JPS59122489A - リボフラビンの精製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は粗製リボフラビンを駆酸溶液で、有利には硝酸
溶液で酸化処理することにより粗製リボフラビン（ビタ
ミン８２）を蔦純度化する改良方法に関する。

リボフラビン（１）は公知であり〔例えばセプレル（Ｗ
、Ｈ，５ｅｂｒｅ１１　）及びハリス（Ｒ，Ｓ、　Ｈａ
ｒｒｉｓ　）著“Ｔｈｅ　Ｖｉｔａｍｉｎｓ　；　Ｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ、　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｅ。

Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ＋　Ｍｅｔｈｏｄｓ”、第２版、第
Ｖ巻（１９７２年）アガデミツク・プレス社、第２２頁
参照〕、通常Ｎ−（Ｄ）−リビチルー２−アリールアゾ
−４，５−ジメチルアニリン（Ｉｔ）とバルビッル酸（
ＩＩ＋）との縮合により合成される： ＩＩ　　　　　　Ｉ［ｌ　　　　　　ＩＲｉｂ＝Ｄ−リ
ピチル Ａｒ　　”＝アリール例えはフェニル この場合、式Ｉの化合物約９２〜９６重量％の他になお
種々の不純物、就中例えばバルビッル酸、シバルビツル
酸、ルミフラビン及びルミクロムを含有する粗生成物が
得られる。

別のＮ　−（Ｄ）−リビチルー４，５−ジメチルーアニ
リン誘導体とバルビッル酸誘導体との縮合によってリボ
フラビンを得る方法も既に開示された。

粗製品から結晶工程によって純粋なりボフラビンを得る
には極めて高い費用がかかるので、粗製リボフラビンを
米国特許第２３２４８００号明細書記載に基づき水／酸
性媒体中で酸化処理にかげ、次いで場合により沈殿物を
分離しかつ残りの浴液を大量の水で希釈する方法が採用
され、この際リボフラビンは黄色の針状結晶の形で生成
し、これはなおｆ別及び洗浄するだけで十分である。

前記米国特許明細書畳によれは、粗製リボフラビンを水
２容重部以下で希釈した鉱酸例えは塩酸、ｆ！Ｌ酸又は
オルト−燐酸中で溶解し、不純物を酸化剤例えば塩系、
過酸化水素又は塩素酸を有する鉱ｍｌ液で処理すること
により酸化し、沈殿した不溶性生成物をｔ４別しかつ該
反応浴液を過剰の水に注入してリボフラビンを析出させ
る。同時に酸性及び酸化性試薬として水性側酸を使用す
ることも前記米国特許明細書に既に開示された。この公
知方法の欠点は反応時間が比較的長いこと並びに得られ
るリボフラビン沈殿物の純度が不十分であることにある
。このリボフラビンの精製は例えば４６重量係の硝酸を
用いて５０〜６０℃で３時間を要する。引続き、析出し
た不純物を１別しかつ清准な溶液を７５℃の熱水に入れ
る、その際無定形沈殿物が得られる。従って、純粋な結
晶物質を得るには水性懸濁液を９０℃でなお数時間償拝
することが必要である。この場合なお装入リボフラビン
の約１５％が失われることを無視したとしても、この操
作法は時間かかかりかつ煩雑である。引用した米国特許
明細書の別の実施形、例えば塩酸及び過酸水素又は塩累
を使用することも同様な欠点を有する。

更に、！開明４３−１０１５１号公報から、前記一般式
Ｈと式■の反応によるリボフラビンの製法が公知であり
、該方法は得られた粗製リボフラビンを希塩酸中に陪解
し、過酸化水素溶液を添加し、引続き加熱し、ｆ別しか
つ熱水中に注入することにより精製することより成る。

この方法の欠点は、得られたリボフラビンに対し精製し
たにもかかわらすなお不快な臭いが付着しており、この
臭いが該ビタミンを使用する際、特にｇの栄養素として
使用する際に障害となることにある。

従って、不発明の課題は、粗製リボフラビンを精製する
ための暇化法を改良することにより前記欠点を排除する
ことであった。

不発明の対象は、Ｎ　−ＣＤ）　−’）ビナルー２−ア
リールアゾ−４，５−ジメチル−アニリンとバルビッル
酸又は別のＮ−（Ｄ）−！Ｊビチルー４，５−ジメチル
ーアニリン誘導体とバルビッル酸誘導体の縮合により得
られた粗製リボフラビンを水で希釈した硫酸又は燐酸中
に溶解しかつ過酸化水素を有する溶液で処理するか又は
間温で希硝酸中に溶解することにより不純物を酸化しか
つ引続き水で析出させて純粋なりボフラビンを収得する
ことより成る粗製リボフラビンを精製する方法であり、
該方法はリボフラビン及び酸化剤の鉱酸浴液又は２０〜
７０　Ｍ　ｋ　％の硝酸中のりボフラビンの溶液を、緑
色から黄〜オレンジ色への溶液の明らかな変色が観察さ
れる温度に可及的に急速に加熱し、該温度で浴液を１〜
１００秒間、爵に１〜５０秒間保持し、次いで水を冷加
することにより酸化反応を停止させることを特徴とする
。

意想外にも本発明方法は、２０〜７０重量％の水性硝酸
中の粗製リボフラビンの浴液を緑色から黄〜オレンジ色
への浴液の明らかな変色が観察される温度に可及的に急
速に加熱することにより特に有利に実施される。

更に、本発明方法では、反応混合物を直ちに又は冷水を
添加することにより酸化反応を予め停止させた後、９０
〜１００℃の熱水中に導入しかつこの際に形成される懸
濁液を上記温度でなお約１０〜３０分間保持した場合最
良の結果か達成されることが判明した。

本発明方法は、不純物の酸化性分解は狭く制限された温
度範囲内で数秒間以内で行なわれ、しがも公知方法にお
いて生じるような、敏感なリボフラビン自体への作用は
ほとんど生じないという意想外の観察に基づく。

本発明方法は同時に酸性及び酸化性試薬として水性硝酸
を使用する場合に特に有利に実施することができる。硝
酸を用いる方法が工業的に簡単に実施することかできる
ことは別にしても、それにより幾分か良好な収率及び幾
分か純粋なリボフラビンが達成される。驚異的にも、こ
の場合には純粋なかつ完全に無臭の生成物が得られる、
従って最終生成物のメタノールでの洗浄を省くことがで
きる。この洗浄は例えは水性塩酸及びＣ４又はＨ２Ｏ２
を使用する際には回避不能である。

従って、米国特許第２３２４８００号明細書記載に基づ
き行に、塩酸及びＣｌ３又は塩酸を、塩酸との交換作用
でＣｌ２を生じる別の酸化性試薬と一緒に使用するのが
推奨される。

以下には、本発明方向をその有利な実施態様につき、す
なわち水性硝酸を用いる操作法につき説明する。七の他
の駆彪及び酸化剤の種類及び濃度は、前記米国特許明細
書記載の条件に相応する。

酸化温度、すなわち激しい発泡を伴う変色の温度は、あ
る程度酸及び酸化剤の種類及び濃度に左右される。該温
度は酸性及び酸性試薬として水性硝酸を使用する際には
、硝酸濃度の１つの関数となる。硝酸濃度か低くなる程
に、酸化塩度は高くなりかつ該濃度が筒くなれは、温度
は低くなる。

この関係を以下の表で説明する、但しこの場合詳細には
粗製リボフラビンのその都度の由来に基づいて偏差が生
じることもある。

硝酸嬢度重量係　　　変色温度　Ｃ ２０９８ ０９４ ４０８７ ４６８４ ５０７８ ６２，５７２ 加熱温度が高くなりすきないように２０Ｍ童％より低い
濃度は一般に選択されずかつ７０厘量％よりも尚い濃度
も一般には好ずしくない、それというのも一部分リボフ
ラビン分子が分解されるからである。

密閉した反応容器内で加圧下に操作する際に限って、２
０Ｍｔ％より低い硝酸濃度及び１００℃よりも商い温度
を適用することができる。

水性硝酸中の硝酸の叢ないしはりポフラビンの濃度は広
い限界内で変動することができる。もちろん、できるだ
け少量のＨＮＯ３で操作するのが最も経剤的である。少
なすぎるＨＮＯ３を使用すると、溶液はもはや形成され
ず懸濁液が形成される。リボフラビンＩＮ童部当り水性
硝酸約１．５〜３重量部で操作するのが有利である。

更に、水性ＨＮＯ３の量はその童によって決まる。

該濃度がＪＯＭ量％未満である場合には、リボフラビン
に対する俗解能力は著しく低下する。

粗製リボフラビンは３０〜６５Ｍ量％の濃度の硝酸中で
最良の溶解性を有する。この場合、粗製リボフラビンｌ
　ｋｇを室温で俗解させるためには酸約０．９〜２ｔか
心安である。リボフラビンを高温で俗解する際には相Ｌ
−６シて少量の敵か心安である、しかしながら変色温度
よりも約２０℃低くても既に完全に溶液で存在するはず
である。

変色温度で有害な随伴物質の自発的酸化性分解が明らか
に行なわれ、しかもこの場合リボフラビンは殆んど作用
を受けない。この温度が達成されると、酸化がりボフラ
ビンに波及しないように、反応をできるだけ急速に停止
させるべきである。

反応の停止は溶液を水で希釈することにより急速に冷却
しかつ／又は溶液の酸化ポテンシャルを低下させること
により行なう。このためには反応溶液にできるだけ急速
に溶液の約２５〜．４０Ｍ電チの水を加える。

停止した反応容液のそれ以降の後処理は、該浴液を大過
剰の煮沸熱水中に注入するのが有利である。この際に、
リボフラビンはまず無定形もしくは無定形と思える形で
晶出するが、しかし約１０〜３０分間経過すると結晶ｗ
Ｊ質に変態する。

煮沸水の量は有利には硝酸浴′ｅ、１を当り約４〜１０
１である。

結晶が形成されると（これは明らかに域別される）、該
混合物を冷却し、次いで結晶物質を分離しかつ水で洗浄
する。

しかしながら、本発明の反応は原理的には、反応溶液を
緑色から黄〜オレンジ色への変色後直ちに９０〜１００
℃の大過剰の水に装入することにより停止させる形式で
実施することができる。

特に有利に、本発明のＭＭ法は連続的に実施することが
できる。連続的操作法では、粗製リボフラビンの酸化剤
を加えた鉱酸溶液ないしは硝酸溶液を高速度で、約１〜
５０秒の滞留時間に相当する長さで変色温度に保持した
加熱した細い管を導び（のが特に有利である。その直後
、反応混合物を煮沸水に導入する。該道程が長すぎる場
合には、既に管内で冷水を調合することにより酸化を停
止させることもできる。

変色温度は一定のりボフラビン品質に関しかつ同一の酸
化浴液又は一定の硝ｔＲ濃度において従来の観察によれ
ば一足である、従って該温度を前実験で確かめれは十分
である。次いで、実地の操作において該温度又は該温度
付近にある規定に基づく温度間隔を保持するだけでよい
、しかもそれ以上監視及び反応制両を行なう必要はない
。

本発明方法によれば、完全に無臭の卵黄色粉末の形でか
つ粗製生成物のリボフラビン含量に対して理論値の９４
〜９８％の収率で医薬品質においてＮ度１００％のりボ
フラビンが得られる。

実施例１ ６２．５％の硝酸５０ｔｎｌ及び水４０７から成る混合
物中で６０℃でリボフラビン９２．７％の含有率を有す
るリボフラビン４０２を溶解しかつ該溶液を急速に９０
〜９２℃に加熱した。反応浴液か発泡しかつ緑色から黄
〜オレンジ色に変色した後、ぽちに冷水４〇−を加えた
。引続き、該浴液を沸騰熱水８００コ中に装入した。こ
の温度で２０分間以内で結晶に変態した。３０℃にｑ却
した俊、吸引濾過しかつ残笛物を水総計２２５　ｒｎＩ
！で洗浄した。乾珠佼、リボフラビン含有率１００％を
有する黄螢光色の結晶３６．２　ｆが得られた。この童
は粗製物のりボフラビン含有率に対して理論１直の９７
．８％に相当する。

実施例２ １２０℃の加熱浴を用いて長さ３００１１に亘って加熱
した、Ｕ字形にわん曲したガラス管（内径４　ｍｎ　）
を通して、６０℃の４０重量％の硝酸９．５１ｎｌ！中
の粗製リボフラビン（純度９２，７％）３．４９Ｆの溶
液を１分間当り１１−の童で圧送した。緑色から黄〜オ
レンジ色への変色によって認められる酸化反応が行なわ
れる加熱区間内での溶液の滞留時間は２０．６秒間であ
った。加熱区間の直後で、溶液にＴ字管を介して水４−
／分を加え、次いで混合容器に供給し、その際同時に煮
沸水（９５〜９８℃）７０ｒｎｌ／分を装入した。この
際に形成された懸濁液を連続的に排出させる前に、該容
器内に攪拌下に９５〜９８℃で１５分間の滞留時間放置
した。

３０℃に冷却し、ｒ別し、水で洗浄しがっ乾珠した後、
純度１００％のりボフラビンが１時間当り１８５．３９
得られた。この童は粗製物のりボフラピン含有率に対し
て理論値の９５．４％の収率に相当する。

特許出願人　パスフ　ァクチェンゲゼルシャフト代理人
弁理士１）代盗゛治

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. Ｎ　−（Ｄ）−リビチルー２−アリールアゾ−４゜５−
   ジメチル−アニリンとバルビッル酸又は別のＮ　−（Ｄ
   ）−リビチルー４．５−ジメチルーアニリン誘導体とバ
   ルビッル酸誘導体の縮合により得られた粗製リボフラビ
   ンを水で希釈した硫酸又は燐酸中に溶解しかつ過酸化水
   素を有する溶液で処理するか又は高温で希硝酸中に溶解
   することにより不純物を酸化しかつ引続き水で析出させ
   て純粋なリボフラビンを収得することより成る粗製リボ
   フラビンを精製する方法において、リボフラビン及び酸
   化剤の鉱酸溶液又は２０〜７０重量−の硝酸中のりボフ
   ラビンの溶液を、緑色から黄〜オレンジ色への溶液の明
   らかな変色が観察される温度に可及的に急速に加熱し、
   該温度で溶液を１〜１００秒間、特に１〜５０秒間保持
   し、次いで水を添加することにより酸化反応を停止させ
   ることを特徴とするりボフラビンの精製法。