JPS58224695A - 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法Info
- Publication number
- JPS58224695A JPS58224695A JP10883482A JP10883482A JPS58224695A JP S58224695 A JPS58224695 A JP S58224695A JP 10883482 A JP10883482 A JP 10883482A JP 10883482 A JP10883482 A JP 10883482A JP S58224695 A JPS58224695 A JP S58224695A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glutamic acid
- strain
- medium
- acid
- genus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるし一グルタミン酸の製造法に関す
る。その目的とするところは、食品添加物等として利用
される重要なアミノ酸であるＬ−グルタミン酸を工業的
安価に製造することにある。
る。その目的とするところは、食品添加物等として利用
される重要なアミノ酸であるＬ−グルタミン酸を工業的
安価に製造することにある。
従来、発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法に関して
はアデニン等の要求株Ｃ特公昭４９−ＩＦ１５７）、Ｌ
−リジン要求株（特公昭５３−２８９９１）、モノフロ
ロ酢酸等め耐性株（％公昭Ｊ４−９１９７）、フロロク
エン酸等の耐性株（特公昭５６−５０８３７）等を用い
る方法が知られている。
はアデニン等の要求株Ｃ特公昭４９−ＩＦ１５７）、Ｌ
−リジン要求株（特公昭５３−２８９９１）、モノフロ
ロ酢酸等め耐性株（％公昭Ｊ４−９１９７）、フロロク
エン酸等の耐性株（特公昭５６−５０８３７）等を用い
る方法が知られている。
本発明者らは発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法を
改良すべく鋭意検討した結果、従来知られているコリネ
バクテリウム属またはブレビバクテリウム属のＬ−グル
タミン酸生産菌にピリミジンアナログおよびプリンアナ
ログの１種以上の耐性を付与した変異株を誘導したとこ
ろ、Ｌ−グルタミン酸生産能が著しく向上することを紹
め、かつ従来Ｌ−グルタミン酸発酵に用いられているよ
うに多量のビオチンを含む培地においても界面活性剤や
ペニシリン等を添加せずに、そのまま培養することによ
りＬ−グルタミン酸を著量蓄積することを認め本発明を
完成するにいたった。発酵法によるＬ−グルタミン酸の
製造に際し、プリンアナログ抵抗性、ピリミジンアナロ
グ抵抗性の性質を持った菌株を用いればＬ−グルタミン
酸の生産性が飛躍的に改善される仁とは本発明者らによ
ってはじめて見出された知見である。
改良すべく鋭意検討した結果、従来知られているコリネ
バクテリウム属またはブレビバクテリウム属のＬ−グル
タミン酸生産菌にピリミジンアナログおよびプリンアナ
ログの１種以上の耐性を付与した変異株を誘導したとこ
ろ、Ｌ−グルタミン酸生産能が著しく向上することを紹
め、かつ従来Ｌ−グルタミン酸発酵に用いられているよ
うに多量のビオチンを含む培地においても界面活性剤や
ペニシリン等を添加せずに、そのまま培養することによ
りＬ−グルタミン酸を著量蓄積することを認め本発明を
完成するにいたった。発酵法によるＬ−グルタミン酸の
製造に際し、プリンアナログ抵抗性、ピリミジンアナロ
グ抵抗性の性質を持った菌株を用いればＬ−グルタミン
酸の生産性が飛躍的に改善される仁とは本発明者らによ
ってはじめて見出された知見である。
以下、本発明の詳細な説明する。
本発明方法では、コリネバクテリウム属またはブレビバ
クテリウム属１／ＣＲし、プリンアナログ抵抗性および
ピリミジンアナログ抵抗性の少なくとも１種の性質を有
するし一グルタミン酸生産菌株であればいかなる菌株を
も用いることができる。すなわち、本発明ではコリネバ
クテリウム属またはブレビバクテリウム属に属し、Ｌ−
グルタミン酸生産能を既に有する菌株にプリンアナログ
抵抗性およびピリミジンアナログ抵抗性の少なくとも１
種の性質を付与せしめた菌株を用いてもよいし、コリネ
バクテリウム属とも１種の性質を有する菌株にＬ−グル
タミン酸生産能を付与せしめた菌株を用いてもよい。
クテリウム属１／ＣＲし、プリンアナログ抵抗性および
ピリミジンアナログ抵抗性の少なくとも１種の性質を有
するし一グルタミン酸生産菌株であればいかなる菌株を
も用いることができる。すなわち、本発明ではコリネバ
クテリウム属またはブレビバクテリウム属に属し、Ｌ−
グルタミン酸生産能を既に有する菌株にプリンアナログ
抵抗性およびピリミジンアナログ抵抗性の少なくとも１
種の性質を付与せしめた菌株を用いてもよいし、コリネ
バクテリウム属とも１種の性質を有する菌株にＬ−グル
タミン酸生産能を付与せしめた菌株を用いてもよい。
たとえば、コリネバクテリウム属またはブレビバクテリ
ウム属に属するＬ−グルタミン酸生産能を有する菌株と
しては、各種の栄養（゛例えばアデニン、メチオニン、
フェニルアラニン、リジン、イソロイシン、オレイン酸
、グリセロール、酢酸）要求性、各種の薬剤（例えばコ
バラミン、モノフロロ酢酸、マロン酸、フロロクエン酸
、８−アミノエチル−アラニン、２−アミノ−３−ホス
ホプロピオン酸、グルタミン酸−γ−モノヒドロキサメ
ート、ケトマロン酸、各種呼吸阻害剤、ＡＤＰＩＪン酸
化阻害剤）耐性および各種の薬剤（例えば、リゾチーム
、フロロピルビン酸）感受性、その低温度感受性の１種
あるいはこれらの組合せの性質を有するＬ−グルタミン
酸生産株があげられる。
ウム属に属するＬ−グルタミン酸生産能を有する菌株と
しては、各種の栄養（゛例えばアデニン、メチオニン、
フェニルアラニン、リジン、イソロイシン、オレイン酸
、グリセロール、酢酸）要求性、各種の薬剤（例えばコ
バラミン、モノフロロ酢酸、マロン酸、フロロクエン酸
、８−アミノエチル−アラニン、２−アミノ−３−ホス
ホプロピオン酸、グルタミン酸−γ−モノヒドロキサメ
ート、ケトマロン酸、各種呼吸阻害剤、ＡＤＰＩＪン酸
化阻害剤）耐性および各種の薬剤（例えば、リゾチーム
、フロロピルビン酸）感受性、その低温度感受性の１種
あるいはこれらの組合せの性質を有するＬ−グルタミン
酸生産株があげられる。
したがって、かくの如きＬ−グルタミン酸生産菌株に、
さらにプリンアナログ抵抗性およびピリミジンアナログ
抵抗性の少なくとも１種の性質を付与することによって
本発明に使用する菌株を得ることもできるし、コリネバ
クテリウム属に属し、プリンアナログ抵抗性およびピリ
ミジ／アナログ抵抗性の少なくとも１種の性質を有する
菌株に上記のごとき各種栄養要求性、各種アミノ酸アナ
ログ抵抗性、またはその他薬剤の抵抗性を付与すること
によって得られるＬ−グルタミン酸生産菌株を本発明で
使用すること本できる。また、本発明に用いる菌株は上
記のごとき性質の他にＬ−グルタミン酸生産に寄与する
いかなる性質を備えていてもさしつかえない。
さらにプリンアナログ抵抗性およびピリミジンアナログ
抵抗性の少なくとも１種の性質を付与することによって
本発明に使用する菌株を得ることもできるし、コリネバ
クテリウム属に属し、プリンアナログ抵抗性およびピリ
ミジ／アナログ抵抗性の少なくとも１種の性質を有する
菌株に上記のごとき各種栄養要求性、各種アミノ酸アナ
ログ抵抗性、またはその他薬剤の抵抗性を付与すること
によって得られるＬ−グルタミン酸生産菌株を本発明で
使用すること本できる。また、本発明に用いる菌株は上
記のごとき性質の他にＬ−グルタミン酸生産に寄与する
いかなる性質を備えていてもさしつかえない。
本発明に用いる菌株のプリンアナログ抵抗性としては、
たとえば、６−メルカプトグアニン、８−アザグアニン
、２−７０ロアデニン、ツベルシジン、６−メチルプリ
ン、８−アザキサンチン、８−７ザアデニン、８−メル
カプトグアノシン、６−メルカプトグアノシン、２−ア
ミノプリン、２−アミノ−６−メルカプトプリン。
たとえば、６−メルカプトグアニン、８−アザグアニン
、２−７０ロアデニン、ツベルシジン、６−メチルプリ
ン、８−アザキサンチン、８−７ザアデニン、８−メル
カプトグアノシン、６−メルカプトグアノシン、２−ア
ミノプリン、２−アミノ−６−メルカプトプリン。
デコイニン、サイコフラニンなどに対する抵抗性があげ
られる。ま九本発明に用いる菌株のピリミジンアナログ
抵抗性としては、たとえば、５−ブロモウラシル、６−
アザウラシル、５−フロロウラシル、５−ブロモ−２−
デオキシウリジン、２−チオウラシル、６−メチル−２
−チオウラシル、アミセチンなどに対する抵抗性があげ
られる。
られる。ま九本発明に用いる菌株のピリミジンアナログ
抵抗性としては、たとえば、５−ブロモウラシル、６−
アザウラシル、５−フロロウラシル、５−ブロモ−２−
デオキシウリジン、２−チオウラシル、６−メチル−２
−チオウラシル、アミセチンなどに対する抵抗性があげ
られる。
本発明の変異株を訪導する際に用いられる親株は、従来
、Ｌ−グルタミン酸生産菌として知られているコリネバ
クテリウム属またはブレビバクテリウム属に属する微生
物であシ、例えば、コリネバクテリウム・グルタミクム
ＡＴＣＣ１３０３２、コリネバクテリウム・アセトアシ
トフィラムＡＴＣ０１３８７０、ブレビバクテリウム・
ラクトフエルメンタムＡＴＣ’Ｃ’１３８６９、ブレビ
バクテリウム・７ラバムＡＴｃ０１４０６７などがある
。
、Ｌ−グルタミン酸生産菌として知られているコリネバ
クテリウム属またはブレビバクテリウム属に属する微生
物であシ、例えば、コリネバクテリウム・グルタミクム
ＡＴＣＣ１３０３２、コリネバクテリウム・アセトアシ
トフィラムＡＴＣ０１３８７０、ブレビバクテリウム・
ラクトフエルメンタムＡＴＣ’Ｃ’１３８６９、ブレビ
バクテリウム・７ラバムＡＴｃ０１４０６７などがある
。
本発明に使用する微生物のうち、プリンアナログ抵抗性
菌株の・具体的−例としてコリネバクテリウム・グルタ
きクム）（−３２８０（微工研菌寄第６５７３号）、同
Ｈ−３２８１（微工研菌寄第６５７４号）、ブレビバク
テリウム・うクトフェルメンタムＨ−３２８４（微工研
菌寄第６５７７号）、同Ｈ−３２８５（微工研菌寄第６
５７８号）を、またピリミジンアナログ抵抗性菌株の具
体的例としてコリネバクテリウム・グルタミクムＨ−３
２８２（微工研菌寄第６５７５号）、同Ｈ−３２８３（
微工研菌寄第６５７６号）、ブレビバクテリウム・ラク
トフェルメンタムＨ−３２８６（微工研菌寄第６５７９
号）、同Ｈ−３２８７（微工研菌寄第６５８０号）をあ
げることができる。これらのうち、微工研菌寄第Ｈ−３
２８１号の菌株は、グルタミン酸生産能を有するコリネ
バクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２の細胞
を０．１規定トリス・マレイン酸緩衝液（ｐＨ６，０）
中に１０ ” Ｏ＠ １１Ｂ ／ｄの濃度に懸濁し、コ
コニＮ−メチルーＮ１−ニトロ−Ｎ゛−ニトロソクアニ
ジンを最終濃度ｏ、２ｖ５．／−に′なるように添加し
、室温で３０分間靜装した後、プリンアナログの１種で
ある６−メルカプトグアノシン（６ＭＧ）（０，４■／
ＭＩ）を含む下記のごとき組成を有する最小培地寒天平
板培地に塗床し、生育するコロニーの中から選択された
変異株であり、６ＭＧ抵抗性を有する点で、第１表に示
すように親株のＡＴＣＣ１８０３２と明らかに区別でき
る。またＨ−３２８０、Ｈ−３２８３およびＨ−３２８
２の菌株は上舵と同様にして、それぞれ６−メヂルプリ
ン（６ＭＰ）（０，２岬／、ｊ）亀、ピリミジンアナロ
グである６−アザウラ’／ル（６ＡＵ）（０，１１Ｂｇ
／ ｍｌ ）または５−ブロモウラシル（ＩＳＢＵ）（
０，１■／−）を含む寒天平板培地で生育可能な変異株
として取得した菌株であり、第１表に示すように６ＭＰ
、６ＡＵ、８ＢＨに抵抗性を有する点で親株と明らかに
区別できる。
菌株の・具体的−例としてコリネバクテリウム・グルタ
きクム）（−３２８０（微工研菌寄第６５７３号）、同
Ｈ−３２８１（微工研菌寄第６５７４号）、ブレビバク
テリウム・うクトフェルメンタムＨ−３２８４（微工研
菌寄第６５７７号）、同Ｈ−３２８５（微工研菌寄第６
５７８号）を、またピリミジンアナログ抵抗性菌株の具
体的例としてコリネバクテリウム・グルタミクムＨ−３
２８２（微工研菌寄第６５７５号）、同Ｈ−３２８３（
微工研菌寄第６５７６号）、ブレビバクテリウム・ラク
トフェルメンタムＨ−３２８６（微工研菌寄第６５７９
号）、同Ｈ−３２８７（微工研菌寄第６５８０号）をあ
げることができる。これらのうち、微工研菌寄第Ｈ−３
２８１号の菌株は、グルタミン酸生産能を有するコリネ
バクテリウム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２の細胞
を０．１規定トリス・マレイン酸緩衝液（ｐＨ６，０）
中に１０ ” Ｏ＠ １１Ｂ ／ｄの濃度に懸濁し、コ
コニＮ−メチルーＮ１−ニトロ−Ｎ゛−ニトロソクアニ
ジンを最終濃度ｏ、２ｖ５．／−に′なるように添加し
、室温で３０分間靜装した後、プリンアナログの１種で
ある６−メルカプトグアノシン（６ＭＧ）（０，４■／
ＭＩ）を含む下記のごとき組成を有する最小培地寒天平
板培地に塗床し、生育するコロニーの中から選択された
変異株であり、６ＭＧ抵抗性を有する点で、第１表に示
すように親株のＡＴＣＣ１８０３２と明らかに区別でき
る。またＨ−３２８０、Ｈ−３２８３およびＨ−３２８
２の菌株は上舵と同様にして、それぞれ６−メヂルプリ
ン（６ＭＰ）（０，２岬／、ｊ）亀、ピリミジンアナロ
グである６−アザウラ’／ル（６ＡＵ）（０，１１Ｂｇ
／ ｍｌ ）または５−ブロモウラシル（ＩＳＢＵ）（
０，１■／−）を含む寒天平板培地で生育可能な変異株
として取得した菌株であり、第１表に示すように６ＭＰ
、６ＡＵ、８ＢＨに抵抗性を有する点で親株と明らかに
区別できる。
またＨ−３２８４、Ｈ−３２８５、Ｈ−３２８６、Ｈ−
３２８７の菌株は、Ｌ−グルタきン酸生産能を有するブ
レビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＡＴＣＣ’１
３８６９から同様の変異処理によって６ＭＧ、６ＭＰ、
６ＡＵまたは５ＢＵ抵抗性株としてそれぞれ選択された
変異株であり第１表に示すように親株と明らかに区別で
きる。
３２８７の菌株は、Ｌ−グルタきン酸生産能を有するブ
レビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＡＴＣＣ’１
３８６９から同様の変異処理によって６ＭＧ、６ＭＰ、
６ＡＵまたは５ＢＵ抵抗性株としてそれぞれ選択された
変異株であり第１表に示すように親株と明らかに区別で
きる。
第１表
＊ １ 壷 ２
１ ： ＡＴＣＣ１８０３２６： ＡＴＣＩＣ！
１３８６９２ ： Ｈ−３２８１７： Ｈ−３２
８４３： Ｈ−３２８０８： Ｈ−３２８５４：
Ｈ−３２８３９： Ｈ−３２８６５： Ｈ−４’２
ｇ２ １０： Ｈ−３２８７上記最少培地寒天平板培
地の組成ニゲルコース１０ ｆ／ｌ、塩化アンモニウム
４１／１％ＫＨ寓ＰＯａ１ ｆ ／ｌ、 Ｋｇ ＨＰＯ
４３ｆ ／ｌ、 ＭｆＢＯａ・７Ｈ雪００．４ｆ／Ｌ、
Ｆｅ１ｏｎ ・７Ｈ１００，０１１７１％Ｍｎ３Ｏ４
・４Ｈ＊００．０１ｆ／ｌ、尿素２ｆ／ｌ、ビオチン５
０ ｐｆ／ｌ。
１ ： ＡＴＣＣ１８０３２６： ＡＴＣＩＣ！
１３８６９２ ： Ｈ−３２８１７： Ｈ−３２
８４３： Ｈ−３２８０８： Ｈ−３２８５４：
Ｈ−３２８３９： Ｈ−３２８６５： Ｈ−４’２
ｇ２ １０： Ｈ−３２８７上記最少培地寒天平板培
地の組成ニゲルコース１０ ｆ／ｌ、塩化アンモニウム
４１／１％ＫＨ寓ＰＯａ１ ｆ ／ｌ、 Ｋｇ ＨＰＯ
４３ｆ ／ｌ、 ＭｆＢＯａ・７Ｈ雪００．４ｆ／Ｌ、
Ｆｅ１ｏｎ ・７Ｈ１００，０１１７１％Ｍｎ３Ｏ４
・４Ｈ＊００．０１ｆ／ｌ、尿素２ｆ／ｌ、ビオチン５
０ ｐｆ／ｌ。
寒天２０ ｆ／１． ｐＨ７，２゜
本発明に使用する培地組成としては使用菌株の利用しう
る炭素源、無機物その他の必要な栄養素を程良く含有す
るものであれば合成培地、天然培地のいずれも使用でき
る。
る炭素源、無機物その他の必要な栄養素を程良く含有す
るものであれば合成培地、天然培地のいずれも使用でき
る。
すなわち炭素源としてはグルコース、フラクトース、ソ
ルビトール、グリセロール、蔗糖、澱粉、澱粉加水分解
物、糖蜜、果汁などの各種炭水化物、酢酸、フマール酸
、乳酸、コノ・り酸などの有機酸、さらにエタノール、
メタノールなどのアルコール類も使用できる。
ルビトール、グリセロール、蔗糖、澱粉、澱粉加水分解
物、糖蜜、果汁などの各種炭水化物、酢酸、フマール酸
、乳酸、コノ・り酸などの有機酸、さらにエタノール、
メタノールなどのアルコール類も使用できる。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
等の各種無機酸のアンモニウム塩、尿素、アミン類、そ
の信金窒素化合物、表らびにペプトン、肉エキス、酵母
エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解
物、大豆粕酸加水分解物、各種発酵菌体およびその消化
物などが使用できる。
アンモニウム、酢酸アンモニウム、リン酸アンモニウム
等の各種無機酸のアンモニウム塩、尿素、アミン類、そ
の信金窒素化合物、表らびにペプトン、肉エキス、酵母
エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分解
物、大豆粕酸加水分解物、各種発酵菌体およびその消化
物などが使用できる。
さらに無機物としては、リン酸第−カリウム、リン酸第
二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、
塩化ナトリウノ１、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、炭酸カ
ルシウムなどを使用すｚ０勿論、本発明に使用する微生
物が生育のために特定の栄養素を必要とする場合には、
その栄養素を２！１幽量培地中に存在させなければなら
ないが、これらの物質は窒素源として例示した天然物に
含まれて添加される場合がある。また培地中に各種の添
加物、例えば各種抗生物質、有機酸、脂肪酸、アミノ酸
などを添加することによりＬ−グルタミン酸生産量を増
加させうる場合がある。 ・□・ 培養は振盪培養あるいは深部通気攪拌培養などの好気的
条件下で行なう。培養温度は通常２５〜４０℃の範囲で
、培地のｐＨは３〜９の範囲で、好ましくは中性付近に
保持することが望ましいが、これ以外の条件下でも使用
菌株が生育すれば実施できる。培地のｐＨ調節は炭酸カ
ルシウム、酸あるいはアルカリ溶液、ｐＨ緩衝剤などに
よって行なう。培養時間は通常１〜４日間で培養液中に
Ｌ−グルタミン酸が生成蓄積する。
二カリウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、
塩化ナトリウノ１、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、炭酸カ
ルシウムなどを使用すｚ０勿論、本発明に使用する微生
物が生育のために特定の栄養素を必要とする場合には、
その栄養素を２！１幽量培地中に存在させなければなら
ないが、これらの物質は窒素源として例示した天然物に
含まれて添加される場合がある。また培地中に各種の添
加物、例えば各種抗生物質、有機酸、脂肪酸、アミノ酸
などを添加することによりＬ−グルタミン酸生産量を増
加させうる場合がある。 ・□・ 培養は振盪培養あるいは深部通気攪拌培養などの好気的
条件下で行なう。培養温度は通常２５〜４０℃の範囲で
、培地のｐＨは３〜９の範囲で、好ましくは中性付近に
保持することが望ましいが、これ以外の条件下でも使用
菌株が生育すれば実施できる。培地のｐＨ調節は炭酸カ
ルシウム、酸あるいはアルカリ溶液、ｐＨ緩衝剤などに
よって行なう。培養時間は通常１〜４日間で培養液中に
Ｌ−グルタミン酸が生成蓄積する。
またＬ−グルタミン酸を蓄積させるため、従来知られて
いるように、ビオチン量を低くおさえたり、ビオチン含
量の高い培地の場合には界面活性剤、ペニシリン等を添
加して培養してもよいし、ビオチン量に関係なく、その
まま培養してもよい。
いるように、ビオチン量を低くおさえたり、ビオチン含
量の高い培地の場合には界面活性剤、ペニシリン等を添
加して培養してもよいし、ビオチン量に関係なく、その
まま培養してもよい。
培養終了後、培養液より菌体などの沈澱物を除去し、公
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法、塩析法などを
併用することにより、培養液からＬ−グルタミン酸を回
収することができる。
知のイオン交換処理法、濃縮法、吸着法、塩析法などを
併用することにより、培養液からＬ−グルタミン酸を回
収することができる。
以下、実施例をあげて本発明を具体的に示す。
実施例１゜
グＡ／：Ｉ−ス５０１／１％ＫＨ＊ＰＯ４１ｆ／ｌ。
ＭｐＳＯ４・７Ｈ，ＯＯ，５ｒ／ｌ、サイアミニ／・Ｈ
Ｃｌ２００ μｔ／ｍ１．尿素５ ｔ ７１％ＦｅＳＯ
４＊ ７ａ、 ０１０ｆｓｙ／ｌ、 ＭｎＳＯ４−４Ｈ
ｚＯ１０１９／１． ＣｕＳＯ４−４Ｈ，Ｏ１ｔｎ９／
ｚ、 ヒオチｙ ３ ｔｕｉｔ／ｌ、 ｐ Ｈ７，０の
培地（生産培地）を調製し、その２Ｏｄずつを２５０胃
！容三角フラスコに入れ１２０℃１０分間加熱殺菌した
。この培地に第２表に示した菌が増殖した種培養物（上
記培地にビオチン１００μｆ／を添加した種培地に培養
した本の）を０．５ ｙｌずつ植菌し３０℃で振盪培養
した。
Ｃｌ２００ μｔ／ｍ１．尿素５ ｔ ７１％ＦｅＳＯ
４＊ ７ａ、 ０１０ｆｓｙ／ｌ、 ＭｎＳＯ４−４Ｈ
ｚＯ１０１９／１． ＣｕＳＯ４−４Ｈ，Ｏ１ｔｎ９／
ｚ、 ヒオチｙ ３ ｔｕｉｔ／ｌ、 ｐ Ｈ７，０の
培地（生産培地）を調製し、その２Ｏｄずつを２５０胃
！容三角フラスコに入れ１２０℃１０分間加熱殺菌した
。この培地に第２表に示した菌が増殖した種培養物（上
記培地にビオチン１００μｆ／を添加した種培地に培養
した本の）を０．５ ｙｌずつ植菌し３０℃で振盪培養
した。
培養中、培養液のｐＨが６．５〜８．０に保たれるよ５
に殺菌し九尿素液を添加しながら３２℃で３０時間培養
した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の
量を第２表に示した。
に殺菌し九尿素液を添加しながら３２℃で３０時間培養
した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミン酸の
量を第２表に示した。
第２表
菌 株 Ｌ−グルタミン酸（ｆ／１）ＡＴＣＣ
１３０３２２３，５ Ｈ−３２８１２５，５ Ｈ−３２８０２６，０ Ｈ−３２８３２６，０ Ｈ−３２８２２３，０ ＡＴＣ’（”１３８６９ ２＆０Ｈ−３２８
４２４，５ Ｈ−３２８５２５，５ ）（−３２８６２５，０ Ｈ−３２８７２５，５ 実施例２゜ 廃糖蜜（グルコース換算）６０ｆ／ｌ、尿素５ ｆ／ｌ
、 （ＮＨ４）、８０４ ２ ｆ／１％ＫＨ，ＰＯ４１
１／ｌ。
１３０３２２３，５ Ｈ−３２８１２５，５ Ｈ−３２８０２６，０ Ｈ−３２８３２６，０ Ｈ−３２８２２３，０ ＡＴＣ’（”１３８６９ ２＆０Ｈ−３２８
４２４，５ Ｈ−３２８５２５，５ ）（−３２８６２５，０ Ｈ−３２８７２５，５ 実施例２゜ 廃糖蜜（グルコース換算）６０ｆ／ｌ、尿素５ ｆ／ｌ
、 （ＮＨ４）、８０４ ２ ｆ／１％ＫＨ，ＰＯ４１
１／ｌ。
Ｋ２ＨＰＯ４１ｆ／ｌ、 Ｍｎ３Ｏ４・４Ｈ１０２０ｍ
ｆ／Ｌ 。
ｆ／Ｌ 。
ｐ Ｈ６，５の培地（生産培地）を調製し、１６＊ｌず
つ２５〇−容三角フラスコに入れ１２０℃、１０分間加
熱殺菌した。この培地に第３表に示した菌が増殖した種
培養物（同上培地組成の培地に培養したもの）３ｄずつ
を植菌し、さらに、ペニシリンＧ溶液を最終濃度５ Ｕ
／ ｙｔｌになるように添加して３４℃で振盪培養し
た。培養中、培養液のｐＨを６．５〜８．０に保つよう
に殺菌したＩＯＸ尿素液０．５４を添加しながら３０時
間培養した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸量は第３表に示す通りである。
つ２５〇−容三角フラスコに入れ１２０℃、１０分間加
熱殺菌した。この培地に第３表に示した菌が増殖した種
培養物（同上培地組成の培地に培養したもの）３ｄずつ
を植菌し、さらに、ペニシリンＧ溶液を最終濃度５ Ｕ
／ ｙｔｌになるように添加して３４℃で振盪培養し
た。培養中、培養液のｐＨを６．５〜８．０に保つよう
に殺菌したＩＯＸ尿素液０．５４を添加しながら３０時
間培養した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸量は第３表に示す通りである。
第３表
ＡＴＣＣ！１３１０３２ ２９．０
１Ｆ（−３２８０３ａ、ｆ）
Ｈ−３２８２３４，０
ＡＴＣＣ１３８６９２７，５
Ｈ−３２８５３２，。
Ｈ−３２８７３３，５
実施例８゜
実施例２で用いた種培地を用い第４表に示した菌株が増
殖した種培養物３−を、実施例２で用いた生産培地にさ
らにポリオキシエチレンンルビタンモノパルミテートを
０．０８ｆ／４添加した培地１６−に植菌し、３−４℃
で培養した。
殖した種培養物３−を、実施例２で用いた生産培地にさ
らにポリオキシエチレンンルビタンモノパルミテートを
０．０８ｆ／４添加した培地１６−に植菌し、３−４℃
で培養した。
培養中、培養液のｐＨを６．５〜＆０に保つように、殺
菌した１０％尿素０．５ ｙｎｌを添加しながら３０時
間培養した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸の量は第４表に示す通りである。
菌した１０％尿素０．５ ｙｎｌを添加しながら３０時
間培養した。かくして培養液中に蓄積したＬ−グルタミ
ン酸の量は第４表に示す通りである。
第４表
Ｈ−３２８４３２，０
Ｈ−３！８１５ ％ ３１５
Ｈ−３２８６３１，５
Ｈ〜３２８７ ａａ、。
実施例４゜
実施例２で用いた稲培地を用い゛第５表に示した菌が増
殖した種培養物３−を実施例２で用いた生産培地１６−
に植菌し、３４℃で培養した。
殖した種培養物３−を実施例２で用いた生産培地１６−
に植菌し、３４℃で培養した。
培養中、培養液のｐＨを６，５〜＆ＯＫ保つように殺菌
した尿素液０，５−を添加しながら３０時間培養した。
した尿素液０，５−を添加しながら３０時間培養した。
かくして培養液中に蓄積したし一グルタミン酸は第５表
に示す通りである。
に示す通りである。
第５表
Ｈ−３２８３３１，０
ＡＴＣＣ１３８６９＆０
Claims (1)
- コリネバクテリウム属またはブレピノくクテリウム属に
属しプリンアナログ抵抗性およびピリミジンアナログ抵
抗性の少なくとも１種の性質を有するＬ−グルタミン酸
生産株を栄養培地に培養し、培養液中にＬ−グルタミン
酸を蓄積せしめ、咳培養液からＬ−グルタミン酸を採取
することを特徴とする発酵法によるＬ−グルタミン酸の
製造法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10883482A JPS58224695A (ja) | 1982-06-24 | 1982-06-24 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
| DE8383303661T DE3379963D1 (en) | 1982-06-24 | 1983-06-24 | Processes for producing l-proline by fermentation |
| EP83303661A EP0098122B1 (en) | 1982-06-24 | 1983-06-24 | Processes for producing l-proline by fermentation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10883482A JPS58224695A (ja) | 1982-06-24 | 1982-06-24 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58224695A true JPS58224695A (ja) | 1983-12-27 |
| JPH0158953B2 JPH0158953B2 (ja) | 1989-12-14 |
Family
ID=14494729
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10883482A Granted JPS58224695A (ja) | 1982-06-24 | 1982-06-24 | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58224695A (ja) |
-
1982
- 1982-06-24 JP JP10883482A patent/JPS58224695A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0158953B2 (ja) | 1989-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3036930B2 (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法 | |
| HU215545B (hu) | Eljárás L-treonin előállítására | |
| US4169763A (en) | Process for the production of L-lysine by fermentation | |
| JP3966583B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法 | |
| JPH0488994A (ja) | 発酵法によるｌ―グルタミン酸の製造法 | |
| JPS61202694A (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミンの製造法 | |
| JP3717970B2 (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法 | |
| JPH022598B2 (ja) | ||
| JPH06133787A (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法 | |
| EP0054311B1 (en) | Process for producing l-glutamic acid | |
| US4657860A (en) | Process for producing L-lysine by fermentation | |
| JP2578474B2 (ja) | Ｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JPS58224695A (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JPH01199589A (ja) | 発酵法によるｌ−リジンの製造法 | |
| JPS6312292A (ja) | Ｌ−リジンの製造法 | |
| EP0098122B1 (en) | Processes for producing l-proline by fermentation | |
| KR900000938B1 (ko) | 발효법에 의한 l-글루타민산의 제조방법 | |
| JPH029384A (ja) | 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造方法 | |
| JP3100763B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 | |
| JP3006907B2 (ja) | 発酵法によるｌ−アラニンの製造法 | |
| KR0146493B1 (ko) | 발효법에 의한 l-알라닌의 제조 방법 | |
| JPS5988094A (ja) | 発酵法によるｌ−リジンの製造法 | |
| US3361642A (en) | Method for producing hypoxanthine by fermentation | |
| KR830001259B1 (ko) | 미생물에 의한 l-글루타민의 제조방법 | |
| JPS62265988A (ja) | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 |