JPS5897656A - 診断試薬用ラテツクス - Google Patents
診断試薬用ラテツクスInfo
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- JPS5897656A JPS5897656A JP19735581A JP19735581A JPS5897656A JP S5897656 A JPS5897656 A JP S5897656A JP 19735581 A JP19735581 A JP 19735581A JP 19735581 A JP19735581 A JP 19735581A JP S5897656 A JPS5897656 A JP S5897656A
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- copolymer particles
- antigen
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
不発＃４は主として免疫血清学的診断に用いて叶適な診
断試薬用ラテックスに関する。
断試薬用ラテックスに関する。
従来、ラテックス粒子を担体とし、抗原又は抗体を感作
させ、血清中の抗体もしくは抗原と特異的に起る抗原、
抗体反応によりラテックス粒子の凝集反応、沈降反応、
溶甥反応、補体結合反応を生じさせ、その結果により各
種疾患の診断を行うことが免疫血清学的診断法として臨
床検査の分針において行なわれており、例えばリフマチ
因子、ＨＢｓ抗原、ＨＢｓ抗体、抗ストレプトリジン−
０（ＡＳＯ）、Ｃ−反応性蛋白質（ＣＲＰ ）、α−７
エトプロテイン、癌胎児性抗原（ＣＲ＾）等の検査にも
診断試薬用ラテックスが用いられている。
させ、血清中の抗体もしくは抗原と特異的に起る抗原、
抗体反応によりラテックス粒子の凝集反応、沈降反応、
溶甥反応、補体結合反応を生じさせ、その結果により各
種疾患の診断を行うことが免疫血清学的診断法として臨
床検査の分針において行なわれており、例えばリフマチ
因子、ＨＢｓ抗原、ＨＢｓ抗体、抗ストレプトリジン−
０（ＡＳＯ）、Ｃ−反応性蛋白質（ＣＲＰ ）、α−７
エトプロテイン、癌胎児性抗原（ＣＲ＾）等の検査にも
診断試薬用ラテックスが用いられている。
かかる診断試薬用ラテックスとして、０．０６μ調〜ｌ
μ膚の粒径のポリスチレン粒子が分散されたラテックス
が一般的でもり、通常は乳化重合によって製造されてい
る。
μ膚の粒径のポリスチレン粒子が分散されたラテックス
が一般的でもり、通常は乳化重合によって製造されてい
る。
この乳化重合においては、／ニオン系、アニオン系等の
乳化剤が使用されるが、乳化剤のボリスチレン粒子ｉｋ
面への吸脱着平衡が成立していることが安定なラテック
スの形成に不可欠である。
乳化剤が使用されるが、乳化剤のボリスチレン粒子ｉｋ
面への吸脱着平衡が成立していることが安定なラテック
スの形成に不可欠である。
しかしながら遊離の乳化剤は前述の特異的な抗原、抗体
反応によるポリスチレン粒子の凝集を阻害したり、場合
によっては非特異的な反応に関与したりして誤まった診
断結果を招くことになる。このためラテックス中のポリ
スチレン粒子表面に抗原、抗体等を感作して試薬化する
際には遠心洗浄するか透析で乳化剤を除去することが必
要である。しかし遊離の乳化剤を除去すればラテックス
の安定性は極端に悪くなり、自己凝１に奮起して診断試
薬用ラテックスとして使用に適さないものとなってしま
うおそれが６つ得ることを目的とするものであり、その
要旨とするところは、フェニル基を有する重合性単量体
と陰イオン性の重合性単量体との共重合体粒子のＷＩＡ
ＲＪ液であって、１ａｌｌｌｓ−液における前記共重合
体粒子の表向荷電密度が繍イオンの解１ｌＩａ度で ３
．０ に １０−７ モｊし／−〜 ８０．０ に
１０−７モＩし／−の範囲内に存することを特徴とする
、診断試薬用ラテックスに存する。
反応によるポリスチレン粒子の凝集を阻害したり、場合
によっては非特異的な反応に関与したりして誤まった診
断結果を招くことになる。このためラテックス中のポリ
スチレン粒子表面に抗原、抗体等を感作して試薬化する
際には遠心洗浄するか透析で乳化剤を除去することが必
要である。しかし遊離の乳化剤を除去すればラテックス
の安定性は極端に悪くなり、自己凝１に奮起して診断試
薬用ラテックスとして使用に適さないものとなってしま
うおそれが６つ得ることを目的とするものであり、その
要旨とするところは、フェニル基を有する重合性単量体
と陰イオン性の重合性単量体との共重合体粒子のＷＩＡ
ＲＪ液であって、１ａｌｌｌｓ−液における前記共重合
体粒子の表向荷電密度が繍イオンの解１ｌＩａ度で ３
．０ に １０−７ モｊし／−〜 ８０．０ に
１０−７モＩし／−の範囲内に存することを特徴とする
、診断試薬用ラテックスに存する。
次に本発明診断試薬用ラテックスにりいて更に詳細に説
明する。
明する。
本発明診断試薬用ラテックスは、フェニルａｔ有する重
合性単量体と、鴎イオン性の重合性単量体との共重合体
粒子のｉ１編液よりなる。
合性単量体と、鴎イオン性の重合性単量体との共重合体
粒子のｉ１編液よりなる。
フェニル基を有する重合性単量体は、共重合成分となる
こと罠よって担体の主構成要素となる。
こと罠よって担体の主構成要素となる。
フェニル基を有する重合性単量体としては、例えばスチ
レン、ジビニルベンゼン、エチルスチレン、α−メチル
スチレン等が存ｔ ｂ ｍ ’工二ル基を有する重合性
単量体のみを重合成分とする重合体においては、５ａｉ
ｉ液中に乳化剤が存在しかしながら乳化剤が存在すると
、これに抗原もしくは抗体を感作させて試薬化した場合
Ｋ。
レン、ジビニルベンゼン、エチルスチレン、α−メチル
スチレン等が存ｔ ｂ ｍ ’工二ル基を有する重合性
単量体のみを重合成分とする重合体においては、５ａｉ
ｉ液中に乳化剤が存在しかしながら乳化剤が存在すると
、これに抗原もしくは抗体を感作させて試薬化した場合
Ｋ。
ＩＰ＃興的な抗原、抗体反応によるラテックスの凝集を
阻害したり、場合によっては非特異的な反応に関与する
おそれがあるものとなるので、乳化剤を含まないものと
されるのが好ましい。
阻害したり、場合によっては非特異的な反応に関与する
おそれがあるものとなるので、乳化剤を含まないものと
されるのが好ましい。
てこで本発明においては、乳化力を付与しうる重合性単
量体が、前記フェニル基を有する単量体との共重合成分
とされることＫよって共重合体粒子に自己乳化力を付与
させている。共重合化力を付与しうる重合性単量体とし
ては、陰イオン性の重合性単量体と非イオン性の重合性
単量体が存しうるが、非イオン性の重合性単量体ＶｃＪ
？いてＩ′１麦面荷電密度が低い共重合体粒子にしかな
らず、懸濁液中においてｐＨ（直やイオンｆ１度の影響
を強く受けるので、診断試薬用ラテックスとして適当な
ものとなり得ない。このため共重合成分としては陰イオ
ン性の重合性単量体が使用される。
量体が、前記フェニル基を有する単量体との共重合成分
とされることＫよって共重合体粒子に自己乳化力を付与
させている。共重合化力を付与しうる重合性単量体とし
ては、陰イオン性の重合性単量体と非イオン性の重合性
単量体が存しうるが、非イオン性の重合性単量体ＶｃＪ
？いてＩ′１麦面荷電密度が低い共重合体粒子にしかな
らず、懸濁液中においてｐＨ（直やイオンｆ１度の影響
を強く受けるので、診断試薬用ラテックスとして適当な
ものとなり得ない。このため共重合成分としては陰イオ
ン性の重合性単量体が使用される。
直イオン性の重合性単量体としては１例えばスチレンス
ルホンＩＮ！［、ジビニルベンゼンスルホン酸塩、エチ
ルスチレンスルホン酸塩、α−メチルスチレンスル水ン
峻塩、メタアクリル酸等が存する。
ルホンＩＮ！［、ジビニルベンゼンスルホン酸塩、エチ
ルスチレンスルホン酸塩、α−メチルスチレンスル水ン
峻塩、メタアクリル酸等が存する。
上記の場合の塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、
リチウム塩、アンモニウム塩噂が存する。
リチウム塩、アンモニウム塩噂が存する。
共重合体粒子は、フェニル基を有する重合性単量体の共
重合成分量１００重量部に対して、陰イオン性の重合性
単量体の共重合成分量が０．１〜７０重量部とされるの
が好適でらり、最適には１〜５０１を部である。
重合成分量１００重量部に対して、陰イオン性の重合性
単量体の共重合成分量が０．１〜７０重量部とされるの
が好適でらり、最適には１〜５０１を部である。
ＳＳ液の媒体どしては水が使用される。零以外に、前記
共重合体粒子を懸濁させるに適した他の液体が好ましく
は水と共に使用されてもよい。
共重合体粒子を懸濁させるに適した他の液体が好ましく
は水と共に使用されてもよい。
しかしながら他の液体として乳化剤は該当しない。
前記共重合体粒子に＃′ｉ表面荷電が付与されている。
か−る表面荷１１１は共重合成分である陰イオン性の重
合性単量体に基づくものと１重合開始削の切片の隘イオ
ンに基づくものからなる０重仝 合間始剤切片の陰イオンに基づくものとは、鍔えば過硫
酸カリウム等の過硫酸塩を用い九場合は、切片である硫
酸根（−５０，”−）が共重合体粒子表面に存在し、こ
の硫酸機は徐々に加水分解を受けて次の様に変化する。
合性単量体に基づくものと１重合開始削の切片の隘イオ
ンに基づくものからなる０重仝 合間始剤切片の陰イオンに基づくものとは、鍔えば過硫
酸カリウム等の過硫酸塩を用い九場合は、切片である硫
酸根（−５０，”−）が共重合体粒子表面に存在し、こ
の硫酸機は徐々に加水分解を受けて次の様に変化する。
−５０，−１ｖ→−ＯＨ＋ ＨＯ５Ｏ８−そしてｌ！に
酸素が存在する条件下で放置すると、−Ｓはカルボキシ
ル基（−ＣＯＯＨ） Ｋ迄酸化される。か＼る硫酸根や
力Ｉレボキシル基の陰イオンが表面荷電の付与に働いて
いる。
酸素が存在する条件下で放置すると、−Ｓはカルボキシ
ル基（−ＣＯＯＨ） Ｋ迄酸化される。か＼る硫酸根や
力Ｉレボキシル基の陰イオンが表面荷電の付与に働いて
いる。
ｌｋ面荷電の測定は、水酸化ナトリウムを用いた電気伝
導度滴定による水酸化ナトリウムの消費源よ＃）求める
ことができる。
導度滴定による水酸化ナトリウムの消費源よ＃）求める
ことができる。
ところで診断試薬用ラテックスとして＃′ｉ、＊面荷電
＠度が一定の範囲内圧存することが必要となる。共重合
体粒子に抗原もしくは抗体を感作して診断試薬を調整す
る場合、抗原もしくは抗体が共重合体粒子の表面全体を
覆いつくしてしまうこと＃−ｉ喜夷上不可能である０通
常、抗原もし−くけ抗体を共重合体粒子に感作させて診
断試薬をＳｔ＊する場合、共重合体粒子の表面積の１０
％前後が感作されて覆われているＫすぎない。
＠度が一定の範囲内圧存することが必要となる。共重合
体粒子に抗原もしくは抗体を感作して診断試薬を調整す
る場合、抗原もしくは抗体が共重合体粒子の表面全体を
覆いつくしてしまうこと＃−ｉ喜夷上不可能である０通
常、抗原もし−くけ抗体を共重合体粒子に感作させて診
断試薬をＳｔ＊する場合、共重合体粒子の表面積の１０
％前後が感作されて覆われているＫすぎない。
残りの部分は抗原もしくは抗体が感作されず、共重合体
粒子のＩｋＩｉｉがそのｉ−の状態で存する。
粒子のＩｋＩｉｉがそのｉ−の状態で存する。
そして共重合体粒子の表面荷電密度が高すぎると、共重
合体粒子間の陰イオンと陰イオンの電気的反撥力が強く
なり、ラテックスは自己凝集を起さず安定ではあるが、
抗原、抗体反応による凝集も妨げられるので診断試薬用
としての実用性は損なわれる。逆に表面荷電密度が低す
ぎると、共重合体粒子自体の有する乳化力が損なわれ、
ａｍ液中で安定な分散が得られず、自己凝集を起こし、
診断試薬用としての貞用性が一様に損なわれる。
合体粒子間の陰イオンと陰イオンの電気的反撥力が強く
なり、ラテックスは自己凝集を起さず安定ではあるが、
抗原、抗体反応による凝集も妨げられるので診断試薬用
としての実用性は損なわれる。逆に表面荷電密度が低す
ぎると、共重合体粒子自体の有する乳化力が損なわれ、
ａｍ液中で安定な分散が得られず、自己凝集を起こし、
診断試薬用としての貞用性が一様に損なわれる。
この点から、前記共重合体粒子の表面荷電密度Ｖｉｌｉ
ｉｌｌ！［Ｋおける陰イオンの解離濃度でＬＯに１ １ ０ モに／ｄ 〜ｇ （Ｌ Ｏ”’ Ｘ
１ ０−’モル／ｇｌ 〕ｌｉ ［５内に存するものと
される。そして表面荷電密＆が３．０にｌＯ七ルアｇｌ
よシも小さくなると、抗原もしくは抗体を感作して調整
した診断試薬においては、共重合体粒子の自己凝集を避
は得ない。
ｉｌｌ！［Ｋおける陰イオンの解離濃度でＬＯに１ １ ０ モに／ｄ 〜ｇ （Ｌ Ｏ”’ Ｘ
１ ０−’モル／ｇｌ 〕ｌｉ ［５内に存するものと
される。そして表面荷電密＆が３．０にｌＯ七ルアｇｌ
よシも小さくなると、抗原もしくは抗体を感作して調整
した診断試薬においては、共重合体粒子の自己凝集を避
は得ない。
また表面荷電密度が８０．０に１０ モル／ｄよりも大
きくなると、抗原もしくは抗体を感作して調整した診断
試薬においては共重合体粒子間の反撥力が強くなシすぎ
て全く凝集しないか、きわめて緩慢にしか凝集しないも
のとなり、凝集反応を利用した診断試薬として適したも
のとな９１Ｉ＋ない。
きくなると、抗原もしくは抗体を感作して調整した診断
試薬においては共重合体粒子間の反撥力が強くなシすぎ
て全く凝集しないか、きわめて緩慢にしか凝集しないも
のとなり、凝集反応を利用した診断試薬として適したも
のとな９１Ｉ＋ない。
又、前記共重合体粒子の粒径は、０．０７μ肩〜２５０
μ肩の範囲内に存するものとされるのが好適である。共
重合体粒子に抗原もしくは抗体が感作されて診断試薬が
得られるが、検体中の抗体もしくは抗原と反応して凝集
反応を生ずる場合共重合体粒子が数個乃至数十個くっつ
いて離れないものとなる。診断試薬として使用される場
合、抗原、抗体反応に伴なう凝集反応にガラス板上で肉
眼判定する場合及び、光学的に散乱光の変化でとらえた
り、透過光の強弱変化でとらえる光学的比濁分析による
場合等がある。
μ肩の範囲内に存するものとされるのが好適である。共
重合体粒子に抗原もしくは抗体が感作されて診断試薬が
得られるが、検体中の抗体もしくは抗原と反応して凝集
反応を生ずる場合共重合体粒子が数個乃至数十個くっつ
いて離れないものとなる。診断試薬として使用される場
合、抗原、抗体反応に伴なう凝集反応にガラス板上で肉
眼判定する場合及び、光学的に散乱光の変化でとらえた
り、透過光の強弱変化でとらえる光学的比濁分析による
場合等がある。
肉眼判定の場合１人聞の限の分解能＃ｉ５０μ肩楊度が
限度であり、これに対し上記粒径は共重合体粒子が数十
個凝集した場合の判定に適当な粒径範囲である。父上記
粒径は散乱光や透過光を利用する光学的比濁分析におい
て、数個の共重合体粒子が凝集した場合の判定に適当な
粒径範囲である。
限度であり、これに対し上記粒径は共重合体粒子が数十
個凝集した場合の判定に適当な粒径範囲である。父上記
粒径は散乱光や透過光を利用する光学的比濁分析におい
て、数個の共重合体粒子が凝集した場合の判定に適当な
粒径範囲である。
か＼る粒径範囲にある場合１例えば血液中のＨＢｓ抗原
分子を検出するような場合、肉眼判定テｒ１１０ ｒｓ
ｇｌｍｌ 〜１ Ｇ ０ ｎｇ／−のＨＢｓ［ｊｌの検
出が可能となり、又光学的比濁分析による場合Ｆｉ０．
１ ｍｇｌｗｌ 〜１ ｍｇ／−のＨＢｓ抗原の検出が
可能で６り、＃新試薬としての貞用性を有するものとな
る。
分子を検出するような場合、肉眼判定テｒ１１０ ｒｓ
ｇｌｍｌ 〜１ Ｇ ０ ｎｇ／−のＨＢｓ［ｊｌの検
出が可能となり、又光学的比濁分析による場合Ｆｉ０．
１ ｍｇｌｗｌ 〜１ ｍｇ／−のＨＢｓ抗原の検出が
可能で６り、＃新試薬としての貞用性を有するものとな
る。
診断試薬用ラテックスを得るには、例えば水が仕込まれ
た反応容器内Ｋ、フェニル基を有する重合性単量体、陰
イオン性の重合性単量体、菖合開始剤等を加えて６ｇＨ
−ｘｏｏＤｉｉ度で６時開〜５０時間程度加熱すること
によシ１粒径、が０．０７μｍ１〜１５０μ厘の範囲内
にあり、粒径のばらつきが変動体数（粒径のｌＩ卒備差
／粒便）で表わして００５以下である粒径が非常によく
彌つ死重分散ラテックスを得ることができる。
た反応容器内Ｋ、フェニル基を有する重合性単量体、陰
イオン性の重合性単量体、菖合開始剤等を加えて６ｇＨ
−ｘｏｏＤｉｉ度で６時開〜５０時間程度加熱すること
によシ１粒径、が０．０７μｍ１〜１５０μ厘の範囲内
にあり、粒径のばらつきが変動体数（粒径のｌＩ卒備差
／粒便）で表わして００５以下である粒径が非常によく
彌つ死重分散ラテックスを得ることができる。
本発明診断試薬用ラテックスにおいては、懸濁液中に乳
化剤が存在しなくとも、共重合体粒子が安定に分散した
ものとなる。そして共重合体粒＃Ｋｉ！抗原もしくは抗
体が感作されて診断試薬とされるが、臨床検査における
免疫血清学的診断に供された際に診断の対象となる抗原
又は抗体に対して鋭敏な凝集反応を示し感度がすぐれた
ものとなる。
化剤が存在しなくとも、共重合体粒子が安定に分散した
ものとなる。そして共重合体粒＃Ｋｉ！抗原もしくは抗
体が感作されて診断試薬とされるが、臨床検査における
免疫血清学的診断に供された際に診断の対象となる抗原
又は抗体に対して鋭敏な凝集反応を示し感度がすぐれた
ものとなる。
以下本発明診断試薬用ラテックスの９Ｆ、施例について
説明する。
説明する。
貞施１４Ｉｌ
（１−１）診断試薬用ラテックスの作成反応容器内圧水
４８０−を仕込み、これにスチレン単量体４３ｔを投与
し、攪拌しつつ窒素ガスで容器内を置換し、６０℃迄加
熱し友後メタアクリル酸単量体を添加し、ただちに７０
′ｃに昇温させ２重合開始剤として過硫酸カリタムを加
えた０次いでｒＯＴ３に２４時間保持した後、残存単量
体がないことを確諷した上で酸素共存下で７００に保持
したま１更に２４時間加熱を続け、過硫酸カリクム切片
の硫酸根の加水分鴫を充分に行なった。これＫよシスチ
レンーメタアクリル綾共重合体粒子の懸濁液が得られた
・次いでこれを一過し、透過型電子原黴鏡による観察を
行なり九ところ、前記共重合体粒子の平均粒径は０．２
８μ騨であり、変動係数は０．０２６であった。
４８０−を仕込み、これにスチレン単量体４３ｔを投与
し、攪拌しつつ窒素ガスで容器内を置換し、６０℃迄加
熱し友後メタアクリル酸単量体を添加し、ただちに７０
′ｃに昇温させ２重合開始剤として過硫酸カリタムを加
えた０次いでｒＯＴ３に２４時間保持した後、残存単量
体がないことを確諷した上で酸素共存下で７００に保持
したま１更に２４時間加熱を続け、過硫酸カリクム切片
の硫酸根の加水分鴫を充分に行なった。これＫよシスチ
レンーメタアクリル綾共重合体粒子の懸濁液が得られた
・次いでこれを一過し、透過型電子原黴鏡による観察を
行なり九ところ、前記共重合体粒子の平均粒径は０．２
８μ騨であり、変動係数は０．０２６であった。
次に塩酸を加え、９Ｈ値を一旦′Ｌ０１ｔ、下けてから
イオン交換水で２週間透析を行な′）友、透析外液の伝
導度がＬＯμΩ／ａｍ以丁である仁とを確１した上で、
電気伝導度滴定を行ない、その変曲点から共重合体粒子
の表面荷電密度を欄定した。懸濁液の濃度と粒径から単
位ｍ積当りの表面荷電密度に換算すると、３８．２にｌ
Ｏ体層であった。このうち硫酸根によるものは０．７
に１０ モル／−であり、カルボキシル基によるものは
３７．５ ｍ １０ モル／−であつ九。
イオン交換水で２週間透析を行な′）友、透析外液の伝
導度がＬＯμΩ／ａｍ以丁である仁とを確１した上で、
電気伝導度滴定を行ない、その変曲点から共重合体粒子
の表面荷電密度を欄定した。懸濁液の濃度と粒径から単
位ｍ積当りの表面荷電密度に換算すると、３８．２にｌ
Ｏ体層であった。このうち硫酸根によるものは０．７
に１０ モル／−であり、カルボキシル基によるものは
３７．５ ｍ １０ モル／−であつ九。
（１−２）診断試薬の調整
ＨＢｓ抗原を、フロイント完全アジュパンＦの中に分散
させたものを３週問おきに３回モルモットの皮下に注射
し、３回目の注射終了後、３週間後に心臓より採血した
。
させたものを３週問おきに３回モルモットの皮下に注射
し、３回目の注射終了後、３週間後に心臓より採血した
。
次にセファロース４８ＫＨＢｓ抗原を固定したカラムを
用いたアフィニティークロマトグラフィーにより精製し
た。この際上記の全血から血清を採取し、血清をＰ Ｈ
８，０のトリス−塩酸緩衝＋１（０，２モルのトリスヒ
Ｆロキシメチルアミノメタン２５ ｍｇ’Ｋ Ｏ，１モ
ルの塩酸２８．１−を加え、蒸溜水で１００−になるよ
うに希釈し友もの）Ｋ溶かしたものを２回流通させた。
用いたアフィニティークロマトグラフィーにより精製し
た。この際上記の全血から血清を採取し、血清をＰ Ｈ
８，０のトリス−塩酸緩衝＋１（０，２モルのトリスヒ
Ｆロキシメチルアミノメタン２５ ｍｇ’Ｋ Ｏ，１モ
ルの塩酸２８．１−を加え、蒸溜水で１００−になるよ
うに希釈し友もの）Ｋ溶かしたものを２回流通させた。
その後４．５モルの塩化マグネカラム又はチオシアン酸
アンモニウムで溶離し、溶離液を抗体量が４０μｔ／−
になるように前記のリン酸緩衝液に溶解させた。
アンモニウムで溶離し、溶離液を抗体量が４０μｔ／−
になるように前記のリン酸緩衝液に溶解させた。
（１−１）ＶＣより得られ、−た診断試薬用ラテックス
をリン酸緩衝液に分散させたものと、上εにより得られ
た抗体をリン酸緩衝液に溶解させたものを等量混合し、
３７Ｃで３時間をかけて１次いで１５０００回転／分で
１５分間遠心分離し、前記共重合体粒子に感作されなか
った抗体を除去した。尚抗体は９９．５％以五が前記共
重合体粒子に感作された。遠心分ＩＩＩＩＩＫより沈降
した前記共重合体粒子をリン酸緩ｓｍで十分洗滌後、正
常なモルモットの血清を０．２重量嘔含有するリン酸緩
衝液を加えて、抗体が感作されている共重合体粒子を再
分散させ３７Ｃで１０分間攪拌し友、このリン酸緩衝液
中Ｋ ＨＢ ｍ抗体が３０μｔ／−含まれていた。
をリン酸緩衝液に分散させたものと、上εにより得られ
た抗体をリン酸緩衝液に溶解させたものを等量混合し、
３７Ｃで３時間をかけて１次いで１５０００回転／分で
１５分間遠心分離し、前記共重合体粒子に感作されなか
った抗体を除去した。尚抗体は９９．５％以五が前記共
重合体粒子に感作された。遠心分ＩＩＩＩＩＫより沈降
した前記共重合体粒子をリン酸緩ｓｍで十分洗滌後、正
常なモルモットの血清を０．２重量嘔含有するリン酸緩
衝液を加えて、抗体が感作されている共重合体粒子を再
分散させ３７Ｃで１０分間攪拌し友、このリン酸緩衝液
中Ｋ ＨＢ ｍ抗体が３０μｔ／−含まれていた。
更に、１２０００回転／分で遠心分離し、上清を捨て沈
降し九処理後の抗体が感作されている前記共重合体粒子
をＰＨ７のリン酸緩衝液に再分散して診断試薬を調整し
た。
降し九処理後の抗体が感作されている前記共重合体粒子
をＰＨ７のリン酸緩衝液に再分散して診断試薬を調整し
た。
（１−ａ）評価
保存安定性
上記の診断試薬を２００で保存し、製造［Ｌ１０日後、
２０日後、３０日後、５ｏ日後の凝桑状態を観察したが
、自己凝集はいずれの場合も全く生じなかった。
２０日後、３０日後、５ｏ日後の凝桑状態を観察したが
、自己凝集はいずれの場合も全く生じなかった。
感 度
種々の濃度のＨＢｓ抗原を含むヒト血清左、１記の診断
試薬をプレート上で混合し、凝集の強さを肉眼判定した
。その結果１０ ａｔ／−〜１Ｇ０ｎｔ／−のＨＢｓ抗
原の検出が可能であった。
試薬をプレート上で混合し、凝集の強さを肉眼判定した
。その結果１０ ａｔ／−〜１Ｇ０ｎｔ／−のＨＢｓ抗
原の検出が可能であった。
非特異的凝集反応
血清中のＨＢｓ抗原が０．４ ｎ＃／−である事が判明
している１０００人の正常人血清について偽陽性の件数
をみた。その結果、偽陽性の件数は０でｂった。
している１０００人の正常人血清について偽陽性の件数
をみた。その結果、偽陽性の件数は０でｂった。
Ｅ記の計価結果よシ本発明により得られる診断試薬用ラ
テックスは保存安定性にすぐれ、又このラテックスを用
いた診断試薬は感度がすぐれ非特異的凝集反応を生じな
いものであることがＦＩＪ明した。
テックスは保存安定性にすぐれ、又このラテックスを用
いた診断試薬は感度がすぐれ非特異的凝集反応を生じな
いものであることがＦＩＪ明した。
特許出願人
積水化学工業株式会社
代表者藤沼基利
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ｌフェニル基を有する重合性単量体と陰イオン性の重合
性単量体との共重合体粒子の懸濁液であって、該懸濁液
における前記共重合体粒子の表向荷電密度が陰イオンの
解離濃度で３．０ Ｘ １０−’モル／イル８０．Ｏに
１０ モル／ｒｔｌの範囲内に存するる、特許請求の
範囲第五項ε載の診断試薬用ラス ４共嘱合体粒子の粒径が０．０７μ層〜２−ｓｏμ解の
範囲にある、特許請求の範囲第１項又は第２］Ｊ記絨の
診断試薬用ラテックス
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19735581A JPS5897656A (ja) | 1981-12-07 | 1981-12-07 | 診断試薬用ラテツクス |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19735581A JPS5897656A (ja) | 1981-12-07 | 1981-12-07 | 診断試薬用ラテツクス |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5897656A true JPS5897656A (ja) | 1983-06-10 |
Family
ID=16373101
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19735581A Pending JPS5897656A (ja) | 1981-12-07 | 1981-12-07 | 診断試薬用ラテツクス |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5897656A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004325416A (ja) * | 2003-04-28 | 2004-11-18 | Sekisui Chem Co Ltd | 測定試薬用担体粒子ラテックス及び測定試薬 |
| JP2024052454A (ja) * | 2022-09-30 | 2024-04-11 | 積水メディカル株式会社 | ラテックス粒子の製造方法、及び測定試薬の製造方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5428816A (en) * | 1977-08-03 | 1979-03-03 | Hoffmann La Roche | Immunological diagnostic reagent |
| JPS5681319A (en) * | 1979-12-07 | 1981-07-03 | Sekisui Chem Co Ltd | Production of latex for serodiagnostic reagent |
| JPS57168163A (en) * | 1981-04-10 | 1982-10-16 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | Carier for immunoserological inspection reagent |
-
1981
- 1981-12-07 JP JP19735581A patent/JPS5897656A/ja active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5428816A (en) * | 1977-08-03 | 1979-03-03 | Hoffmann La Roche | Immunological diagnostic reagent |
| JPS5681319A (en) * | 1979-12-07 | 1981-07-03 | Sekisui Chem Co Ltd | Production of latex for serodiagnostic reagent |
| JPS57168163A (en) * | 1981-04-10 | 1982-10-16 | Japan Synthetic Rubber Co Ltd | Carier for immunoserological inspection reagent |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004325416A (ja) * | 2003-04-28 | 2004-11-18 | Sekisui Chem Co Ltd | 測定試薬用担体粒子ラテックス及び測定試薬 |
| JP2024052454A (ja) * | 2022-09-30 | 2024-04-11 | 積水メディカル株式会社 | ラテックス粒子の製造方法、及び測定試薬の製造方法 |
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