JPH09506906A

JPH09506906A - 純粋な形態又は植物抽出物としてのマンジフェリン又はその誘導体を活性成分として含有する化粧用又は医薬用組成物

Info

Publication number: JPH09506906A
Application number: JP8518327A
Authority: JP
Inventors: ルイヤール，フランソワ; ジョセ，アナベル; ロバン，ジャン−ルノー
Original assignee: ラボラトワール・ドウ・ビオロジー・ヴェジェタル・イヴ・ロシェ
Priority date: 1994-11-25
Filing date: 1995-11-23
Publication date: 1997-07-08
Anticipated expiration: 2015-11-23
Also published as: NO963053L; PL315636A1; NO963053D0; US5824320A; DE69523169D1; CA2180745A1; JP2858961B2; ATE206611T1; EP0793476B1; WO1996016632A1; DE69523169T2; AU4264396A; EP0793476A1; MX9602837A

Abstract

(57)【要約】一般式（Ｉ）（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇及びＲ₈は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択される）で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩を活性成分として含む、化粧用又は医薬用組成物。

Description

【発明の詳細な説明】純粋な形態又は植物抽出物としてのマンジフェリン又はその誘導体を活性成分として含有する化粧用又は医薬用組成物本発明は、天然由来であるか、又は化学的、酵素的若しくは生物工学的な合成により得られたマンジフェリン(mangiferine)又はその誘導体を活性成分として含有する、化粧用又は医薬用組成物、及びマンジフェリン含有植物抽出物、特にアフロイア(Aphloia)又はマンジフェラ(Mangifera)の葉の抽出物を活性成分として含有する組成物に関する。これらの組成物は、特に紫外線照射及び皮膚の老化に対して皮膚を保護するため、及び皮膚組織の質を増強するために使用することができる。マンジフェリンは、１，３，６，７−テトラヒドロキシキサントンのＣ−グルコシドである。これはアフロイオール（aphloiol）（Billetら，1965）とも呼ばれる。この分子及びその誘導体（メチル化、Ｏ−グルコシル又はイソマンジフェリン誘導体）は、多くの植物中に天然に存在するが、最も広く分布し(Hostettma nn，1977)、特に被子植物中に多いＣ−グルコシドキサントンはマンジフェリンである。これは、下記式：（式中、Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｒ₆＝Ｒ₇＝ＯＨであり、そしてＲ₄＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである）で示される化学構造を有する。下記式：（式中、Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｒ₆＝Ｒ₇＝ＯＨであり、そしてＲ₂＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである）で示される構造を有するイソマンジフェリンも天然に存在する。天然由来のこの誘導体は、Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₆又はＲ₇位に−Ｏ−メチル(−ＯＣＨ₃ )又はグルコシル(−Ｃ₆Ｈ₁₁Ｏ₆)基を有してよい。マンジフェリン及びその誘導体を含む全ての化合物は、下記一般式（Ｉ）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₇は−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択される）で示される。式（Ｉ）の化合物は、下記の種々の方法により得ることができる：１）植物材料からの抽出。マンジフェリンとその誘導体は、特に下記の表に示される種を含む種々の植物に天然に存在する：アフロイアとマンジフェラ種は葉にマンジフェリンが多く含まれる植物である。 −アフロイアは、完全に無毛で、高さ３〜４ｍの、マダガスカルの東海岸やその近くの島（レユニオン、モーリシャス、セーシェル、コモロ）原産の低木である。互生葉は、単葉、披針形で、基部を除いて葉縁に沿って多かれ少なかれ歯牙状突起があり、托葉ではない。小さい花の集散花序の形の単生の両性花は、花弁がない。これらは４〜６個の重なり合った萼片を有し；最も内側の萼片は花弁状である。果実は成熟すると白色の漿果である。この植物の葉は、利尿性、血管強壮性（veinotonic）及び瘢痕形成性（この性質により、民間療法における浸剤として使用されている）が知られている。 −マンジフェラ、及び特にマンゴー(Mangifera indica)は、ウルシ科(Anacard iaceae)に属する。マンジフェラ属は、以下の共通の特徴により特徴付けられる：互生葉で、有柄で、全体／革質の葉を有する、円錐花序の形の頂生花序を有する樹木である。その果実は核果である。この属は、６２の樹木様の種を含み、その内１６種は実をつける。マンゴー(Mangifera indica L.)種は特に、多少枝を張る習性を有する高さ９〜３０ｍの直立性の樹木であり、常緑樹である。この種は現在約１，０００種の変種を含む。実をつけるマンジフェラ種は非常に広く分布している。マンゴー（ Mangifera indica）は、特にアジア、中米と南米及び熱帯アフリカで見られる。伝統的には、マンジフェラの果実は現地の人々により消費され、彼らは種々の用途にその木の他の部分も使っている：特にマンゴー（Mangifera indica）は人々を治療するために普通に使用される（白帯下、出血及び赤痢を治療するための樹皮の浸剤）。葉は、失声症及び糖尿病のための煎剤として使用される。葉の灰も火傷に使用される。式（Ｉ）の化合物は、例えば、任意の抽出及び精製方法（例えば、水、アルカノール、又はこれらの溶媒の混合物のような極性溶媒による抽出、次に結晶化又は当業者に公知の任意の他の方法による精製）により、これらの植物類の全部又は一部の抽出物を精製することにより得られる。これらの方法の幾つかは、例えばFR-A-2,486,941号で公布された特許に記載されている。２）化学的又は酵素的方法により（特に以下の２つの文献に記載される方法： Bhatia-V-Kら，Tetrahedron lett．(14)，1741-2頁及びNott-P-E,Phytochemistr y，6(11); 1597-9頁）。３）任意の生物工学的方法により：固体支持体上又は醗酵槽内のカルスとして、あるいはプロトプラストの形でマンジフェラ細胞の培養を考えることは可能である。しかし、マンジフェリン又はその誘導体の前駆体を微生物（例えば、酵母、細菌など）により生物学的変換し、そしてこれらの微生物からの抽出による、又は培地中への排泄によるその産生を考えることも可能である。マンジフェリン（又はその誘導体）は、単独又は混合物として種々のレベルの純度で使用することができる。乾燥精製マンジフェリンは、黄色の三稜形針状結晶の形で存在する。これは無味無臭である。これは冷水には極めて溶けにくく、アルカリ性液に可溶性である。その可溶化は、フェノール性「ＯＨ」基による塩の形成に起因し、マンジフェリン（又はその誘導体）は遊離形又は塩の形態で使用することができる。発明者らは、純粋な形態又は植物抽出物の形態でマンジフェリン（及びその誘導体）の生物学的性質を検討した。特に、マンジフェリンが葉に多く含まれるアフロイア又はマンジフェラ抽出物の活性を検討した。発明者らは、純粋な形態、又は植物抽出物、特にアフロイア葉又はマンジフェラ葉に含まれるマンジフェリン及びその誘導体が、非常に著しい抗紫外線（ＵＶ）、抗コラゲナーゼ及び抗エラスターゼ活性を有することを発見した。式（Ｉ）のこれらの化合物はまた、抗フリーラジカル及び抗チロシナーゼ作用も有する。したがってこれらは、紫外線に対する表皮の保護、皮膚組織の質の増強、及び生物学的及び／又は化学線による皮膚の老化に拮抗する助けを提供することを目的とした化粧用又は医薬用組成物に特に有用である。したがって本発明の主題は、下記一般式（Ｉ）：式（Ｉ）（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇及びＲ₈は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択される）で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩の１つを活性成分として含む、化粧用又は医薬用組成物である。有利な一態様として、本発明の組成物は、式（Ｉ）の化合物であって、式中、Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₆及びＲ₇は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択され；そしてＲ₂＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝ＨでＲ₄がグルコシル基であるか、又はＲ₂がグルコシル基でＲ₄＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである化合物を活性成分として含む。更に好適には、Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｒ₆＝Ｒ₇＝ＯＨであり；そしてＲ₂がグルコシル基で、Ｒ₄＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである。１つの有利な実施態様として、本発明の組成物は、植物抽出物から得られた式（Ｉ）の化合物を含む。好適にはこれらの組成物は、選択した化合物により、０．０１〜５０重量％、更に好適には０．０１〜１０重量％の範囲の割合で乾燥状態のこの化合物を含む。本発明の主題はまた、アフロイア葉又はマンジフェラ葉の抽出物、特に極性溶媒による抽出により得られた抽出物を活性成分として含む、化粧用又は医薬用組成物である。アフロイア又はマンジフェラ抽出物を含む本組成物は、一般に組成物の全重量に対して０．１〜２０重量％の乾燥抽出物を含む。しかし抽出物の割合は、液体抽出物の場合には５０％までの範囲であってよい。本発明の組成物は、皮膚、唇又は毛髪に対して光防御効果を有する。これらは一般に皮膚組織の質を増強するか、又は皮膚の老化に拮抗することが意図される。本発明の組成物は、好適には単純な油／水又は水／油エマルション、複エマルションあるいはマイクロエマルション、水性又は水性−アルコール性ゲル、油剤、水性又は水性−アルコール性ローション、クリーム、スティック、シャンプー又はコンディショナーの形態で提供される。本発明の主題はまた、これらの化粧用組成物の任意の１つを皮膚、毛髪又は唇に適用することよりなる美容的処置方法である。更にこの主題は、光防御、抗コラゲナーゼ及び抗エラスターゼ、抗フリーラジカル及び抗チロシナーゼ作用を有する薬剤又は化粧用組成物の製造のための、式（Ｉ）の化合物（マンジフェリン又はその誘導体）又はアフロイア葉若しくはマンジフェラ葉の抽出物の用途である。アフロイア及びマンジフェラ抽出物の性質は精製マンジフェリンの性質同様、以下に記載される。これらの性質は図１〜７ｂに説明される。 −図１ａは、波長の関数として表したアフロイア抽出物のＵＶ吸収スペクトルを示し； −図１ｂは、波長の関数として表したマンジフェラ抽出物のＵＶ吸収スペクトルを示し； −図１ｃは、波長の関数として表したマンジフェリンのＵＶ吸収スペクトルを示し； −図２ａは、市販の日焼け止め剤であるパラソルＭＣＸ（Parsol MCX）と比較した、アフロイア抽出物の光安定性を照射時間の関数として表し； −図２ｂは、市販の２つの合成日焼け止め剤と比較した、マンジフェラ抽出物の光安定性を時間の関数として表し（マンジフェラ抽出物、ユニブルＴ１５０(U nivul T150)、ベンゾフェノン３）； −図２ｃは、市販の日焼け止め剤であるパラソルＭＣＸ（Parsol MCX）と比較した、マンジフェリンの光安定性を時間の関数として表し； −図３ａは、時間の関数として表した、アフロイア抽出物と阻害剤を含まない対照物の抗フリーラジカル作用曲線を示し； −図３ｂは、時間の関数として表した、マンジフェラ抽出物（０．２５％乾燥抽出物）と阻害剤を含まない対照物の抗フリーラジカル作用曲線を示し； −図３ｃは、時間の関数として表した、マンジフェリン（０．０５％）と阻害剤を含まない対照物の抗フリーラジカル作用曲線を示し； −図４ａは、アフロイア抽出物（０．２０％、１／５希釈）と阻害剤を含まない対照物の抗エラスターゼ活性曲線を表し； −図４ｂは、分光光度計を使用した酵素反応速度論により測定（時間に対する吸光度の比率の測定）した、マンジフェラ抽出物（０．２５％、１／４希釈）の抗エラスターゼ活性曲線を表し； −図４ｃは、マンジフェリン（０．０１％）の抗エラスターゼ活性曲線を表し； −図５ａは、アフロイア抽出物の抗ヒアルロニダーゼ活性を表し； −図５ｂは、マンジフェラ抽出物（０．２５％）の抗ヒアルロニダーゼ活性を表し； −図６は、アフロイア抽出物の抗チロシナーゼ活性を表し； −図７ａは、３２０nmでの吸光度測定により決定した、マンジフェラ抽出物（０．２５％）の抗コラゲナーゼ活性曲線を表し； −図７ｂは、マンジフェリン（０．０４２％）の抗コラゲナーゼ活性曲線を表す。Ｉ−アフロイア抽出物アフロイア抽出物は任意のアフロイア亜種、例えばAphloia theaformis（Vahl ）Benn、及びAphloia madagascariensis Clos から得られる。本発明のアフロイア葉の抽出物中に現在同定されている主要成分は、以下のものである：・Ｃ−グルコシルテトラヒドロキシキサンタン（アフロイオール）・フラボノイド類・タンニン類・３種のトリテルペングルコシド（トルメンチン酸（tormentic acid）及び２３ −ヒドロキシトルメンチン酸のグルコシドエステル及び６−β−ヒドロキシトルメンチン酸のグルコシドエステル）。これはアルカロイドを含まない物質である。アフロイア抽出物は、新鮮な又は乾燥アフロイア葉を極性溶媒、特に水、アルカノール（例えば、エタノール、メタノール）、プロピレングリコール、ブチレングリコール又はこれらの溶媒の混合物により抽出することにより得ることができる。例えば、アルカノール／水混合物又はプロピレングリコール／水混合物を使用することが可能である。使用される溶媒の重量は、好適には、乾燥重量で表した葉の重量の２〜２０倍である。抽出は、有利には、撹拌しながら、１０℃と溶媒の沸点の間の温度で行われる。抽出時間は、好適には１５分〜５時間である。抽出液は場合により濃縮し、得られた濃縮物は、場合により当業者に公知の方法（真空乾燥器、マイクロ波乾燥器など）により乾燥させる。アフロイア抽出物の実施例検討した抽出物は、下記の方法で得た：粗く砕いたマダガスカル産のAphloia theaformisの乾燥葉６％(w/w)を、撹拌しながら５５℃で、プロピレングリコール／水混合物（４０／６０）に接触させた。１時間３０分間抽出を行った。布(５５μm)で濾過することにより植物を分離した。次に抽出液をプレートフィルター(５μm)で濾過した。抽出液のｐＨは約５．５であり、その乾燥抽出物量は０．８と１．３％の間であった。光防御効果上記アフロイア抽出物は、図１ａに表されるように、ＵＶＢ線に対応する３２０nm周辺で最大になり、ＵＶＡ線の領域に対応する３６０nm周辺でもう１つのピークを有する、太陽紅斑を防御するための適用に非常に有用なＵＶ吸収スペクトルを示した。更に光毒性(phototoxicity)のないことを立証した。この抽出物の安全性を考慮に入れて、既に市販されている合成日焼け止め剤（例えば、オクチルメトキシケイ皮酸エステル（パラソルＭＣＸ（PARSOL MCX）、ジボーダン社（Givaudan）、バーゼル、スイス）と比較した、照射に対する抽出物の抵抗性、即ちその光安定性を立証した。日焼け止めは、その定義によれば、高エネルギーの紫外線を吸収する分子である。このように励起されると、高波長線を放射すること、又は分子内変換を受けることにより、そのエネルギーを失うことが可能である。これらの再調整(rearrangement)は、その物理化学的性質、特に考慮されるスペクトル領域内の光を吸収する能力を改変する。したがってこの抽出物を、スペクトルが太陽光のスペクトルと同様で、調節可能なエネルギーレベルを有する、キセノンランプによる連続照射に付した。吸収スペクトルの変動を経時的にモニターし、半減期を測定した（固定波長で吸収の５０％消失に必要な照射時間）。図２ａに表されるように、アフロイア抽出物は同じ条件下でパラソルＭＣＸと比べると、非常に類似した半減期を有し、照射に対して同等に抵抗性であることが判った。最後に、インビトロ・インターナショナル（IN VITRO INTERNATIONAL）（アーヴィン、カリフォルニア州、米国）から市販されている、インビトロ（試験管内）で太陽光防御因子(sun protection factor)を評価する方法である、ソラテックス(SOLATEX)法により、その防御値であるＳＰＦを評価するために、上述の方法で調製したアフロイア抽出物を化粧用組成物の形で試験した。１０重量％の上記抽出物を含有する化粧下地（bace）を、１０重量％の純粋なプロピレングリコールを含有する同じ下地と比較した。ソラテックス法を適用後、下記の結果を得た：下地＋プロピレングリコール→ＳＰＦ＝１下地＋本発明の抽出物→ＳＰＦ＝４．５したがって本発明の抽出物は、紫外線照射に対して皮膚を保護するのに有効であることが判った；この抽出物は単独、又はこれらの効力を高める合成化学日焼け止め剤若しくは無機日焼け止め剤との組合せで使用することができる。更に、下記インビトロ活性試験により、分子レベルでの皮膚の保護における本発明により得られた抽出物の有益性を示した。抗フリーラジカル活性（V．Ponti，M.U．Dianzani，K．Cheeseman 及びT.F．Sla ter，Cehm-Biol interaction，23(1978)281-291により測定）スーパーオキシド陰イオンは、ＮＡＤＨ（還元型のニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）とＰＭＳ（フェナジンメトスルフェート）との反応により生成する。このスーパーオキシド陰イオンは、ＮＢＴ（ニトロブルーテトラゾリウム）を還元して青紫色のジホルマザンを形成させる。分光光度計を使用して、還元されたＮＢＴの出現を経時的にモニターした。結果を図３ａに示した。抽出物の抗フリーラジカル活性は、５０％阻害のルチン当量として表される。アフロイア抽出物（１％乾燥抽出物）は、使用した抽出溶媒の極性に依存して、ルチン対照（０．１％）よりも６〜１２倍高い活性を示した。スーパーオキシドラジカルに対する防護に関して考えられる抽出物の効果は、かなり大きかった。老化過程におけるフリーラジカルの活発な役割を考慮に入れると、アフロイア抽出物は、表皮の分子構造の改変に起因する老化に対して皮膚を保護するのに有益な潜在的活性を有する。更に、アフロイア抽出物は、蛋白（エラスチンとコラーゲン）の構造に対して保護活性を有する。抗エラスターゼ活性の測定（J．Bieth，B．Spices 及びCamille G.Wermecth，Bi ochemical medicine 11，350-357，1974 の変法により測定）膵臓エラスターゼを、この酵素に特異的な親水性基質であり、発色性生成物であるｐ−ニトロアニリド（ｐＮａ）を遊離する特徴を有する、ＭｅＯＳｕｃ− Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ｐＮａと反応させた。分光光度計を使用して、この酵素反応速度をモニターした。結果は図４ａに示した。抗エラスターゼ活性は、任意の単位(arbitrary units)で表され、５０％阻害を得るための抽出物の量の逆数に１００をかけたものにより定義される。こうして２００μｌの上記抽出物を１／５希釈したものにより、阻害剤を含有しない対照例に比べて５０％の阻害を得ることが可能であった。したがってこの活性は、（１／２００）×１００×５＝２．５任意単位である。アフロイア抽出物（１％乾燥抽出物）は１〜６任意単位の活性を有した。により測定）クロストリディウム・ヒストリクム(Clostridium histolycum)コラゲナーゼを親水性基質（ｐ−フェニルアゾ−ベンジルカルボニル−Ｌ−プロリル−Ｌ−ロイシル−グリシル−Ｌ−プロリル−Ｄ−アルギニン）と反応させた。ＬｅｕとＧｌｙの間を切断して得られる生成物は、親油性であり、３２０nmのＵＶ光を吸収する。抗コラゲナーゼ活性は、任意の単位で表され、５０％阻害を得るために必要な抽出物の量（１％乾燥抽出物）の逆数に１００をかけたものに相当する。アフロイア抽出物について、その活性は０．５〜３であった。 F．Leloior，05.12.1955 により測定）ヒアルロニダーゼとヒアルロン酸との反応中４５分後に遊離したＮ−アセチルグルコサミンを、分光光度計を使用して測定した。酸性媒体中でフラン誘導体に変換される無水糖を還元する方法を使用した；この糖はパラ−ジメチルアミノベンズアルデヒドと反応して着色複合体を形成する。この活性は１分当りに形成されるＮ−アセチルグルコサミンの量（μg）で表される。この抗ヒアルロニダーゼ活性は、５０％阻害を得るための抽出物の量として表される。結果は図５ａに示した。アフロイア抽出物の半阻害容量（half-inhibition volume）であるＩＶ₅₀は、９５〜１２０μｌであった。比較のため、認知されているヒアルロニダーゼ阻害剤であるヘパリン（Sigma １０USP/ml）は、３８０μｌのＩＶ₅₀を有する。抗チロシナーゼ活性（Hamada，T とMishima，Y，(1972)，British Journal of Dermatology，86，385 の変法により測定）この方法で、ドーパミンをpH７で緩衝化した媒体中のチロシナーゼと接触させて、ドパクロムに変換した。ドパクロムは４７５nmで吸光する着色分子である。したがって生成物の形成を４７５nmで経時的にモニターした（図６参照）。チロシナーゼ活性は生成物の形成速度により示される。速度を５０％低下させるのに充分な乾燥抽出物の濃度（ＩＣ₅₀）を測定した。測定されたＩＣ₅₀は、５×１０^-2〜０．３mg/ml のオーダーであった。これは、その抗チロシナーゼ活性が既に知られているクマコケモモ(bearberry)抽出物で得られる活性より１０〜１５倍高い活性である。このデータにより、アフロイア抽出物は非常に有益な抗チロシナーゼ活性を有すると結論することができた。その結果、既に定義されている用途に加えて、この抽出物は、皮膚の老化による褐色斑の再吸収を助けるため、そしてより一般的には皮膚を白くするために、基礎化粧品及び／又はメイクアップ化粧品及び医薬において使用することができる。アフロイア抽出物は、皮膚の分子的損傷に対するかなりの保護効果を有しており、このため、特に紫外線に対して皮膚や毛髪を保護するため、年齢に関係する皮膚の老化に対抗するため、及び一般に表皮の外見と組織の質を増強するための化粧品としての適用が考えられる。 II−マンジフェラ抽出物マンジフェラ抽出物は任意のマンジフェラ種、及び特にマンゴー(Mangifera i ndica L.)から得られる。本発明のマンジフェラ種の葉の抽出物中に現在同定されている主要成分は、以下のものである：・Ｃ−グルコシルテトラヒドロキシキサンタン・フラボノイド類・タンニン類（これはアルカロイド物質を含まない）。マンジフェラ抽出物は、新鮮な又は乾燥葉を極性溶媒又は極性溶媒の混合物（例えば、アルカノール／水又はプロピレングリコール／水）により抽出することにより、アフロイア抽出物と同じ方法で得られる。これらの抽出物は色々な程度に濃縮された液体、又は乾燥物で使用することができる。マンジフェラ抽出物の実施例検討した抽出物は、下記の方法で得た：粗く砕いたマンゴー（Mangifera indica）の乾燥葉５％(w/w)を、撹拌しながら５０℃で、エタノール／水混合物（３０／７０）に接触させた。１時間３０分間抽出を行った。布(５５μm)で濾過することにより植物を分離した。次に抽出物をセルロースフィルター(５μm)で濾過した。光防御効果上記マンジフェラ抽出物は、図１ｂに表されるように、ＵＶＢ線に対応する３２０nm周辺で最大になり、ＵＶＡ線の領域に対応する約３６０nmでもう１つのピークを有する、太陽紅斑の防御のための適用に非常に有用なＵＶ領域の吸収スペクトルを示した。更に光毒性のないことを立証した。この抽出物の安全性を考慮に入れて、各々溶解度に相応する溶媒中で、既に市販されている合成日焼け止め剤（例えば、ベンゾフェノン３（ＧＡＦ、米国）又はUVINUL T150（BASF、ドイツ）と比較して、照射に対するこの抽出物の抵抗性（その光安定性）を試験した。したがってこの抽出物に、キセノンランプにより放射される、スペクトルが太陽光のスペクトルと同様で、調節可能なエネルギーレベルを有する光線の連続照射を行った。吸収スペクトルの変動を経時的にモニターし、半減期を測定した（固定波長で吸収の５０％消失に必要な照射時間）。図２ｂに表されるように、マンジフェラ抽出物は同じ条件下でベンゾフェノン３、及びUVINUL T150 と比べると、少なくとも同等に抵抗性であり、半減期はこれら２つの合成日焼け止め剤よりも相当に長いことが判った。最後に、インビトロ・インターナショナル（IN VITRO INTERNATIONAL）（アーヴィン、カリフォルニア州、米国）から市販されている、インビトロでの太陽光防御因子(sun protection factor)を評価する方法である、ソラテックス(SOLATE X)法により、その防御値であるＳＰＦを評価するために、本発明の方法に記載されるように調製したマンジフェラ抽出物を化粧用組成物の形で試験した。５重量％の上記抽出物を化粧用下地に組み入れた（更に、１．５％パラソル１７８９、４％パラソルＭＣＸ、２％ユーソレックス５０７(Eusolex 507)及び２％微粉酸化チタンのチオベイル(Tioveil)を含有し、当初ＳＰＦ値８を与えられている）。この調製物を、５重量％の純粋なプロピレングリコールを含有する同じベースと比較した。ソラテックス法を適用後、下記の結果を得た：下地単独→ＳＰＦ＝８下地＋本発明の抽出物→ＳＰＦ＝１４したがって本発明の抽出物は、紫外線照射に対して皮膚を保護するのに有効であることが判った；この抽出物は単独、又はこれらの効力を高める合成化学日焼け止め剤若しくは無機日焼け止め剤との組合せで使用することができる。下記実施例によっても、分子レベルでの皮膚の保護に関する、本発明により得られた抽出物の有益性を説明した：インビトロの抗フリーラジカル活性（V．Ponti，M.U．Dianzani，K.Cheeseman 及びT.F．Slater，Cehm-Biol interaction，23(1978)281-291）使用した方法は、アフロイア抽出物で記載したのと同じである。結果を図３ｂに示した。この抽出物の抗フリーラジカル活性は、５０％阻害のルチン当量として表される。マンジフェラ抽出物（１％乾燥抽出物）は、使用した抽出溶媒の極性に依存して、ルチン対照（０．１％）よりも１５〜３０倍高い活性を示した。得られたデータは、スーパーオキシドラジカルに対する防護に関して考えられる抽出物の効果がかなり大きいことを示した。フリーラジカルは老化過程において重要な役割を果たすことが知られているため、本発明の抽出物は、表皮の分子構造の改変による老化に対して皮膚を保護するのに有益な潜在的活性を有する。インビトロの抗エラスターゼ活性の測定（J．Bieth，B．Spices 及びCamille G ．Wermecth，Biochemical medicine 11，350-357，1974 の変法）以下の方法は、アフロイア抽出物に関して記載した方法と同じである。マンジフェラ抽出物の量の関数として得られた傾斜曲線により、５０％阻害に対応する濃度（ＩＣ₅₀）を求めることができた。この曲線は図４ｂにプロットした。本発明のマンジフェラ抽出物は、５×１０^-2〜１mg/ml のオーダーの非常に大きなＩＣ₅₀を示した。種によっては、この範囲を越えると思われる。 Heidrich，Hoppe-Seyler's-Zeit-Physiol.-Chem．333，149-151,1963）コラゲナーゼは、親水性基質（ｐ−フェニルアゾ−ベンジルカルボニル−Ｌ− プロリル−Ｌ−ロイシル−グリシル−Ｌ−プロリル−Ｄ−アルギニン）反応させた。ＬｅｕとＧｌｙの間を切断して生じる生成物は、親油性であり、３２０nmのＵＶ光を吸収する。マンジフェラの阻害効果は、本発明により得られた抽出物を反応媒体に添加することにより測定した。図７ａに、媒体に添加したマンジフェラ抽出物の種々の容量の関数として３２０nmで得られた値の曲線を示した。こうして５０％阻害を示す濃度（ＩＣ₅₀）を決定した。マンジフェラ抽出物は、５×１０^-2〜１mg/ml のオーダーのＩＣ₅₀を示した。種によってはこの範囲を越えると思われる。インビトロの抗ヒアルロニダーゼ活性（Jose L．Reissig，Jack L.Stominger及びLuis F．Leloior，J．Biol.-Chem．217，960-966,1953）この方法はアフロイア抽出物について記載されたものと同じである。この活性は１分当りに形成されるＮ−アセチルグルコサミンの量（μg）で表される。この抗ヒアルロニダーゼ活性は、５０％阻害を得るための抽出物の量として表される。結果は図５ｂにプロットした。マンジフェラ抽出物（１％乾燥抽出物）の半阻害容量（half-inhibition volu me）であるＩＶ₅₀は、ＩＶ₅₀＝３８０μｌを有する認知されているヒアルロニダーゼ阻害剤であるヘパリン（Sigma １０USP/ml）と比べて、２００〜２５０μｌであった。抗チロシナーゼ活性（Hamada，T とMishima，Y，(1972)，British Journal of D ermatology，86，385 の変法により測定）以下の方法は、アフロイア抽出物について記載されたものと同じである。チロシナーゼ活性は４７５nmで測定される生成物の形成速度により示される。この速度を５０％減少させるのに充分な乾燥抽出物の濃度を決定した：ＩＣ₅₀ は２〜３mg/ml のオーダーであった。このデータにより、マンジフェラ抽出物は皮膚の分子的損傷に対するかなりの防御効果を有しており、このため、化粧品でのこれらの使用は、特に紫外線に対して皮膚や毛髪を保護するため、年齢に関係する皮膚の老化に対抗するため、及び一般に表皮の外見と組織の質を増強するために、明らかに有用であると結論することができた。 III−精製マンジフェリン植物抽出物からのマンジフェリン溶液の調製の実施例マンジフェリンを抽出するための１つの方法は、４０％エタノールで、マンゴー属（genus Mangifera indica）を砕いたものからキサントンのグルコシドを抽出することよりなる。抽出は、加熱（例えば５０℃）して、１０リットルの抽出剤当り１kgの植物材料の割合で行った。抽出液は一部を蒸発させて冷却した。マンジフェリンが結晶化して沈殿した。この沈殿物を回収して、精製物質が得られるまで溶媒（例えば水又はクロロホルム）の混合物で数回濯いだ。光防御効果マンジフェリン（又はその誘導体）は、図１ｃに表されるように、ＵＶＢ線に対応する３２０nm周辺で最大になり、ＵＶＡ線の領域に対応する３６０nm周辺でもう１つのピークを有する、太陽紅斑の防御のための適用に非常に有用なＵＶ領域の吸収スペクトルを示した。更に光毒性のないことを立証した。その安全性を考慮して、既に市販されている合成日焼け止め剤（例えば、オクチルメトキシケイ皮酸エステル（パラソルＭＣＸ（PARSOL MCX）、Givaudan、バーゼル、スイス）と比較して、照射に対する抽出物の抵抗性（その光安定性）を試験した。マンジフェリン溶液に、キセノンランプにより放射される、スペクトルが太陽光のスペクトルと同様で、調節可能なエネルギーレベルを有する光線の連続照射を行った。吸収スペクトルの変動を経時的にモニターし、半減期を測定した（固定波長で吸収の５０％消失に必要な照射時間）。図２ｃに表されるように、マンジフェリン水溶液は同じ条件下でベンゾフェノン４と比べると、照射に対して同等に抵抗性であり、非常に類似した半減期を有することが判った。更に計算されたその分子吸収係数は、市販されているほとんどの合成日焼け止め剤と同様、即ち、２０，０００と３０，０００L.cm^-1mol^-1の間であった。したがってマンジフェリンは、紫外線照射に対して皮膚を保護するのに有効であることが判った；これは単独で、又はこれらの効力を高める合成化学日焼け止め剤若しくは無機日焼け止め剤との組合せで使用することができる。下記実施例によっても、分子レベルでの皮膚の保護におけるマンジフェリンの有益性を説明した：インビトロの抗エラスターゼ活性測定（J．Bieth，B．Spices 及びCamille G．W ermecth，Biochemical medicine 11，350-357，1974 の変法）アフロイア及びマンジフェラ抽出物について上述されたのと同じ方法により、マンジフェリン溶液（０．０１％）を増量しつつ最終反応混合物３．０１ml中に導入した。マンジフェリンの量の関数として得られた傾斜の曲線により、５０％阻害に対応する濃度（ＩＣ₅₀）を求めることができた。この曲線は図４ｃにプロットした。マンジフェリンは、１０^-2mg/ml のオーダーの非常に大きなＩＣ₅₀を示した。 Heidrich，Hoppe-Seyler's-Zeit-Physiol．Chem．333，149-151,1963）マンジフェリンの阻害効果は、プロピレングリコール中０．０４２％の溶液を反応媒体に添加することにより測定した。図７ｂに、媒体に添加したマンジフェリンの種々の容量の関数として３２０nm で得られた値の曲線を示した。こうして５０％阻害を与える濃度（ＩＣ₅₀）を決定した。マンジフェリンは、５×１０^-2mg/ml のオーダーのＩＣ₅₀を示した。得られたデータは、この分子の効果が、特に皮膚組織の質を保護することについてかなり優れていることを示した。インビトロの抗チロシナーゼ活性チロシナーゼを基質であるＬ−ドーパと室温で反応させた。形成された生成物を４７５nmで分光光度計を使用して経時的にモニターした。０．２％のマンジフェリン溶液はチロシナーゼを５０％阻害した。即ち、ＩＣ₅₀は０．２mg/m l のオーダーであった。その抗チロシナーゼ効果により、マンジフェリンは皮膚の外見の単一化(unifi cation)に寄与しうる。インビトロの抗フリーラジカル活性（V．Ponti，M.U．Dianzani，K.Cheeseman 及びT.F．Slater，Cehm．Biol．interaction，23(1978)281-291）結果は図３ｃに示した。抽出物の抗フリーラジカル活性は、５０％阻害のルチン当量として表される。プロピレングリコール中の１％マンジフェリン溶液は、０．１％ルチン参照溶液よりも４倍高い活性を示した。得られたデータにより、スーパーオキシドラジカルを防御するこの分子の効力は有益であることが判った。この全てのデータにより、マンジフェリン分子又はその誘導体、及びこれを含有するアフロイア又はマンジフェラ抽出物が、基礎化粧品及び／又はメイクアップ化粧品及び医薬として使用することができることが結論できた。これらは特に以下のことに有用である：これらの遮蔽及び抗フリーラジカル作用によって、ＵＶＡ線の影響下で生成するラジカルの有害作用から保護することによる；ヒアルロン酸（非常に強力な含水化力を有するプロテオグリカン）の分解を制限するこれらの抗ヒアルロニダーゼ作用による；また、コラーゲンやエラスチン（これらの分子の状態が特に皮膚組織の質に関係する）の分解を制限する抗コラゲナーゼ及び抗エラスターゼ作用による、時間（年齢）、組織の含水率と緊張の低下により脆くなった皮膚のためのＵＶＡ及びＵＶＢ線の防御。アフロイア葉及びマンジフェラ種の葉の抽出物、及び純粋な形態のマンジフェリンとその誘導体は、植物油又は鉱物油；植物性ロウ又は鉱物性ロウ；シリコーン；アルコール及び脂肪酸；界面活性剤；蛋白の誘導体、無機又は有機ゲル化剤；ラノリン及びその誘導体；有機又は無機ＵＶ遮光剤、あるいは水のような、賦形剤の混合物との組合せで；あるいは他の植物抽出物との組合せで、そのまま、ベクトル化(vectorize)して、又はマイクロカプセル化して使用することができる。活性成分としてアフロイア又はマンジフェラの抽出物あるいは精製マンジフェリンを含有する組成物の下記の実施例により、本発明を説明する。１．ゲルの形の組成物の実施例下記の表は水性ゲル（欄１）又は水性−アルコール性ゲル（欄２）の形の組成物のための処方を示す。 −精製マンジフェリン含有処方： −マンジフェラ抽出物含有処方：２．乳剤の形の組成物の実施例 −精製マンジフェリン含有処方：水適量マンジフェリン０．０１〜１０％Ａ保存料適量プロピレングリコール５．００％キサンタンガム０．３０％アクリル酸／アクリル酸エステルコポリマー０．５０％ステアリン酸１００ＥＯ^**** ３．００％ステアリン酸ソルビタン２．００％ラウリン酸ソルビタン２０ＥＯ３．００％セチルステアリルアルコール１．５０％Ｂミツロウ１．００％小麦胚芽油５．００％ジメチコン２．００％シクロメチコン５．００％Ｃポリアクリルアミドゲル２．００％Ｄ香料０．３０％^**** ＥＯ１００モルを有するエトキシ化ステアリン酸 −アフロイア抽出物含有処方：水適量アフロイアの乾燥抽出物０．０１〜１０％Ａ保存料適量ジプロピレングリコール５．００％アルギン酸ナトリウム０．３０％アクリル酸／アクリル酸エステルコポリマー０．５０％ステアリン酸１００ＥＯ３．００％ステアリン酸ソルビタン２．００％ラウリン酸ソルビタン２０ＥＯ３．００％ステアリン酸１．５０％Ｂカルナウバロウ１．００％ハシバミ実油（Hazelnut oil）５．００％ジメチコン２．００％シクロメチコン５．００％Ｃポリアクリルアミドゲル２．００％Ｄ香料０．３０％３．クリーム剤の形の組成物の実施例 −精製マンジフェリン含有処方：水適量キサンタンガム０．３０％Ａ金属イオン封鎖剤（例えばＥＤＴＡ）０．０５％保存料適量マンジフェリン０．０１〜１０％Ｃ１８酸２．５０％Ｃ１６アルコール２．５０％トリラウリン１．００％Ｂシア脂３．００％酢酸トコフェロール０．０５％ α−ビサボロール（α-bisabolol）０．０５％植物油（小麦）５．００％ジメチコン３．００％ポリアクリル酸０．３０％Ｃ水３．００％ＤＴＥＡ１．５０％Ｅ香料０．１０％マンジフェラ抽出物含有処方：水適量グアーガム０．３０％Ａ金属イオン封鎖剤（例えばＥＤＴＡ）０．０５％保存料適量マンゴー乾燥抽出物０．０１〜１０％Ｃ１８酸２．５０％パルミチン酸セチル２．５０％トリラウリン１．００％Ｂシア脂３．００％酢酸トコフェロール０．０５％ α−ビサボロール（α-bisabolol）０．０５％エチルヘキシルココエート(Ethyl hexyl cocoate) ５．００％ジメチコン３．００％ポリアクリル酸０．３０％Ｃ水３．００％ＤＴＥＡ１．５０％Ｅ香料０．１０％４．ローション剤の形の組成物の実施例 −精製マンジフェリン含有処方：水適量金属イオン封鎖剤０．０５％プロピレングリコール２．００％保存料適量マンジフェリン０．０１〜１０％アルコール５〜５０％オレイルアルコール２０ＥＯ１．００％香料０．０５％着色料適量 −アフロイア抽出物含有処方：水適量金属イオン封鎖剤０．０５％メチルグルセス（Methyl gluceth）２０（柔軟剤）２．００％保存料適量アフロイア抽出物０．０１〜５０％アルコール５〜５０％ヒマシ油４０ＥＯ１．００％香料０．０５％着色料適量アラントイン０．１％

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 35/78 ＡＤＡ 9159−4ＣＡ６１Ｋ 35/78 ＡＤＡＣＡＧＺ 9159−4ＣＡＧＺＸＣ０７Ｄ 311/86 9360−4ＣＣ０７Ｄ 311/86 Ｃ０７Ｈ 17/07 8615−4ＣＣ０７Ｈ 17/07 (31)優先権主張番号９５／０７５０８ (32)優先日 1995年６月22日 (33)優先権主張国フランス（ＦＲ） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ロバン，ジャン−ルノーフランス国、エフ−93200 サン−デニ、リュ・フォンテーヌ、12

Claims

【特許請求の範囲】１．下記一般式（Ｉ）：（式中、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇及びＲ₈は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択される）で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩の１つを活性成分として含む、化粧用組成物。２．Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₆及びＲ₇は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃及びグルコシル基より選択され；そしてＲ₂＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈであって、Ｒ₄はグルコシル基であるか；又はＲ₂はグルコシル基であって、Ｒ₄＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである、請求項１記載の組成物。３．Ｒ₁＝Ｒ₃＝Ｒ₆＝Ｒ₇＝ＯＨであり、Ｒ₂は、グルコシル基であり、そしてＲ₄ ＝Ｒ₅＝Ｒ₈＝Ｈである、請求項１又は２記載の組成物。４．該化合物が、乾燥した形態で０．０１〜５０重量％の量で存在することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。５．該化合物が、乾燥した形態で０．０１〜１０重量％の量で存在することを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。６．該化合物が、植物抽出物の形態で存在する、請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。７．活性成分としてアフロイア葉の抽出物を含む、請求項６記載の化粧用組成物。８．活性成分としてマンジフェラ葉の抽出物を含む、請求項６記載の化粧用組成物。９．葉の抽出物を、組成物の全重量に対する乾燥抽出物の重量で表して０．０１〜２０重量％含むことを特徴とする、請求項７又は８記載の組成物。１０．植物抽出物が、極性溶媒又は極性溶媒混合物で抽出することにより得られたものであることを特徴とする、請求項６〜８のいずれか１項記載の組成物。１１．単純エマルション又は複エマルション、マイクロエマルション、水性又は水性−アルコール性ゲル、クリーム、油剤、水性又は水性−アルコール性ローション、スティック、シャンプー又はコンディショナーである、請求項１〜１０のいずれか１項記載の組成物。１２．紫外線に対して皮膚、唇又は毛髪を保護するための、請求項１〜１１のいずれか１項記載の化粧用組成物。１３．皮膚組織の質を増強するための、請求項１〜１１のいずれか１項記載の化粧用組成物。１４．皮膚の老化に拮抗するための、請求項１〜１１のいずれか１項記載の化粧用組成物。１５．請求項１〜１４のいずれか１項記載の化粧用組成物を皮膚、唇又は毛髪に適用することよりなる美容的処置方法。１６．光防御、抗コラゲナーゼ及び抗エラスターゼ、抗フリーラジカル及び抗チロシナーゼ作用を有する化粧用組成物の製造のための、精製した形態又は植物抽出物の形態の請求項１記載の式（Ｉ）の化合物の用途。１７．式（Ｉ）の化合物が、アフロイア葉又はマンジフェラ葉の抽出物の形であることを特徴とする、請求項１６記載の用途。