JPS62247244A - 電気泳動用媒体材料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［発明の分野］ 本発明は、電気泳動用媒体材料に関するものであり、さ
らに詳しくは特に蛋白質等の生体高分子成分の電気泳動
分析に使用するのに適した電気泳動用媒体材料に関する
ものである。

［発明の背景］ 電気泳動分析の代表的な態様としては、ガラス板支持体
に寒天、セルロース、セルロースアセテート、デンプン
、シリカゲル、ポリアクリルアミド等の膜形成材料を塗
４ｊまたは流延して製造した電気泳動膜に緩衝液をしみ
こませ、このＬに分析対象の物質を付着させ、支持体の
両端に電圧をかけ、支持体のＬまたは内部で展開（移動
）させたのち、染色し、この染色した試料の光学濃度を
測定して物質の各成分の定量分析を行なう態様を挙げる
ことかできる。

このような電気泳動分析および電気泳動膜の詳細につい
ては、電気泳動操作編「１［気泳動実験法（改訂第５版
）」（文光堂、１９７５年発行）、青水、永井編著「最
新電気泳動法」　（広角書店、１９７３年発行）等に記
載されている。

近年において、電気泳動法は生体成分の分析に多用され
ており、特に蛋白分析は病気診断のための生化学検査に
おいて頻繁に用いられている。

′心気泳動用膜またはシートとしては古くから波紙か用
いられていたか、上述のように性能りの面から最近はア
ガロース膜やポリアクリルアミドゲル膜が用いられるよ
うになり、特に分子ふるい効果を有するポリアクリルア
ミドゲル膜は現在最も多く利用されている。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミドのような
単量体を、重合触媒の存在下、Ｎ、Ｎ’−メチレンビス
アクリルアミドのような二官能性の架橋剤て酸素不存在
条件下で重合架橋させることによって得られている。

なお、ポリアクリルアミドゲル膜の製造に際しては変性
剤として陰イオン界面活性剤が添加されることが多いが
、蛋白質分析用ゲル膜の製造においては、変性剤の必要
量が少ないため、湿潤ゲル膜に変性剤水溶液を塗布する
方法、ゲル膜を変性剤水溶液に浸漬する方法等によりゲ
ル膜内に変性剤を含浸させることかできる。

上記の重合反応はラジカル架Ｊｒａ重合であり、酸素の
影響により反応か阻害されるため、ポリアクリルアミド
ゲル膜は酸素を′ｇ断した状態で調製する必要がある。

この理由から、現在では一般に、ポリアクリルアミドゲ
ル膜は２枚のガラス板で形成されたセル（一定の空間、
たとえば約０．３〜１ｍｍ厚の空間を有するもの）の中
にゲル形成液を注入し、酸素をｉ！！断した状態で東線
重合させてゲル膜を形成させている。しかし、この方法
は二枚のガラス板の間でゲル膜を形成するために、取り
扱い性が悪く、かつゲル膜の量産化が困難であるといっ
た大きな欠点を有している。

以上のようにして形成したポリアクリルアミドゲル膜を
電気泳動媒体として用いる電気泳動操作は、たとえば、
次のようにして実施される。

サンプルスロットがＬ端部に設けられたポリアクリルア
ミドゲル膜をガラス板に挟んだままの状態で垂直に配置
し、まず前゛電気泳動操作を行なったのち、サンプルス
ロット中に試料を一定量注入し　ｋし＼て′、１ン仁ン
蒼−ＩｌＩＩ渇作を看〒なう−そして一宇七与間の電気
泳動を行なった後、片面のガラス板を注、α深く除去し
、染色液中に浸漬して、泳動分離した蛋白質もしくはそ
の誘導体、分解物などを染色して、泳動パターンを画像
化する。

従来のアクリルアミドゲル膜を用いた電気泳動媒体材料
は上記のようにガラス板を用いるために取り扱い性に問
題があり、しばしばガラスを割ッたりして実験を失敗す
ることかある。この様な欠点を改良した取り扱い性の良
好な電気泳動用媒体材料の開発は既にすすめられ、支持
体としてポリエチレンテレフタレートなどのプラスチッ
ク材料からなる支持体を用い、その上にポリアクリルア
ミドゲル膜を形成した電気泳動媒体材料か既に提案され
ている。

１−記のプラスチック材料製の支持体を用いた電気泳動
媒体材料は、その製造が容易で、取り扱い性も良いとの
利点を有する。そして、蛋白質などの電気泳動も、その
電気泳動媒体材料を用いて行なうことができるか１本発
明者が詳細に検３Ｊ　Ｌ／たところによると、支持体と
してガラス板を用いて製造した従来の電気泳動媒体材料
に比較すると、その解像力か若干低下する傾向があるこ
とがわかった。

［発明の要旨］ 本発明の［１的は、新規なプラスチック製フィルム（あ
るいはシート）を支持体として用いたポリアクリルアミ
ドゲル膜系電気泳動媒体材料を提供することにある。

本発明の［１的は、特にプラスチック製フィルム（ある
いはシート）を支持体として用いたポリアクリルアミド
ゲル膜系電気泳動媒体材料てあって、支持体としてガラ
ス板を用いて製造した電気泳動媒体材料と同等もしくは
それ以上の解像力を示す電気泳動媒体材料を提供するこ
とにある。

本発明は、アクリルアミド系化合物と架橋剤とか水の存
在下で架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲル
からなる電気泳動用媒体層およびプラスチック材料製支
持体を含む電気泳動用媒体材料であって、該電気泳動用
媒体層と支持体層との間に、Ｖ、Ｃｒ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｇ
ａ、Ｉｎ、ＧｅおよびＳｎからなる群より選ばれる金属
元素の酸化物もしくは硫化物からなる酸素透過防１に層
が焔１えられていることを特徴とする電気泳動用媒体材
料からなるものである。

［９，明の効果］ 未発ＩＪ１の電気泳動用媒体材料は、に記のようにプラ
スチック製支持体からの゛市気泳動奴体層への酸素の透
過、拡散を低下させることのできる酸素透過防止層が設
けられているため、電気泳動用媒体層（ポリアクリルア
ミドゲル膜）の形成のための架橋重合反応が非常に円滑
に進行し、高度に均質な電気泳動用媒体層が形成される
。従って、そのような酸素透過防止層を備えていないプ
ラスチック支持体上に形成された電気泳動用媒体層に比
較して、本発明の電気泳動用媒体材料の電気泳動用媒体
層は、更に高い解像性を示す。

また、本発明の蒸着層の形成によって、スマイリング効
果により中央泳動列と両側部泳動列との間で発生しゃす
い泳動速度の差を低減することができるとの効果もある
。

［発明の詳細な記述］ 未発１！１の電気泳動用媒体材料の支持体は、プラスチ
ック材料から形成されるシート状物（フィルム状物も含
む）である、このプラスチック製シートとしては、任、
１のプラスチック材料から形成したものを用いることが
できる。好ましいプラスチック材料の例としては、ポリ
エチレンテレフタレート、ビスフェノールＡのポリカル
ボネ−１、ポリ塩化ビニル、ポリメチルメタクリレート
、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、セル
ロースアセテート、およびセルロースアセテートプロピ
オネートをあげることができる。

プラスチック材料製支持体は公知の表面活性化処理によ
り表面を親水化したものであることが好ましい。表面親
木化処理のためには紫外線照射。

グロー放電処理、コロナ放電処理、火焔処理、電子線照
射、ケミカルエツチング、電解エツチング等の公知の方
法を適用することかてきる。

支持体は、一般に厚さが約５０〜５００ルｍ、好ましく
は約７０〜３００ｐｍのものが用いられる。

これまでに提案されているプラスチック製支持体を用い
た電気泳動用媒体においては、プラスチック製支持体丘
に、直接あるいは接着剤層を介してポリアクリルアミド
ゲル形成用塗布液が塗布され、次いで窒素雰囲気ｆにて
架橋重合反応が行なわれている。

本発明の電気泳動用媒体においては、プラスチック製支
持体上にＶ、Ｃｒ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｇａ、Ｉｎ、Ｇｅおよ
びＳｎからなる群より選ばれる金属元素の酸化物もしく
は硫化物からなる酸素透過防止層が設けられる０本発明
の酸素透過防止層はＩｎ２Ｏ３会５ｎ０２からなること
が好ましい。

上記金属酸化物簿をプラスチック支持体表面に蒸着する
方法としては、たとえば電Ｆビーム法、スパッタリング
法を利用することができる。これらの蒸着法は、既に一
般的に利用されている技術を適用できるので、ここで特
に触れることはしない。

なお、蒸着層には必要に応じてビニルシランのようなシ
ラン系カップリンク剤を用いて処理（たとえば、蒸着層
のににカップリング剤を塗布する処理）してもよい。

酸よ透過防１１一層は０．０５〜３ＩＬｍの層厚を有す
ることか好ましく、特に０１１〜２ｇｍの範囲の層厚を
有することか好ましい。

また、酸素透過防止層はｌ　Ｑ　１３〜１０３Ω／口の
範囲の表面抵抗値を有することか望ましい。

酸素透過防１１一層と」−記支持体とからなる桔層体の
酸素透過かは１０ｃｃ／ｒｎ’・ａＬｍ　・ｄａｙ以ド
であることか好ましく、さらに７ｃｃ／ゴ・ａＬ寵・ｄ
ａｙ以下であることか特に好ましい。

なお、Ｌ記の酸素透過４１は、酸棄透過量の測定力法と
して一般的に利用されているｍ　ｏ　ｃ　ｏ　ｎ法によ
る測定ｆ１である。

Ｌ記の酸素透過防止層の上に直接、あるいは接着剤層な
どの他の中間層を介して電気泳動用媒体層か設けられる
。

次に電気泳動用媒体層（以下において、ゲル媒体層、ポ
リアクリルアミドゲル膜あるいは巾にゲル膜ともいう）
について説明する。

ポリアクリルアミドゲル膜は、アクリルアミド系化合物
と架橋剤とを、水溶液または水分散液として水中に溶解
または分散させてゲル形成液を調製したのち、液中て両
者を架橋重合させて架橋重合した水性ゲル膜として形成
することにより得ることかできる。本明細書においては
、特にことわらない限り、（水中に）溶解と（水中に）
分散の両者を含めて巾に（水中に）溶解といい、水溶液
と水分散液の両者を含めて単に水溶液という。また、溶
媒または分散媒として、所望により加えられる有機溶媒
と水の混合物をも包含する。

ポリアクリルアミドゲル膜の形成に用いることかできる
アクリルアミド系化合物の例としては、アクリルアミド
、Ｎ−メチルアクリルアミド。

Ｎ、Ｎ−ジメチルアクリルアミド、Ｎ−（ヒドロキシメ
チル）アクリルアミド、ジアセトンアクリルアミド等の
アクリルアミド系化合物やメタクリルアミド等のメタク
リルアミド系化合物が挙げられ、これらの化合物は単独
で、あるいは二種以上を併用して用いることかできる。

これらのアクリルアミド系化合物のうちてはアクリルア
ミドが最も好ましく、またアクリルアミドと他のアクリ
ルアミド系化合物、メタクリルアミド系化合物の一種以
りの併用も好ましい。

架橋剤としてはｒ　ＥＩｃｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＪ
　１９８１．２゜２２０−ｚｚｓｈｇに記載の公知の化
合物（一種または二種以上の組合せ）を用いることがで
きる。架橋剤の具体例としては、Ｎ、Ｎ’　−メチレン
ビスアクリルアミド（ＢＩＳ）；Ｎ、Ｎ’　−プロピレ
ンビスアクリルアミド（ＰＢＡ）、ジ（アクリルアミド
ジメチル）エーテル（ＤＡＥ）、１．２−ジアクリルア
ミドエチレングリコール（ＤＥＣ）、エチレンウレアビ
スアクリルアミド（ＥＵＢ）、エチレンジアクリレート
（ＥＤＡ）；Ｎ、Ｎ’　−ジアリルタータルジアミド（
Ｎ、Ｎ’−ｄｉａｌｌｙｌＬａｒｔａｒｄｉａｓｉｄｅ
　：　ＤＡＴＤ）　；およびＮ、Ｎ’　−ビスアクリリ
ルシスタミン（Ｎ、Ｎ’−ｂｉｓａｃｒｙｌｙｌｃｙｓ
ｔａｍｉｎｃ。

ＢＡＣ）等の二官濠性化合物か挙げられる。

架橋剤の量は、１１４１体と架橋剤の！ａ型重量対して
約２〜３０ｗｔ％、好ましくは約３〜ｌ　Ｏｗ　ｔ％の
範囲である。

ゲル濃度としては、Ｓ、　１ｌｊｅｒＬｅｎ：　　ｒ　
　Ａｒｃｈ。

Ｒｉｏｃｈｅｍ、旧ｏｐｈｙｓ、　Ｊ　１　（５ｕｐ９
１．　）、　１４７（１９６２）に記載の定義に従って
表示して、単帽体、架橋剤および水からなるゲル膜の容
績に対して、単量体と架橋剤の量が約３〜３０　ｗ　／
　ｖ％の範囲て好ましく用いられる。

本発明の電気泳動用媒体材料は主として蛋白質または複
合蛋白質（たとえばリボプロティン、糖プロティンなど
）の分析に有利に用いられるものてあり、電気泳動用媒
体層には、変性剤として陰イオン性界面活性剤を含有さ
せることができる。

分析試料が蛋白質または複合蛋白質（例えばリボ蛋白質
、糖蛋白質など）の場合には陰イオン界面活性剤を含ま
せることは好ましいか、または必須であることか多い。

陰イオン界面活性剤をゲル媒体層に含有させないことか
あることは勿論である。たとえば陰イオン界面活性剤を
含有しないゲル媒体層は、ＤＮＡフラグメント分析に基
づく遺伝病診断あるいは制限酵素分解を利用１ノだＤＮ
Ａ構造解析などの［１的に用いることかできる。

陰イオン界面活性剤を電気泳動用媒体層に含有させるこ
とにより、蛋白質または複合蛋白質の効率的な分離およ
びそれらの分子７５．７１１１定か可１七となる。

陰イオン性界面活性剤の例としてはアルキル硫酸塩か挙
げることかでき、特に炭素原子ａｌＯ以上の長鎖アルキ
ル基を右するアルキル硫酸塩か好ましく用いられる。塩
を形成する陽イオンとしては、ナトリウムイオン、カリ
ウムイオン、リチウムイオン等のアルカリ金属イオンが
一般的であり、これらのうちではナトリウムイオンか用
いやすい。アルキル硫酸塩のうちではドデシル硫酸塩（
ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等）か好ましく
、なかでもドデシル硫酸ナトリウム（ＳＯ３）が最も好
ましい。ＳＤＳを本発明のゲル媒体層に含有させること
により蛋白質または複合蛋白質の効率的な分離およびそ
れらの分子量測定がｉＴｆ能となる。

変性剤としての陰イオン界面活性剤の含有：、；二はゲ
ル形成液に対して４約０．０５〜２．０ｗ／ｖ％、好ま
しくは約０．１〜１．５ｗ／ｖ％の範囲である。

ポリアクリルアミドゲル膜には水溶性ポリマーを含有さ
せることかできる。

水溶性ポリマーとしては、付加東金型または縮重合型の
水溶性ポリマーを用いることができる。

付加重合型ポリマーの具体例としては、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド等
の非イオン性水溶性ポリマーが挙げられる。縮重合型ポ
リマーの具体例としてポリエチレングリコール、ポリプ
ロピレングリコール等の非イオン性水溶性ポリアルキレ
ングリコールか挙げられる。水溶性ポリマーの分子量は
、約１万から約１００万の範囲のものか好ましい。これ
らの水溶性ポリマーのうちでは、ポリエチレングリコー
ル、ポリアクリルアミドか特に好ましい。

水溶性ポリマーは、単量体と架橋剤の合計重量に対して
約２〜１００ｗｔ％の範囲、好ましくは約５〜５０ｗｔ
％の範囲の量で用いられる。水溶性ポリマーを添加する
ことにより、ポリアクリルアミドゲル膜は可塑性を有す
るようになるため、ａ断加工時に壊れることがなくなり
、またゲル膜は乾燥時にも可塑性を有するようになり、
もろさが改良され、壊れにくくなるとの利点かある。ま
た、水溶性ポリマーの分子量および添加量を選択するこ
とにより、ゲル膜の粘度をコントロールすることもてき
る。

ポリアクリルアミドゲル膜にはアガロースを含有させる
ことかてきる。アガロースは公知のアガロースてあれば
特に制限はなく、低゛ｉ「気浸透性、Φ′市気気浸透性
高’１１ｉ、気浸透性アガロースのいずれをも用いるこ
とかてきる。用いることのできるアガロースの例として
は特開昭５５−５７３０号、特開昭５５−１１０９４６
号、特表昭５７−５０２０９８号等の公報に開示されて
いるアガロース等がある。

アガロースは、単量体と架橋剤とを含むゲル組成液の容
積に対して約０．２〜２　ｗ　／　ｖ％、好ましくは約
０．３〜１．２ｗ／ｖ％の割合にて添加される。ゲル膜
にアガロースを添加することにより、ゲル形成用溶液温
度を変化させることにより、適当な溶液粘度にコントロ
ールすることか可能となり、その流動性を止めることが
てき、またゲル膜を成形する時には成形しやすくなると
の利点かある。

ゲル媒体層にはＰＨＩＩ衝剤を含有させることもできる
。緩衝剤としては、電気泳動分析される試料に応じて、
ＰＨ２，５から１０．０の範囲内のｐＨ値に緩衝できる
公知の緩衝剤から適宜選択して用いることかできる。

用いうる緩衝剤としては、■木化学会編「化学便覧　基
礎編」（東京、丸＝［１９５６年発行）＋３１２−１３
２０ベージ：古木、永井編「最新電気泳動法」　（東京
、広角、！１店、１９７３年発行３２０−３２２ベージ
；　ｒ　　ＤａＬａ　ｆｏｒ　Ｂｉｏｃｈｃｍｉｃａｌ
　ｎｅｓｃａｒｃｈＪ　（Ｒ，Ｍ。

Ｃ，Ｄａｗｓｏｎ　ａｔ　ａｌ、編、第２版、０ｘｆｏ
ｒｄ　ａｔ　ｔｈｅＣｌａｒｅｎｄｏｎ　Ｐｒｅｓｓ、
　１９６９年発行）　　４７６−５０８ベージ；　ｒ　
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　Ｊ　　５．４６７　（１９
６６）、ｒ　ＡｎａｌｙＬｉｃａｌ　Ｂ：ｏｃｈｃｌｓ
ＬｒｙＪ　Ｉ（１４，３００−３１０（１９８０）ｉに
記載の緩衝剤か挙げられる。

緩衝剤の例としては、バルビツールを含む緩衝剤、トリ
ス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（Ｔｒｉｓ）を含
む緩衝剤、燐＃塩を含む緩衝剤、ホウ酸塩を含む緩衝剤
、酢酸または酢酸塩を含む緩衝剤、クエン酸またはクエ
ン酸塩を含む緩衝剤、乳酸または乳酸塩を含む緩衝剤、
グリシンを含む緩衝剤、Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒドロキシ
エチル）クツシン（Ｂｉｃｉｎｅ）、Ｎ−２−ヒドロキ
シエチルピベラシンーＮ°−２−ヒドロキシプロパン−
３−スルホン酸（ＨＥＰＰＳＯ）またはその塩、Ｎ−２
−ヒトロキシエチルビベラジン−Ｎ’　−３−プロパン
スルホン酸（ＥＰＰＳ）またはその塩、Ｎ〜［トリス（
ヒドロキシメチル）］−］３−アミノプロパンスルホン
酸ＴＡＰＳ）またはその塩Ｔをおよび、これらのいずれ
かと必要により組合せられる酸、アルカリ、または塩等
を挙げることかできる。好ましい緩衝剤の具体例として
は、燐酸二水素カリウム−燐酸水素二ナトリウム、Ｔ　
ｒ　ｉ　ｓ・ホウ酸ナトリウム、Ｔｒｉｓ・ホウ酸ナト
リウム・ＥＤＴＡ２Ｎａ塩、Ｔｒｉｓ・クエン酸、ハル
ビタールナトリウム・酢酸ナトリウム、ハルビタールナ
トリウム・塩酸、バルビツール・パルビタールナトリウ
ム、酢酸・酢酸ナトリウム、乳酸・乳酸ナトリウム、ク
エン酸−燐酸水素二ナトリウム、ビシン（Ｂｉｃｉｎｃ
）、ＨＥＰＰＳＯ，ＨＥＰＰＳＯナトリウム塩、ＥＰＰ
Ｓ、ＥＰＰＳナトリウム塩、ＴＡＰＳ、ＴＡＰＳナトリ
ウム塩等を挙げることができる。

末完ＩＪＪにおいてポリアクリルアミドゲル膜はアクリ
ルアミドに代表される単量体、二官濠性のアリル（ａｌ
ｌｙ＋　）化合物またはアクリル化合物（架橋剤）、水
溶性ポリマー、およびアガロースを実質的に均一に溶解
させた水溶液中て単量体と架橋剤とをラジカル架橋重合
させて得られるものであり、巾Ｍ体と架橋剤から形成さ
れた三次元ｉ！橘重重合体水溶性ポリマーとアガロース
か実質的に分散されて、後二者のポリマー鎖か三次元架
橋重合体とからみあっている構造を有すると推定される
。

上記のラジカル架［ｆ合反応は、分子状酸素の不存在丁
で過酸化物の存在および／または紫外線照射等の公知の
方法により発生させることかできる。この反応を加熱お
よび紫外線照射により加速することもてきる。

ラジカル架４１！重合用触媒としては、ｒ　ＥｌｅｃＬ
ｒ。

ｐｈｏｒｃｓｉｓＪ　１９８１．２．２１３−２１９．
同＋９８１．２．２２０−２２８；青水、水井編「最新
電気泳動法Ｊ　　（１９７：Ｉ年発行）等に記載の公知
の低温ラジカル重合開始剤のうちから適宜選択して用い
ることかできる。

好ましいラジカル重合開始剤の具体例としては、β−ジ
メチルアミノプロピオニトリル（ＤＭＡＰＮ）−ベルオ
クソ二硫酸アンモニウム混合物。

Ｎ、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’　−テトラメチルエチレンジアミ
ン（ＴＥＭＥＤ）−ベルオクソニ硫酸アンモニウム混合
物、ＴＥＭＥＤ−リボフラビン混合物、ＴＥＭＥＤ−リ
ボフラビン−過酸化水素混合物と紫外線照射の組合せ等
が挙げられる。ラジカル重合開始剤の含有州は、単量体
と架橋剤の合計型かに対して約０．３〜５重量％、そし
て好ましくは約０．５〜３屯量％の範囲である。

ゲル媒体層は、支持体上の前記の＃素透過防止層の上に
直接あるいは接着剤層などの他の中間層を介して上記の
ゲル形成液を公知の方法により塗４Ｊ　Ｌ／て、没けた
のち、ゲル形成液を架橋重合させることにより形成する
ことができる。

ゲル形成液を支持体の表面で架橋重合させる場合には、
ゲル形成液塗布層の上をさらにカバーフィルム、シート
または板などの被覆材料でおおうことがてきる。この目
的に使用されるカバーフィルム、シート、または板とし
ては前記支持体と同様な素材からなり、更に支持体同様
、酸素透過能を低下させているものを用いることがてき
る。この被覆材料の厚さは３００ｐｍ以下であり、実用
的に好ましい厚さの範囲は約４〜２００ＪＬｍてあり、
特に好ましい範囲は約４ルｍ〜ｌＯＯルｍである。

ポリアクリルアミドゲル膜には、必要に応じて抗酸化剤
などの他の添加剤を含有させることかできる。抗酸化剤
としては、ゲル膜に配合しうろことか知られている種々
の化合物を用いることかできる。抗酸化剤の具体例とし
てはジチオスレイトール、２−メルカプトエタノールを
挙げることがてきる。

その他の添加剤としては湿潤剤があり、ポリアクリルア
ミドゲル膜にはグリセリン、エチレングリコール等のポ
リオール化合物を含有させることもてきる。ポリオール
化合物の含有品゛は、ゲル膜の容積に対して約５〜約４
０　ｗ　／　ｖ％の範囲から選ばれる。ポリオール化合
物のうちではグリセリンか特に好ましい。湿潤剤を配合
することによりゲル膜の保存時の極端な水分の蒸発によ
る乾燥を防ぐことかｉｔ）能となり、また極端な乾燥に
起因するもろさを防ぎ、ひびわれを防ぐ等のゲル膜の物
性か覆片されるとの利点がある。

本発明の電気泳動用媒体材料は、前述の諸文献等に記載
の公知の方法に従って、水平型および垂直型平板電気泳
動法、ディスク電気泳動泳動法等のいずれにも用いるこ
とかできる。

以ドに未発ＩＩの実施例を記載するか、これらは本発明
の範囲を限定するものてはない。

［実施例１］ 紫外線照射処理により表面を親水性にした厚さ１８０ｐ
ｍの無色透明ポリエチレンテレフタレートシート（支持
体）上に、Ｉｎ２０＝のベレットと５ｎ０２のベレット
とを用いて層厚か約０．５ｐｍのＩｎ２Ｏ３・５ｎ０２
　（１０：　１）混合蒸着層を形成した。この層厚は水
晶振動式膜厚ヘットモニターを用いて測定した。

上記の蒸着層が付設された支持体の酸素透過係数は５ｃ
ｃ／ｒＩＴ′・ａＬ層・ｄａｙであった。

支持体上に設けられた蒸着層の上に、アクリルアミド９
．５ｇ、ＢＩＳｏ、５ｇ、リン酸水素二ナトリウム・−
二氷塩３．５８ｇ、リン酸二木宋ナトリウム・二本３１
０．３３ｇ、および５ＤＳＯ、ｌｏｇを含有する１　０
０　ｍ　ｆＬの溶液に重合開始剤としてベルオクソニ硫
酸アンモニウム（５重量％）１．３ｍＪｌ、ＴＥＭＥＤ
３３ｕｌを加えたものを０．３ｍｍの厚みに塗布成形し
、窒素雰囲気下にて、１００ｗ高圧水銀灯を１０ｃｍの
距離から照射し、１０分間静置しポリアクリルアミドゲ
ル膜を得た。

［比較例１］ ポリエチレンテレフタレートシート（支持体）」二に、
蒸着層を設けなかったこと以外は実施例１と同様にして
支持体上にポリアクリルアミドゲル１悶を形成した。

なお、上記の支持体の酸素透過係数は１７ｃｃ／ｍｌ・
ａＬ■・ｄａｙであった。

［８考例１］ 支持体としてポリエチレンテレフタレートシートの代り
にガラス板を用い、蒸着層を設けなかったこと以外は実
施例１と同様にして支持体りにポリアクリルアミドゲル
膜を形成した。

［電気泳動試験］ 実施例１、比較例１および参考例１で得られたポリアク
リルアミドゲル膜にサンプル注入口を形成し、次いでゲ
ル膜に厚さ６３ｇｍのポリエチレ”）−？　＋！−７々
　１１−に：／−ｋ　　（−ｈ）＜−：／　　　　ｋ　
　１　ｂ４）−Ｐせた。

このポリアクリルアミドゲル膜を使用して、標準蛋白質
試料を電気泳動にかけ、分離実験を行なった。

電気泳動終了後に、ゲル膜のカバーフィルムを静かには
がして除去し、ゲル膜全体なＯ，１％コーマシーブルー
水溶液に浸漬して、泳動ゾーンを、１色に染色した。

実施例１および参照例１のゲル膜により得られた泳動パ
ターンは高い解像力を示し、解読か容易であった。一方
、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターンの解像
力は、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンの解像力に比較して低かった。

また、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンのスマイリング効果による中央部泳動列と
両側部泳動列との泳動距離の差はいずれも小さい値であ
ったが、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターン
のスマイリング効果による中央部泳動列と両側部泳動列
との泳動距離の差は大きかった。

［実施例２１ 支持体にに設ける蒸着層の厚さをｌ用ｍとして形成した
以外は実施例１と同様にして蒸着層を有する支持体を形
成した。

１−記の蒸着層か付設された支持体の酸素透過係数は４
　ｃ　ｃ　／　ｒｒｆ　・ａｔｅ　・ｄａｙてあった。

次いて、］二二叉支持体−の蒸着層の−Ｌに実施例１と
同様にしてポリアクリルアミドゲル膜を形成した。

し電気泳動試験］ 実施例２、比較例１および参考例１て得られたポリアク
リルアミドゲル膜にサンプル注入口を形成し、次いてゲ
ル１佼に厚さ５０７ｚｍのポリエチレンテレフタレート
シート（カバーシート）をかぶせた。

このポリアクリルアミドゲル膜を使用して、標準蛋白質
試料を電気泳動にかけ、分離実験を行なった。

電気泳動終了後に、ゲル膜のカバーフィルムな静かには
かして除去し、ゲル膜全体な０９１％コーマシーフルー
水溶液に浸漬して、泳動ゾーンを１７色に染色した。

実施例１および参照例１のゲル膜により得られた泳動パ
ターンは高い解像力を示し、解読か容易であった。一方
、比較例１のゲル１原により得られた泳動パターンの解
像力は、実施例１および参照例１のゲル膜により得られ
た泳動パターンの解像力に比較して低かった。

また、実施例１および参照例１のゲル膜により得られた
泳動パターンのスマイリング効果による中央部泳動列と
両測部泳動列との泳動距離の差はいずれも小さい値であ
ったが、比較例１のゲル膜により得られた泳動パターン
のスマイリング効果による中央部泳動列と両測部泳動列
との泳動距離の差は大きかった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、アクリルアミド系化合物と架橋剤とが水の存在下で
   架橋重合してなるポリアクリルアミド系水性ゲルからな
   る電気泳動用媒体層およびプラスチック材料製支持体を
   含む電気泳動用媒体材料であって、該電気泳動用媒体層
   と支持体層との間にＶ、Ｃｒ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｇａ、Ｉｎ
   、ＧｅおよびＳｎからなる群より選ばれる金属元素の酸
   化物もしくは硫化物からなる酸素透過防止層が備えられ
   ていることを特徴とする電気泳動用媒体材料。 ２、上記酸素透過防止層が金属酸化物の蒸着層であるこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動用
   媒体材料。 ３、酸素透過防止層が０．０５〜３μｍの層厚を有する
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動
   用媒体材料。 ４、酸素透過防止層が、Ｉｎ＿２Ｏ＿３・ＳｎＯ＿２か
   らなることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電
   気泳動用媒体材料。 ５、酸素透過防止層と支持体とが形成する積層体の酸素
   透過量が１０ｃｃ／ｍ＾２・ａｔｍ・ｄａｙ以下である
   ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の電気泳動
   用媒体材料。 ６、プラスチック材料製支持体がポリエチレンテレフタ
   レートからなることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   記載の電気泳動用媒体材料。 ７、上記電気泳動用媒体層がさらに水溶性ポリマーおよ
   びアガロースを含むことを特徴とする特許請求の範囲第
   １項乃至第６項のいずれかの項記載の電気泳動用媒体材
   料。 ８、上記電気泳動用媒体層がさらに陰イオン界面活性剤
   からなる変性剤を含むことを特徴とする特許請求の範囲
   第１項乃至第６項のいずれかの項記載の電気泳動用媒体
   材料。