JPH11508603A

JPH11508603A - 植物から食用キサントフィル結晶を製造、単離及び精製する方法

Info

Publication number: JPH11508603A
Application number: JP9523608A
Authority: JP
Inventors: ロドニーエルオーシック; ディヴィッドジェイサンダース
Original assignee: ケミンフーズリミテッドカンパニー
Priority date: 1995-12-21
Filing date: 1996-09-24
Publication date: 1999-07-27
Anticipated expiration: 2016-09-24
Also published as: EP0904258A4; EP0904258B1; AU700719B2; ATE215059T1; DE69620258D1; DE69620258T2; EP0904258A1; IL124987A0; US5648564A; CA2239971C; CA2239971A1; JP3190686B2; NZ319825A; AU7243496A; WO1997023436A1; IL124987A

Abstract

(57)【要約】キサントフィル結晶、好ましくはマリゴールドフラワー花弁からのルテイン、ウォルフベリーからのゼアキサンチン又はトウガラシからのカプサンチン及びカプソルビンを製造、単離及び精製する方法を開示する。キサントフィルジエステル含有植物の抽出物を、プロピレングリコール及び水性アルカリの組成物中で鹸化して、キサントフィル結晶を形成する。結晶化は、有機溶媒を添加することなくなされる。結晶を単離し、精製する。そのようにして得た実質的に純粋なキサントフィル結晶は、ヒトが摂取するのに適しており、栄養補給剤として及び食物中の添加剤として使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】植物から食用キサントフィル結晶を製造、単離及び精製する方法技術分野本発明は、カロテノイド化合物を製造、単離及び精製する方法、より具体的には、ヒトが摂取するのに適した結晶形態の植物由来キサントフィル化合物を製造、単離及び精製する方法に関するものである。発明の技術背景カロテノイドは、炭化水素（カロテン）及びそれらの酸素化された、アルコール系の誘導体（キサントフィル）を含む。カロテンの代表例としては、β−カロテン、α−カロテン及びリコピンがある。キサントフィルの代表例としては、ルテイン、ゼアキサンチン、カプソルビン、カプサンチン、アスタキサンチン及びカンタキサンチンがある。カロテノイドは、果実及び野菜中に豊富であり、癌及び他のヒトの病気の予防用の抗酸化剤として大規模に研究されている。食用カロテノイドのうち、種々のタイプの癌の予防に対して重要な役割を果たすことが確認されたβ−カロテンが注目されている。より最近の調査では、他のカロテノイド、特にキサントフィルが強力な抗酸化能力を有し、かつ癌を含む病気の予防に有用であり得ることが分かった。例えば、ルテイン及びゼアキサンチンの摂取により、年齢に関連した黄斑変性において、４０％の低減が得られることが報告されている(Seddonら(1994年)，J．Amer． Med．Assoc．272(18): 1413-1420)。また、β−カロテンより高レベルの血清カロテノイドが、心臓病の出現率の低下に関連することが報告されている(Morris ら(1994年)，J．Amer．Med．Assoc．272(18): 1439-1441)。また、キサントフィルは、それらの黄から赤の色彩及びヒトの食物中での天然的な存在のため、食物用着色剤としての使用が見出されている。従って、栄養補給剤及び食物用添加剤として使用可能な、実質的に純粋なキサントフィルの必要性が高まっている。多くの植物組織には存在するが、他の植物色素を含まないカロテノイドは、大抵、花（マリゴールド）、果実（ベリー）及び根組織（ニンジン及びイエローポテト）から容易に得られる。炭化水素カロテンは、典型的には、植物組織内の雑色体において未結合で、遊離して存在する。キサントフィルは、典型的には、植物の雑色体中に、例えばパルミチン又はミリスチン酸等の酸の長鎖脂肪酸エステル（特にはジエステル）として存在する。商業的に入手可能な出発物質からキサントフィルを合成する化学的方法は公知だが、そのような方法は、過度に時間のかかるものであり、多数の工程を含み、経済的なキサントフィルの製造法は提供されていない。実質的に純粋なキサントフィルを大きなスケールで製造する一層経済的な手段は、キサントフィルを天然源から抽出、単離及び精製する方法である。しかしながら、キサントフィルを植物から単離する前述の方法では、多数の有機溶剤が使用される。また、前述の研究では、出発物質として、遊離ルテインを含む、商業的に入手可能な鹸化マリゴールド含油樹脂を使用し、その後、適切な溶剤を添加して、鹸化含油樹脂からルテインを結晶化する(Tcyczkowski及びHamiltonのPoultry Sci ．70(3): 651-654(1991年);米国特許第5,382,714 号)。また、精製ルテイン二脂肪酸エステルの製造は、米国特許第4,048,203 号に記載されている。葉のキサントフィルを得る方法は、H．StrainのLeaf Xanthophylls, Carnegie Institution，Washington，D．C．(1936年)に記載されている。葉において遊離状態で生じるキサントフィルを得ることを含む、記載の技術のうち、Strainは、 Physalis alkekengiのポッド（萼）に存在するキサントフィルジエステルから遊離キサントフィルを得ることを記載する。後者の製造（９９〜１１４頁）では、ほとんど乾燥されたポッドをミートグラインダーでカットして小片にし、その小片を石油エールで抽出した。抽出物を濃縮して少量にし、存在するキサントフィルエステルをアルコールカリで鹸化した。アルコールには表示はなかったが、前述のテキストからメタノールであると推測される。水をアルコール溶液に添加して、キサントフィルを沈澱させた。沈澱キサントフィルを、その後、メタノール又は石油エーテル等の補助溶媒及びクロロホルム（その後ピリジンを用いた）により数回結晶化した。 Strainにより記載された上述の手順は、食用キサントフィルの製造において複数の不利益を有している。第１に、キサントフィルジエステルを抽出するために使用する疎水性石油エーテルが、鹸化前に除去されず、沈澱疎水性キサントフィルに取り込まれ得る。第２に、メタノール（又はエタノールでさえ）等の一価アルコールの使用により、疎水性キサントフィルにより取り込まれ得る水不溶性脂肪酸メチル又はエチルエステルが形成され得る。そのような取込みは、非常に多くの再結晶化工程を必要とする原因となり得る。また、−１２℃及び−７０℃等の極低温がこの再結晶化に必要とされる。これらの方法の不利益は、キサントフィルが、単離及び精製される溶媒をいくらか保持し得ることである。また、これらの方法には、より多くの溶媒でのキサントフィルの洗浄が必要とされる。溶媒は、通常、高温で結晶を乾燥することにより除去することができる。しかし、ある場合には、溶媒の除去が困難であるか不可能である。単離された、精製キサントフィル生成物中の毒性有機溶媒の痕跡により、それがヒトの摂取に不適切なものとなる。有機溶媒を用いる方法の使用による他の不利益は、そのような溶媒が、取扱い困難であり、物理的及び化学的危険性が生じることである。そのような使用による更に他の不利益は、有機溶媒が、危険廃棄物であり、廃棄問題が生じることである。従って、毒性の又は危険性の有機溶媒を用いないで、食用の、実質的に純粋なキサントフィル（例えばルテイン又はゼアキサンチン）を製造する経済的な手段が必要とされる。これ以降に記載する方法により、そのような食用キサントフィルが提供される。本発明の概要本発明は、キサントフィル、好ましくはルテイン又はゼアキサンチンを、キサントフィルジエステル含有植物の抽出物から抽出、単離及び精製する方法に関するものである。植物は、好ましくはマリゴールドフラワー(マンジュギク等のセンジュギク属(Tagetes sp.))中のルテイン、ウォルフベリー(wolfberry)(Lycium barbarum等のクコ属)中のゼアキサンチン、又はコショウ属植物(Capsicum annum 等のトウガラシ属)中のカプサンチン及びカプソルビン等の所望のキサントフィルジエステルを高濃度で含むことが知られたものである。その方法は、有機溶媒を含まない、キサントフィルジエステルを含有する食物用の植物抽出物（含油樹脂: oleoresin)の使用を意図するものであり、即ち、含油樹脂は、有機溶媒を１％未満含む。抽出物を、ポリプロピレングリコール及び水性アルカリ（好ましくは水酸化カリウム）を含む組成物と混合して、含油樹脂とポリプロピレングリコールとで少なくとも７５重量％が占められた反応混合物を形成する。そのように形成された反応混合物を、約６５〜約８０℃の温度で、キサントフィルジエステルを鹸化し、結晶の形態の遊離キサントフィルを含む鹸化反応混合物を形成するのに十分な時間保持する。鹸化抽出物を、希釈量の水と混合して、水溶性不純物を溶解し、反応混合物の粘度を低減させる。希釈混合物を、穏やかに均一になるまで混合し、その後、ろ過して、キサントフィル結晶を採取する。採取したキサントフィル結晶を、温水で洗浄し、乾燥する。プロピレングリコール以外の有機溶媒は、キサントフィルジエステル含有含油樹脂からのキサントフィルの単離及び精製において使用しない。本発明は、いくつかの利点を有する。本発明の利点の１つは、単離又は結晶化の間に比較的毒性のある有機溶媒を使用せずに、ヒトが摂取するのに適した、実質的に純粋なキサントフィルを製造する方法が提供されることである。本発明の他の利点は、再結晶化が必要されずに、食用の、実質的に純粋なキサントフィルを製造する方法が提供されることである。本発明の更なる利点は、商業的に大きなスケールで行うのに経済的で簡単な、食用の、実質的に純粋なキサントフィルの製造方法が提供されることである。更なる利点が、以下の記載から当業者には明らかであろう。本発明の詳細な記載本発明によれば、キサントフィルジエステル含有植物、好ましくは所望のキサントフィルジエステルを高濃度で含むことが知られている植物から単離及び精製したキサントフィル、好ましくはルテイン、ゼアキサンチン又はカプサンチン及びカプソルビンが形成される。マリゴールドフラワー（マンジュギク）は天然に高濃度（公知）のルテインジエステルを１以上含むので良好なルテイン源であり、ウォルフベリー果実(Lycium barbarum)は高濃度のゼアキサンチンジエステルを含むので良好なゼアキサンチン源であり、またコショウ属植物(Capsicum annu m)はそのカプサンチン及びカプソルビンジエステル濃度が高いので良好なカプサンチン及びカプソルビン源である。所望のキサントフィルを高濃度で含むことが知られている他の植物もまた、利用することができる。目的の植物源は、エステル化された形態のキサントフィルを、モノ−又はジ− Ｃ_12-18長鎖脂肪酸（ラウリン酸、ミリスチン酸、オレイン酸、リノール酸及びパルミチン酸等）として含む。マリゴールフラワー中のルテイン、ウォルフベリー中のゼアキサンチン、及びコショウ属植物中のカプサンチン及びカプソルビンは、キサントフィルジエステルとして存在する。遊離又は非エステル化キサントフィルは、他の植物（ホウレンソウ、ブロッコリー、ケール及びトウモロコシ等）中に見出され得る。キサントフィルエステルを、植物から、好ましくは花、果実又は根から、適切な有機溶媒又は抽出物から容易に除去可能な溶媒の混合物を用いて抽出する。所望のキサントフィル源としての花、根及び果実の使用により、クロロフィル等の他の色素からのキサントフィルの分離についての困難が回避される。本発明のある実施態様においては、商業的に入手可能な乾燥した粉砕(ground) マリゴールドフラワー（マンジュギク）をルテイン源として使用する。他の実施態様では、ウォルフベリー果実(Lycium barbarum)をゼアキサンチン源として使用し、一方、トウガラシ(Capsicum annum)をカプサンチン及びカプソルビン源として使用する。植物からカルテノイドを抽出するために使用する有機溶媒は、メタノール、アセトン、エチルアセテート、ジエチルエーテル、石油エーテル、ヘキサン、ヘプタン、クロロホルム及びテトラヒドロフランを含む。本発明の説明的な実施態様の１つにおいては、ルテインジエステルを、乾燥マリゴールドフラワーからヘキサンにより抽出する。本発明の他の説明的な実施態様では、ゼアキサンチンジエステルを、乾燥ウォルフベリーからヘキサン及びエチルアセテートにより抽出する。抽出は、当該技術分野において公知の手順に従って行う。溶剤を除去して、キサントフィルエステルを高濃度含み、抽出有機溶媒の存在しない割合が約９９％（好ましくは約99.9％）である、即ち、有機溶媒を約１重量％未満（好ましくは約0.1重量％未満）含む抽出物を得る。得られた溶媒のない抽出物は、当該技術分野において含油樹脂と呼ばれる。キサントフィル結晶の回収のために予め使用されるプロピレングリコールや数種の溶媒の典型的な毒性は、いくつかの出典から入手できる。メルクインデックス(１１版、Merck & Co.，Inc.，Rahway，NJ(1989年))からラットにおける比較経口的毒性を、ＬＤ₅₀値として以下の表に記載する。報告されたラットの毒性溶媒ＬＤ₅₀（ml/kg）プロピレングリコール２５エチルアセテート１１．３エチルアルコール１０．６〜７．６クロロホルム２．１８ピリジン１．５８本発明では、そのように形成した含油樹脂を、プロピレングリコール（１，２ −プロパンジオール）及び水性アルカリ、好ましくは水酸化カリウムの混合により鹸化する。驚くべきことに、水性プロピレングリコールを含有する鹸化含油樹脂中に形成された遊離キサントフィルが結晶状態で存在することを見出した。結晶は、顕微鏡で明白に観察された。従って、キサントフィルの結晶化は、予め行われた種々の有機溶媒の添加によるのではなく、鹸化反応により直接的に達成された。また、鹸化マリゴールド含油樹脂を出発物質として使用してルテインを単離する前述の方法（Tcyczkowski 及びHamiltonのPoultry Sci. 70(3): 651-654( 1991年);米国特許第5,382,714号）とは異なり、有機溶媒の添加により鹸化マリゴールド含油樹脂からルテインを結晶化する必要がなかった。大きなサイズの結晶が、所望の純度でキサントフィルを得るために重要である。所望の大結晶（平均サイズ約0.01〜約0.1mm）を得るために、鹸化反応混合物の４つの成分の濃度について、好ましくは、含油樹脂を約３５〜約５０重量％で、プロピレングリコールを約３０〜４５重量％で、水酸化カリウムとしての水溶性アルカリを約５〜約１０重量％で、水を約７〜約１５重量％で、初期の混合成分（即ち反応前の成分）として存在させる。含油樹脂とプロピレングリコールとで、鹸化反応混合物の少なくとも約７５重量％が構成される。より好ましくは、上記の重量比は、その記載順で約４：４：１：１であるとして単に表されてもよい。特に好ましい実施態様においては、その重量比は、含油樹脂４１％、プロピレングリコール４１％、水性水酸化カリウム（水５５％）１８重量％である。これらの比は、使用する植物体により変動し得る。また、鹸化反応は、好ましくは、緩やかに進行させる。典型的な実施態様においては、約1000kgのマリゴールド抽出物と、該抽出物を溶解又は微細分散させるプロピレングリコールとを混合する。混合物を約５０〜約６０℃の範囲内の温度、好ましくは約５５℃に加熱して、室温でモーターオイルと同様の粘度を有する均一液体を得る。水性水酸化カリウム溶液を、ゆっくりと均等に、鹸化反応混合物を形成するための時間にわたり、溶解／分散抽出物（含油樹脂）に添加する。少なくとも１０分、好ましくは３０分、上記成分量での鹸化反応混合物形成に時間をかけ、混合物を、存在するキサントフィルジエステルを鹸化するのに十分な時間（少なくとも３時間、好ましくは１０時間）穏やかに攪拌しながら保持する。アルカリ溶液を最初に含油樹脂に添加する時、温度を約７０℃に上昇させ、更に加熱を施してその温度を約６５〜約８０℃、好ましくは約７０℃で全反応期間中（即ち、キサントフィルジエステルの鹸化が完了するまで）保持する。鹸化の完了は、後述する薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）等により、容易に決定することができる。また、水酸化ナトリウムを、鹸化のために使用してもよいが、カリウム石鹸が、一般にナトリウム石鹸よりも水溶液中での溶解性が高いために、より望ましい。本発明の好ましい実施態様において使用するアルカリは、水酸化カリウム４５重量％である水性苛性カリである。鹸化反応により、キサントフィルジエステルから脂肪酸が分離し、結晶形態の遊離キサントフィル、脂肪酸のカリウム又はナトリウム石鹸が生じる。プロピレングリコールモノ脂肪酸エステルが鹸化の間に形成されうる。その物質は、存在する場合、おそらくその脂肪酸のモノメチル又はモノエチルと比べ水溶解性が高いので、キサントフィルの結晶化の妨げにはならない。鹸化反応混合物を、その後、低イオン強度（脱イオン）水、好ましくは温水（例えば６０〜８０℃）との混合により希釈して、該反応混合物の粘度を更に低減させ、かつ水溶性不純物を溶解させる。冷水を使用するなら、更なる加熱を希釈反応混合物に施して、約６０〜約８０℃の温度範囲、好ましくは約７０℃の温度で保持する。温度があまり低すぎると、希釈反応混合物が非常に粘稠なものとなり、ろ過することができない。温度があまり高すぎると、希釈反応混合物が泡立ち、結晶の回収に支障がでる。十分な水を添加して、鹸化反応混合物を約５〜約２５容量％含む希釈反応混合物を形成する。従って、反応混合物の容量あたり約３〜約１９容量の希釈水を添加する。好ましい実施態様では、その比は、希釈水約９０容量％に対して鹸化反応混合物約１０容量である。水の添加により形成した希釈反応混合物を、均一になるまで穏やかに攪拌し、その後、ポンプ又は他の供給方法で、結晶を採取するろ過装置に入れる。当該技術分野において公知のろ過装置のいずれを用いてもよい。本発明の好ましい実施態様においては、混合物を、最大細孔サイズ３５〜４０μｍを有するバスケット型遠心ろ過機に供給する。抽出物中の大抵の化学不純物は、形成された脂肪酸石鹸自身の溶解性及び幅広い範囲の水性組成物におけるそれらの可溶化力、並びに同一水性組成物におけるキサントフィル結晶の不溶性のために、ろ過工程の間に取り除かれる。また、アントシアニン及び水溶性フラボノイド等の他の水溶性不純物も取り除かれる。ろ過後、採取した結晶を、約７０〜約９０℃の温度範囲、好ましくは約８５℃ の低イオン強度（脱イオン）水で十分に洗浄する。使用した温水温度で、その温水により、鹸化反応において使用された水酸化カリウム又はナトリウム、残留カリウム石鹸及びプロピレングリコール等の存在し得る化学的汚染物の大抵のものは取り除かれる。洗浄された結晶を、凍結乾燥、回転減圧乾燥等の適切な方法により、又は加熱窒素でのパージにより乾燥する。ＵＶ／可視分光測光法によれば、この方法により得られた結晶は、全カルテノイドを約７０〜８５％含み、実質的に純粋なキサントフィルであるとみなされる。ルテインがマリゴールド抽出物から単離される本発明の実施態様においては、カロテノイドは、定量ＨＰＬＣ分析により測定されたように、８５〜９５％の全トランス形ルテイン、0.2〜1.5％のその幾何異性体、2.5〜8.0％の全トランス形ゼアキサンチン、1.0％未満のα−及びβ−クリプトキサンチン及びその痕跡量の他のカロテノイド（ネオキサンチン及びビオラキサンチン）からなる。これらの他のカロテノイドの低レベルでの存在は何ら問題なく、なぜなら、それら他のカロテノイドが、食物起源のものであり、かつルテイン濃度に対して非常に高濃度でヒトの血清及び血しょう中に見出されているからである。ルテイン結晶は、約0.5〜5.0％の水を含み、また、該結晶から完全に洗浄されなかった脂肪酸石鹸及び／又は脂肪酸を痕跡量含んでいてもよい。しかしながら、この方法により得られた実質的に純粋なキサントフィルは、毒性有機溶媒（即ち、プロピレングリコール以外の溶媒）又は他の毒性化合物の残部を含まず、ヒトが摂取するのに適したものである。そのようにして形成された乾燥キサントフィル結晶は、典型的には、食物中での又は食用着色剤としての使用のために食用トリグリセリドオイルと混合物する。混合物のキサントフィル含量は、典型的には、約0.1〜約３５重量％とする。典型的な食用オイルとしては、カンデリラ(candelilia)油、ココナッツ油、タラ肝油、綿実油、メンヘーデン油、オリーブ油、パーム油、トウモロコシ油、大豆油、ピーナッツ油、けしの実油、ベニバナ油及びヒマワリ油が挙げられる。比較的高濃度の不飽和脂肪酸を有するオイルの使用が好ましく、即ち、約１００〜１５０のヨウ素価を有するオイルの使用が好ましい。混合は、典型的には、周知であるような高剪断混合装置を用いて行う。また、エタノール及びα−トコフェロール等の補助溶媒及び添加剤が、それぞれ、米国特許第5,382,714 号に記載されたように存在していてもよい。以下の実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明を限定するものではない。本発明を行う最良の実施態様実施例１：マリゴールドフラワーの花弁からのルテインの単離抽出商業的に入手可能な乾燥した粉砕マリゴールドフラワーの花弁約1000kgを、ペレット化し、温かいヘキサン（約６０℃）40,000リットルを用いて抽出した。ペレットを１時間浸け、排出した。この手順を８〜１０回繰り返して、前記フラワー中に存在する色素の完全抽出を確実なものとした。ヘキサン抽出物を組合せ、ヘキサンを減圧及び加熱を用いて蒸発させた。ヘキサンを取り除いた後、約100k gの油状抽出物（含油樹脂）が残った。鹸化／結晶化反応マリゴールド含油樹脂（1140 lbs、40.9％）を、攪拌しながら、１，２−プロパンジオール(1140 lbs 、40.9％)と混合し、５５℃に加熱して、均一で攪拌可能な液体を形成した。水酸化カリウム４５重量％を含む水性苛性カリ（540 lbs 、18.2％）を、ゆっくりと均等に３０分間かけて添加した。反応温度が７０℃に上昇し、穏やかな攪拌をしながら７０℃で１０時間保持した。ルテイン結晶が、上記時間内に、この鹸化反応混合物中に現れた。ルテイン結晶の採取上記反応により製造した鹸化含油樹脂(鹸化反応混合物；232 lbs)の一部を脱イオン水を用いて１０％に希釈した。このブレンドを７０℃に加熱し、均一になるまで攪拌し、最大細孔サイズ３５〜４０μｍのろ過機を備えた３０”TOLHURST （商標）遠心分離機（中央アメリカのSanteeのKetema Process Equipmentから入手可能）に供給した。採取したルテイン結晶を、８５℃の脱イオン水(560 lbs) を用いて、該温水をノズルを通して紡糸湿潤ケーク(spinning wet cake)上にスプレーすることにより洗浄した。洗浄後、湿潤結晶（28 lbs）をステンレス鋼トレー上に広げ、VIRTIS（商標）凍結乾燥機（ニューヨーク州のGardinerのVirtis Co.から入手可能）中に置き、以下の乾燥条件で乾燥した：凍結−４０℃、吸引減圧１００ｍトル、トレーの加熱２０℃、４８時間。結晶の分析の結果を以下に示す：結晶の乾燥重量 3.63ｋｇ全カロテノイド濃度 79.0％（ＵＶ／可視分光測光法）ルテイン（調整ＨＰＬＣ^*） 73.6％水分濃度（水） 1.28％ ^*全カロテノイドの93.1％を全トランス形ルテインとして分析カロテノイドの回収は、出発含油樹脂中に存在する全カロテノイドの５９％であった。乾燥結晶は、高剪断混合機を用いてベニバナ油とブレンドダウン(blend down)した。ベニバナ油中の最終ルテイン生成物は、全トランス形ルテインを２０％含んでいた。カプサンチン及びカプソルビン結晶の単離及び採取粉砕マリゴールドフラワーの花弁含油樹脂の代わりにトウガラシの乾燥レッドペッパーからの含油樹脂を用いた同様の方法により、カプサンチン及びカプソルビン結晶の混合物を得た。実施例２：マリゴールトフラワーの花弁からのルテインの単離鹸化／結晶化反応この実験は、反応混合物に、30.4重量％の１，２−プロパンジオール(848 lbs )及び19.4重量％の水性水酸化カリウム(４５％ＫＯＨ；542 lbs)と混合されたマリゴールド含油樹脂（1401 lbs）を50.2重量％含ませた以外は、実施例１と同様の方法を用いて行った。また、上記反応により製造した鹸化含油樹脂(462 lbs)は、脱イオン水により2 0.4容量％に希釈し、この希釈ブレンドを、最大細孔サイズ２５〜３０μｍのろ過機を備えた１６”TOLHURST（商標）遠心分離機に供給し、ろ過した。結晶の分析により、全カロテノイド濃度が実施例１よりも低い、64.7％であることが分かった。実施例３：ウォルフベリー(Lycium barbarum)からのゼアキサンチンの抽出、単離及び精製抽出７５ｇのベリーを２００ｇの水を用いて水和及び均一化した。種をろ過により除去した。得られた材料を、遠心分離にかけて、カロテノイド含有ペレットを形成した。過剰水をデカントした。ペレットを広げ、熱及び空気を用いて乾燥した。乾燥材料を、細かく粉砕し、全カロテノイド含量についての分析により、6.46 ｇ／ｋｇ含むことが分かった。この材料のごく一部（６ｇ）を、各乾燥果実ペレット２ｇについてヘキサン及びエチルアセテート各溶剤１００ｍｌを用いて抽出した。これらの抽出は、５０ ℃で数時間行った。この抽出物を、組合せて、ろ過し、その後、見掛け上の乾燥 (apparent dryness)まで減圧下で回転蒸発して、有機溶剤を含まない鹸化用含油樹脂を形成した。鹸化／結晶化約１ｇの乾燥含油樹脂をプロピレングリコールに懸濁した。この混合物0.5ｇに対し、水性水酸化カリウム４５重量を添加した。この混合物を、小さな電磁攪拌棒を用いて混合し、ホットプレート上で約７０℃に加熱した。小アリコートを反応期間中に取り出し、鹸化の程度の定性測定のため及び顕微鏡観察のために溶離溶媒としてヘキサン及びアセトンの混合物（３：１の容量）及びシリカゲルを用いるＴＬＣ分析に付した。ＴＬＣにより、３時間後に高い程度の鹸化が示された。顕微鏡観察により、反応の進行後、ゼアキサンチン結晶の形成が示された。前述の記載及び実施例は、説明のためのものであって、限定のためのものではない。本発明の精神及び範囲内での更なる他の変更が可能であり、当該技術分野における当業者には明らかであろう。

【手続補正書】【提出日】１９９８年１１月５日【補正内容】請求の範囲１．キサントフィルジエステル含有植物の含油樹脂からキサントフィル結晶を製造する方法であって、以下の工程： (a)前記含油樹脂とプロピレングリコールとを混合し、約５０〜約６０℃の温度で加熱して均一液体を形成すること、 (b)水酸化ナトリウム又はカリウムの水性アルカリ溶液と前記均一液体とを混合して、初期混合成分として含油樹脂約３５〜約５０重量％、プロピレングリコール約３０〜約４５重量％、水酸化カリウムとしてのアルカリ約５〜約１０重量％及び水約７〜約１５重量％から本質的になる鹸化反応混合物であって、該含油樹脂とプロピレングリコールとの合計重量が該反応混合物の少なくとも７５重量％を占める鹸化反応混合物を形成すること、 (c)キサントフィルジエステルを鹸化し、かつキサントフィル結晶を含む鹸化反応混合物を形成するのに十分な時間、約６５〜約８０℃の温度で前記鹸化反応混合物を保持すること、 (d)鹸化反応混合物の容量あたり約３〜約１９容量の水を温度約６０〜約８０ ℃で混合して、キサントフィル結晶を含む希釈反応混合物を形成すること、 (e)前記希釈反応混合物を均一となるまで穏やかに混合すること、 (f)キサントフィル結晶を前記希釈反応混合物から採取すること、及び (g)採取したキサントフィル結晶を洗浄し、その後乾燥することを含むことを特徴とする該方法。２．植物抽出物がマリゴールドフラワー（センジュギク属）からのものであり、キサントフィルがルテインである請求項１に記載の方法。３．植物抽出物がウォルフベリー（クコ属）の果実からのものであり、キサントフィルがゼアキサンチンである請求項１に記載の方法。４．含油樹脂：アルコール：アルカリ：水の割合が、その順でおよそ４：４：１：１である請求項１に記載の方法。５．アルカリが水酸化カリウムである請求項１に記載の方法。６．鹸化反応混合物を少なくとも３時間保持する請求項１に記載の方法。７．鹸化反応混合物の水に対する容量割合が１：９である請求項１に記載の方法。８．前記乾燥キサントフィル結晶と食用トリグリセリドオイルとを混合して、約 0.1〜約３５重量％のキサントフィルを含む混合物を形成する更なる工程を含む請求項１に記載の方法。

Claims

【特許請求の範囲】１．キサントフィルジエステル含有植物の含油樹脂からキサントフィル結晶を製造する方法であって、以下の工程： (a)前記含油樹脂とプロピレングリコールとを混合し、約５０〜約６０℃の温度で加熱して均一液体を形成すること、 (b)水酸化ナトリウム又はカリウムの水性アルカリ溶液と前記均一液体とを混合して、初期混合成分として含油樹脂約３５〜約５０重量％、プロピレングリコール約３０〜約４５重量％、水酸化カリウムとしてのアルカリ約５〜約１０重量％及び水約７〜約１５重量％からなる本質的に鹸化反応混合物であって、該含油樹脂とプロピレングリコールとの合計重量が該反応混合物の少なくとも７５重量％を占める鹸化反応混合物を形成すること、 (c)キサントフィルジエステルを鹸化し、かつキサントフィル結晶を含む鹸化反応混合物を形成するのに十分な時間、約６５〜約８０℃の温度で前記鹸化反応混合物を保持すること、 (d)鹸化反応混合物の容量あたり約３〜約１９容量の水を温度約６０〜約８０ ℃で混合して、キサントフィル結晶を含む希釈反応混合物を形成すること、 (e)前記希釈反応混合物を均一となるまで穏やかに混合すること、 (f)キサントフィル結晶を前記希釈反応混合物から採取すること、及び (g)採取したキサントフィル結晶を洗浄し、その後乾燥することを含むことを特徴とする該方法。２．植物抽出物がマリゴールドフラワー（センジュギク属）からのものであり、キサントフィルがルテインである請求項１に記載の方法。３．植物抽出物がウォルフベリー（クコ属）の果実からのものであり、キサントフィルがゼアキサンチンである請求項１に記載の方法。４．含油樹脂：アルコール：アルカリ：水の割合が、その順でおよそ４：４：１：１である請求項１に記載の方法。５．アルカリが水酸化カリウムである請求項１に記載の方法。６．鹸化反応混合物を少なくとも３時間保持する請求項１に記載の方法。７．鹸化反応混合物の水に対する容量割合が１：９である請求項１に記載の方法。８．前記乾燥キサントフィル結晶と食用トリグリセリドオイルとを混合して、約 0.1〜約３５重量％のキサントフィルを含む混合物を形成する更なる工程を含む請求項１に記載の方法。