JPH10506383A

JPH10506383A - ナトリウム利尿性環状化合物

Info

Publication number: JPH10506383A
Application number: JP8507600A
Authority: JP
Inventors: ジェイ．ウェッチャー，ウィリアム; イー．マーレイ，デビッド; カントシ，ダーコ; エイチ．レバイン，バリー; ジェイ．ベナクサス，エレイン
Original assignee: ローマリンダユニバーシティメディカルセンター; ジェイ．ウェッチャー，ウィリアム
Priority date: 1994-08-15
Filing date: 1995-08-15
Publication date: 1998-06-23
Also published as: ATE239465T1; AU3327795A; EP0792270B1; US6083982A; EP0792270A1; US6150402A; WO1996005191A1; DE69530701D1; JPH10510656A

Abstract

(57)【要約】哺乳類にナトリウム排泄増加を誘発するための化合物、方法及び組成物が提供される。ナトリウム排泄増加化合物を単離し、そして合成するための方法もまた提供される。ナトリウム排泄増加化合物を用いる治療方法もまた提供される。ナトリウム排泄増加化合物は、その対応する延長されたカリウム排泄の誘発を伴わないで、哺乳類におけるナトリウム排泄を誘発することができる。

Description

【発明の詳細な説明】ナトリウム利尿性環状化合物発明の背景１．発明の分野本発明はヒト又は他の哺乳類におけるナトリウム排泄を高めるために使用され得る化合物に関する。本発明はまた、前記化合物を精製するための方法、及び前記化合物を用いての医薬組成物及び治療方法にも関する。２．関連技術の歴史高いナトリウム濃度の有害な効果が、多くの疾病、たとえば高血圧症、ウッ血性心不全、肝硬変及び慢性腎不全を導びく腎疾患を少なくとも一部、担当しているように思われる。従って、ナトリウム排泄を調節するシステムの性質の理解は、それらの疾病の効果的な治療又は治癒を導びくことができる。過去30年間にわたって、de Wardenerは、“ナトリウム利尿性ホルモン”がナトリウム排泄の調節のために存在するはずであることを系統立てた。犬における彼の伝統的なパラビオーゼ実験において、延長された高められたナトリウム利尿性（この後、“ナトリウム利尿性”として言及する）が体積拡張された動物からの血漿の注入により正常な動物に生成されたことが観察された。de Wardenerなど．，Clin．Sci．21，249-258（1961）を参照のこと。それ以来、相当の努力が、ナトリウム排泄の調節に関与される因子を単離し、そして同定するためにそれらの分野の研究者により払われて来た。この分野におけるほとんどの研究者は、この推定上の体液性物質が維持されたナトリウム利尿性のためのみならず、またナトリウム輸送及び高められた血管反応性の阻害をも相当していると信じている。後者の２種の効果は、ナトリウムポンプとしても知られている、Na⁺／Ｋ⁺−ATPaseの阻害を通じて生じる。従って、多くのインビトロアッセイが、ホルモンによるナトリウムポンプ阻害主義に基づいてホルモンについて研究するために使用されて来た。それらのアッセイは、Na⁺／Ｋ⁺−ATPase阻害、ポンプからのウアバイン置換、及び種々のインビボ源からの単離物と抗心臓性グリゴシド抗体との交差反応性を包含する。(W echterなど．，Prog．Drug Res．34，231-260(1990)を参照のこと）。研究は、N a⁺／Ｋ⁺−ATPaseポンプに対して作用するナトリウム利尿性因子の単離に集中されて来た。多くの推定上のナトリウム利尿性化合物（時々、ホルモンとして同定される）が、上記方法を用いて見出された。たとえば、Wechterなど．，Prog．D rug Res．34，231-260(1990)を参照のこと。たとえば、Brickerなど．、アメリカ特許第5,106,630号は、ステロイド核、360の分子量及びＣ₂₁Ｈ₂₈Ｏ₅の分子式を有する化合物をナトリウム利尿性ホルモンとして同定した。ウアバイン及びジゴキシン又はそれらの異性体が最近、それらの方法を用いて単離されている。しかしながら、それらの物質はナトリウム利尿性ではない。Lu densなど．，Hypertens，17，923-929（1991）；Mathewsなど．，Hypertens，17 ，930-935（1991）；Tymiakなど．，Proc．Natl．Acad．Sci．（USA）90，8189 ，8193（1993）；Gotoなど．，Biochem．Biophys．Res．Comm．173，1093-1101( 1990)を参照のこと。それらの及び他の結果は、ナトリウムポンプ阻害活性が必ずしもナトリウム利尿性を導びかないことを示唆する。実際、カリウム尿を生成する傾向がある。Sekiharaなど．，Life Sci．53，975-980（1993）；Pamnaniなど．，Hypertens．18，316 -324（1991）；Smythなど．，Can．J．Physiol．Pharmacol．70，723-727（1992 ）；Crabosなど．，Eur．J．BioChem．162，129-135(1987)を参照のこと。従って、Na⁺／Ｋ⁺−ATPaseポンプの結合及び／又は阻害に基づくアッセイを用いてのナトリウム利尿化合物の精製方法は推定上のナトリウム利尿性ホルモンの発見を導びくことができない。さらに、10年の努力にもかかわらず、ナトリウム利尿性化合物は、純粋な形で単離されておらず、化学的及び構造的に定義されておらず、又は実験室においても合成されていない。また、上記に示されるように、ナトリウム利尿性をモニターするためへの精製方法に使用される上記方法論は、ナトリウム利尿性を直接的に測定することに失敗している。従って、本発明の前、推定上のナトリウム利尿ホルモンは同定されていない。ナトリウム利尿効果を有する化合物を供給することが高く所望される。ナトリウム利尿性を直接的に測定するアッセイを用いることによって内因性ナトリウム利尿性化合物を単離する新規方法を開発することがまた所望される。化学的及び構造学的定義のために十分な量、実質的に純粋なナトリウム利尿化合物を得るためのより効果的な精製方法を開発することがまた所望される。発明の要約本発明の１つの観点によれば、下記一般式Ｉ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸(phosphate)基、リン酸エステル(phospho erter)基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないか又は置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物が供給される。より特定の態様において、Ｒは式ＩにおいてＯである。好ましい態様において、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃はOHであり、Ｒ₄はＨであり、Ｒ₆はCOOHであり、ｎは１であり、そしてｍは２である。また、下記一般式II：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン、又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族、芳香族又は複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物が供給される。さらに、下記一般式III：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族又は芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるナトリウム利尿化合物が供給される。さらに、下記一般式IV：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−又は６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物が供給される。また、下記一般式Ｖ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって完全な５−もしくは６−員の脂肪族又は芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるナトリウム利尿化合物が供給され、但し、前記化合物は４−メチル−６−（５，６−ジメチルベンゾキノイル）−４−ヘキサノリドではない。もう１つの観点において、本発明は下記一般式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二もしくは第三アミン基、リン酸基、リン酸(phospho)エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族又は芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物が供給される。前述の式で表わされる化合物は、ナトリウム排泄を刺激するために及び高血圧症又は他の水腫性状態、虚血症、狭心症及びHIV感染又はAIDSを包含する状態の処理のためにそれ自体で又は医薬組成物に使用され得る。前述の化合物の好ましい態様において、（ｉ）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はＨであり、ｍは２〜５であり；（ii）ＲがＯである場合、Ｒ₁はＨ又はCH₃であり、Ｒ₂はＨ，CH₃，C(CH₃)₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、Ｒ₄はCH₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₅はＨ，CH₃又はCH₂CH₃であり、そしてＲ₆はＨ，OH，OCH₃，OCH₂CH₃、又はNH₂ であり、ｍは１〜５であり；（iii）ＲがＯである場合、Ｒ₁及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₂及びＲ₄はＨであり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、そしてＲ₆はOH又はCH₃Oであり、ｍは２ではなく；（iv）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COO であり、Ｒ₄は少なくとも２つの炭素原子を有するアルキルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、ｍは１であり；そして（ｖ）Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がメチルである場合、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はアルキルであり、ｍは２である。さらに、本発明のもう１つの観点は、哺乳類の尿中においてナトリウム排泄を高めることができる実質的に精製されたナトリウム利尿化合物を、哺乳類サンプルから得る方法を提供する。本発明の方法においては、少なくとも一部のサンプルが、溶出液として酢酸アンモニウムの溶液を用いてのゲル濾過にゆだねられ、そして塩ピークの直後に現われ、そして280nmで有意な吸光度を有する材料のみの保持により、後−塩ピーク材料が得られる。生物学的活性画分が、酢酸ピリジニウム／メタノール、酢酸／メタノール、及びイソクラティク(isocratic)酢酸／メタノールから成る群から選択された溶出液を用いて、反復された逆相高圧クロマトグラフィーにより前記後−塩ピーク材料から単離される。次に、その生物学的活性画分が、シリカゲル高圧クロマトグラフィーにゆだねられ、クロマトグラフィー生成物が得られる。生物学的活性を有するクロマトグラフィー生成物が溶出液としてイソプロパノール／ヘキサンを用いて回収される。最後に、化合物が、前記画分から溶媒を除去することによって生物学的活性画分から分離される。好ましい態様において、精製方法はさらに、前記後−塩ピーク材料からイソプロパノール／ジエチルエーテル可溶性化合物を抽出し、そして逆相高圧クロマトグラフィー段階をくり返すことによって前記抽出物から生物学的活性画分を単離する段階を含んで成る。本発明のもう１つの観点において、インビボバイオアッセイを用いて、活性画分のナトリウム利尿を直接的に測定することができる。本発明のさらなる観点は、上記のようにナトリウム利尿化合物を生成するための方法を提供する。１つの好ましい方法は、下記式VI：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；そしてＲ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成している〕で表わされる化合物と、下記式VII：〔式中、Ｒ₅は、Ｈ、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族又はエステルであり、ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるビニルラクトンとを反応せしめる段階を包含する。上記式Ｉの化合物（Ｒ＝Ｏ及びＲ₆＝COOH）が、前記方法に従って生成され得る。式II−Ｖの化合物は、たとえば塩化第二鉄(FeCl₃)の溶液との反応によりその対応する式Ｉの化合物の酸化及び／又は脱水により生成され得る。前記合成方法の副生成物として、下記式VIIIの化合物が生成される：それらの化合物はまた、本発明のナトリウム利尿化合物としても有用である。本発明のもう１つの観点は、医薬的に許容できるキャリヤー及びナトリウム排泄を刺激するのに効果的な量での上記化合物を含んで成る、哺乳類の尿におけるナトリウム排泄を刺激するのに有用な医薬組成物を供給する。前記組成物はまた、複数の本発明の化合物の混合物を含んで成り、そして前記化合物の合計量は、ナトリウム排泄を刺激するのに効果的な量である。本発明のさらにもう１つの観点は、本発明の医薬組成物を哺乳類に経口又は非経口に投与する段階を含んで成る、高血圧症、虚血症（特に心臓虚血症）、狭心症、又は水腫性状態を有する哺乳類を処理するための方法を提供する。本発明のさらにもう１つの観点は、本発明の医薬組成物を哺乳類に経口又は非経口投与する段階を含んで成る、HIV感染又はAIDSを有する哺乳類を処理するための方法を提供する。本発明は請求の範囲においてその範囲を定義されており、そして好ましい態様で下記に記載される。図面の簡単な説明図１は、本発明の水性酢酸／メタノール再クロマトグラフィー段階のHPLCクロマトグラム、すなわち290nmでの溶出プロフィール（実線）、及びその対応する画分のナトリウム利尿及び血圧応答を提供する。図２は、酢酸／アセトニトリルRP−HPLCシステムに基づく精製されたナトリウム利尿化合物、すなわちLLU−αのアリコートのクロマトグラム、295nmでの溶出プロフィール（実線）を提供する。抽出工程の７番目の精製段階を通して精製されたLLU−αが、追加のRP−HPLC段階における酢酸／アセトニトリルを用いての分析HPLCにゆだねられた。図３Ａ−Ｂは、LLU−α（Ａ）及びLLU−γ（Ｂ）のインビボバイオアッセイの結果を提供する。ナトリウム利尿（UNaV：ぬりつぶされた丸）、カリウム尿（UK V；白丸）及び利尿（尿の体積：ぬりつぶされた三角）が測定された。図４は、トリフルオロ酢酸／アセトニトリルRP−HPLCシステムに基づくナトリウム利尿化合物、すなわちLLU−γの精製の最終段階のクロマトグラム、すなわち265nmでの溶出プロフィール（実線）を提供する。抽出工程の４番目の精製段階を通して精製されたLLU−γが、追加のRP−HPLC段階におけるトリフルオロ酢酸／アセトニトリルを用いての最終精製段階にゆだねられた。好ましい態様の詳細な説明本発明によれば、新規のナトリウム利尿化合物が、哺乳類においてナトリウム排泄の刺激及びヒトにおいて高ナトリウム濃度関連疾病の処理のために提供される。本明細書で使用される場合、用語“ナトリウム利尿化合物”とは、哺乳類へのその化合物の投与に基づいて哺乳類におけるナトリウム排泄の速度を高める化合物を言及する。用語“ナトリウム利尿化合物”はまた、ナトリウム利尿活性を保持する生来の化合物及びインビトロ又はインビボ変性の両者も言及する。官能基の制限された変性、置換又は欠失は生物学的活性を破壊しないで実施され得ることが理解される。さらに、この後に指摘される化合物に生物学的及び化学的に等しいか又はそれよりもさらに活性的である多くの誘導体が製造され得ることが化学及び医薬調製の当業者により理解されるであろう。同等の化合物の例は、前記化合物のエステル、エーテル、アミド及び塩を包含する。さらに、本発明の化合物は、本発明の利点を得るために同じか又は相補的な範囲の生物学的活性を有する化合物と混合され、その化合物に結合され、又はその化合物により接合され得る。ナトリウム利尿化合物の状態を記載するために使用される“実質的に精製された”とは、天然の環境下でナトリウム利尿化合物と通常関連するか又はそれと共に存在するタンパク質、ステロイド及び他の材料を実質的に含まない化合物を示す。本明細書で使用される場合、用語“後塩ピーク（post salt peak”とは、280n mでUV吸光度を有する、ナトリウム、カリウム、尿及びクレアチニン含有画分の直後に現われる、Ｇ−25 Sephadex カラムから溶離された材料を言及する。材料は、それが本明細書に記載されるようにインビボアッセイにおいてナトリウム排泄増加を高めることができる場合、“生物学的活性”である。本発明の１つの観点は、下記一般式Ｉ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる新規のナトリウム利尿化合物を供給する。本明細書で使用される場合、用語“置換された”とは、１又は複数の置換基、たとえばアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、エーテル又はハロゲンの存在を示す。より特定の置換基は、Ｃ_1-6の枝分れしていないか又は枝分れしたアルキル、たとえばメチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、sec−ブチル及びtert−ブチル、及びＣ_6-12のアリール、特にフェニルを包含する。好ましい態様において、ＲはＯである。また、好ましくはｎは１である。好ましくは、ｍは２である。Ｒ₆は好ましくはCOOHである。好ましくは、Ｒ₃はＨ又はOHである。また、好ましくは、Ｒ₄はＨ又はCH₃である。好ましい態様において、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃である。式Ｉの典型的に好ましい化合物は、ＲがＯであり、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がCH₃であり、Ｒ₃がOHであり、Ｒ₄がＨ又はCH₃であり、Ｒ₆がCOOHであり、ｎが１であり、そしてｍが２である化合物を包含する。式Ｉの他の典型的に好ましい化合物は、ＲがＯであり、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がCH₃ であり、Ｒ₃がＨであり、Ｒ₄がＨ又はCH₃であり、Ｒ₆がCOOHであり、ｎが１であり、そしてｍが２である化合物を包含する。好ましい態様において、Ｒ₇はＣ_1-6のアルキル基、特にCH₃である。もう１つの好ましい態様において、Ｒ₃はOHである。本発明の範囲内の化合物はまた、ナトリウム排泄増加活性を保持しながら、多くの手段で上記式を変性することによっても得られる。そのような活性誘導体の例は、下記式II−Ｖの化合物を包含する。本明細書に記載されるすべての式において、同様の名称を有する成分とは、関連する化合物における同様の成分としてお互いに対応するように思われる。本発明の範囲内のナトリウム利尿化合物はまた、下記一般式II：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン、又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン、又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR ₇ R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物を供給する。さらに、ｎが１であることが好ましい。好ましくはｍは２である。好ましい態様において、Ｒ₆はCOOCH₂CH₃であり、そしてＲ₉はOHである。もう１つの好ましい態様において、Ｒ₆はCOOHであり、そしてＲ₉はCH₃CH₂Oである。特定の例は次のものを包含する：本発明のナトリウム利尿化合物はまた、下記一般式III：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされる化合物を供給する。好ましい態様において、ｎは１である。また、ｍが２である化合物が好ましい。式IIIの典型的なナトリウム利尿化合物は次のものを包含する：本発明はまた、下記一般式IV：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステルもしくは置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物も包含する。好ましくはｎは１である。また、好ましくはｍは２である。一般式IVで表わされる本発明の特定の化合物は、下記のものを包含する：下記一般式Ｖ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるナトリウム利尿化合物がまた包含される。好ましい態様は、ｎが１であるものである。また、好ましくは、ｍは２である。一般式Ｖの本発明の化合物に下記のものが包含される：本発明のもう１つの観点によれば、下記一般式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二もしくは第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物が供給される。好ましい態様において、（ｉ）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はＨであり、ｍは２〜５であり；（ii）ＲがＯである場合、Ｒ₁はＨ又はCH₃であり、Ｒ₂はＨ，CH₃，C(CH₃)₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、Ｒ₄はCH₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₅はＨ，CH₃又はCH₂CH₃であり、そしてＲ₆はＨ，OH，OCH₃，OCH₂CH₃、又はNH₂ であり、ｍは１〜５であり；（iii）ＲがＯである場合、Ｒ₁及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₂及びＲ₄はＨであり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、そしてＲ₆はOH又はCH₃Oであり、ｍは２ではなく；（iv）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COO であり、Ｒ₄は少なくとも２つの炭素原子を有するアルキルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、ｍは１であり；そして（ｖ）Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がメチルである場合、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はアルキルであり、ｍは２である。本発明の一定のナトリウム利尿化合物は、実質的に純粋な形で単離される。ナトリウム利尿化合物は、種々の源、たとえば尿、視床下部、副腎血漿、血液及び培養された細胞から得られる。ヒト尿毒症の尿は好ましい源である。但し、正常なヒト尿もまた使用され得る。本発明の化合物は、哺乳類においてナトリウム排泄増加及び利尿活性を有することが示されている。LLU−αと称する本発明の単離されたナトリウム利尿化合物の１つは、264.1362の分子量及びＣ₁₅Ｈ₂₀Ｏ₄の分子式を有する。この化合物は次の性質を有する：約210nmでの主要な紫外線吸光度ピーク；約295nmでの広い第２ピーク；希釈塩基における不安定性；CH₂N₂との反応によるエステル化の能力。その化合物は、ナトリウム排泄の対応する増加を伴わないで哺乳類におけるナトリウム排泄を高めることができ、そして平均動脈圧の有意な変化を引き起こさない。その化合物はさらに、心選択性遊離基スキャベンジャーとしても作用する。LLU−α（分類上の名称：６−ヒドロキシ−７，７，８−トリメチルクロマン−２−プロパン酸）は次の構造を有する：式Ｉによれば、LLU−αのためには、ＲはＯであり、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃はOHであり、Ｒ₄はＨであり、Ｒ₆はCOOHであり、ｎは１であり、そしてｍは２である。本発明はまた、次の性質を有するもう１つの単離されたナトリウム排泄増加化合物、すなわちLLU−γも供給する：約220nmでの主要な紫外線吸光度ピーク；約 268nmでの第２ピーク；Ｏ²の存在下又は希釈塩基において高い不安定性。カリウム排泄（カリウム尿化）は意識のあるラット中への化合物の注入の後に時々観察され得るけれども、それはカリウム排泄の対応する上昇を伴わないで哺乳類の尿中へのナトリウム排泄を高めることができる。さらに、それは平均動脈圧の有意な変化を引き起こさず、そしてそれはナトリウムポンプの阻害を示さない。ナトリウム利尿化合物の生物学的活性は、多くのアッセイ技法、たとえば本明細書に記載されるインビボバイオアッセイ（但し、これだけには限定されない）により、意識のあるラット中への本発明の化合物の注入の後、意識のあるラットにおける平均動脈圧及びナトリウム排泄増加を測定するために、決定され得る。本発明のナトリウム排泄増加化合物は、インビボバイオアッセイにおいてナトリウム排泄増加及び利尿活性を有することが示されている。たとえば、インビボバイオアッセイにおいては、ナトリウム排泄増加が、本発明のナトリウム利尿化合物が意識のあるラットに注入される場合に観察され得る。しかしながら、血圧変換器に意識のあるラットの動脈カテーテルを連結することによって測定されるMA Pは、本発明のナトリウム利尿化合物の添加後、有意な変化を有さない。一般的に、そのナトリウム利尿化合物は、Na⁺／Ｋ⁺−ATPase阻害アッセイにおいて阻害を示さない。本発明のナトリウム利尿化合物及び組成物は、多くの治療用途、たとえばナトリウム利尿及び利尿に使用され得る。従って、式Ｉ−Ｖ及びVIIIの化合物、又は酸化又は脱水により、Ｒ＝Ｏの式Ｉａの化合物から生成される化合物（この後、式Ｉｂの化合物と称する）は、種々の水腫性状態、たとえばうっ血性心不全、水腫又は腹水により引き起こされる肝硬変、腎疾患、たとえばネフローゼ症候群、並びに高血圧、及び無能な腎灌流又は減じられた糸球体濾過速度による腎不全の処理に治療剤として使用され得る。ナトリウム利尿性の他に、式Ｉ−Ｖ及びVIIIの範囲内の化合物は虚血症及び狭心症の処理に有用であることが意外な事には発見された。従って、本発明は、それらの病状の処理に有用な化合物及び組成物も包含する。式Ｉ−III及びVIIIの範囲内の化合物がまた、酸化性ストレスを緩和し、そして従って、アポプトシス及び続く免疫細胞の損失を阻害することが意外な事には発見された。酸化性ストレス及び得られるアポプトシスは、HIV感染に関係される（たとえば、Greenspon など．，Immunology Today，vol．15，No．5，pp209-213(1994)を参照のこと）。従って、本発明はまた、HIV感染又はAIDSを有する患者の処理に有用である化合物及び組成物も供給する。本発明の範囲内の化合物及び組成物は、家畜使用、たとえば家畜動物使用、及びヒトへの臨床学的使用のために従来の手段により哺乳類に投与され得る。たとえば、医薬的に許容できるキャリヤーと共に１又は複数の本発明の化合物を含む組成物が調製され得る。本発明のナトリウム利尿化合物又は投与される化合物の量は、それがナトリウム排泄を高める場合、治療的に効果的である。典型的な初期用量は、0.1μｇ〜１mg／kg体重、より好ましくは４μｇ〜50μｇ／kg体重である。後者の用量は、初期用量の臨床効果に従って調節され得る。合計の毎日の用量は、１回の個人の用量、又は一定期間で与えられる複数回の用量から成る。それらの範囲内の用量は、所望する治療的な利益が得られるまで、拡散された期間にわたって、通常24 時間以上にわたって一定の注入により投与され得る。高血圧症、虚血症、等に対して治療的に有効である本明細書に記載される化合物の量はまた、日常の調査を通しても決定され得る。化合物は、単独で、他の生理学的に許容できる活性又は不活性材料、たとえば保湿剤、風味剤、結合剤、及び増量剤、並びに薬理学的活性を有する他の化合物、たとえばナトリウムの遠位供給を高める他の利尿剤又は他の抗高血圧剤と共に混合物として投与され得る。それはまた、生理学的に適切なキャリヤー、たとえば水又は通常の塩溶液と共にも投与され得る。化合物は、経口、鼻腔内又は非経口、たとえば注射投与され得る。注射は、皮下、静脈内又は筋肉内注射され得る。それはまた、薬理学的に許容できる塩としても投与され得る。医薬組成物は、錠剤、カプセル、注射用溶液及び懸濁液、経口溶液及び医薬使用のために意図された他の製剤の形を取ることができる。たとえば、錠剤への使用のために意図された組成物は、活性材料、ステアリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、微結晶セルロース、ペパーミント油、ポリソルベート80、ポビドン及び予備ゼラチン化されたスターチを含むことができる。本発明のナトリウム利尿化合物は、特に本明細書に例示される多くの方法により精製され得る。本発明内の好ましい方法においては、集められた尿が超限外濾過(≦３KDa)、ゲル濾過クロマトグラフィー（Ｇ−25）及びイソプロパノール及びジエチルエーテルによる抽出により処理される。次に、有機溶媒可溶性材料が連続的な高性能液体クロマトグラフィーにゆだねられ、画分のナトリウム排泄増加、Na⁺／Ｋ⁺−ATPaseポンプ阻害及び血管弛緩活性についてアッセイされる。他の態様においては、ゲル濾過クロマトグラフィーからの材料が、有機溶媒抽出を伴わないで連続的な高性能液体クロマトグラフィーに直接的にゆだねられ得る。さらなる他の態様においては、本発明の化合物は、当業者に知られている方法を用いて合成され得る。１つのそのような方法は、J.Weichetなど．，Czech．Ch em．Commun．24，1689-1694（1959）により記載される方法であり、この開示は引用により本明細書に組込まれる。この方法は、本発明の化合物を合成する方法を提供するために当業者により容易に適合され得る。好ましい合成方法は、下記一般式VI：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；そしてＲ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成している〕で表わされる化合物と、下記式VII：〔式中、Ｒ₅は、Ｈ、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族又はエステルであり、ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるビニルラクトンとを反応せしめる段階を包含する。前記合成の好ましい態様においては、Ｒ₃はOHである。好ましくは、Ｒ₄は同時にOHではない。式VIの好ましい化合物は、ヒドロキノン、たとえば２，３−ジメチル−１，４−ヒドロキノンである。式VIIの好ましいビニルラクトンは、γ−メチル−γ−ビニルブチロラクトン（Ｒ₅＝CH₃，ｎ＝１，ｑ＝１）である。前記反応の実施においては、好ましくは触媒、たとえば金属又は非金属塩が使用される。特定タイプの触媒は、溶媒と複合体を形成する非金属塩、特に触媒、たとえば三弗化硼素ジエチルエーテレートを包含する。前記反応の実施においては、好ましくは非プロトン性又はプロトン性溶媒、特に非プロトン性溶媒、たとえばジオキサンが使用される。触媒及び／又はビニルラクトンは好ましくは、選択された溶媒に希釈される。好ましくは、前記合成は、高温、たとえば100〜110℃で行なわれる。好ましい態様においては、前記反応混合物は、非プロトン性又はプロトン性溶媒、特に非プロトン性溶媒、たとえばジエチルエーテルにより希釈される。所望する生成物は好ましくは、たとえばRP−HPLCカラム又はシリカゲルを用いて精製される濃縮上清液から得られる。RP−HPLCのための好ましい溶離剤は、水、アセトニトリル及び酢酸の混合物である。シリカゲルのための好ましい溶媒は、酢酸エチル及びヘキサンを包含する。他の精製方法、たとえば結晶化が使用され得る。また、他の溶離剤、たとえばヘキサン及びジメチルケトンも使用され得る。前記合成はラセミ混合物を生成し、典型的には、この１つの鏡像異性体が活性的であり、そして第２の鏡像異性体は低い活性を有し又は不活性である。ラセミ体は、不活性鏡像異性体の存在について考慮するための量の調節を伴って、本発明の組成物に使用され得る。他方、ラセミ体は従来の方法を用いて分解され得、そして活性鏡像異性体が同定され、そして利用される。本明細書に記載される化合物のすべての鏡像異性体形は特に、本発明の範囲内にあるものとして考慮される。前記合成の副生成物として、下記式VIIIの誘導体化合物が生成される：それらの化合物はまた、本発明のナトリウム排泄増加化合物としても使用され得る。式VIIIの典型的な化合物は、次のベンゾジピラン誘導体を包含する：前記化合物のすべての立体異性体形、たとえばメソ化合物及びジアステレオマー対が特に、本発明の範囲内にあるものとして考慮される。式VIIIの化合物の二−酸化された及び／又は二−水和化された誘導体が、式Ｉの化合物から式II−Ｖの化合物を得るために使用される態様と類似する態様で得られる。前記のように、本発明のナトリウム利尿化合物は、エステル、アミド、等の形成により変性され得る。エステル化は、ジアゾアルカンの溶液、又は無水物又は塩化アシルとの反応により実施され得る。アミドは、アンモニア又はアミンとの反応により形成され得る。式II−Ｖのナトリウム利尿化合物は、前記方法、たとえば酸化により生成されるその対応するナトリウム利尿化合物から誘導され得る。本発明の方法の好ましい態様においては、Ｒ₄がＨである場合、Ｒ₅はCH₃ではない。前記方法の好ましい酸化剤は塩化第二鉄の溶液である。他の酸化剤、たとえば KMnO₄，SeO₂，CrO₃，H₂O₂，ｍ−クロロ過安息香酸、Caro酸、OsO₄，HIO₄、シアン化カリウム第二鉄、クロム酸銀、又は過硼酸ナトリウムがまた使用され得る。スケム１は、式Ｉ−Ｖの典型的な化合物間の関係を示す。スケム１はＳ−鏡像異性体間の関係を示すことを注目すること。その同じ関係が、その対応するＲ− 鏡像異性体間に存在する。本発明の範囲内の広範囲の種類のナトリウム利尿化合物が示される態様により得られる。次の例は例示目的のためであって、本発明を制限するものではない。それらは使用され得る方法の典型的なものであるが、当業者に知られている他の方法も他方では使用され得る。例において、次の略語が使用される： EI：電子衝撃 FR：フロセミド応答 FT−IR：フーリエー変換赤外線分光写真法 HPLC：高性能液体クロマトグラフィー MAP ：平均動脈圧 MDBK： Madin−Darby ウシ腎臓 MS：質量分析法 NMR ：核磁気共鳴 PBS ：リン酸緩衝溶液 Rn：ナトリウム排泄増加率 RP−HPLC：逆相高性能液体クロマトグラフィー SR：サンプル応答 UNaV：ナトリウムの尿濃度×尿体積／時間例１：ナトリウム利尿化合物の単離ヒト尿毒症の尿を、Benaksasなど．，Life Sci．52，1045-1054(1993)（引用により本明細書に組込まれる）の方法に従って、まず限外濾過(３KDa)及び凍結乾燥により処理し、続いてSephadex Ｇ−25ゲル濾過クロマトグラフィーから後 −塩画分を単離した。表１（最初の精製段階を参照のこと）。粗材料をさらに、２つの方法の１つにより精製した。１つの方法は４つの連続的なHPLC段階を包含し、そして第２の方法は有機溶媒抽出、続く５つまでの連続的なHPLC段階を包含した。表Ｉは２種の方法を要約している。上記Benaksasなどにより報告されている方法の変法である４段階連続HPLC法を用いた。第１Ｃ₁₈RP-HPLC（表Ｉ、段階２）を、0.2Ｍの酢酸ピリジニウムpH5.5( Ａ)及びメタノール（Ｂ）のグラジエントにより５ml／分で溶出するBeckman Ult rasphere ODSカラム(10μｍ；21.2×150nm)上で行なった（22分間、80％Ａ：20 ％Ｂ，48分間、40％Ａ：60％Ｂの線状グラジエント、10分間、100％Ｂの線状グラジエント）。カラムを、70％トルエン：30％メタノールにより洗浄し、次に、少なくとも20分間、初期条件で再平衡化した。このカラムの洗浄方法は、メタノール溶離剤を用いてあらゆるクロマトグラフィーにおいて実施された。溶離剤は、290nmでBeckman166UV検出器によりモニターされた。81分の画分を集め、そして遠心分離真空濃縮器において減圧下で乾燥せしめた。前のHPLC試験のバイオアッセイ評価（下記例２を参照のこと）及びクロマトグラフィー比較に基づけば、画分50〜80が第２RP−HPLC段階のために組合された（表Ｉ，第３段階）。Beckman Ultrasphere ODS（Ｃ₁₈）カラム(５μｍ；10×250m m)を、0.2Ｍの酢酸（Ａ）、メタノール（Ｂ）及び70％のトルエン：30％のメタノール（Ｃ）のグラジエントにより２ml／分で溶出した（５分間、60％Ａ：40％Ｂ，５分間、50％Ａ：50％Ｂの線状グラジエント、55分間、30％Ａ：70％Ｂの線状グラジエント、２分間、100％Ｂ，３分間、100％Ｂ，８分間、100％Ｃ，７分間、100％Ｂの線状グラジエント）。溶離剤を、螢光（励起、310〜410nm；発光、475〜610nm；Beckman 157検出器）及びBeckman 168ダイオードアレー検出器により290nmでの吸光度についてモニターした。紫外線スペクトルを、 202〜390nmの範囲にわたって２秒間融でダイオードアレーにより集めた。81分の画分を集めた。例２に詳細に論ぜられるように、２種のナトリウム排泄増加活性単離物(LLU− α及びLLU−γ)が特に同定された。それらの２種のナトリウム利尿性単離物を包含する領域をプールし、そして第３RP−HPLCのために変性された酢酸／メタノールグラジエントを用いて再クロマトグラフィー処理した。溶媒及びカラムは上記第２RP−HPLCと同じであるが、しかしながら、グラジエントは変更された（５分間、60％Ａ：40％Ｂ，５分間にわたって40％Ａ：60％Ｂの線状グラジエント、28 分間にわたって30％Ａ：70％Ｂの線状グラジエント、２分間にわたって100％Ｂ，３分間にわたって100％Ｂ，８分間にわたって100％Ｃの線状グラジエント）、そして51分のみの画分が集められた。第１の水性酢酸−メタノールRP−HPLC段階（表Ｉ、第３段階）の間、ナトリウム排泄増加活性材料に対応する発色団マーカーが、異なったバッチの尿を処理する場合に同定され得る。短いグラジエントを用いる変性された酢酸−メタノール方法（表Ｉ、第４段階）を用いての再クロマトグラフィー処理画分38〜58及び63 〜66により、LLU−α及びLLU−γと称する２種のナトリウム排泄増加活性マーカー発色団がそれぞれ27.8及び35.4分で再現的に溶離された（図１）。この第４の精製段階はナトリウム利尿性粗単離物の一定の同定を可能にした。 LLU−αナトリウム利尿性単離物を、ヘキサン（Ｂ）イソプロパノール（Ａ）グラジエントにより２ml／分で溶出するシリカゲル上での通常の相クロマトグラフィー(Beckman Ultrasphere,５μｍ，10×250mm)に個々にゆだねた（25分間、６％Ａ：94％Ｂ，30分間，100％Ａ，20分間、100％Ａの線状グラジエント、５分間、６％Ａ：94％Ｂの線状グラジエント及び35分間、６％Ａ：94％Ｂでの平衡化期間）。71 分の画分を第５の精製段階（表Ｉ）から集めた。螢光を上記のようにしてモニターした。個々の単離物についてモニターされる波長は、前のクロマトグラムからのその吸光度スペクトルに基づいて選択された。第１の単離物(LLU−α)のクロマトグラフィーを、295nmで、そして第２の単離物(LLU−α)のクロマトグラフィーを267nmでモニターした。LLU−α及びLLU−γのUV吸光度特徴を示す画分をバイオアッセイした（下記を参照のこと）。２．抽出方法ゲル濾過クロマトグラフィーから得られた凍結乾燥材料を、９体積のイソプロパノールと共に18時間、撹拌した。次に、そのイソプロパノール溶液を除去し、そして減圧下で回転蒸発器上で蒸発乾燥せしめた。そのイソプロパノール溶解相からの得られる濃厚な黒カッ色油状物を計量し、そして次に、交互に撹拌及び音波処理を行ない、そして最後に、10体積のジエチルエーテルと共にさらに18時間、撹拌した。次に、そのエーテル溶液をデカントし、そして４体積のエーテルを残る不溶性材料に添加した。72時間の撹拌の後、そのエーテル溶液を再びデカントした。２体積の脱イオン化された蒸留水及び２体積のジエチルエーテルを残留物に添加した。２時間の撹拌の後、エーテル相を分離し、そして水性相を１体積のエーテルにより３度、洗浄した。組合されたエーテル抽出物を飽和水性NaCl及び水により洗浄し、そして減圧下で回転蒸発器上で乾燥せしめた。残留物を95％エタノールに再溶解し、そして再び乾燥せしめた。エーテル抽出残留物を40％水性メタノールに溶解し、そして酢酸−メタノール RP−HPLCにゆだねた（表Ｉ、第３段階）。それらの特徴的なUVスペクトルにより同定されるようなLLU−α〜LLU−γのクロマトグラフィー領域を、プールし、乾燥せしめ、再懸濁し、そして第２の変性された酢酸−メタノールRP−HPLC上でクロマトグラフィー処理した（表Ｉ、第４段階）。LLU−α及びLLU−γのみが、このクロマトグラフィー処理段階の後に検出された。次にイソクラティク酢酸−メタノールRP−HPLC（表Ｉ、第５段階）を、LLU− αに対して行なった。Beckman Ultrasphere ODS（Ｃ₁₈）カラム(５μｍ：10×25 0mm)を用いて、LLU−αを、45％の0.2Ｍ酢酸及び55％のメタノールにより２ml／分で35分間、溶出し、70.5分の画分を集めた。溶離剤を、290nmでの吸光度（ダイオードアレー）及び螢光についてモニターした。LLU−αをそのUVスペクトルにより同定し、そしてシリカゲルHPLCにゆだねた（表Ｉ、第６段階）。シリカゲルHPLCからのLLU−αを含む画分をプールし、そして他のＣ₁₈RP−HPL C段階にゆだねた。この第７精製段階（表Ｉ）においては、Beckman Ultrasphere ODSカラム(５μｍ：4.6×250mm)を、50mMの酢酸（Ａ）及びアセトニトリル中、 45mMの酢酸（Ｂ）のグラジエントにより１ml／分で溶出した。（３分間、85％Ａ：15％Ｂ，42分間、100％Ｂ，５分間、100％Ｂの線状グラジエント）。カラムを、１：１の塩化メチレン：アセトニトリルにより５分間、洗浄し、次に、初期条件下で10分間、再平衡化した。クロマトグラフィーを、ダイオードアレー検出器により265及び295nmでモニターした。10分で開始する50.5分の画分を集めた。その抽出精製方法は、単離されたLLU−αの収率を約50％、高めた。合計５つの精製段階を包含するクロマトグラフィー方法においては、１mg以下のLLU−α が、約105ｇの凍結乾燥されたＧ−25材料から得られた（９×10^-4％以下の収率）。抽出工程（第７の精製段階）から得られる約1.8mgのLLU−αを、約155ｇの凍結乾燥されたＧ−25生成物に適用した（約1.2×10^-3％の収率）。この方法のさらなる２つのRP−HPLC段階は、実質的に純粋なLLU−αを導びいた。同様に、LLU−γの収率は、比較できるほど高まったように見えた。変性された酢酸−メタノールRP−HPLCクロマトグラフィー段階（表Ｉ、第４段階）からのLLU−γを、LC−MSのための適切な方法を用いてさらに精製した。この精製段階においては、Beckman Ultrasphere ODSカラム(５μｍ： 4.6×250mm) を、0.1％トリフルオロ酢酸、40％アセトニトリル、及び60％水により１ml／分で30分間、溶出した。前のクロマトグラフィー処理段階からのLLU−γが16.5分で溶出する。試験の間、カラムは、アセトニトリル中、0.1％トリフルオロ酢酸により10分間、洗浄され、次に初期条件下で10分間、再平衡化された。クロマトグラフィーを、ダイオードアレー検出器により265及び230nmでモニターした。LL U−γを、単一画分として集めた。結果は図４に示される。何人かの尿ドナーに投与された薬物ナプロキセンが、LLU−αのシリカゲルHPL Cの初期画分から単離された。その同一性をNMRにより決定し、そして市販のナプロキセンのNMRスペクトルとの比較により立証した。ナプロキセンは、シリカゲルHPLCの間、追加のマーカーとして作用する。３．CH₂N₂によるLLU−αの処理ジアゾメタンを、50％KOH（水性）400μｌによる１−メチル−３−ニトロ−ニトロソグアニジン（112mg，760μモル）の処理により生成した。ジアゾメタンを、−７℃でジエチルエーテル１ml中に蒸留した。この溶液を、０℃で、ジエチルエーテル0.5ml中、LLU−α 700μｇ（2.6μモル）に添加した。その反応混合物を周囲温度に暖め、次に40分間、放置した。溶媒をＮ₂の流れ下で除去し、そして残留物を、アセトニトリル中、15％の45mM酢酸／85％の50mM酢酸に溶解し、そして上記のような（第７段階）酢酸−アセトニトリルRP-HPLC精製段階にゆだねた。エステルのおおよその収率は53％であった。LLU−αのメチルエステル化、続くRP−HPLCは実質的に純粋なLLU−αメチルエステルを生成した。そのメチルエステルを、LLU−αのさらなる特徴化のために合成した。LLU−αメチルエステルは、酢酸−アセトニトリルRP−HPLCから、明らかに均一の単一ピークとして溶出した。合計約0.9mgのLLU−αメチルエステルを単離し、そして紫外線、赤外線、¹³Ｃ−及び¹Ｈ−NMR及び質量分光法による化学的特徴化にゆだねた。両LLU −α及びそのメチルエステルの物理的化学的特徴、分子量及び分子式は表IIに列挙される。例２：生物学的活性についてのバイオアッセイ１．インビボバイオアッセイ意識のあるラットにおけるナトリウム利尿についてのアッセイは前で記載した（Benaksasなど．、上記を参照のこと）。アッセイを手短にここでくり返す。雌のSpraguc−Dawley（Harian）ラット（200〜250ｇ）の大腿動脈及び静脈にカニューレ挿入し、平均の動脈圧(MAP)及び塩溶液及びサンプルの注入をそれぞれモニターする。膀胱にカテーテルを通し、10分間融で尿を採取した。フロセミド(0 .4mg／kg bwt；0.17％塩溶液中、１mg／ml)を、６番目の10分間融の始めで正の対照として注入した。サンプルを、17番目の10分間融の始めで注入した。尿をさらに150分間、採取した。尿の体積を重量測定し、そしてNa⁺及びＫ⁺濃縮をBeckm an E2A 電解質分析器により測定した。それらのデータから、ナトリウム排泄値（UNaV）を計算した。サンプルのナトリウム利尿応答を、注入されたフロセミドの用量に対して標準化した。フロセミド又はサンプルの注入のためのナトリウム排泄を、次の通りに計算した。フロセミド又はサンプルの注入の前、５つの期間についての中間のナトリウム排泄値（μモルNa⁺／10分の期間）を用いて、それぞれフロセミド又はサンプルのいづれかの投与のためのΔUNaVの計算のための基線値（＝μモル Na⁺期間−基線μモルNa⁺）を確立した。フロセミドの注入に続く４つの期間についてのΔUNaVの合計は、FRとして定義される、フロセミドのために排泄される正味ナトリウムであった。サンプルの注入に続く15番目の期間のための ΔUNaVの合計は、SRとして定義される、サンプルのために排泄される正味ナトリウムであった。サンプルのナトリウム排泄増加率Rn（又は標準化されたナトリウム利尿応答）を、FRによりSRを割り算することによって計算した（Rn＝SR／FR）。サンプルは、そのサンプルのためのRn値が0.67よりも大きいか又はそれに等しい場合、ナトリウム利尿性であると思われる。シリカゲル−HPLC（６番目の精製段階）からの一部精製されたLLU−αを、インビボバイオアッセイを用いてナトリウム利尿活性についてアッセイした。それは４〜８μｇ／kgの用量範囲で活性的であり、そしてそれよりも低いか又は高い用量で非活性を示した（表III）。LLU−αはまた、酢酸／アセトニトリルRP−HP LCに基づいてさらに精製された後（抽出方法の７番目の段階）、インビボバイオアッセイで評価される場合、８μｇ／kgで活性的である。 LLU−α及びLLU−γは、ラット中に注入される場合、血圧に対する効果を伴わないで（データは示されていない）、持効性ナトリウム利尿を引き起こす（図３Ａ及びＢ）。LLU−γは、その不安定性のために、ナトリウム利尿についての用量−応答曲線を得るために、十分には精製されていない。LLU−αは、狭く、且つ二相性のナトリウム排泄増加用量−応答曲線を示す（表III）。LLU−αが注入される場合、検出可能なカリウム尿は存在しなかった（図３Ａ）。カリウム尿が LLU−γの注入の後に生じるが、しかしながら、これは常には観察されなかった。LLU−αもLLU−γも、平均動脈圧の有意な変化を引き起こさなかった。２．Na⁺／Ｋ⁺−ATPase阻害アッセイ MDBK細胞におけるアッセイは前記の通りであった（Benaksasなど．、上記を参照のこと）。このアッセイをここで手短に記載する。Madin−Darbyウシ腎臓（MD BK）細胞(ATCC：CCL22)を、37℃で５％ CO₂／95％の湿潤化された空気雰囲気下で、５％ウシ胎児血清及び５％ウシ血清を含むダルベッコ変性イーグル培地（DM EM）に維持し、そして１週当たり１度、分けた（１：２）。アッセイの１日前、細胞を、血清を含むDMEMにおいて５×10⁵個の細胞／ウェルの密度で96−ウェルプレートにプレートした。アッセイの日、培地を除去し、そして細胞をリン酸緩衝溶液(PBS)により洗浄し、その後、100μｌのアッセイ培地(122mMのNaCl，1.8mMのCaCl₂，0.8mMのMgSO₄，24mMのNaHCO₃，１mMのピルビン酸ナトリウム、25mMのグルコース、14mMのグリシルグリシン、0.2％のフェノールレッド、８mMのNa₂HPO₄，1.15mMのKH₂PO₄，pH8.0)及び100μｌのサンプルを添加した。プレートを37℃で30分間プレインキュベートし、次に氷上で10分間、急冷せしめた。個々のウェルに、アッセイ培地10μｌ中、0.15μCiの⁸⁶RbCl（Amer sham）を添加した。次に、プレートを37℃で10分間、インキュベートした。上清液の一部(100μｌ)を、液体シンチレーション計算器を用いて0.5mlのシンチレーションカクテルにより計数した。Na⁺／Ｋ⁺−ATPase阻害のための対照として、10^-5 〜10^-8Ｍの範囲でのウアバインについての用量応答曲線を得た。ウアバインについての実験内変動率は、３〜15％であった。サンプルによる⁸⁶Rb⁺摂取の阻害を、ウアバインにより阻害できるその摂取のために修正した。 LLU−αがNa⁺／Ｋ⁺−ATPase阻害アッセイにおいてアッセイされる場合、それは0.2〜200ng／ウェルの範囲においては阻害を示さなかった。ナトリウムポンプ阻害アッセイにおける酢酸−メタノールRP−HPLC 再クロマトグラフィー段階から得られた粗LLU−γのアッセイは、ナトリウムポンプの阻害を示さなかった。例３：分析分光法さらに、UV以外の分光法を実施した。¹³Ｃ−及び¹Ｈ−NMRスペクトルを、GN− 500スペクトロメーター（General Electric）により第二クロロホルム（99.9％）において500.1357MHzで記録した。2000の解像度を有する高解像度電子衝撃（E I）マススペクトルを、70eVのイオン化電圧及び220℃の温度源及びVG7070EHF 高解像度質量スペクトロメーター上への直接的なプローブによるサンプルの導入で記録した。Fourier−転換赤外線（FT−IR）分光法を、４波数解像度を有するNic olet ５DX上で実施した。 LLU−αのIR及び¹³Ｃ−NMRスペクトルは、カルボン酸基の存在の証拠を提供した。これは、イソプロパノール／ヘキサンシリカゲルHPLC（６番目の精製段階）からの溶出に基づいて観察されるLLU−αの末端を説明する。カルボキシ基の存在が、LLU−αとジアゾメタンとの反応がRP−HPLCに基づいて低い極性であり、そしてMSにより決定されるようなLLU−αよりも高い正確な質量の14単位を有する生成物をもたらす場合に確証された（表II）。これはメチルエステルの形成と矛盾しない。次の合成例において、例４〜10は、本発明の範囲内の広範囲の化合物を生成するために有用な一般的な方法を示す。例11〜21は特定化合物の合成を記載する。例４：ラセミ性６−ヒドロキシクロマンの合成有機溶媒、好ましくは無水ジオキサン（10ml）中、ヒドロキノン１（0.01モル）及び触媒、好ましくは三弗化硼素ジエチルエーテレート（0.016モル）の溶液に、有機溶媒、好ましくは無水ジオキサン(5.0ml)中、ビニルラクトン２(0.016 モル)を、不活性ガス下で、１〜60分、好ましくは60分間にわたって、０〜150℃ 、好ましくは110℃で添加する。この反応混合物を、選択された温度で０〜８時間、好ましくは０時間、撹拌し、室温に冷却し、そして有機溶媒、好ましくはジエチルエーテル(200ml)により希釈する。次に、その反応混合物を、水(100ml，２×50ml)により洗浄し、硫酸ナトリウム（Na₂SO₄）上で乾燥せしめ、そして溶媒を減圧下で除去し、カッ色の油状残留物を得る。この残留物を、アルコール、好ましくはメタノール（30ml）に溶解し、そして次に、アルコールを減圧下で除去する。そのカッ色の油状液体又は半固体をクロマトグラフィー、好ましくはシリカゲル上で精製し、純粋なラセミ性クロマン誘導体３を得る。例５：ラセミ性クロマンの合成有機溶媒、好ましくは無水ジオキサン（10ml）中、フェノール４（0.01モル）及び触媒、好ましくは三弗化硼素ジエチルエーテレート(0.016モル)の溶液に、有機溶媒、好ましくは無水ジオキサン(5.0ml)中、ビニルラクトン２(0.016モル) を、不活性ガス下で０〜150℃、好ましくは110℃で１〜60分、好ましくは60分間にわたって添加する。この反応混合物を、選ばれた温度で、０〜８時間、好ましくは０時間、撹拌し、室温に冷却し、そして有機溶媒、好ましくはジエチルエーテル(200ml)により希釈する。次に、その反応混合物を水(100ml，２×50ml)により洗浄し、硫酸ナトリウム（Na₂SO₄）上で乾燥せしめ、そして溶媒を減圧下で除去し、カッ色の油状残留物を得る。この残留物をアルコール、好ましくはメタノール（30ml）に溶解し、そして次に、アルコールを減圧下で除去する。カッ色の油状液体又は半固体をクロマトグラフィー、好ましくはシリカゲル上でさらに精製し、純粋なラセミ性クロマン誘導体５を得る。例６：クロマンメチルエステルの合成クロマン３（Ｒ₃＝OH）又は５（上記例４及び５を参照のこと）（0.01モル）を、メタノール（30ml）に溶解し、そしてエーテル中、ジアゾメタンの溶液を０〜５℃で、ジアゾメタンの黄色の色が存続するまで添加する。その反応混合物を室温で２〜５時間、放置し、溶媒を除去し、そして所望する生成物６を適切な有機溶媒から結晶化する。例７：クロマンエステルの合成クロマン３（Ｒ₃＝OH）又は５（10ｍモル）を、アルコールＲ₇−OH（12ｍモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（10ｍモル）及び１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（11ｍモル）と共に無水テトラヒドロフラン（30ml）に２〜５℃で溶解する。その反応混合物を、２〜５℃で１時間、及び23℃で１〜20時間、撹拌する。沈殿せしめられたジシクロヘキシルウレアを濾過し、溶媒を減圧下で除去し、そして残留物を酢酸エチル(150ml)により希釈する。有機相を水性KHS O₄（10％，40ml）、水（50ml）及び飽和水性炭酸水素（50ml）により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめる。溶媒を減圧下で除去し、そして残留物をクロマトグラフィー、好ましくはシリカゲル上で精製し、ラセミ性エステル７を得る。例８：クロマンアミドの合成クロマン３（Ｒ₃＝OH）又は５（10ｍモル）を、無水テトラヒドロフラン（40ml）に溶解し、そしてＮ−メチルモルホリンにより中和する。イソブチルクロロカーボネート（10ｍモル）を添加し、続いて１分後、選択されたアミン（Ｒ₇−NH₂又はR₇R₈−NH）、又はアンモニア（11ｍモル）を添加する。その反応混合物を室温にする。室温で１時間の撹拌の後、THFを減圧下で除去し、そして残留物を酢酸エチル(250ml)中に取る。その酢酸エチル溶液を、水性KHSO₄（ 10％，40ml）、水（50ml）及び飽和水性炭酸水素（50ml）により連続的に洗浄し、そして次に、硫酸ナトリウム上で乾燥せしめる。溶媒を減圧下で除去し、そして残留物をクロマトグラフィー、好ましくはシリカゲル上で精製し、純粋なラセミ性アミド８を得る。例９：Ｒ₄クロマンエステルの合成方法１：クロマン３（Ｒ₃＝OH）又は５（10ｍモル）を、ピリジン（20ml）に溶解し、そして酸無水物（30ｍモル）を50℃で添加する。その反応混合物を室温で 18時間放置し、溶媒を真空下で除去し、そして残留物を酢酸エチル(100ml)に溶解し、クエン酸（10％，30ml）及び水（30ml）により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめる。溶媒を除去し、そして残留物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化し、エステル９を得る。方法２：クロマン３（Ｒ₃＝OH）又は５（10ｍモル）を窒素下で無水ピリジン（5 0ml）に溶解し、そして氷−水浴において冷却する。塩化アシル（10ｍモル）を1 5分間にわたって、注射器を通して添加する。室温で撹拌を１時間、続ける。ピリジンを減圧下で除去し、そして残留物を酢酸エチル(100ml)に溶解する。酢酸エチル相を、水（２×40ml）、水性塩酸（0.05Ｍ，30ml）及び水（40ml）により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめる。溶媒を減圧下で除去し、そして残留物をクロマトグラフィー、好ましくはシリカゲル上で精製し、エステル９を得る。例10 ：酸化されたクロマン誘導体の合成クロマン３又は５(0.3ｍモル)を、フラスコ中でメタノール(2.5ml)に溶解する。塩化第二鉄溶液を、水(4.0ml)に1.0ｇのFeCl₃・６H₂Oを溶解し、そしてメタノール(4.0ml)を添加することによって調製する。その塩化第二鉄溶液(2.5ml)を、室温で激しく撹拌しながら暗室において30分間にわたってフラスコに添加する。メタノールを真空下で除去し、そして残留物をエーテル（70ml）に溶解する。そのエーテル溶液を水（３×20ml）により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、次に溶媒を除去する。生成物をRPHPLCカラム（CH₃CN／H₂Oグラジエント）上で精製し、黄色〜カッ色の油状生成物を得る。例11 ：ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６− ヒドロキシクロマン(LLU−α)の合成フラスコにおけるジオキサン（10ml、ナトリウム上で乾燥された）中、２，３ −ジメチル−１，４−ヒドロキノン（0.01モル）及び三弗化硼素ジエチルエーテレート(0.016モル)の溶液に、窒素下で110℃で（油浴、還流）、50分間にわたって、ジオキサン(5.0ml)中、γ−メチル−γ−ビニルブチロラクトン(0.016モル) を添加した。その反応混合物を室温に冷却し、そしてエーテル(200ml)により希釈し、次に水(100ml，２×50ml)により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。次に、エーテルを減圧下で除去し、カッ色の油状物を得る。その残留物をメタノール（30ml）に溶解し、そして溶媒を減圧下で除去した。その残留物をメタノール（10ml）に再溶解し、そしてフラスコを窒素によりパージし、そして５℃で20時間、貯蔵した。その得られる懸濁液を遠心分離し、そして上清液を除去した。残存する白色固体（下記例21を参照のこと）を、70％水性メタノール（15ml）に懸濁し、そして再ぴ遠心分離した。その上清液を前の上清液と組合し、そしてメタノールを真空下で除去し、カッ色の油状液体を得た。その液体をさらに、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤、酢酸エチル／ヘキサン／酢酸＝500：300：１）により精製し、純粋なラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマンを得、これをエーテル−ヘキサンから40％の収率で結晶化した（Ｍ．Ｐ．＝147〜148℃）。例12 ：ラセミ性２，５，７，８−テトラメチル−２−（β−カルボキシエチル） −６−ヒドロキシクロマンフラスコにおけるジオキサン（10ml、ナトリウム上で乾燥された）中、２，３，５−トリメチル−１，４−ヒドロキノン（0.01モル）及び三弗化硼素ジエチルエーテレート(0.016モル)の溶液に、窒素下で110℃で（油浴、還流）、50分間にわたって、ジオキサン(5.0ml)中、γ−メチル−γ−ビニルブチロラクトン(0.01 5モル)を添加した。その反応混合物を室温に冷却し、そしてエーテル(200ml)により希釈し、次に水(100ml，２×50ml)により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。次に、エーテルを真空下で除去した。残留物をメタノール（30 ml）に溶解し、そして溶媒を真空下で除去した。カッ色の油状残留物をメタノール（20ml）に溶解し、そしてその溶液が濁るまで水（約20ml）を添加し、次にフラスコを窒素によりパージし、そして冷蔵庫に一晩、貯蔵した。淡黄色の固体を焼結漏斗上で濾過し、水腫50％メタノールにより洗浄し、そして乾燥器において乾燥せしめた。さらに、生成物を、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤、酢酸エチル／ヘキサン／酢酸＝500：300：１）により精製し、純粋なラセミ性２，５，７，８−テトラメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマンを得、これを50％の収率でエーテル−ヘキサンから結晶化した（Ｍ．Ｐ．＝173℃）。例13 ：ラセミ性２，５，７，８−テトラメチル−２−（β−カルボキシエチル） −クロマンの合成フラスコにおけるジオキサン（10ml、ナトリウム上で乾燥された）中、２，３，５−トリメチルフェノール（0.01モル）及び三弗化硼素ジエチルエーテレート (0.016モル)の溶液に、窒素下で110℃で（油浴、還流）、50分間にわたって注射器ポンプを通してジオキサン(5.0ml)中、γ−メチル−γ−ビニルブチロラクトン(0.016モル)を添加した。その反応混合物を室温に冷却し、そしてエーテル(20 0ml)により希釈し、次に水(100ml，２×50ml)により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。次に、エーテルを真空下で除去した。残留物をメタノール（30ml）に溶解し、そして溶媒を真空下で除去した。その反応混合物を、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤、酢酸エチル／ヘキサン＝１：１）により精製した。所望するクロマンを含む画分をプールし、溶媒を除去し、そして化合物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化し、収率40％で白色の結晶生成物を得た（Ｍ．Ｐ．＝148〜149℃）。例14 ：ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−クロマンの合成フラスコにおけるジオキサン（10ml、ナトリウム上で乾燥された）中、２，３ −ジメチルフェノール（0.01モル）及び三弗化硼素ジエチルエーテレート(0.016 モル)の溶液に、窒素下で110℃で（油浴、還流）、50分間にわたって注射器ポンプによりジオキサン(5.0ml)中、γ−メチル−γ−ビニルブチロラクトン(0.016 モル)を添加した。その反応混合物を室温に冷却し、そしてエーテル(200ml)により希釈し、次に水(100ml，２×50ml)により洗浄し、そして硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。次に、エーテルを真空下で除去した。残留物をメタノール（30ml ）に溶解し、そして溶媒を真空下で除去した。その反応混合物を、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離剤、酢酸エチル／ヘキサン＝１：１）により精製した。所望するクロマンを含む画分をプールし、溶媒を除去し、そして化合物を酢酸エチル／ヘキサンから結晶化した。Ｍ．Ｐ．＝93〜94℃。例15 ：ラセミ性４−メチル−６−（５，６−ジメチルベンゾキノイル）−４−ヘキサノリドの合成ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマン(100mg)を、フラスコにおいてメタノール(2.5ml)に溶解した。塩化第二鉄の溶液を、水(4.0ml)に1.0ｇのFeCl₃・6H₂O を溶解し、そしてメタノール(4.0ml)を添加することによって調製した。その塩化第二鉄溶液(2.5ml)を、暗室において、激しく撹拌しなから室温で30分間にわたってフラスコに添加した。メタノールを真空下で除去し、そして残留物をエーテル（70ml）に溶解した。そのエーテル溶液を水（３×20ml）により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして溶媒を除去した。生成物をRP HPLCカラム (CH₃CN／H₂Oグラジエント)上で精製し、黄色〜カッ色の油状生成物を60％の収率で得た。例16 ：ラセミ性４−メチル−６−（３，５，６−トリメチルベンゾキノイル）− ４−ヘキサノリドの合成ラセミ性２，５，７，８−テトラメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６ −ヒドロキシクロマン(100mg)を、フラスコにおいてメタノール(2.5ml)に溶解した。例10の塩化第二鉄溶液(2.5ml)を、激しく撹拌しなから、暗室において30分間にわたって室温でフラスコに添加した。メタノールを真空下で除去し、そして残留物をエーテル（70ml）に溶解した。そのエーテル溶液を水（３×20ml）により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして溶媒を除去した。生成物をRP HPLCカラム(CH₃CN／H₂Oクラジエント)上で精製し、黄色〜カッ色の油状生成物を60％の収率で得た。例17 ：ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６− ヒドロキシクロマン(LLU−α)の分解（Ｓ）及び（Ｒ）−鏡像異性体の分解を、溶離剤として80％のヘキサン：20％のプロパノール：0.5％の酢酸を用いて、（Ｓ，Ｓ）−WHELK−01カラム(Regis T echnologies，Inc.)(250×4.6mm，１ml／分)上で実施した。画分をUV分光計によりモニターし、集め、そしてアルゴンの流れ下で乾燥せしめた。鏡像異性体が6. 8分及び8.7分で溶離し、単離されたLLU−αが、このシステム上で試験される場合、8.6分で溶離する。例18 ：（Ｒ）−及び（Ｓ）−４−メチル−６−（５，６−ジメチルベンゾキノイル）−４−ヘキサノリドの合成（Ｒ）−２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマン(100mg)（例17を参照のこと）を、メタノール(2.5ml)に溶解し、そして塩化第二鉄溶液(2.5ml)を、暗室において激しく撹拌しながら室温で30分間にわたって添加した。メタノールを減圧下で除去し、そして残留物をエーテル（70ml）に溶解した。そのエーテル溶液を水（３×20ml）により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥せしめ、そして溶媒を除去した。生成物を、Phenomenexカラム (SPHEREX 100DS，250×21.2mm)を用いて、CH₃CN−H₂O(50：50)により５分間、CH₃ CN−H₂O(90：10)の線状グラジエントにより30分間、100％ CH₃CNの線状グラジエントにより５分間、６ml／分の流速でHPLCにより精製した。所望する酸化生成物を含む画分をUV分光計により同定した。その画分をプールし、そして溶媒を減圧下で除去し、黄色〜カッ色の油状物として（Ｒ）−４−メチル−６− （５，６−ジメチルベンゾチノイル）−４−ヘキサノリドを得た。前記工程を、（Ｓ）−２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマン(100mg)を用いてくり返し、黄色〜カッ色の油状物として（Ｓ）−４−メチル−６−（５，６−ジメチルベンゾチノイル）−４−ヘキサノリドを得た。例19 ：ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６− アセチルクロマンの合成ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−ヒドロキシクロマン(500mg)（例11を参照のこと）を、室温でピリジン（20ml）に溶解し、そして無水酢酸（10ml）を添加した。その溶液を室温で５時間、維持し、溶媒を真空下で除去し、メタノール（４×10ml）を添加し、そして次に減圧下で除去した。残留油状物を酢酸エチル(150ml)に溶解し、そして有機相を水（50ml ）、水性HCl(１Ｎ，50ml)及び水（50ml）により洗浄し、次に硫酸ナトリウム上で乾燥せしめた。次に、溶媒を除去し、そして残留油状材料を、ヘキサン／酢酸エチル（１：１）によりシリカゲルカラム上で精製した。所望する生成物を、アセトン／ヘキサンから結晶化した（ｍ．ｐ．＝105〜107℃）。例20 ：ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６− アセチルクロマンメチルエステルの合成ラセミ性２，７，８−トリメチル−２−（β−カルボキシエチル）−６−アセチルクロマン(500mg)（例11及び19を参照のこと）を、メタノール（10ml）に溶解し、そしてエーテル性ジアゾメタンを、ジアゾメタンの黄色が残るまで添加した。その溶液を室温で１時間、維持し、溶媒を除去し、そして残留物を、ヘキサン／アセトン（３：１）によりシリカゲルカラム上で精製した。所望する生成物が、メタノール／水から結晶化した（ｍ．ｐ．＝87〜88℃）。例21 ：ベンゾジピランメチルエステルの合成ベンゾジピラン誘導体10（ｍ．ｐ．225〜227℃）を、LLU−α（例11）の合成からの反応副生成物として単離した。誘導体10は、メソ−（Ｒ，Ｓ）化合物及びジアステレオマー対（Ｒ，Ｒ）及び（Ｓ，Ｓ）のラセミ性混合物として存在する。誘導体10(1.0ｇ)をメタノール（10ml）に懸濁し、そしてエーテル性ジアゾメタンを、ジアゾメタンの黄色が残るまで添加した。透明な溶液を室温で１時間、維持し、溶媒を除去し、そして残留物を、ヘキサン／アセトン（３：１）によりシリカゲルカラム上で精製した。所望する生成物が、ヘキサンから結晶化した（ｍ．ｐ．75〜76℃）。本発明が好ましい態様で記載されて来たが、種々の修飾が本発明の範囲内で行なわれ得ることは理解されるべきである。従って、本発明は次の請求の範囲によってのみ限定される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｃ 51/09 Ｃ０７Ｃ 51/09 59/52 59/52 59/84 59/84 61/39 61/39 61/40 61/40 62/32 62/32 62/34 62/34 67/343 67/343 69/76 69/76 ＡＺ 211/26 211/26 211/29 211/29 211/34 211/34 211/37 211/37 211/44 211/44 231/24 231/24 233/11 233/11 235/32 235/32 235/78 235/78 317/32 317/32 317/44 317/44 Ｃ０７Ｄ 307/33 Ｃ０７Ｄ 311/58 311/58 311/72 １０１ 311/72 １０１ 333/58 333/58 333/60 333/60 333/64 333/64 335/06 335/06 337/08 337/08 337/16 337/16 493/04 １０６Ｃ 493/04 １０６Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００ // Ｃ０７Ｂ 61/00 ３００Ｃ０７Ｄ 307/32 Ｇ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ウェッチャー，ウィリアムジェイ. アメリカ合衆国，カリフォルニア 92373, レッドランズ，ハイビュードライブ 12876 (72)発明者マーレイ，デビッドイー. アメリカ合衆国，カリフォルニア 92374, レッドランズ，パークビュー 1716 (72)発明者カントシ，ダーコアメリカ合衆国，カリフォルニア 92373, レッドランズ，シープライスストリート 69 (72)発明者レバイン，バリーエイチ. アメリカ合衆国，カリフォルニア 94611, オークランド，マンザニタドライブ 1742 (72)発明者ベナクサス，エレインジェイ. アメリカ合衆国，カリフォルニア 92687, ヨーバリンダ，ヘザーウッドレーン 21810

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式Ｉ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は、独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物。２．ＲがＯである請求の範囲第１項記載のナトリウム利尿化合物。３．Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がCH₃であり、Ｒ₃がOHであり、Ｒ₄がＨ又はCH₃であり、Ｒ₆がCOOHであり、ｎが１であり、そしてｍが２である請求の範囲第２項記載のナトリウム利尿化合物。４．Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がCH₃であり、Ｒ₃がＨであり、Ｒ₄がＨ又はCH₃であり、Ｒ₆がCOOHであり、ｎが１であり、そしてｍが２である請求の範囲第２項記載のナトリウム利尿化合物。５．下記式II：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン、又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５ −もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニルもしくはアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物。６．下記式III：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６− 員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるナトリウム利尿化合物。７．下記式IV：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR ₇ R₈又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；Ｒ₉は、ヒドロキシル又は置換されていないかもしくは置換されたアルコキシルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされるナトリウム利尿化合物。８．下記式Ｖ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₄は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニルであり；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるナトリウム利尿化合物であって、但し、４−メチル−６−（５，６−ジメチルベンゾキノイル）−４−ヘキサノリドではない化合物。９．Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がCH₃であり、Ｒ₄がＨであり、ｎが１であり、そしてｑが１である請求の範囲第８項記載の方法。 10．ナトリウム利尿化合物の調製方法であって、下記式VI：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；そしてＲ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成している〕で表わされる化合物と、下記式VII：〔式中、Ｒ₅は、Ｈ、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族又はエステルであり、ｎは、０〜３であり；そしてｑは、０〜４である〕で表わされるビニルラクトンとを反応せしめる段階を含んで成る方法。 11．三弗化硼素ジエチルエーテレートが触媒として使用される請求の範囲第10 項記載の方法。 12．前記ナトリウム利尿化合物がエステル化される請求の範囲第10項記載の方法。 13．前記ナトリウム利尿化合物が酸化される請求の範囲第10項記載の方法。 14．下記式VIII：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル、又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる利尿化合物。 15．下記化合物：から成る群から選択される請求の範囲第14項記載のナトリウム利尿化合物。 16．下記式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物であって、ここで（ｉ）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はＨであり、ｍは２〜５であり；（ii）ＲがＯである場合、Ｒ₁はＨ又はCH₃であり、Ｒ₂はＨ，CH₃，C(CH₃)₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、Ｒ₄はCH₃又はCH(CH₃)₂であり、Ｒ₅はＨ，CH₃又はCH₂CH₃であり、そしてＲ₆はＨ，OH，OCH₃，OCH₂CH₃、又はNH₂であり、ｍは１〜５であり；（iii）ＲがＯである場合、Ｒ₁及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₂及びＲ₄はＨであり、Ｒ₃はOH又はCH₃COOであり、そしてＲ₆はOH又はCH₃Oであり、ｍは２ではなく；（iv）ＲがＯである場合、Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅はCH₃であり、Ｒ₃はOH又はCH₃COO であり、Ｒ₄は少なくとも２つの炭素原子を有するアルキルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、そしてＲ₆はＨ，OH又はエステルであり、ｍは１であり；そして（ｖ）Ｒ₁，Ｒ₂及びＲ₅がメチルである場合、Ｒ₃及びＲ₆はOHであり、そしてＲ₄はアルキルであり、ｍは２であることを特徴とする化合物。 17．予備濃縮された再構成水性哺乳類サンプルから、哺乳類の尿へのナトリウム排泄を高めることができる実質的に精製されたナトリウム利尿化合物を得るための方法であって：（ｉ）溶離剤として酢酸アンモニウムの溶液を用いてのゲル濾過に前記サンプルの少なくとも一部をゆだね、そして後−塩ピーク材料を得るために、塩ピークの直後に現われる材料のみを保持し；（ii）前記後−塩ピーク材料から生物学的活性画分を、酢酸ピリジニウム／メタノール、酢酸／メタノール及びイソクラティック酢酸／メタノールから成る群から選択された溶離剤を用いての樹脂カラム上での反復逆相高圧クロマトグラフィーにより単離し、（iii）クロマトグラフィー生成物を得るために前記生物学的活性画分をシリカゲル高圧クロマトグラフィー処理にゆだね、（iv）溶離剤としてイソプロパノール／ヘキサンを用いて、生物学的活性を有する前記クロマトグラフィー生成物を回収し、そして（ｖ）前記生物学的活性画分から前記化合物を、前記画分から水を除去することによって分離する段階を含んで成る方法。 18．段階（ｉ）の前、前記哺乳類サンプルが、（ａ）水性溶媒中、約３KDa以下か又はそれに等しい分子量を有する化合物を含む材料を哺乳類サンプルから分離し、（ｂ）前記化合物から前記溶媒を除去することによって前記材料を濃縮し、そして（ｃ）前記材料を減じられた体積に溶媒により再構する段階を含んで成る方法により調製される請求の範囲第17項記載の方法。 19．前記後−塩ピーク材料からイソプロパノール／ジエチルエーテル可溶性化合物を抽出し、そして段階（ii）の反復逆相高圧クロマトグラフィーにより前記抽出から生物学的活性画分を単離する段階をさらに含んで成る請求の範囲第17項記載の方法。 20．溶離剤として酢酸／アセトニトリルを用いての樹脂カラム上での反復逆相高圧クロマトグラフィーにより、前記段階（iv）の回収されたクロマトグラフィー生成物から生物学的活性画分を単離する段階をさらに含んで成る請求の範囲第 17項記載の方法。 21．前記哺乳類サンプルが、血液、尿及び組織から成る群から選択される請求の範囲第17項記載の方法。 22．前記画分の生物学的活性を、意識のあるラットにおけるナトリウム排泄増加についてのインビボバイオアッセイにより測定する請求の範囲第17項記載の方法。 23．請求の範囲第17項記載の方法により得られる、実質的に精製されたナトリウム排泄増加化合物。 24．医薬的に許容できるキャリヤー及びナトリウム排泄を刺激するのに有効な量の請求の範囲第１項記載の化合物を含んで成る、哺乳類の尿におけるナトリウム排泄を刺激するために有用な医薬組成物。 25．医薬的に許容できるキャリヤー及びナトリウム排泄を刺激するのに有効な量での、請求の範囲第２項記載の化合物を酸化することにより生成される化合物を含んで成る、哺乳類の尿におけるナトリウム排泄を刺激するため有用な医薬組成物。 26．請求の範囲第24項記載の医薬組成物を哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る、哺乳類の尿におけるナトリウム排泄を刺激するための方法。 27．請求の範囲第25項記載の医薬組成物を哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る、哺乳類の尿におけるナトリウム排泄を刺激するための方法。 28．医薬的に許容できるキャリヤー及び治療的に有効な量の請求の範囲第１項記載の化合物を含んで成る、高血圧症又は水腫性状態を有する哺乳類の処理のために有用な医薬組成物。 29．医薬的に許容できるキャリヤー及び治療的に有効な量の請求の範囲第２項記載の化合物を含んで成る、高血圧症又は水腫性状態を有する哺乳類の処理のために有用な医薬組成物。 30．請求の範囲第28項記載の医薬組成物を、高血圧症又は水腫性状態を有する哺乳類に経口又は非経口投与する段階を含んで成る、前記哺乳類を処理するための方法。 31．請求の範囲第29項記載の医薬組成物を、高血圧症又は水腫性状態を有する哺乳類に経口又は非経口投与する段階を含んで成る、前記哺乳類を処理するための方法。 32．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物の治療的有効量を含んで成る、虚血症を有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 33．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉｂ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり；ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物を酸化又は脱水することによって生成される化合物の治療的有効量を含んで成る、虚血症を有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 34．請求の範囲第32項記載の医薬組成物を、虚血症を有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。 35．請求の範囲第33項記載の医薬組成物を、虚血症を有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。 36．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５− もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物の治療的有効量を含んで成る、狭心症を有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 37．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉｂ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物を酸化又は脱水することによって生成される化合物の治療的有効量を含んで成る、狭心症を有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 38．請求の範囲第36項記載の医薬組成物を、狭心症を有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。 39．請求の範囲第37項記載の医薬組成物を、狭心症を有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。 40．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉａ：〔式中、Ｒは、Ｏ，Ｓ，SO，SO₂、第二又は第三アミン基、リン酸基、リン酸エステル基、又は置換されていないかもしくは置換されたメチレン基であり；Ｒ₁及びＲ₂は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は、独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物の治療的有効量を含んで成る、HIV 感染又はAIDSを有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 41．医薬的に許容できるキャリヤー及び下記式Ｉｂ：〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族もしくは芳香族環を構成しており；Ｒ₃及びＲ₄は独立して、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エーテル、エステル、置換されていないかもしくは置換されたアミン、アミド、ハロゲン又は置換されていないかもしくは置換されたスルホニル、又は一緒になって５−もしくは６−員の脂肪族、芳香族もしくは複素環式環を構成しており；Ｒ₅は、Ｈ，OH、アルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、芳香族、エステル又は置換されていないかもしくは置換されたアミンであり；Ｒ₆は、COOH，COOR₇，CONH₂，CONHR₇，CONR₇R₈，NH₂，NHR₇，NR₇R₈、又はカルボン酸塩であり、ここでＲ₇及びＲ₈は独立して、置換されていないかもしくは置換されたアルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルケニル又はアルキニルであり；ｎは、０〜３であり；そしてｍは、０〜５である〕で表わされる化合物を酸化又は脱水することによって生成される化合物の治療的有効量を含んで成る、HIV感染又はAIDSを有する哺乳類を処理するのに有用な医薬組成物。 42．請求の範囲第40項記載の医薬組成物を、HIV感染又はAIDSを有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。 43．請求の範囲第41項記載の医薬組成物を、HIV感染又はAIDSを有する哺乳類に経口又は非経口投与することを含んで成る前記哺乳類を処理するための組成物。