JPH0725687B2 - ギンクゴ・ビロバ葉抽出液、製法および製剤 - Google Patents

ギンクゴ・ビロバ葉抽出液、製法および製剤

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JPH0725687B2
JPH0725687B2 JP2400221A JP40022190A JPH0725687B2 JP H0725687 B2 JPH0725687 B2 JP H0725687B2 JP 2400221 A JP2400221 A JP 2400221A JP 40022190 A JP40022190 A JP 40022190A JP H0725687 B2 JPH0725687 B2 JP H0725687B2
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クラウス−ペーター・シュバーベ
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ドクター・ビィルマール・シュバーベ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング・ウント・カンパニー
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明はギングゴ・ビロバ(Gink
go biloba:イチョウ)葉からの抽出液、抽出液の製造
方法および抽出液を含む医薬製剤に関する。
【0002】
【従来の技術】ギンクゴ・ビロバの葉から得られる抽出
物は、長い間末梢および脳動脈血循環障害の治療に使用
されてきた。有効成分としてフラボン配糖体を非常に豊
富に含むギンクゴ・ビロバ抽出物の製造方法は公知であ
る。DE−B1767098およびDE−B21174
29参照。また、これらの抽出物は、ギンクゴ・ビロバ
・モノ抽出物とも呼ばれる。
【0003】EP−A0324197には、葉の抽出後
に得られた低級アルコールまたはケトンの水溶液を微粒
の珪藻土の存在下で濃縮する、ギンクゴ・ビロバの葉の
抽出物の製造方法が記載されている。生成した水性懸濁
液を微粒の珪藻土によりろ過し、ろ液をブタノンで抽出
し、抽出物から溶媒を除く。
【0004】EP−A330567は、粉砕した葉を水
性ケトン化合物により抽出する、ギンクゴ・ビロバの葉
の抽出物の製造方法に関するものである。ビフラボンお
よび疎水性化合物が沈澱するまでこの抽出物を濃縮す
る。ろ過後、水性濃縮物をアルカリ性にすることによ
り、プロアントシアニジンが沈澱する。沈澱物を分離
し、ろ液を酸性化した後、硫酸アンモニウムの存在下C
4-6ケトン化合物により液体−液体−抽出を行う。ケト
ン化合物を除去した後、抽出物が得られる。
【0005】DE−A3514054は、ラクトン構造
を有するテルペノイド物質であるギンクゴ・ビロバ葉の
既知成分、ギングゴリド(中西、「ピュア・アンド・アプ
ライド・ケミストリー」(Pure and Applied Chemistr
y)、第14巻(1967)、89−113、および丸山
等、「テトラヘドロン・レターズ」(Tetrahedron Letter
s)(1967)、299−302および303−319、
および岡部等、「ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサエ
ティー」(J.Chem.Soc.)(1967)、2201−2
206参照)が、PAF(血小板活性化因子)により誘発
される疾患および類似症状の処置に使用され得ることを
開示している。
【0006】ギンクゴ・ビロバ葉中に含まれる別の物質
であるビロバリドの使用は、神経障害、脳障害、脊髄障
害および脳浮腫の処置に関するDE−A3338995
および対応するUS−A4571407から公知であ
る。ビロバリドはギンクゴリドに構造上関連したセスキ
テルペン・ラクトンである(中西等、メジャー等および
ウェインゲス等、「ジャーナル・オブ・アメリカン・ケ
ミカル・ソサエティー」(J.Am.Chem.Soc.)、第9
3巻(1971)、3544−3546参照)。
【0007】上記化合物に加えて、ギンクゴ・ビロバの
葉はまた、いわゆるギンクゴール酸(アナカルド酸)を含
む。これらの化合物は、0〜3個の二重結合を有するn
−C13−〜n−C19−アルキル基を含む6−アルキルサ
リチル酸である。ゲラーマン等、「フィトケミストリー」
(Phytochemistry)、第15巻(1976)、1959−
1961頁および「アナリティカル・ケミストリー」(An
alytic.Chem.)、第40巻(1968)、739−74
3頁参照。
【0008】「ギンクゴール」、すなわち対応するアルキ
ル基により置換されたフェノールは、ギンクゴール酸の
脱カルボキシル化により生合成的に、またはギンクゴ・
ビロバ葉の精製処理中に得られる。河村、日本、「ジャ
ーナル・オブ・ケミストリー」(J.Chem.)、第3巻(1
928)、91−93頁参照。
【0009】ギングゴ・ビロバにおけるギンクゴール酸
およびギンクゴールは、4位に別のフェノール性ヒドロ
キシル基を有する対応する誘導体、6−アルキルレゾル
シン酸または5−アルキルレゾルシンに随伴する。ゲラ
ーマン等、「フィトケミストリー」(Phytochemistry)、
第15巻(1976)、1959−1961頁参照。これ
らのレゾルシン誘導体は、トキシコデンドロン植物が誘
発する毒性作用並びに特に強いアレルギーおよび接触性
皮膚炎に関与する。ヒル等、「ジャーナル・オブ・アメ
リカン・ケミカル・ソサエティー」(J.Am.Chem.S
oc.)、第56巻(1934)、2736−2738頁参
照。
【0010】イチョウの果実との接触後に生ずる強いア
レルギー反応の症例は周知である。ソウァーズ等、「ア
ーカイブス・オブ・ダーマトロジー」(Arch.Dermato
l.)、第91巻(1965)、452−456頁および中
村、「コンタクト・ダーマティティス」(Contact Derma
titis)、第12巻(1985)、281−282頁参照。
イチョウの果実を食べた後の重い粘膜障害が記載されて
いる。ベッカーおよびスキップワース、「ジャーナル・
オブ・アメリカン・メディカル・アソシエーション」
(J.Am.Med.Assoc.)、第231巻(1975)、1
162−1163頁参照。また、イチョウの葉を集めた
り手を触れたときにアレルギー性皮膚反応が生じること
も多い。
【0011】ウルシ科(anacardiaceae)およびイチョウ
科(ginkgoaceae)由来のアルキルフェノール化合物によ
り誘発されるアレルギーの重要性は、アルキルフェノー
ル化合物により誘発されるアレルギーに対する特許文献
に記載された(US−A4428965参照)脱感作の物
質および方法の開発により明白である。
【0012】ギンクゴ・ビロバ葉から得られた市販の抽
出物は、50ないし10000ppmのギンクゴール酸を
含有する。
【0013】DE−B1767098およびDE−B2
117429における公知方法により製造されたギンク
ゴ・ビロバ葉からの抽出物は、抽出物の親油性成分が、
実質的に水非混和性の親油性溶媒、例えば含塩素脂肪族
低級炭化水素、例えば四塩化炭素による水性アセトン抽
出物の液体−液体−抽出により除去されるため、アルキ
ルフェノール化合物を実質的に含まない。しかしなが
ら、この段階で、治療上貴重なギンクゴリドおよびビロ
バリドはまた、かなり低減化されるため、DE−B21
17429の実施例1における最終生成物中のそれらの
含有率は、ギンクゴリドA、B、CおよびJの場合全部
で最大0.5%およびビロバリドの場合約0.3%であ
る。しかしながら、フラボン配糖体の量は、この段階中
にかなりの程度まで、すなわち粗抽出物中3〜4%から
最終生成物中約24%まで増加する。
【0014】従って、本発明の目的は、実質的にアルキ
ルフェノール化合物を含まず、フラボン配糖体を多量に
含む、ギンクゴ・ビロバ(Ginkgo biloba)葉からの抽
出液を提供するものであり、これは使用した葉中に存在
するすべてのギンクゴリド類およびビロバリド類を含
む。
【0015】本発明のもう1つの別の目的は実質的にア
ルキルフェノール化合物を含まないギンクゴ・ビロバ葉
からの抽出液−これはフラボン配糖体、ギンクゴリドお
よびビロバリドを多量に含む−の方法を提供するもので
ある。本発明の方法は、周知の方法であるDE−B17
67098およびDE−B2117429と対照的に、
塩素化脂肪族炭化水素を使用せず、アルキルフェノール
化合物の除去に成功した。技術的操作中の塩素化炭化水
素の使用は、職業的薬害、環境に対するこれらの化合物
の重大な危険および医薬組成物中への望ましくない残留
可能性のために非常に問題が多い。
【0016】DE−B2117429の方法に比較して
本発明の方法の別の利点は、褐変性を有するポリフェノ
ール化合物(プロアントシアニジン)の除去に鉛化合物を
使用しないということである。鉛化合物は、関与する人
間に対する健康上の危険およびその上、それらの適切な
処分にかかる費用はかなりである。
【0017】最後の本発明の目的は、フラボン配糖体、
ギンクゴリドおよびビロバリド高含有のギンクゴ・ビロ
バ抽出物を含む医薬製剤を提供するものであり、これに
は、アルキルフェノール化合物が除去されているため、
あきらかにアレルギー反応の実質的な危険性がない。
【0018】従って、本発明は実質的にアルキルフェノ
ール化合物を含まないギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液
に関するものであり、これはフラボン配糖体高含有であ
り、葉中に本来存在する大部分のギンクゴリド類および
ビロバリド類を含む。好ましくは、本発明の抽出物は下
記のものを含む。−フラボン配糖体20−30重量%、
特に22−26重量%−ギンクゴリドA、B、Cおよび
J(総量)2.5−4.5重量%−ビロバリド2.0−
4.0重量%−アルキルフェノール化合物10ppm未
満、特に1ppm未満、−プロアントシアニジン10重量
%未満
【0019】さらに、本発明は、請求項3−6に記載し
た工程を含むギンクゴ・ビロバ葉からのギンクゴ・ビロ
バ抽出物の製造方法に関する。DE−B1767098
に記載の親油性組成分の分離方法と対照的に、水性アル
コールまたは水性アセトン粗抽出液を塩素化脂肪族炭化
水素での液々抽出を直ちに行なわずに、むしろ、親油性
成分の多くは有機溶媒成分の蒸留と水での稀釈により、
最大10重量%、好ましくは5重量%まで沈澱させ、濾
過により分離する。アルキルフェノール化合物、クロロ
フィル、脂肪酸誘導体およびビフラボンは水に対する低
溶解性により沈澱し、濾過により分離することができ
る。これらの条件下、ギンクゴ・ビロバ抽出物の目的化
合物は溶解したまま残る。
【0020】ついで、メチルエチルケトンまたはメチル
エチルメトン/アセトン−抽出物をDE−B17670
98およびDE−B2117429により製造する。し
かしながら、DE−B2117429の方法とは対照的
に、プロアントシアニジン含量を10%以下に減らすた
めに鉛化合物またはポリアミドを使用せず、むしろ、ブ
タノン抽出物の分配は水と水と混和可能なC4−C5アル
コールの間で行い、この場合はプロアントシアニジンは
水層に残留する。
【0021】好ましい実施例において、メチルエチルケ
トン、またはメチルエチルケトン/アセトン抽出を直
接、親油性成分を含まない水性抽出液を水と混合可能な
4または5個のC−原子を有するアルカノールで抽出す
ることにより代替する。経済的な理由からn−ブタノー
ルは好ましい。塩化ナトリウムまたは硫酸アンモニウム
10−30重量%を水性抽出液に添加することができ
る。次に減量工程である、蒸留によりブタノールまたは
ペンタノール抽出物から溶媒を除き、水性エタノールの
20−60重量%中に5−20重量%の固体を含有する
溶液を調製し、この溶液を沸点60−100℃の脂肪族
炭化水素で多段階の液々抽出を行うことにより、アルキ
ルフェノール化合物は10ppm未満の含有量に減少させ
る。
【0022】さらに、本発明は、請求項7記載のギンク
ゴ・ビロバ抽出物を含有することを特徴とする医薬製剤
に関する。
【0023】薬理学的実験モデルにおいて、本発明によ
り製造した抽出物は顕著なラジカルスカベンジャー作用
および血液循環の刺激、虚血障害の抑制および血小板凝
集を阻害する性質を有する。
【0024】本発明のギンクゴ・ビロバ抽出物を医薬組
成物製造のための通常の方法で、溶液、被覆錠、錠剤ま
たは注射製剤を製造することができる。本発明の医薬製
剤は末梢または中枢動脈循環障害の処置に使用する。
【0025】実施例は本発明を具体的に説明するもので
あり、特にそうでないと言わないかぎり、部および百分
率は重量による。
【0026】 実施例1 乾燥ギンクゴ・ビロバ葉100kgを製粉機中で粉砕し、
4mm未満の粒径にする。60重量%の水性アセトン75
0kgを添加後、混合物を30分間57−59℃の温度に
て激しく撹拌する。固体残渣を濾過または遠心分離によ
り分離し、同一条件にてもう一度抽出を行う。第一およ
び二回の抽出工程からの抽出物を一緒にする。ギンクゴ
ール酸量は(乾燥抽出物にもとづき)約13000ppmで
ある。得られた抽出物は減圧下で濃縮し、30−40%
および最大値約5重量%のアセトンを含む固体に濃縮す
る。撹拌しつつ、水を添加して、濃縮物を2倍容量に稀
釈し、約12℃に放置冷却する。ギンクゴール酸、すな
わち葉中に存在するアルキルフェノールの大部分を含む
沈澱物が生成する。この温度にて1時間保った後、得ら
れた沈澱物を遠心分離し、捨てる。
【0027】得られた水性上清液中のギンクゴール酸含
有量(乾燥抽出物をもとに)約320ppmである。
【0028】硫酸アンモニウム30部を水性溶液100
部に添加する。混合物を撹拌する。硫酸アンモニウムの
溶解後、液々抽出を6:4−1:1の割合のメチルエチ
ルケトンとアセトンの混合物で2回行うと、添加した有
機溶媒は水性溶液の容積の半分になり、ポンプを使用
し、激しく撹拌した後、混合工程完了後に生成した上層
有機相を除去する。
【0029】ついで、メチルエチルケトン・アセトン溶
液を減圧下、固体含量50−70%まで濃縮する。この
濃縮物を固体含量10%まで水で稀釈する。
【0030】この実質的抽出水溶液をそれぞれ水溶液の
容量の半分のn−ブタノール飽和水と3回撹拌する。集
めたブタノール相は減圧下固体含量少なくとも50%ま
で濃縮する。高濃縮抽出物から共沸蒸留によりn−ブタ
ノールを除去するために、好ましくは水を添加する。得
られた水性濃縮物は水とエタノールで稀釈し、30重量
%水性エタノール中10重量%乾燥抽出物の溶液を得
る。
【0031】アルキルフェノール化合物を残留含量10
ppm以下に減らすために、この溶液を少なくとも3回室
温にて、各回溶液の容量1/3のn−ヘプタンと撹拌す
る。
【0032】水層を減圧下固体含量少なくとも50%以
上まで濃縮し、生成物最大温度約60−80℃にて、水
の含有量5%未満の乾燥抽出物に乾燥する。
【0033】ギンクゴ・ビロバ葉100kgから、フラボ
ン配糖体24.8重量%、ギンクゴリド3.2%、ビロ
バリド2.9%、プロアントシアニジド約5%およびア
ルキルフェノール化合物1ppm未満を含むギンクゴ・ビ
ロバ抽出物2.7kgを得る。
【0034】 実施例2 実施例1で得られた抽出水溶液を、親油性成分を主成分
とする沈澱物を遠心分離後、3回各回溶液の半分のブタ
ン−2−オール(第2ブチルアルコール)で3回撹拌す
る。
【0035】得られたブタン−2−オール溶液を減圧下
濃縮し、固体含量少なくとも50%の濃縮物を得る。高
濃縮物から共沸蒸留によりブタノールを除去するため
に、好ましくは水を添加する。水とエタノールで、溶液
中固体約10重量%とエタノール30重量%を含むよう
に稀釈し、溶液を3回各回溶液の1/3容量のシクロヘ
キサンと撹拌する。
【0036】水層を減圧下固体を少なくとも50%含む
ように濃縮し、水含量約5%未満の乾燥抽出物になるよ
う最高60−80℃の温度で乾燥する。
【0037】ギンクゴ・ビロバ葉100kgから、フラボ
ン配糖体25.3%、ギンクゴリド3.4%、ビロバリ
ド3.1%、プロアントシアニジン4.2%およびアル
キルフェノール化合物1ppm以下を含むギンクゴ・ビロ
バ抽出物2.9kgを得る。
【0038】 実施例3 経口投与用溶液 溶液100ml中 ギンクゴ・ビロバ抽出物 4.0g エタノール 50.0g 脱塩水を加えて、 100.0mlとする。
【0039】 実施例4 被覆錠
【0040】この発明により下記の各事項が可能とな
る。 (1) 本来葉中に存在していたギンクゴリド類および
ビロパリド類の大部分を含むことを特徴とする、実質的
にアルキルフェノール化合物を含まず、フラボン配糖体
含有量が増加している、ギンクゴ・ビロバ(Ginkgo b
iloba)葉からの抽出物。 (2) −フラボン配糖体20−30重量%、特に22−26重
量%−ギンクゴリドA、B、CおよびJ(総量)2.5−
4.5重量%−ビロバリド2.0−4.0重量%−アル
キルフェノール化合物10ppm未満、特に1ppm未満、お
よび−プロアントシアニジン10重量%未満を含む1の
抽出物。 (3) 実質的にアルキルフェノール化合物を含まず、
フラボン配糖体を多量および本来葉中に存在する成分の
大部分に相当するギンクゴリド類およびビロパリド類を
含むギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液の製造方法であ
り、その方法は、水性アセトン、炭素原子1−3の水性
アルカノールまたは無水メタノールでの葉の抽出、親油
性成分を除去する段階、硫酸アンモニウムで少なくとも
1回処理およびそれに続くメチルエチルケトンまたはメ
チルエチルケトンおよびアセトンの混合物での抽出から
なり、上記方法は、大部分の有機溶媒を水性有機溶媒を
含む葉からの抽出物から分離し、残る水性溶液は5−2
5重量%、好ましくは約15−20重量%固体含有率ま
で希釈し、放冷し、水にあまり溶解しない親油性成分か
ら沈殿形成するまで置き、その後この沈殿物を分離する
こと、および、濾液の抽出により直接製造されたブタノ
ールまたはペンタノール抽出液またはブタノールまたは
ペンタノールおよび水の間でのメチルエチルケトン−ア
セトン−抽出液の分配の後で得られた水性アルコール溶
液を、さらにアルキルフェノール化合物を分離するため
におよそ60−100℃の沸点をもつ脂肪族またはシク
ロ脂肪族溶媒で抽出することを特徴する製造法。 (4) −フラボン配糖体20−30重量%、特に22−26重
量%−ギンクゴリドA、B、CおよびJ(総量)2.5−
4.5重量%−ビロバリド2.0−4.0重量%−アル
キルフェノール化合物10ppm未満、特に1ppm未満、お
よび−プロアントシアニジン10重量%未満を含み、 (a)ギンクゴ・ビロバの生または乾燥緑葉を水性アセ
トン、炭素原子1−3の水性アルカノールまたは無水メ
タノールでおよそ40−100℃の温度で抽出し、 (b)有機溶媒の大部分を抽出液から分離して最大量1
0重量%、好ましくは5重量%にし、その際水を蒸留の
最終段階で加えることができ、 (c)残りの濃縮水性溶液を水で希釈して5−25重量
%、好ましくは15−20重量%固体含有率とし、沈殿
物が形成されるまで撹拌しながら25℃未満、好ましく
は約10−12℃の温度に放冷し、水にあまり溶けない
親油性成分から成るこの沈殿物を除去し、 (d)硫酸アンモニウムを残った水性溶液を加え、30
重量%含量とし、形成した溶液をメチルエチルケトンま
たはメチルエチルケトンとアセトンを9:1−4:6、
好ましくは6:4の割合で含む混合物で抽出し、 (e)得られた抽出液を50−70%固体含有率に濃縮
し、生じる濃縮物を水で5−20%固体含有率に希釈
し、 (f)生ずる溶液を水に混合しないブタノールまたはペ
ンタノールで多段階抽出に付し、 (g)ブタノールまたはペンタノール層を50−70%
固体含有率に濃縮し、 (h)濃縮物を十分な水およびエタノールで希釈し、2
0−60重量%水性エタノール中に5−20重量%の乾
燥抽出物を含む溶液を得、 (i)水性アルコール溶液をさらにアルキルフェノール
化合物を除去するために沸点が約60−100℃の脂肪
族もしくはシクロ脂肪族溶媒で抽出し、 (j)水相を減圧下濃縮し、60−80℃の最大温度で
乾燥して含水量5%未満の乾燥抽出物にする ことを特徴とするギンクゴ・ビロバ葉からの抽出液の製
造方法。 (5) 方法段階(d)および(e)を除き、(c)で
得られた水性溶液を段階(f)から(j)によりさらに
続けるが、段階(f)では塩化ナトリウムまたは硫酸ア
ンモニウム10−30重量%、好ましくは硫酸アンモニ
ウム20%を水性溶液に加え得る4の方法。 (6) n−ブタノールを段階(f)で使用する3−5
の何れか1項の方法。 (7) 1まは2のギンクゴ・ビロバ抽出物または3−
6の何れか1項により得られる抽出物含有を特徴とする
医薬。

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】−フラボン配糖体20−30重量%、特に
    22−26重量% −ギンクゴリドA、B、CおよびJ(総量)2.5−4.
    5重量% −ビロバリド2.0−4.0重量% −アルキルフェノール化合物10ppm未満、特に1ppm未
    満、および −プロアントシアニジン10重量%未満 を含み、 (a)ギンクゴ・ビロバの生または乾燥緑葉を水性アセ
    トン、炭素原子1−3の水性アルカノールまたは無水メ
    タノールでおよそ40−100℃の温度で抽出し、 (b)有機溶媒の大部分を抽出液から分離して最大量1
    0重量%にし、その際水を蒸留の最終段階で加えること
    ができ、 (c)残りの濃縮水性溶液を水で希釈して5−25重量
    %固体含有率とし、撹拌しながら25℃未満の温度で放
    冷し、沈殿物が形成されるまで放置し、水にあまり溶け
    ない親油性生物から成るこの沈殿物を除去し、 (d)硫酸アンモニウムを残った水性溶液を加え、生成
    した溶液をメチルエチルケトンまたはメチルエチルケト
    ンとアセトンの混合物で抽出し、 (e)得られた抽出液を50−70%固体含有率に濃縮
    し、生じる濃縮物を水で5−20%固体含有率に希釈
    し、 (f)生ずる溶液を水に混合しないブタノールまたはペ
    ンタノールで多段階抽出に付し、 (g)ブタノールまたはペンタノール層を50−70%
    固体含有率に濃縮し、 (h)濃縮物を十分な水およびエタノールで希釈し、2
    0−60重量%水性エタノール中に5−20重量%の乾
    燥抽出物を含む溶液を得、 (i)水性アルコール溶液をさらにアルキルフェノール
    化合物を除去するために沸点が約60−100℃の脂肪
    族もしくはシクロ脂肪族溶媒で抽出し、 (j)水相を減圧下濃縮し、60−80℃の最大温度で
    乾燥して含水量5%未満の乾燥抽出物にする ことを特徴とするギンクゴ・ビロバ(Ginkgo bilob
    a)葉からの抽出液の製造方法。
  2. 【請求項2】請求項1記載の方法により得られ得る抽出
    物を含む、末梢又は脳動脈血流症害の処置に使用する
    剤。
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