JPH07309859A

JPH07309859A - 新規生理活性物質ｂｍ９９−１、ｂｍ９９−２およびｂｍ９９−３

Info

Publication number: JPH07309859A
Application number: JP6191346A
Authority: JP
Inventors: Satoru Hyodo; 哲兵頭; Kenichi Fujita; 研一藤田; Isamu Takahashi; 勇高橋; Osamu Kasuya; 修糟谷; Machiko Futamata; 待子二又; Katsuyuki Futamata; 克之二又; Keizo Inoue; 圭三井上
Original assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1994-03-25
Filing date: 1994-07-22
Publication date: 1995-11-28

Abstract

(57)【要約】【目的】ホスホリパーゼＡ₂ 阻害作用を有する新規な
化合物を提供する。腫瘍細胞に対する殺細胞作用を有す
る新規な化合物を提供する。【構成】式【化１】で示される新規生理活性物質ＢＭ９９−１および式【化２】で示される新規生理活性物質ＢＭ９９−２および新規物
質ＢＭ９９−３。【効果】ホスホリパーゼＡ₂ 阻害作用による該酵素に
起因する様々な病態の治療および予防に用いることが期
待される。腫瘍細胞の殺細胞作用による腫瘍疾病の治療
および予防に用いることが期待される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ホスホリパーゼＡ₂ 阻
害作用および腫瘍細胞に対する殺細胞作用を有する新規
化合物、その製造法および用途に関する。

【０００２】

【従来の技術】ホスホリパーゼＡ₂ はリン脂質の２位の
アシル基のエステル結合を加水分解し、遊離脂肪酸を生
成する酵素である。炎症局所滲出液中など、いくつかの
疾患の病態と関連してホスホリパーゼＡ₂ が高濃度に検
出されることが知られている。また、ホスホリパーゼＡ
₂ が膜リン脂質からアラキドン酸を遊離し、アラキドン
酸カスケードによりプロスタグランジン、ロイコトリエ
ンなどの脂質性メディエーターを産生させることが示さ
れている。従って、ホスホリパーゼＡ₂ の酵素活性に対
する阻害物質が得られれば、該酵素の作用に起因または
関連する様々な病態を抑制し、予防あるいは治療するこ
とができると考えられる。

【０００３】ホスホリパーゼＡ₂ が関与すると考えられ
る病態としては、１）感染性、外傷性、薬物性などの外
因性およびリュウマチ性関節炎、痛風、乾鮮などの炎
症、２）肝炎、膵炎、腎炎などの内臓疾患、３）喘息、
アトピーなどのアレルギー性疾患およびリュウマチなど
の自己免疫疾患、４）脳梗塞、心筋梗塞などの虚血性疾
患および虚血性再還流時の障害、５）１）〜４）の疾患
に伴う疼痛または神経伝達過剰による神経痛などがあ
る。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】従来知られているホス
ホリパーゼＡ₂ 阻害物質としては、マノアライド、メパ
クリン、ｐ−ブロモフェナシルブロミドなどが存在する
が、上記病態を予防および治療するのには十分とは言え
ず、さらなるホスホリパーゼＡ₂ 阻害物質の開発が待た
れている。また、現在までに種々の抗腫瘍剤が開発さ
れ、実用化されているが、腫瘍疾患のより効果的な治療
および予防のために、さらに新たな有用物質が待たれて
いる。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、ホスホリパー
ゼＡ₂ 阻害作用および腫瘍細胞に対する殺細胞作用を有
する新規な化合物を提供することを目的としている。本
発明者らはホスホリパーゼＡ₂ の阻害剤を微生物代謝産
物に求めて探索した結果、カビの一種であるペニシリウ
ム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．）ＢＭ
−９９株がホスホリパーゼＡ₂ 阻害活性を有する化合物
を生産する事を見いだした。該微生物を培養し、培養物
からホスホリパーゼＡ₂ 阻害活性を有する２種類の化合
物を単離した。さらに該化合物の有用な生理活性につい
て鋭意研究を重ねた結果、腫瘍細胞に対し殺細胞作用を
有することを見いだした。さらに該培養物から該化合物
に類縁である化合物をも見出し本発明を完成するに至っ
た。

【０００６】すなわち、本発明は以下の構造式で示され
る化合物ＢＭ９９−１およびＢＭ９９−２および以下の
物理化学的性状を有するＢＭ９９−３またはその塩、ペ
ニシリウム属に属する菌株を培養し、その培養物より該
化合物を採取することを特徴とする製造方法、該化合物
またはその塩を含有してなるホスホリパーゼＡ₂ 阻害剤
および抗腫瘍剤である。

【０００７】本発明の化合物の物理化学的性状を以下に
列挙する。［１］ＢＭ９９−１の物理化学的性状１）構造式

【化３】２）形状：黄色粉末３）分子量：８２０４）分子式：Ｃ₅₀Ｈ₆₀Ｏ₁₀ ５）精密質量分析値（ｍ／ｚ）実測値：821.4224(MH)⁺ （ポジティブファブマスによ
る。）計算値：821.4265（Ｃ₅₀Ｈ₆₁Ｏ₁₀）６）比旋光度［α］_D ²⁵：-222゜（ｃ＝１．０，ＭｅＯ
Ｈ）７）紫外線吸収スペクトル（ｎｍ（ε））：216(51,00
0),240(30,000),267(30,000),302(14,000),393(20,000)
（メタノール溶液中）８）赤外線吸収スペクトル（ｃｍ^-1）：3200,2959,172
5,1645,1534,1451 （ＫＢｒ法）９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ）：207.
6(s),191.0(s),170.8(s),169.1(s),166.6(s),164.7(s),
159.6(s),154.4(s),152.0(s),145.3(s),145.3(s),137.2
(d),136.7(d),133.7(d),128.4(s),124.5(d),120.8(d),1
18.8(s),113.0(d),110.7(d),104.7(s),101.8(d),86.3
(s),71.3(d),64.6(t),56.1(d),55.9(s),48.4(d),44.7
(s),44.3(d),43.3(t),42.6(t),41.7(d),40.7(d),40.2
(t),37.5(s),37.3(t),37.3(t),34.4(d),33.8(d),32.4
(t),25.3(q),24.4(q),21.5(q),20.8(t),20.5(q),20.2
(q),20.0(q),18.5(q),18.3(q) （重メタノール中のケミ
カルシフト）１０）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、ア
セトンに可溶。クロロホルムに難溶。水に不溶。

【０００８】［２］ＢＭ９９−２の物理化学的性状１）構造式

【化４】２）形状：黄色の粉末３）分子量：８０６４）分子式：Ｃ₄₉Ｈ₅₈Ｏ₁₀ ５）精密質量分析値（ｍ／ｚ）実測値：807.4117(MH)⁺ （ポジティブファブマスによ
る。）計算値：807.4108（Ｃ₄₉Ｈ₅₉Ｏ₁₀）６）比旋光度［α］_D ²⁵：-503゜（ｃ＝１．０，ＭｅＯ
Ｈ）７）紫外線吸収スペクトル（ｎｍ（ε））：219(47,00
0),269(23,000),336(31,000)（メタノール溶液中）８）赤外線吸収スペクトル（ｃｍ^-1）：3200,2961,172
5,1620,1449（ＫＢｒ法）９）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ）：194.
7(s),194.0(s),178.5(s),171.0(s),166.4(s),165.4(s),
164.5(s),156.1(d),148.6(s),146.8(s),145.5(s),145.2
(s),136.7(d),133.6(d),129.3(s),121.0(d),116.6(s),1
12.8(d),111.5(d),106.9(d),105.0(s),101.8(d),86.6
(s),71.2(d),56.2(d),52.3(d),48.5(d),48.0(d),44.3
(d),43.9(s),42.5(t),40.6(d),40.1(t),38.5(d),38.0
(d),37.6(s),37.2(t),36.9(t),34.4(d),32.3(t),24.2
(q),22.8(q),21.4(q),20.6(t),20.5(q),20.2(q),20.2
(q),18.7(q),18.1(q) （重メタノール中のケミカルシフ
ト）１０）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、ア
セトンに可溶。クロロホルムに難溶。水に不溶。

【０００９】［３］ＢＭ９９−３の物理化学的性状１）構造式

【化５】と推定される。２）質量分析値（ｍ／ｚ）：805(M-H)^- （ネガティブフ
ァブマスによる。）３）紫外吸収スペクトル（ｎｍ）：388,300(sh),268,21
2 （メタノール溶液中）４）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ）：208.
17,190.66,170.80,166.65,162.63,156.79,151.54,145.3
1,145.08,139.27,136.72,133.71,128.77,122.78,121.0
1,115.74,112.88,106.23,104.70,101.74,86.36,71.26,6
4.65,62.38,56.35,56.01,48.32,44.66,44.38,43.52,42.
58,41.94,40.66,40.22,37.50,37.39,37.32,34.39,33.8
3,32.38,25.51,24.27,21.46,20.84,20.47,20.13,19.90,
18.43,18.24（重メタノール中のケミカルシフト）

【００１０】本発明化合物ＢＭ９９−１、ＢＭ９９−２
およびＢＭ９９−３は、常法にしたがって塩とすること
ができる。そのような塩としては例えばナトリウム、カ
リウム、カルシウム等のアルカリ金属との塩、アンモニ
ウム、トリエチルアミン、エタノールアミン等の有機ア
ミンとの塩またはリジン、アルギニン等の塩基性アミノ
酸との塩など、生理学的に許容される塩を形成させるこ
とができる。

【００１１】本発明化合物ＢＭ９９−１、ＢＭ９９−２
およびＢＭ９９−３を生産する菌株は、本発明者らが、
静岡県小笠郡小笠町にて採取した草地の土壌から分離さ
れたペニシリウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ
ｓｐ．）ＢＭ−９９株を挙げることができる。本菌株
の菌学的性状は次の通りである。

【００１２】（１）形態本菌株は、ツアペック・イーストエキストラクト寒天培
地、マルトエキストラクト寒天培地、バレイショ・ブド
ウ糖寒天培地で良好に生育し、分生子の着生も良好であ
る。ツアペック・イーストエキストラクト寒天培地とバ
レイショ・ブドウ糖寒天培地に生育したコロニーを光学
顕微鏡で観察すると、菌糸は隔壁を有し、よく分岐す
る。分生子柄は主に培地上の菌糸より気中に直立して長
さ３０〜９５μｍまで伸長し、幅は２〜４μｍである。
ペニシリは複輪生、散開型である。メトレは、長さ７〜
１０μｍ、幅２．５〜３．５μｍで、その先端にとっく
り型（ａｃｅｒｏｓｅ）の長さ７〜９μｍ、幅２〜
２．５μｍのフィアライドが存在する。分生子は、黄緑
色を呈し、直径２〜３μｍの球形から亜球形で、フィア
ライド上に連鎖して生じる。形成された分生子の連鎖
は、分散しやすい。

【００１３】（２）各種培地上での性状各種培地上で、２５℃、７日間培養した場合の肉眼的観
察結果を表１に、生育状態を表２に示した。なお、色調
の表示はカラー・ハーモニー・マニュアル(colar harmo
ny manual)（コンテイナー・コーポレーション・オブ・
アメリカ(Container Corporation of America)社製）の
標準色の色調コード番号に従った。

【表１】

【表２】

【００１４】（３）生理学的性質１）生育温度範囲および最適温度本菌株はポテトデキストロース寒天培地上において、生
育温度範囲は１１〜４０℃であり、最適生育温度は２５
〜３８℃である。２）生育ｐＨ範囲および最適ｐＨ本菌株はＢＭ９９−１、ＢＭ９９−２およびＢＭ９９−
３を生産する培地中３０℃において、ｐＨ２〜１１の範
囲で生育し、最適生育ｐＨはｐＨ４〜７である。３）好気性、嫌気性の区別：本菌株は好気性菌株であ
る。

【００１５】上記ＢＭ−９９株の形態的特徴、培養上の
諸性状、生理学的性状に基づき、既知菌種との比較を試
みた結果、本菌株をペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉ
ｕｍ）属に属する一菌株と同定し、ペニシリウム・エス
ピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．）ＢＭ−９９と
命名した。本菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究
所に微工研菌寄第１４２３１号（ＦＥＲＭＰ−１４２
３１）として寄託されている。

【００１６】ペニシリウム属の菌類の諸性質はきわめて
変異しやすく、一定したものではなく、自然的あるいは
通常行われる紫外線、Ｘ線または化学薬剤で人工的変異
手段によって容易に変化することは周知の通りである。
従って、本発明で使用しうる菌株は、人工的変異株は勿
論、自然変異株をも含め、ペニシリウム属に属するＢＭ
９９−１、ＢＭ９９−２またはＢＭ９９−３を生産する
能力を有する全ての菌株を包含するものである。

【００１７】本発明においては、ペニシリウム属に属す
るＢＭ９９−１、ＢＭ９９−２およびＢＭ９９−３生産
菌が培地で培養される。本菌の培養には、通常のカビの
培養法が一般に用いられる。培養培地としては、使用さ
れる微生物が利用する炭素源、窒素源、さらに必要に応
じて無機塩などを程よく含有する培地であればよく、合
成培地、半合成培地あるいは天然培地が用いられる。

【００１８】炭素源としては、グルコース、シュークロ
ース、グリセロール、フルクトース、マルトース、マン
ニトール、デキストラン、オート麦、ライ麦、澱粉、ジ
ャガイモ、トウモロコシ粉などが単独または組合わせて
用いられる。窒素源としては、ペプトン、肉エキス、酵
母エキス、麦芽エキス、乾燥酵母、コーンステープリカ
ー、カゼイン加水分解物、大豆粉、綿実粉、尿素、硫酸
アンモニウム、硝酸アンモニウムその他の有機、無機窒
素源が単独または組合わせて用いられる。

【００１９】このほか、例えばリン酸水素二ナトリウ
ム、リン酸二水素カリウム、塩化ナトリウム、塩化マグ
ネシウム、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウムなどの無
機塩や鉄、マンガン、亜鉛、コバルトなどの微量の重金
属塩も必要に応じて単独かまたは組合わせて培地に添加
される。また、培養中発泡の著しい時には、消泡剤とし
てシリコン化合物、高級アルコール、植物油などを用い
ることができる。

【００２０】培養方法は通常振盪培養または通気攪拌培
養などの好気的条件下が適している。培養温度は２０〜
３７℃の範囲が望ましいが、通常は２４〜３０℃に保つ
のがよい。培地のｐＨを４〜７の範囲に調整すると好結
果が得られる。培養時間は、培地の組成、温度条件に応
じて変化するが、通常２〜７日間培養するのが好まし
い。

【００２１】培養より生成したＢＭ９９−１、ＢＭ９９
−２およびＢＭ９９−３は、菌体内および培養濾液中に
含有されているが、通常、菌体内の方が蓄積される生成
量が多いので、培養物を遠心分離または濾過によって菌
体と培養濾液とに分離した後、菌体から目的物質の抽出
する方法が有利である。

【００２２】

【実施例】次に、実施例を挙げて、本発明を更に具体的
に説明する。

【００２３】＜実施例１＞５００ｍｌ容三角フラスコに
グルコース５％、大豆粉０．５％、麦芽エキス０．５
％、酵母エキス０．１％、ポリペプトン０．５％、硫酸
鉄０．０５％、硫酸マンガン０．０５％、硫酸マグネシ
ウム０．０５％を含む培地（ｐＨ６．５）を８０ｍｌず
つ分注し、１２１℃で２０分間蒸気滅菌したものに、ポ
テトデキストロース寒天培地上に生育させたペニシリウ
ム・エスピーＢＭ−９９株の菌糸をかき取って接種し、
２５℃で３０時間振盪培養して種培養液を得た。

【００２４】次に、上記の培地４０ｌを作製し、これを
５００ｍｌ三角スラスコに８０ｍｌずつ分注し、１２１
℃で２０分間蒸気滅菌したものに、種培養液を１％の割
合で移植し、２５℃で５日間振盪培養を行った。培養終
了後、培養液を遠心分離により培養上澄液と菌体に分け
た。得られた４０ｌ分の培養液の菌体にアセトン２７ｌ
を加えて一晩抽出した。アセトンでの抽出をさらに１回
行った後、抽出液を減圧濃縮して粗製物を得た。蒸留水
１２ｌで懸濁した後、酢酸エチル１２ｌを加えてよく攪
拌し、酢酸エチル層を分離した。酢酸エチルでの抽出を
さらに２回繰返した。

【００２５】減圧濃縮乾固した物質をクロロホルムに溶
解し、クロロホルムで平衡化したシリカゲル（ワコーゲ
ルＣ−２００、和光純薬社製、２００ｇ）のカラムに吸
着させた。クロロホルム−メタノール（１０：１、５：
１）の混合溶媒で溶出した分画を集め、減圧濃縮乾固し
た後、再度シリカゲルのカラムに吸着させた。ヘキサン
−酢酸エチル（１：２）の混合溶媒で活性成分が回収さ
れた。得られた活性画分を減圧濃縮乾固した後メタノー
ルに溶解し、この溶液をセファデックスＬＨ−２０（フ
ァルマシア社製）のカラムを用いてメタノール溶媒にて
ゲル濾過を行った。

【００２６】活性画分をメタノール２０ｍｌに溶解し、
次いで逆相クロマトグラフィーに付して精製した。すな
わち、逆相カラムのカプセルパックＣ１８ＡＧ１２０
（２０ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ、資生堂社製）を用
い、４０回に分けてカラムに付した。カラムは、９５％
アセトニトリル・水の移動相で１０ｍｌ／分で溶出し
た。カラムに接続したＵＶ検出器（３９０ｎｍ）が示す
１４分から１５分のピークを分取してＢＭ９９−２を２
００ｍｇ得、１８分から１９分のピークを分取してＢＭ
９９−１を６０ｍｇ得た。

【００２７】さらに、回収画分を再度逆相クロマトグラ
フィーに付した。すなわち、カプセルパックＣ１８Ａ
Ｇ１２０（２０ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ）を用い、
３回に分けてカラムに付した。カラムは１０ｍｌ／分の
流速で、８５％アセトニトリル・水の移動相で０分から
３０分溶出した後、３０分から４５分に８５％アセトニ
トリル・水からアセトニトリルのリニアグラジエントで
溶出し、４５分からはアセトニトリルで溶出をした。４
６．５分から４７．５分のピークを分取してＢＭ９９−
３を０．１ｍｇ得た。得られた化合物はいずれも、先に
示した物理化学的性状を示した。

【００２８】次に、本発明化合物の生理活性について例
を挙げて説明する。＜実施例２＞ホスホリパーゼＡ₂ 阻害作用酵素活性の測定は、ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−
３−ホスホエタノールアミンを基質とし、生成した遊離
脂肪酸を蛍光標識して定量した（藤田ら，実験医学,Vo
l.9,No.3,p.91(1991)）。ラット血小板由来のホスホリ
パーゼＡ₂ に対するＩＣ₅₀値はＢＭ９９−１が０．４４
μＭ、ＢＭ９９−２が０．５６μＭで、インドメタシン
のＩＣ₅₀値３９．８μＭよりも強い阻害作用を示した。
また、ブタ膵臓由来ホスホリパーゼＡ₂ （シグマ社製）
に対するＩＣ₅₀値はＢＭ９９−１が５１．７μＭ、ＢＭ
９９−２が３９．０μＭであった。

【００２９】＜実施例３＞腫瘍細胞に対する殺細胞作
用殺細胞作用の判定にはＭＴＴ法（Mosmann,T.,J.Immuno
l.Methods,65,55-63,(1983)）に若干の改良を加えたも
のを用いた。ＲＰＭＩ１６４０培地（日水製薬社製）を
用いて、ＨｅＬａ（ヒト子宮頸部ガン）を５×１０⁴ ｃ
ｅｌｌ／ｍｌ、Ｐ３８８（マウス白血病）を１×１０⁵
ｃｅｌｌ／ｍｌに調整し、９６ウェルマルチプレート
（ファルコン社製、Ｎｏ．３０７２）に１００μｌずつ
分注した。該培地を用いてＢＭ９９−１およびＢＭ９９
−２を調製し、上記９６ウェルマルチプレートに５０μ
ｌずつ添加した。ＣＯ₂ インキュベーターで３７℃、３
日間培養した。５ｍｇ／ｍｌに調製したＭＴＴ（シグマ
社製）を１０μｌ添加し、５時間反応した。

【００３０】上清を捨て、０．０４規定塩酸−イソプロ
パノール溶液１００μｌで懸濁し、水５０μｌを添加し
た後、マイクロプレートリーダー（東ソー社製、ＭＰＲ
Ａ４）にて測定を行った。すなわち、６２０ｎｍをリフ
ァレンスに設定し、５７０ｎｍの吸光度を測定して、サ
ンプルブランクに対する吸光度の％を求めた。表３にＨ
ｅＬａ細胞およびＰ３８８細胞に対するＥＤ₅₀値を記載
する。

【表３】

【００３１】

【発明の効果】これらの結果から明らかなように、新規
生理活性物質ＢＭ９９−１およびＢＭ９９−２はホスホ
リパーゼＡ₂ 阻害作用を有し、該酵素に起因する様々な
病態の治療および予防に用いることが期待される。ま
た、該化合物は腫瘍細胞の殺細胞作用を有し、腫瘍疾病
の治療および予防に用いることが期待される。新規化合
物ＢＭ９９−３はこれらの結果から明らかなようにＢＭ
９９−１およびＢＭ９９−２と類縁の化合物であり、同
様の生理活性が期待される。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＢＭ９９−１の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルであ
る。

【図２】ＢＭ９９−２の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルであ
る。

【図３】ＢＭ９９−３の¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルであ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｐ 17/06 Ｃ１２Ｒ 1:80） (72)発明者糟谷修静岡県藤枝市源助301番地科研製薬株式会社中央研究所内 (72)発明者二又待子静岡県藤枝市源助301番地科研製薬株式会社中央研究所内 (72)発明者二又克之静岡県藤枝市源助301番地科研製薬株式会社中央研究所内 (72)発明者井上圭三東京都江東区越中島１−３−17−605

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】以下の構造式で示される化合物ＢＭ９９−
１またはその塩。【化１】
【請求項２】以下の構造式で示される化合物ＢＭ９９−
２またはその塩。【化２】
【請求項３】以下の性状を有する化合物ＢＭ９９−３ま
たはその塩。１）質量分析値（ｍ／ｚ）：８０５(M-H)^-（ネガティブ
ファブマスによる。）２）紫外吸収スペクトル（ｎｍ）：388,300(sh),268,21
2（メタノール溶液中）３）¹³Ｃ−核磁気共鳴スペクトル（δ：ｐｐｍ）：208.
17,190.66,170.80,166.65,162.63,156.79,151.54,145.3
1,145.08,139.27,136.72,133.71,128.77,122.78,121.0
1,115.74,112.88,106.23,104.70,101.74,86.36,71.26,6
4.65,62.38,56.35,56.01,48.32,44.66,44.38,43.52,42.
58,41.94,40.66,40.22,37.50,37.39,37.32,34.39,33.8
3,32.38,25.51,24.27,21.46,20.84,20.47,20.13,19.90,
18.43,18.24,（重メタノール中のケミカルシフト）
【請求項４】ペニシリウム属に属する請求項１、２およ
び３に記載の化合物を生産する菌株を培養し、その培養
物より該化合物を採取することを特徴とする該化合物の
製造方法。
【請求項５】ペニシリウム属に属する菌株が、ペニシリ
ウム・エスピー（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．）Ｂ
Ｍ−９９（微工研菌寄第１４２３１号（ＦＥＲＭＰ−
１４２３１））である請求項４記載の製造法。
【請求項６】請求項１、２および３記載の化合物または
その塩を含有してなるホスホリパーゼＡ₂ 阻害剤。
【請求項７】請求項１、２および３記載の化合物または
その塩を含有してなる抗腫瘍剤。