JPH09508900A

JPH09508900A - 薬理学的に活性な化合物及びリポソーム並びにそれらの使用方法

Info

Publication number: JPH09508900A
Application number: JP7520799A
Authority: JP
Inventors: ペイ，ヨン−ウェイ; メイヤー，エリック; アーマド，イムラン; ジャノフ，アンドリュー，エス
Original assignee: ザリポソームカンパニー、インコーポレーテッド
Priority date: 1994-02-02
Filing date: 1995-02-02
Publication date: 1997-09-09
Also published as: CA2182485A1; AU1871295A; WO1995021175A1; ATE195944T1; DK0742789T3; EP1008342A3; NO314405B1; EP0742789A1; FI963045A0; FI963045A; GR3034521T3; EP0742789B1; ES2149350T3; EP1008342A2; FI116620B; US5677337A; AU691886B2; NO963224D0; US5631394A; US5681589A

Abstract

(57)【要約】本発明は、式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物を提供する。ここで、Ｒ₁は、脂肪族鎖中に８〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）、Ｚ₁は、ＯＨ又は変換抑制基であり、Ｚ₂は、変換抑制基、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有すアルキル鎖、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂、Ｒ₂は、脂肪族鎖中に１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基、Ｚ₂がアミノであるとき、Ｒ₂は、脂肪族鎖中に１〜９個又は１９〜２３個の炭素原子を有する脂肪族鎖である。

Description

【発明の詳細な説明】薬理学的に活性な化合物及びリポソーム並びにそれらの使用方法発明の分野本発明は、薬理学的に活性なスフィンゴ脂質化合物、薬理学的に活性なスフィンゴ脂質化合物を含むリポソーム、並びにそのような化合物及びリポソームを、特に癌に罹っている動物の治療に使用する方法に関する。多細胞生物の細胞死は、外傷に対する偶発的な応答であるか、又は内部若しくは外部刺激に対するプログラム応答であり得る。壊死、即ち、偶発的な細胞死は、生物に対する突然かつ重大な傷害の結果として、例えば、物理的又は化学的損傷、持続性高熱又は虚血によって、細胞が抑制できずに死ぬときに、非常に頻繁に見られる（例えば、J．Cohen、イムノロジカル・トウディ（Immunol．Today），１４巻（３）、１２６頁（１９９３）；J．Marx、サイエンス（Science），２５９巻、７５０頁（１９９３）参照）。原形質膜損傷は、細胞がその浸透圧を調節する能力を失う原因になり得るし、それによって細胞破裂が起こり得る。その結果、細胞の内容物が漏出して、更に周囲の細胞に対する損傷を引き起こし、炎症性応答を生じて、細胞壊死組織片を取り除くことができる。対照的に、アポプトシス（自然死）は、膜結合粒子への分裂(fragmentation) によって細胞死に至るプログラム化された一連の経過を示している。これらの粒子は、その後、他の細胞によって食される（例えば、ステッドマン医学辞典（図解）、上記、参照）。細胞は、代表的には、自己反応性Ｔ細胞の除去、半減期の短い細胞（例えば、好中球）の死、成長因子欠損細胞の退縮、胚発育中の形態形成細胞死及び細胞媒介性細胞障害の細胞ターゲットの死のような生理学的に決定された環境のもとでアポプトシスを受ける（例えば、J．Cohen、上記、参照）。アポプトシスを受ける細胞は、分裂してアポプトシス体（apoptotic bodies）になることができ、アポプトシス体は、それらの膜を保持し、それらの浸透圧を調節することができる細胞断片である。壊死細胞とは異なり、通常は、細胞内容物の漏出はなく、従って、炎症性応答は起こらない。アポプトシス細胞（apopto tic cells）は、代表的には、原形質膜を破砕し、凝縮して、核を破砕してしまう。これらの細胞中の核染色質は、アポプトシス中に、エンドヌクレアーゼ活性化の結果として、ヌクレオソーム間でランダムに切断される。アポプトシス細胞の転写は停止するけれども、細胞死は、転写の停止だけから考えられるよりも速く起こる。このことは、転写の終了に加えて、細胞プロセスがアポプトシスに含まれているようであることを示している。遺伝子発現それ自身は、実際に、アポプトシスに関連した形態学的変化の発生に必要であるかもしれない（例えば、J．Cohen、上記参照）。あるいは、転写終了の抑制も、それ自身、アポプトシスを誘発するかもしれない。更に、いずれにしても、ある細胞のアポプトシスが、蛋白質合成の抑制によって影響されるようには見えない。例えば、ｂｃｌ−２癌遺伝子の発現は、さもなくば別の刺激によって誘発されるアポプトシスを抑制し、それによって癌発生の原因になるかもしれない。従って、ｂｃｌ−２発現の抑制は、アポプトシスを誘発するのに必要かも知れない（例えば、J．Marx、上記；J．Cohen、上記；G.Williams 及びC．Smith、セル（Cell）、７４巻、７７７頁（１９９３）；M. Barinaga、Science、２５９巻、７６２頁（１９９３年２月５日）参照）。Ｃ−ｍｙｃ蛋白質は、細胞の増殖を促進することが知られている。しかしながら、この蛋白質は、付加的な増殖促進なしで、アポプトシスをも促進するかもしれない。ｐ５３は、腫瘍成長を抑制すると考えられているが、アポプトシスをも刺激するかもしれない。腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）と同族の膜貫通（transmembrane）蛋白質であるＣ−ｆａｓも、ＴＮＦ自身と同様、アポプロシスを誘発することがある。ＴＮＦは、単核細胞とマクロファージによって作られるモノカイン蛋白質であり、構造的、機能的に関連した２つのＴＮＦ蛋白質、ＴＮＦ−αとＴＮＦ−β、が知られており、両者とも同一の細胞表面受容体に結合している。これら受容体にＴＮＦが結合すると、スフィンゴミエリナーゼを始めとする多数のシグナル形質導入経路が活性化される。（例えば、M．Raines 等、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（J．Biol．Chem.）２６８巻（２０）、１４５７２頁（１９９３）；L．Obeid 等、Science、２５９巻、１７６９頁（１９９３年３月１２日）；H．Morishige 等、バイオヒミカ・バイオフィジカ・エ・アクタ（Bio chem．Biophys．Acta.）、１１５１巻、５９頁（１９９３）；J.Vilcek 及び T ．Lee、J．Biol．Chem.、２６６巻（１２）、７３１３頁（１９９１）；Dbaibo 等、J. Biol．Chem.、２６８巻（２４）、１７７６２頁（１９９３）；R．Koles nik、トレンズ・セルラー・バイオロジー（Trends Cell．Biol.）、２巻、２３２頁（１９９２）；J. Fishbein等、J．Biol. Chem.、２６８巻（１３）、９２５５（１９９３）参照）。本発明者等は、セラミド濃度が増えると、アポプトシスを促進することを見い出した。セラミドは、スフィンゴイドの脂肪酸誘導体からなるスフィンゴ脂質の一種、例えばスフィンゴシン塩基である（例えば、ステッドマン医学辞典（図解）（２４版、編者J．V．Basmajian等編）、９９頁、Willi ams and Wilkins，Baltimore（１９８２）参照）。種々のセラミドは、スフィンゴイド塩基に結合した種々の脂肪酸によって特徴づけられる。例えば、ステアリン酸は、スフィンゴシンのアミノ基と結合して、セラミドＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ（ＣＨ₂ＯＨ）−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ₂）₁₆ＣＨ₃を生じることができる。脂肪酸の鎖は、短くても長くても、スフィンゴイド塩基と結合することができる。本発明者等は、このような化合物の類似物を形成するように、ある種の化学基をスフォンゴ脂質とセラミドに結合させると、セラミドのスフィンゴミエリンへの生物変換反応を抑制することができ、それによって、セラミド濃度がアポプトシスを促進するまでに増加しうることを見いだした。セラミド類は、あらゆる真核細胞膜に見出され、さまざまな臨界細胞プロセスに関与していることがわかっている。更に、ある種のスフィンゴ脂質化合物は、細胞増殖の防止にある役割を果たしていることが見い出されている。しかしながら、これらの参考文献は、いずれも、出願人の化学化合物及びリポソーム、あるいは細胞死を促進するのにそれらを使用することを教示していない。発明の要旨式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物がここに提供される。式中、Ｒ₁は、脂肪族鎖中に８〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、− Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁は、ＯＨ又は変換抑制基であり、Ｚ₂は、変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖中に１〜約６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は炭素数が１〜６のアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、鎖中に１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、ここで、Ｚ₂がアミノであるとき、Ｒ₂はその脂肪族鎖中に１〜９個又は１９〜２３個の炭素原子を含む脂肪族鎖である。好ましくは、Ｒ₁は、アルキル基、より好ましくは、ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、Ｙ₂は、Ｈ、Ｙ₃は−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂、Ｒ₂はアルキル鎖である。変換抑制基は、式−Ｘ₂Ｘ₃又は−ＯＸ₂Ｘ₃を有することができ、ここで、Ｘ₂ は、ＣＨ₂−、Ｃ（ＣＨ₃）₂−、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂−、Ｓｉ（ＣＨ₃）₂−、ＳｉＣＨ₃ＰＯ₄−、Ｃ（Ｏ）−及びＳ（Ｏ）₂−からなる群から選ばれ、Ｘ₃は、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₃、−Ｃ（ＣＨ₃）₃、−Ｓｉ（ＣＨ₃）₃、−ＳｉＣＨ₃ （Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、−Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₃、−Ｓｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃ 、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ成分（amino moiety）、塩素、フッ素及び式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基からなる群から選ばれ、Ｒ₃とＲ₄は、それぞれ独立に１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基である。変換抑制基は、好ましくは、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃又は−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃であり、より好ましくは、− ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である。変換抑制基は、式−Ｘ₁又は−ＯＸ₁を有することもでき、ここで、Ｘ₁は、Ｃ（Ｏ）Ｈ、ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₃、Ｃ（ＣＨ₃）₃、Ｓｉ（ＣＨ₃）₃、ＳｉＣＨ₃（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₃、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ成分、フッ素、塩素又は式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基であり、Ｒ₃ とＲ₄は、それぞれ独立に１〜６個の炭素を有するアルキル鎖である。本発明の化合物は、好ましくは、式ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂Ｚ₁ −ＣＨ（ＮＨＹ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する。ここで、Ｙ₃は、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂、より好ましくは、Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄−ＣＨ₃を有する基である。Ｚ₂は、好ましくは、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、−ＯＳｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、− Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又は−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃である。本発明の化合物と薬理学的に許容されうるキャリヤーとからなる医薬組成物も、ここに提供される。この組成物は、追加の生理活性剤を含むことができる。更に、この組成物を動物へ投与することからなる、動物、好ましくはヒトへの生理活性化合物の投与方法が提供される。この方法は、追加の生理活性剤を動物へ投与することを含むことができる。動物が癌に罹っている場合、この方法は、抗癌有効量の化合物を含む量の組成物を投与することからなる。通常、この化合物の抗癌有効量は、動物の体重１ｋｇ当たりこの化合物が少なくとも約１ｍｇである。一般的に、抗癌有効量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇである。治療可能な癌としては、これらに限定されることはないが、脳、乳房、肺、卵巣、大腸、胃、前立腺などの癌を挙げることができ、肉腫、癌腫、神経芽細胞腫又は神経膠腫であってもよい。薬剤耐性癌も治療することができる。脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜（bilayer）を有するリポソームが、ここに提供される。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ独立にＯＨ又は変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、二分子膜は、この化合物を、少なくとも約５モル％含んでいる。Ｙ₃は、好ましくは、Ｒ₂であり、これは、好ましくは、−（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₅ ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃又は−（ＣＨ₂）₉ＣＨ₃であり、更に好ましくは、Ｒ₂ は、−（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃である。また、Ｙ₃は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂であり、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄ＣＨ₃である。本発明のリポソームにおいては、Ｚ₁とＺ₂のうちの少なくとも一つが、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃などの変換抑制基であることが好ましい。更に好ましくは、変換抑制基は、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₃Ｃ（ＣＨ₃）₃である。リポソームは、式ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₁₂−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂Ｚ₁−ＣＨ（ＮＨＹ₃）−ＣＨ₂Ｚ₂を有する化合物を含むことが、更に好ましい。リポソーム二分子膜は、この化合物を、少なくとも約１０モル％含んでいることが好ましい。二分子膜は、ビタミンＤ₃を含むことができる。このような二分子膜は、約１モル％のビタミンＤ₃を含むことが好ましい。二分子膜は、ヘッドグループ変性（headgroup-modified）脂質を含むこともできる。リポソームは、追加の生理活性剤を含むことができ、脱水されることができる。本発明のリポソームと薬理学的に許容しうるキャリヤーとからなる医薬組成物も、ここに提供される。更に、動物にこの組成物を投与することからなる、動物に化合物を投与する方法が提供される。この方法は、癌に罹っている動物を治療するのに用いることができ、その場合、組成物を投与し、その投与量には、抗癌有効量のリポソームが含まれている。通常、投与量には、動物の体重１ｋｇ当たり少なくとも約１ｍｇのリポソームが含まれている。一般には、投与量には、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ含まれる。脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜を有するリポソームが、ここに提供される。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ独立にＯＨ又は変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、二分子膜は、抗癌有効量のこの化合物を含んでいる。このリポソームと、薬理学的に許容しうるキャリアーとからなる医薬組成物も提供される。更に、動物にこの組成物を投与することからなる、癌に罹っている動物の治療方法が提供される。図面の簡単な説明図１セラミド代謝Ｃｅｒ：セラミド，ＳＭ：図２変換抑制基を含むセラミドＡ：タイプIII Ｃｅｒ−１−ＴＢＤＭＳ；Ｃ２Ｃｅｒ−１−ＴＢＤＭＳ；Ｃ６Ｃｅｒ−１−ＴＢＤＭＳ；Ｃ２Ｃｅｒ−１−ＴＢＤＰＳ、Ｂ：３−ＴＢＤＭＳＣ６−Ｃｅｒ；１−ＴＢＤＭＳＣ６−Ｃｅｒ；１，３ＤｉＴＢＤＭＳＣ６Ｃｅｒ（ＹＷ１５１．ａ）；１−ＴＢＤＭＳ，３−アセテートＣ６− Ｃｅｒ；１−ＴＢＤＭＳ，３−ブチレート，Ｃ６−Ｃｅｒ、Ｃ：１−アセテート −３−オンＣ６−Ｃｅｒ；４，５−ジオールＣ６−Ｃｅｒ、Ｄ：Ｎ−Ｃ４スフィンゴシン；ｎ−ヘキシルスフィンゴシン；ｎ−Ｃ８スフィンゴシン；Ｎ− Ｃ１０スフィンゴシン図３種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＨＬ−６０細胞の成長に及ぼす影響生細胞の数（ｍｌ当たり×１０，０００、ｙ軸）を１００μＭ及び２００μＭの脂質投与量（ｚ軸）について測定した。ｘ軸：対照、卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２−セラミド（Ｃ２）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／ビタミンＤ３（Ｄ３）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ２、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ６−セラミド（Ｃ６）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ６、ＳＭ／Ｃｈｏｌ及びＳＭ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３リポソーム図４種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＰ３８８細胞の成長に及ぼす影響生細胞の数（ｍｌ当たり×１０，０００、ｙ軸）を５０μＭ、１００μＭ及び２００μＭの脂質投与量（ｚ軸）について測定した。ｘ軸：対照、卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２− セラミド（Ｃ２）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／ビタミンＤ３（Ｄ３）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ２、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ６−セラミド（Ｃ６）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ６、スフィンゴミエリン（ＳＭ）／Ｃｈｏｌ及びＳＭ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３リポソーム図５種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＵ９３７細胞の成長に及ぼす影響生細胞の数（ｍｌ当たり×１０，０００、ｙ軸）を５０μＭ、１００μＭ及び２００μＭの脂質投与量（ｚ軸）について測定した。ｘ軸：対照、卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２− セラミド（Ｃ２）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／ビタミンＤ３（Ｄ３）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ２、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ６−セラミド（Ｃ６）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ６、スフィンゴミエリン（ＳＭ）／Ｃｈｏｌ及びＳＭ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３リポソーム図６種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＲＰＭＩ−７６６６細胞の成長に及ぼす影響生細胞の数（ｍｌ当たり×１０，０００、ｙ軸）を２００μＭの脂質投与量について測定した。ｘ軸：対照、卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２−セラミド（Ｃ２）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／ビタミンＤ３（Ｄ３）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ２、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ６−セラミド（Ｃ６）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ６、スフィンゴミエリン（ＳＭ）／Ｃｈｏｌ及びＳＭ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３リポソーム図７リポソームセラミドの正常（ＲＰＭＩ−７６６６）及び癌（Ｕ−９３７）細胞の成長に及ぼす影響各培養における生細胞の数を測定し、対照に対するパーセントで示す（ｙ軸）。図８リポソームラセミドのマウスにおける治療効力ｘ軸：リポソーム／対照投与後日数；ｙ軸：治療群における生存パーセント、四角内円：ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水を投与した対照マウス；黒四角：リポソームビタミンＤ３；白菱形：リポソームＣ２セラミド；黒菱形：リポソームＣ６セラミド図９Ａ５４９細胞のＣ６−セラミド誘導体に対する試験管内感受性Ａ：１時間さらす；Ｂ：４時間さらす；Ｃ：８時間さらす；Ｄ：２４時間さらす；Ｅ：４８時間さらす、Ｘ軸：薬剤（セラミド誘導体）濃度（マイクロモル）；ｙ軸：パーセント細胞成長。“×”：Ｎ−Ｃ８スフィンゴシン；菱形：１−アセテート、Ｃ６−セラミド；四角：１−ブチレート、Ｃ６−セラミド；三角：１ −イソブチレート、Ｃ６−セラミド図１０異なったさらす時間におけるＡ５４９細胞の１−アセテート、Ｃ６−セラミドに対する試験管内感受性ｘ軸：薬剤濃度（マイクロモル）；ｙ軸：パーセント成長。菱形：１時間；四角：４時間；三角：８時間；×：２４時間；星：４８時間図１１異なったさらす時間におけるＡ５４９細胞の１−ブチレート、Ｃ６−セラミドに対する試験管内感受性ｘ軸：薬剤濃度（マイクロモル）：ｙ軸：パーセント成長。菱形：１時間；四角：４時間；三角：８時間；×：２４時間；星：４８時間図１２異なったさらす時間におけるＡ５４９細胞の１−イソブチレート、Ｃ６ −セラミドに対する試験管内感受性Ｘ軸：薬剤濃度（マイクロモル）；ｙ軸：パーセント成長。菱形：１時間；四角：４時間；三角：８時間；×：２４時間；星：４８時間図１３異なるさらす時間におけるＡ５４９細胞のＮ−Ｃ８スフィンゴシンに対する試験管内感受性ｘ軸：薬剤濃度（マイクロモル）；ｙ軸：パーセント成長。菱形：１時間；四角：４時間；三角：８時間；×：２４時間；星：４８時間図１４Ｐ−３８８／ＡＤＲ（抗アドリアマイシン）腫瘍を有するマウスに対するＮ−ヘキシルスフィンゴシンの治療効力ｘ軸：治療後日数；ｙ軸：治療群における残存パーセント。“＋”：対照（未治療）；四角：体重１ｋｇ当たりｎ−ヘキシルスフィンゴシン２０ｍｇを１回投与；円：２０ｍｇ／ｋｇを３回投与発明の詳細な説明式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物がここに提供される。式中、Ｒ₁は、脂肪族鎖中に８〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、− Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁は、ＯＨ又は変換抑制基であり、Ｚ₂は、変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は炭素数が１〜６のアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、鎖中に１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、ここで、Ｚ₂がアミノであるとき、Ｒ₂はその脂肪族鎖中に１〜９個又は１９〜２３個の炭素原子を含む脂肪族鎖である。好ましくは、Ｒ₁は、アルキル基、より好ましくは、ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、Ｙ₂は、Ｈ、Ｙ₃は−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂、Ｒ₂はアルキル鎖、より好ましくは、炭素数が６〜８のアルキル鎖である。最も好ましくは、Ｒ₁とＲ₂が、共に約１５〜約２５個の炭素からなり、ここで、Ｒ₁が１３個の炭素からなり、Ｒ₂が６〜８個の炭素からなっていることが好ましい。理論によって限定されるものではないが、脂質の全炭素鎖長が、それ自身を生体膜に挿入する能力を決定する重要な因子であると考えられている。本発明に関し、いずれにせよ、理論によって限定されることはないが、スフィンゴシンとセラミドは、細胞内でシグナルトランスデューサ又は二次メッセンジャーとして作用しうること、即ち、細胞内濃度が、外部刺激に応じて増加し、この増加によって、蛋白質キナーゼ活性とホスファターゼ活性が高くなると信じられている（例えば、M．Raines 等、上記；R．Kolesnik 等、上記；G．Dbaibo 等、上記；J．Fishbein 等、上記参照）。活性化された蛋白質キナーゼとホスファターゼは、細胞死につながる細胞プロセスを活性化する。従って、癌細胞内のスフィンゴシン及びセラミドの細胞内濃度を高めることは、治療的に望ましいことであろう。スフィンゴシン及びセラミドは、パルミトイルＣｏＡ（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₄ＣＯ −Ｓ−ＣｏＡ）とセリンの組み合わせにより動物細胞内で形成され、デヒドロスフィンガニン（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₄ＣｏＣＨ（ＮＨ₃）ＣＨ₂ＯＨとＣＯ₂が得られる（例えば、L．Stryer、生化学（第二版）、４６１〜４６２頁、W.H．Freeman and Co．、New York 参照）。デヒドロスフィンガニンは、ジヒドロスフィンゴシン（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₄ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＮＨ₃）ＣＨ₂−ＯＨ）に変換され、次いで、スフィンゴシン（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ（ＮＨ₃）−ＣＨ₂ＯＨ）に変換される。次いで、脂肪酸がスフィンゴシンのアミド基に結合し、セラミド（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ＝ＣＨ− ＣＨＯＨ−ＣＨ（ＣＨ₂ＯＨ）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ、ここで、Ｒは脂肪酸鎖）を生じる。ホスホリルコリン基（ＰＯ₄ＣＨ₂ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₃）は、その水酸基でセラミドと結合して、スフィンゴミエリン（ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨＯＨ−ＣＨ（ＣＨ₂ＰＯ₄）ＣＨ₂ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₃）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ）を生成することができる。スフィンゴミエリナーゼは、スフィンゴミエリンからのホスホリルコリンの加水分解による除去に触媒作用して、セラミドを生じることができる（例えば、図１参照）。セラミドの逆加水分解により、スフィンゴミエリンが生じうる。この「逆加水分解」工程、即ち、セラミドのそれに相当するスフィンゴミエリンへの変換を、阻害又は抑制することによって、細胞内のセラミド濃度が増加することになる。「変換抑制基」は、一般に、動物細胞内で、スフィンゴシン若しくはセラミド、又はそれらの生合成先駆体に結合して見出される基ではない。むしろ、そのような基は、スフィンゴシン及びセラミドに合成的に結合して、それからのスフィンゴミエリン生成を抑制する。本発明の化合物は、変換抑制基及びさまざまな長さのアルキル、アルケニル、アルキニル基からなり、当業者によく知られ、かつ、本発明の教示があれば、容易に実施できる多くのルートによって合成される（例えば、下記を参照。ここで、“ｒｆ”は、次の参考文献の１つを意味する。１：ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエイ（J．Am．Chem．Soc.）、９４巻、６１９０頁（１９７２）；２：ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（J ．Org．Chem.）、５９巻、６６８頁（１９９４）；３：アンゲバンテ・ケミストリー（Angew．Chem.），Intl．Ed．（Engllsh）、１７巻、５６９頁（１９７８）；４：ヴォーゲルズ・テキストブック・オブ・プラクティカル・オーガニック・ケミストリー（Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry）（第５版）、７６９〜７８０頁；５：J．Org．Chem.、４０巻、５７４頁（２９７５）；６：J. Org. Chem.、５９巻、１８２頁（１９９４）；７：J．Org. Chem.、２５巻、２０９８頁（１９６０）；８：シンセーシス（Synthesis）、２５３〜２６８頁（１９８５）；９：ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサイエテイ（J. Che m. Soc.）、２５４８頁（１９５３）；１０：J．Am. Chem.Soc.、９０巻、４４６２、４４６４頁（１９６８）；１１：オキシデーション・イン・オーガニック・ケミストリー（Oxidation in Organic Chemistry）、６０〜６４頁（Am.Chem. Soc.、Washington, D．C.）（１９９０）；１２：ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー（J．Med．Chem.）、３０巻、１３２６頁（１９８７）；１３：シンセーシス・コミュニケーション（Synth．Commun.）、９巻、７５７頁（１９７９）；１４：ザ・ケミストリー・オブ・アミズ（The Chemistry of Amides ）、７９５〜８０１頁（J.Wiley & Sons，New York（２９７０））；１５：J.Me d．Chem.、３７巻、２８９６頁（１９９４）；４：J．Med．Chem.、３０巻、１３２６頁（１９８７）１６：レク・ケミカル・プログレス（Rec．Chem．Prog.）、２９巻、８５頁（１９６８）；及び１７：ホスホリピッズハンドブック（Phospholipids Handbook）、９７頁（Ma rcell Decker, Inc., New York（１９９３））。例えば、かかる当業者は、スフィンゴシンあるいはセラミドをそれらの出発物質として使用するであろう。公知の手段により、さまざまな長さのアルキル、アルケニル又はアルキニル基をそれに結合させたり、あるいはそれから除去することができる。変換抑制基も、公知の手段でスフィンゴシン及びセラミドに結合させることができる。これらの手段に限定はなく、化合物に化学基を結合し、化合物から化学基を除去し、化合物をあるものから他のものへ変換する他の一般に受け入れられている手段のほかに、酸化／還元、置換、縮合及びアルキル化反応が挙げられる。このような反応は、通常、一般に受け入れられている溶媒を用いて行われ、容易に決定できる条件の下で行われる。具体的な化合物は、次のようにして合成することができる。セラミドのシリルエーテルの合成：セラミド、塩化ｔ−ブチルヂメチルシリル（１当量）及びイミダゾール（２当量）のＤＭＦ液混合物を、窒素下、室温で一夜攪拌した。溶媒を窒素気流下で除去し、残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解して、洗浄（Ｈ₂Ｏ）、乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、濃縮乾固した。残渣をシリカゲル（ＡｃＯＥｔ：ヘキサン＝１：３）で精製した。１−エステルセラミドの合成：セラミド、Ａｃ₂Ｏ（１当量）及び触媒量のジメチルアミノピリジンの乾燥ＣＨ₂Ｃｌ₂中混合物を、室温で１時間攪拌し、反応をＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ）でチェックした。混合物を濃縮した。粗生成物をシリカゲル（ＡｃＯＥｔ：ヘキサン＝２：３．５）で精製した。セラミドのＣ３−ＯＨのケトンへの酸化：１−ＯＡｃセラミドをアセトンに溶解し、氷浴で冷却した。ジョーンズ試薬を、オレンジ色が消えなくなるまで徐々に滴下した。イソプロパノールにより反応を抑制し（quench）、ＮａＨＣＯ₃を加えて５分間攪拌した。溶液を濾過して、濃縮乾固した。粗生成物を調製ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ：へキサン＝１：２．５）で精製した。セラミドのスフィンゴシン類似体への還元：氷冷下攪拌したセラミドの無水ＴＨＦ溶液にＬｉＡｌＨ₄を加え、室温で窒素下２４時間攪拌した。氷冷下、ＮａＨＣＯ₃飽和水溶液を加えて、反応生成物を冷却した。生成したスラリーを濾過し、ＴＨＦで洗浄した。溶液を濃縮し、残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂に移し、洗浄（Ｈ₂Ｏ）、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濃縮乾固した。残渣を調製ＴＬＣ（シリカゲル：ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＭｅＯＨ：ＴＥＡ＝８：１：０．０８）で精製した。４，５−ジオールセラミドの合成：セラミドのＭｅ₂ＣＯ、蒸留水及びｔ−ＢｕＯＨ混合溶液へ、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシド（ＮＭＯ、１．２当量）とＯｓＯ₄（触媒量）のＴＨＦ溶液を加えた。反応混合物を４５℃で６時間攪拌し、固体ＮａＨＣＯ₃で冷却して（quench）、混合物を１５分間攪拌した。懸濁液を濾過し、ろ液をＴＨＦに溶解した。この溶液を食塩水で洗浄した。有機溶液を分離し、乾燥し、濃縮乾固した。残渣を調製ＴＬＣ（ＴＨＦ）で精製した。適当な変換抑制基は、そのような基を同定する動機づけが本発明によって与えられていれば、当業者によって容易に実施できる多くの手段によって同定できる。例えば、かかる当業者は、ある化学成分を選択し、上述したように、それをスフィンゴシン又はセラミドに結合することができるが、これに限定されるものではない。次いで、当業者は、そのような化合物が加水分解を受ける相対速度及びスフィンゴミエリンがその化合物から生成する速度を容易に測定することができる。加水分解速度それ自身は、当業者により、例えば、放射性部分をスフィンゴシンやセラミドに結合し、次いで、クロマトグラフィによりその部分の加水分解速度を追跡することによって、容易に測定できるが、これに限定されるものではない。スフィンゴミエリンの生成速度も、例えば、ホスホリルコリンを変換抑制基含有化合物に結合できる酵素系中で、放射性ホスホリルコリンをその化合物と結合させ、次いで、クロマトグラフィ手段を用いてホスホリルコリンが付加される速度を評価することによって、容易に測定できるが、これに限定されるものではない。好ましい変換抑制基は、加水分解とホスホリルコリンの結合を最も抑制するものである。変換抑制基は、式−Ｘ₂Ｘ₃又は−ＯＸ₂Ｘ₃を有することができ、ここで、Ｘ₂ は、ＣＨ₂−、Ｃ（ＣＨ₃）₂−、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂−、Ｓｉ（ＣＨ₃）₂−、ＳｉＣＨ₃ＰＯ₄−、Ｃ（Ｏ）−及びＳ（Ｏ）₂−からなる群から選ばれ、Ｘ₃は、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₃、−Ｃ（ＣＨ₃）₃ 、−Ｓｉ（ＣＨ₃）₃、−ＳｉＣＨ₃（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、−Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃ ）₃、−Ｓｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ部分、塩素、フッ素及び式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基からなる群から選ばれ、Ｒ₃とＲ₄は、それぞれ独立に１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基である。変換抑制基は、好ましくは、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、− ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃又は−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃であり、より好ましくは、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である。変換抑制基は、式−Ｘ₁ 又は−ＯＸ₁を有することもでき、ここで、Ｘ₁は、Ｃ（Ｏ）Ｈ、ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₃ 、Ｃ（ＣＨ₃）₃、Ｓｉ（ＣＨ₃）₃、ＳｉＣＨ₃（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₃、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ部分、フッ素、塩素又は式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基であり、Ｒ₃とＲ₄は、それぞれ独立に１〜６個の炭素を有するアルキル鎖である。従って、変換抑制基としては、エーテル、シリルエーテル、エステル、アセタール及びスルホネート結合によるスフィンゴシン及びセラミドへの化学成分の結合が挙げられる。本発明の化合物は、好ましくは、式ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂Ｚ₁ −ＣＨ（ＮＨＹ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する。ここで、Ｙ₃は、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂、より好ましくは、Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄−ＣＨ₃を有する基である。Ｚ₂は、好ましくは、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃ 、−ＯＳｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又は−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ ＣＨ₂ＣＨ₃である。本発明の化合物と薬理学的に許容されうるキャリヤーとからなる医薬組成物も、ここに提供される。この組成物は、追加の生理活性剤を含むことができる。ここで用いられる“薬理学的に許容されうるキャリヤー”とは、一般に、リポソーム生理活性剤製剤を包含する脂質及びリポソームを、ヒトを始めとする動物へ投与することに関連して、用いられることを意味する。薬理学的に許容されうるキャリヤーは、当業者が決定し考える範囲内で、多くの要因に従って処方されるのが普通であり、要因としては用いる特定のリポソーム生理活性剤、その濃度、安定性及び目的とするバイオアベイラビリティ；リポソーム組成物で治療される病気、障害又は状況；患者、その年齢、大きさ及び一般的な状況；並びに組成物の目的とする投与ルート、例えば鼻、口、目、局所、経皮、膣、皮下、乳房内、腹腔内、静脈内又は筋肉内、などが挙げられる（例えば、Nairn 参照）が、これらに限定されることはない。非経口生理活性剤投与に用いられる代表的な薬理学的に許容されうるキャリアーとしては、例えば、Ｄ５Ｗ、即ち５重量％／体積のデキストロースを含む水溶液、及び生理的食塩水を挙げることができる。薬理学的に許容されうるキャリアーは、追加の成分、例えば、防腐剤や抗酸化剤のように、含有される活性成分の安定性を高めるものを含むことができる。更に、この組成物を動物へ投与することからなる、動物、好ましくはヒトへの生理活性化合物の投与方法が提供される。この方法は、追加の生理活性剤を動物へ投与することを含むことができる。投与は、医薬製品を動物に投与するのに一般に受け入れられている任意の手段で行うことができ、一般には、静脈内投与である。動物が癌に罹っている場合、この方法は、抗癌有効量の化合物を含む量の組成物を投与することからなる。治療可能な癌としては、脳、乳房、肺、卵巣、大腸、胃、前立腺などの癌を挙げることができ、肉腫、癌腫、神経芽細胞腫又は神経膠腫であってもよいが、これらに限定されることはない。薬剤耐性癌も治療することができる。本発明の化合物の“抗癌有効量”は、一般に、化合物が投与された動物の１種以上のがんの樹立、成長、転移又は侵入を抑制、改善、減少又は防止するのに有効な量である。抗癌有効量は、一般に、多くの要因、例えば患者の年齢、大きさ及び一般的な状況、治療される癌及び目的とする投与ルートに従って選択され、当業者によく知られ、本発明の教示があれば、容易に実施できる種々の手段、例えば投与量範囲試験（dose ranging trials）によって決定される。代表的には、この化合物の抗癌有効量は、動物の体重１ｋｇ当たりこの化合物が少なくとも約０．１ｍｇである。一般的に、抗癌有効量は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇである。脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜を有するリポソームが、ここに提供される。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ独立にＯＨ又は変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂ は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、二分子膜は、この化合物を、少なくとも約５モル％含んでいる。リポソームは、一つ又はそれ以上の二分子膜からなる自己集合構造体であり、そのそれぞれが、水性区画を取り囲んでおり、両親媒性脂質分子の二つの対向する単分子膜（monolayers）からなっている。これらは、一つ又は二つの非極性（疎水性）アシル鎖に共有結合で結合されている極性（親水性）ヘッドグループ領域を含んでいる。疎水性アシル鎖と水性媒体との間のエネルギー的に好ましくない接触によって、極性ヘッドグループが水性媒体に向かって配向し、一方、アシル鎖が二分子膜の内部に向かって再配向するように、脂質分子が再配列されると一般に考えられている。アシル鎖が、水性媒体と接触するのを有効に遮蔽する、エネルギー的に安定な構造が形成される。リポソームは、種々の方法により製造することができる（例えば、Deamer 及び Uster 参照）。これらの方法としては、マルチラメラベシクル（multilamell ar vesicle、ＭＬＶ）を製造する Bangham の方法、実質的に同じ層間溶質分布を有するＭＬＶを製造するLenk、Fountain 及び Cullisの方法（例えば、米国特許第４，５２２，８０３号、４，５８８，５７８号、５，０３０，４５３号、５，１６９，６３７号及び４，９７５，２８２号参照）及びオリゴラメラリポソームを製造する Paphadjopoulos 等の逆相蒸発法（米国特許第４，２３５，８７１号）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。ユニラメラベシクル（ unilamellar vesicle）は、音波破砕（Paphadjopoulos 等（１９６８））又は押出（米国特許第５，００８，０５０号及び米国特許第５，０５９，４２１号）によりＭＬＶから製造することができる。本発明のエーテル脂質リポソームは、これらの開示のいずれの方法によってでも製造することができ、上記文献を参照されたい。音波破砕、均質化、フレンチプレスの適用、ミリング、押出などの種々の方法論は、リポソームのサイズを小さくするのに、即ち、大きいリポソームから、より小さいサイズのリポソームを製造するのに使用できる。接線流れ濾過（tangen tial flow filtration）（ＷＯ８９／００８８４６参照）も、リポソームのサイズを制御するのに、即ち、サイズ不均質性がより小さく、サイズ分布がより均一で、限定されたリポソーム母集団を有するリポソームを製造するのに用いることができる。本発明のリポソームは、ユニラメラ（unilamellar）でもマルチラメラでもよく、直径は、約２００ｎｍ未満であることが好ましく、約５０ｎｍよりも大きく、約２００ｎｍ未満であることがより好ましい。リポソーム二分子膜は、飽和あるいは不飽和であり、代表的には１０〜２４個の炭素のアシル鎖を有する脂質を始めとして、多様な両親媒性脂質を含むことができる。適当な極性基としては、ホスホリルコリン、ホスホリルエタノールアミン、ホスホリルセリン、ホスホリルグリセロール及びホスホリルイノシトールが挙げられるが、これらに限定されるものではない。適当なアシル鎖としては、ラウレート、ミリステート、パルミテート、ステアレート及びオレート鎖が挙げられるが、これらに限定されるものではない。従って、適当なリポソーム形成脂質としては、卵ホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール及びその他のものが挙げられる。リポソーム二分子膜は、更に、コレステロールなどのステロールを含むことができる。ステロールは、一般に脂質二分子膜の流動性に影響を及ぼし、代表的には、ゲル−液転移温度（Ｔｍ）よりも低い温度での二分子膜炭化水素鎖の流動性を高め、Ｔｍより高い温度での流動性を下げる（例えば、Lewis 及び McElhaney（１９９２）、Damell 等（１９８６）参照）。従って、ステロールとその周囲の炭化水素鎖との相互作用によって、一般に、二分子膜からのこれらの鎖の移出が抑制される。リポソーム二分子膜は、この化合物を、少なくとも約１０モル％含んでいることが好ましい。Ｙ₃がＲ₂であるとき、それは、好ましくは、−（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃ 、−（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃又は−（ＣＨ₂）₉ＣＨ₃であり、更に好ましくは、−（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃である。Ｙ³が−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂であるとき、それは、好ましくは、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄ＣＨ₃である。リポソームは、式ＣＨ₃− （ＣＨ₂）₁₂−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂Ｚ₁−ＣＨ（ＮＨＹ₃）−ＣＨ₂Ｚ₂を有する化合物を含むことが好ましく、その化合物は、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃などの、少なくとも一つの変換抑制基を含むことが更に好ましい。最も好ましくは、変換抑制基は、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃（ＴＭＢＤＭＳ）である。本発明の化合物及びリポソームの投与とは別に、あるいは、より好ましくは、リポソームの投与と関連して、ビタミンＤ₃を投与することにより、細胞内セラミド濃度を高めることもできる。いずれにせよ、何らかの理論によって束縛されるものではないが、ビタミンＤ₃は、スフィンゴミエリナーゼを刺激して、スフィンゴミエリンをセラミドに変換することができるものと考えられている。代表的には、二分子膜は、ビタミンＤ₃を含むことができ、このような二分子膜は、約１モル％のビタミンＤ₃を含むことが好ましい。二分子膜は、ハッドグループ変性脂質を含むこともできる。リポソームは、追加の生理活性剤を含むことができる。“生理活性剤”は、動物、好ましくはヒトに投与できる任意の化合物あるいは物質組成物である。このような剤は、動物内で生理活性を持つことができ、あるいは診断的に動物に用いられることもできる。生理活性剤としては、治療剤及びイメージング剤が挙げられる。リポソームと共に用いられてもよい生理活性剤としては、アシクロビア、ジドブディン（zidovudin）、インターフェロン類などの抗ウイルス剤；アミノグリコシド、セファロスポリン、テトラサイクリンなどの抗菌剤；ポリエン系抗生物質、イミダゾール、トリアゾールなどの抗真菌剤；葉酸、プリン及びピリミジン類似体などの抗代謝剤；アントラサイクリン抗生物質、植物アルカロイドなどの抗腫瘍剤；コレステロールなどのステロール；例えば糖やデンプンなどの炭水化物；細胞受容体蛋白質、免疫グロブリン、酵素、ホルモン、神経伝達物質、糖蛋白質などのアミノ酸、ペプチド、蛋白質；色素；放射性同位体、放射性同位体標識化合物などの放射線標識；放射線不透過性化合物；蛍光性化合物；散瞳性化合物；気管支拡張剤；局所麻酔薬などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。リポソーム生理活性剤製剤は、例えば薬剤の毒性を緩和することによって、生理活性剤の治療指数を高めることができる。リポソームは、生理活性剤が動物の循環系から除かれる速度を低下させることもできる。従って、生理活性剤のリポソーム製剤は、目的とする効果を達成するのに、より少ない薬剤を投与すればよいことを意味することができる。本発明のリポソームにとって好ましい追加の生理活性剤としては、殺菌剤、抗炎症剤、抗腫瘍剤あるいはセラミドのような治療脂質が挙げられる。最も好ましくは、追加の生理活性剤は、抗腫瘍剤である。リポソームには、一つ又はそれ以上の生理活性剤を、リポソームを調製するために用いられた脂質又は水性相中に溶解することにより装填することができる。あるいは、イオン化しうる生理活性剤は、まずリポソームを形成し、例えば、最外層のリポソーム二分子膜を横切るｐＨ勾配によって電気化学ポレンシャルを確立し、次いで、リポソームの外部にある水性媒体にイオン化しうる生理活性剤を加えることによって、リポソームに装填することができる（Bally 等、米国特許５，０７７，０５６号及びＷＯ８６／０１１０２参照）。本発明のリポソームは、ヘッドグループ変性脂質を含むことができる。“ヘッドグループ変性脂質”は、リポソームの脂質二分子膜内へ導入された場合、それらが投与された動物の循環系からのリポソームの排除を抑制することができる。リポソームは、固定及び循環マクロファージからなる細網内皮系（ＲＥＳ）によって、動物の体から排除される。ＲＥＳ排除を回避することによって、より長時間、リポソームを循環させたままにしておくことができ、このことは、目的とする血清濃度を達成するのに、より少ない薬剤を投与すればよいことを意味する。循環時間が長くなれば、リポソームが、ＲＥＳを含まない組織を標的にすることもできる。動物に投与した場合、リポソームの表面は、血清蛋白質で被覆されるようになる。即ち、リポソームは食菌作用（opsonized、オプソニン処理）。ＲＥＳによる排除速度は、このようなオプソニン処理の程度及びレベルに関係することができる。従って、血清蛋白質の結合が一般に抑制されるように、リポソームの外表面を変性することによって、排除を抑制することができる。これは、蛋白質結合を促進することができる負の表面電荷を最少にするか、遮蔽することにより、あるいは、そうでなければ、血清蛋白質の結合に対して立体障害を与えることにより、達成することができる。有効な表面変性、即ち、食菌作用及びＲＥＳ取り込みを抑制することになるリポソーム外表面に対する変更は、ヘッドグループ変性脂質をリポソーム二分子膜へ入れることにより、達成することができる。ここで用いられる“ヘッドグループ変性脂質”とは、動物の循環系における小胞の薬物動力学的挙動を変えるように、リポソームへの血清蛋白質の結合を抑制することができる化学部分、例えばポリエチレングリコール、ポリアルキルエーテル、ガングリオシド、有機ジカルボン酸などをヘッドグループへ結合することにより、その極性ヘッドグループが誘導体化された（derivatized）両親媒性脂質のことである（例えば、Blume 等、Blochim．Biophys．Acta.１１４９巻、１８０頁（１９９３）；Gabizon 等、P harm．Res．１０巻（５）、７０３頁（１９９３）；Park 等、Biochim．Biophys . Acta．１１０８巻、２５７頁（１９９２）；Woodle 等、米国特許第５，０１３，５５６号、Allen 等、米国特許第４，８３７，０２８号及び米国特許第４，９２０，０１６号；米国特許出願番号第１４２，６９１号、１９９３年１０月２５日出願を、参照されたい。リポソームに取り込まれるヘッドグループ変性脂質の量は、当業者によく知られているか、あるいは必要以上の実験を行わなくても当業者が決めることのできる範囲内の多数の要因によって決まる。これらの要因としては、脂質の種類及びヘッドグループ変性の種類、リポソームの種類及びサイズ並びにリポソーム製剤の目的とする治療用途などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。一般に、リポソームの二分子膜内のヘッドグループ変性脂質の濃度は、少なくとも約５モルパーセントであり、約１０モルパーセントが望ましい。本発明のリポソームは、それらの内容物の実質的な部分をリポソーム内に保持したままで、脱水し、貯蔵し、その後、再構成することができる。リポソームの脱水には、通常、親水性乾燥保護剤を使用することが必要である（米国特許第４，２２９，３６０号及び４，８８０，６３５号）。この親水性化合物は、リポソーム内での脂質の転位を防止すると一般に考えられており、乾燥工程中及び再水和を通じて、サイズ及び含有量が保持され、リポソームを再構成することができる。このような乾燥保護剤に適当な性質は、強力な水素結合受容体であり、リポソーム二分子膜成分の分子内空間を保持する立体化学的な特徴を持っているということである。糖類、好ましくは単糖類及び二糖類が、リポソームの適当な乾燥保護剤である。あるいは、脱水前にリポソーム製剤が凍結されず、十分な水が、脱水以後の製剤中に残っていれば、乾燥保護剤を省略することができる。本発明のリポソームと、薬理学的に許容しうるキャリアーとからなる医薬組成物もここに提供される。更に、動物にこの組成物を投与することからなる、動物に化合物を投与する方法が提供される。この方法は、癌に罹った動物を治療するのに使用することができ、その場合、組成物を投与するが、その投与量には、抗癌有効量のリポソームが含まれている。代表的には、投与量には、動物の体重１ｋｇ当たり少なくとも約１ｍｇのリポソームが含まれている。一般には、投与量には、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇ含まれる。脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜を有するリポソームが、ここに提供される。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ,₁、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ独立にＯＨ又は変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、二分子膜は、抗癌有効量のこの化合物を含んでいる。このリポソームと、薬理学的に許容しうるキャリアーとからなる医薬組成物も提供される。更に、動物にこの組成物を投与することからなる、癌に罹った動物を治療する方法が提供される。実施例実施例１リポソーム製剤表１（下記参照）に示した成分とそのモル比で、溶媒蒸発法によりリポソームを調製した。例えば、１．８２４２ｍｇのウシホスファチジルコリン（ＢＰＣ）、０．４６３９ｍｇのコレステロール（Ｃｈｏｌ）及び０．１３６６ｍｇのＣ２ −セラミド（Ｃ２）をクロロホルム／メタノール混合溶剤（２：１、体積／体積）に溶解して、ＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２−セラミドリポソームを調製した。次いで、この溶剤を蒸発させて、乾燥脂質を製造し、この乾燥脂質をＨＥＰＥＳ緩衝食塩水（１０ｍＭＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で再水和した。ビタミンＤ₃含有製剤については、０．０１５４ｍｇのビタミンＤ₃を脂質混合物に添加した。Ｃ６−セラミド含有製剤については、０．１５９０ｍｇのＣ６セラミド（Ｃ６）をＣ２セラミドに代えて使用した。スフィンゴミエリン（ＳＭ）含有製剤については、２．０４７０ｍｇのＳＭ、０．４６３９ｍｇのコレステロール及び０．０１５４ｍｇのビタミンＤ₃を用いた。更に、２．１２８０ｍｇのＢＰＣ、０．４６３９ｍｇのコレステロール及び０．０１５４ｍｇのビタミンＤ₃用いて、ＰＣ／Ｃｈｏｌ及びＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ₃を調製した。実施例２種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＨＬ−６０細胞の成長におよぼす影響２×１０₅個のＨＬ−６０細胞を、バッファー（リポソームなし、“対照”）や卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）リポソームの他に、卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ２−セラミド（Ｃ２）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／ビタミンＤ３（Ｄ３）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ２、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｃ６−セラミド（Ｃ６）、ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３／Ｃ６、スフィンゴミエリン（ＳＭ）／Ｃｈｏｌ及びＳＭ／Ｃｈｏｌ／Ｄ３リポソームでインキュベートした。インキュベーションは、５ｍｇ／Ｌのインシュリンと５ｍｇ／Ｌのトランスフェリンを含む無血清培地で、３７℃で２４時間行った。次に、ウシ胎児血清を培地に加えて、最終濃度を１０％とした。細胞を、更に２４時間インキュベートし、その後、各培養における生細胞の数を、トリパンブルー染色と血球計数器を用いて数えた。１００μ Ｍと２００μＭの脂質投与量について、生細胞の数を測定し、培地１ｍｌ当たりの生細胞数、１０，０００倍、として、図（下記）に示す。結果を図３及び表２に報告する（以下参照）。実施例３種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＰ３８８細胞の成長におよぼす影響２×１０₅個のＰ３８８細胞を、上記条件下で、バッファーのみ及び卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）リポソームの他に、種々のセラミド又はスフィンゴミエリンリポソーム製剤（上記実施例２参照）でインキュベートした。５０μＭ、１００μＭ及び２００μＭの脂質投与量について、培養における生細胞数を測定した。結果を図４並びに表２及び３に報告する。実施例４種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＵ９３７細胞の成長におよぼす影響２×１０₅個のＵ９３７細胞を、上記条件下で、バッファーのみ及び卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）リポソームの他に、上記の種々のセラミド又はスフィンゴミエリンリポソーム製剤（実施例２参照）でインキュベートした。５０μＭ、１００μＭ及び２００μＭの脂質投与量について、培養における生細胞数を測定した。結果を図５及び７並びに表２及び３に報告する。実施例５種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＲＰＭＩ−７６６６細胞の成長におよぼす影響２×１０₅個のＲＰＭＩ−７６６６細胞を、上記条件下で、リポソームなし（対照）及び卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）リポソームの他に、上記の種々のセラミド／スフィンゴミエリンリポソーム製剤（実施例２参照）でインキュベートした。培養における生細胞数を測定した。結果を図６及び７並びに表２及び３に報告する。実施例６種々のリポソームセラミド／スフィンゴミエリン製剤のＣＨＯ／Ｋ１細胞の成長におよぼす影響２×１０₅個のＣＨＯ／Ｋ１細胞を、上記条件下で、リポソームなし（対照）及び卵ホスファチジルコリン／コレステロール（ＥＰＣ／Ｃｈｏｌ）リポソームの他に、上記の種々のセラミド／スフィンゴミエリンリポソーム製剤（実施例２参照）でインキュベートした。培養における生細胞数を測定した。結果を表２に報告する。実施例７マウスにおけるリポソームセラミドの治療効力ＣＤＦ１マウスに、それぞれ、２．５×１０₆個のＰ３８８細胞を腹腔内注射した。１０匹のマウス群に、それぞれ、実施例１（上記参照）で述べた方法に従って製造したＨＥＰＥＳ−緩衝食塩水対照（１０ｍＭＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭＮａＣｌ、ｐＨ７．４）か、又はリポソームビタミンＤ３、Ｃ２セラミド含有リポソーム若しくはＣ６セラミド含有リポソームを、マウスの体重１ｋｇ当たり脂質１．５ｍｇの脂質投与量で腹腔内投与した。投与は、Ｐ３８８細胞の２４時間投与であった。生存維持は、リポソーム／対照投与後、種々の時点で評価した。結果を図８に示す。実施例８試験管内細胞毒性の検討スルホローダミンＢ測定法（Monks 等、J．Natl．Cancer Inst．(U.S.)、８３巻、７５７頁（１９８７））を用いて、これらの検討を行った。化合物は、エタノールに溶解した。検討結果は以下の表に示すが、Ｇｌ₅₀値、すなわち、細胞の５０％の成長を抑制するのに要する薬剤の濃度（ミクロモル）で表す。実施例９生体内毒性検討示された投与量（下記参照）で、ｎ−ヘキシルスフィンゴシンをマウスに静脈内注射することにより、これらの検討を行った。結果を下に示す。実施例１０生体内検討Ｐ３８８／アドリアマイシン耐性白血病細胞を用いて、これらの検討を行った。マウスに、１００，０００の細胞を腹腔内に注射し、注射後１、３、５日目に、ｎ−ヘキシルスフィンゴシンで治療した。結果を図１４に示す。実施例１１化合物合成セラミドのシリルエーテルの合成：セラミド、塩化ｔ−ブチルジメチルシリル（１当量）及びイミダゾール（２当量）のＤＭＦ中混合物を、窒素下、室温で一夜攪拌した。窒素気流下で溶剤を除き、残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し、洗浄（Ｈ₂ Ｏ）し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濃縮乾固した。残渣を、シリカゲル（ＡｃＯＥｔ：ヘキサン＝１：３）で精製した。１−エステルセラミドの合成：セラミド、Ａｃ₂Ｏ（１当量）、触媒量のジメチルアミノピリジンの乾燥ＣＨ₂Ｃｌ₂中混合物を、室温で１時間攪拌し、ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ）で反応をチェックした。混合物を濃縮した。粗生成物を、シリカゲル（ＡｃＯＥｔ：ヘキサン＝２：３．５）で精製した。セラミドＣ３−ＯＨのケトンへの酸化：１−ＯＡｃセラミドをアセトンに溶解し、氷浴で冷却した。ジョーンズ試薬を、オレンジ色が消えなくなるまでゆっくりと滴下した。イソプロパノールで反応を抑制し、ＮａＨＣＯ₃を加え、５分間攪拌した。溶液をろ過し、濃縮乾固した。粗生成物を、調製ＴＬＣ（ＡｃＯＥｔ：ヘキサン＝１：２．５）で精製した。セラミドのスフィンゴシン類似体への還元：氷冷攪拌した、セラミドの無水ＴＨＦ溶液に、ＬｉＡｌＨ４を加え、混合物を、室温で、窒素下にて２４時間攪拌した。氷冷下、ＮａＨＣＯ₃の飽和水溶液を加えて、反応混合物を冷却した。生成したスラリーを濾過し、ＴＨＦで洗浄した。溶液を濃縮し、残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂に導入し、Ｈ₂Ｏで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、濃縮乾固した。残渣を、調製ＴＬＣ（シリカゲル）ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＭｅＯＨ：ＴＥＡ＝８：１：０．０８で精製した。４，５−ジオールセラミドの合成：Ｍｅ₂ＣＯ、蒸留Ｈ₂Ｏ、ｔ−ブチルアルコールの混合物に溶解したセラミドの溶液に、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシド（ＮＭＯ、１．２当量）とＯｓＯ₄（触媒量）のＴＨＦ溶液を加えた。反応混合物を、４５℃で６時間攪拌し、固体ＮａＨＣＯ₃で冷却し（quench）、混合物を１５分間攪拌した。懸濁液を濾過し、ろ液をＴＨＦに溶解した。この溶液を、食塩水で洗浄した。有機溶液を分離し、乾燥し、濃縮乾固した。残渣を、調製ＴＬＣ（ＴＨＦ）で精製した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 31/165 9455−4ＣＡ６１Ｋ 31/165 31/18 9455−4Ｃ 31/18 31/695 ＡＤＵ 9051−4Ｃ 31/695 ＡＤＵ 38/00 8828−4ＨＣ０７Ｃ 211/22 Ｂ０１Ｊ 13/02 8828−4Ｈ 211/45 Ｃ０７Ｃ 211/22 8828−4Ｈ 211/49 211/45 7457−4Ｈ 215/02 211/49 7457−4Ｈ 219/02 215/02 9450−4Ｈ 229/02 219/02 9547−4Ｈ 233/18 229/02 9547−4Ｈ 233/31 233/18 7419−4Ｈ 311/03 233/31 7419−4Ｈ 311/11 311/03 7419−4Ｈ 317/28 311/11 9636−4ＨＣ０７Ｆ 7/18 Ｍ 317/28 9636−4ＨＮＣ０７Ｆ 7/18 9450−4Ｈ 9/06 9051−4ＣＡ６１Ｋ 37/22 9/06 9630−4ＤＢ０１Ｊ 13/02 Ｚ (72)発明者メイヤー，エリックアメリカ合衆国ニュージャージー州 08540，プリンストン，プリンストンフォレスタルセンター，ワンリサーチウェイ（番地なし) (72)発明者アーマド，イムランアメリカ合衆国ニュージャージー州 08536，プレインスボロ，フォックスランドライヴ 2408 (72)発明者ジャノフ，アンドリュー，エスアメリカ合衆国ペンシルヴァニア州 19067，ヤードレイ，サウスクレッセントブールヴァード 1807

Claims

【特許請求の範囲】１．式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物。ここで、Ｒ₁は、脂肪族鎖中に８〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）であり、Ｚ₁は、ＯＨ又は変換抑制基であり、Ｚ₂は、変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖中に１〜約６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有すアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂であり、Ｒ₂は、脂肪族鎖中に１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｚ₂がアミノであるとき、Ｒ₂は、脂肪族鎖中に１〜９個又は１９〜２３個の炭素原子を有する脂肪族鎖である。２．Ｒ₁が、アルキル基である請求項１の化合物。３．アルキル基が、ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−である請求項２の化合物。４．Ｙ₁が、−ＣＨ＝ＣＨ−である請求項１の化合物。５．Ｙ₂が、Ｈである請求項１の化合物。６．Ｙ₃が、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂である請求項１の化合物。７．Ｒ₂が、アルキル鎖である請求項６の化合物。８．変換抑制基が、式−Ｘ₂Ｘ₃又は−Ｏ−Ｘ₂Ｘ₃を有する基である請求項１の化合物。ここで、Ｘ₂は、ＣＨ₂−、Ｃ（ＣＨ₃）₂−、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂−、Ｓｉ（ＣＨ₃ ）₂−、ＳｉＣＨ₃ＰＯ₄−、Ｃ（Ｏ）−及びＳ（Ｏ）₂−からなる群から選ばれ、Ｘ₃は、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＨ₃、−Ｃ（ＣＨ₃）₃、−Ｓｉ（ＣＨ₃ ）₃、−ＳｉＣＨ₃（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、−Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₃、−Ｓｉ（ＰＯ₄ ）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ成分、塩素、フッ素及び式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基からなる群から選ばれた基であり、ここで、Ｒ₃及びＲ₄は、それぞれ、独立に１〜６個の炭素を有するアルキル基、フェニル基又はアルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基である。９．変換抑制基が、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃又は−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である請求項８の化合物。１０．変換抑制基が、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である請求項９の化合物。１１．変換抑制基が、式−Ｘ₁又は−ＯＸ₁を有する基である請求項１の化合物。ここで、Ｘ₁は、Ｃ（Ｏ）Ｈ、ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₃、Ｃ（ＣＨ₃）₃、Ｓｉ（ＣＨ₃）₃ 、ＳｉＣＨ₃（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₂、Ｓｉ（Ｃ（ＣＨ₃）₃）₃、Ｓｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル鎖、アミノ成分、フッ素、塩素又は式Ｃ（Ｒ₃Ｒ₄）ＯＨを有する基であり、Ｒ₃及びＲ₄は、それぞれ、独立に１〜６個の炭素を有するアルキル鎖である。１２．式ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ₂Ｚ₁−ＣＨ（ＮＨＹ₃）−ＣＨ₂− Ｚ₂を有する請求項１の化合物。１３．Ｙ₃が、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂を有する基である請求項１２の化合物。１４．Ｙ₃が、式−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄ＣＨ₃である請求項１３の化合物。１５．Ｚ₂が、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃、−ＯＳｉ（ＰＯ₄）₂Ｃ（ＣＨ₃ ）₃、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃又は−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃である請求項１２の化合物。１６．請求項１の化合物及び薬理学的に許容されうるキャリアーからなる医薬組成物。１７．追加の生理活性剤を含む請求項１６の組成物。１８．請求項１６の組成物を動物に投与することからなる動物に生理活性化合物を投与する方法。１９．動物がヒトである請求項１８の方法。２０．動物が、癌に罹っており、組成物が、抗癌有効量の該化合物を含んでいる請求項１８の方法。２１．該化合物の抗癌有効量が、動物の体重１ｋｇ当たり少なくとも０．１ｍｇである請求項２０の方法。２２．抗癌有効量が、１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇである請求項２１の方法。２３．癌が、脳、乳房、肺、卵巣、大腸、胃又は前立腺の癌である請求項２０の方法。２４．癌が、肉腫、癌腫、神経芽細胞腫又は神経膠腫である請求項２０の方法。２５．癌が、薬剤耐性癌である請求項２０の方法。２６．追加の生理活性剤を動物に投与することからなる請求項１８の方法。２７．脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜を有するリポソーム。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）−であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ、独立に、ＯＨ又は変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、アルキル鎖中に１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂、−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、ここで、二分子膜は、少なくとも５モル％の上記化合物を含んでいる。２８．Ｙ₃が、式Ｒ₂を有する基である請求項２７のリポソーム。２９．Ｒ₂が、−（ＣＨ₂）₃ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃、−（ＣＨ₂）₇ＣＨ₃又は −（ＣＨ₂）₉ＣＨ₃である請求項２８のリポソーム。３０．Ｒ₂が、−（ＣＨ₂）₅ＣＨ₃である請求項２９のリポソーム。３１．Ｙ₃が、式−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂を有する基である請求項２７のリポソーム。３２．Ｙ₃が、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ₂）₄ＣＨ₃である請求項３１のリポソーム。３３．Ｚ₁とＺ₂のうちの少なくとも一つが、変換抑制基である請求項２７のリポソーム。３４．変換抑制基が、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₃、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₃又は−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である請求項３３のリポソーム。３５．変換抑制基が、−ＯＳｉ（ＣＨ₃）₂Ｃ（ＣＨ₃）₃である請求項３４のリポソーム。３６．化合物が、式ＣＨ₃−（ＣＨ₂）₁₂ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂Ｚ₁−ＣＨ（ＮＨＹ₃） −ＣＨ₂Ｚ₂を有する請求項２７のリポソーム。３７．二分子膜が、少なくとも１０モル％の該化合物を含む請求項２７のリポソーム。３８．二分子膜が、ビタミンＤ₃を含む請求項２７のリポソーム。３９．二分子膜が、１モル％のビタミンＤ₃を含む請求項３８のリポソーム。４０．二分子膜が、ヘッドグループ変性脂質を含む請求項２７のリポソーム。４１．追加の生理活性剤を含む請求項２７のリポソーム。４２．リポソームが脱水されている請求項２７のリポソーム。４３．請求項２７のリポソーム及び薬理学的に許容されうるキャリアーからなる医薬組成物。４４．請求項４３の組成物を動物に投与することからなる化合物を動物に投与する方法。４５．動物が癌に罹っており、ある量の組成物が投与され、その投与量には、抗癌有効量のリポソームが含まれている請求項４４の方法。４６．投与量が、動物の体重１ｋｇ当たり少なくとも１ｍｇのリポソームを含んでいる請求項４５の方法。４７．投与量が、約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇを含んでいるからなる請求項４６の方法。４８．脂質及び式Ｒ₁−Ｙ₁−ＣＨＺ₁−ＣＨ（ＮＹ₂Ｙ₃）−ＣＨ₂−Ｚ₂を有する化合物からなる二分子膜を有するリポソーム。ここで、Ｒ₁は、鎖中に５〜１９個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、Ｙ₁は、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ‖Ｃ−又は−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＨ）であり、Ｚ₁とＺ₂は、それぞれ、独立に、ＯＨあるいは変換抑制基であり、Ｙ₂は、Ｈ、フェニル基、１〜６個の炭素を有するアルキル置換フェニル基又は１〜６個の炭素を有するアルキル鎖であり、Ｙ₃は、Ｈ又は式−Ｒ₂−Ｃ（Ｏ）Ｒ₂若しくは−Ｓ（Ｏ）₂Ｒ₂を有する基であり、Ｒ₂は、１〜２３個の炭素原子を有する直鎖のアルキル、アルケニル又はアルキニル基であり、二分子膜が、抗癌有効量の該化合物を含んでいる。４９．請求項４８のリポソーム及び薬理学的に許容されうるキャリアーからなる薬剤組成物。５０．請求項４９の組成物を動物に投与することからなる癌に罹った動物を治療する方法。