JPS6118852A - 電気泳動用媒体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の分野］ 本発明は、電気泳動用媒体に関、するものであり、さら
に詳しくは、特にＤＮＪの塩基配列決定操作に用いるの
に適した電気泳動用媒体に関するものである。

［発明の背景コ ボストラヘル法に基゛づ＜ＤＮＡやＲＮＡの塩基配列決
定〃、においては、ポリアクリルアミドゲル膜を用いた
スラブ電気泳動操、作が必須の操作となっている。特に
近年において遺伝子関連の研究が進むにつれて　ＤＮＡ
塩基配列決定の操作の迅速化が急務となっている。

従来のポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドの
ような単量体を触媒の存在下にて、Ｎ。

Ｎ”−メチレンビスアクリルアミドのような二官能性の
架橋剤を用い架橋重合させることにより得られている。

なお、このＤＮＡ塩基配列決定のための電気泳動用媒体
として用いるポリアクリルアミドゲル膜の形成に際して
は通常、尿素あるいはホルムアミドのような変性剤を含
有させる。

上記の重合反応はラジカル架橋重合であり、酸素の影響
により反応が阻害されるため、ポリアクリルアミドゲル
膜は酸素を遮断した状態で作成する必要がある。この理
由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲル膜は
二枚のカラス板で形成されたセル（一定の空間、たとえ
ば約０．３〜１ｍｍを有する）の中にゲル形成液を注入
させ、酸素を遮断した状態で架橋重合させてゲル膜を形
成させている。

以」二のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜
を用いる電気泳動操作は、たとえば、次のようにして実
施される。

ポリアクリルアミドゲル膜はカラス板に挟んだままの状
態で垂直に立てられ、前電玄泳動を行なったのぢ、ゲル
膜」一端部に設けられたサンプルスロットに試料）（た
とえば、マキサムΦギルバート分解した３２Ｐラベル化
ＤＮＡ）を一定量注入し、次いで電気泳動を行なう。そ
して一定時間（例、約６時間・〜１２時間）の電気泳動
を行なった後、片面のガラス板を注意深く除去し、その
露出面をポリ塩化ヒニリデンフィルムなどの合成樹脂製
フィルムでゲル膜を覆い、これを用いてオートラジオグ
ラフィー処理を行なう。

すなわち、ポリアクリルアミドゲル膜を被覆しているフ
ィルムの上にＸ線フィルム、増感スクリーンを順次のせ
て、低温（たとえば、−８０℃）で一定時間（たとえば
、約１０〜２０時間）露光を行なう。そして露光終了後
、Ｘ線フィルムを現像し、ＤＮＡの分離泳動パターンを
読みとることからなるオートラジオグラフィー処理によ
り、ＤＮ’Ａの塩基配列を決定することができる。

［発明の目的］ 本発明の第一の目的は、ＤＮＡの電気泳動分析に使用す
るのに適した解像力が向−トした電気泳動用媒体を提供
することにある。

本発明の第二の目的は、ＤＮＡの電気泳動分析に適した
加工性が優れた電気泳動用媒体を提供することにある。

本発明の第三の目的は、保存、輸送等が容易な軽量で壊
れにくい電気泳動用媒体であって解像力および加工性が
向上したＤＮＡの電気泳動分析に適した電気泳動用媒体
を提供することにある。

［発明の要旨］ 本発明は、下記一般式（１）および（２）のいずれかに
より表わされる構成繰返し単位を有するアクリルアミド
系コポリマー： ［」一式において、 ＲＩＩは、水素原子または１から６個の炭素原子を有す
るアルキル基であり： １０個の炭素原子を有するアリーレン基であり：Ｌ　”
　ハ、−ｃｏｏ−、ｔ）６いは−ＣＯＮ−Ｊ結合のいず
れかを少なくとも一個含み、がっ３がも１５４１Ｖｉの
炭素原子を有する二価の基、または、ＲＩＩ −ｏ−１−Ｎ−１−ｃｏ−１−ＳＯ−１Ｒ’１ °１ −ｓｏｚ−１−ｓｏ３−１−５０２Ｎ−１ずれかを少な
くとも一個含み、かっ１から１２個の炭素原子を有する
二価の基（ただしＲ１１は前述・と同義である）であり
； Ｒ１２は−ＣＨ＝ＣＨ２又は−ＣＨ２ＣＨ２Ｘ”（ただ
し、Ｘｌは求核基により置換され得る基、あるいは塩基
によってＨＸ”の形で脱離し得る基を表わす）のいずれ
かであり： Ａ１はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和七ツマ−から誘導された二価の基であ
り： Ｘｌ、ｙｌおよびｚｌはモル百分率を表わし、Ｘｌは５
０〜９９、ｙｌは１〜５０．’ｚ”は残余の値をとる、
“ただしｚｌは０であってもよいコ［上式において、 Ｒ２１は水素原子または１から６個の炭素原子を有する
アルキル基であり： Ｒ２２ｉ；ｉ　−ＣＨ＝　ＣＨ２又は−ＣＨ，ＣＨ２Ｘ
２（ただし、ｘ２は求核基により置換され得る基、ある
いは塩基によってＨＸ２の形で脱離し得る基を表わす）
であり； Ｌ２は、ｌから６個の炭素原子を有するアルキレン基、
６から１２個の炭素原７を有するアリーレン基、−ｃｏ
ｚ２−で表わされる基、および−ＣＯＺ”Ｒ”−で表わ
さ−れる基（ただし　Ｈｎは１から６個の炭素原子を有
するアルキレン基、あるいは６から１２個の炭素原子を
有するアリーレン基であり、そして７２は酸素原子ある
し）はＮＨである）から選ばれる二価の基であり；Ａ２
はその左側に示した各モノマ一単位と共重合可能なエチ
レン性不飽和モノマーから誘准された二価の基であり； Ｘ２、ｙ２およびｚ２はモル百分率を表わし、ｘ２は５
０〜９９．Ｙ２は１〜５０、ｚ２は残余の値をとる、た
だしｚ２は０であってもよい］とアクリルアミド系化合
物とが水の存在下で架橋重合してなるポリアクリルアミ
ド系水性ゲル、および変性剤として少なくとも１個のカ
ルノくモイル基を有する化合物を含む電気泳動用媒体を
提供するものである。

本発明の電気泳動用媒体は高い解像力を示し、また加工
性が良い、すなわち長尺状に製造した電気泳動用媒体の
切断作業あるいはサンプルスロットの付設作業などの刃
物によるポリアクリルアミドゲル膜の切断加工がゲル膜
の破壊や切断面付近の形状の変化を伴なうことなく容易
かつ確実にできるため、得られる電気泳動用媒体は優れ
た性能を示し、また大量生産により製造することが容易
となる。

なお電気泳動用媒体を大量生産する場合には、これをプ
ラスチック材料製支持体の上に付設した形状とするのが
有利である。このような形状とすることにより本発明の
電気泳動用媒体の大量生産が容易となり、また支持体が
軽量で、壊れにくいため、電気泳動用媒体の保存、輸送
等が容易となる。従って、ポリアクリルアミドゲル膜（
電気泳動用媒体）を集中的に製造し、必要に応じてＤＮ
Ａ分析のための電気泳動操作担当者に供給するようなゲ
ル膜製造・使用システムの実現に極めて有効である。

［発明の詳細な記述］ 本発明の電気泳動用媒体の支持体としては、ガラス板、
ポリマーコート紙、プラスチック材料製シートなどの任
意の耐水性シート状支持体を用いることができる。ただ
し、本発明の電気泳動用媒体の利点を生かすためには、
支持体としてプラスチック材お）製シートを用いること
が望ましい。

電気泳動用媒体のプラスチックシート支持体としては各
種のプラスチックシートを用いることができる。好まし
いプラスチックシートの例としては、親木性ポリマーま
たは公知の表面処理により表面を親水化したポリマー（
例、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノールＡの
ポリカルボネート、ポリ塩化ビニル、塩化ビニリデン・
塩化ビニルコポリマー、ポリメチルメタアクリレート、
ポリエチレン、ポリプロピレン、セルロースアセテート
類、セルロースアセテートプロピオネート等）のシート
（フィルム、板状物も含む）等を挙げることができる。

特に好ましい支持体はポリエチレンテレフタレートでア
ル。

次に電気泳動用媒体層（以下においてゲル媒体層、ポリ
アクリルアミドゲル膜あるいは単にゲル膜ともいう）に
ついて説明する。

ポリアクリルアミドゲル膜は、前述のように、一般には
アクリルアミド系化合物と架橋剤とを、水溶液または水
分散液として水中に溶解または分散させてゲル形成液を
調製したのち、液中で両者を架橋重合させて架橋重合し
た水性ゲル膜として形成することにより得ることができ
る。なお、木明細書においては、特にことわらない限り
、（水中に）溶解と（水中に）分散の両者を含めて単に
（水中に）溶解といい、水溶液と水分散液の両者を含め
て単に水溶液という。また溶媒または分散媒としては、
所望により加えられる有機溶媒と水の混合物をも包含す
る。

これに対して本発明においては、ポリアクリルアミドゲ
ル膜を、特定のポリアクリルアミド系コポリマーとアク
リルアミド系化合物とを水の存在下で架橋重合して製造
する。なお、この架橋重合の実施に際して多官能性架橋
剤（特に三官能性架橋剤）を関与させると、得られるポ
リアクリルアミドゲル膜の解像力と加工性は更に向上す
る。

本発明に用いることができるアクリルアミド系化合物の
例としては、アクリルアミド、Ｎ−メチルアクリル・ア
ミド、Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリル、アミド、Ｎ−（ヒド
ロキシメチル）アクリルアミド、ジアセトンアクリルア
ミド等のアクリルアミドホモログや、メタクリルアミド
系化合物、例えばメタクリルアミドがあげられ、これら
の化合物は単独で、あるいは二種６以上を併用して用い
ることができる。これらのアクリルアミド系化合物のう
ちではアクリルアミドが最も好ましく、またアクリルア
ミドと他のアクリルアミド系化合物の一種以上の併用も
好ましい。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜の製造に関与させる
特定のポリアクリルアミド系コポリマーは下記一般式（
１）および（２）のいずれかにより表わさ′れる構成繰
返し単位を有するアクリルアミド系コポリマーである。

ニし 上式において、Ｒ１１は水素原子または１から６゜個の
炭素原子を有するアルキル基であり、その例にはメチル
基、エチル基、ブチル基、ｎ−ヘキシル基などが含まれ
る。

Ｑｌは−Ｃｏｏ−、−ＣＯＮ−、マタは６から１０個の
炭素原子を有するアリーレン基であり、その例には次の
ような基が含まれる。

ＣＨ３ −ｃｏｏ−１−ＣＯＮＨ−１−ＣＯＮ−１ＲＩ＋ Ｌｌは、−ＣＯＯ−あるいは−ＣＯＮ−の結合のいずれ
かを少なくとも一個含み、かつ３から１５個の炭素原子
を有する二価の基、または、−Ｏ−、−Ｎ−、、−ＣＯ
−１−５Ｏ−１Ｒ” 一５Ｏ２−１−ＳＯ３−５Ｓ　Ｏ２Ｎ−１ずれかを少な
くとも一個含み、かつ１から１２個の炭素原子を有する
二価の基（ただしｌ（１１は前述と同義である）であり
、その例には次のような基が含まれる。なお、これらの
二価の基の一般式（Ｉ）における結合の方向は、Ｑｌと
ＳＯ２との結合が可能なかぎり、いずれの方向をもとる
ことができる。

−ＣＨ２ＣＯＯＣＨｚ− −ＣＨ：ｚ　ＣＯＯＣＨ２ＣＨｚ− −ＣＨ２ＣＨ２Ｃ００ＣＨｚ− −ｆ−ＣＨ２方−５ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２−＋ＣＨ２方−
１０ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２−二ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２− −ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２ＣＨ２− ＋ＣＨ２つ−ａ　　Ｎ　ＨＣＯＣＨ２ＣＨ２−＋ＣＨ’
２つ−５Ｎ　ＨＣＯＣＨｚ　ＣＨ２−−（−ＣＨ２つ−
＋ｏ　Ｎ　ＨＣＯＣＨ２ＣＨ２−−ＣＨ２０Ｃ、Ｈ２− ＣＨ２ＣＨ２０ＣＨｚ　ＣＨ２ＣＨｚ　　−ＣＨ３ＣＨ
３ −Ｎ　ＣＨ２ＣＨｚ　　　　　ＣＨ２Ｎ　ＣＨ２ＣＨ２
−−ＣＯＣＨ２ＣＨ２− −ＣＨ２Ｃ０ＣＨ２ＣＨ２− −ＳＯＣＨ２ＣＨ２− −ＣＨ２５ＯＣＨ２ＣＨ２− −Ｓｏ　２　ＣＨ２ＣＨ２− −ＳＯ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ□ＣＨ２ＣＨ２−−Ｓ　（）
　２　ＣＨ２ＣＨＺ　Ｓ　Ｏ２ＣＨ２ＣＨＣＨ２−Ｈ 〜Ｓ　Ｏ３ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２〜Ｓ　Ｏ３ＣＨ２
ＣＨ２ＣＯＯＣＨ２ＣＨ２−３Ｏｚ　Ｎ　ＨＣＨｚ　Ｃ
ＯＯＣＨ２ＣＨ２−〜ＳＯ□Ｎ　ＨＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ
ＣＨｚ　ＣＨ２−−ＮＨＣＯＮＨＣＨ２ＣＨ２− ＣＨ２Ｎ　ＨＣＯＮ　ＨＣＨ２ＣＨｚ−−Ｎ　ＨＣＯＯ
ＣＨｚ　　ＣＨ２− ＣＨｚ　Ｎ　ＨＣＯＯＣＨｚ　ＣＨ２−Ｒ１２は−ＣＨ
＝ＣＨ２又４ｌ−ＣＨ２ＣＨ２Ｂｒ（ただし、ｘｌは求
核基により置換され得る基、あるいは塩基によってＨＸ
ｌの形で脱離し得る基を表わす）のいずれかであり、こ
のｘｌの例には次のような基が含まれる。

ハロゲン原子（塩素、臭素など）；ヒドロキシル基、ア
ルキルスルホニルオキシ（例、メチルスニルオキシ、プ
ロピルスルホニルオキシなど）ニアリールスルホこルオ
キシ（例、フェニルそルホホニルオキシなど）：アルキ
ルカルボニルオキシ（例、アセトキシ、プロピオニルオ
キシ、トルフルオロメチルカルボニルオキシ、ジクロロ
メチルカルボこルオキシなど） 従って、Ｒ１２の例には、次のような基が含まれる。

−ＣＨ＝ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ文、−ＣＨ２ＣＨ２
Ｂｒ、 −ＣＨ２ＣＨ２−０−３−ＣＨ３、 −ＣＨ２ＣＨ２０Ｈ１ −ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＨ３、 ＣＨｚ　ＣＨ２００ＣＣＦ　３、 −ＣＨ２ＣＨ２００ＣＣＣ文、。

Ａ１はその左側に示した各七ツマ一単位と共重合可能な
エチレン性不飽和モノマーから誘導された一価の基であ
り、その例としては、下記のようなエチレン性不飽和モ
ノマーから誘導された基を挙げることができる。

エチレン、プロピレン、■−ブテン、イソブチン、スチ
レン、クロロメチルスチレン、ヒドロキシメチルスチレ
ン、ビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ビニルベン
ジルスルホン酸ナトリウム、Ｎ、Ｎ、ｈｌトリメチル−
Ｎ−ビニルベンジルアンモニウムクロリド、Ｎ　、−Ｎ
−ジメチル−Ｎ−ヘンシル−Ｎ−ビニルベンジルアンモ
ニウムクロリド、α−メチルスチレン、ビニル）　、１
１／エン、４−ビニルピリジン、２−ビニルピリジン、
ベンジルビニルピリジニウムクロリド、Ｎ−ビニルアセ
トアミド、Ｎ−ビニルピロリドン、■−ビニルー２−メ
チルイミダソール、脂肪族酸のモノエチレン性不飽和エ
ステル（例えば酢酸ビニル、酢酸アリル）、エチレン性
不飽和のモノカルボンｍもしくはジカルボン酸およびそ
の塩（例えばアクリル酸、メタクリル酸、イタモノ醇、
マレイン酸、アクリル酸ナトリウム、アクリル酩カリウ
ム、メタクリル酸すトリウム）、無水マレイン酸、エチ
レン性不飽和のモノカルボン酸もしくはジカルボン酸の
エステル（例えばｎ−ブチルアクリレ−１・、ｎ−へキ
シルアクリレート、ヒドロキシエチルアクリレート ト、（ジエチルアミノ）エチルアクリレート、メチルメ
タクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、ベンシルメ
タクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート、クロ
ロエチルメタクリレート、メトキシエチルメタクリレー
ト、（ジエチルアミノ）エチルメタクリレート、Ｎ、Ｎ
、Ｎ−トリエチル−Ｎ−メタクリロイルオキシエチルア
ンモニウムｐ−トルエンスルホナート、Ｎ、Ｎ−ジエチ
ル−Ｎ−メチル−Ｎ−メタクリロイルオキシエチルアン
モニウムＰ−１ルエンスルホナート、イタコン酩ジメチ
ル、マレイン酸モノベンジルエステル）、エチレン性不
飽和のモノカルボン酸もしくはジカルボン酸のアミド（
例えばＮ、Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−メチロー
ルアクリルアミド、Ｎ−［（ジメチルアミノ）プロピル
コアクリルアミド、Ｎ、Ｎ、Ｎ−トリメチル−Ｎ−（ア
クリロイルプロピル）アンモニウム、Ｉ）−）ルエンス
ルホナート、２−アクリルアミド−２−メチルプロパン
スルホン酪ナトリウム、アクリロイルモルホリン、メタ
クリルアミド、Ｎ、Ｎ−ジメチル−Ｎ′−アクリロイル
プロパンジアミンプロピオナートベタイン、Ｎ、Ｎ−ジ
メチル−Ｎ′−メタクリロイルプロパンジアミンアセテ
ートベタイン。

また一般式（１）のコポリマーを架橋されたう記のエチ
レン性不飽和モノマーから誘導された基のほかに、少な
くとも共重合可能なエチレン性不飽和基を２個以上もつ
千ツマ−（例、ジビニルベンゼン、メチレンビスアクリ
ルアミド、エチレングリコールジアクリレー）・、トリ
メチレングリコールジアクリレート、エチレングリコー
ルジメタクリレート、トリメチレングリコールジメタク
リレート、ネオペンチルグリコールジメタクリレート等
）から誘導された基を用いることができる。

Ｘｌ、ｙｌおよびｚｌはモル百分率を表わし、Ｘｌは５
０〜９９、ｙｌは１〜５０．ｚ”は残余の値をとる、た
だしｚｌは０であってもよい。

上式におい、て、Ｒ２１、Ｒ２２およびＡ２は、それぞ
れ前記一般式（１）のＨ１１、Ｒ１２およ−びＡＸと同
意義であり、それらの例も同様である。

Ｌ２は、１から６個の炭素原子を有するアルキレン基（
例、メチレン、エチレン、インブチレンなど）、６から
１２個の炭素原子を有するアリーレン基（例、フェニレ
ン、トリレン、ナフタレンな“ど）、−ＣＯＺ２−で表
わされる基、および−ＣＯＺ２Ｒ”−で表わされる基（
ただし、Ｒβは１から６個の炭素原子を有するアルキレ
ン基、あるいは６から１２個の炭素原子を有するアリー
レン基であり、そして２２は酸素原子あるいはＮＨであ
る）から選ばれる二価の基である。

Ｘ２、ｙ２およびＺ２はモル百分率を表わし、Ｘ２は５
０〜９９、ｙ２は１〜５０、ｚ２は残余の値をとる、た
だしｚ２はＯであってもよい。

以下に、上記の一般式（１）もしくは（２）のいずれか
により表わされる構成繰返し単位を有するポリで−の合
成に用いることができる代表的なヒニルスルホニル基あ
るいはその前駆体となる官能基を有するエチレン性不飽
・和モノマーの合成法の＝−例を示す。

［合成例１］　　Ｎ−［３−（２−クロロエチルスルホ
ニル）プロパンアミドメチルコアクリルアミドの合成 Ｃ）にＣＨ２ Ｃ＝０ Ｎ）Ｉ　　　Ｏ Ｉ　　　　ｌｌ ＣＨ２ＮＨＣＣＨ２ＧＨｚ　−ＳＯ２−ＣＨ２ＣＨ２０
１２文の反応容器に蒸留水１．４００ｍ文、亜硫酩ナト
リウム２４４ｇおよび炭酸水素ナトリウム２２０ｇを加
え、攪拌して溶解させた後、氷水により冷却しながら約
５℃で、クロロエタンスルホニルクロリド２６０ｇを１
．５時間で滴下した。

その後４９％硫酸１６０ｇを約Ｌ　５分で滴下し、５℃
で１時間はど攪拌を続けて、析出した結晶を濾過した後
、結晶を４００ｍ文の蒸留水で洗浄し、＠腋と洗浄液と
を一緒にして３文の反応容器に入れた。この中にメチレ
ンビスアクリルアミド２４６ｇを蒸留水４８０ｍ１、エ
タノール１，４８０ｍＭに溶解させたものを、氷冷しな
がら約５°Ｃで、３０分間で滴下した後、全体を冷蔵庫
に５゛ＥＩＭ放置して反応を完結させた。析出した結晶
を濾取した後、冷却した蒸留水８００ｍ１で洗浄し、２
に９．の５０％エタノール水溶液から再結晶して、２　
Ｊ、　９　ｇのモノマーを得た。収率は４９％であった
。

本発明で用いるアクリルアミド系コポリマーとして好ま
しいコポリブーは次に挙げる式で表わさここで、ｘ、ｙ
、ｚはモル百分率であり、ＲとＲ′は下記の置換基を示
す。

Ｐ−１ｘ＝９２、ｙ−肌　ｚ＝Ｑ Ｒ＝ＣＯＯＣＨｚ　ＣＨ２Ｏｒ：ＯＣ８２０Ｈ２Ｓ０２
　ＣＨ＝　ＣＨｚＰ−２ｘ＝９０．７＝１０．２＝０ Ｒ＝　に０ＮＨＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２ＣＨ２ｓｏ２ｃＨ
＝　ＣＨｚＰ−３ｘ＝８０、Ｙ＝８、ｚ＝１２ Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨ２ＮＨＣＯＣＨｚ　ＣＨ２ＳＯ２Ｃ
Ｈ＝　ＧＨｚＲ’　＝　Ｃ０Ｎ）Ｉ２Ｃ（ＣＨ３）　２
ＣＨ２ＣＯＣＨ３Ｐ−４ｘ＝９２、ｙ＝８．２＝０ Ｐ−６ｘ＝９２．ｙ＝８、Ｚ−Ｏ Ｐ−７ｘ’＝９２、　Ｙ＝８、ｚ＝。

Ｒ＝　Ｃ０ＮＨＣＨｚ　ＮＨＣＯＣ：Ｈ，ｚ　ＧＨｚ　
ＳＯｚ’Ｃ１１ｚ　ＣＨ２ＣＩＰ−８ｘ＝８０．ｙ＝８
、ｚ＝１２ Ｒ＝　ｃｏＮＨｃ）１２ＮＨＣ：ＱＣ：ｌ（ｚ　Ｃ，Ｈ
２，ＳＯ２ＧＨｚ　ＣＨ２ＣＩＲ’　＝　Ｃ０Ｎ）ｌｚ
　Ｃ（Ｇ）Ｉ３）　　２　Ｃ８２ＣＯＣ；Ｈ３Ｒ’　　
＝　　　Ｃ０Ｎ）ＩｃＨ２０）１Ｒ’　　＝　　　Ｃ０
Ｎ（ＣＨｓ　）２Ｐ−１２ｘ　＝　　９　２、　ｙ＝ｇ
　　　、　ｚ＝０Ｒ＝　ＣＯＯＣＨ２ＣＨｚ　０００　
ＣＨｚ　ＳＯ２ＣＨ＝　ＣＨ２次に、前記のコポリマー
のうちＰ−２およびＰ−８と名付けられたコポリマーの
合成例を示す。

［合成例２］　　Ｎ−（［３−（ビニルスルホニル）プ
ロパンアミドコメチル）アクリルアミ１・アクリルアミ
ドコポリマー（Ｐ−２）の合成２００ｍ、Ｑ、の反応容
器に１合成例】で得られた七ツマ−５，６５ｇ、アクリ
ルアミド１２．８ｇおよび５０％メタノール水溶液８０
　ｍ　ｌを′加え、攪拌しなから６０℃に加熱し、２，
２′−アゾビス（２、４−ジメチルバレロニトリル）０
．１ｇを加え、さらに３０分後にも同じものをＯ，Ｉｇ
加えて、１時間加熱攪拌を続けた。その後、氷水により
約１０℃に冷却して、トリエチルアミン２．５ｇを８０
ｍ１のメタノールに溶解させたものを加え、１時間攪拌
を続けてから、反応液を攪拌しなから１又のアセトンに
注ぎ込み、生成した沈澱を濾取して、ｌ　５　、．９　
ｇの白色ポリマー（前記Ｐ−２に該当）を得た（収率は
９０％）。このポリマーのスルホニル基含量は０．９５
ＸＩＯ−”当量／ｇ、であった。

［合成例３］　　Ｎ−（［３−（２−クロロエチルスル
ホニル）プロパンアミドコメチル）アクリルアミドφア
クリルアミド−Ｎ−（１，１−ジメチル−３−オギソブ
チル）アクリルアミドコポリマー　（Ｆ−８）の合成 ５００ｍ１の反応容器に、合成例１で得られたモノマー
１０３ｇ、アクリルアミド２９．２ｇ、Ｎ−（１，１−
ジメチル−３−オキンブチル）アクリルアミド（ジアセ
トンアミド）１１゜３ｇおよび５０％メタノール水溶液
１６０ｍ１を加え、攪拌しながら６０℃に加熱し、２．
２’−−７ンビスー（２，４−ジメチルバレロニトリル
）０８２ｇを加え、３０分後更に同じものを０．２ｇ加
えて１時間加熱攪拌を続けた。反応液をセルロースチ鷺
−ブに入れて２日間透析し、凍結乾燥により４３．２ｇ
の白色のポリマー（前記Ｐ−８に該当）を得た。（収率
８５％）このポリマーのクーロロエチルスルホニル基含
量は０　、８　Ｘ　１０−３当量／ｇであった。

本発明において好ましく用いられるアクリルアミド系コ
ポリマーの分子量は約１万から約１００万の範囲にある
。

架橋重合反応に用いられるアクリルアミド化合物とアク
リルアミド系コポリマーとの比率は、アクリルアミド系
化合物に対して該コポリマーが通常は約１〜５０重量％
であり、好ましくは約５〜４０重量％である。

前述のように本発明のポリアクリルアミドゲル膜の製造
に際しては架橋剤を併用してもよい。架橋剤としては、
たとえば、ｒ　ＥｌｅｃｔｒｏｐｈａｒｅｓｉｓＪ１９
８１．２．２１３−２２８等に記載の公知の化合物を用
いることができる。架橋剤の例としては、Ｎ、Ｎ’−メ
チレンビスアクリルアミド（ＢＩＳ）、Ｎ。

Ｎ゛−プロピレンビスアクリルアミド（ＰＢＡ）；ジ（
アクリルアミドジメチル）エーテル（ＤＡＥ）、、ｌ、
２−ジアクリルアミドエチレングリＤ　−、ＩＬ／　（
Ｄ　Ｅ　Ｃ）　　；エチレンウレアビスアクリルアミド
（ＥＵＢ）、エチレンジアクリレート（ＥＤＡ）；Ｎ、
Ｎ’−ジアリルタータルジアミド　　（Ｎ、Ｎ’−ｄｉ
ａｌｌｙｌｔａｒｔａｒｃｌｉａｍｉｄｅ　　　：　　
Ｄ　　Ａ　　Ｔ　　Ｄ　　）　　　；Ｎ、Ｎ’−ビスア
クリリルシスタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌ
ｃｙｓｔａｍｉｎｅ、　Ｂ　Ａ　Ｃ）などの二官能性化
合物、およびトリアリルシアヌレート、トリアリルイン
シアヌレート、１，３．５−トリアクリロイ゛ルヘキサ
ヒトローＳ−）リアジンなどの三官能性化合物が挙げら
れる。架橋剤は単独で使用してもよく、あるいは二種以
上を併用してもよい。

架橋剤は、アクリルアミド系化合物、アクリルアミド系
コポリマーそして架橋剤の総重量に対して約３０重量％
以下、好ましくは約１０重量％以下の範囲の量で用いる
。

本発明の電気泳動用媒体の製造において用いられるポリ
アクリルアミドゲルのゲル濃度としては、　　Ｓ、　Ｈ
ｊｅｒｔｅｎ：　ｒ　Ａｒｃｈ、　Ｂｉｏｃｈｅｍ、　
ＢｉｏｐｈｙＳ、ＪＬ　（５ｕｐｐ１．）、　１４７　
（１９８２）に記載の定義に従って表示して、アクリル
アミド系化合物、アクリルアミド系コポリマー、および
水、そして場合により架橋剤、からなるゲル媒体の容積
に対して、アクリルアミド系化合物およびアクリルアミ
ド系コポリマー（そして場合により架橋剤）の量が約３
Ｗ／Ｖ％から約３０　ｗ　／　ｖ％の範囲が好ましく用
いられる。

本発明のＤＮＡの電気泳動分析に適した電気泳動用媒体
（ポリアクリルアミドゲル膜）には変性剤が添加される
。添加される変性剤としては、少なくとも１個のカルバ
モイル基を持つ化合物を挙げることができ、その具体例
としては、尿素、ホルムアミド等が挙げられる。これら
のうちで尿素が特に好ましく用いられる。変性剤は水性
ゲルの容積に対し１約４０　ｗ　ｔ　／　ｖ％から約６
０ｗｔ／Ｖ％の範囲の量で用いられる。尿素を用いる場
合には、水性ゲル１又に対し約６モル（約３６０ｇ）か
ら飽和溶解量まで、好ましくは約７モル（約４２０ｇ）
から飽和溶解量までの範囲で用いることができる。

本発明の電気泳動用媒体層には、場合によって水溶性ポ
リマーが添加される。水溶性ポリマーとしては、付加重
合型または縮重合型の水溶性ポリマーを用いることがで
きる。付加重合型ポリマーの例としては、ポリビニルア
ルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド
等の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。また縮重
合型ポリマーの例としては、ポリエチレングリコール、
ポリプロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリア
ルキレングリコールが挙げられる。これらの水溶性ポリ
マーのうちでは、ポリアクリルアミドとポリエチレング
リコールが好ましい。

水溶性ポリマーの分子量は約１万から約１００万の範囲
のものが好ましい。水溶性ポリマーは単量体と架橋剤の
合計重量に対して、約２重量％から約１００重量％の範
囲、そして好ましくは約５重量％から約５０重量％の範
囲で用いられる。

水溶性ポリマーの添加によりポリアクリルアミドゲル膜
がｏＪ　ｑ性を有するようになり、裁断加工時に壊れる
ことがなくなり、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有す
るようになり、もろさが改良され壊れにくくなるとの利
点がある。また、水溶性ポリマーの分子量および添加量
を選択することにより、ゲル膜の粘度をコントロールす
ることもできる。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜は、さらにアガロー
スを含有することが好ましい。アガロースとしては任意
のものを使用することができ、低電気浸透性、中電気浸
透性、高電気浸透性アガロースのいずれをも用いること
ができる。用いることができるアガロースの例としては
、特開昭５５−５７３０号、特開昭５５−１１０９４６
号、特表昭５７−５０２０９８号等の各公報に開示の７
カロース等がある。アガロースは、単量体と架橋剤を含
む水性ゲルの容積に対して約０　、２　ｗ　／　ｖ％か
ら約２ｗ／！％、好ましくは約０．．３ｗ／ｖ％から約
１．２ｗ／ｖ％の割合で用いられる。

ポリアクリルアミドゲル膜がアガロースを含有する場合
には、ゲル形成液の温度を変化させることによって適当
な液粘度にコントロールすることが可能となるため、そ
の流動性を止めることができ、またゲル膜を成形する操
作において成形しやすくなるとの利点がある一 本発明の電気泳動用媒体層にはｐＨ緩衝剤を含有させる
ことができる。緩衝剤としては、ｐＨ８，０からｉｏ、
ｏ　（好ましくはｐＨ８，０から９．０）の範囲内のｐ
Ｈ値に緩衝できる公知の緩衝剤から適宜選択して用いる
ことができる。

用いうる緩衝剤としては１日本化学会編「化学便覧　基
礎編」（東京、丸首■　１９６６年発行）１３１２−１
３２０ページ：青水、永井編「最新電気泳動法」　（東
京、床用書店、１９７３年発行３２０−３２２ページ；
　ｒ　Ｄａｔａ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｒ
ｅ５ｅａｒｃｈＪ　（Ｒ，Ｍ。

Ｃ，Ｄａｗｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、編、第２版、０ｘｆｏ
ｒｄ　ａｔ　ｔｈｅＣｌａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、
　１９［ｉ９年発行）　　４７ｆｌ−５０８頁；ｒ　Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｊ　　”４．４６７　（１９
６Ｂ）、ｒ　Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙＪ　１０４．３００−３１０（１９８０）等に
記載の緩衝剤が挙げられる。

緩、衝剤の例としては、トリス（ヒドロキシメチル）ア
ミノメタン（Ｔｒｉｓ）　　［ＣＡＳ　Ｒｅｇｉｓｔｒ
ｙ　Ｎｏ７７−８６−１　］　、Ｎ　、　Ｎ−ビス（２
−ヒドロキシエチル）グリシン（Ｂｉｃｉｎｅ）　、Ｎ
　−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−ヒド
ロキシプロパン−３−スルホン酩のＮａ塩またはに塩等
、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジンーＮ゛−３−プ
ロパンスルホン酸のＮａ塩またはに塩等、Ｎ−、［’）
リス（ヒドロキシメチル）メチルコー３−ア二ノプロパ
ンスルホン酸のＮａ塩またはに塩および、これらのいず
れかと必要により組合せられる酸、アルカリまたは塩等
をあげることができる。特に好ましい緩衝剤の例として
はＴｒｉｓ、ホウ酸およびＥＤＴＡ・２Ｎａ塩の組合せ
（ｐＨ８，３）がある。

また５本発明の電気泳動用媒体層には、湿潤剤としてグ
リセリン、エチレングリコール等のポリオール化合物を
含有させることもでｙる。ポリオール化合物の含有量は
、電気泳動用媒体層の容積に対して約５　ｗ　／　ｖ％
から約４０ｗ／ｖ％の範囲から選ばれる。これらの化合
物のうちではグリセリンが特に好ましい。湿潤剤を配合
することによりポリアクリルアミドゲル膜の保存時の極
端な水分の蒸発による乾燥を防ぐことが可能となり、ま
た極端な乾燥に起因するもろさの発生を防ぎ、ひびわれ
を防ぐ等のゲル膜の、物性が改善されるとの利点がある
。

本発明の電気泳動用媒体層には、必要に応じて抗酸化剤
を含有させることができる。抗酸化剤としては、ポリア
クリルアミドゲル膜に配合しうることか知られている種
々の化合物を用いることができる。抗酸化剤の例として
は、ジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールな
とを挙げることができる。

本発明の電気泳動用媒体における電気泳動用媒体層（ポ
リアクリルアミドゲル膜）の代表的なものは、上記のよ
うにアクリルアミドに代表される単量体、二官能性のア
リル（ａｌｌｙｌ　）化合物またはアクリル化合物（架
橋剤）、水溶性ポリマー、およびアガロースなどを、実
質的に均一な水溶液中でアクリルアミド系化合物および
アクリルアミド系コポリマー（そして場合により架橋剤
）とをラジカル架橋重合させて得られるものであり、ア
クリルアミド系化合物およびアクリルアミド系コポリマ
ー（そして場合により架橋剤）から形成された三次元架
橋重合体に水溶性ポリマーとアガロースが実質的に分散
されて、後二者のポリマー鎖と三次元架橋重合体とがか
らみあっている構造を有すると推定される。

本発明で利用されるラジカル架橋重合反応は分子状酸素
の不存在下で過酸化物の存在および／または゛紫外線照
射等公知の方法により発生させることができる。さらに
、この架橋重合反応は加熱または紫外線照射により加速
することもできる。

ラジカル架橋重合用触媒としては、ｒ　Ｅｌｅｃｔｒ。

ｐｈｏｒｅｓｉｓＪ　１９８１．２Ｌ２１３−２１９．
同１９８１．　ｇ、　２２０−２２８：古木、永井編「
最新電気泳動法Ｊ　　（１９７３年発行）等に記載の公
知の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用
いることができる。好ましいラジカル重合開始剤の具体
例としては、β−ジメチルアミノプロピオニトリル（Ｄ
ＭＡＰＮ）・ベルオクンニ硫酸アンモニウム混合物、Ｎ
、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（
ＴＥＭＥＤ）　　・ペルオクソニ硫酸アンモニウム混合
物、Ｔ　Ｅ　Ｍ　Ｅ　Ｄ・リボフラビン混合物、ＴＥＭ
、ＥＤ・リボフラビン・過酸化水素混合物と紫外線照射
の組合せ等が挙げられる。ラジカル重合開始剤の含有量
は、アクリルアミド系化合物およびアクリルアミド系コ
ポリマー（そして場合により架橋剤）の合計重量に対し
て約０．３重量％から約５重量％、そして好ましくは約
０．５重量％から約３重量％の範囲である。

本発明のポリアクリルアミドゲル膜は、平滑表面を有す
る支持体の上にゲル形成液を公知の方法により塗布して
塗布層を形成させたのち、その塗布層を架橋重合させて
製造する。ただし、ゲル形成液を支持体に塗布するに際
しては、電気泳動用媒体層と支持体との接着性を向上さ
せるために、予め支持体表面に接着層を設け、この上に
ゲル形成液を塗布し、ゲル化させる方法を利用すること
もできる。接着層の付設は、プラスチック製支持体シー
トを用いた際に特に有利となる。

ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場合には、
ゲル形成液の上を更にカバーフィルム、シートまたは板
などの被覆材料でおおうことができる。この目的に使用
されるカバーフィルム等としては前記支持体と同様な素
材からなるものを用いることかできる。この被覆材料の
厚さは３００ｇｍ以下であり、実用的に好ましい範囲と
しては約４〜２００ルｍである。

なお、本発明の電気泳動媒体を製造するに際して、カバ
ーフィルム等の上に電気泳動媒体を形成させたのち、そ
の上に支持体を付設する方法を利用することも可能であ
る。

本発明の電気泳動用媒体は、前述の諸文献等に記載の公
知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳動法
、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いることが
できる。

電気泳動媒体層の製造に際して力へ−フィルムが付設さ
れた電気泳動媒体は電気泳動に付されたのちカバーフィ
ルムを除き、あるいは力へ−フィルムを除去することな
くオートラジオグラフィー処理性なうことにより、泳動
結果の解析が行なわれる。

次に本発明の実施例を示す。

［実施例１］ 表面を親水性にした厚さ１８０　ｇｍのポリエチレンテ
レフタレート（ＰＥＴ）シート（支持体）の上に約３０
０ルｍの厚さになるように第１表記載のゲル形成液を塗
布し、窒素雰囲気中で架橋重合させてポリアクリルアミ
ドゲル膜を製造した。

これにカンタ−を用いてサンプル注入口を形成した。次
に、表面を親水性にしたＰＥＴシート（カバーフィルム
、厚さ１００ルｍ）をこのゲル膜の表面に置いて被覆し
、電気泳動媒体材料を得た。

なお、第１表において試料番号ｌは比較試料に該当し、
試料番号２〜４は本発明に従う試料に該当する。

第１表 試料番号　　　１　　２　　３　　４ アクリル ア　ミ　　ド　　　　　　　　１１．９９ｇ　　　　＋
０．８１ｇ　　　　　８．・５０ｇ　　　　１０．８１
８Ｆ−２−１，２３３，８ｇ　　　− ｐ　　　Ｂ　　　　　　　＋　　　　　−−１２ｇＢ　
Ｉ　Ｓ　　　　　　、０．２１ｇ　　　Ｏ，１，９ｇ　
　　０．１５ｇ　　　０．１８ｇ尿素　　　　　４２．
０　ｇ　　同左　　同左　　同左アガロース　　１５．
０　ｍｌ　　同左　　同左−同左トリス（ヒドロキシメ
チル） アミノメタン　１．０８ｇ　　同左　　同左　　同左ホ
ウ酸　　　　Ｑ、５５ｇ　　同左　　同左　　同左ＥＤ
ＴＡ参２Ｎａ　　　０．０９３８　　同左　　同左　　
同左（水を加えて１００ｍ文にする） Ｔ　Ｅ　Ｍ　Ｅ　Ｄ　　　３３ル文　同左　　同左　　
同左ＡＰＳ　　　　　１．３．ｍ文　同左　　同左　　
同左性）Ｐ−２：Ｎ−（［３−（ビニルそルホニル）プ
ロパンアミドコメチル）アクリル アミド拳アクリルアミドコポリマー Ｐ−８’：　Ｎ−（［３−（２−クロロエチルスルホニ
ル）プロパンアミドコメチル）ア クリルアミド・アクリルアミド・Ｎ− （１，１−ジメチル−３−オキソブチ ル）アクリルアミドコポリマー ＢＩＳ：Ｎ、Ｎ’−メチレンヒスアクリルアミド［二官
能性架橋剤］ アガロース：低電気浸透性、ゲル化温度３６℃（２重量
％水溶液として使用） ＴＥＭＥＤ：Ｎ、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン （５重量％水溶液） ＡＰＳ：ベルオクソ二硫酸アンモニウム（５重量％水溶
液） なお、ＴＥＭＥＤとＡＰＳとは重合開始剤である。

上記の試料番号１．（比較試料）のサンプル注入口の形
成に際しては、カッターにゲルが粘着したため、サンプ
ル注入口付近のゲル膜部分に大きなゆがみが生じた。一
方、試料番号２〜４（本発明に従う試料）では、サンプ
ル注入口の形成が問題なく実現できた。

３２Ｐ−ＤＮＡをマキサム拳ギルバート分解して得た分
析試料について、上記の電気泳動用媒体を用いて塩基配
列決定操作のための電気泳動およびオートラジオグラフ
ィー処理を行なった。

−」二記の試料番号２〜４（本発明に従う試料）ではい
ずれも６５個の塩基配列が解読されたが、これに対して
、試料番号１（比較試料）で解読された塩基配列は４５
個であった。

［実施例２］ 第２表にボしたゲル形成液を用い実施例１と同様にして
電気泳動媒体材料を形成した。

なお、第２表において試料番号５は比較試料に該当し、
試料番号６〜Ｂは本発明に従う試料に該当する。

第２表 試料番号　　　５　　６　　７　　８ アクリル ア　ミ　　ド　　　　　　　　Ｉｌ、９１ｇ　　　　１
０．８１ｇ　　　　　８．５０ｇ　　　　］０．８１ｇ
Ｆ−２−１，２ｇ　　３．ｆｌｇ　　３．６ｇＴ　Ａ　
ＨＴ　　　　Ｏ，２３ｇ　　Ｏ，］９９ｇ　Ｏ，１５ｇ
　　　−尿素　　　　　４２．０　ｇ　　同左　　同左
　　同左アガロース　　１５．０　ｍｌ　　同左　　同
左　　同左ＰＡＡ　　　　　１．Ｏｇ　　同左　　同左
　　同左トリス（ヒドロキシメチル） アミノメタン　１”、０８ｇ　　同左　　同左　　同左
ホウ酸　　　　０．５５ｇ　　同左　　同左　　同左Ｅ
ＤＴＡ　１１２Ｎａ　　　０．０９３ｇ　　同左　　同
左　　同左（水を加えて１００ｍ文にする） ＴＥＭＥＤ　　　３３ル文　同左　　同左　　同左Ａ　
Ｐ　Ｓ　　　　　１．３ｍ文　同左　　同左　　同左注
）ＴＡＨＴ：　１．３．５−）リアクリロイルへキサヒ
ドロ−５−）リアジン ［三官能性架橋剤］ ＰＡＡ　：ポリアクリルアミド その他の成分の表示は、第１表の同じ意味を表わす。

」−記の試料番号５（比較試料）のサンプル注入、口の
形成に際しては、カッターにゲルが粘着したため、サン
プル注入口付近のゲル膜部分に大きなゆがみが生じた。

一方、試料番号６および７（本発明に従う試料）では、
サンプル注入口の形成が問題なく実現できた。また、試
料番号８（本発明に従う試料）では、サンプル注入口の
付近に若干孔れが生したが、実質的な問題はなかった。

Ｍ　−１３牽ｍｐ　−１１・５ＳＤＮＡに対してジデオ
キシ法を施して得た分析試料について、上記の電気泳動
用媒体を用いて塩基配列決定操作のための電気泳動およ
びオートラジオグラフィー処理を行なった。

Ｌ記の試料番号６〜８（本発明に従う試料）ではいずれ
も８２個の塩基配列が解読されたが、これに対して、試
料番号１（比較試料）で解読された塩基配列は５３個で
あった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記一般式（１）および（２）のいずれかにより表
   わされる構成繰返し単位を有するアクリルアミド系コポ
   リマー： ￥一般式（１）￥ ▲数式、化学式、表等があります▼ ［上式において、 Ｒ＾１＾１は、水素原子または１から６個の炭素原子を
   有するアルキル基であり； Ｑ＾１は−ＣＯＯ−、▲数式、化学式、表等があります
   ▼、または６から１０個の炭素原子を有するアリーレン
   基であり；Ｌ＾１は、−ＣＯＯ−あるいは▲数式、化学
   式、表等があります▼の結合のいずれかを少なくとも一
   個含み、かつ３から１５個の炭素原子を有する二価の基
   、または、−Ｏ−、▲数式、化学式、表等があります▼
   、−ＣＯ−、−ＳＯ−、 −ＳＯ＿２−、−ＳＯ＿３−、▲数式、化学式、表等が
   あります▼、 ▲数式、化学式、表等があります▼、あるいは▲数式、
   化学式、表等があります▼の結合のい ずれかを少なくとも一個含み、かつ１から１２個の炭素
   原子を有する二価の基（ただしＲ＾１＾１は前述と同義
   である）であり； Ｒ＾１＾２は−ＣＨ＝ＣＨ＿２又は−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   Ｘ＾１（ただし、Ｘ＾１は求核基により置換され得る基
   、あるいは塩基によってＨＸ＾１の形で脱離し得る基を
   表わす）のいずれかであり； Ａ＾１はその左側に示した各モノマー単位と共重合可能
   なエチレン性不飽和モノマーから誘導された二価の基で
   あり； ｘ＾１、ｙ＾１およびｚ＾１はモル百分率を表わし、ｘ
   ＾１は５０〜９９、ｙ＾１は１〜５０、ｚ＾１は残余の
   値をとる、ただしｚ＾１は０であってもよい］￥一般式
   （２）￥ ▲数式、化学式、表等があります▼ ［上式において、 Ｒ＾２＾１は水素原子または１から６個の炭素原子を有
   するアルキル基であり； Ｒ＾２＾２は−ＣＨ＝ＣＨ＿２又は−ＣＨ＿２ＣＨ＿２
   Ｘ＾２（ただし、Ｘ＾２は求核基により置換され得る基
   、あるいは塩基によってＨＸ＾２の形で脱離し得る基を
   表わす）であり； Ｌ＾２は、１から６個の炭素原子を有するアルキレン基
   、６から１２個の炭素原子を有するアリーレン基、−Ｃ
   ＯＺ＾２−で表わされる基、および−ＣＯＺ＾２Ｒ＾２
   ＾３−で表わされる基（ただし、Ｒ＾２＾３は１から６
   個の炭素原子を有するアルキレン基、あるいは６から１
   ２個の炭素原子を有するアリーレン基であり、そしてＺ
   ＾２は酸素原子あるいはＮＨである）から選ばれる二価
   の基であり；Ａ＾２はその左側に示した各モノマー単位
   と共重合可能なエチレン性不飽和モノマーから誘導され
   た二価の基であり； ｘ＾２、ｙ＾２およびｚ＾２はモル百分率を表わし、ｘ
   ＾２は５０〜９９、ｙ＾２は１〜５０、ｚ＾２は残余の
   値をとる、ただしｚ＾２は０であってもよい］とアクリ
   ルアミド系化合物とが水の存在下で架橋重合してなるポ
   リアクリルアミド系水性ゲル、および変性剤として少な
   くとも１個のカルバモイル基を有する化合物を含む電気
   泳動用媒体。 ２、上記ポリアクリルアミド系水性ゲルが、上記アクリ
   ルアミド系コポリマーとアクリルアミド系化合物そして
   更に架橋剤が水の存在下で架橋重合してなるものである
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動
   用媒体。 ３、上記架橋剤が三官能性架橋剤であることを特徴とす
   る特許請求の範囲第２項記載の電気泳動用媒体。 ４、さらに水溶性ポリマーおよびアガロースを含むこと
   を特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用媒
   体。 ５、前記変性剤が尿素またはホルムアミドである特許請
   求の範囲第１項記載の電気泳動用媒体。 ６、プラスチック材料製支持体に付設された形態にある
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第５項のい
   ずれかの項記載の電気泳動用媒体。