NO314405B1 - Farmasöytisk aktive forbindelser og liposomer og anvendelse derav - Google Patents

Farmasöytisk aktive forbindelser og liposomer og anvendelse derav Download PDF

Info

Publication number
NO314405B1
NO314405B1 NO19963224A NO963224A NO314405B1 NO 314405 B1 NO314405 B1 NO 314405B1 NO 19963224 A NO19963224 A NO 19963224A NO 963224 A NO963224 A NO 963224A NO 314405 B1 NO314405 B1 NO 314405B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
carbons
alkyl
formula
chain
Prior art date
Application number
NO19963224A
Other languages
English (en)
Other versions
NO963224D0 (no
NO963224L (no
Inventor
Yong-Wei Pei
Eric Mayhew
Imran Ahmad
Andrew Stuart Janoff
Original Assignee
Liposome Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Liposome Co Inc filed Critical Liposome Co Inc
Publication of NO963224D0 publication Critical patent/NO963224D0/no
Publication of NO963224L publication Critical patent/NO963224L/no
Publication of NO314405B1 publication Critical patent/NO314405B1/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse er rettet mot farmasøytisk aktive sfingolipidforbindelser, liposomer inneholdende farmasøytisk aktive sfingolipidforbindelser.
Celledød i flercellede organismer kan være en ulykkesrespons overfor ytre traumer, eller det kan være en programmert respons på indre eller ytre stimuli. Nekrose, eller celledød ved uhell, ses som oftest når cellene dør ukontrollert som et resultat av plutselig eller alvorlig skade på en organisme, f.eks. ved fysiske eller kjemiske traumer, vedvarende hypertermi eller ischemi (se, f.eks. J. Cohen, Immunol. Today, 14(3): 126
(1993)); J. Marx, Science, 259: 750 (1993)). Plasmamembranskade kan forårsake at cellene mister deres evne til å regulere deres osmotiske trykk, og celleødeleggelse kan følgelig være et resultat. Konsekvent lekkasje av celleinnholdet kan forårsake ytterligere skade på angivende celler og kan utløse en inflammatorisk respons for å klare cellulært debris.
Apoptose derimot beskriver en programmert serie av hendelser som resulterer i celledød ved fragmentering til membran-bundede partikler og disse partiklene blir deretter utsatt for fagocytose av andre celler (se, f.eks. Stedman's Medical Dictionary (Ulustratet), supra). Celler gjennomgår vanligvis apoptose i fysiologisk bestemte omstendigheter så som eliminering av selvreaktive T-celler, celledød (f.eks. neutrofiler) med korte halveringstider, involusjon av vekstfaktortappede celler, morfogen celledød i løpet av embryonal utvikling og død til cellulære mål av cellemediert cytotoksisitet (se, f.eks. J. Cohen, supra).
Celler som gjennomgår apoptose kan bli brutt opp til apoptotiske legemer som er cellulære fragmenter som har beholdt deres membraner og har evne til å regulere deres osmotiske trykk. Ulikt nekrotiske celler, er det vanligvis ingen lekkasje av cellulært innhold og følgelig ingen påkalling av inflammatorisk respons. Apoptotiske celler har vanligvis ødelagte plasmamembraner og kondensert, ødelagt kjerne. Nukleært kromatin i disse cellene blir tilfeldig fragmentert mellom nukleosomer som et resultat av endonuklease-aktivering i løpet av apoptose.
Til tross for at transkripsjon i apoptotiske celler reduseres, oppstår celledød hurtigere enn hva som var ventet fra opphøret av transkripsjon alene. Dette indikerer at cellulære prosesser i tillegg til transkripsjonseliminering sannsynligvis er involvert i apoptose. Genekspresjon i seg selv kan være nødvendig for forekomst av morfologiske forandringer assosiert med apoptose (se, f.eks. J. Cohen, supra). Alternativt kan inhibering av transkripsjonstermineringen indusere apoptose. Apoptose av noen celler ser ikke ut til å bli påvirket på den ene eller andre måten ved inhibering av proteinsyntesen. Ekspresjon av bcl-2 onkogenene kan f.eks. inhibere apoptosen som ellers blir indusert ved forskjellige stimuli, og kan derved bidra til utvikling av cancer. Følgelig kan inhibering av bcl-2-ekspresjonen være nødvendig for å indusere apoptose (se, f.eks. J. Marx, supra; J. Cohen, supra; G. Williams og C. Smith, Cell, 74:777
(1993); M. Barinaga, Science, 259: 762 (5. februar 1993)). C-myc-protein er kjent for å stimulere celleproliferasjon, men kan også stimulere apoptose i fravær av ytterligere proliferative stimuli. p53 som antas å undertrykke tumorveksten, kan også stimulere apoptose. C-fas, et transmembranprotein homologt med tumornekrosefaktor (TNF) kan også indusere apoptose, som TNF selv.
TNF er et monokinprotein produsert av monocytter og makrofager. Det er to kjente strukturelt og funksjonelt relaterte TNF-proteiner, TNF-a og TNF-f}, blir begge bundet til samme celleoverflatereseptorer. Binding av disse reseptorene av TNF fører til aktivering av flere signaltransduksjons-reaksjonsveier, inkludert aktivering av sfmgomyelinase (se, f.eks. M. Raines et al., J. Biol. Chem., 268 (20): 14572 (1993); L. Obeid et al., Science, 259:1769 (12. mars 1993); H. Morishige et al., Biochim. Biophys. Acta., 1151:59 (1993); J. Vilcek og T. Lee, J. Biol. Chem., 266(12:7313 0991); Dbaibo et al., J. Biol. Chem., 268(24): 17762 (1993); R. Kolesnik, Trends Cell. Biol., 2:232 (1992); J. Fishbein et al., J. Biol. Chem., 268(13): 9255 (1993)).
Søkeren har oppdaget at økninger i ceramidkonsentrasjonene kan stimulere apoptose. Ceramider er en klasse sfingolipider omfattende fettsyrederivater av et sfingoid, f.eks. sfingosin-base (se, f.eks. Stedman<*>s Medical Dictionary (Illustrated), 24. utgave (J.V. Basmajian et al., utg.), Williams and Wilkins, Baltimore (1982), s. 99). Forskjellige ceramider er karakterisert ved forskjellige fettsyrer koblet til sfingoidbasen. F.eks. kan stearinsyre bli koblet til amidgruppen til sfmgosin for å gi opphav til ceramidet CH3(C<H>2)i2CH=CH-CHOH-CH(CH20H)-NH-CO-(CH2)i6CH3. Kortere- eller lengere-kjedede fettsyrer kan også bli koblet til sfingoidbasen. Søkeren har også oppdaget at kobling av visse kjemiske grupper til sfingolipider og ceramider for å danne analoger av slike forbindelser kan inhibere bioomdannelsen av ceramider til sfingomyeliner, og kan derved føre til en apoptose-stimulerende økning i ceramidkonsentrasjonene.
Ceramider finnes i alle eukaryote cellemembraner og er kjent for å delta i forskjellige kritiske cellulære prosesser. Visse sfingolipidforbindelser er blitt funnet å spille en rolle ved forhindring av cellulære proliferasjon. Ingen av disse referansene beskriver imidlertid søkerens kjemiske forbindelser og liposomer, eller deres anvendelse for stimulering av celledød.
Foreliggende oppfinnelse er kjennetegnet ved at den har formelen
Rl.Yl-CHZi-CHCNY^J-^-Z2,
hvor:
R.<1> er en rettkjedet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe som har fra 8 til 19 karbonatomer i den alifatiske kjeden; Y<1> er -CH=CH-, -C = C- eller -CH(OH)CH(OH)-; Z<l> er OH eller en fosforylkolin-tilfestingsinhiberende gruppe med formelen -X^, -OX<l>, -X<2>X3 eller -0-X2X<3>; Z<2> er en fosforylkolin-tilfestingsinhiberende gruppe som har formelen -X<*>, -OX<l>,. X<2>X<3> eller-0-X2X<3>; X<1> er C(0H)H, C02H, CH3, C(CH3)3, Si(CH3)3, SiCH3(C(C<H>3)3)2, Si(C(CH3)3)3, Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et fluor, et klor, eller en gruppe som har formelen C(R<3>R<4>)OH; og hver R<3> og R<4> er uavhengig en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner; X<2> er valgt fra gruppen bestående av CH2-, C(CH3)2-, Si(P04)2-, Si(CH3)2-, SiCH3P04-, C(0)- og S(0)2-; X<3> er valgt fra gruppen betående av -C(0)H, -CO2H, -CH3, -C(CH3)3, -Si(CH3)3, -SiCH3(C(C<H>3)3)2, -Si(C(C<H>3)3)3, -Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et klor, et fluor, eller en gruppe som har formelen C(R3R<4>)OH, hvor hver av R<3> og R<4> er uavhengig en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en fenylgruppe eller en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden;
Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner;
Y<3> er H eller en gruppe som har formelen -C(0)R<2> eller
-S(0)2R<2>;
R<2> er en rettkjedet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe som har fira 1 til 23 karbonatomer i kjeden: og når Z<2> er en amino, er R<2> en alifatisk kjede som har fra 1 til 9 eller fra 19 til 23 karbonatomer i den alifatiske kjeden.
Konversjons-inhiberende grupper kan ha formelen
-X<2->X3 eller -0-X<2>X<3>,
hvor
X<2> blir valgt fra gruppen bestående av CH2-, C(CH3)2-, Si(P04)2-f Si(CH3)2-, SiCH3PC*4-, C(O)- og S(0)2- og hvori X<3> blir valgt fra gruppen bestående av -C(0)H,
-C02H, -CH3, -C(CH3)3, -Si(CH3)3, -SiCH3(C(CH3)3)2, -Si(C(CH3)3)3, - Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et klorin, et fluorin, eller en gruppe med formelen C(R<3>R<4>)OH; hver av R<3> og R<4> er uavhengig en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en fenylgruppe eller en alkyl-substituerte fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden. Det er foretrukket at den konversjons-inhiberende gruppen er -OC(0)CH3, -OC(0)CH2CH2CH3, - OC(0)CH(CH3)CH3 eller -OSi(CH3)2C(CH3)3, mer foretrukket er - OSi(CH3)2C(CH3)3. Konversjons-inhiberende grupper kan også ha formelen -X<1> eller -OX<l>, hvor x<l> er C(0)H, C02H, CH3, C(CH3)3, Si(CH3)3, SiCH3(C(CH3)3)2, Si(C(CH3)3)3, Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et fluorin, et klorin, eller en gruppe med formelen C(R<3>R<4>)OH og hver av R3 og R<4> er uavhengig en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner. Forbindelsen ifølge oppfinnelsen har fortrinnsvis formelen CH3(C<H>2)i2-CH=CH-CH2Z<l->CH(NHY<3>)-CH2-Z<2.> Y<3> er da en gruppe med formelen -C(0)R2 fortrinnsvis C(0)(CH2)4CH3. Z<2> er fortrinnsvis -OSi(CH3)2C(CH3)3, - OSi(P04)2C(CH3)3, -C(0)CH3 eller -OC(0)CH2CH2CH3.
Også gitt er en farmasøytisk sammensetning som omfatter forbindelsen ifølge oppfinnelsen og en farmasøytisk akseptabel bærer. Sammensetningen kan også omfatte et ytterligere bioaktivt middel.
Foreliggende oppfinnelse omfatter anvendelse av forbindelsen som nevnt over for fremstilling av et medikament for behandling av et dyr som er påvirket av cancer.
Anvendelsen omfatter å administrere en mengde av sammensetningen som omfatter en anticancereffektiv mengde av forbindelsen. Vanligvis utgjør den anticancereffektive mengden av forbindelsen minst omtrent 0,1 mg av forbindelsen pr. kg kroppsvekt til dyret. Generelt utgjør den anticancereffektive mengden fra omtrent 1 mg pr. kg til omtrent 50 mg pr. kg. Behandlebare cancere innbefatter, uten begrensning, hjerne-, bryst-, lunge-, ovarie-, tarm-, mage- eller prostatacancere, og kan være sarkomer, karsinomer, neuroblastomer eller gliomer. Medikamentresistente cancere kan også be-handles.
Foreliggende oppfinnelse omfatter også er et liposom som har et bilag som omfatter et lipid og inneholder en forbindelse som tidligere angitt.
Nevnte forbindelse er:
hvor:
Ri er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 5 til 19 karbonatomer i kjeden; Y<1> er -CH=CH-, -C||C- eller -CH(OH)CH(OH)-; hver av Z<1> og Z<2> er uavhengig OH eller en konversjons-inhiberende gruppe; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe som har formelen -R<2>, -C(0)R<2> eller - S(0)2R<2>; R<2> er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 1 til 23 karbonatomer; og hvori bilaget omfatter minst omtrent 5 mol-% av forbindelsen. Y<3> er fortrinnsvis R<2>, som er fortrinnsvis, -(CH2)3CH3, -(CH2)7CH3 eller -(CH2)9CH3, og mer foretrukket er det at R<2> er -(CH2)sCH3 eller -C(0)R<2>, som er fortrinnsvis - C(0)(CH2)4CH3. Det er foretrukket at det i liposomet ifølge oppfinnelsen minst en av Z<l> ogZ<2> er en konversjons-inhiberende gruppe, så som -OC(0)CH3, - 0C(0)CH2CH2CH3, -OC(0)CH(CH3)CH3 eller -OSi(CH3)2<C>(CH3)3. Mer foretrukket er det at den konversjons-inhiberende gruppen er -OSi(CH3)2C(CH3)3- Det er mest foretrukket at liposomet omfatter en forbindelse som har formelen CH3-(CH2)i 2-CH=CH-CH2zl -CH(NHY3)-CH2z2.
Det er foretrukket at det liposomale bilaget omfatter minst omtrent 10 mol-% av forbindelsen. Bilaget kan omfatte vitamin D3, og slike bilag omfatter fortrinnsvis omtrent 1 mol-% vitamin D3. Bilaget kan også omfatte et hodegruppemodifisert lipid. Liposomet kan omfatte et ytterligere bioaktivt middel og kan bli dehydrert.
Også gitt heri er en farmasøytisk sammensetning som omfatter liposomet ifølge oppfinnelsen og en farmasøytisk akseptabel bærer. Nevnte liposom kan anvendes for å behandle et dyr påvirket av cancer, idet en dose av sammensetningen blir administrert og hvor dosen omfatter en anticancer-effektiv mengde av liposomet. Vanligvis omfatter dosen minst omtrent 1 mg liposom pr. kg kroppsvekt av dyret. Generelt omfatter dosen fra omtrent 1 mg pr. kg til omtrent 1000 mg pr. kg.
Det er tilveiebrakt et liposom som har et bilag som omfatter et lipid og en forbindelse med formelen
hvor:
Ri er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 5 til 19 karbonatomer i kjeden; <yl> er -CH=CH-, -C||C- eller -CH(OH)CH(OH)-; hver av Z<l> og Z<2> er uavhengig OH eller en konversjonsinhiberende gruppe; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner eller en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe med formelen -R<2>, -C(0)R<2> eller -S(0)2R<2>; R<2> er lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 1 til 23 karbonatomer; og hvor bilaget omfatter en anticancer-effektiv mengde av forbindelsen. Også tilveiebrakt er en farmasøytisk sammensetning som omfatter dette liposomet og en farmasøytisk akseptabel bærer. Det er videre gitt en fremgangsmåte for behandling av et dyr påvirket av cancer som omfatter administrering av sammensetningen til dyret.
Foreliggende oppfinnelse omfatter en anvendelse av liposomet som tidligere nevnt for fremstilling av et medikament for behandling av et dyr påvirket av cancer.
Kort beskrivelse av tegningene
Figur 1. Ceramidmetabolisme, Cer: ceramider; SM;
Figur 2. Ceramider omfattende omdannings-inhiberende gruppe,
A: Type III Cer-l-TBDMS; C2 Cer-l-TBDMS; C6 Cer-l-TBDMS;
C2
Cerl-TBDPS.
B: 3-TBDMS C6-Cer; 1-TBDMS C6-Cer; 1,3-DiTBDMS C6 Cer (YWlSl.a); 1-TBDMS, 3-acetat C6-Cer; 1-TBDMS, 3-butyrat, C6-Cer. C: l-acetat-3-on C6-Cer; 4,5-diol C6-Cer. D: N-C4-sfingosin; n-heksyl-sfingosin; N-C8-sfingosin; N-C10-sfingosin.
Figur 3. Virkning av forskjellige liposomale ceramid/sfingomyelin-formuleringer på veksten av HL-60-celler. Antall levedyktige celler (pr. m x 10.000, y-akse) ble bestemt for lipiddoser på 100 uM og 200 uM (z-akse). X-akse: kontroll, eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol),
EPC/Chol/C2-ceramid/(C2), EPC/Chol/vitamin D3 (D3), EPC/Chol/D3/C2, EPC/Chol/C6-ceramid (C6), EPC/Chol/D3/C6, SM/Chol og SM/Chol/D3-liposomer. Figur 4. Virkning av forskjellige liposomale ceramid/sfingomyelin-formuleringer på veksten av P388-celler. Antall levedyktige celler (pr. ml x 10.000, y-akse) ble bestemt for lipiddoser på 50 uM, 100 uM og 200 uM (z-akse). X-akse: kontroll, eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol), EPC/Chol/C2-ceramid/(C2), EPC/Chol/vitamin D3 (D3), EPC/Chol/D3/C2, EPC/Chol/C6-ceramid (C6), EPC/Chol/D3/C6, sfingomyelin (SM)/Chol og SM/Chol/D3-liposomer. Figur 5. Virkning av forskjellige liposomale ceramid/sfingomyelin-formuleringer på veksten av U937-celler. Antall levedyktige celler (pr. ml x 10.000, y-akse) ble bestemt for lipiddoser på 50 uM, 100 uM og 200 uM (z-akse). X-akse: kontroll, eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol), EPC/Chol/C2-ceramid/(C2), EPC/Chol/vitamin D3 (D3), EPC/Chol/D3/C2, EPC/Chol/C6-ceramid (C6), EPC/Chol/D3/C6, sfingomyelin (SM)/Chol og SM/Chol/D3-liposomer. Figur 6. Virkning av forskjellige liposomale ceramid/sfingomyelin-formuleringer på veksten av RPMI-7666-celler. Antall levedyktige celler (pr. ml x 10.000, y-akse) ble bestemt for en lipiddose på 200 uM. X-akse: kontroll, eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol), EPC/Chol/C2-ceramid/(C2), EPC/Chol/vitamin D3 (D3), EPC/Chol/D3/C2, EPC/Chol/C6-ceramid (C6), EPC/Chol/D3/C6, sfingomyelin (SM)/Chol og SM/Chol/D3-liposomer. Figur 7. Virkning av liposomalt ceramid på vekten av normale (RPMI-7666) og cancer (U-937) celler. Antall levedyktige celler i hver av kulturene ble bestemt og er gitt som % i forhold til kontroll (y-akse). Figur 8. Terapeutisk effektivitet til liposomale ceramider i mus. X-akse: dager etter liposom/kontroll-administrering; y-akse: % overlevelse i behandlingsgruppen. Sirkel-i-kvadrat: kontroll-mus administrert HEPES-bufret saltvann; fylte firkanter: liposomalt vitamin D3; åpen diamant:
liposomt C2-ceramid; fylte diamanter: lipsomalt C6-ceramid.
Figur 9: In vitro-sensitiviteten til A549-celler overfor C6-ceramidderivater: A: En times eksponering; B: 4 timers eksponering; C: 8 timers eksponering;
D: 24 timers eksponering; E: 48 timers eksponering. X-akse: Medikament (ceramidderivat) konsentrasjon (mikromolar); y-akse: % cellevekst. "X": N-C8-sfingosin; diamant: 1-acetat, C6-ceramid; kvadrat:
1-butyrat, C6-ceramid; triangel: 1-isobutyrat, C6-ceramid.
Figur 10. In vitro-sensitiviteten til A549-celler overfor 1-acetat, C6-ceramid for forskjellige lengder med eksponering: x-akse: Medikamentkonsentrasjon (mikromolar); y-akse: % vekst. Diamant: 1 time; kvadrat: 4 timer;
triangel: 8 timer; X: 24 timer; Stjerne: 48 timer.
Figur 11. In vitro-sensitiviteten til A549-celler overfor 1 -butyrat, C6-ceramid for forskjellige eksponeringslengder. x-akse: Medikamentkonsentrasjon (mikromolar); y-akse: % vekst. Diamant: 1 time; kvadrat: 4 timer;
triangel: 8 timer; X: 24 timer; Stjerne: 48 timer.
Figur 12. In vitro-sensitiviteten til A549-celler overfor 1-isobutyrat, C6-ceramid for forskjellige eksponeringslengder. x-akse: Medikamentkonsentrasjon (mikromolar); y-akse: % vekst. Diamant: l time; kvadrat: 4 timer;
triangel: 8 timer; X: 24 timer; Stjerne: 48 timer.
Figur 13. In vitro-sensitiviteten til A549-celler overfor N-C8-sfingosin for forskjellige eksponeringslengder. x-akse: Medikamentkonsentrasjon (mikromolar); y-akse: % vekst. Diamant: 1 time; kvadrat: 4 timer; triangel: 8 timer; X: 24 timer; Stjerne: 48 timer. Figur 14. Terapeutisk effektivitet til N-heksyl-sfingosin overfor P-388/ADR
(adriamycin-resistente) tumor-bærende mus. x-akse: dager etter terapi; y-akse: % overlevelse i behandlingsgruppen. "+": kontroll (ubehandlet);
kvadrater: en dose med 20 mg n-heksyl-sfingosin pr. kg kroppsvekt;
sirkler: 3 20 mg/kg doser.
Det er heri gitt en forbindelse som har formelen:
hvor:
Ri er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 8 til 19 karbonatomer i den alifatiske kjeden; Y<*> er -CH=CH-, -C||C- eller -CH(OH)CH(OH)-; Z<l> er OH eller en konversjons-inhiberende gruppe; Z<2> er en konversjons-inhiberende gruppe; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til omtrent 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe med formelen -C(0)R<2> eller -S(0)2R<2>; R<2> er lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 1 til 23 karbonatomer i kjeden; og når Z<2> er en amino, er R<2> en alifatisk kjede med fra 1 til 9 eller fra 19 til 23 karbonatomer i den alifatiske kjeden. Ri er fortrinnsvis en alkylgruppe, mer foretrukket CH3(CH2)i2-, Y<J> er -CH=CH-, Y<2> er en H, Y<3> er - C(0)R<2> og R<2> er en alkylkjede, fortrinnsvis en alkylkjede med fra 6 til 8 karboner. Det er mest foretrukket at Ri og R<2> sammen omfatter fra omtrent 15 til omtrent 25 karboner, idet Ri fortrinnsvis omfatter 13 karboner og R<2> fortrinnsvis omfatter 6 til 8 karboner. Uten å være begrenset til noen teori, er det antatt at den totale karbonkjedelengden til et lipid er en viktig faktor for å bestemme evnen til å innsette seg selv inn i biologiske membraner.
Uten å være begrenset til noen teori, er det antatt at sfingosiner og ceramider kan virke som signaltransdusere eller sekundære budbringere i celler, dvs. at intracellulære nivåer økes som respons på ytre stimuli og at denne økningen resulterer i forsterket proteinkinase og fosfatase-aktiviteter (se, f.eks. M. Raines et al., supra; R. Kolesnik et al., supra; G. Dbaibo et al., supra; og J. Fishbein et al., supra). Aktiverte proteinkinaser og fosfataser kan aktivere cellulære prosesser som fører til celledød. Følgelig kan det være terapeutisk ønskelig å øke intracellulære konsentrasjoner til sfingosiner og ceramider i cancerceller.
Sfingosiner og ceramider blir dannet i dyreceller ved kombinasjon av palmitoyl CoA (CH3(CH2)i4-CO-S-CoA og serin for å tilveiebringe dehydrosfinganin (CH3(CH2)i4Co-CH(NH3)-CH20H og CO2 (se, f.eks. L. Stryer, Biochemistry (2. utg.),W.H. Freeman and Co., New York, s. 461-462). Dehydrosfinganin blir omdannet til dihydrosfingosin (CH3(CH2)i4-CH(OH)-CH(NH3)-CH20H) som blir omdannet til sfingosin (CH3(CH2)i2CH=CH-CH(OH)-CH(NH3)-CH2OH). En fettsyre blir deretter koblet til amidgruppen til sfingosin for å gj opphav til et ceramid (CH3(CH2)i2CH=CH-CHOH-CH(CH2OH)-NH-CO-R, hvor R er en fettsyrekjede). En fosforylcholingruppe (P04CH2CH2-N(CH3)3) kan bli koblet til ceramid ved dets hydroksylgruppe for å produsere et sfingomyelin (CH3(CH2)i2CH=CH-CHOH-CH(CH2P04CH2CH2-N(CH3)3)-NH-CO-R). Sfingomyelinase kan katalysere den hydrolytiske fjerningen av fosforylcholin fra sfingomyelin for å gi opphav til et ceramid (se, f.eks. figur 1). Revers hydrolyse av ceramidet kan gi opphav til et sfingomyelin.
Blokkering eller inhibering av dette "reverse hydrolyse"-trinnet, dvs. omdanning av et ceramid til tilsvarende sfingomyelin, kan føre til økte intracellulære ceramidnivåer. "Konversjons-inhiberende grupper" er generelt ikke grupper som finnes koblet til sfingosiner eller ceramider i dyreceller, eller til deres biosyntetiske forløpere. Slike grupper er derimot syntetisk koblet til sfingosiner og ceramider for å inhibere sfingomyelindannelsen derifra.
Forbindelsene ifølge oppfinnelsen omfatter konversjons-inhiberende grupper og alkyl-, alkenyl-, alkynylkjeder med varierende lengder, blir syntetisert ifølge et antall veier som er velkjente og lett kan utføres av fagfolk innenfor dette området ut fra det som er beskrevet i foreliggende oppfinnelse (se, f.eks. nedenfor hvor "rf refererer til en av de følgende referanser: 1. J. Am. Chem. Soc, 94: 6190 (1972); 2: J. Org. Chem., 5: 668
(1994); 3. Angew. Chem., Intl. Ed. (English), 17, 569 (1978); 4. Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry, (5. utg.), s. 769-780); 5: J. Org. Chem., 40: 574 (2975); 6: J. Org. Chem., 59: 182 (1994); 7. J. Org. Chem., 25: 2098 (1960); 8: Synthesis (1985): s. 253-268; 9: J. Chem. Soc. (1953): s. 2548; 10: J. Am. Chem. Soc, 90: 4462,4464
(1968); 11: Oxidations in Organic Chemistry (Am. Chem. Soc, Washington, D.C.
(1990), s. 60-64; 12: J. Med. Chem., 30, 1326 (1987); 13: Synth. Commun., 9: 757
(1979); 14: The Chemistry of Amides, (J. Wiley & Sons, New York (1970)), s. 795-801; 15: J. Med. Chem., 37: 2896 (1994); 4: J. Med. Chem., 30:1326 (1987); 16: Ree. Chem. Prog., 29: 85 (1968); og 17: Phospholipids Handbook (Marcell Dekker, Inc., New York (1993), s. 97). For eksempel kan fagfolk anvende et sfingosin eller et ceramid som utgangsmateriale. Alkyl-, alkenyl- eller alkynylkjedene med varierende lengder kan bli koblet dertil, eller fjernet derfrå, ifølge kjente metoder. Konversjons-inhiberende grupper kan også bli koblet til sfingosiner og ceramider ifølge kjente metoder. Disse innbefatter uten begrensning, oksydasjon/reduksjon, substitusjon, kondensasjon og alkyleringsreaksjoner, samt andre aksepterte metoder for kobling og fjerning av kjemiske grupper fra en forbindelse og omdanning av forbindelser fra en form til en annen. Slike reaksjoner blir generelt dannet ved anvendelse av generelt aksepterte oppløsningsmidler og kan lett utføres under bestemte betingelser. Spesifikke forbindelser kan bli syntetisert som følger. Syntese av silyeter til ceramid: Blandingen av ceramid og t-butyldimetylsilylklorid (1 ekvivalent) og imidazol (2 ekvivalenter) i DMF ble omrørt under N2 ved romtemperatur over natten. Oppløsningsmid-let ble fjernet under en strøm av N2 og resten ble løst opp i CH2C12, vasket (H20), tørket (MgSC<4) og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset over silikagel (AcOEt:heksan = 1:3). Syntese av 1-esterceramid: Blandingen av ceramid og Ac20 (1 ekvivalent) og katalytisk mengde av dimetylaminopyridin i tørr CH2C12, ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og reaksjonen ble undersøkt ved TLC (AcOEt). Blandingen ble konsentrert. Råproduktet ble renset over silikagel (AcOEt:heksan = 2:3,5). Oksydasjon av C3-OH til ceramid til keton: 1-OAc-ceramid ble løst opp i aceton og avkjølt i isbad. Jones reagens ble dråpevis sakte tilsatt til den oransje fargen var vedvarende. Reaksjonen ble stoppet ved isopropanol og NaHCC>3 ble tilsatt og omrørt i 5 minutter. Oppløsningen ble filtrert og konsentrert til tørrhet. Råproduktet ble renset ved preparativ TLC (AcOEt:heksan = 1:2,5). Reduksjon av ceramid til sfingosinanaloger: Til en iskald omrørt oppløsning av ceramid i vannfri THF ble det tilsatt LiAHfy og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under N2 i 24 timer. Under isavkjøling ble reaksjonsblandingen stoppet ved tilsetning av mettet, vandig NaHC03. Den resulterende oppslemmingen ble filtrert og vasket med THF. Oppløsningen ble konsentrert og resten ble brakt inn i CH2C12, vasket med H20, tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset over preparativ TLC (silikagel) CH2CI2:MeOH:TEA ~ 8:1:0,08. Syntese av 4,5-diolceramid: Til en oppløsning av ceramid i en blanding av Me2CO, destillert H20 og t-BuOH ble N-metylmorfolin-N-oksyd (NMO, 1,2 ekvivalenter) og OSO4 (katalytisk mengde) i THF tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 45°C i 6 timer og ble stoppet med fast NaHC03 og blandingen ble omrørt i 15 minutter. Suspensjonen ble filtrert og filtratet ble løst opp i THF. Oppløsningen ble vasket med saltvann. Den organiske oppløsningen ble separert, tørket og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset over preparativ TLC (THF).
Egnede konversjons-inhiberende grupper kan bli identifisert ifølge et antall metoder som lett kan bli utført av fagfolk innenfor dette fagområdet gitt motivasjon ifølge oppfinnelsen for å identifisere slike grupper. F.eks. kan slike fagfolk velge en kjemisk del og koble den til et sfingosin eller ceramid som beskrevet ovenfor. Den relative raten hvor en slik forbindelse gjennomgår hydrolyse kan deretter lett bestemmes, og raten hvorved et sfingomyelin blir dannet fra forbindelsen. Hydrolyseringsratene kan i seg selv lett bestemmes av fagfolk innenfor dette området ved å koble en radioaktiv del til et sfingosin eller ceramid og deretter følge raten til hydrolytisk spaltning av delen ved kromatografiske midler. Rater og sfingomyelindannelse kan også lett bestemmes, f.eks. og uten begrensning, ved kombinering av radioaktiv fosforylcholin med en konversjons-inhiberende gruppeinneholdende forbindelse i et enzymsystem som har evne til å koble fosforylcholin til forbindelsen, og deretter anvendelse kromatografiske metoder for å vurdere raten hvorved fosforylcholin blir tilsatt. Foretrukne konversjons-inhiberende grupper er de som mest inhiberer hydrolysen og fosforylcholinkoblingen.
Konversjons-inhiberende grupper kan ha formelen
hvor
X<2> blir valgt fra gruppen bestående av CH2, C(CH3)2-, SifPO^-, Si(CH3>2-, SiCH3PC"4-, C(O)- og S(0)2- og hvor X<3> blir valgt fra gruppen bestående av -C(0)H, - C02H, -CH3, -C(CH3)3, -Si(CH3)3, -SiCH3(C(C<H>3)3)2, -Si(C(CH3)3)3, - Si{P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenyl med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et klorin, et fluorin, eller en gruppe med formelen C(R<3>R<4>)OH; idet hver av R<3> og R<4> er uavhengig en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en fenylgruppe eller en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden. Det er foretrukket at den konversjons-inhiberende gruppen er -OC(0)CH3, -OC(0)CH2CH2CH3, - OC(0)CH(CH3)CH3 eller -OSi(CH3)2C(CH3)3 (TBDMS), mer foretrukket, - OSi(CH3)2C(CH3)3. Konversjons-inhiberende grupper kan også ha formelen -X<*> eller -OX<1>, hvor X<1> er C(0)H, C02H, CH3, C(CH3)3, Si(C<H>3)3, SiCH3(C(CH3)3)2, Si(C(CH3)3)3, Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et fluorin, et klorin eller en gruppe med formelen C(R<3>R<4>)OH, og hver av R<3 >og R<*> er uavhengig en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner. Følgelig innbefatter konversjons-inhiberende grupper kobling av kjemiske deler til sfingosiner og ceramider ved eter, silyleter, ester, acetal og sulfonatbindinger.
Det er foretrukket at forbindelsen ifølge oppfinnelsen har formelen CH3(CH2)i2" CH=CH-CH2Z<1->CH(NHY<3>)-CH2-Z<2>. Y<3> er fortrinnsvis en gruppe med formelen - C(0)R2 mer foretrukket -C(0)(CH2)4CH3. Z<2> er fortrinnsvis -OSi(CH3)2C(CH3)3, - OSi(P04)2C(C<H>3)3, -C(0)CH3 eller -OC(0)CH2CH2CH3.
Også gitt heri er en farmasøytisk sammensetning som omfatter forbindelsen ifølge oppfinnelsen og en farmasøytisk akseptabel bærer. Sammensetningen kan også omfatte et ytterligere bioaktivt middel. "Farmasøytisk akseptable bærere" som anvendt heri er generelt anvendt for anvendelser i sammenheng med administrering av lipider og liposomer, inkludert liposomale, bioaktive formuleringer, til dyr, inkludert mennesker. Farmasøytisk akseptable bærere blir generelt formulert ifølge et antall faktorer som hører inn under det som er kjent for fagfolk for å bestemme og gjøre rede for, uten begrensning: det bestemte liposomale bioaktive midlet som blir anvendt, dets konsentrasjon, stabilitet og antatt biotilgjengelighet; sykdom, forstyrrelser eller tilstand som blir behandlet med den liposomale sammensetningen; individet, alder, størrelse og generell tilstand; og sammensetningens antatte administreringsvei, f.eks. nasal, oral, oftalmisk, topisk, transdermal, vaginal, subkutan, inn i bryst, intraperitonealt, intravenøst eller intramuskulært (se, f.eks. Naim (1985)). Vanlige, farmasøytisk akseptable bærere anvendt i parenterale bioaktive middeladministreringer innbefatter f.eks. D5W, en vandig oppløsning inneholdende 5 vekt ved volum-% dekstrose og fysiologisk saltvann. Farmasøytisk akseptable bærere kan inneholde ytterligere ingredienser, f.eks. de som forsterker stabiliteten til de aktive ingredienser som er innbefattet, så som konserveringsmidler og anti-oksydanter.
Det kan anvendes en fremgangsmåte for administrering av en bioaktiv forbindelse til et dyr, fortrinnsvis et menneske, som omfatter administrering til dyret av denne sammensetningen. Fremgangsmåten kan omfatte administrering av et ytterligere bioaktivt middel til dyret. Administreringen som kan være ved hjelp av en hvilken som helst metode som generelt er akseptert for administrering av farmasøytiske produkter til dyr, er generelt intravenøs administrering.
Dyret kan være påvirket med cancer, idet fremgangsmåten omfatter administrering av en mengde av sammensetningen som omfatter en anticancer-effektiv mengde av forbindelsen. Behandlebare cancertyper innbefatter, uten begrensning, hjerne-, bryst-, lunge-, ovarie-, tarm-, mage- eller prostatacancer, og kan være sarkomer, karsinomer, neuroblastomer eller gliomer. Medikamentresistente cancere kan også bli behandlet.
"Anticancer-effektive mengder" av forbindelsene ifølge oppfinnelsen er generelt mengder effektive for å inhibere, lindre, gjøre mindre eller forhindre etablering, vekst, metastase eller invasjon av en eller flere cancere i dyr hvortil forbindelsene er blitt administrert. Anticancer-effektive mengder blir generelt valgt i henhold til et antall faktorer, f.eks. alder, størrelse og generell tilstand til individet, cancere som blir behandlet og antatt administreringsvei, og bestemt ved forskjellige metoder, f.eks.,
dosevarierende forsøk, som er velkjente og som lett kan bli praktisert av fagfolk innenfor dette området ut fra det som er beskrevet i foreliggende oppfinnelse. Vanligvis er den anticancer-effektive mengden av forbindelsen minst omtrent 0,1 mg av forbindelsen pr. kg kroppsvekt til dyret. Generelt er den anticancer-effektive mengden fra omtrent 1 mg pr. kg til og med 50 mg pr. kg.
Det er beskrevet heri et liposom som har et bilag som omfatter et lipid og en forbindelse med formelen
hvor:
Ri er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 5 til 19 karbonatomer i kjeden; Y<l> er -CH=CH-, C||C- eller -CH(OH)CH(OH)-; hver av Z<l> og Z<2> er uavhengig OH eller en konversjons-inhiberende gruppe; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe med formelen -C(0)R<2> eller -S(0)2R<2>; R<2 >er lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 1 til 23 karbonatomer; og hvor bilaget omfatter minst omtrent 5 mol-% av forbindelsen.
Liposomene er selvsammenstillende strukturer som omfatter et eller flere lipidbilag som hver omgir et vandig rom og omfatter to motstående monolag av amfipatiske lipidmolekyler. Disse omfatter en polar (hydrofil) hodegrupperegion kovalent koblet til en eller to upolare (hydrofobe) acylkjeder. Energetiske ugunstige kontakter mellom hydrofobe acylkjeder og det vandige mediet antas generelt å indusere lipidmolekyler slik at de rearrangeres slik at de polare hodegruppene er orientert mot det vandige mediet, mens acylkjedene er reorientert mot det indre av bilaget. En energetisk stabil struktur blir dannet hvor acylkjedene er effektivt beskyttet fra å komme i kontakt med det vandige mediet.
Liposomer kan bli dannet ifølge forskjellige metoder (for en oversikt, se f.eks. Deamer og Uster (1983)). Disse fremgangsmåtene omfatter uten begrensing: Banghams metoder for å danne multilamellære liposomer (MLV); Lenk's, Fountain's og Cullis<1> metode for å danne MLV med vesentlig lik interlamellær oppløsningsmiddelfordeling (se, f.eks. US patent nr. 4.522.803,4.588.578, 5.030.453,5.169.637 og 4.975.282); og Paphadjopoulos et al.'s reversfase avdampningsmetode (US patent nr. 4.235.871) for fremstilling av oligolamellære liposomer. Unilamellære vesikler kan bli produsert fra MLV ifølge slike metoder som sonikering (se Paphadjopoulos et al. (1968)) eller ekstrudering (US patent nr. 5.008.050 og US patent nr. 5.059.421). Eterlipidliposomer ifølge oppfinnelsen kan bli produsert ifølge fremgangsmåtene i hvilke som helst av disse beskrivelsene og innholdet er inkorporert heri som referanse.
Forskjellige metoder, så som sonikering, homogenisering, French Press-applikasjon, maling og ekstrudering kan bli anvendt for å størrelsesredusere liposomer, dvs. danne liposomer med mindre størrelse fra større liposomer. Tangensial flow-filtrering (se WO 89/008846) kan også anvendes for å regularisere størrelsen på liposomene, dvs. for å produsere liposomer som har en populasjon av liposomer med mindre størrelsesheterogenitet, og en mer homogen, definert størrelsesfordeling. Liposomer ifølge oppfinnelsen kan være unilamellær eller multilamellær, og har fortrinnsvis en diameter som er mindre enn omtrent 200 nm, mer foretrukket er fra større enn omtrent 50 nm til mindre enn omtrent 200 nm.
Liposomale bilag kan omfatte forskjellige amfipatiske lipider, inkludert de som er mettede eller umettede og som vanligvis har acylkjeder på fra 10 til 24 karboner. Egnede polare grupper innbefatter, uten begrensning, fosforylcholin, fosforyletanolamin, fosforylserin, fosforylglycerol og fosforylinsitiol. Egnede acylkjeder innbefatter, uten begrensning, laurat-, myristat-, palmitat-, stearat- og oleat-kjeder. Følgelig omfatter egnede liposom-dannende lipider, uten begrensning: eggfosfatidylcholin, distearoylfosfatidylcholin, dimyristoylfosfatidylcholin, dipalmitoylfosfatidylcholin, dipalmitoylfosfatidylglycerol og andre. Liposomale bilag kan videre omfatte steroler, så som kolesterol. Steroler omfatter generelt fluiditet til lipidlagene, og øker vanligvis fluiditeten til bilaghydrokarbonkjedene nedenfor gel-til-væske-overgangstemperaturen (Tm) og reduserer fluiditeten over Tm (se, f.eks. Lewis og McElhaney (1992) og Darnell et al. (1986)). Sterolinteraksjoner med omgivende hydrokarbonkjeder inhiberer følgelig generelt emigrering av disse kjedene fra bilaget.
Det liposomale bilaget omfatter følgelig fortrinnsvis minst omtrent 10 mol-% av forbindelsen. Når Y<3> er R<2>, er det fortrinnsvis -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -(CH2)7CH3 eller -(CH2)oCH3, og mer foretrukket (CH2)5CH3. Når Y3 er -C(0)R2 er det fortrinnsvis - C(0)(CH2)4CH3. Det er foretrukket at liposomet omfatter en forbindelse som har formelen CH3-(C<H>2)i2-CH=CH-CH-CH2Z<1->CH(NHY<3>)-CH2Z<2>; mer foretrukket er det at forbindelsen omfatter en konversjons-inhiberende gruppe, så som -OC(0)CH3, -OC(0)CH2CH2CH3, -OC(0)CH(CH3)CH3, eller -OSi(C<H>3)2C(C<H>3)3. Mest foretrukket er det at en konversjons-inhiberende gruppe er -OSi(CH3)2C(CH3)3 (TBMDS). Intracellulære ceramidnivåer kan også bli øket ved administrering av vitamin D3, enten separat fra administrering av forbindelsene og liposomene ifølge oppfinnelsen, eller fortrinnsvis, i sammenheng med administrering av liposomene. Uten å være begrenset av noen teori, er det antatt at vitamin D3 kan stimulere sfingomyelinase til å omdanne sfingomyeliner til ceramider. Vanligvis kan bilaget omfatte vitamin D3 og slike bilag omfatter fortrinnsvis omtrent 1 mol-% vitamin D3. Bilaget kan også omfatte et hodegruppe-modifisert lipid.
Liposomer kan omfatte et ytterligere bioaktivt middel. Et "bioaktivt middel" er en hvilken som helst forbindelse eller sammensetning som kan bli administrert til dyr, fortrinnsvis mennesker. Slike midler kan ha biologisk aktivitet i dyr, og midlet kan også bli anvendt diagnostisk i dyrene. Bioaktive midler innbefatter terapeutiske og bildedannende midler. Bioaktive midler kan bli assosiert med liposomer som innbefatter, men ikke begrenset til, antivirale midler så som acyklovir, zidovudin og interferoner; antibakterielle midler så som aminoglycosider, cefalosponer og tetracykliner; antisoppmidler så som polyenantibiotika, imidazoler og triazoler; antimetaboliske midler så som folinsyre og purin av pyrimidinanaloger; antineoplastiske midler så som antracyklin-antibiotika og plantealkaloider; steroler så som kolesterol; karbohydrater, f.eks. sukkere og stivelser; aminosyrer, peptider, proteiner så som cellereseptorproteiner, immunoglobuliner, enzymer, hormoner, neurotransmittere og glycoproteiner; fargestoffer; radiomarkører som radioisotoper og radioisotop-merkede forbindelser; radiopaque-forbindelser; fluorescensforbindelser; mydriatiske forbindelser; bronkodilatorer; lokale bedøvelsesmidler; og lignende. Liposomale bioaktive middelformuleringer kan forsterke den terapeutiske indeksen til det bioaktive midlet, f.eks. ved bufring av midlets toksisitet. Liposomer kan også redusere raten hvorved et bioaktivt middel blir fjernet fra sirkulasjonen til dyret. Følgelig kan liposomalformulering av bioaktive midler bety at mindre av midlet behøver å bli administrert for å oppnå den ønskede effekten. Ytterligere bioaktive midler foretrukket for liposomet ifølge oppfinnelsen innbefatter antimikrobielle, anti-inflammatoriske og antineoplastiske midler, eller terapeutiske lipider, f.eks. ceramider. Det er mest foretrukket at det ytterligere bioaktive midler er et antineoplastisk middel.
Liposomene kan bli applisert med én eller flere biologisk aktive midler ved solubilisering av midlet i lipid eller vandig fase anvendt for å danne liposomene. Alternativt kan ioniserbare, bioaktive midler bli applisert i liposomene ved først å danne liposomer, etablere et elektrokjemisk potensiale, f.eks. ved hjelp av en pH-gradient, over det ytterste liposomale bilaget, og deretter tilsetning av det ioniserbare midlet til det vandige mediet utenfor liposomet (se Bally et al., US patent nr. 5.077.056 og WO 86/01102).
Liposomet ifølge oppfinnelsen kan omfatte et hodegruppe-modifisert lipid. "Hodegruppe-modifiserte lipider" er lipider som, når inkorporert i lipidlagene til liposomene kan inhibere fjerning av liposomene fra sirkulasjonssystemet til dyret som de er blitt administrert til. Liposomer blir fjernet fra dyrelegemet ved dets retikuloendotele system (RES) som består av fikserte og sirkulerende makrofager. Unngåelse av RES-klaring kan muliggjøre at liposomene forblir i sirkulasjon lengre og betyr at mindre medikament trenger å bli administrert for å oppnå ønskede serumnivåer. Lengre sirkulasjonstider kan også muliggjøre målsetning av liposomene til ikke-RES-inneholdende vev. Liposomale overflater kan belegges med serumproteiner når administrert til dyr, dvs. liposomene kan bli opsonisert. Rater av fjerning av RES kan bli relatert til rate og nivå av opsonisering. Fjerningen kan bli inhibert ved modifisering av den ytre overflaten til liposomene slik at binding av serumproteinene blir generelt inhibert. Dette kan bli oppnådd ved minimalisering eller beskytte negative overflate-ladninger som kan fremme proteinbinding, eller ved ellers å presentere en sterisk hindring til binding av serumproteinene.
Effektiv overflatemodifikasjon, dvs. endringer på de ytre overflatene til liposomene som resulterer i inhibering av opsonisering og RES-opptak, kan oppnås ved inkorporering av hodegruppe-modifiserte lipider til liposomale bilag. "Hodegruppe-modifiserte lipider"
som anvendt heri er amfipatiske lipider hvor polare hodegrupper kan bli derivatisert ved kobling dertil av en kjemisk del, f.eks. polyetylenglykol, en polyalkyleter, et gangliosid, en organisk dikarboksylsyre eller lignende, som kan inhibere binding av serumproteiner til liposomer slik at den for farmakokinetiske adferden til vesiklene i
sirkulasjonssystemet til dyrene blir endret (se, f.eks. Blume et al., Biochim. Biophys. Acta., 1149:180 (1993); Gabizon et al., Pharm. Res., 10(5): 703 (1993); Park et al., Biochim. Biophys. Acta., 1108:257 (1992); Woodle et al., US patent nr. 5.013.556; Allen et al., US patent nr. 4.837.028 og 4.920.016; US serienr. 142.691, inngitt 25. oktober 1993 og innholdene av disse beskrivelsene er inkorporert heri som referanse).
Mengden av et hodegruppe-modifisert lipid inkorporert i liposomet avhenger av et antall faktorer som er velkjente for fagfolk innenfor et område, eller som kan bli bestemt uten unødig eksperimentering. Disse innbefatter, men er ikke begrenset til: type lipid og type hodegruppe-modifikasjon; type og størrelse på liposomet; og antatt terapeutisk anvendelse av den liposomale formuleringen. Vanligvis er konsentrasjonen av det hodegruppe-modifiserte lipidet i lipidbilaget til liposomet minst omtrent 5 mol-%, ønskelig er omtrent 10 mol-%.
Liposomet ifølge oppfinnelsen kan bli dehydrert, lagret og deretter rekonstituert slik at en vesentlig del av deres indre innhold blir beholdt i liposomene. Liposomal dehydrering krever generelt anvendelse av et hydrofilt tørke-beskyttelsesmiddel (se US patent nr. 4.229.360 og 4.880.635). Denne hydrofile forbindelsen antas generelt å forhindre rearrangering av lipidene i liposomer slik at størrelsen og innholdet blir opprettholdt i løpet av tørkeprosedyren og i løpet av rehydreringen slik at liposomene kan bli gjenopprettet. Hensiktsmessige kvaliteter for slike tørkebeskyttelsesmidler er at de er sterke hydrogenbindingsakseptorer og har stereokjemiske trekk som bevarer det intramolekylære rommet til liposom-bilagkomponentene. Sakkaridsukkerforbindelser, fortrinnsvis mono- og diasakkarider, er egnede tørkebeskyttelsesmidler for liposomer. Alternativt kan tørkebeskyttelsesmidlene bli utelatt dersom liposompreparatet ikke er frosset før dehydrering, og tilstrekkelig vann forblir i preparatet etter dehydrering.
Også gitt heri er en farmasøytisk sammensetning som omfatter liposomet ifølge oppfinnelsen og en farmasøytisk akseptabel bærer.
Beskrevet heri er et liposom som har et bilag som omfatter et lipid og en forbindelse med formelen
hvor:
Ri er en lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 5 til 19 karbonatomer i kjeden; Y<l> er -CH=CH-, -C||C- eller -CH(OH)CH(OH)-; hver av Z<l> og Z<2> er uavhengig OH eller en konversjons-inhiberende gruppe; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkyl-substituert fenylgruppe med fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede med fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe med formelen -C(0)R<2> eller - S(0)2R<2>; R<2> er lineær alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe med fra 1 til 23 karbonatomer; og hvor bilaget omfatter en anticancereffektiv mengde av forbindelsen. Også tilveiebrakt er en farmasøytisk sammensetning som omfatter dette liposomet og en farmasøytisk akseptabel bærer. Videre er det tilveiebrakt en fremgangsmåte for behandling av et dyr påvirket av en cancer som omfatter administrering av forbindelsen til dyret.
EKSEMPLER
EKSEMPEL 1
Liposompreparering
Liposomene ble fremstilt med komponentene og i molforhold av komponenter, indikert i tabell 1 (se nedenfor) ifølge oppløsningsmiddelavdampningsmetoden. F.eks. ble PC/Chol/C2-ceramidliposomene dannet ved oppløsning av 1,8242 mg bovint fosfatidylcholin (BPC), 0,4639 mg kolesterol (Chol) og 0,1366 mg C2-ceramid (C2) i en kloroform/metanol-oppløsningsmiddelblanding (2:1, volum/volum). Oppløsningsmidlet ble deretter avdampet for å produsere tørket lipid, og det tørkede lipidet ble rehydrert med HEPES-bufret saltvann (10 mM HEPES, 150 mM NaCl, pH 7,4). For vitamin D3-inneholdende preparater ble 0,0154 mg vitamin D3 tilsatt lipidblandingen. For C-6-ceramid-inneholdende preparater ble 0,1590 mg C6-ceramid (C6) erstattet med C2-ceramidet. For sfingomyelin (SM)-inneholdende preparater ble 2,0470 mg SM, 0,4639 mg kolesterol og 0,0154 mg vitamin D3 anvendt. Videre ble PC/Chol og PC/Chol/D3-preparater dannet med 2,1280 mg BPC, 0,4639 mg kolesterol og 0,0154 mg vitamin D3.
EKSEMPEL 2
Effekten av forskjellige liposomale ceramid/ sfingomyelin- formuleringer på veksten av HL- 60- celler 2 x IO<5> HL-60-celler ble inkubert med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol), EPC/Chol/C2-ceramid (C2), EPC/Chol/Vitamin D3 (D3), EPC/Chol/D3/C2, EPC/Chol/C6-ceramid (C6), EPC/chol/D3/C6, sfingomyelin (SM)/Chol og SM/Chol/D3-liposomer samt med buffer (ingen liposomer; "kontroll") og med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPCVChol)-liposomer. Inkubasjon var 37°C i serumfritt medium, supplementert med 5 mg/l insulin og 5 mg/l transferrin, i 24 timer. Føtalt kalveserum ble deretter tilsatt til kulturmediet til en sluttkonsentrasjon på 10% og cellene ble deretter inkubert i ytterligere 24 timer, hvoretter antall levedyktige celler i hver kultur ble opptelt ved anvendelse av trypan-blåfarging og et hemocyttometer. Antall levedyktige celler ble bestemt for lipiddoser på 100 uM og 200 uM, og er angitt i figurene (nedenfor) som antall levedyktige celler pr. ml kulturmedium, ganger 10.000. Resultatene er rapportert i figur 3 og tabell 2 (se nedenfor).
EKSEMPEL 3
Effekt av forskjellige liposomale ceramid/ sfingomyelin- formuleringer på veksten på P388- celler 2 x 10^ P388-celler ble inkubert med forskjellige ceramid eller sfingomyelinliposomale formuleringer (se eksempel 2, ovenfor), samt med bare buffer og med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol)-liposomer, under betingelsene angitt ovenfor. Antall levedyktige celler i kulturene ble bestemt for lipiddoser på 50 uM, 100 uM og 200 uM. Resultatene er rapportert i figur 4 og tabellene 2 og 3.
EKSEMPEL 4
Effekten av forskjellige liposomale ceramid/ sfingomvelin- formuleringer på veksten av U937- cellene 2 x 10^ U937-cellene ble inkubert med forskjellige ceramid eller sfingomyelinliposomale formuleringer angitt ovenfor (se eksempel 2) samt med bare buffer og med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol)-liposomer, under betingelsene angitt ovenfor. Antall levedyktige celler i kulturene ble bestemt for lipiddoser på 50 uM, 100 uM og 200 uM Resultatene er rapportert i figurene 5 og 7 og tabellene 2 og 3.
EKSEMPEL 5
Virkningen av forskjellige liposomale ceramid/ sfingomyelin- formuleringer på veksten av RPMI- 7666- celler 2 x 10^ RPMI-7666-celIene ble inkubert med forskjellige ceramid eller sfingomyelinliposomale formuleringer angitt ovenfor (se eksempel 2), samt uten liposomer (kontroll) og med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPCYChol)-liposomer, under betingelsene angitt ovenfor. Antall levedyktige celler i kulturene ble bestemt. Resultatene er angitt i figurene 6 og 7, og tabellene 2 og 3.
EKSEMPEL 6
Effekt av forskjellige liposomale ceramid/ sfingomyelin- formuleringer på veksten til CHO/ K1 - celler
2 x 10^ CHO/K1-celler ble inkubert med forskjellige ceramid/sfingomyelinliposomale formuleringer angitt ovenfor (se eksempel 2), samt uten liposomer (kontroll) og med eggfosfatidylcholin/kolesterol (EPC/Chol)-liposomer, under betingelsene angitt ovenfor. Antall levedyktige celler i kulturene ble bestemt. Resultatene er angitt i tabell 2.
EKSEMPEL 7
Terapeutisk effektivitet til liposomale ceramider i mus
CDFl-mus ble hver injisert intraperitonealt med 2,5 x 10^ P388-celler. Grupper med hver 10 mus ble administrert intraperitonealt med enten en HEPES-bufret
saltvannskontroll (10 mM HEPES, 150 mM NaCl, pH 7,4) eller liposomal vitamin D3, liposomer inneholdende C2-ceramid eller liposomer inneholdende C6-ceramid, dannet i henhold til prosedyrene beskrevet i eksempel 1 (se ovenfor), ved en lipiddose på 1,5 mg lipid pr. kg kroppsvekt til mus, idet administreringen utgjør 24 timers administrering av P388-celler. Overlevelsen ble vurdert ved forskjellige tidspunkter etter liposom/-
kontroll-administrering. Resultatene er presentert i figur 8.
EKSEMPEL 8
In vitro- cvtotoksisitetsstudier
Disse studiene ble utført ved anvendelse av en sulforrhodamin B-analyse (se Monks et al., J. Nati. Cancer Inst. (U.S.), 83: 737 (1987)). Forbindelsene ble løst opp i etanol. Resultatene fra disse studiene, presentert i de følgende tabeller, er uttrykt som GI5Q-verdier, dvs. konsentrasjon av et medikament (mikromolar) nødvendig for å inhibere veksten til 50% av cellene.
EKSEMPEL 9
In vivo- toksisitetsstudier
Disse studiene ble utført ved intravenøs injeksjon av n-heksyl-sfingosin ved de angitte doser (se nedenfor) inn i mus. Resultatene er presentert nedenfor.
EKSEMPEL 10
In vivo- studier
Disse studiene ble utført ved anvendelse av P-388/adriamycin-resistente leukemiceller. Mus ble injisert i.p. med 100.000 celler og deretter behandlet på dager 1, 3 og 5 etter injeksjon med n-heksyl-sfingosin. Resultatene er presentert i figur 14.
EKSEMPEL 11
Syntese av forbindelser
Syntese av silyeter av ceramid: Blandingen av ceramid og t-butyldimetylsilylklorid (1 ekvivalent) og imidazol (2 ekvivalenter) i DMF ble omrørt under N2 ved romtemperatur over natten. Oppløsningsmidlet ble fjernet under en strøm av N2 og resten ble løst opp i CH2C12, vasket (H20), tørket (MgSC>4) og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset
over silikagel (AcOEt:heksan = 1:3).
Syntese av 1-ester-ceramid: Blandingen av ceramid og Ac20 (1 ekvivalent) og katalytisk mengde dimetylaminopyridin i tørr CH2CI2 ble omrørt ved romtemperatur i 1 time og reaksjonen ble undersøkt ved TLC (AcOEt). Blandingen ble konsentrert. Råproduktet ble renset over silikagel (AcOEt:heksan = 2:3,5).
Oksydasjon av C3-OH-ceramid til keton: 1-OAc-ceramid ble løst opp i aceton og av-kjølt i isbad. Jones reagens ble dråpevis sakte tilsatt helt til den oransje fargen var vedvarende. Reaksjonen ble stoppet av isopropanol og NaHC03 ble tilsatt og omrørt i 5 minutter. Oppløsningen ble filtrert og konsentrert til tørrhet. Råproduktet ble renset ved preparativ TLC (AcOEt:heksan = 1:2,5).
Reduksjon av ceramid til sfingosianaloger: Til en iskald omrørt oppløsning av ceramid i vannfri THF ble det tilsatt LiAlH4 og blandingen ble omrørt ved romtemperatur under N2 i 24 timer. Under isavkjøling ble reaksjonsblandingen stoppet ved tilsetning av mettet, vandig NaHC03- Den resulterende oppslemmingen ble filtrert og vasket med THF. Oppløsningen ble konsentrert og resten ble brakt til CH2Cl2, vasket med H2O, tørket (MgS04) og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset over preparativ TLC (silikagel) CH2Cl2:MeOH:TEA = 8:1:0,08.
Syntese av 4,5-diol-ceramid: Til en oppløsning av ceramid i en blanding av Me2CO, destillert H2O og t-BuOH ble N-metylmorfolin-N-oksyd (NMO, 1,2 ekvivalenter) og OSO4 (katalytisk mengde) i THF tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 45°C i 6 timer og ble stoppet av fast NaHC03 og blandingen ble omrørt i 15 minutter. Suspensjonen ble filtrert og filtratet ble løst opp i THF. Oppløsningen ble vasket med saltvann. Den organiske oppløsningen ble separert, tørket og konsentrert til tørrhet. Resten ble renset over preparativ TLC (THF).

Claims (17)

1. Forbindelse, karakterisert ved at den har formelen R l-Yl-CHZ^-CH(NY2y3)-CH2-Z<2>; hvor: Ri er en rettkjedet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe som har fra 8 til 19 karbonatomer i den alifatiske kjeden; Y<1> er -CH=CH-, -CsC- eller -CH(OH)CH(OH)-; Z<*> er OH eller en fosforylkolin-tilfestingsinhiberende gruppe med formelen -X<*>, -OX<*>, -X<2>X3 eller -0-X2X<3>; Z<2> er en fosforylkolin-tilfestingsinhiberende gruppe som har formelen -X<*>, -OX<l>, _ X<2>X<3> eller -0-X2X<3>;Xl er C(OH)H, C02H, CH3, C(CH3)3, Si(CH3)3, SiCH3(C(C<H>3)3)2, Si(C(CH3)3)3, Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et fluor, et klor, eller en gruppe som har formelen C(R<3>R<4>)OH; og hver R<3> og R<4> er uavhengig en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner; X<2> er valgt fra gruppen bestående av CH2-, C(CH3)2-, Si(P04)2-, Si(CH3)2-, SiCH3P04-, C(0)- og S(0)2-; X<3> er valgt fra gruppen betående av -C(0)H, -C02H, -CH3, -C(CH3)3, -Si(CH3)3, - SiCH3(C(CH3)3)2, -Si(C(CH3)3)3, -Si(P04)2C(CH3)3, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en aminodel, et klor, et fluor, eller en gruppe som har formelen C(R<3>R<4>)OH, hvor hver av R3 og R<4> er uavhengig en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner, en fenylgruppe eller en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden; Y<2> er H, en fenylgruppe, en alkylsubstituert fenylgruppe som har fra 1 til 6 karboner i alkylkjeden, eller en alkylkjede som har fra 1 til 6 karboner; Y<3> er H eller en gruppe som har formelen -C(0)R<2> eller -S(0)2R<2>; R<2> er en rettkjedet alkyl-, alkenyl- eller alkynylgruppe som har fra 1 til 23 karbonatomer i kjeden: og når Z<2> er en amino, er R<2> en alifatisk kjede som har fra 1 til 9 eller fra 19 til 23 karbonatomer i den alifatiske kjeden.
2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R<1> er en alkylgruppe med formelen CH3(CH2)i2-, Y<1> er -CH=CH-, Y<2> er H, Y<3> er -C(0)R<2> og R<2> er en alkylkjede.
3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Z<1> er OH og Z<2> er en gruppe med formelen -X<2>X<3> eller -0-X<2>X<3>.
4. Forbindelse ifølge krav 3, karakterisert ved at Z2 er -OSi(CH3)2C(CH3)3.
5. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at Z1 er OH og Z2 er en gruppe med formelen -X<*> eller-OX<l>.
6. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den har formelen CH3(CH2)i2-CH=CH-CH2Z<1->CH(NHY<3>)-CH2-Z<2.>
7. Forbindelse ifølge krav 6, karakterisert ved at Y<3> er en gruppe med formelen -C(0)R<2>.
8. Forbindelse ifølge krav 7, karakterisert ved at Y<3>er-C(0)(CH2)4CH3.
9. Anvendelse av forbindelsen ifølge krav 1 for fremstilling av et medikament for behandling av et dyr som er påvirket av cancer.
10. Liposom som har et bilag, karakterisert ved at det omfatter et lipid som inneholder en forbindelse som angitt i krav 1.
11. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at Y<3> blir valgt fra gruppen bestående av -(CH2)3CH3, -(CH2)5CH3, -(CH2)7CH3, og (CH2)9CH3 eller C(0)(CH2)4CH3.
12. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at at minst én av Z' og Z2 er valgt fra gruppen av deler bestående av -OC(0)CH3, -OC(0)CH2CH2CH3, - OC(0)CH(CH3)CH3 eller -OSi(CH3)2<C>(CH3)3.
13. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at forbindelsen omfatter minst omtrent 10 mol-% lipid.
14. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at det omfatter et ytterligere bioaktivt middel.
15. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at bilaget videre omfatter vitamin D3-
16. Liposom ifølge krav 10, karakterisert ved at lipidet videre omfatter et hodegruppe-modifisert lipid.
17. Anvendelse av liposomet ifølge krav 10 for fremstilling av et medikament for behandling av et dyr påvirket av cancer.
NO19963224A 1994-02-02 1996-08-01 Farmasöytisk aktive forbindelser og liposomer og anvendelse derav NO314405B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US19029594A 1994-02-02 1994-02-02
PCT/US1995/001490 WO1995021175A1 (en) 1994-02-02 1995-02-02 Pharmaceutically active compounds and liposomes, and methods of use therof

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO963224D0 NO963224D0 (no) 1996-08-01
NO963224L NO963224L (no) 1996-09-27
NO314405B1 true NO314405B1 (no) 2003-03-17

Family

ID=22700754

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO19963224A NO314405B1 (no) 1994-02-02 1996-08-01 Farmasöytisk aktive forbindelser og liposomer og anvendelse derav

Country Status (14)

Country Link
US (3) US5631394A (no)
EP (2) EP1008342A3 (no)
JP (1) JPH09508900A (no)
AT (1) ATE195944T1 (no)
AU (1) AU691886B2 (no)
CA (1) CA2182485A1 (no)
DE (1) DE69518627T2 (no)
DK (1) DK0742789T3 (no)
ES (1) ES2149350T3 (no)
FI (1) FI116620B (no)
GR (1) GR3034521T3 (no)
NO (1) NO314405B1 (no)
PT (1) PT742789E (no)
WO (1) WO1995021175A1 (no)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6255336B1 (en) 1995-09-20 2001-07-03 The Regents Of The University Of Michigan Amino ceramide-like compounds and therapeutic methods of use
WO1997010817A1 (en) * 1995-09-20 1997-03-27 The Regents Of The University Of Michigan Amino ceramide-like compounds and therapeutic methods of use
US5834016A (en) * 1996-04-04 1998-11-10 Cilag Ag Liposome-based topical vitamin D formulation
US6274309B1 (en) * 1996-07-26 2001-08-14 Richard Kolesnick Method for the modulation of acid-sphingomyelinase-related apoptosis
CN1055640C (zh) * 1996-11-29 2000-08-23 沃维汉 人降钙素基因相关肽脂质体组合物及其制法
US6982142B2 (en) * 1997-12-01 2006-01-03 John Wayne Cancer Institute Methods for screening therapeutically effective agents
US7683044B2 (en) * 1999-03-25 2010-03-23 Center For Molecular Medicine And Immunology Sphingomyelin therapy of autoimmune disease
US6541462B1 (en) 1999-03-25 2003-04-01 Center For Molecular Medicine And Immunology Sphingomyelin enhancement of tumor therapy
US7820718B1 (en) * 1999-04-07 2010-10-26 Roger Williams Hospital Combinations of ceramide and chemotherapeutic agents for inducing cell death and uses thereof in treating cancer
TW502133B (en) 1999-06-10 2002-09-11 Wako Pure Chem Ind Ltd Resist composition, agent and method for reducing substrate dependence thereof
US6682545B1 (en) * 1999-10-06 2004-01-27 The Penn State Research Foundation System and device for preventing restenosis in body vessels
AU1548101A (en) * 1999-11-24 2001-06-04 Sagami Chemical Research Center Sphingosine derivatives
US6410597B1 (en) * 2000-02-25 2002-06-25 Virginia Commonwealth University Hydroxyalkyl amide analogs of ceramide
CA2432978C (en) * 2000-12-22 2012-08-28 Medlyte, Inc. Compositions and methods for the treatment and prevention of cardiovascular diseases and disorders, and for identifying agents therapeutic therefor
ATE554082T1 (de) * 2001-07-16 2012-05-15 Genzyme Corp N-acetylsphingosin glukosyltransferase inhibitor
EP1287815A1 (en) * 2001-08-31 2003-03-05 Cosmoferm B.V. Use of a sphingoid base for inhibiting ceramidase activity
US20060217560A1 (en) * 2002-04-29 2006-09-28 Shayman James A Amino ceramide-like compounds and therapeutic methods of use
US6916802B2 (en) * 2002-04-29 2005-07-12 Genzyme Corporation Amino ceramide-like compounds and therapeutic methods of use
US20070031480A1 (en) * 2003-03-07 2007-02-08 Lawrence Mayer Enhanced delivery of sphingolipids
EP1610763A2 (en) * 2003-03-31 2006-01-04 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Stable liposomes or micelles comprising a sphingolipid and a peg-lipopolymer
CN1812766A (zh) * 2003-04-25 2006-08-02 宾州研究基金会 用于全身传递使生长停滞的、衍生于脂质的生物活性化合物的方法和系统
US8242089B2 (en) 2003-06-18 2012-08-14 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Sphingolipids polyalkylamine conjugates for use in transfection
US7906122B2 (en) 2003-06-18 2011-03-15 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jersusalem Sphingoid polyalkylamine conjugates for Hepatitis B virus vaccination
US7794713B2 (en) 2004-04-07 2010-09-14 Lpath, Inc. Compositions and methods for the treatment and prevention of hyperproliferative diseases
US8003617B2 (en) * 2004-11-10 2011-08-23 Genzyme Corporation Methods of treating diabetes mellitus
EP1817004A2 (en) * 2004-11-15 2007-08-15 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Combination therapy associating preferably a ceramide with a cytotoxic drug
JP4791082B2 (ja) * 2005-05-30 2011-10-12 株式会社クラレ リポソームおよびそれを含む皮膚外用剤
WO2007044748A2 (en) * 2005-10-11 2007-04-19 University Of Pittsburgh Sphingomyelin liposomes for the treatment of hyperactive bladder disorders
PT2032134E (pt) 2006-05-09 2015-10-07 Genzyme Corp Métodos de tratamento da doença do fígado gorduroso
US8796429B2 (en) 2006-05-31 2014-08-05 Lpath, Inc. Bioactive lipid derivatives, and methods of making and using same
US7862812B2 (en) 2006-05-31 2011-01-04 Lpath, Inc. Methods for decreasing immune response and treating immune conditions
US9274130B2 (en) 2006-05-31 2016-03-01 Lpath, Inc. Prevention and treatment of pain using antibodies to lysophosphatidic acid
US9274129B2 (en) 2006-05-31 2016-03-01 Lpath, Inc. Methods and reagents for detecting bioactive lipids
US9217749B2 (en) 2006-05-31 2015-12-22 Lpath, Inc. Immune-derived moieties reactive against lysophosphatidic acid
JP5732182B2 (ja) 2006-10-27 2015-06-10 エルパス・インコーポレイテッドＬｐａｔｈ， Ｉｎｃ． 眼疾患と症状を処置するための組成物および方法
PT2087002E (pt) 2006-10-27 2014-11-26 Lpath Inc Composições e métodos para a ligação de esfingosina-1- fosfato
EP2594565B1 (en) 2007-05-31 2018-10-24 Genzyme Corporation 2-acylaminopropanol-type glucosylceramide synthase inhibitors
BRPI0823522A2 (pt) 2007-10-05 2014-01-07 Genzyme Corp Uso de um composto derivado de ceramida
WO2009132082A2 (en) * 2008-04-22 2009-10-29 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Immunogenic compositions containing ceramide and methods of use thereof
WO2010014554A1 (en) 2008-07-28 2010-02-04 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibition for the treatment of collapsing glomerulopathy and other glomerular disease
WO2010039256A1 (en) * 2008-10-03 2010-04-08 Genzyme Corporation 2-acylaminopropoanol-type glucosylceramide synthase inhibitors
SI3133070T1 (sl) 2009-11-27 2019-11-29 Genzyme Corp Eliglustat (GENZ 112638) kot inhibitor sintaze glukozilceramida za uporabo v postopku zdravljenja Fabrjyeve ali Gaucherjeve bolezni, kjer postopek obsega prilagajanje individualnega terapevtskega odmerka metabolizmu P-450 pacienta
JP6120222B2 (ja) * 2011-08-15 2017-04-26 国立大学法人 千葉大学 セラミド誘導体およびこれを用いたゴルジ体標識化蛍光プローブ
KR102423002B1 (ko) * 2021-02-17 2022-07-21 주식회사 엘씨에스바이오텍 신규 세라마이드, 그의 제조방법 및 그의 용도

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522803A (en) * 1983-02-04 1985-06-11 The Liposome Company, Inc. Stable plurilamellar vesicles, their preparation and use
US5169637A (en) * 1983-03-24 1992-12-08 The Liposome Company, Inc. Stable plurilamellar vesicles
US4588578A (en) * 1983-08-08 1986-05-13 The Liposome Company, Inc. Lipid vesicles prepared in a monophase
US5030453A (en) * 1983-03-24 1991-07-09 The Liposome Company, Inc. Stable plurilamellar vesicles
US4721612A (en) * 1984-04-12 1988-01-26 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes
US5008050A (en) * 1984-06-20 1991-04-16 The Liposome Company, Inc. Extrusion technique for producing unilamellar vesicles
US5077056A (en) * 1984-08-08 1991-12-31 The Liposome Company, Inc. Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
US4975282A (en) * 1985-06-26 1990-12-04 The Liposome Company, Inc. Multilamellar liposomes having improved trapping efficiencies
US5059421A (en) * 1985-07-26 1991-10-22 The Liposome Company, Inc. Preparation of targeted liposome systems of a defined size distribution
JP2588729B2 (ja) * 1987-10-05 1997-03-12 塩野義製薬株式会社 スフィンゴシン誘導体
FR2637598B1 (fr) * 1988-10-06 1991-10-11 Agronomique Inst Nat Rech Nouveaux sphingophospholipides a inositol, leur obtention, et leur application comme inducteurs de resistance a diverses maladies cryptogamiques chez les vegetaux
US5100662A (en) * 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
DE4021082C2 (de) * 1990-07-03 1995-08-17 Hans Dr Lautenschlaeger Hautbehandlungsmittel mit hohen Lipidgehalten unter Verwendung eines Bilayer enthaltenden Systems, Salzen organischer Säuren, Alkohol und Stabilisator
HUT65932A (en) * 1990-08-13 1994-07-28 Univ Duke Methods for inducing cell differentiation using ceramides
GB9022921D0 (en) * 1990-10-22 1990-12-05 Unilever Plc Cosmetic composition
GB9100816D0 (en) * 1991-01-15 1991-02-27 Unilever Plc Cosmetic composition
DE4201461A1 (de) * 1992-01-21 1993-07-22 Mueller Schulte Detlef Dr Mittel fuer die selektive tumortherapie auf der basis ferromagnetischer partikel - verfahren zu ihrer herstellung und verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
CA2182485A1 (en) 1995-08-10
EP1008342A3 (en) 2004-12-29
US5631394A (en) 1997-05-20
DK0742789T3 (da) 2000-11-13
JPH09508900A (ja) 1997-09-09
FI963045A (fi) 1996-08-01
NO963224D0 (no) 1996-08-01
ATE195944T1 (de) 2000-09-15
GR3034521T3 (en) 2000-12-29
WO1995021175A1 (en) 1995-08-10
EP1008342A2 (en) 2000-06-14
NO963224L (no) 1996-09-27
US5681589A (en) 1997-10-28
EP0742789A1 (en) 1996-11-20
FI963045A0 (fi) 1996-08-01
EP0742789B1 (en) 2000-08-30
DE69518627T2 (de) 2001-01-11
FI116620B (fi) 2006-01-13
PT742789E (pt) 2000-12-29
AU1871295A (en) 1995-08-21
AU691886B2 (en) 1998-05-28
ES2149350T3 (es) 2000-11-01
US5677337A (en) 1997-10-14
DE69518627D1 (de) 2000-10-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO314405B1 (no) Farmasöytisk aktive forbindelser og liposomer og anvendelse derav
US4797285A (en) Lipsome/anthraquinone drug composition and method
JP3074733B2 (ja) 脂肪乳剤
US5762958A (en) Multilipid component ether lipid liposomes
US5043166A (en) Liposome/anthraquinone drug composition and method
WO1994026254A1 (en) Incorporation of taxol into liposomes and gels
US20090041835A1 (en) Method of inhibiting leakage of drug encapsulated in liposomes
KR19980701289A (ko) 소수성 탁산 유도체(hydrophobic taxane derivatives)
EP1426044B1 (en) Use of esters of L-carnitine or alkanoyl L-carnitines as cationic lipids for the intracellular delivery of pharmacologically active compounds
EP1254143B1 (en) Lipid-based drug delivery systems
US5304380A (en) Glucosamine derivative and liposome containing the same as membrane constituent
CA2132347C (en) Liposomes with a negative excess charge
US7449197B2 (en) Liposome formulation of 6,9-bis[(2-aminoethyl)-amino]benzo[g]isoquinoline-5, 10-dione dimaleate
US6017557A (en) Carriers containing an etherlipid/complementarily shape lipid combination and therapeutic uses thereof
US6667053B1 (en) D and L etherlipid stereoisomers and liposomes
US20200405857A1 (en) Radiation-triggered liposomes
WO2000009071A2 (en) A novel liposomal formulation useful in treatment of cancer and other proliferation diseases
Kopjoni et al. Liposome/doxorubicin composition and method