JPS58135868A - Ｎ−アシルカルノシンの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発＠はＮ−アシルカルノシンの製造法に関するＯＮ−
アシルカルノシンｒｉＮ−７シルーβ−７２ニルヒスチ
ジンの栴Ａを有するもので、特にＮ−アセチル−し−力
ルノシンはＬ−カルノシンと同様に大脳辺縁系に強力な
抑制作用を有するなど、ｋ桑品として有用である。又、
そのアルミニウム塩に優れた抗潰瘍性を有している。

従来、Ｎ−アシルカルノシンの製造法としてＵ、＋ＩＩ
Ｌ−カルノシンを無水酢酸を用いてアセチル化してＮ−
アセチルカルノシンを製造する方法（Ａ、　Ｃｏ１１　
ａｎｄ　Ｇ、　Ｃ１ｔｙ、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ
、。

２６．６１７（１９６１）ｉ２１アシル基がアセチル又
はベンゾイルである３−アシルアミノプロピオン酸とＰ
−ニトロフェノールをジシクロへキシルカルボジイミド
の存在下に反応させて３−アシルアミノ１０ピオン酸−
Ｐ−ニドｃＩフェニルエステルを合゛成し、これをヒス
チジンメチルエステルと縮合させてＮ−アシルカルノシ
ンメチルエステルを生成せしめ、次いでこれを加水分解
してＮ−アシルカルノシンを製造する方法（Ｇ、　Ｂａ
１ｌｌｎ　ａｎｄＡ、　Ｌｕｋｔｏ４　Ｊ、　Ｏｒｇ、
Ｃｈｅｍ、　Ｌｌ、　　６８４　（１９６２）　）およ
び＋３１３−アセチルアミノプロピオン酸とヒスチジン
メチルエステルをジシクロへキシルカルボシイオドの存
在下Ｋ１１Ｊ合させてＮ−アセチルカルノシンメチルエ
ステルを生成せしめ、次いで脱メチル化してＮ−丁セチ
ルカルノシンを製造する方法（特公昭４１−１４７４１
号公報）が知られている。しかし、（りの方法ｔｔＣお
いてニ、原料り一カルノシンがラセミ化してしまう上に
、ヒスチジン核にある窒素原子もアセチル化され、−ｊ
生成智が生じ易い等の欠点かｌ、又、１２）、（３）の
方法においてに、いずれも縮合試薬として用いるジシク
ロへキシルカルボジイミドが高価であり、又、眼粘膜刺
激性か尚く、安全性に間−があり、さらに、Ｌ−ヒスチ
ジンメチルエステルを経由する為、工程数が長い勢の欠
点があり、工業的ＮＬ僕での実施には有利なＬ−アシル
カルノシンの製造方法とＯＮえない。

先に本発明者は工業的に有利なＮ−アシルカルノシンの
製造法として３−アシルアミノプロピオン酸クロライド
とヒスチジンとを塩基性条件下に反応させることにより
目的とするＮ−アシルカルノシンが好収率で得られるこ
とを見出し、特許出願したが（％願昭５５−１４０９０
６号）、その後引続き鋭意検討した結果、３−アシルア
ミノプロピオン酸に適当なカルボン酸活性化試剤、例え
は無水ｉｋ酸、りｐルスルホン敵、クロルギ酸アｋ　キ
ｋｘステル、オキシ塩化燐等を作用させて得られる３−
アシルアミノプロピオン酸反応性誘導体とヒスチジンと
を塩基性条件下に反応させることによりＮ−アシルカル
ノシンが高収率で製造取得し得ることを見出し、本発明
を完成した〇本発明の製造法を反応式で示すと、次のと
おりである。

（１）　　　　　　　　　　　　　（［１塩基性条件下 （２） 〔但し、（１）および（２）式中、Ｒはアルキル、アリ
ール又はアラルキル基、０）式中、Ｘ［、例えば−０８
Ｏｎ’ｋ”（但し、Ｙψは第カルボン酸反応性騎導基（
但し、Ｘ＝Ｃυ場合を除く）を示す〕。

本法は反応工程が蝮か（、Ｎ、Ｎ−ジシクロへキシルカ
ルボジイミドのよりなＩＩｉ！＋価な試乗を使用せずν
ζ、従来法に比較して工業的に極めて有利な方法である
。

本発８Ａにおいて、ヒスチジンと反応させゐ３−アシル
アミツブルビオン酸反応性誘導体は、３−アシルアミノ
プロピオン酸と対応するカルボン籠活性化試乗とを塩化
メチレン、エチレンジクロリド、ジオキサン、テトラヒ
ドロ７ラン、酢酸エチル、メチルイソブチルケトン等の
有機溶媒中で反応させることにより容易に＃製される。

例えは、Ｘが一０８Ｏ１θＹ６９で　Ｙ６９が第三級ア
ミンカチオンであるところの３−アシルアミノプロピオ
ン酸とＪＩＩＬｍからなる混合酸無水物の第三級アミン
塩は、３−アミルアミノプロピオン酸と無水＋ｔＬ酸あ
るいはクロルスルホン酸を、例えばトリメチルアミン、
トリエチルアミン、トリーｎ−ブチルアミン、Ｎ−メチ
ルモルフォリン勢の第三級アミンの存在下に、５〜４０
℃で反応させることＫより１ｉｌｌ製される。又、Ｙφ
がアルカリ金属イオンの場合ＫＦｉ例えは、３−アシル
アミノプロピオン酸と髄厳からなる混合酸無水物のリチ
ウム塩のように、３−アシルアミノ１０ピオン酸のアル
カリ金属塩と無水憾＃を反応させると巌酸モノアルキル
エステルとの混合酸無水物は、３−アシルアミノプロピ
オン酸とクロルギ酸アルキルエステルとを第三級アミン
の存在下に、−１５℃から０℃で反応させることによっ
て得られる◇上記式中に′ハ例えは、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソブチル基、イソブチル基、アミル
基等のＣ＋＜ｓのアルキル基が好ましい・ Ｘが一〇ＰＯＣ／、である場合には、３−アシルアミノ
プロピオン酸とオキシ塩化リンとを第三級アミンの存在
下に一２０’Ｃがら一５℃で反応させることにより調製
される。

反応にいずれも１０分〜４時間で終了する〇又、３−ア
シルアミノプロピオン酸反応性Ｍ４体におｔｌアシル基
としては、脂肪族アシル又は芳香族アシル基のいずれで
あってもよい。

又、芳香族アシル基としては、例えはベンゾイル、ナフ
トイル、フェニルアセチル基等が挙けられる〇 尚一方の原料であるヒスチジンは遊離ヒスチジンの他、
塩酸塩であってもよく、又、ラセミ体又は光字活性体の
いずれでもよいが、通常り一体が使用きれる。

一般に反応は、ヒスチジンの水溶猷又ｒＪ水と水溶性有
機溶剤との混合′＃Ｉ液に、塩基性条件下、３−アシル
アミノプロピオン酸反応性ｓ４体をその１１、あるいは
有機浴剤に浴鱗して加えることによって行われる・水溶
性有機溶剤としては、例えはアセトン、アセトニトリル
、メタノール勢が用いられ、１機溶剤としては例えはア
セトン、アセトニトリル、クロロホルム、ジクロルメタ
ン、エチレンジクロリド、メチルイソブチルケトン等が
使用される。

塩基性条件としては水酸化ナトリウム、水酸化カリウム
等の無機塩基弗るいにトリエチルアミン、トリーｎ−ブ
チルアミン、ピリジン等の有機塩基を使用して反応媒体
の−を９０〜１２、好ましく　ｒｉｓ、　ｓ〜１０．５
に保持し、これによって副反応が極力抑制し目的とする
Ｎ−アシルカルノシンが高収率で得られる。

反応中も上記ｐ１１範囲＆Ｃ保持する為ｔこ３−アシル
アミノフロピオン＃に反応性酩導体と塩基溶液を同時に
ヒスチジン溶液ＦＣ加えるのが好ましい。

反応温度に３０℃以下、好ましくは５〜１０℃が望筐・
しい。

尚、原料に光学活性ヒスチジンを使用してもシセミ化の
危険性はない。

ヒスチジンは一般に３−アシルアミノプロピオン酸反応
性誘導体よりｊｌｌ＋価であるので、反応を完結させる
ために３−アシルアミノフロピオン＃に反応性綽導体が
過剰に用いられる０好ましく　ｔ’１１．５〜２５倍モ
ルの３−アシルアミノ１０ピオン酸反応性誌導体が使用
される。

反応終了健、反応混合物を例えにダイヤイオン５Ｋ−Ｉ
Ｂ。

アンバーライ）ＩＲ−１２０，ダウエクス５０Ｗ等の強
飯性イ１ン交換＠ｈ（Ｈ−ｍ）テｌＡｌｌ−１しｒｉ、
目的物ｔ！ＩＩＪｋｉＫ＠着されるので、未反応の３−
アシルアミノプロピオン毅反応性妨導体が加水分解して
生成した３−アシルアミノプロピオン酸および無機−等
と効果的に分別される。ついで、＊脂よりアン七ニア水
にて溶離し、濃縮脱アンモニア後、アンバーライトＩＲ
Ｃ−５０等の弱酸性イオン交換樹脂（Ｈ−型）Ｋ通過せ
しめて、少量残在している未反応ヒスチジンおよびアン
モニアを除去すれは、高純度の目的物が容易に得られる
。

父、反応混合物を電気透析処理あるいは濃縮後残渣をメ
タノール等の水溶性有機溶剤で目的物を抽出することＫ
より、容易に脱塩を行うことが出来、しかるのち必ｌ！
に応じて上述のような樹脂処理を行ってもよい。

このようＫして得られｆｉＮ−アシルカルノミンはこの
ままでも充分に高純度であるが、これをさらに１例えは
水−イングロバノール混合溶媒などから晶析させるとと
Ｋより精製品となすこともできる。

以下実施例により具体的に説明する。

実施例１゜ ３−アセチルアミノプロピオン酸５２４ｇを塩化メチレ
ン４゜璽しとトリエチルアミン４０４ｇの混合溶媒に溶
解し、攪拌下に、反応温度１０℃以下に保持しつつ、無
水ｍｍ３２ｇを含む塩化メチレン溶液７０■Ｌを滴下し
た。滴下終了後、室温で１０分間攪拌し、３−アセチル
アミノプロピオン酸ｉｉ＊混合酸無水物トリエチルアミ
ン塩１２４．８ｇを含む塩化メチレン溶液２２０ｍｔ、
ｔ−＃製した。

他方、Ｌ−ヒスチジン３１．Ｏｇに水４０１）＋Ｌを加
えた後、約５０ｍＬの２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液で
溶液の−を１０．５０に調製した。この溶液の温度を５
〜１０℃および−１０，３〜１０．５の範囲に保持しつ
つ、先ＫｖＩ４製した３−アセチルアミノプロピオン酸
１ｋＷＲ混合酸無水物トリエチルアミン塩１２４８ｇを
含む塩化メチレン溶液２２０■Ｌと２Ｎ−水酸化ナトリ
ウム水溶液３５０ｍｊ、を−］時に滴下した・滴下終了
後、室温で３０分間攪拌（た。反応液を静置し、下層の
塩化メチレン層を除去し、水層をダイヤイオン５Ｋ−Ｉ
Ｂ（Ｈ型）１．０／＋７）カラムに通液させ、生成し７
’ｊＮ−７セチルーＬ−カルノシンを＠着させる０しが
る後、中性ｅｃなるまでカラムを水洗し、１．５　Ｎア
ンモニア水ｊｌ’Ａｋ　１．５１で浴出し、さらに水２
．５１で洗浄する０治山液と洗液を合せて減圧下に７０
０ｗａｊまでａｍし、その溶液をアンバーライ、）Ｉ）
ｔｃ−５０（Ｈｆｆｉ）２００１１１、に通液させ、次
いでカラムを中性まで洗浄する。貫流敵と洗液を合せて
減圧下に７５ｍＬまで凝縮する０このａ翻敵を５０１貧
・ ℃に加温し、イソフ゛ロビルアルコール４３０■ｌを−
々に加えり後、１晩、室温１で放冷し、析出した結晶を
Ｖ別、１に、諏し粗Ｎ−アセチルーＬ−カルノシン４２
．１ｇが得られ九〇この結晶４２３ｇを水２４０■ｔ、
に溶解し活性炭６０ｇを加えて脱色した後、活性炭をＶ
過、水５０．して洗浄する。脱色液と洗液を合せて減圧
下に７０■Ｌまで＃Ｉ縮した。この濃１ＩＩＩｉ液を６
０℃に加温し、イングロビルアルコール３６０ｍＬ、を
加えた猿、１晩、室１！壕で放冷し、析出した結晶をＦ
別、乾燥し、Ｎ−アセチル−し−カルノシン３８．０ｇ
が得られた０ 本物［Ｕ、ニンヒドリンで発色せず、水に可溶、アセト
ン、エーテル、石油エーテルに不溶である。

その比論光１１は（ａ）’ｄ＝＋２ｓ６（Ｃ＝３、Ｈ２
Ｏ）ヲ示シタ〇又、その赤外−吸収スペクトル（ＩＲ）
、鳥分解能核磁気共鳴吸収スペクトル（ＮＭＲ）ｒｔ、
神品と一致した。

実施例２ ３−アセチルアミノプロピオン＄４９．１ｇとトリーｎ
−ブチルアミン７３０ｇをメチルイソブチルケトン６８
璽ＬＶｃ浴解した。そこへクロルスルホン１１４５．７
ｇ！：）ｕｎ−ブチルアミン７２９ｇをメチルイソプチ
ルクトン２００ｍＬＫ溶解した沿を反応温度をｌＯ℃〜
５℃に保持しつつ、授拌下に滴下した。滴下終了後、室
温で４時間攪拌し、３−７セチルアミノプロピオンａｒ
ｍ酸混合酸無水物トリーｎ−ブチルアミン塩１４８．６
ｇを含むメチルイソブチルケトン溶液３７０ｍ１、を調
製（また。

他方、Ｌ−ヒスチジン塩酸塩ｌ水和物５２．４ｇを水４
００■１に溶解した後、約１１２■Ｌの４Ｎ−水酸化ナ
トリウム水溶液で−１０，５ＦＫ調整した。この無液の
温１を５〜１０’Ｃおよび−１１０３〜１０５の範囲に
保持しつつ、先に調製した３−アセチルアミノプロピオ
ン＃ｌ硫酸混合酸無水物）　リーｎ−ブチルアきン塩１
４ｇ６ｇを含むメチルインブチルケトン＋１Ｉ３７０■
Ｌと４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液３３０献を同時に滴
下した。滴）終了後、室温で３０分間攪拌し、約３０ｍ
１の４Ｎ−水酸化ナトリウム水ＩｖｆａＬでｐ１１１３
．０に＃整した後、反応液を静置した。

上層のメチルイソブチルケトン場を除去し、以彼、下層
の水層を実施例１と同様の処理、操作をくり返し、Ｎ−
アセチルカルノシンの結晶４９．６　ｇを得た。

−ｔｃＤ比＆光駄Ｆｉ　Ｌ　”　）　］）　＝　２６．
８°（Ｃ＝３、ＨｘＯ）をボした。

又、その亦外細吸収スペクトル（ＩＲ）、＾分解能核憾
共鳴吸収スペクトル（ＮＭＲ）は、神品と一致した。

実施例３ ３−アセチルアミノプロピオン＃５．２４　ｇをクロロ
ホルム２５献とトリエチルアミン４．０４　ｇの混合＃
ｒ媒に溶解し、これに攪拌下、反応５ｉｔ−ｓ℃以下に
保持しつつ、クロルギ酸イノブチルエステル６．８３ｆ
ｔ−滴下した。滴下終了後、室温で２０分間攪拌した。

このＷ！を液を、ｐＨ１０，５０に調整したし一ヒスチ
ジン３．１０ｇを含む水ｉ＠１ｌｋ４５−に、攪拌下、
反応ｉ！度１０℃以下、および田１０３０〜１０５０の
範ｆｉｌを保持しつつ、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液
２０■１．とｌＷｊ時に滴下したＯ滴下終了後、室温で
３０分間攪拌した０反応液を静置し、下階のクロロホル
ム層を除去し、以後、実施例１と一様の処理、操作をく
り返し、Ｎ−アセチルカルノシンの結晶３．６５ｆｔ得
た。

その比論光ｔは（α）；＝２６．５　（Ｃ＝３、Ｈ２Ｏ
）を示し友。

父、その赤外線吸収スペクトル（ＩＲ）、高分解能核磁
共鳴ｑ＆収スペクトル（ＮＭｋｔ）ｉ、神品と一致した
。

３−ベンゾイルアミノプロピオン酸７．４６　ｇにクロ
ロホルム２５ｍｔ、、トリエチルアミン４．０４ｇを加
えて溶解し、攪拌下、反応温度を一５℃以下に保持しな
がら、クロルギ酸イノブチルエステル５．７８ｇを滴下
した。次いで室温て更に２０分間攪拌した。

この溶液を、−（ｔｏ、ｓに調整したし一ヒスチジン３
．１０　ｇを含む水溶液４５１１１．ＩＣ１攪拌下、反
応温度を１０℃以下、および−１０３〜１０．５の範囲
を保持しつつ、２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液２０１１
１と同時に滴下した。滴下終了後、室温で３０分間攪拌
した。

反応液を静置し、下層のクロロホルム層を除去し、以後
、実施例１と同様の処理操作をくり返し、Ｎ−ベンゾイ
ル−し−力ルノシンの結晶ｓ、ｏｇｔｌ−得た。このも
のＦｉ融点２１５．５〜２１８０℃を有し、旋光度、Ｉ
　Ｒ，ＮＭＲとも神品と一致した。

実施例５゜ ３−アセチルアミノプロピオン＠ｓ２４ｇｔｔエチレン
ジクロリド３０■ｔとトリーｎ−ブチルアミン７．４１
ｇの混合温媒に溶解し、これに攪拌下、反応温１１１０
℃以下に保ちつつ、オキシ塩化燐３、０８　ｇを滴下し
た。滴下終了後、室温で１０分間攪拌した。

この溶液を、ｐＨ１ｏ、ｏ　ｏＫ調整したし一ヒスチジ
ン３１０ｇを含む水＃ｌ！箪４５’ｍＬに、攪拌下、反
応温度を１０℃以下、およびｐｅａｓ〜１０．０の範囲
に保持しつつ、４Ｎ−水酸化す）　ＩＪウム水水溶液４
２ｍ表同時に滴下した。滴下終了後、室温で３０分間攪
拌し、約７ｗｒＬの４Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液でｐ
ｉ−１１３，０に調整し、反応１１［ｔｌ−静置した。

下層のエチレンジクロリド層を除去し、以後、土層の水
層を実施例１と同様の処理、操作をくり返し、Ｎ−アセ
チル−Ｌ−カルノシンの結晶２７０ｇを得た。

七〇比旋光皺は（ａ’）　甘＝　２６．８　（Ｃ＝３、
Ｈ２Ｏ）を示したＯ又、その亦外＊ａ収スペクトル（Ｉ
Ｒ）、高分解能核磁気共鳴吸収スペクトル（ＮＭｋ　ｌ
に、神品と一致した。

特許出願人味の素株式会社 手続補正書 １、事件の表示 昭和５７年特許験第１７０９０号 ２、発明の名称 Ｎ−アシルカルノシン ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所　　　東京都中央区京橋−丁目５番８月５、補正に
より増加する発明の数　　　なし補正の内容 （１）　　明細−第３頁７行目に記載の［１３１例えば
無水硫酸１の後に［無水硫酸電子供与性分子錯体、］を
補充します。

（２）　　明細書第４頁２０行目に記載の「１１３反応
させることによりＪの後に［あるいは３−アシルアミノ
プロピオン酸と無水硫酸電子供与性分子錯体、例えば無
水ａｓトリエチルアミン錫体、無水硫酸トリー〇−ブチ
ルアミン錯体、無水硫酸ピリジン錯体等の第三級アミン
錐体や無水硫酸Ｎ、Ｎ−ジメチル小ルムアミド鋸体を５
〜４０℃で反応させることによりＪを補充します。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １１）　　ヒスチジンと３−アシルアミノプロピオン酸
   反応性誘導体（但し、３−アシルアミノプロピオン鹸ク
   ロライドを除く）とを塩基性条件下に反応させることを
   特徴とするＮ−アシルカルノシンの製造法。 （２）３−アシルアミノプロピオン酸反応８＋鰐導体が
   一般式〔但し、式中Ｒはアルキル基、アリール基または
   、ア２ルキ（但し、Ｒ′はアルキルを示す）、−ｏｐｏ
   ｃｚ、勢のカルボン険反応性赫尋基を示す〕Ｋて表わさ
   れる化合物で壷る特許請求の範囲（１）偵記載の製造法
   。 （３）反応を水性媒体中、ｐＨｓ、　ｏ〜１２．０、温
   ｆ３０℃以下で行なう特許請求の範囲（１）項筐たｒｉ
   （２１項記載の製造法。