JPS58115346A - 血球種類識別装置 - Google Patents
血球種類識別装置Info
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- JPS58115346A JPS58115346A JP56211568A JP21156881A JPS58115346A JP S58115346 A JPS58115346 A JP S58115346A JP 56211568 A JP56211568 A JP 56211568A JP 21156881 A JP21156881 A JP 21156881A JP S58115346 A JPS58115346 A JP S58115346A
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1456—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
- G01N15/1459—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
-
- G—PHYSICS
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- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
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- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
- G01N33/491—Blood by separating the blood components
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- G—PHYSICS
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- G01N2015/018—Platelets
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- G01N2015/1486—Counting the particles
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血球を赤血球と他の血球或は赤血球。
白血球及び血小板の各血球を識別して各別に計数し得る
ようにするための血球種類識別装置に関する。
ようにするための血球種類識別装置に関する。
血球数を計数するには顕微鏡を用い人間が目視によって
数えるのが最も簡単であるが大へん時間がか＼り労力も
多くか＼る。従来から自動的な血球計数法としてコール
タ原理を用いた電気的方法と光学的方法とがあるが、各
種血球を区別して計数することはできなかった。
数えるのが最も簡単であるが大へん時間がか＼り労力も
多くか＼る。従来から自動的な血球計数法としてコール
タ原理を用いた電気的方法と光学的方法とがあるが、各
種血球を区別して計数することはできなかった。
本発明は光学的方法によつそ血球を種類別に自動的に計
数し得るための血球識別方法を提供しようとするもので
ある。
数し得るための血球識別方法を提供しようとするもので
ある。
本発明は赤血球中のヘモグロビンの最大吸収波長付近の
光を用いて赤血球、白血球及び血小板を識別するもので
ある。血球浮遊液を照明し、透過光からヘモグロビンの
最大吸収波長である４１５ｎｍの波長の光を取出すと、
赤血球はこの波長の光を強く吸収するから暗く見え、他
種の血球はこの波長の光は殆んど吸収せず光散乱による
減光があるだけなめて目視的には殆んど見えず、従って
赤血球だけが選択的に検出できる。他方血球浮遊液を照
明したときの散乱光から上述した４１５ｎｍの波長の光
を取出して見ると、何れの種類の血球もこの波長の光を
散乱するが、赤血球にあっては赤血球内で散乱したこの
波長の光がヘモグロビンに吸収されてしまうため見°掛
上散乱光はきわめて弱い。従って４１５ｎｍの波長の散
乱光によって血球浮遊液を見るときは赤血球は殆んど見
えず、白血球と血小板だけが見える。こ＼で白血球と血
小板とを比較すると白血球の方が光散乱能が高いから白
血球の方が血小板よりも光って見える。このようＩこし
てヘモグロビンの最大吸収波長付近の光の血球浮遊液透
過光と散乱光とを載量」することにより各種血球を明暗
の差で識別できる。上の説明では各種血球の検出を目視
的に行うように述べたが、透過光及び散乱光を光電的装
置によって検出し信号処理を行うことによって各種血球
を区別して自動的に計数し得ることは容易に予想できる
所である。以下実施例にょらて本発明を説明する。
光を用いて赤血球、白血球及び血小板を識別するもので
ある。血球浮遊液を照明し、透過光からヘモグロビンの
最大吸収波長である４１５ｎｍの波長の光を取出すと、
赤血球はこの波長の光を強く吸収するから暗く見え、他
種の血球はこの波長の光は殆んど吸収せず光散乱による
減光があるだけなめて目視的には殆んど見えず、従って
赤血球だけが選択的に検出できる。他方血球浮遊液を照
明したときの散乱光から上述した４１５ｎｍの波長の光
を取出して見ると、何れの種類の血球もこの波長の光を
散乱するが、赤血球にあっては赤血球内で散乱したこの
波長の光がヘモグロビンに吸収されてしまうため見°掛
上散乱光はきわめて弱い。従って４１５ｎｍの波長の散
乱光によって血球浮遊液を見るときは赤血球は殆んど見
えず、白血球と血小板だけが見える。こ＼で白血球と血
小板とを比較すると白血球の方が光散乱能が高いから白
血球の方が血小板よりも光って見える。このようＩこし
てヘモグロビンの最大吸収波長付近の光の血球浮遊液透
過光と散乱光とを載量」することにより各種血球を明暗
の差で識別できる。上の説明では各種血球の検出を目視
的に行うように述べたが、透過光及び散乱光を光電的装
置によって検出し信号処理を行うことによって各種血球
を区別して自動的に計数し得ることは容易に予想できる
所である。以下実施例にょらて本発明を説明する。
第１図は本発明の一実施例装置の概要を示す。
１は試料セルであって、その詳細は後述するが血球浮遊
液が図の紙面に垂直に流通し、血球が一列に並んで移動
して行くようになっている。この血球の移動の列に４１
５ｎｍの波長の光の細く絞った光束２を照射する。３は
試料セルを透過した光、４は試料セル内の血球によって
散乱された光であり、５．６は光検出素子である。第２
図Ａは光検出器５の出力の変化を示しＰＩ、Ｐ２．Ｐ３
の３個の吸収ピークが見えている。このうちＰｌ、Ｐ２
は赤血球以外あ血球が光束２を横切ったときの光検出素
子５への入射光量の低下であり、Ｐ３は赤血球が光束２
を横切ったときの光量低下である。
液が図の紙面に垂直に流通し、血球が一列に並んで移動
して行くようになっている。この血球の移動の列に４１
５ｎｍの波長の光の細く絞った光束２を照射する。３は
試料セルを透過した光、４は試料セル内の血球によって
散乱された光であり、５．６は光検出素子である。第２
図Ａは光検出器５の出力の変化を示しＰＩ、Ｐ２．Ｐ３
の３個の吸収ピークが見えている。このうちＰｌ、Ｐ２
は赤血球以外あ血球が光束２を横切ったときの光検出素
子５への入射光量の低下であり、Ｐ３は赤血球が光束２
を横切ったときの光量低下である。
従って選別レベルをａに設定して吸収ピークを検出し計
数すれば赤血球が計数できる。第２図Ｂは光検出素子６
の出力の変化を示し、３個のピークＱ１．Ｑ２．Ｑ３は
夫々Ｐｉ 、Ｐ２．Ｐ３に対応するもので、Ｑｌは白血
球が光束２を横切ったときの散乱によるもので散乱が強
く、第２図ＡでＰｌの吸収を示した粒子は白血球であっ
たことが判る。Ｑ２は血小板が光束、２を横切ったこと
による散乱を示し、白血球による散乱より弱い。Ｑ３は
赤血球による散乱できわめて弱い。従って選別レベルを
ｂに置いてピークを検出して計数すると白血球を計数す
ることができる。また選別レベルをＣに設定してピーク
を検出すれば白血球と血小板とを合せた数を計数でき、
ｂのレベルによる計数値を引算すれば血小板の数が求ま
る。第１図でＬは光検出器５の出力を吸光度信号に変換
し、レベルａ以上の吸収ピークを検出する回路、ＣＩは
検出されたピークを計数するカウンタ、Ｐは第２図のレ
ベルｂ以上及びＣ以上のピークを検出する回路、ｃ ２
、 ｃ、２’は夫々のピークを計数するカウンタであ
る。
数すれば赤血球が計数できる。第２図Ｂは光検出素子６
の出力の変化を示し、３個のピークＱ１．Ｑ２．Ｑ３は
夫々Ｐｉ 、Ｐ２．Ｐ３に対応するもので、Ｑｌは白血
球が光束２を横切ったときの散乱によるもので散乱が強
く、第２図ＡでＰｌの吸収を示した粒子は白血球であっ
たことが判る。Ｑ２は血小板が光束、２を横切ったこと
による散乱を示し、白血球による散乱より弱い。Ｑ３は
赤血球による散乱できわめて弱い。従って選別レベルを
ｂに置いてピークを検出して計数すると白血球を計数す
ることができる。また選別レベルをＣに設定してピーク
を検出すれば白血球と血小板とを合せた数を計数でき、
ｂのレベルによる計数値を引算すれば血小板の数が求ま
る。第１図でＬは光検出器５の出力を吸光度信号に変換
し、レベルａ以上の吸収ピークを検出する回路、ＣＩは
検出されたピークを計数するカウンタ、Ｐは第２図のレ
ベルｂ以上及びＣ以上のピークを検出する回路、ｃ ２
、 ｃ、２’は夫々のピークを計数するカウンタであ
る。
上の例では試料照射光束ｇ予＋１５ｎｍの単色光とした
が、照射光束は適宜の白色光とし、光束３．４の側に夫
々４１５ｎｍの波長の光を通すフィルタを挿入してもよ
い。
が、照射光束は適宜の白色光とし、光束３．４の側に夫
々４１５ｎｍの波長の光を通すフィルタを挿入してもよ
い。
第３図は本発明の他の実施例の概略を示す。ｌは第１図
におけると同じ試料セル、２は照射光束、３は透過゛光
束、４，４′は散乱光束である。照射光束２は白色光で
あり、光検出素子６の前面に４１５ｎｍの波長の光を透
過するフィルタＦ１が挿入してあり、光検出器６の出力
の変化を第４図Ｂに示す。これは第２図のＢと同じもの
になる。７は散乱光束４′を検出する光検出素子でその
前面には６００ｎｍの波長の光を透過するフィルタＦ２
か挿入しである。このｅｏｏｎｍの波長の光はヘモグロ
ビンによって殆んど吸収されない光であり、また他の血
球によっても吸収されない。第４図Ｃは光検出素子７の
出力の変化を示し、赤血球も白血球と同程度の散乱光を
与えている。第４図でαは白血球による散乱光のピーク
、βは血小板による散乱のピーク、γは赤血球による散
乱のピークである。Ｂに示す信号で選別レベルをす、ｃ
夫々に設けてピークを計数すれば前述したように白血球
と血小板の数が求まる。Ｃに示す信号（７の出力）に対
し選別レベルｄを設けてピークを計数すれば赤血球と白
血球の合計数が求まり、それから白血球数を引算すれば
赤血球数が求まる。或は選別レベルをｅに設定すると全
血球数が求まるから、これから白血球数と血小板数を引
算しても赤血球数が求まる。この構成では光検出器５は
不要であるが、光検出器５の前面に４１５ｎｍの光を通
すフィルタＦ３を挿入し、５の出力によって直接赤血球
数を求め、６．７の出力から求めた赤血球数と照合する
ことにより各種血球数の計数値の正確さをチェックする
ことがで参る。
におけると同じ試料セル、２は照射光束、３は透過゛光
束、４，４′は散乱光束である。照射光束２は白色光で
あり、光検出素子６の前面に４１５ｎｍの波長の光を透
過するフィルタＦ１が挿入してあり、光検出器６の出力
の変化を第４図Ｂに示す。これは第２図のＢと同じもの
になる。７は散乱光束４′を検出する光検出素子でその
前面には６００ｎｍの波長の光を透過するフィルタＦ２
か挿入しである。このｅｏｏｎｍの波長の光はヘモグロ
ビンによって殆んど吸収されない光であり、また他の血
球によっても吸収されない。第４図Ｃは光検出素子７の
出力の変化を示し、赤血球も白血球と同程度の散乱光を
与えている。第４図でαは白血球による散乱光のピーク
、βは血小板による散乱のピーク、γは赤血球による散
乱のピークである。Ｂに示す信号で選別レベルをす、ｃ
夫々に設けてピークを計数すれば前述したように白血球
と血小板の数が求まる。Ｃに示す信号（７の出力）に対
し選別レベルｄを設けてピークを計数すれば赤血球と白
血球の合計数が求まり、それから白血球数を引算すれば
赤血球数が求まる。或は選別レベルをｅに設定すると全
血球数が求まるから、これから白血球数と血小板数を引
算しても赤血球数が求まる。この構成では光検出器５は
不要であるが、光検出器５の前面に４１５ｎｍの光を通
すフィルタＦ３を挿入し、５の出力によって直接赤血球
数を求め、６．７の出力から求めた赤血球数と照合する
ことにより各種血球数の計数値の正確さをチェックする
ことがで参る。
第５図は本発明の他の実施例を示し、原理的には第３図
の例と同じである。この図では試料セルｌは紙面に平行
に画かれている。照射光束は後述するが約１２°の開き
角で試料セル１の中心部に収束せしめられている。試料
セルｌの透過光側に中央に孔のあいた４５°傾けた反射
鏡８が置かれ、試料を透過した非散乱光は鏡８のこの孔
を通過する。鏡８の上記孔は試料セルの中心から見た視
角よ が２Ｏ２程度であり、試料にかり散乱された光が孔の外
側に当って反射される。５．６．７は第８図の光検出素
子５，６．７に対応するもので、散乱光束９をハーフミ
ラ−１ｏで２つに分け、光検出器６の前面に４１５ｎｍ
の光を通すフィルタＦ１を置き、光検出器７の前面に６
００ｎｍの光を通すフィルタＦ２を置いである。Ｆ８は
４１５ｎｍの光を通すフィルタである。この構成で８個
の光検出器のうち一個は原理的には不要であるが、情報
処理上の冗長度を与え、各種血球の計数値の正確さをチ
ェックするのに役立つ。・ 上述した各実施例に共通な事項について述べる。
の例と同じである。この図では試料セルｌは紙面に平行
に画かれている。照射光束は後述するが約１２°の開き
角で試料セル１の中心部に収束せしめられている。試料
セルｌの透過光側に中央に孔のあいた４５°傾けた反射
鏡８が置かれ、試料を透過した非散乱光は鏡８のこの孔
を通過する。鏡８の上記孔は試料セルの中心から見た視
角よ が２Ｏ２程度であり、試料にかり散乱された光が孔の外
側に当って反射される。５．６．７は第８図の光検出素
子５，６．７に対応するもので、散乱光束９をハーフミ
ラ−１ｏで２つに分け、光検出器６の前面に４１５ｎｍ
の光を通すフィルタＦ１を置き、光検出器７の前面に６
００ｎｍの光を通すフィルタＦ２を置いである。Ｆ８は
４１５ｎｍの光を通すフィルタである。この構成で８個
の光検出器のうち一個は原理的には不要であるが、情報
処理上の冗長度を与え、各種血球の計数値の正確さをチ
ェックするのに役立つ。・ 上述した各実施例に共通な事項について述べる。
試料セルｌは第６図に示すような透明管で内径０゜５ｍ
ｍであり、適当な液が流しである。この管の上流側に毛
細管１１を挿入して、適当に稀釈した試料の血液をこの
毛細管を通して上記液の流れの中心に流れと平行に注入
する。この注入速度と上記液の流速とを調節して注入し
た試゛料の血液が約０．０２ｍｍ径の線状１２になって
試料セル１の中心線に沿い流れるようにする。血球の直
径は１０μｍ程度であり、血液の稀釈を適当にすると試
料セル内の試料血液の流れに乗って血球が１列に並んで
移動して行くようにすることができる。このように構成
された試料セルを照明する光束は第７図に示すように試
料血液の流れ１２の中心に長手方向が流れと直交する幅
４μ、長さ２０７１の矩形の領域Ｓを照明するように絞
られている。このように絞るには縦横の比率が５＝１の
矩形の窓に光源の光を集光し、この窓を顕微鏡の対物レ
ンズによって流れ１２の中心部に縮小投影する。この場
合４μの幅に光を収束するには光束の開き角が４ＱＱｎ
ｍの波長の光に対して１２°程度以上である。第５図の
構成ではこの光束の開き角が余り大きいと透過光と散乱
光の選別が困難になるので、照明光束の開き角を約１２
°としである。
ｍであり、適当な液が流しである。この管の上流側に毛
細管１１を挿入して、適当に稀釈した試料の血液をこの
毛細管を通して上記液の流れの中心に流れと平行に注入
する。この注入速度と上記液の流速とを調節して注入し
た試゛料の血液が約０．０２ｍｍ径の線状１２になって
試料セル１の中心線に沿い流れるようにする。血球の直
径は１０μｍ程度であり、血液の稀釈を適当にすると試
料セル内の試料血液の流れに乗って血球が１列に並んで
移動して行くようにすることができる。このように構成
された試料セルを照明する光束は第７図に示すように試
料血液の流れ１２の中心に長手方向が流れと直交する幅
４μ、長さ２０７１の矩形の領域Ｓを照明するように絞
られている。このように絞るには縦横の比率が５＝１の
矩形の窓に光源の光を集光し、この窓を顕微鏡の対物レ
ンズによって流れ１２の中心部に縮小投影する。この場
合４μの幅に光を収束するには光束の開き角が４ＱＱｎ
ｍの波長の光に対して１２°程度以上である。第５図の
構成ではこの光束の開き角が余り大きいと透過光と散乱
光の選別が困難になるので、照明光束の開き角を約１２
°としである。
本発明装置は上述したような構成で、血球の生理的な性
質によらず、光学的な性質だけを利用しているので、試
料の血液に対し格別な前処理を要せず単に適当に稀める
だけで血球の種類を光電的に識別できるのであり、識別
された各種血球の検出信号が電気的なパルスとして得ら
れるので、自動計数がきわめて容易にできる。
質によらず、光学的な性質だけを利用しているので、試
料の血液に対し格別な前処理を要せず単に適当に稀める
だけで血球の種類を光電的に識別できるのであり、識別
された各種血球の検出信号が電気的なパルスとして得ら
れるので、自動計数がきわめて容易にできる。
第１図は本発明の一実施例装置の平面図、第２図は同装
置における光検出器の出力を示すグラフ、第３図は本発
明の他の一実施例装置の平面図、第４図は同装置の光検
出器の出力を示すグラフ、第５図は本発明の更に他の一
実施例装置の側面図、第６図は上記各実施例に共通な試
料セルの側面図、第７図は同じく照明光束の断面と試料
との関係を示す斜視図である。 ■・・・試料セル、２・・・照明光束、３・・・透過光
、４・・・散乱光、５’、６．７・・・光検出素子、Ｆ
’１．Ｆ２゜Ｆ８・・・フィルタ、８・・・孔あき鏡、
ｌＯ・・・ノ＼−フミラー。
置における光検出器の出力を示すグラフ、第３図は本発
明の他の一実施例装置の平面図、第４図は同装置の光検
出器の出力を示すグラフ、第５図は本発明の更に他の一
実施例装置の側面図、第６図は上記各実施例に共通な試
料セルの側面図、第７図は同じく照明光束の断面と試料
との関係を示す斜視図である。 ■・・・試料セル、２・・・照明光束、３・・・透過光
、４・・・散乱光、５’、６．７・・・光検出素子、Ｆ
’１．Ｆ２゜Ｆ８・・・フィルタ、８・・・孔あき鏡、
ｌＯ・・・ノ＼−フミラー。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 Ｅｌｌ 血球透過光と血球による散乱光とにおいて、
ヘモグロビンの最大吸収波長付近の波長の光について測
光を行う手段と、上記透過光測光手段の出力より吸収ピ
ークを検出する手段と、上記散乱光測光手段の出力より
散乱強度のピークをレベル選別して検出する手段とより
なる血球種類識別装置。 （２）血球散乱光をヘモグロビンの最大吸収波長付近の
波長の光と各種血球によって顕著な吸収を受けない波長
の光とについて測光する手段と、これら両側光手段の出
力より夫々散乱強度ピークをレベル選別して検出する手
段とよりなり血球種類識別装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56211568A JPS58115346A (ja) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | 血球種類識別装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56211568A JPS58115346A (ja) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | 血球種類識別装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58115346A true JPS58115346A (ja) | 1983-07-09 |
Family
ID=16607933
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56211568A Pending JPS58115346A (ja) | 1981-12-29 | 1981-12-29 | 血球種類識別装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58115346A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0224557A (ja) * | 1988-07-12 | 1990-01-26 | Canon Inc | 粒子測定装置 |
| CN103134711A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-06-05 | 湖南省蔬菜研究所（辣椒新品种技术研究推广中心） | 一种从红干椒果实中快速提取与测定辣椒红色素的方法 |
| JP2014196958A (ja) * | 2013-03-29 | 2014-10-16 | シスメックス株式会社 | 血球分析装置および血球分析方法 |
| JP2015522165A (ja) * | 2012-07-05 | 2015-08-03 | ベックマン コールター， インコーポレイテッド | 白血球数の測定方法及び測定装置 |
| JP2016070658A (ja) * | 2014-09-26 | 2016-05-09 | シスメックス株式会社 | 血液分析装置および血液分析方法 |
-
1981
- 1981-12-29 JP JP56211568A patent/JPS58115346A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0224557A (ja) * | 1988-07-12 | 1990-01-26 | Canon Inc | 粒子測定装置 |
| JP2015522165A (ja) * | 2012-07-05 | 2015-08-03 | ベックマン コールター， インコーポレイテッド | 白血球数の測定方法及び測定装置 |
| CN103134711A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-06-05 | 湖南省蔬菜研究所（辣椒新品种技术研究推广中心） | 一种从红干椒果实中快速提取与测定辣椒红色素的方法 |
| JP2014196958A (ja) * | 2013-03-29 | 2014-10-16 | シスメックス株式会社 | 血球分析装置および血球分析方法 |
| JP2016070658A (ja) * | 2014-09-26 | 2016-05-09 | シスメックス株式会社 | 血液分析装置および血液分析方法 |
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