CN106543769A - 枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法 - Google Patents

枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及植物提取物领域，具体是涉及一种以枸杞子为原料，提取制备玉米黄质为主的类胡萝卜素类等单体色素及其制备方法。本发明提供了一种以枸杞子为原料，通过提取制备、分离、纯化、精制等步骤，直接得到以玉米黄质单体为主的不同纯度的类胡萝卜素类色素提取物及其制备方法。无需经过先提取类胡萝卜素酯，再皂化水解得到单体素色的繁复过程；该制备方法具有制备工艺简单，易于实施，使用溶剂简单，环保污染小，成本低，适合大规模工业化生产等特点；所得到的以玉米黄质为主的类胡萝卜素单体色素纯度高，提取率高，溶剂残留小。

Description

枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法
技术领域
本发明涉及植物提取物领域，具体是一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法。
背景技术
随着人们对食品安全的不断重视，天然色素替代人工合成色素作为食品添加剂越来越成为一种趋势。天然色素主要来源于天然植物的根、茎、叶、花、果实和动物、微生物等的可以食用的色素，其中大部分又来源于天然植物。绝大多数植物色素无副作用，安全性高，多数是一类生物活性物质，是植物药和保健食品中的功能性有效成分，在医药、食品、烟草、化妆品、养殖、纺织等行业中广泛使用。
枸杞（Lycium barbartum L.）是茄科枸杞属的多分枝灌木植物，其干燥成熟果实枸杞子为我国传统名贵中药材，是国家卫生部第一批列为药食同源品种之一，在我国已有2000多年的用药历史，也是享誉海内外的滋补食疗珍品。其味甘，性平，有滋补肝肾，益精明目的功效和调节机体免疫力、延缓衰老、抗脂肪肝等功能。现代医学、营养学和药理学研究表明枸杞果中的主要生物活性物质之一是类胡萝卜素类天然色素，具有极高的药用价值和营养价值。
枸杞子中的色素主要是类胡萝卜素类的色素，占干果重的0.03%～0.5%，其中主要的类胡萝卜素是以脂肪酸酯形式存在的玉米黄质酯（玉米黄质双棕榈酸酯、玉米黄质单棕榈酸酯、β-隐黄质棕榈酸酯等），而游离的玉米黄质单体很少。玉米黄质具有很强的单线态氧清除能力，主要集中在入射光最强的视网膜黄斑区中心。流行病学研究显示，短期增加玉米黄质摄入量，可以使黄斑色素增加，从而增强黄斑区对抗有害物质和光射线损害的能力，预防和减缓老年性黄斑变性（AMD）。玉米黄质摄入量高的人群比低摄入量人群患白内障的可能性降低20%左右。此外，玉米黄质还具有预防心血管疾病，减缓动脉硬化进程；防止紫外线照射对上皮细胞的DNA破坏；防止脂质过氧化从而抑制肿瘤的生长，减少癌症的发生和提高机体免疫等重要生理功能。玉米黄质目前无法人工合成，人体自身也不能合成玉米黄质，只能膳食摄取，而由于膳食来源的限制以及膳食中玉米黄质含量太低，制备高纯度玉米黄质的规模化生产技术是亟待解决的关键问题。
目前，从枸杞中提取玉米黄质主要采用传统溶剂萃取法和超临界CO2萃取法，超声提取、酶法等制备工艺，上述方法大都是先提取出含玉米黄质类胡萝卜素的混合油脂，再对该油脂进行皂化、分离、纯化，反应制备时间过长，步骤繁琐，损失较大，最后得到玉米黄质单体含量也不高。
从枸杞、枸杞渣粕中提取玉米黄质的方法，专利号CN201110406665.9、公开号CN103130698B，介绍了以乙醇为夹带剂进行超临界二氧化碳萃取，得到玉米黄质提取物，该方法得到的是“玉米黄质浸膏”实际为玉米黄质酯，并且采用超临界二氧化碳萃取的方法，生产成本较高。
高纯度枸杞玉米黄质棕榈酸酯的制备方法，专利号CN201410498454.6、公开号CN105503681A，采用丙酮提取，柱分离，石油醚和乙醇的混合溶剂极性梯度洗脱，乙酸乙酯萃取，超临界二氧化碳萃取，得到是玉米黄质棕榈酸酯，过程复杂繁琐，实用溶剂多样，生产成本高且不易实现大规模制备。
一种提取富集枸杞子中玉米黄质的方法，专利号CN201510647650.X、公开号CN105130867A，采用亚临界流体萃取，乙酸乙酯萃取，大孔吸附树脂洗脱，所得产物仍是玉米黄质酯，其过程使用的溶剂也较为复杂，制备过程复杂，成产成本高，不易实现大规模制备。
一种枸杞色素饮片及其制备方法，专利号CN201510006507.2、公开号CN104606365A，其中枸杞色素的提取采用乙酸乙酯:乙醚（v/v=1/1）混合溶剂进行抽提，浓缩、干燥、灭菌后制得，其所提取枸杞色素的也为枸杞色素的酯，并非单体，使用溶剂危险，毒性较大。
一种枸杞色素提取物及其制备方法，专利号CN201510711042.0、公开号CN105232774A，需要对枸杞超微粉碎，采用超临界CO 2萃取，活性炭吸附、解吸附，干燥后制得，其所提取枸杞色素的仍为枸杞色素的酯，制备过程较为复杂，生产成本较高，不易大规模制备。
一种含类胡萝卜素单体的浓缩物及其制备方法与它的用途，专利号CN201110453746.4、公开号CN102586377A，其中公布了使用枸杞提取物制备类胡萝卜素浓缩物，然后通过酶解48小时的生物反应方法制得玉米黄质单体，且只得到了枸杞中的玉米黄质一种类胡萝卜素，其它类胡萝卜素被损失或未被提取。
发明内容
本发明的目的在于提供一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，以枸杞子为原料，通过同步皂化提取工艺，分离纯化，直接得到以玉米黄质单体为主的类胡萝卜素类色素不同纯度提取物的制备方法，无需经过先提取类胡萝卜素酯，再皂化水解得到单体素色的繁复过程。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案为：
枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为180~300μm；
B、提取液制备
质量浓度95~100%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为2~8g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5~15混合添加，升温至40~60℃提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度85%的H3PO4溶液或质量浓度30%的HCl溶液，调节PH值至6.8~7.2，静置8~12小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用真空浓缩装置或减压旋蒸装置，浓缩倍率15~20倍，负压浓缩压力-0.06~-0.08Mpa，温度在35~45℃之间，浓缩物进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，压力-0.06~-0.08Mpa，干燥时间为6~10h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为12~24h，得到枸杞色素Ⅱ；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%~40%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1:1~4混合添加，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，干燥时间为2~4h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为10~16h，得到枸杞色素Ⅲ；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：3~5混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：1~3添加，静置6~8小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为55~58℃，干燥时间为1~3小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷、1,2-二氯乙烷、丁烷和石油醚其中一种，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：0.5~2混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
步骤C中枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5混合添加，升温至55~58℃，提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液。
步骤C中提取反应180min。
步骤F中枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%的乙醇溶液制成混悬溶液。
步骤F中枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1: 2混合添加。
步骤G的固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：1.5混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
本发明的有益效果为：
枸杞色素Ⅲ为以玉米黄质单体为主的类胡萝卜素类色素混合物，UV测定枸杞色素含量为45%~60%，其中HPLC测定玉米黄质含量占枸杞色素（总类胡萝卜素）总量的83%~92%。枸杞色素Ⅳ为以玉米黄质单体为主的类胡萝卜素类色素混合物，UV测定枸杞色素含量为85%~95%，其中HPLC测定玉米黄质含量占枸杞色素（总类胡萝卜素）总量的88%~95%。
该制备方法具有制备工艺简单，易于实施，使用溶剂简单，环保污染小，成本低，适合工业化大规模生产等特点；所得到以玉米黄质为主的类胡萝卜素单体色素纯度高，提取率高，溶剂残留小。
通过与现有技术对比，本专利的优势在于，本专利为化学反应，采用步骤C同步皂化提取工艺，皂化水解3小时内完成，所用时间短；纯化、制备过程简单易行，加入纯化试剂，用质量浓度20%~40%的乙醇纯化后即可得到较高纯度的枸杞色素，过滤即可得到较高纯度的枸杞色素，更加适合工业化大规模生产，有效降低成本；所得枸杞色素为以玉米黄质为主的类胡萝卜素类的混合物，尽可能的保全了枸杞中的各种类胡萝卜素单体，包括玉米黄质、叶黄素、β-胡萝卜素等，其中玉米黄质单体含量占枸杞色素（总类胡萝卜素）总量的85%~95%。
附图说明
图1为试样液紫外扫描图；
图2为现有技术方法提取的枸杞色素的色谱图；
图3为发明的方法提取的枸杞色素的色谱图；
图4为本发明色素提取时间效果示意图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但是，本发明的保护范围并不只限于实施例所覆盖的范围，而是由权利要求加以限定。
枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为180~300μm；
B、提取液制备
质量浓度95-100%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为2~8g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5~15混合添加，升温至40~60℃提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度85%的H3PO4溶液或质量浓度30%的HCl溶液，调节PH值至6.8~7.2，静置8~12小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用真空浓缩装置或减压旋蒸装置，浓缩倍率15~20倍，负压浓缩压力-0.06~-0.08Mpa，温度在35~45℃之间，浓缩物进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，压力-0.06~-0.08Mpa，干燥时间为6~10h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为12~24h，得到枸杞色素Ⅱ；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%~40%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1:1~4混合添加，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，干燥时间为2~4h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为10~16h，得到枸杞色素Ⅲ；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：3~5混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：1~3添加，静置6~8小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为55~58℃，干燥时间为1~3小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷、1,2-二氯乙烷、丁烷和石油醚其中一种，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：0.5~2混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
步骤C中枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5混合添加，升温至40~60℃，提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液。
步骤C中提取反应180min。
步骤F中枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%的乙醇溶液制成混悬溶液。
步骤F中枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1: 2混合添加。
步骤G的固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：1.5混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
实施例1
枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为180~300μm；
B、提取液制备
质量浓度95%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为2g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5混合添加，升温至40℃提取反应1小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150rpm，超声功率150w，频率30MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度85%的H3PO4溶液，调节PH值至6.8，静置8小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤，过滤目数270目，加压过滤压力0.06Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ，UV测定枸杞色素含量为0.0088%；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用真空浓缩装置，浓缩倍率15倍，温度在35℃，浓缩物进行真空干燥，真空干燥的温度在55℃之间，压力-0.06Mpa，干燥时间为6h，得到枸杞色素Ⅱ，UV测定枸杞色素含量为0.55%；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1:1混合添加，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤，过滤目数270目，加压过滤压力0.06Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行真空干燥，真空干燥的温度在55℃，干燥时间为2h，得到枸杞色素Ⅲ，UV测定枸杞色素含量为54.58%；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：3混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：1添加，静置6小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤，过滤目数270目，加压过滤压力0.06Mpa，进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为55℃，干燥时间为1小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用1,2-二氯乙烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：0.5混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ，UV含量测定色素含量为92.86%，HPLC测定玉米黄质含量为90.02%，叶黄素含量为1.63%，β-胡萝卜素含量为0.81%。
实施例2
枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为300μm；
B、提取液制备
质量浓度100%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为8g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1: 15混合添加，升温至60℃提取反应5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速200rpm，超声功率350w，频率80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度30%的HCl溶液，调节PH值至7.2，静置12小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行负压抽滤，过滤目数400目，负压抽滤压力-0.06Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ，UV测定枸杞色素含量为0.0071%；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用减压旋蒸装置，浓缩倍率20倍，负压浓缩压力-0.08Mpa，温度在45℃之间，浓缩物进行冷冻干燥，冷冻干燥温度-40℃，压力100Pa，干燥时间为24h，得到枸杞色素Ⅱ，UV测定枸杞色素含量为0.46%；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度40%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1: 4混合添加，离心转速8000rpm离心处理5min后进行负压抽滤，过滤目数400目，负压抽滤压力-0.06Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行冷冻干燥，冷冻干燥温度-40℃，压力100Pa，干燥时间为16h，得到枸杞色素Ⅲ，UV测定枸杞色素含量为47.05%；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：5混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：3添加，静置8小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行负压抽滤，过滤目数400目，负压抽滤压力-0.06Mpa，进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为58℃，干燥时间为3小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用丁烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1： 2混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ，UV含量测定色素含量为88.91%，HPLC测定玉米黄质含量为87.41%，叶黄素含量为1.20%，β-胡萝卜素含量为1.34%。
实施例3
枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为250μm；
B、提取液制备
质量浓度100%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为6g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5混合添加，升温至55℃，提取反应3小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速180rpm，超声功率200w，频率50MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度30%的HCl溶液，调节PH值至6.8~7.2，静置10小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数300目，加压过滤压力0.07Mpa，负压抽滤压力-0.07Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ，UV测定枸杞色素含量为0.0082%；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用真空浓缩装置，浓缩倍率16倍，负压浓缩压力-0.07Mpa，温度在40℃，浓缩物进行真空干燥，真空干燥的温度在56℃，压力-0.07Mpa，干燥时间为8h，冷冻干燥温度-50℃，压力50Pa，干燥时间为20h，得到枸杞色素Ⅱ，UV测定枸杞色素含量为0.51%；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1: 2混合添加。离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤，过滤目数300目，加压过滤压力0.07Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行真空干燥，真空干燥的温度在56℃之间，干燥时间为3h，得到枸杞色素Ⅲ，UV测定枸杞色素含量为47.75%；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：4混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：2添加，静置7小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤，过滤目数300目，加压过滤压力0.07Mpa进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为56℃，干燥时间为2小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：1.5混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ，UV含量测定色素含量为90.64%，HPLC测定玉米黄质含量为90.07%，叶黄素含量为1.03%，β-胡萝卜素含量为1.15%。
UV法测定枸杞色素含量：
准确称取0.03g试样，精确至0.0001g，加入2mlTHF转移至50ml容量瓶中，加入无水乙醇定容至刻度，摇匀。取此试样液1ml于100ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，置于1cm比色皿中，以无水乙醇做空白对照，用紫外-可见分光光度计在446nm±1nm处的最大吸收波长处测定吸光度。（吸光度应控制在0.3~0.7之间，否则应调整试样液浓度，再重新测定吸光度。）类胡萝卜素含量以总类胡萝卜素的质量分数w0计，数值以%表示，按以下公式计算：
紫外扫描图（图1），图1中A、实际测定试样液的吸光度；C、被测试样液的浓度的数值，单位为克每毫升（g/ml）；试样液在无水乙醇中波长 446nm处的吸收系数。
本发明的以玉米黄质单体为主的枸杞色素成分与现有技术方法提取的枸杞色素之间的区别：
HPLC方法分析条件：
色谱柱：硅胶柱，4.6mm×250mm，粒度3µm；或其他等效的色谱柱。
流动相：正己烷∶乙酸乙酯=70∶30（v:v体积比）
柱温：室温。
流动相流速：1.5mL/min。
进样量：10μl。
现有技术方法提取的枸杞色素色谱图（图2）：图2中A、枸杞色素酯B、某类胡萝卜素C、玉米黄质。
本发明方法提取的枸杞色素色谱图（图3）：图3中A、枸杞色素酯B、某类胡萝卜素C、玉米黄质D、叶黄素。
提取条件优化选择正交试验：
以达到平衡时的反应时间为考察指标，时间越短反应条件越好，各因素作用主次为C＞A＞B，即提取温度＞提取液浓度＞提取液体积；最佳条件为A2B2C3，即提取液浓度为5g/ml，提取液加入量为枸杞粉末质量的10倍量，提取温度为60℃。
提取时间的选择：
按最佳提取条件提取，以HPLC枸杞色素色谱峰面积为考察指标指示反应时间终点，提取反应在180min时达到平衡，以后时间峰面积虽然仍有略微上升，考虑反应效率和经济效益，确定180min为最佳反应提取时间（图4）。
纯化试剂的选择：
选取不同浓度的乙醇溶液作为纯化试剂，加入量为枸杞粉末质量的2倍，在室温下抽滤（<-0.075Mpa），得到枸杞色素Ⅲ，UV测定枸杞色素含量和提取率，确定最佳的纯化试剂为20%的乙醇；水作为纯化试剂，溶解后的混悬液无法抽滤获得枸杞色素Ⅲ。
纯化试剂加入量的选择：
以20%的乙醇溶液作为纯化试剂，选取的加入量为杞粉末质量的1~4倍，在室温下抽滤（<-0.075Mpa），得到枸杞色素Ⅲ，UV测定枸杞色素含量和提取率，确定最佳的纯化试剂的加入量为枸杞粉末质量的2倍。
以上所述实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神及发明原理的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。

Claims (6)

1.枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于具体包括以下步骤：
A、粉碎
将枸杞粉碎并过筛，枸杞粉末的粒径为180~300μm；
B、提取液制备
质量浓度95~100%的乙醇溶液中添加KOH粉末搅拌溶解，KOH质量浓度为2~8g/ml，制成混合提取液；
C、色素提取
枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5~15混合添加，升温至40~60℃提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液；
D、分离
枸杞色素提取液中加入质量浓度85%的H3PO4溶液或质量浓度30%的HCl溶液，调节PH值至6.8~7.2，静置8~12小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除杂质部分得到枸杞色素提取液Ⅰ；
E、浓缩
将枸杞色素提取液Ⅰ进行负压压浓缩，减压浓缩选用真空浓缩装置或减压旋蒸装置，浓缩倍率15~20倍，负压浓缩压力-0.06~-0.08Mpa，温度在35~45℃之间，浓缩物进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，压力-0.06~-0.08Mpa，干燥时间为6~10h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为12~24h，得到枸杞色素Ⅱ；
F、纯化
枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%~40%的乙醇溶液制成混悬溶液，枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1:1~4混合添加，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，去除溶液部分得到固体部分，固体部分进行真空干燥或冷冻干燥，真空干燥的温度在55~58℃之间，干燥时间为2~4h，冷冻干燥温度-60~-40℃，压力5~100Pa，干燥时间为10~16h，得到枸杞色素Ⅲ；
G、精制
四氢呋喃THF和水按体积比1：3~5混合制备成重结晶溶剂，重结晶溶剂中添加枸杞色素Ⅲ，枸杞色素Ⅲ和重结晶溶剂按质量比1：1~3添加，静置6~8小时，离心转速8000rpm离心处理5min后进行加压过滤或负压抽滤，过滤目数270~400目，加压过滤压力0.06~0.08Mpa，负压抽滤压力-0.08~-0.06Mpa，进行真空干燥得到固体物质，真空干燥的温度为55~58℃，干燥时间为1~3小时，固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷、1,2-二氯乙烷、丁烷和石油醚其中一种，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：0.5~2混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
2.根据权利要求1所述的一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于步骤C中枸杞粉末加入到混合提取液中，枸杞粉末与混合提取液按质量比1:5混合添加，升温至55~58℃，提取反应1~5小时，提取反应配合搅拌和超声处理，搅拌转速150~200rpm，超声功率150~350w，频率30~80MHz，过滤杂质得到枸杞色素提取液。
3.根据权利要求2所述的一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于步骤C中提取反应180min。
4.根据权利要求1所述的一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于步骤F中枸杞色素Ⅱ中加入质量浓度20%的乙醇溶液制成混悬溶液。
5.根据权利要求4所述的一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于步骤F中枸杞色素Ⅱ与乙醇溶液按质量比1: 2混合添加。
6.根据权利要求1所述的一种枸杞中提取玉米黄质为主的类胡萝卜素类单体色素的方法，其特征在于步骤G的固体物质中加入非氧化性的非极性溶剂，非氧化性的非极性溶剂选用正己烷，固体物质与非氧化性的非极性溶剂按质量比1：1.5混合添加，再次干燥得到高纯的枸杞色素Ⅳ。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109749480A (zh) * 2018-12-29 2019-05-14 塔里木大学 一种改善枸杞色素活性的方法
CN111153843A (zh) * 2020-01-10 2020-05-15 中国科学院兰州化学物理研究所 一种分离枸杞色素单体的方法
CN111153842A (zh) * 2018-11-08 2020-05-15 南京农业大学 一种利用高速逆流色谱制备高纯度枸杞玉米黄素双棕榈酸酯的方法
CN111675640A (zh) * 2020-07-27 2020-09-18 中国科学院兰州化学物理研究所 一种高纯度玉米黄质的分离制备方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5648564A (en) * 1995-12-21 1997-07-15 Kemin Industries, Inc. Process for the formation, isolation and purification of comestible xanthophyll crystals from plants
CN104125987A (zh) * 2012-02-27 2014-10-29 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 制造高度富含玉米黄质和/或其酯的萃取物的方法
CN104803901A (zh) * 2014-01-27 2015-07-29 中国科学院大连化学物理研究所 一种原位富集制备天然玉米黄素制备的方法
CN105307490A (zh) * 2013-05-16 2016-02-03 马里兰大学派克分院 同时提取和分离酯化和未酯化的单羟基类胡萝卜素的方法
CN105646314A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 中国农业科学院郑州果树研究所 一步完成万寿菊叶黄素提取皂化的方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5648564A (en) * 1995-12-21 1997-07-15 Kemin Industries, Inc. Process for the formation, isolation and purification of comestible xanthophyll crystals from plants
CN104125987A (zh) * 2012-02-27 2014-10-29 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 制造高度富含玉米黄质和/或其酯的萃取物的方法
CN105307490A (zh) * 2013-05-16 2016-02-03 马里兰大学派克分院 同时提取和分离酯化和未酯化的单羟基类胡萝卜素的方法
CN104803901A (zh) * 2014-01-27 2015-07-29 中国科学院大连化学物理研究所 一种原位富集制备天然玉米黄素制备的方法
CN105646314A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 中国农业科学院郑州果树研究所 一步完成万寿菊叶黄素提取皂化的方法

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111153842A (zh) * 2018-11-08 2020-05-15 南京农业大学 一种利用高速逆流色谱制备高纯度枸杞玉米黄素双棕榈酸酯的方法
CN109749480A (zh) * 2018-12-29 2019-05-14 塔里木大学 一种改善枸杞色素活性的方法
CN111153843A (zh) * 2020-01-10 2020-05-15 中国科学院兰州化学物理研究所 一种分离枸杞色素单体的方法
CN111153843B (zh) * 2020-01-10 2021-04-13 中国科学院兰州化学物理研究所 一种分离枸杞色素单体的方法
CN111675640A (zh) * 2020-07-27 2020-09-18 中国科学院兰州化学物理研究所 一种高纯度玉米黄质的分离制备方法
CN111675640B (zh) * 2020-07-27 2021-06-22 中国科学院兰州化学物理研究所 一种高纯度玉米黄质的分离制备方法

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