１’、４３） 本発明のゲル媒体を形成するために好ましいポリマーと
して、次に示す構成繰返し単位を有するポリマーを挙げ
ることができる。

ここで、ｘ、ｙ、ｚはモル百分率であり、Ｒ１Ｒ′は下
記の置換基を示す。

Ｐ−１’ｘ＝９２、Ｙ＝８．２＝０ Ｒ＝　Ｃｏｏ　ＣＨ２ＣＨ２０ＣＯＣＨ２ＣＨｚ　ＳＯ
２ＣＨ＝　ＧＨ２Ｐ−２ｘ＝９２．ｙ＝８、ｚ＝Ｑ Ｒ＝　Ｃ０ＮＩ（Ｃ）Ｉ２ＮＨＣＯＣＨ２ＣＨ２ＳＯ□
ＣＨ−Ｃ）１２Ｐ−３ｘ＝８０、Ｙ＝８、Ｚ−１２ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨｚ　ＮＨＣＯＣＨ２ＣＨ２Ｓｏ。Ｃ
Ｈ＝ＣＨ２Ｒ’　＝　ＧＣＩＮＨｚ　Ｃ（ＣＨ３）　２
　ＧＨｚ　ＣＣＪＣＨｚＰ−４ｘ＝９２、Ｙ＝８．２＝
０ Ｐ−５ｘ＝９２、Ｙ＝８．２＝０ Ｐ−６ｘ＝９２、Ｙ＝８．２＝０ Ｕ Ｐ−？　　　　ｘ＝９２　、　ｙ＝８．　　ｚ＝０Ｒ＝
　Ｃ０ＮＨＧＨ２ＮＨＣＯＣＨｚ　ＧＨｚ　ＳＯ□ＣＨ
ｚ　ＯＨ２ＣＩＰ−８ｘ＝８０　、　Ｙ＝８　、　Ｚ　
−１２Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＧＨ２ＮＨＧＯＣＨｚ　ＯＨ２Ｓ
Ｏ２ＯＨ２ＣＨ２ＣＩＲ”　＝　Ｃ０ＮＨ２Ｃ（ＣＨ３
）２　ＧＨｚ　Ｃ０ＣＨｚＰ−９ｘ＝８０．ｙ＝８、　
Ｚ−１２ Ｒ’　　＝　　　Ｃ０ＮＨＣＨ２０）ＩＰ−１０ｘ＝８
０．　　Ｙ＝８、　ｚ　＝　１２Ｐ−＋１　　　　ｘ　
＝　　８　０　　、　Ｙ＝８　、　Ｚ　−１２Ｐ−１２
ｘ　＝　９　２　、　Ｙ＝８、　ｚ＝ＱＲ＝　Ｃｏｏ　
Ｃ’Ａｚ　ＣＨ２０ＣＯＣ）１２　ＳＯ２ＣＨ＝　ＯＨ
２本発明においてアクリルアミドコポリマーは電気泳動
用媒体の構造体支持成分として機能しており、これらの
アクリルアミドコポリマーの水性ゲルは、所望のコポリ
マーの各構成成分を水の存在下で架橋重合させて調製す
る。この架橋重合に際しては架橋剤を用いることが好ま
しい。

本発明のアクリルアミドコポリマー水性ゲルを得るため
に用いられる架橋剤としては、２個以上の求核性基（た
とえば、アミノ基、フェノール性水酸基、スルフィン酸
基、チオール基、アミノ基とチオール基の組合わせ）を
同一分子内に有する化合物を挙げることができる。

求核性基としてアミ７基を有する架橋剤としては、例え
ばエチレンジアミン、１，３−プロパンジアミン、１，
５−ペンタンジアミン、ヘキサメチレンジアミン、ジエ
チレントリアミン、トリエチレンテトラミン、プロピレ
ンシアミン、ジ（アミノメチル）エーテル、１，４−ジ
アミノ−２−ブテン、１．８−ジアミノ−４−（アミノ
メチル）オクタン、キシリレンジアミン、フェニレンジ
アミン、ポリリジン、ポリエチレンイミン、ゼラチン等
がある。

フェノール性水酸基を有する架橋剤としてはヒドロキノ
ン、ビスフェノールＡ、ビスフェノールスルホン等があ
る。

スルフィン酸基を有する架橋剤としては１゜４−ブタン
ジスルフィン酸、ベンゼンジスルフィン醇等がある。

チオール基を有する架橋剤としては、チオエタノールア
ミン、ｐ−アミノチオフェノール等がある。

アミノ基とチオール基を有する化合物としてはシスチア
ミン等がある。

架橋剤の添加量としては、ゲル化しうる程度、すなわち
本発明のポリマー中の反応性基に対して０．５〜５倍当
量を用いるのが好ましい。

次に、前記のポリマーのうちでも特に好ましいポリマー
であるＰ−１、Ｐ−２、Ｐ−７およびＰ−８の合成例を
示す。

［合成例５コ　ポリ−２−［３−（ビニルスルホニル）
プロピオニルオキシ］エチルアクリレートーコーアクリ
ルアミド（ｊ−１）の合成反応容器にＮ、Ｎ−ジメチル
ホルムアミド６ＯＩＩＩ文、２−　［３−（２−クロロ
エチルスルホニル）プロピオニルオキシ］エチルアクリ
レート１４．５ｇおよびアクリルアミド３２．６ｇを入
れ８、窒素ガスで脱気後、６０℃に加熱して、２゜２′
−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）　　Ｅ
ＣＡ　Ｓ　　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ　４４１９−１１
−８　］　０　、４ｇを加え、２時間加熱攪拌を続けた
。その後さらに２，２′−アゾビス（２，４−ジメチル
バレロニトリル）Ｏ，，２０ｇを加え、２時間加熱、攪
拌を続けた後、５°Ｃに冷却して炭酸ナトリウム１２ｇ
、トリエチルアミン４．９ｇを加え、１時間攪拌を行な
った。さらに室温で１時間攪拌を続けた後、反応液をセ
ルロースチューブに入れて２日間透析し、凍結乾燥によ
って４３ｇの白色ポリマー（前記Ｐ−１に該当）を得た
（収率９５％）。このポリマーのビニルスルホニル基含
量は１，０×１０−３当量／ｇであった。

［合成例６］　ポリ−Ｎ−（［３−（ビニルスルホニル
）プロパンアミドコメチル）アクリルアミドーコーアク
リルアミド（Ｐ−２）の合成２００ｍ１の反応容器に、
合成例２で得られた千ツマ−５，６５ｇ、アクリルアミ
ド１２．８ｇおよび５０％メタノール水溶液８０ｍ文を
加え、攪拌しなから６０°Ｃに加熱し、２，２′−アゾ
ビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）０．１ｇを加
え、さらに３０分後にも同じものを０．１ｇ加えて、１
時間加熱攪拌を続けた。その後、氷水により約１０’ｏ
に冷却して、トリエチルアミン２．５ｇを８０　ｍ　ｌ
のメタノールに溶解させたものを加え、１ｖｆＭ攪拌を
続けてから、反応液を攪拌しながらＬＭのアセトンに注
ぎ込み、生成した沈澱を濾取して、１５．９ｇの白色ポ
リマー（前記Ｐ−２に該当）を得た（収率は９０％）。

このポリマーのスルホニル基含量は０　、９５　Ｘ　Ｉ
　Ｏ−’当量／ｇであった。

［合成例７］　ポリ−Ｎ−（［３−（２−クロロエチル
スルホニル）プロパンアミドコメチル）アクリルアミド
ーコーアクリルアミド（Ｐ−７）の合成 ５００ｍＪ１の反応容器に、合成例２で得られた七ツマ
−１０，３ｇ、アクリルアミド１５．６ｇおよび５０％
メタノール水溶液１６０　ｍ　ｌを加え、攪拌しながら
６０°Ｃに加熱し、２，２”−アゾビス（２，４−ジメ
チルバレロニトリル）　０．２ｇを加え、さらに３０分
後にも同じものを０．２ｇ加えて、１時間加熱、攪拌を
続けた。反応液をセルロースチューブに入れて２日間透
析し、凍結乾燥によって２３ｇの白色ポリマー（前記Ｐ
−７に該当）を得た（収率９０％）。このポリマーのク
ロロエチルスルホニル基含量は１　、　ＯＸ　１０−’
当量／ｇであった。

［合成例８コ　コーポリ−Ｎ−（［３−（２−クロロエ
チルスルホニル）プロパンアミドメチルコアクリルアミ
ド−アクリルアミド−Ｎ−（１。

１−ジメチル−３−オキツブチル）アクリルアミド（Ｐ
−８）の合成 ５００ｍ文の反応容器に、合成例２で得られたモノマー
１０．３ｇ、アクリルアミド２９．２ｇ、Ｎ−（１，１
−ジメチル−３−オキツブチル）アクリルアミド（ジア
セトンアクリルアミド）１１．３ｇおよび５０％メタノ
ール水溶液１６０ｍ交を加え、攪拌しなから６０’Ｃに
加熱し、２゜２゛−アゾビス−（２，４−ジメチルバレ
ロニトリル）０．２ｇを加え、３０分後さらに同じもの
を０．２ｇ加えて１時間加熱攪拌を続けた。反応液をセ
ルロースチューブに入れて２日間透析し、凍結乾燥によ
り４３．２ｇの白色のポリマー（前記Ｐ−８に該当）を
得た（収率８５％）。このポリマーのクロロエチルスル
ホニル基含量は０．８ｘ　ｉ　ｏ−’当量／ｇであった
。

本発明において好ましく用いられるアクリルアミドコポ
リマーの分子量は約１万から約１００万の範囲にあり、
分子量を選択することにより電気泳動用媒体形成液（以
下、ゲル形成液という）の粘度を調節することができる
。このゲル形成液を例えば水平に置いた支持体の上に流
延、塗布するなど公知の方法によりゲル電気泳動膜を形
成することができる。

本発明の電気泳動用媒体（以下、ゲル媒体ともいう）は
、変性剤として陰イオン性界面活性剤を含有することが
好ましい。特に分析試料が蛋白質または複合蛋白質（た
とえば、リポプロティン、糖プロティンなど）の場合に
は、陰イオン性界面活性剤を含ませることは好ましいか
、または必須であることが多い。陰イオン性界面活性剤
をゲル媒体に含有させないことがあることはもちろんで
ある。

陰イオン性界面活性剤の具体例としては、アルキル硫酸
塩が挙げられ、とくに炭素原子数ｉｏ以上の長鎖アルキ
ル基を有するアルキル硫酸塩が好ましく用いられる。塩
を形成する陽イオンとしては、ナトリウムイオン、カリ
ウムイオン、リチウムイオン等のアルカリ金属イオンが
一般的であり、これらのうちではナトリウムイオンが安
価で用いやすい。アルキル硫酸塩のうちではドデシル硫
酸塩（ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等）が好
ましく、なかでもドデシル硫酸ナトリウム（ＳＯ５）が
最も好ましい。陰イオン界面活性剤、特にＳＤＳを本発
明のゲル媒体に含有させることにより、蛋白質または複
合蛋白質の分離およびそれらの分子量測定が可能となる
。変性剤としての陰イオン界面活性剤の含有量はゲル形
成液に対して約０．０５ｗ／ｖ％から約２．Ｏｗ／ｖ％
、好ましくは約０．１ｗ／ｖ％から約１．５ｗ／ｖ％の
範囲である。

本発明のゲル媒体にはＰＨ緩衝剤を含有させることがで
きる。緩衝剤としては、電気泳動分析される試料に応じ
て、ｐＨ２，５から１０．０の範囲内のｐ　Ｈ値に緩衝
できる公知の緩衝剤から適宜選択して用いることができ
る。

用いうる緩衝剤としては、日本化学会編「化学便覧　基
礎編」（東京、丸首■１９６６年発行）１３１２−１３
２０ベージ；青米、永井編「最新電気泳動法」　（東京
、応用書店、１９７３年発行３２０−３２２ページ；　
ｒ　Ｄａｔａ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒｅ
５ｅａｒｃｈ　　Ｊ　（Ｒ。

Ｍ、　Ｃ，Ｄａｖｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、編、第２版、０
ｘｆｏｒｄ　ａｔｔｈｅ　Ｃ１ａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅ
ｓｓ、　１９６９年発行）　　４７Ｂ−５０８ページ；
　ｒ　ＢｌｏｃｈｅｍＩｓｔｒｙ　Ｊ　　５．４６７　
（１９８８）、ｒ　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ　　Ｊ　１０４．３００−３１０（１８
８０）等に記載の緩衝剤が挙げられる。

緩衝剤の具体例としては、バルビタールを含む緩衝剤、
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔ　ｒ　ｉ
　ｓ　）　　［ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒｙ　Ｎｏ　７？
−８８−１］を含む緩衝剤、燐酸塩を含む緩衝剤、ホウ
酸塩を含む緩衝剤、酢酸または酢酸塩を含む緩衝剤、ク
エン酸またはクエン酸塩を含む緩衝剤、乳酸または乳酸
塩を含む緩衝剤、グリシンを含む緩衝剤、Ｎ、Ｎ−ビス
（２−ヒドロキシエチル）グリシン（Ｂ　ｉ　ｃ　ｉ　
ｎｅ）　、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′
−２−ヒドロキシプロパン−３−スルホン酸（ＨＥＰＰ
ＳＯ）またはその塩、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラ
ジン−Ｎ’−３−プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ）また
はその塩、Ｎ−「トリス（ヒドロキシメチル）］−］３
−７ミノプロパンスルホン酸ＴＡ　Ｐ　Ｓ）またはその
塩等を挙げることができる。そして好ましい緩衝剤の具
体例としては、燐酸二水素カリウム−燐酸水素二ナトリ
ウム、Ｔｒｉｓ−ホウ酸ナトリウム、Ｔｒｉｓ−ホウ酸
ナトリウムーＥＤＴＡ−２Ｎａ塩、Ｔｒｉｓ−クエン酸
、パルビタールナトリウム−酢酸ナトリウム、パルビタ
ールナトリウム−塩酸、へルビタールーバルビクールナ
トリウム、酢酸−酢酸ナトリウム、乳酸−乳酸ナトリウ
ム、クエン酸−燐酸水素二ナトリウム、Ｂｉｃｉｎｅ、
ＨＥＰＰＳＯ，ＨＥＰＰｓｏす）ｌＪウム塩、ＥＰＰＳ
、ＥＰＰＳナト！Ｊ’７Ａ塩、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳナト
リウム塩等を挙げることができる。

本発明のゲル媒体は、さらに水溶性の合成高分子化合物
を添加することが好ましい。この合成高分子化合物は、
単量体と架橋剤の総重量に対して２重量％から１００重
量％の範囲で用いられ、好ましくは５重量％から５０重
量％の範囲で用いられる。

上記の水溶性の合成高分子化合物の分子量としては、１
万から１００万の範囲が好ましい。

水溶性合成高分子の好ましい例としては、伺加重合型ま
たは縮重合型の、水溶性ポリマーを用い′ることができ
る。付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニル
アルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミ
ド等の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。またＭ
重合型ポリマーの具体例としてポエチレングリコール、
ポリプロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリア
ル三レンゲリコール等が挙げられる。なかでもポリエチ
レングリコール、ポリアクリルアミドが特に好ましい。

このポリマーを添加することにより、湿潤ゲル膜は可塑
的となり、もろさが改良される・また乾燥ゲル膜の状態
でも、可塑化効果はさらに有効に作用し、ひびわれ等の
もろさが改良される。

本発明のゲル媒体は更にアガロースを含有することが好
ましい。アガロースは、種類として特に制限はなく、低
電気浸透性、中電気浸透性、高電気浸透性アガロースの
いずれをも用いることができる。用いることのできるア
ガロースの例として７±、特開昭５５−５７３０号、特
開昭５５−１１０９４６号、特表昭５７−５０２０９８
号等の公報に開示されているアガロース等を用いること
もできる。アガロースの添加量は単量体と架橋剤を含む
ゲル組成液の容積に対して約０．２ｗ／ｖ％から約２ｗ
／ｖ％、好ましくは約０．３ｗ／ｖ％カラ約１　、２　
ｗ　／　ｖ％の範囲から選ばれる。アガロースを含有さ
せた組成においては、溶液温度を変化させることにより
、適当な溶液粘度にコントロールすることが可、能とな
る。

本発明の電気泳動用媒体は、前記のようにアクリルアミ
ドに代表される単量体、二官能性のアリル（ａｌｌｙｌ
　）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水溶性ポ
リマー、およびアガロースを実質的に均一な水溶液中で
単量体と架橋剤とを架橋重合させて得られるものであり
、単量体と架橋剤から形成された三次元架橋重合体に水
溶性ポリマーとアガロース（アガロースを併用した場合
）が２実質的に分散されて、後二者のポリマー鎖が三次
元架橋重合体とからみあっている構造を有すると推定さ
れる。

本発明のゲル媒体には、必要に応して抗酸化剤を含有さ
せることができる。抗酸化剤としては、ゲル電気泳動媒
体に配合しうろことが知られている種々の化合物を用い
ることができる。抗酸化剤の具体例としては、ジチオス
レイトール、？−メルカプトエタノールを挙げることが
できる。

その他の添加剤としては湿潤剤があり、本発明のゲル媒
体にグリセリン、エチレングリコール等のポリオール化
合物を含有させることもできる。

ポリオール化合物の含有量は、ゲル媒体の容積に対して
約５　ｗ　／　ｖ％から約４０　ｗ　／　ｖ％の範囲か
ら選ばれる。このうちではグリセリンが特に好ましい。

湿潤剤を配合することによりゲル媒体の保存時の極端な
水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、また極
端な乾燥に起因するもろさの発生を防ぎ、ひびわれを防
ぐ等のゲル媒体の物性が改善されるとの利点がある。

本発明のゲル媒体を層または膜として用いる場合には、
平滑な親水性表面を有する電気絶縁性支持体の上にゲル
形成液を公知の方法により塗布して設けたのちにゲル形
成液を架橋させることによりゲル層またはゲル膜に成形
することができる。

支持体としてはガラス板、親木性ポリマー、または公知
の表面処理により表面を親水化したポリマー（例、ホＩ
Ｊエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポリカ
ルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・塩化ビ
ニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、ポリエ
チレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート類、セ
ルロースアセテートプロピオネート等）の板またはシー
ト等の成形物をあげることができる。これらのポリマー
成形物の表面を親水化するための処理としては、紫外線
照射、グロー放電処理、コロナ放電処理、火焔処理、電
子線照射、ケミカルエツチング、電解エツチング等の公
知の方法を適用することができる。

ゲル形成液を支持４の表面で架橋させる場合には、ゲル
形成液の上をさらにカバーフィルム、シートまたは板な
と゛でおおう゛ことができる。この目的に使用されるカ
バーフィルム、シート、または板としては前記支持体と
同様な素材からなるものを用いることができる。これら
カバーフィルム等の厚さは５０ｐｍ以下であり、実用的
に好ましい範囲としては約３ｇｍ〜約５０７ｚｍ、特に
好ましい範囲としては約４ＡＬｍ〜約４０ｇｍである。

本発明の電気泳動用媒体を用いることにより、従来のそ
の製造工程において、必要で煩雑な除酸素操作を省くこ
とができ、電気泳動用媒体の量産化を可能にするものと
考える。

以下に本発明の実施例および比較例を示す。ただし、こ
れらは、本発明の範囲を限定するものではない。

［実施例１］ 空気中にて平面平滑なガラス板を水平側こ保持しこの上
に第１表に記載のアクリルアミド′系コポリマーゲル組
成液（ゲル形成液）を厚さ約４００用ｍに塗布してゲル
膜の形成の有無を調べた。

以下余白 第１表　ゲル媒体組成 １　２　３　４ ポリマー　　　　　　Ｐ−Ｉ　　Ｐ−２Ｐ−２Ｐ−８Ｓ
　Ｄ　Ｓ　　　　　　　　（１，ＩＱ　ｇ　Ｏ，１（ｌ
　ｇ　０．ＩＱ　ｇ　０．１０　ｇ燐酸水素二ナトリウ ムφ−二水塩　　　３．５８ｇ　３．５８ｇ　３．５８
ｇ　３．５８ｇ燐酸二水素ナトリウ ム書十二水塩　　　０．３３ｇ　０．３３ｇ　０．３３
ｇ　０．３３ｇ水　　　　　　　　（水を加えて１００
ｍ文とする）１．３−プロパンシアミン５３０ｍｇ５３
０ｍｇ　８８０ｍｇ　　−１，３−プロパン ジチオール　　　　　−　　−−７７Ｑｍｇ註：各ポリ
マーの重量は１１．８７ｇである。

上記の試料番号１〜４（本発明に従う試季斗）では、空
気中（酸素の存在する条件下）でも所望のケル膜を得る
ことができた。

なお、架橋剤（アミン化合物）の雄加量を変えた試料に
ついてゲル化の完了に要した時間を比較してみると、ア
ミン化合物を多く含む試料番号３では試料番号２よりも
短く、従って、架橋弁１を多ｆｌｒ’ＦＦ＝加すること
によりゲル化に必要とする時間力く短縮化できることが
わかる。

また、アミン化合物の代りにチオール化合物を用いても
同様のゲル膜が得られた。

以上のように、本発明の電気泳動用媒体を形成する際に
は、酸素遮断操作を必要とせず、従来公知のゲル膜と比
較してその操作が極めて容易であることが明らである。

［比較例１］ アクリルアミド（１１，８７ｇ）、Ｎ、Ｎ’−メチレン
ビスアクリルアミド’（０，６３ｇ）、ＳＤＳ　（０，
Ｌｏｇ）、燐酸水素二ナト１ノウムφ七二水塩（３，５
８ｇ）、燐酸二水素ナト１ノウム−十二木塩（０，，３
３ｇ）に水を加えて１００ｍ文とした後、更に重合開始
剤として過硫酸アンモニウム５重量％水溶液（１，３ｍ
文）とＮ、Ｎ。

Ｎ’　、Ｎ’−ブトラメチルエチレンジアミン３３ｊＬ
ｌを加えてアクリルアミドゲル組成液（ゲル形成液）を
調製し、空気中で水平に保持した平面平滑なカラス板の
上にこのゲル形成液を厚さ約４００壓ｍに塗布して、ゲ
ル膜の形成の有無を調べたが、ゲル膜は形成しなかった
。

ただし、平面平滑なカラス板２枚と４００７ｐｍ厚みの
スペーサー板を用いて作成した４００ｇｍ厚み空間を有
するガラス板セルを作成し、このセルの中に上記のゲル
形成液を注入し、酸素遮断下におけるゲル膜の形成有無
を調べたところ、ゲル膜の形成が確認された。

［実施例２コ 実施例１における試料番号１〜４と同じゲル処方を用い
ゲル媒体を調製した。

これらのゲル媒体を用いて、標準蛋白質を電気泳動に掛
けた。標準蛋白質として、チトクロームＣ１（分子１１
２４００）、キモトリプシノーゲンＡ（分子１２５００
０）、オポアルブミン（分子量４５０００）、ウシ血清
アルブミン（分子量６７０００）を用いた。

染色はｏ、ｉ％１マーシーブルー（ＣｏｏｍａｓｉｅＢ
ｌｕｅ　）Ｒ−２５０にゲル膜を浸漬して１行った。

試料番号１〜４について、いずれも正常な電気泳動パタ
ーンが得られた。

なお比較例１と同じゲル処方を用いた場合には、酸素を
遮断した条件下においてのみ、ゲル媒体を製造すること
ができ、得られた電気泳動パターンは正常であった。

以上のごとく本発明の電気泳動用媒体は酸素存在下でも
形成することができ、従来において必要であった酸素遮
断操作をはふけ、しかも電気泳動特性に問題がなく、従
って本発明により簡便で高性能の電気泳動用媒体を提供
できることが明らかになった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １゜水の存在下で架橋重合され、一般式（１）乃至（３
   ）のいずれかにより表わされる構成繰返し単位を有する
   アクリルアミド系コポリマーを含む水性ゲルからなる電
   気泳動用媒体。 ［一般式（１）において、 Ｒ１１は水素原子または１から６個の炭素原子を有する
   アルキル基である； ＲＩ！ Ｑｌは−ＣＯ〇−１−ＣＯＮ−１または６から１０個の
   炭素原子を有するアリーレン基、　１１ Ｌｌは、−０００−あるいは−〇〇Ｎ−の結合のいずれ
   かを少なくとも１個含み、かつ３から１５個の炭素原子
   を有する二価の基、または、　１１ 一〇−１−Ｎ−１−ＣＯ−１−５Ｏ−１ＲＩ＋ 一５Ｏ２−１−ＳＯ３−２−３Ｏ２Ｎ−１ずれかを少な
   くとも１個含み、かつｌから１２個の炭素原子を有する
   二価の基である（ただしＲ１１は前述と同義である）： Ｒ１２ハＣＨ＝　ＣＨ２又、ｉ；ｊ：　−ＣＨ２ＣＨ２
   Ｘ　”のいずれかである（ただし、Ｘｌは求核基により
   置換される基、あるいは塩基によってＨＸＩの形で脱離
   しうる基を表わす）； Ａ１はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
   エチレン性不飽和千ツマ−から誘導された二価の基であ
   る： Ｘｌ、ｙｌおよびＺｌはモル百分率を表わし、ｘｌは５
   ０〜９９、ｙｌは１〜５０、Ｚｌは残余の値をとる（ｚ
   ｌはＯであってもよい）］；［一般式（２）において、 Ｒ”は水素原子または１から６個の炭素原子を有するア
   ルキル基である； Ｒ２２ハＣＨ＝　ＣＨｚ　又ハＣＨ２ＣＨｚ　Ｘ　２で
   ある（ただし、Ｘ２は求核基によって置換されうる基、
   または塩基によってＨＸ２の形で脱離しうる基を表わす
   ）； Ｌ２は、■から６個の炭素原子を有するアルキレン基、
   ６から１２個の炭素原子を有するアリーレン基、−ＣＯ
   Ｚ２−で表わされる基、および−ＣＯＺ２Ｒ２３−で表
   わされる基（ただし、Ｒ２３は１から６個の炭素原子を
   有するアルキレン基、あるいは６から１２個の炭素原子
   を有するアリーレン基であり、そしてＺ２は酸素原子あ
   るいはＮＨである）から選ばれる二価の基である；Ａ２
   はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能なエチ
   レン性不飽和モノマーから誘導された二価の基である： Ｘ２・　ｙ２およびＺ２はモル百分率を表わし、Ｘ２は
   ５０〜９９、ｙ２は１〜５０、Ｚ２は残余の値をとる（
   Ｚ２は０であってもよい）］；［一般式（３）において
   、 Ｒ３１は水素原子、または１から６個の炭素原子を有す
   るアルキル基である； Ｌ３は１から２０個の炭素原子を有する二価の連結基で
   ある； ｘ３は活性エステル基である； Ａ３はその左側に示した各七ツマ一単位と共重合可能な
   エチレン性不飽和モノマーから誘導された二価の基であ
   る； ｘ３、ｙ３および２３はモル百分率を表わし、Ｘ３は５
   ０〜９９、ｙ３は１〜５０．２３は残余の値をとる（　
   ｚ　３はＯであってもよい）］；ｍはＯあるいは１であ
   る］ ２゜アクリルアミド系化合物と架橋剤とを水の存在下で
   架橋重合させてなるポリアクリルアミド系水性ゲル電気
   泳動用媒体において、さらに水溶性ポリマーおよびアガ
   ロースを含む特許請求の範囲第１項記載の媒体。 ３゜さらに変性剤として陰イオン性界面活性剤を含む特
   許請求の範囲第１項または第２項記載の媒体。 ４゜前記陰イオン性界面活性剤がアルキル硫酸塩である
   特許請求の範囲第３項記載の媒体。 ５゜前記アルキル硫酸塩がドデシル硫酸ナトリウムであ
   る特許請求の範囲第４項記載の媒体。 ６゜前記アクリルアミド系化合物と前記架橋剤の合計重
   量に対し、前記架橋剤が２ｗｔ％から３０ｗｔ％の範囲
   、前記水溶性ポリマーが２ｗｔ％から１００ｗｔ％の範
   囲、前記アガロースが前記ポリアクリルアミド系水性ゲ
   ルの容積に対し０　、２　ｗ　ｔ　／　ｖ％から２　ｗ
   　ｔ　／　ｖ％の範囲で含有されている特許請求の範囲
   第２項記載の媒体。 ７゜前記変性剤が前記ポリアクリルアミド系水性ゲルの
   容積に対し、０　、０５　ｗ　ｔ　／　ｖ％から２、Ｏ
   ｗｔ／ｖ％の範囲で含有されている特許請求の範囲第３
   項ないし第５項のいずれかの項記載の媒体。