JPS59159786A - 新規物質アルゴマイシン - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の背景 本発明は、新規なアンスラサイクリン化合物およびその
製造法に関する。

制癌性抗生物質としてのアンスラサイクリン化合物は医
薬として重要な位置を占めており、既に各種のものが提
案されている。一般に、化学物質の生理活性はその化学
構造ないし理化学的性質に依存するところが大きいから
、アンスラサイクリン化合物についてもそのアグリコン
部分及び糖鎖部分の糖の種類または置換基において既存
のものと異なる化合物ないし既存のものと異なる理化学
的性質を有する化合物に対しては不断の希求があるとい
えよう。

発明の概要 本発明は、上記の希求に応えるものである。

すなわち、本発明によるアンスラサイクリン化合Ｒ’／
Ｊ　７　／Ｌ／ゴマイシンは、下記の理化学的性質を有
するものである。

本発明によるアンスラサイクーリン化合物アルボマイシ
ンの製造法は、適当な培地にストレプトミセス属のアル
ボマイシン生成能を有する菌株を好気的に培養し、培養
物から下記の理化学的性質を有するアンスラサイクリン
化合物アルボマイシンを採取すること、を特徴とするも
のである。

（１）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　：２０７〜２１３℃（分解）（３）比
旋光度　：〔αｌ）　’６”’　−＋　１１２°（Ｃ＝
０．１、クロロホルム：メタノール−９＝１） （４）元素分析値　Ｃ：　５６．２％ （実験値）Ｈ：　　６．９％ ０　：　３５．１係 Ｎ：１．８係 （５）紫外部可視部吸収スペクトル 第１図に示した通りである。

ＣＨ３０Ｈλｍａｘ　　（Ｅ”） ０ｍ ２３５　（３６３）、２５８（１６７）、２９２　（６
１）、４７６　（１０４）０　、　ＩＮＨＣｌ　＋ＣＨ
３０Ｈ ２３５（３８７）、２５８（１５９）、２９２（６１）
、４６８　（１１０）０　、　ｌＮＮａＯＨ＋ＣＨａＯ
Ｈ ２３９、（３０２）、２９４（４１）、５２３　（８８
）（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定
）第２図に示した通りである。

（力溶剤に対する溶解性 クロＵホルムーメタノール混液、ジメチルスクロロホル
ム、メタノール、酢酸エチル、メチ水に難溶。

（８）薄層クロマトグラフィー （メルク社しシリカゲル６０Ｆ２５４Ｊプレート使用）
展開溶媒　　　　　　　　　　　Ｒｆ値ジクロロホルム
メタノール　　　　　　　　０．２０＝８：１：０．１ クロロポルム：メタノール：酢酸　　　　　０．３０＝
８：１：０．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　　０．２６＝
７：２：２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４０ｐメガヘルツ、重ク
ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。

アンスラサイクリン化合物アルボマイシン化学構造 本発明によるアンスラサイクリン化合物アルボマイシン
は、下記の式（Ａ）で示される化学構造を有するアグリ
コンに構造不明の糖がグリコシド結合したものである。

この化学構造は、下記のようにして決定された。

すなわち、アルゴマイシ／を０．４Ｎ塩酸に溶解し、１
８；５＋　’Ｃで０．５時間加水分解を行なうことによ
り、アグリコン部分と糖部分とが得られた。アグリコン
部分は、薄層クロマトグラフィー、紫外部吸収スペクト
ル、マススペクトル及び核磁気共鳴スペクトル等の解析
により、Ｗｉ　１ｅｙＸＰ、Ｆ、らが報告（Ｊ。

Ａｍ　、Ｃｈｅｍ　、　Ｓａｃ　、　９９．５４２〜５
４９　（１９７７）　）　　しているノガラマイシン（
Ｎｏｇａｌａｍｙｃｉｎ　）のアグリコン部分であるノ
ガラロール（Ｎｏｇａｌａｒｏｌ）　テ１＞ることか判
った。

理化学的性質 アンスラサイクリン化合物アルボマイシンの理化学的性
質は、下記の通りである。

（１）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　＝２０７〜２１３°Ｃ（分解）、　　
　　２５− （３）比旋光度　、〔α）、、−＋１１２°（Ｃ＝　０
．１、クロロホルム：メタノール＝９：１） （４）元素分析値　Ｃ：　５６．２係 （実験値）Ｈ：６．９％ ０　：　３５．１％ Ｎ：１．８％ （５）紫外部＝Ｔ視郡部吸収スペクト ル第１図示した通りである。

、ＣＨ３０Ｈλｍａｘ　　（Ｅ１％） ０ｍ ２３５　（３６３）、２５８　（１６７）、２９２　（
６１）、４７６（１０４）０、ｌＮＨＣｌ　十〇Ｈ３０
Ｈ ２３５　（３８７）、２５８（１５９）、２９２（６１
）、４６８　（１１０）０　、　ｌＮＮａＯＨ＋ＣＨ３
０Ｈ ２３９（３０２）、２９４（４１）、５２３（８８）（
６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）第
２図に示した通りである。

（力溶剤に対する溶解性 クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、メチルエチル
ケトン、ブタノール、酢酸ブチル、５ エタノール１、ア、セ＋ンおよび酸性Ｅに可溶。

水に難溶。

（８）薄層クロマトグラフィー （メルク社「シリカゲル６０Ｆ２５４Ｊプレート使用）
展開溶媒　　　　　　　　　　Ｒｆ値 ジクロロホルムメタノール　　　　　　　０．２０＝８
　：　１　：　０．１ クロロホルム：メタノール：６酸０．３０＝８　：　　
１　：　０．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　帆２６＝７：
２：２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重ク
ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。

ア／Ｌ／、ゴマイシンの製造 概要 アンスラサイクリン化合物アルボマイシンは現在のとこ
ろ微生物の培養によってのみしか得られていないが、そ
の糖部分の構造が解明できれば、類縁化合物の合成化学
的または微生物学的修飾によって製造することも、ある
いは全合成化学的に製造することもできよう。

微生物の培養による場合の菌株としては、ストレプトミ
セス属に属するアルボマイシン生成能を有するものが使
用される。具体的には本発明者らの分離したストレプト
ミセス・ピオロクロモケネス１０８９−ＡＶ２（８９２
）株がアルボマイジンを生産することが本発明者らによ
って明らかにされているが、その他の菌株については抗
生物質生産菌単離の常法によって適当なものを自然界よ
り分離する菌を放射線照射その他の処理に付して、アル
ザマイシン生産能を高める余地も残されている。

８９２株 アンスラサイクリン化合物アルボマイシン生産能を有す
るストレプトミセス属の菌株として本発明者らの見出し
ている８９２株は、下記の内容のものである。

（１）由来および寄託番号 ８９２株は佐賀県神崎郡基山町の水田で採取した土壌か
ら分離されたものであり、昭和５７年１２月路日に工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託され−て、「微工研
菌寄第６８６５号」の番号を得ている。

（２）菌学的性状および生理学的性質 （イ）形態 空中菌糸は主軸を長く伸ばし、短板を不規則に多くは房
状に分岐しく単軸分枝）、その先端に胞子鎖を形成する
。胞子鎖は通常ｔｏ−２５個の胞子からなり、密な閉鎖
状螺旋を呈する（径２〜３μ、１〜４回転）。胞子表面
は平滑で径０　、７−０　、９μ、０．５−０．６μの
円筒状または長楕円形である。培地（栄養課天培地）に
よっては基生菌糸上に屈曲した短板を単独または房状に
分岐し、その先端に不規則に曲折した姻子鎖（２〜１５
個）を形成することがある。その他の特殊形態は観察さ
れない。全菌体加水分解中にＬＬ型クジアミノピメリン
酸含む。

（ロ）各種培地に２ける生育状態 国際放線菌命名委員会（ＩＳＰ）の方法便覧（Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ　ｏｆ　Ｍａｎｕａｌ　１９４１）にしたがって
観察した。観察結果は、要約して表１に示した。

（ハ）生理的性質および炭素源の同化性生理的性質は表
２に、また炭素源の同化性は表３に、それぞれ示す通り
である。

表２　生理的性質 生育温度範囲　　　　　　　２０−４２℃生育最適温度
　　　　　　　２７−３７℃ゼラチンの液化　　　　　
　　　十 スターチの加水分解　　　　　　十 脱脂牛乳の凝固　　　　　　　　− 脱脂牛乳のペプトン化　　　　　士 メラニン様色素の生成 チロシン寒天　　　　　　　　　十 ペストン・イースト・鉄寒天　　＋ トリゾトン・イースト液体培地　土 柱）＋：陽性 ｍ：陰性 表３　炭素源の同化性 Ｌ−アラビノース　　　　　　＋ Ｄ−キシロース　　　　　　士 Ｄ−グルコース　　　　　　士 Ｄ−フラクトース　　　　　＋ シュクロース　　　　　　　　＋ イノシトール　　　　　　　士 Ｌ−ラムノース　　　　　　− ラフィノース　　　　　　　± Ｄ−マンニトール　　　　　士 ゾリドハム・ゴツトリーブ寒天培地を使用註）＋：良く
生育 ±：わずかに生育 ｍ：生育せず に）考察 本菌株１０８９−ＡＶ２は細胞壁成分としてＬ型のジア
ミノピメリン酸を含み、１０個以上の胞子からなる胞子
鎖を形成することから、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ）属に所属され、次のように特徴づけら
れる。すなわち、ａ）胞子鎖は密な閉鎖コイル状、ｂ）
胞子鎖表面構造は平滑、ｃ）閑叢色は灰色及び赤色系列
、ｄ）集落の裏面色は淡橙色から明黄色、暗橙色、ｅ）
メラニン様色素の産性は陽性。

上述の５特性を基準にして既知菌種と比較検討した結果
、本菌株はアクチノミセス（ストレプトミセス）ピオロ
クロモゲネス（Ａｃ　ｔ　ｉｎｏｍｙｃｅｓ（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ）ｖｉｏｌｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ
）に最も近縁である。本菌株とＡ、ビオロクロモゲネス
とを比較するとラムノースおよびラフィノースの利用能
のみが異なり、これは柵を分けるほどの差異とは考えら
れないところから、本菌株は同種に所属されるものとし
た。よって、本菌株はストレプトミセス・ビオロクロモ
ゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｉｏｌｏｃｈｒｏ
ｍｏｇｅｎｅｓ）１０８９−ＡＶ２と称する。

（３）培養／アルボマイシンの生産 アンスラサイクリン化合物アルボマイシンは、ストレプ
トミセス属に属するアルボマイシン生産菌を適当な培地
で好気的に培養し、培養物から目的物を採取することに
よって製造することができる。

培地は、アルボマイシン生産菌が利用しうる任意の栄養
源を含有するものでありうる。具体的には、例えば、炭
素源として、グルコース、シュークロース、マルトース
、スターチ、および油脂類などが使用でき、窒素源とし
て大豆粉、綿実粕、肉エキス、ペプトン、乾燥酵母、酵
母エキス、およびコーンスチーゾリカーなどの有＠−並
びにアンモニウム塩または硝酸塩、たとえば硫酸アンモ
ニウム、硝酸ナトリウム、および塩化アンモニウム等の
無機物が使用できる。また、必要に応じて、食塩、塩化
カリウム、リン酸塩、重金属塩など無機塩類を添加する
ことができる。発酵中の発泡を抑制する為に、常法に従
って適当な発泡剤、たとえばシリコーンを添加すること
もできる。

培養方法としては、一般に行われている抗生物質の生産
の方法と同じく、好気的液体深部培養法が最も適してい
る。培養温度は加℃〜４７Ｃが適当であるが、２７℃〜
３７°Ｃが好ましい。この方法でアルボマイシンの生産
量は、振盪培養、通気攪拌培養共に３日〜６日で最高に
達する。

このようにしてアルボマイシンの蓄積された培養物が得
られる。培養物中では、アルボマイシンはその大部分は
培養ｃ液中に存在するが、その一部分は菌体中に存在す
る。

このような培養物からアルボマイシンを採取するには、
合目的的な任意の方法が利用可能である。

その一つの方法は、抽出の原理に基くものであって具体
的には、たとえば、培養ｆ液中のアルボマイシンについ
てはこれを水不混オロ性のアルボマイシン用溶媒（前記
参照）例えば酢酸エチル、酢酸ブチル、クロロホルム、
ブタノール等で抽出する方法、あるいは自体内のアルボ
マイシンについては１過、遠心分離等で得た菌体集体を
クロロホルム、酢酸エチル、ブタノール、メタノール、
エタノール、アセトン、メチルエチルケトン、塩酸溶液
または酢酸溶液などで処理して回収することができる。

菌体を分離せずに培養物そのま＼を上記の抽出操作に付
すこともできる。適当な溶媒を用いた向流分配法も抽出
の範噛に入れることができる。

培養物からアルボマイシンを採取する他の方法の一つは
、吸着の原理に基くものであって、既に液状となってい
るアルボマイシン含有物、例えば培養ｆ液あるいは上記
のようにして抽出操作を行なうことによって得られる抽
出液、を対象として、−適当な吸着剤、例えば活性炭、
アルミナ、シリカゲル、［ダイヤイオンＨＰ２０Ｊ　　
（三菱化成製）等、を用いたカラムクロマトグラフィー
、液体クロマトグラフィー、その他によって目的アルボ
マイシンを吸着させ、その後溶離させることによって、
アルボマイシンを得ることができる。このようにして得
られたアルボマイシン溶液を減圧濃縮乾固すれは、アル
ボマイシンの粗標品が得られる。

このようにして得られるアルボマイシンの粗標品をさら
に精製するためには、上記の抽出法および吸着法を必要
に応じて組合せて必要回数行なえばよい。例えば、シリ
カゲル、［ダイヤイオンＨＰ２０　Ｊなどの吸着剤また
はゲル沢過剤を用いたカラムクロマトグラフィー、適当
な溶媒を用いた液体クロマトグラフィー、および向流分
配法を適宜組合わせて実施することができる。具体的に
は、例えば、アルボマイシン粗標品を少量のクロロホル
ムに溶解し、酸性シリカカラムを用いて、適当な溶媒で
展開して活性成分を浴出させ、溶出液を減圧濃縮後、更
に「セファデックスＬＨ２０Ｊ　（ファルマシア社製）
カラムで浴出させると、アルボマイシンが単−物質とし
て分離されるから、これを濃縮乾固すればアルボマイシ
ンを得ることができる。

アルボマイシンの用途 本発明によるアンスラサイクリン化合物アルボマイシン
は、制癌活性および抗菌活性を有するという点で有用な
化合物である。

生理活性 （１）抗腫瘍性 アルボマイシンは、実験動物の白血病に対して抗腫瘍作
用を示した。例えば、ＣＤＦ１マウスに対し、Ｐ３８８
白血病細胞の懸濁液１×１０６ケ／マウスを腹腔内に移
植し、移植後より１日目と５日目にアルボマイシン０　
、５ｍｇ／ｋ　ｇを投与した。生理食塩水を投与した対
照群のマウスの生存日数を１００とした延命率（％）で
効果を示すと、１１０係であった。

（２）抗菌性 アルボマイシンは主としてダラム陽性囚に対して抗菌作
用を示す物質であり、寒天希釈法により求めた最小増殖
阻止濃度（ＭＩＣ）は表４の通りであ表４　アルボマイ
シンの最小増殖阻止濃度（抗菌性ＭＩＣ）１、　Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ　　５ｕｂｔｉｌｉｓ　ＰＣＩ　２１９　　
　　　１２．５（バチルス・スズチリス） ２、５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｆ
ＤＡ２０９Ｐ　　　１２．５（スタフィロコッカス・ア
ウレウス） ３、Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　　１ｕｔｅｕｓ　ＡＴＣ
Ｃ９３４１１２，５（ミクロコツカス・ルテウス） ４、　Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　　ａｅｒｕｇｉｎｏｓ
ａ　ＮＣＴＣ１０４９０＞１００（シュードモナス・エ
ルギノサ） ５、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　　ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ
ＩＦＯ１２５２９）１００（サルモネラ・チフィムリウ
ム） ６、　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＮＩＨＪ　
ＪＣ−２）１００（エシェリキア・コリ） ７、　Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉ
ａｅ　ＡＴＣＣ９７６３）１００（サツカロミセス・セ
レビシェ） ８、　Ｃａｎｄｉｄａ　　ａｌｂｉｃａｎｓ　Ｎｏ、Ｙ
ｕ　１２００　　　　　＞１００（キャンディダ・アル
ビカンス） ９、　Ｃａｎｄｉａ　ｕｔｉｌｉｓ　　ＩＦＯ０３９６
）１００（キャンデイダ・ウティリス） １０、　Ａｓｐｅｒｇｉｌ　ｌｕｓ　　ｆｕｍｉｇａｔ
ｕｓ　ＩＦ０４４００　　　　＞１００（アスペルギル
ス・フミガッス） １１、　Ｐｅｎ１ｃｉｌ　ｌｉｕｍ　ｃｈｒｙｓｏｇｅ
ｎｕｍ　ＡＴＣＣ１０００２＞１００（ペニシリウム・
クリソゲヌム） １２、　Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｍｅｎｌｇｒｏｐ
ｈｙｔｅｓ　　　　　＞１００（）　ＩＪコフイトン・
メンタグロフィテス）（３）急性毒性（ＬＤ５０） アルボマイシンのマウス腹腔内注射によるＬＤ５０は、
１　、７５ｍｇ／ｋｇであった。

実験例 以下において「％」は「Ｗ／′Ｖ％」である。

実施例１ （１）種母の調製 使用した培地は、下記の組成の成分を１リツトルの水に
溶解して、ｐＨ７，０に調帯したものである。

グルコース　　　　　　　　　　４％ モルト・エクストラクト　　　１０係 イースト・エクストラクト　　４饅 ビタミン・コンプレックス　　１０ｍ１／１なお、ビタ
ミン・コンプレックスは、下記の組成の成分を１０ｍ１
の蒸留水に溶解したものである。

塩酸チアミン　　　　　　　　０．５ｍｇリボフラビン
　　　　　　　　０　、５ｍｇナイアミン　　　　　　
　　０　、５ｍｇ塩酸ピリドキシン　　　　　　０　、
５ｍｇイノ／トール　　　　　　　　０　、５ｍｇ、５
ントテン酸カルシウム　　　　　　０　、５ｍｇノξラ
アミノペンゾイックアシド　　０　、５ｍｇビオチン　
　　　　　　　　　　０．２５ｍｇ上記培地Ｌ５ｍｌを
大型試験管に分注殺菌し、スト時間試験管振盪機にて振
盪（２３Ｏｒｐｍ）　　したものを種母とした。

（２）培養 使用した培地は、下記の組成の成分を１リツトルの水に
溶解して、ｐ）１７．０に調整したものである。

澱粉　　　　　２．５％ 大豆粉　　　　　　　　　　　１．５係乾燥酵母　　　
　　　　　　　０．２％炭酸カルシウム（沈降性）　　
　　　　Ｏ−、４％上記培地１１１リツトルを１００ｍ
１ずつ５００ｍ１の三角フラスコに分注殺菌したものへ
、上記種母２ｍｌを添加し、ロータリーシェカー（２３
０ｒｐｍ）を用い（３）アルボマイシンの採取 培養後、培養液を濾過し、得られた培養１液１リツトル
をｐｌ（２，０に調整した後、ダイアイオンＨＰ２０に
吸着させ、これを水で、続いて５０％メタノールで洗浄
し、１００％メタノールで溶出する。

これを、減Ｆｆ！濃縮後、クロロホルムで抽出する。

このクロロホルム層を減圧乾固して、赤色粉末１ｇを得
る（アルボマイシン粗粉末）。

実施例２ 実施例１で得られたアルボマイシン粗粉末１ｇをクロロ
ホルム：メタノール−２０＝１の溶液に溶解し、酸性シ
リカ５００ｇをクロロホルム：メタノール＝２０：１で
平衡化したカラム６　Ｘ　６０ｃｍにのせ、クロロホル
ム：メタノール＝２０：１で溶出する。

得られた活性画分を減圧乾固した後、更にクロロホルム
：メタノール−１＝１の溶液に溶解し、クロロホルム：
メタノール＝１：１で平衡化した［セファデックスＬＨ
２０Ｊカラムにのせ、クロロホルム：メタノール＝１＝
１で溶出する。得られた活性画分を減圧乾固し、橙色の
アルボマイシン粉末１００ｍｇを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図は、アルボマイシンの紫外部可視部吸収スペクト
ルを模写したものである。 １　メタノール中 ２　メタノール＋ＨＣＩ中（ＨＣＩ　：０．ＩＮ　）３
　メタノール＋Ｎａ　ＯＨ中（Ｎａ　ＯＨ：　０．Ｉ　
Ｎ　）第２図は、アルボマイシンの赤外吸収スペクトル
を模写したものである。 第３図は、アルボマイシンの１）（−ＮＭＲスペクトル
を模写したものである。 出願人代理人　　猪　　股　　　清 手続補正書 昭和犯年８月よ２　日 特許庁長官　　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示 昭和５８年特許願第３５６６３号 ２、発明の名称 新規物質アルザマイシン ３、補正をする者 事件との関係　ｑ−、ｙ許出願人 鎮麟麦酒株式会社 ７、補正の対象 明細書の「発明の詳細な説明」の欄および「特許請求の
範囲」の欄 ８、補正の内容 （１１特許請求の範囲を、別紙の通りに補正する。 （２）明細書の下記の個所のｒ　５２３（８８月を、ｒ
　５４３（８８）Ｊと補正する。 （イ）第７頁第１６行 （ロ）第１１頁第３行 （３）明細書第９頁第１行〜第１０頁第４行「アンスラ
サイクリン化合物アルゴマイシン〜判った。」を、下記
の通りに補正する。 化学構造 本発明によるアンスラサイクリン化合物アルボマイシン
は、下記の式＋１１で示される化学構造を有する。 Ｃ０ＯＨ この化学構造は、下記のようにして決定された。 アルボマイシンを４０係蟻酸に溶解し、８５″Ｃで４０
分間加水分解を行うことにより、アグリコン部分と糖部
分とが得られた。アグリコン部分は、薄層クロマトグラ
フィー、紫外部吸収スペクトル、マススペクトルおよび
核磁気共鳴スペクトル等の解析にＬす、Ｗｉｌｅｙ、　
Ｐ、Ｆ、らが報告（Ｊ、　Ａｍ、Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、
、　９９，５４２〜５４９　（１９７７）　）している
ノガラマイシンのアグリコン部分であるノガラロール（
Ｎｏｇａｌａｒｏｌ）であることが判明した。 糖部分は、１）（−ＮＭＲスペクトルのデカップリング
により、ジギノース、デシロニトロースおよび２−デオ
キシフコースを構成糖とするものであると判明した。 アルボマイシンの１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルに於いて、
アグリコンの４．６．７．２′および４′位のシグナル
をセレクテイプ・デカップリングなどにより帰属し、こ
れらのシグナル゛のケミカルシフトを文献値（Ｊ、Ａｍ
、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、９９．．５４２（１９７７
）　）と比較することにより、アルボマイシンはアグリ
コンの４′位および７位にそれぞれ糖鎖Ｒニオ、１：　
ヒＲ２を有していることが判明した。 顯 アルボマイシンを５　’％　Ｐｄ−ＢａＳＯ４にて水素
気流下で接触還元に付すことにより、７位の結合が切れ
て赤色の化合物（イ）と無色の化合物（ロ）とが得られ
る。（イ）および（ロ）の各物質は、各々　Ｃ−ＮＭｆ
ｔスペクトル、’Ｈ−Ｎｌｌ／ＩＲスペクトル、および
マススペクトルを解析することにより、以下の構造を有
することが判明した。 物質（イ）と物質（ロ）との７位における結合はαであ
ることがＩＨ−ＮＭＲスペクトルにより判明しているの
で、アルボマイシンの構造は式（１）のように決定され
た。」 （４）同第１２頁第１１行 「その糖部分の構造が解明できれば」を削除。 （５）明細書の下記の個所に「ＱＯ）分子量（ＳＩＭＳ
）ｍ／ｚ　１６９４　（Ｍ＋Ｈ）ｊを加入する。 （イ）第８頁下から第２行と第１行との間（ロ）第１２
頁第６行、と第７行との間（６）明細（の下記の個所の
１（４）元素分析値〜１．８饅」を、 「（４）元素分析値（＠：ＣＩ（ＯＮ 実験値　　　５６．２　６．９　３５．１　１．８理論
値　　５６．７　６．７　３４．９　１．７　ｊと補正
する。 （イ）第７頁第５〜８行 （ロ）第１Ｏ頁第１２〜１５行 １、下記の理化学的性質を有するアンスラサイクリン化
合物アルボマイシン。 （１）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　：２０７〜２１３℃（分解）（３１比
旋ｉ［：　（ｃｔ）２５＝＋ｎ２’　（ｃｍｏ、ｔ、　
りｏ　。 Ｉホルム：メタノール＝９：１） （実験値）　　　５６．２　６．９　３５．１　１．８
（５）紫外部可視部吸収スペクトル 第１図に示したとおりである。 Ｃｌ４３０ＦＬ　　　　λ　＜９１％）ｍａｘ　　　ｃ
ｍ ２３５　（３６３）、２５８　（１６７）、２９２（６
１）、４７６（１０４）０　、１ＮＨＣＩ　＋ＣＨ３０
Ｈ ２３５（３８７）、２５８（１５９）、２９２（６１）
、４６８（１１０）０　、　ｌＮＮａＯＨ＋ＣＨａＯＨ ２３９（３０２）、２９４　（４１）、５４３（８８）
（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）
第２図に示した通りである。 （力落剤に対する溶解性 クロロホルム−メタノール混液、ジメチルスル７オキシ
ド、ピリジンおよび塩基性水に易溶。 クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、メチルエチル
ケトン、ブタノール、酢酸ブチル、エタノール、アセト
ンおよび酸性水に可溶。 水に難溶。 （８）薄層クロマトグラフィー （メルク社「シリカゲル６０Ｆ　（２５４）Ｊプレート
使用） 展開溶媒　　　　　　　　　　Ｒｆ値 ジクロロホルムメタノール　　　　　　　　　　　０．
２０＝８：１ りＯＯホルム：メタノール＝２９％アンモニア水　０．
２５＝８：１：０．１ クロロホルム：メタノール：Ｉｌ！２　　　　　　　０
．３０＝８：１：０．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　　　　　０．
２６＝７：２：２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重ク
ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。 （ｌＯ）分子量（ＳＩＭＳ） ｒｖ／Ｚ　　１６９４　（Ｍ十Ｈ） ２、適当な培地にストレプトミセス属のアンスラサイタ
リン化合物アルザマイシン生成能を有する菌株を好気的
に培養し、培養物から下記の理化学的性質を有するアン
スラサイクリン化合物アルボマイシンを採取することを
特徴とするアンスラザイクリン化合物アルゴマイシンの
製造法。 ｔｌ）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　：２０７〜２１３℃（分解）（３）比
旋光度　：〔α）”＝＋１１２°（Ｃ＝０．１、クロロ
ホルム：メタノール＝９：１） （４）元素分析値（％）：ＣＨＯＮ （実験値）５６．２　６．９　３５．１　　１．８（５
）望外部可視部吸収スペクトル 第１図に示したとおりである。 ＣＨ３０Ｈλ　（８１％） ｍａＸ　　　　ｃｍ ２３５　（３６３）、２５８（１６７）、２９２（６１
）、４７６（１０４）０、ｌＮＨＣｌ＋ＣＨ３０Ｈ ２３５（３８７）、２５８（１５９）、２９２（６１）
、４６８（１１０）０　、　ｌＮＮａＯＨ＋　ＣＨ３０
Ｈ ２３９（３０２）、２９４（４１）、５４３　（８８）
（６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）
第２図に示した通りである。 （力溶剤に対する溶解性 クロロホルム−メタノール混液、ジメチルスルフオキシ
ド１．ピリジンおよび塩基性水に易溶。 クロロホルム、メタノール、酢酸フチル、エタノール、
アセトンおよび酸性水に可溶。 水に難溶。 （８）薄層クロマトグラフィー （メルク社［シリカゲル６０Ｆ　（２５４）ｊプレート
使用） 展開溶液　　　　　　　　　　　Ｒｆ値クロロホルム：
メタノール　　　　　　　　　　　　０．２０＝８＝１ クロロホルム：メタノール：　　　　　　　　　　　−
０，２５２９係アンモニア水 ＝８：１：０．１ クロロホルム：メタノール：酢酸　　　　　　　０．３
０＝８：１：０．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　　　　　０．
２６＝７　　：　　２　　：　　２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重ク
ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。 （１０１分子量（ＳＩＭＳ） ｍ／ｚ　　１６９４　（Ｍ　＋　Ｈ） 手続補正書 昭和５９年４月８０ 特許庁長官　　　若　杉　和　夫　殿 １、事件の表示 昭和５８年　特　許願第３５６６３号 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 鎮麟麦酒株式会社 Ｚ補止−１旬宕 （１）昭和５８年８月四日付手続補正書第２頁第７行〜
第７頁第４行口３）〜決定された」」を削除して、明ｇ
ｔ書第９頁第１行〜第１０頁第４行の記載を元へ戻す。 （２）明細書第９頁第１行〜第１０頁第４行「アンスラ
サイクリノ化合物アルゴマイン７〜判った。」を、下記
の通りに補正する。 化学（ｉ４造 本発明によるアンスラサイクリ／化合物アルゴマインン
は、下記の式（Ｉ）で示される化合構造この化学構造は
、下記のようにして決定された。 アルゴマイア／を４０％蟻酸に母解し、８５℃で４０分
間加水分解を行うことにより、アグリコン部分と糖部分
とが得られた。アグリコン部分は、薄層クロマトグラフ
ィー、紫外部吸収スペクトル、マススペクトルおよび核
磁気共鳴スペクトル等の解析により、後記の式（Ａ）で
示される化学構造を有するものであることが判明した（
ただし、式中のＲ□およびＲ２は、それぞれ水素な示す
）。 糖部分は、１Ｈ７ＮＭＲスペクトルのデカップリングに
より、ジギノース、デ／７ロニトロースよび２−デオキ
ノフコースを構成糖とするものであると判明した。 アルゴマイア／の　Ｃ−ＮＭＲスペクトルに於いて、ア
グリコ／の４．６．７．２′および４′位のシグナルを
セレクティブ・デカップリングなどにより帰属し、これ
らのシグナルのケミカルジフトをアグリコンの対応する
データと比較することにより、アルボマイシンはアグリ
コンの４′位および７位にそれぞれ糖鎖Ｒ□およびＲ２
を有してＶ≧ることが判明した。 ２ アルボマイシンを５％ｐａ−ＢａＳＯ４にて水素気流下
で接触還元に付すことにより、７位の結合が切れて赤色
の化合物（イ）と無色の化合物（ロ）とが得られる。（
イ）および仲）の各物質は、各々　Ｃ−間スペクトル、
　　”Ｈ−ＮＩＩＩＩＲスペクトル、およびマススペク
トルを解析することにより、以下の構造を有することが
判明した。 Ａ１３＋ （ 物質（イ）と物質−）との７位における結合はαである
ことが１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより判明しているので
、アルゴマイア／の構造は式（Ｉ）のように決足された
。」 （３）明細！を第５頁な、下記の通りに補正する。 行　補正前　　補正後 １１　　４％　　　０．４％ １２　　１０％　　　１．０％ １３４％　　　０．４％ １９　　　　ナイアミン　　　　ナイア７／受託番号変
更届 昭和９年２月ＪＺ日 特許庁長官若杉和夫殿 １、事件の表示 昭和５８年特許願第３５６６３号 ２、発明の名称 新規物質アルボマイシン ３、手続をした者 事件との関係　特許出願人 鎮麟麦酒株式会社 ４、代理人 工業技術院微生物工業技術研究所 ６、旧受託番号 微工研菌寄第６８６５号 ９、添付書類の目録

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ■、下記の理化学的性質を有するアンスラサイクリン化
   合物アルボマイシン。 （１）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　：２０７〜２１３℃（分解）（３）比
   旋光度　：〔α’：ｌ”５＝＋１１２’　（Ｃ＝　０．
   １、クロロホルム：メタノール−９＝１） （４）元素分析値：　Ｃ：　５６．２チ（実験値）Ｈ：
   　　６．９％ ０　：　３５．ＩＬ％ Ｎ：１．８％ （５）紫外部可視部吸収スペクトル 第１図に示したとおシである。 ＣＨ３０ＨλｍａＸ（ＦＪ３：） ２３５　（３６３）、２５８（１６７）、２９２（６１
   ）、４７６（１０４）０　、　ＩＮＨＣｌ　＋ＣＨ３０
   Ｈ ２３５（３８７）、２５８　（１５９）、２９２（６１
   ）、４６８（１１０）０　、　ｌＮＮａＯＨ＋ＣＨ３０
   Ｈ ２３９（３０２）、２９４（４１）、５２３（８８）（
   ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）第
   ２図に示した通シである。 （７）溶剤に対する溶解性 クロロホ代ムーメタノール混液、ジメチルスルフオキシ
   Ｐ１ピリジンおよ研縫性水に易溶。 クロロホルム、メタノール、酢酸エチル、メチルエチル
   ケトン、ブタノール、酢酸メチル、エタノール１、アセ
   トノおよび酸性水に可溶。 水に難溶。 （８）薄層クロマトグラフィー （メルク社［シリカゲル６０ＦＣ２５４１１プレート使
   用）展開だ媒　　　　　　　　　　　Ｒｆ値ジクロロホ
   ルムメタノール　　　　　　　０．２０＝８：１ ＝８　：　１　：　０．１ クロロホルム：メタノール：酢酸０．３０＝８：１：０
   ．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　　０．２６＝
   ７：２：２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重ク
   ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。 ２、適当な培地にストレプトミセス属のアンスラサイク
   リン化合物アルボマイシン生成能を有する菌株を好気的
   に培養し、培養物から下記の理化学的性質を有するアン
   スラサイクリン化合物アルボマイシンを採取することを
   特徴とするアンスラサイクリン化合物アルボマイシンの
   製造法。 （１）色、性状　：橙色粉末 （２）融点　　　＝２０７〜２１３℃（分解）（３）比
   旋光度　：〔α〕”＝＋１１２°（Ｃ＝０．１、りロロ
   ホルム：メタノール＝９：１） （４）元素分析値：　ｃ　：　５６．２チＨ：６．９チ ０　：　３５．１％ Ｎ：１．８チ （５）紫外部可視部吸収スペクトル 第１図に示したとおりである。 ＣＨ３０Ｈλｍａｘ（８１％） グｍ ２３５（３６３）、２５８（１６７）、２９２（６１）
   、４７６（１０４）０　、１　ＮＨＣ１＋　ＣＨ３０Ｈ ２３５（３８７）、２５８（１５９）、２９２（６１）
   、４６８（１１０）０　、　Ｉ　ＮＮａＯＨ＋ＣＨ３０
   Ｈ ２３９（３０２）、２９４（４１）、５２３（８８）（
   ６）赤外線吸収スペクトル（臭化カリウム法で測定）　
   　　第２図に示した通りである。 （７）溶剤に対する溶解性 クロロホルム−メタノール混液、ジメチルスルフオキシ
   ド、ピリジンおよび塩基性水に易溶。 クロロホルム、メタノール、酢酸ブチル、エタノール、
   アセトンおよび酸性水に可溶。 水に難溶。 （８）薄層クロマトグラフィー （メルク社［シリカゲル６０　Ｆ　（２５４）Ｊプレー
   ト使用）展開溶媒　　　　　　　旦ｌ クロロホルム：メタノール　　　　　　０．２０＝８：
   １ クロロホルム：メタノール：　　　　　　０．２５２９
   チアンモニア水 ＝８：ｌ：０．１ クロロホルム：メタノール：酢酸０．３０＝８　：　１
   　：　０．１ クロロホルム：ベンゼン：メタノール　　　　０．２６
   ＝７：２：２ （９）核磁気共鳴スペクトル（４００メガヘルツ、重ク
   ロロホルム−重メタノール中） 第３図に示した通りである。