JPH0769912A - 活性酸素消去剤及びこれを含有する組成物 - Google Patents
活性酸素消去剤及びこれを含有する組成物Info
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- JPH0769912A JPH0769912A JP5214467A JP21446793A JPH0769912A JP H0769912 A JPH0769912 A JP H0769912A JP 5214467 A JP5214467 A JP 5214467A JP 21446793 A JP21446793 A JP 21446793A JP H0769912 A JPH0769912 A JP H0769912A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 生体内に発生する活性酸素を十分に消去する
作用を有し、且つ安全性が高い活性酸素消去剤及びこれ
を含有する組成物を提供する。 【構成】 胡桃殻抽出物を活性酸素消去剤として用い
る。また、この活性酸素消去剤を食品、医薬品等の組成
物に配合する。
作用を有し、且つ安全性が高い活性酸素消去剤及びこれ
を含有する組成物を提供する。 【構成】 胡桃殻抽出物を活性酸素消去剤として用い
る。また、この活性酸素消去剤を食品、医薬品等の組成
物に配合する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、活性酸素消去剤及びこ
れを含有する組成物に関し、詳しくは、胡桃殻の抽出物
からなる活性酸素消去剤及びこの活性酸素消去剤を含有
する組成物に関する。
れを含有する組成物に関し、詳しくは、胡桃殻の抽出物
からなる活性酸素消去剤及びこの活性酸素消去剤を含有
する組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】一般的に、活性酸素が生体へ及ぼす影響
としては、コラーゲン線維の架橋や、ＤＮＡ螺旋の部分
開裂、連鎖的ラジカルの発生による組織の損傷が挙げら
れ、その結果としてシワや弾力消失といった皮膚や生体
の老化、気管支喘息等のアレルギー反応の惹起とヒスタ
ミン放出による炎症の惹起、虚血性疾患のひとつである
心筋梗塞における平滑筋の損傷、肝臓障害などの疾患の
悪化、また、脳組織の破壊による痴呆の誘発などが引き
起こされることが知られている。更に、詳細な原因、機
構は不明であるがリューマチの発症にも活性酸素が関与
していることも公知の事実である。
としては、コラーゲン線維の架橋や、ＤＮＡ螺旋の部分
開裂、連鎖的ラジカルの発生による組織の損傷が挙げら
れ、その結果としてシワや弾力消失といった皮膚や生体
の老化、気管支喘息等のアレルギー反応の惹起とヒスタ
ミン放出による炎症の惹起、虚血性疾患のひとつである
心筋梗塞における平滑筋の損傷、肝臓障害などの疾患の
悪化、また、脳組織の破壊による痴呆の誘発などが引き
起こされることが知られている。更に、詳細な原因、機
構は不明であるがリューマチの発症にも活性酸素が関与
していることも公知の事実である。
【０００３】従って、生体内において活性酸素の発生を
抑制することは、これらの疾患を治療あるいは予防する
点で非常に重要なことであり、このため、従来より生体
内に発生した活性酸素を消去する作用を有する薬剤の探
索研究が広く行われてきた。
抑制することは、これらの疾患を治療あるいは予防する
点で非常に重要なことであり、このため、従来より生体
内に発生した活性酸素を消去する作用を有する薬剤の探
索研究が広く行われてきた。
【０００４】例えば、このような作用を有する薬剤とし
て、従来より用いられているものとしては、天然物由来
のものでは、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）、
水溶性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）等が挙げられ、
合成化合物では、ＢＨＴ（３，５−ｔｅｒｔ−ブチル−
４−ヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（２（３）−ｔｅｒ
ｔ−ブチル−ヒドロキシアニリール）等が挙げられる。
しかし、これらの薬剤に関しては、活性酸素消去作用が
十分でなく、また合成化合物のＢＨＴ、ＢＨＡでは、発
ガン性の疑いが持たれている等の問題があった。
て、従来より用いられているものとしては、天然物由来
のものでは、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）、
水溶性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）等が挙げられ、
合成化合物では、ＢＨＴ（３，５−ｔｅｒｔ−ブチル−
４−ヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（２（３）−ｔｅｒ
ｔ−ブチル−ヒドロキシアニリール）等が挙げられる。
しかし、これらの薬剤に関しては、活性酸素消去作用が
十分でなく、また合成化合物のＢＨＴ、ＢＨＡでは、発
ガン性の疑いが持たれている等の問題があった。
【０００５】また、最近では、十分な薬効と安全性を求
めて、生薬抽出物から活性酸素消去作用を有する薬剤を
得ようという試みも数多くなされている。例えば、特開
昭６０−２２４６２９号、特開昭６１−２４５２２号、
特開平２−１９３９３０号、特開平２−２４３６３２
号、特開平２−２６４７２７号、特開平３−１５３６２
９号、特開平３−２２１５８７号、特開平４−６９３４
３号、特開平４−２０２１３８号、特開平４−２４７０
１０号など、これらは全て生薬由来物の活性酸素消去作
用を利用したものである。しかし、これらの生薬抽出物
では、安全性には問題がないものの、活性酸素消去作用
の点から言えば、未だ十分なものは得られていなかっ
た。
めて、生薬抽出物から活性酸素消去作用を有する薬剤を
得ようという試みも数多くなされている。例えば、特開
昭６０−２２４６２９号、特開昭６１−２４５２２号、
特開平２−１９３９３０号、特開平２−２４３６３２
号、特開平２−２６４７２７号、特開平３−１５３６２
９号、特開平３−２２１５８７号、特開平４−６９３４
３号、特開平４−２０２１３８号、特開平４−２４７０
１０号など、これらは全て生薬由来物の活性酸素消去作
用を利用したものである。しかし、これらの生薬抽出物
では、安全性には問題がないものの、活性酸素消去作用
の点から言えば、未だ十分なものは得られていなかっ
た。
【０００６】更に、酵素のひとつスーパーオキサイドデ
スミューターゼ（ＳＯＤ）を投与することにより、生体
内に発生する活性酸素を消去する試みもなされてきてい
るが、ＳＯＤは、タンパク質であるため、その入手が困
難であるばかりでなく、消化されてしまうが故に、経口
投与は不可能であり、また、注射による投与でも血中半
減期が短く満足の行くものではなかった。
スミューターゼ（ＳＯＤ）を投与することにより、生体
内に発生する活性酸素を消去する試みもなされてきてい
るが、ＳＯＤは、タンパク質であるため、その入手が困
難であるばかりでなく、消化されてしまうが故に、経口
投与は不可能であり、また、注射による投与でも血中半
減期が短く満足の行くものではなかった。
【０００７】一方、胡桃の殻については、その粉砕物が
スクラブ剤として有用である知見や、その抽出エキス
が、皮膚外用剤として保湿性に優れ有用である知見が知
られている。しかし、この胡桃殻の抽出エキスが、活性
酸素消去作用を有することは知られておらず、また、こ
れを医薬品、食品等に含有させて、上述したような様々
な疾患の予防や治療、老化の防止、改善に用いるという
試みはされていなかった。
スクラブ剤として有用である知見や、その抽出エキス
が、皮膚外用剤として保湿性に優れ有用である知見が知
られている。しかし、この胡桃殻の抽出エキスが、活性
酸素消去作用を有することは知られておらず、また、こ
れを医薬品、食品等に含有させて、上述したような様々
な疾患の予防や治療、老化の防止、改善に用いるという
試みはされていなかった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記観点か
らなされたものであり、生体内に発生する活性酸素を十
分に消去する作用を有し、且つ安全性が高い活性酸素消
去剤及びこれを含有する組成物を提供することを課題と
する。
らなされたものであり、生体内に発生する活性酸素を十
分に消去する作用を有し、且つ安全性が高い活性酸素消
去剤及びこれを含有する組成物を提供することを課題と
する。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために、活性酸素消去作用を指標として各種
物質をスクリーニングする中で、活性酸素により劣化を
うけやすい不飽和油脂を殻の内部に含む胡桃の実が、内
部の不飽和油脂を安定に保てるのは、外の殻に何らかの
活性酸素に対する防御機構が存在するためではないかと
推論し、活性酸素消去剤のスクリーニングに胡桃殻抽出
物をかけたところ、この胡桃殻抽出成分に優れた活性酸
素消去作用を有する成分が存在することを見出し、本発
明を完成するに至った。
を解決するために、活性酸素消去作用を指標として各種
物質をスクリーニングする中で、活性酸素により劣化を
うけやすい不飽和油脂を殻の内部に含む胡桃の実が、内
部の不飽和油脂を安定に保てるのは、外の殻に何らかの
活性酸素に対する防御機構が存在するためではないかと
推論し、活性酸素消去剤のスクリーニングに胡桃殻抽出
物をかけたところ、この胡桃殻抽出成分に優れた活性酸
素消去作用を有する成分が存在することを見出し、本発
明を完成するに至った。
【００１０】すなわち、本発明は胡桃殻の抽出物からな
る活性酸素消去剤及びこれを含有する組成物に関する。
以下、本発明を詳細に説明する。
る活性酸素消去剤及びこれを含有する組成物に関する。
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１１】＜１＞本発明の活性酸素消去剤 本発明の活性酸素消去剤は、胡桃殻の抽出物からなる。
本発明に用いる胡桃殻とは、一般的に知られている、ク
ルミ科植物の果実の殻であり、例えば、オニグルミ、マ
ンシュウグルミ、ウォールナッツなどの胡桃殻が挙げら
れる。
本発明に用いる胡桃殻とは、一般的に知られている、ク
ルミ科植物の果実の殻であり、例えば、オニグルミ、マ
ンシュウグルミ、ウォールナッツなどの胡桃殻が挙げら
れる。
【００１２】上記胡桃殻は、活性酸素消去作用を有する
成分を含んでおり、抽出により前記成分を含む抽出物を
取り出して、本発明の活性酸素消去剤として用いる。胡
桃殻の抽出処理は、連続式、バッチ式等の方法で、常法
により冷浸または温浸にて任意の時間行う。例えば、胡
桃殻を細かく粉砕し、抽出溶媒に、室温で１〜３日間、
または抽出溶媒の沸騰温度で１時間〜５時間、浸漬し抽
出を行う。その後、抽出液から抽出残渣を除いて、減圧
または限外濾過を行い抽出物を濃縮する。さらに、必要
に応じて有機溶媒を完全に留去して乾固するかまたは凍
結乾燥する。
成分を含んでおり、抽出により前記成分を含む抽出物を
取り出して、本発明の活性酸素消去剤として用いる。胡
桃殻の抽出処理は、連続式、バッチ式等の方法で、常法
により冷浸または温浸にて任意の時間行う。例えば、胡
桃殻を細かく粉砕し、抽出溶媒に、室温で１〜３日間、
または抽出溶媒の沸騰温度で１時間〜５時間、浸漬し抽
出を行う。その後、抽出液から抽出残渣を除いて、減圧
または限外濾過を行い抽出物を濃縮する。さらに、必要
に応じて有機溶媒を完全に留去して乾固するかまたは凍
結乾燥する。
【００１３】このような抽出に用いる溶媒としては、水
や各種有機溶媒が挙げられるが、本発明においては特
に、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコ
ール、ｉ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコー
ル、ｉ−ブチルアルコール、ｓｅｃ−ブチルアルコー
ル、ｔ−ブチルアルコール、アセトンから選ばれる１種
または２種以上が好ましい。
や各種有機溶媒が挙げられるが、本発明においては特
に、水、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコ
ール、ｉ−プロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコー
ル、ｉ−ブチルアルコール、ｓｅｃ−ブチルアルコー
ル、ｔ−ブチルアルコール、アセトンから選ばれる１種
または２種以上が好ましい。
【００１４】＜２＞本発明の活性酸素消去剤を含有する
組成物 本発明の組成物は、上記活性酸素消去剤を、常法に従っ
て配合したものであり、例えば、医薬品、食品等が挙げ
られる。
組成物 本発明の組成物は、上記活性酸素消去剤を、常法に従っ
て配合したものであり、例えば、医薬品、食品等が挙げ
られる。
【００１５】本発明の活性酸素消去剤を医薬品として製
剤化する場合、剤型は特に限定されないが、注射剤、散
剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤など通常用いられ
ている各種製剤へ、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、
着色剤、矯味剤、矯臭剤、増量剤、被覆剤などの医薬品
で通常用いられる任意成分とともに、通常の方法に従っ
て剤型化できる。
剤化する場合、剤型は特に限定されないが、注射剤、散
剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤など通常用いられ
ている各種製剤へ、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、
着色剤、矯味剤、矯臭剤、増量剤、被覆剤などの医薬品
で通常用いられる任意成分とともに、通常の方法に従っ
て剤型化できる。
【００１６】上記医薬品の投与量に関しては、疾患の種
類、症状、患者の年齢、体重などにより異なるが、成人
１人１日あたり、胡桃殻の抽出物の量として１０ｍｇ〜
１０００ｍｇを１回ないし数回に分けて経口投与する
か、５ｍｇ〜５００ｍｇを注射で投与するのが適当であ
る。注射剤の投与方法としては、静脈内投与、動脈内投
与、門脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与等
が挙げられる。
類、症状、患者の年齢、体重などにより異なるが、成人
１人１日あたり、胡桃殻の抽出物の量として１０ｍｇ〜
１０００ｍｇを１回ないし数回に分けて経口投与する
か、５ｍｇ〜５００ｍｇを注射で投与するのが適当であ
る。注射剤の投与方法としては、静脈内投与、動脈内投
与、門脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与等
が挙げられる。
【００１７】本発明の活性酸素消去剤を食品に配合する
場合、特に留意することなく、種々の食品へ、食品で通
常用いられている任意成分とともに配合できる。例示を
すれば、キャンディーやグミ、ゼリーといったお菓子類
やジュースのようなドリンク類、パンなどの主食等が挙
げられる。配合量は、食品の種類により異なるが、食品
の味を損なわずに、且つ十分な活性酸素消去効果を得る
ためには、０．１〜１０重量％が好ましい。
場合、特に留意することなく、種々の食品へ、食品で通
常用いられている任意成分とともに配合できる。例示を
すれば、キャンディーやグミ、ゼリーといったお菓子類
やジュースのようなドリンク類、パンなどの主食等が挙
げられる。配合量は、食品の種類により異なるが、食品
の味を損なわずに、且つ十分な活性酸素消去効果を得る
ためには、０．１〜１０重量％が好ましい。
【００１８】なお、胡桃殻の抽出物は、胡桃が可食果実
であることから安全性に優れていることが期待できる。
であることから安全性に優れていることが期待できる。
【００１９】
【作用】本発明の活性酸素消去剤及びこれを含有する組
成物は、その有効成分である胡桃殻抽出物の優れた活性
酸素消去作用により、上述したように活性酸素が関与し
ているとされる、炎症、老人性痴呆、心筋梗塞などの虚
血性疾患、あるいはアレルギー性疾患、肝臓障害、リュ
ーマチなど様々な疾病の治療や皮膚などの生体老化の改
善に対して有効に働くものである。
成物は、その有効成分である胡桃殻抽出物の優れた活性
酸素消去作用により、上述したように活性酸素が関与し
ているとされる、炎症、老人性痴呆、心筋梗塞などの虚
血性疾患、あるいはアレルギー性疾患、肝臓障害、リュ
ーマチなど様々な疾病の治療や皮膚などの生体老化の改
善に対して有効に働くものである。
【００２０】また、本発明の活性酸素消去剤及びこれを
含有する組成物は、上記疾病や生体老化の予防のために
も有効に使用できる。これは、活性酸素消去作用を有す
る成分を、あらかじめ生体内に存在させることにより、
生体内で発生した活性酸素を素早く消去し、無毒化する
ことができるためである。
含有する組成物は、上記疾病や生体老化の予防のために
も有効に使用できる。これは、活性酸素消去作用を有す
る成分を、あらかじめ生体内に存在させることにより、
生体内で発生した活性酸素を素早く消去し、無毒化する
ことができるためである。
【００２１】
【実施例】以下に、本発明の実施例を説明する。はじめ
に、本発明の活性酸素消去剤の実施例を説明する。
に、本発明の活性酸素消去剤の実施例を説明する。
【００２２】
【実施例１】オニグルミの胡桃殻５００ｇを細かく粉砕
し、これに５ｌの水を加え、１０５℃で２時間加熱撹拌
した後、濾過して残渣を取り除き、得られた濾液を２昼
夜かけて凍結乾燥して、オニグルミの胡桃殻抽出物を
４．９ｇの褐色粉末として得た。これを、そのまま活性
酸素消去剤とした。
し、これに５ｌの水を加え、１０５℃で２時間加熱撹拌
した後、濾過して残渣を取り除き、得られた濾液を２昼
夜かけて凍結乾燥して、オニグルミの胡桃殻抽出物を
４．９ｇの褐色粉末として得た。これを、そのまま活性
酸素消去剤とした。
【００２３】
【実施例２】マンシュウグルミの胡桃殻５００ｇを細か
く粉砕し、これにメタノールとｎ−ブチルアルコールの
等量混合液５ｌを加え、撹拌、加熱、還流を２時間行っ
た後、濾過して残渣を取り除き、得られた濾液を減圧濃
縮して、マンシュウグルミの胡桃殻抽出物を５．３ｇを
粘稠性液体として得た。これを、そのまま活性酸素消去
剤とした。
く粉砕し、これにメタノールとｎ−ブチルアルコールの
等量混合液５ｌを加え、撹拌、加熱、還流を２時間行っ
た後、濾過して残渣を取り除き、得られた濾液を減圧濃
縮して、マンシュウグルミの胡桃殻抽出物を５．３ｇを
粘稠性液体として得た。これを、そのまま活性酸素消去
剤とした。
【００２４】
【実施例３】ウォールナッツの胡桃殻５００ｇを細かく
粉砕し、これに５０％アセトン水溶液５ｌを加え、撹
拌、加熱、還流を２時間行った後、濾過して残渣を取り
除き、得られた濾液を減圧濃縮した。更に、この濃縮物
を４８時間かけて凍結乾燥処理し、ウォールナッツの胡
桃殻抽出物を５．１ｇのアモルファスとして得た。これ
を、そのまま活性酸素消去剤とした。
粉砕し、これに５０％アセトン水溶液５ｌを加え、撹
拌、加熱、還流を２時間行った後、濾過して残渣を取り
除き、得られた濾液を減圧濃縮した。更に、この濃縮物
を４８時間かけて凍結乾燥処理し、ウォールナッツの胡
桃殻抽出物を５．１ｇのアモルファスとして得た。これ
を、そのまま活性酸素消去剤とした。
【００２５】＜活性酸素消去剤の評価＞上記各実施例で
得られた活性酸素消去剤について、安全性、活性酸素消
去作用、及び老化、肝臓障害、アレルギー疾患に対する
効果に関する評価を行った。
得られた活性酸素消去剤について、安全性、活性酸素消
去作用、及び老化、肝臓障害、アレルギー疾患に対する
効果に関する評価を行った。
【００２６】（１）急性毒性試験 １群２匹づつの５週齢ＩＣＲ雄性マウス（体重２５〜３
０ｇ）の腹腔内に、実施例１で得られた活性酸素消去剤
を生理食塩水に溶解したものを、それぞれ５００ｍｇ／
ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、２０００ｍｇ／ｋｇの割合
で投与し、１４日後に生死の判定を行った。その結果、
前記何れの投与量においてもマウスは生存し、ＬＤ50値
は２０００ｍｇ／ｋｇ以上であることが確認された。こ
のことより本発明の活性酸素消去剤が安全性に優れるこ
とが明白である。
０ｇ）の腹腔内に、実施例１で得られた活性酸素消去剤
を生理食塩水に溶解したものを、それぞれ５００ｍｇ／
ｋｇ、１０００ｍｇ／ｋｇ、２０００ｍｇ／ｋｇの割合
で投与し、１４日後に生死の判定を行った。その結果、
前記何れの投与量においてもマウスは生存し、ＬＤ50値
は２０００ｍｇ／ｋｇ以上であることが確認された。こ
のことより本発明の活性酸素消去剤が安全性に優れるこ
とが明白である。
【００２７】（２）活性酸素消去作用の測定（インビト
ロ） 化１に示す反応式に基づき、キサンチン−キサンチンオ
キシダーゼ（ＸＯＤ）系により活性酸素のひとつである
スーパーオキシドアニオン（Ｏ2 -）を発生させ、発生し
たＯ2 -の生成率を亜硝酸法により測定し、この値をキサ
ンチンオキシダーゼ阻害活性値で補正して活性酸素消去
作用値を求めた。
ロ） 化１に示す反応式に基づき、キサンチン−キサンチンオ
キシダーゼ（ＸＯＤ）系により活性酸素のひとつである
スーパーオキシドアニオン（Ｏ2 -）を発生させ、発生し
たＯ2 -の生成率を亜硝酸法により測定し、この値をキサ
ンチンオキシダーゼ阻害活性値で補正して活性酸素消去
作用値を求めた。
【００２８】
【化１】
【００２９】上記各実施例で得られた活性酸素消去剤を
５００μｇ／ｍｌの割合で含有する活性酸素消去剤水溶
液０．１ｍｌを、６５ｍＭリン酸２水素カリウム、３５
ｍＭホウ酸ナトリウム、０．５ｍＭＥＤＴＡ２ナトリウ
ム水溶液（以下、緩衝液Ａという）０．２ｍｌ、０．５
ｍＭキサンチン溶液０．２ｍｌ、１０ｍＭヒドロキシル
アミン塩酸塩水溶液０．１ｍｌ、純水０．２ｍｌの混合
液に、加えてよく撹拌し試験液とした。同様にして、活
性酸素消去剤の代わりに純水０．１ｍｌを用いたコント
ロールの溶液を作製した。
５００μｇ／ｍｌの割合で含有する活性酸素消去剤水溶
液０．１ｍｌを、６５ｍＭリン酸２水素カリウム、３５
ｍＭホウ酸ナトリウム、０．５ｍＭＥＤＴＡ２ナトリウ
ム水溶液（以下、緩衝液Ａという）０．２ｍｌ、０．５
ｍＭキサンチン溶液０．２ｍｌ、１０ｍＭヒドロキシル
アミン塩酸塩水溶液０．１ｍｌ、純水０．２ｍｌの混合
液に、加えてよく撹拌し試験液とした。同様にして、活
性酸素消去剤の代わりに純水０．１ｍｌを用いたコント
ロールの溶液を作製した。
【００３０】上記各試験液及びコントロール溶液に、キ
サンチンオキシダーゼを１μｌ／ｍｌ濃度で含有する緩
衝液Ａを０．２ｍｌ加えて撹拌した後、３７℃で３０分
インキュベーションした。ブランクとして、上記と同様
に調整された試験液及びコントロール溶液に、キサンチ
ンオキシダーゼを含まない緩衝液Ａを０．２ｍｌ加え、
上記と同様に処理した溶液を用意した。
サンチンオキシダーゼを１μｌ／ｍｌ濃度で含有する緩
衝液Ａを０．２ｍｌ加えて撹拌した後、３７℃で３０分
インキュベーションした。ブランクとして、上記と同様
に調整された試験液及びコントロール溶液に、キサンチ
ンオキシダーゼを含まない緩衝液Ａを０．２ｍｌ加え、
上記と同様に処理した溶液を用意した。
【００３１】このようにして得られた各溶液のそれぞれ
に、３０μＭＮ−１−ナフチルエチレンジアミン塩酸
塩、３ｍＭスルファニル酸、２５％氷酢酸混液２ｍｌを
加え、３０分間室温で放置した後、各溶液について、５
５０ｎｍでの吸光度で活性酸素の発生量を、２９５ｎｍ
の吸光度で尿酸の発生量を測定した。
に、３０μＭＮ−１−ナフチルエチレンジアミン塩酸
塩、３ｍＭスルファニル酸、２５％氷酢酸混液２ｍｌを
加え、３０分間室温で放置した後、各溶液について、５
５０ｎｍでの吸光度で活性酸素の発生量を、２９５ｎｍ
の吸光度で尿酸の発生量を測定した。
【００３２】得られた値を用いて、以下の式に基づき、
活性酸素消去活性値を算出した。結果を表２に示す。
活性酸素消去活性値を算出した。結果を表２に示す。
【００３３】＜活性酸素消去活性を求める式＞ 活性酸素発生率＝［（Ａ550-3−Ａ550-4）／（Ａ550-1
−Ａ550-2）］×１００ 尿酸生成率＝［（Ａ295-3−Ａ295-4）／（Ａ295-1−Ａ
295-2）］×１００ 活性酸素消去活性＝１００−（活性酸素発生率／尿酸生
成率）×１００ 但し、式中の記号は、表１に示す条件で調整された各溶
液の吸光度の値とする。
−Ａ550-2）］×１００ 尿酸生成率＝［（Ａ295-3−Ａ295-4）／（Ａ295-1−Ａ
295-2）］×１００ 活性酸素消去活性＝１００−（活性酸素発生率／尿酸生
成率）×１００ 但し、式中の記号は、表１に示す条件で調整された各溶
液の吸光度の値とする。
【００３４】
【表１】
【００３５】
【表２】 以上の結果から、本発明の活性酸素消去剤が、優れた活
性酸素消去作用を有することは明らかである。
性酸素消去作用を有することは明らかである。
【００３６】（３）活性酸素消去作用の測定（インビ
ボ） ３５週齢ＩＣＲ系ＭＣＨ雄性マウス（体重３０〜４０
ｇ）から採血を行った後、このマウスに実施例１で得ら
れた活性酸素消去剤を、１０００ｍｇ／ｋｇの割合で経
口投与した。投与３０分後、２時間後、５時間後に採血
を行った。 上記各条件で採血した血液から遠心分離に
より血清を取り出し、これを、緩衝液Ａで１０倍に希釈
して、上記（２）の試験と同様の方法で活性酸素消去活
性を測定した。結果を表３に示す。
ボ） ３５週齢ＩＣＲ系ＭＣＨ雄性マウス（体重３０〜４０
ｇ）から採血を行った後、このマウスに実施例１で得ら
れた活性酸素消去剤を、１０００ｍｇ／ｋｇの割合で経
口投与した。投与３０分後、２時間後、５時間後に採血
を行った。 上記各条件で採血した血液から遠心分離に
より血清を取り出し、これを、緩衝液Ａで１０倍に希釈
して、上記（２）の試験と同様の方法で活性酸素消去活
性を測定した。結果を表３に示す。
【００３７】
【表３】 この結果から、本発明の活性酸素消去剤は、経口投与に
より速やかに血中に移行し、長時間その効果を保つこと
が明白である。
より速やかに血中に移行し、長時間その効果を保つこと
が明白である。
【００３８】（４）老化、肝障害に対する効果の検討 ５週齢ウィスター系雌性ラット４０匹を体重にばらつき
のない様に４群に分け、１群には通常の固形飼料（Ｆ2
飼料、船橋農場製）を、他の３群にはそれぞれ、各実施
例の活性酸素消去剤を前記固形飼料に１重量％の配合し
たものを摂取させて２４ヶ月飼育した。なお、実験中、
ラットには、固形飼料及び水を自由に摂取できるように
した。
のない様に４群に分け、１群には通常の固形飼料（Ｆ2
飼料、船橋農場製）を、他の３群にはそれぞれ、各実施
例の活性酸素消去剤を前記固形飼料に１重量％の配合し
たものを摂取させて２４ヶ月飼育した。なお、実験中、
ラットには、固形飼料及び水を自由に摂取できるように
した。
【００３９】２４ヶ月飼育後、各群のラットから血液を
採取した後、屠殺した。その後、各群のラットについて
老化の評価指標として散在性脱毛、表皮下の結合組織の
膨化断裂、脂腺、汗腺の消失に関して出現の有無を観察
した。
採取した後、屠殺した。その後、各群のラットについて
老化の評価指標として散在性脱毛、表皮下の結合組織の
膨化断裂、脂腺、汗腺の消失に関して出現の有無を観察
した。
【００４０】更に、これらのラットを解剖して肝臓を摘
出し、肉眼観察の上病理標本として顕微鏡下観察するこ
とにより肝障害に関する評価を行った。また、生体内に
活性酸素が発生すると、体内の不飽和脂肪酸と容易に反
応して過酸化脂質を生じるが、このようにして体内各部
（血清中、脳中、肝臓中）に生じた過酸化脂質の量をＴ
ＢＡ法で測定することにより、各器官における活性酸素
消去効果の評価を行った。
出し、肉眼観察の上病理標本として顕微鏡下観察するこ
とにより肝障害に関する評価を行った。また、生体内に
活性酸素が発生すると、体内の不飽和脂肪酸と容易に反
応して過酸化脂質を生じるが、このようにして体内各部
（血清中、脳中、肝臓中）に生じた過酸化脂質の量をＴ
ＢＡ法で測定することにより、各器官における活性酸素
消去効果の評価を行った。
【００４１】結果を、過酸化脂質量については１０匹の
平均値として、その他の評価項目については出現匹数と
して、表４に示す。
平均値として、その他の評価項目については出現匹数と
して、表４に示す。
【００４２】
【表４】 本発明の活性酸素消去剤は、体内の各器官において、活
性酸素を消去することで過酸化脂質の生成をよく抑制
し、生体の老化を防ぎ、且つ肝臓の障害を防いでいるこ
とが明らかである。
性酸素を消去することで過酸化脂質の生成をよく抑制
し、生体の老化を防ぎ、且つ肝臓の障害を防いでいるこ
とが明らかである。
【００４３】（５）アレルギー疾患に対する効果の検討 クリーグマンのモルモットマキシマイゼーションテスト
法に準じて、感作物質であるシンナムアルデヒドを用い
て、アレルギー性の惹起反応に対する評価を行った。
法に準じて、感作物質であるシンナムアルデヒドを用い
て、アレルギー性の惹起反応に対する評価を行った。
【００４４】１群８〜１０匹づつのモルモットの２群
（このうち１群はコントロール群）には通常の固形飼料
（Ｆ2飼料、船橋農場製）と水を、他の３群にはそれぞ
れ、各実施例の活性酸素消去剤を前記固形飼料に１重量
％の配合したものと水を、自由に摂取させて飼育しなが
ら以下の実験を行った。
（このうち１群はコントロール群）には通常の固形飼料
（Ｆ2飼料、船橋農場製）と水を、他の３群にはそれぞ
れ、各実施例の活性酸素消去剤を前記固形飼料に１重量
％の配合したものと水を、自由に摂取させて飼育しなが
ら以下の実験を行った。
【００４５】コントロール群のモルモットを除いた、上
記各群のモルモットに、２日おきに４回、１％シンナム
アルデヒド流動パラフィン溶液とフロイントの完全アジ
ュバントの等量混合液、１％シンナムアルデヒド流動パ
ラフィン溶液及びフロイントの完全アジュバントを、各
０．０５ｍｌづつ背部の２ヶ所に皮内注射した。更に、
注射開始日より注射終了日までの期間、上記注射部位
に、１％シンナムアルデヒド流動パラフィン溶液を絆創
膏のパット部に塗布したものをクローズドパッチして、
経皮投与も同時に行った。
記各群のモルモットに、２日おきに４回、１％シンナム
アルデヒド流動パラフィン溶液とフロイントの完全アジ
ュバントの等量混合液、１％シンナムアルデヒド流動パ
ラフィン溶液及びフロイントの完全アジュバントを、各
０．０５ｍｌづつ背部の２ヶ所に皮内注射した。更に、
注射開始日より注射終了日までの期間、上記注射部位
に、１％シンナムアルデヒド流動パラフィン溶液を絆創
膏のパット部に塗布したものをクローズドパッチして、
経皮投与も同時に行った。
【００４６】注射及びクローズドパッチ終了日の２週間
後、すべてのモルモットの背部を剃毛し、０．０１％、
０．０５％、０．１％、０．５％、１％濃度の各シンナ
ムアルデヒド流動パラフィン溶液を、上記と同様にクロ
ーズドパッチする方法で、２４時間経皮投与して、惹起
反応を見た。評価の基準は、以下に示す日本皮膚科学会
本邦パッチテスト基準を用いた。結果を表５に示す。
後、すべてのモルモットの背部を剃毛し、０．０１％、
０．０５％、０．１％、０．５％、１％濃度の各シンナ
ムアルデヒド流動パラフィン溶液を、上記と同様にクロ
ーズドパッチする方法で、２４時間経皮投与して、惹起
反応を見た。評価の基準は、以下に示す日本皮膚科学会
本邦パッチテスト基準を用いた。結果を表５に示す。
【００４７】− ： 無反応 ± ： 疑陽性反応 ＋ ： 陽性反応 ＋＋ ： 浮腫を伴う反応
【００４８】
【表５】 この結果から明らかなように、本発明の活性酸素消去剤
は、よくアレルギー性の惹起反応を抑制している。
は、よくアレルギー性の惹起反応を抑制している。
【００４９】次に、上記実施例で得られた、活性酸素消
去剤を含有する、食品、医薬品等の組成物の実施例につ
いて説明する。なお、以下に用いる配合量は、特にこと
わりのないものは、すべて重量部である。
去剤を含有する、食品、医薬品等の組成物の実施例につ
いて説明する。なお、以下に用いる配合量は、特にこと
わりのないものは、すべて重量部である。
【００５０】
【実施例４〜６】 キャンディー 表６中、Ａ成分を１５０℃で加熱溶解し、１２０℃に冷
却後、Ｂ成分を添加、撹拌後、均一としたものを成型
後、冷却してキャンディーを製造した。
却後、Ｂ成分を添加、撹拌後、均一としたものを成型
後、冷却してキャンディーを製造した。
【００５１】
【表６】
【００５２】
【実施例７】 グミ 表７のＡ成分を１１０℃で加熱溶解し、別途膨潤溶解さ
せたＢ成分を添加し、更に、Ｃ成分を添加し、型に流し
込み、一昼夜放置後、型からはずしてグミを製造した。
せたＢ成分を添加し、更に、Ｃ成分を添加し、型に流し
込み、一昼夜放置後、型からはずしてグミを製造した。
【００５３】
【表７】
【００５４】
【実施例８】 ジュース 表８の成分をよく撹拌して溶液とし、滅菌、無菌充填、
密閉してジュースを製造した。
密閉してジュースを製造した。
【００５５】
【表８】
【００５６】
【実施例９】 ホットケーキ 表９の成分をよく混ぜ合わせ、油を引いたフライパンで
焼き上げホットケーキを作成した。
焼き上げホットケーキを作成した。
【００５７】
【表９】
【００５８】
【実施例１０】 顆粒剤 表１０のＡ成分をよく混合し、これに１００ｍｌの２０
％エタノール水溶液に溶かしたＢ成分を練合させながら
徐々に加え造粒した。これを４０℃で２昼夜送風乾燥
し、篩過、整粒して顆粒剤とした。
％エタノール水溶液に溶かしたＢ成分を練合させながら
徐々に加え造粒した。これを４０℃で２昼夜送風乾燥
し、篩過、整粒して顆粒剤とした。
【００５９】
【表１０】
【００６０】
【実施例１１】 注射剤 表１１の成分を溶解、濾過、滅菌し、アンプル中へ無菌
充填して封入し、注射剤とした。
充填して封入し、注射剤とした。
【００６１】
【表１１】
【００６２】
【発明の効果】本発明の活性酸素消去剤およびこれを含
有する組成物は、安全性が高く、優れた活性酸素消去作
用を有するので、活性酸素が関与するアレルギー疾患、
肝障害の予防と治療、生体老化の防止に有効である。
有する組成物は、安全性が高く、優れた活性酸素消去作
用を有するので、活性酸素が関与するアレルギー疾患、
肝障害の予防と治療、生体老化の防止に有効である。
Claims (3)
- 【請求項１】 胡桃殻の抽出物からなる活性酸素消去
剤。 - 【請求項２】 前記抽出物が、水、メタノール、エタノ
ール、ｎ−プロピルアルコール、ｉ−プロピルアルコー
ル、ｎ−ブチルアルコール、ｉ−ブチルアルコール、ｓ
ｅｃ−ブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール、アセ
トンから選ばれる１種又は２種以上で抽出されたことを
特徴とする請求項１記載の活性酸素消去剤。 - 【請求項３】 請求項１記載の活性酸素消去剤を含有す
る組成物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5214467A JP2788166B2 (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 活性酸素消去用の組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5214467A JP2788166B2 (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 活性酸素消去用の組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0769912A true JPH0769912A (ja) | 1995-03-14 |
| JP2788166B2 JP2788166B2 (ja) | 1998-08-20 |
Family
ID=16656211
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5214467A Expired - Fee Related JP2788166B2 (ja) | 1993-08-30 | 1993-08-30 | 活性酸素消去用の組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2788166B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003009860A1 (de) * | 2001-07-07 | 2003-02-06 | Lore Klett-Loch Gdbr | MITTEL ZUR ÄUssERLICHEN BEHANDLUNG VON SCHMERZEN UND HAUTERKRANKUNGEN |
| JP2005179285A (ja) * | 2003-12-22 | 2005-07-07 | Lotte Co Ltd | ヒスタミン遊離抑制剤及びそれを含む飲食品 |
| JP2010070498A (ja) * | 2008-09-18 | 2010-04-02 | Kao Corp | セラミド産生促進剤及び保湿剤 |
| WO2015129895A1 (ja) * | 2014-02-27 | 2015-09-03 | 中島 利博 | クルミの抽出物を含む抗肥満剤 |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62148427A (ja) * | 1985-12-23 | 1987-07-02 | Kao Corp | 皮膚外用剤 |
| JPS63203625A (ja) * | 1987-02-19 | 1988-08-23 | Kao Corp | ５α−リダクタ−ゼ阻害剤 |
| JPS6425726A (en) * | 1987-04-24 | 1989-01-27 | Yuutoku Yakuhin Kogyo Kk | Agent for eliminating active oxygen free radical |
| JPH02117619A (ja) * | 1988-06-24 | 1990-05-02 | Richter Gedeon V G Rt | 化粧用組成物及びパラメディカル組成物 |
| JPH02172922A (ja) * | 1988-12-26 | 1990-07-04 | Masazumi Yoshihara | 抗エイズウィルス剤 |
| JPH03223217A (ja) * | 1989-03-03 | 1991-10-02 | Asahi Breweries Ltd | 抗活性酸素作用剤並びにこれを有効成分とする抗活性酸素剤、食品、化粧料及び医薬品 |
| JPH048256A (ja) * | 1990-04-24 | 1992-01-13 | Junko Ehata | 野菜による活性酸素類の消去方法 |
| JPH04295430A (ja) * | 1991-03-25 | 1992-10-20 | Takasago Internatl Corp | 制癌剤 |
-
1993
- 1993-08-30 JP JP5214467A patent/JP2788166B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPS62148427A (ja) * | 1985-12-23 | 1987-07-02 | Kao Corp | 皮膚外用剤 |
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| JP2005179285A (ja) * | 2003-12-22 | 2005-07-07 | Lotte Co Ltd | ヒスタミン遊離抑制剤及びそれを含む飲食品 |
| JP4491065B2 (ja) * | 2003-12-22 | 2010-06-30 | 株式会社ロッテ | ヒスタミン遊離抑制剤 |
| JP2010070498A (ja) * | 2008-09-18 | 2010-04-02 | Kao Corp | セラミド産生促進剤及び保湿剤 |
| WO2015129895A1 (ja) * | 2014-02-27 | 2015-09-03 | 中島 利博 | クルミの抽出物を含む抗肥満剤 |
| JPWO2015129895A1 (ja) * | 2014-02-27 | 2017-03-30 | 中島 利博 | クルミの抽出物を含む抗肥満剤 |
| US10034909B2 (en) | 2014-02-27 | 2018-07-31 | Toshihiro Nakajima | Antiobesity agent containing walnut extract |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2788166B2 (ja) | 1998-08-20 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |