JPH07184670A - ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑制剤およびその中間体の酵素ヒドロキシル化製造法 - Google Patents
ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑制剤およびその中間体の酵素ヒドロキシル化製造法Info
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- JPH07184670A JPH07184670A JP6256548A JP25654894A JPH07184670A JP H07184670 A JPH07184670 A JP H07184670A JP 6256548 A JP6256548 A JP 6256548A JP 25654894 A JP25654894 A JP 25654894A JP H07184670 A JPH07184670 A JP H07184670A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 本発明は、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑制
剤としておよび／またはＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑
制剤の製造の中間体として有用な化合物の酵素ヒドロキ
シル化製造法を提供する。 【構成】 本発明の酵素ヒドロキシル化製造法は、ヒド
ロキシル化法を触媒しうる微生物、または該微生物から
誘導される酵素あるいは該酵素の構造を有する酵素を用
いることを特徴とする。
剤としておよび／またはＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑
制剤の製造の中間体として有用な化合物の酵素ヒドロキ
シル化製造法を提供する。 【構成】 本発明の酵素ヒドロキシル化製造法は、ヒド
ロキシル化法を触媒しうる微生物、または該微生物から
誘導される酵素あるいは該酵素の構造を有する酵素を用
いることを特徴とする。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤およびその中間体の酵素ヒドロキシル化製造
法、更に詳しくは、ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤
としておよび／またはＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制
の製造の中間体として有用な化合物の酵素ヒドロキシル
化法による製造法に関する。
ーゼ抑制剤およびその中間体の酵素ヒドロキシル化製造
法、更に詳しくは、ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤
としておよび／またはＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制
の製造の中間体として有用な化合物の酵素ヒドロキシル
化法による製造法に関する。
【０００２】
【発明の構成と効果】本発明は、式:
【化６】 (式中、Ｒはアルキルまたはアリール;Ｚは式:
【化７】 の開鎖成分基または式：
【化８】 のラクトン基；およびＲ2は水素、アルキル、アンモニ
ウム、アルキルアンモニウムまたはアルカリ金属であ
る)の化合物(Ｉ)またはその部分もしくは完全水素化類
縁体あるいは塩の製造法であって、式:
ウム、アルキルアンモニウムまたはアルカリ金属であ
る)の化合物(Ｉ)またはその部分もしくは完全水素化類
縁体あるいは塩の製造法であって、式:
【化９】 (式中、Ｒ,ＺおよびＲ2は上記式Ｉの場合と同意義であ
る)の化合物(ＩＩ)またはその部分もしくは完全水素化
類縁体あるいは塩を、該化合物(ＩＩ)またはその塩のヒ
ドロキシル化を触媒して、上記化合物(Ｉ)またはその塩
を形成しうる微生物と、または該微生物から誘導される
酵素あるいは該酵素の構造を有する酵素と接触せしめ、
次いでヒドロキシル化を行う工程から成り、上記微生物
はノカルジア(Ｎocardia)属、アミコラータ(Ａmycolat
a)属、サッカロポリスポラ(Ｓaccharopolyspora)属、ス
トレプトミセス(Ｓtreptomyces)属、アミコラトプシス
(Ａmycolatopsis)属、サッカロスリックス(Ｓaccaharot
hrix)属またはジルベールテラ(Ｇilbertella)属から選
ばれ、但し、化合物(ＩＩ)がコンパクチン(compactin)
のとき、微生物はアミコラータ属、ノカルジア属または
ストレプトミセス属でないことを特徴とする製造法を提
供するものである。
る)の化合物(ＩＩ)またはその部分もしくは完全水素化
類縁体あるいは塩を、該化合物(ＩＩ)またはその塩のヒ
ドロキシル化を触媒して、上記化合物(Ｉ)またはその塩
を形成しうる微生物と、または該微生物から誘導される
酵素あるいは該酵素の構造を有する酵素と接触せしめ、
次いでヒドロキシル化を行う工程から成り、上記微生物
はノカルジア(Ｎocardia)属、アミコラータ(Ａmycolat
a)属、サッカロポリスポラ(Ｓaccharopolyspora)属、ス
トレプトミセス(Ｓtreptomyces)属、アミコラトプシス
(Ａmycolatopsis)属、サッカロスリックス(Ｓaccaharot
hrix)属またはジルベールテラ(Ｇilbertella)属から選
ばれ、但し、化合物(ＩＩ)がコンパクチン(compactin)
のとき、微生物はアミコラータ属、ノカルジア属または
ストレプトミセス属でないことを特徴とする製造法を提
供するものである。
【０００３】本発明の酵素ヒドロキシル化法(製造法)
は、それ自体がＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活性を
呈しうる、および／または他のＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤の製造の中間体として使用しうる、化合物
(Ｉ)を得る有効な手段を付与する。すなわち、本発明の
ヒドロキシル化法を採用することにより、副生物の減少
または削除が達成され、またこのヒドロキシル化法は、
穏やかな反応条件下で行うことができる。以下、本発明
方法について詳述する。
は、それ自体がＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活性を
呈しうる、および／または他のＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤の製造の中間体として使用しうる、化合物
(Ｉ)を得る有効な手段を付与する。すなわち、本発明の
ヒドロキシル化法を採用することにより、副生物の減少
または削除が達成され、またこのヒドロキシル化法は、
穏やかな反応条件下で行うことができる。以下、本発明
方法について詳述する。
【０００４】定義 本明細書において、単独または他の基の一部として用い
る各種語句の定義は、以下の通りである。「酵素法」と
は、酵素または微生物を用いる方法を意味する。「アル
キル」とは、ノルマル鎖の炭素数１〜１２、好ましくは
１〜６の、必要に応じて置換された直鎖および分枝鎖炭
化水素基の両方を意味し、たとえばメチル、エチル、プ
ロピル、イソプロピル、ブチル、t−ブチル、イソブチ
ル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、
４,４−ジメチルペンチル、オクチル、２,２,４−トリ
メチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシ
ル、これらの各種分枝鎖異性体等が挙げられる。置換基
の具体例としては、ハロ(特にクロロ)、トリハロメチ
ル、アルコキシ(たとえば２つのアルコキシ置換基がア
セタールを形成する場合)、非置換アリール(たとえばフ
ェニル)、アルキル−アリールまたはハロアリールなど
のアリール、非置換シクロアルキルまたはアルキル−シ
クロアルキルなどのシクロアルキル、ヒドロキシまたは
保護されたヒドロキシ、カルボキシル、アルキルオキシ
カルボニル、アルキルアミノ、ジメチルアミノなどのジ
アルキルアミノ、アセチルアミノなどのアルキルカルボ
ニルアミノ、アミノ、アリールカルボニルアミノ、ニト
ロ、シアノ、チオール、およびアルキルチオの群から選
ばれる少なくとも１つの基が包含される。好ましいアル
キルの置換基は、ヒドロキシ基である。
る各種語句の定義は、以下の通りである。「酵素法」と
は、酵素または微生物を用いる方法を意味する。「アル
キル」とは、ノルマル鎖の炭素数１〜１２、好ましくは
１〜６の、必要に応じて置換された直鎖および分枝鎖炭
化水素基の両方を意味し、たとえばメチル、エチル、プ
ロピル、イソプロピル、ブチル、t−ブチル、イソブチ
ル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、
４,４−ジメチルペンチル、オクチル、２,２,４−トリ
メチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシ
ル、これらの各種分枝鎖異性体等が挙げられる。置換基
の具体例としては、ハロ(特にクロロ)、トリハロメチ
ル、アルコキシ(たとえば２つのアルコキシ置換基がア
セタールを形成する場合)、非置換アリール(たとえばフ
ェニル)、アルキル−アリールまたはハロアリールなど
のアリール、非置換シクロアルキルまたはアルキル−シ
クロアルキルなどのシクロアルキル、ヒドロキシまたは
保護されたヒドロキシ、カルボキシル、アルキルオキシ
カルボニル、アルキルアミノ、ジメチルアミノなどのジ
アルキルアミノ、アセチルアミノなどのアルキルカルボ
ニルアミノ、アミノ、アリールカルボニルアミノ、ニト
ロ、シアノ、チオール、およびアルキルチオの群から選
ばれる少なくとも１つの基が包含される。好ましいアル
キルの置換基は、ヒドロキシ基である。
【０００５】「アルケニル」とは、アルキルの場合に上述
した、必要に応じて置換された直鎖または分枝鎖炭化水
素基であって、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を
有するものを意味する。「シクロアルキル」とは、好まし
くは１〜３つの環およびホモ環式環１つ当り３〜１２、
好ましくは３〜８つの炭素を有する、必要に応じて置換
された飽和ホモ環式炭素環系を意味し、たとえばシクロ
プロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキ
シル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシ
ル、シクロドデシル、およびアダマンチルが挙げられ
る。任意の置換基の具体例としては、上記アルキル基の
少なくとも１つ、またはアルキルの置換基で上述した基
の少なくとも１つが包含される。
した、必要に応じて置換された直鎖または分枝鎖炭化水
素基であって、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を
有するものを意味する。「シクロアルキル」とは、好まし
くは１〜３つの環およびホモ環式環１つ当り３〜１２、
好ましくは３〜８つの炭素を有する、必要に応じて置換
された飽和ホモ環式炭素環系を意味し、たとえばシクロ
プロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキ
シル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロデシ
ル、シクロドデシル、およびアダマンチルが挙げられ
る。任意の置換基の具体例としては、上記アルキル基の
少なくとも１つ、またはアルキルの置換基で上述した基
の少なくとも１つが包含される。
【０００６】「アリール」とは、環部の炭素数６〜１２の
モノ環式またはジ環式置換または非置換芳香族基を意味
し、たとえばフェニル、ビフェニル、ナフチル、置換フ
ェニル、置換ビフェニルまたは置換ナフチルが挙げられ
る。置換基(好ましくは３つもしくはそれ以下)の具体例
としては、非置換アルキル、ハロアルキルまたはシクロ
アルキルアルキルなどのアルキル、ハロゲン、非置換ア
ルコキシまたはハロアルコキシなどのアルコキシ、ヒド
ロキシ、フェニルまたはハロフェニルなどのアリール、
フェノキシなどのアリールオキシ、アルキルカルボニル
オキシまたはアロイルオキシ、アリル、アルキルアミ
ノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニルアミノまた
はアリールカルボニルアミノなどのアミド、アミノ、ニ
トロ、シアノ、アルケニル、チオール、アルキルカルボ
ニルまたはアリールカルボニル、またはメチレンジオキ
シ(ここで、メチレン基は低級アルキル基、すなわち、
上述の炭素数１〜６のアルキル基、アリールアルケニル
基および／またはアルキルチオ基で置換されていてもよ
い)の群から選ばれる少なくとも１つの基が包含され
る。
モノ環式またはジ環式置換または非置換芳香族基を意味
し、たとえばフェニル、ビフェニル、ナフチル、置換フ
ェニル、置換ビフェニルまたは置換ナフチルが挙げられ
る。置換基(好ましくは３つもしくはそれ以下)の具体例
としては、非置換アルキル、ハロアルキルまたはシクロ
アルキルアルキルなどのアルキル、ハロゲン、非置換ア
ルコキシまたはハロアルコキシなどのアルコキシ、ヒド
ロキシ、フェニルまたはハロフェニルなどのアリール、
フェノキシなどのアリールオキシ、アルキルカルボニル
オキシまたはアロイルオキシ、アリル、アルキルアミ
ノ、ジアルキルアミノ、アルキルカルボニルアミノまた
はアリールカルボニルアミノなどのアミド、アミノ、ニ
トロ、シアノ、アルケニル、チオール、アルキルカルボ
ニルまたはアリールカルボニル、またはメチレンジオキ
シ(ここで、メチレン基は低級アルキル基、すなわち、
上述の炭素数１〜６のアルキル基、アリールアルケニル
基および／またはアルキルチオ基で置換されていてもよ
い)の群から選ばれる少なくとも１つの基が包含され
る。
【０００７】「ハロ」または「ハロゲン」とは、塩素、フッ
素、臭素または沃素を意味する。「塩」とは、酸性塩およ
び／または無機および／または有機塩基によって形成さ
れる塩基性塩を指称する。非毒性の医薬的に許容しうる
塩が好ましい。医薬的に許容しうる塩の具体例として
は、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウ
ム、リチウム、マグネシウム、亜鉛およびテトラメチル
アンモニウムなどのカチオンから形成される塩並びにア
ンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、
リシン、アルギニン、オルニチン(ornitine)、コリン、
Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイ
ン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフ
ェネチルアミン、１−p−クロロベンジル−２−ピロリ
ジン−１'−イル−メチルベンズイミダゾール、ジエチ
ルアミン、ピペラジンおよびトリス(ヒドロキシメチル)
アミノメタンなどのアミンから形成される塩が包含され
る。
素、臭素または沃素を意味する。「塩」とは、酸性塩およ
び／または無機および／または有機塩基によって形成さ
れる塩基性塩を指称する。非毒性の医薬的に許容しうる
塩が好ましい。医薬的に許容しうる塩の具体例として
は、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウ
ム、リチウム、マグネシウム、亜鉛およびテトラメチル
アンモニウムなどのカチオンから形成される塩並びにア
ンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、
リシン、アルギニン、オルニチン(ornitine)、コリン、
Ｎ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイ
ン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフ
ェネチルアミン、１−p−クロロベンジル−２−ピロリ
ジン−１'−イル−メチルベンズイミダゾール、ジエチ
ルアミン、ピペラジンおよびトリス(ヒドロキシメチル)
アミノメタンなどのアミンから形成される塩が包含され
る。
【０００８】「医薬的に許容しうるカチオン」とは、たと
えば上述の、医薬的に許容しうる塩を形成する陽カウン
ターイオンを意味する。「ＡＴＣＣ」とは、微生物寄託所
の、メリーランド州２０８５２、ロックビル、パークラ
ウン・ドライブ１２３０１のザ・アメリカン・タイプ・
カルチャー・コレクション(the Ａmerican Ｔype Ｃ
ulture Ｃollection)の受入番号を指称する。
えば上述の、医薬的に許容しうる塩を形成する陽カウン
ターイオンを意味する。「ＡＴＣＣ」とは、微生物寄託所
の、メリーランド州２０８５２、ロックビル、パークラ
ウン・ドライブ１２３０１のザ・アメリカン・タイプ・
カルチャー・コレクション(the Ａmerican Ｔype Ｃ
ulture Ｃollection)の受入番号を指称する。
【０００９】出発物質 本発明のヒドロキシル化法で使用すべき化合物(ＩＩ)
は、当業者に公知の方法によって得ることができる。か
かる化合物(ＩＩ)は、たとえばＵ.Ｓ.特許Ｎo.４４５０
１７１に開示されている。
は、当業者に公知の方法によって得ることができる。か
かる化合物(ＩＩ)は、たとえばＵ.Ｓ.特許Ｎo.４４５０
１７１に開示されている。
【００１０】好ましい化合物 下記式Ｉaを有する化合物(Ｉ)またはその部分もしくは
完全水素化類縁体あるいはアルカリ金属塩が好ましい。
完全水素化類縁体あるいはアルカリ金属塩が好ましい。
【化１０】 (式中、ＲはアルキルおよびＲ2は式Ｉの記載と同意義で
ある) 特に好ましい具体例は、式:
ある) 特に好ましい具体例は、式:
【化１１】 のメチルプラバスタチンまたはその部分もしくは完全水
素化類縁体あるいはアルカリ金属塩である。
素化類縁体あるいはアルカリ金属塩である。
【００１１】下記式ＩＩaを有する化合物(ＩＩ)または
その部分もしくは完全水素化類縁体あるいはアルカリ金
属塩が、出発物質としての使用に好適である。
その部分もしくは完全水素化類縁体あるいはアルカリ金
属塩が、出発物質としての使用に好適である。
【化１２】 (式中、ＲはアルキルおよびＲ2は式ＩＩの記載と同意義
である) 特に好ましい具体例は、式:
である) 特に好ましい具体例は、式:
【化１３】 のメチルコンパクチンまたはその部分もしくは完全水素
化類縁体あるいはアルカリ金属塩である。
化類縁体あるいはアルカリ金属塩である。
【００１２】二重結合が存在しない、化合物(Ｉ)、また
は本明細書に記載のいずれの化合物も、かかる二重結合
が存在する対応化合物を、当業者に公知の方法に従って
水素化することによって得ることができる。本発明方法
のいずれの生成物も、公知の方法、たとえば細胞または
細胞性物質の濾去により、適当な場合には、抽出、結晶
化、薄層またはカラムクロマトグラフィー、高性能液体
クロマトグラフィー等によって単離および精製しうる。
は本明細書に記載のいずれの化合物も、かかる二重結合
が存在する対応化合物を、当業者に公知の方法に従って
水素化することによって得ることができる。本発明方法
のいずれの生成物も、公知の方法、たとえば細胞または
細胞性物質の濾去により、適当な場合には、抽出、結晶
化、薄層またはカラムクロマトグラフィー、高性能液体
クロマトグラフィー等によって単離および精製しうる。
【００１３】本明細書において、上記メチルコンパクチ
ンおよびメチルプラバスタチンで示される構造を、これ
らの化合物の酸型と称す。これらの化合物のカルボキシ
ル基がアルカリ金属塩の形状にある場合、該化合物を塩
型と称す。以下で説明するように、本発明のヒドロキシ
ル化法を行うのに水性媒体の使用が好ましい。従って、
Ｚが上述の開鎖成分基である化合物を製造したり、ある
いは出発物質として用いることが好ましい。何故なら、
かかる化合物は、Ｚがラクトン基である対応化合物より
水溶性が比較的に大きいためである。Ｚがラクトン基で
ある化合物(ＩＩ)は、たとえば、本発明方法での使用に
先立ち、加水分解することによって開鎖型にすることが
できる。
ンおよびメチルプラバスタチンで示される構造を、これ
らの化合物の酸型と称す。これらの化合物のカルボキシ
ル基がアルカリ金属塩の形状にある場合、該化合物を塩
型と称す。以下で説明するように、本発明のヒドロキシ
ル化法を行うのに水性媒体の使用が好ましい。従って、
Ｚが上述の開鎖成分基である化合物を製造したり、ある
いは出発物質として用いることが好ましい。何故なら、
かかる化合物は、Ｚがラクトン基である対応化合物より
水溶性が比較的に大きいためである。Ｚがラクトン基で
ある化合物(ＩＩ)は、たとえば、本発明方法での使用に
先立ち、加水分解することによって開鎖型にすることが
できる。
【００１４】酵素および微生物 本発明方法で用いる酵素または微生物は、起源または純
度に拘らず、上述の変換を触媒する能力を有するもので
あれば、いずれの酵素または微生物であってもよい。触
媒酵素の源として適当な微生物の属としては、ノカルジ
ア、アミコラータ、サッカロポリスポラ、ストレプトミ
セス、アミコラトプシス、サッカロスリックスまたはジ
ルベールテラが包含される。本発明の使用に好適な具体
種としては、アミコラータ・オートトロフィカ(Ａmycol
ata autotrophica)(たとえばＡＴＣＣ３５２０４)、ス
トレプトミセス・カリホルニカス(Ｓtreptomyces cali
fornicus)(たとえばＡＴＣＣ１５４３６)、アミコラト
プシス・メディターラネイ(Ａmycolatopsis mediterra
nei)(たとえばＡＴＣＣ２１４１１)、サッカロスリック
ス・オストラリエンシス(Ｓaccharothrix australensi
s)(たとえばＡＴＣＣ３１４９７)、ジルベールテラ・ペ
ルシカリア(Ｇilbertella persicaria)(たとえばＡＴ
ＣＣ３８５９１)、サッカロポリスポラ・ヒルスタ(Ｓac
charopolyspora hirsuta)(たとえばＡＴＣＣ２７８７
５、２７８７６または２０５０１)、サッカロポリスポ
ラ・エリスラ(Ｓaccharopolyspora erythraea)(たとえ
ばＡＴＣＣ１１６３５)等が挙げられる。特に好ましい
のは、アミコラータ・オートトロフィカ(たとえばＡＴ
ＣＣ３５２０４)およびサッカロポリスポラ・ヒルスタ
(たとえばＡＴＣＣ２０５０１)である。
度に拘らず、上述の変換を触媒する能力を有するもので
あれば、いずれの酵素または微生物であってもよい。触
媒酵素の源として適当な微生物の属としては、ノカルジ
ア、アミコラータ、サッカロポリスポラ、ストレプトミ
セス、アミコラトプシス、サッカロスリックスまたはジ
ルベールテラが包含される。本発明の使用に好適な具体
種としては、アミコラータ・オートトロフィカ(Ａmycol
ata autotrophica)(たとえばＡＴＣＣ３５２０４)、ス
トレプトミセス・カリホルニカス(Ｓtreptomyces cali
fornicus)(たとえばＡＴＣＣ１５４３６)、アミコラト
プシス・メディターラネイ(Ａmycolatopsis mediterra
nei)(たとえばＡＴＣＣ２１４１１)、サッカロスリック
ス・オストラリエンシス(Ｓaccharothrix australensi
s)(たとえばＡＴＣＣ３１４９７)、ジルベールテラ・ペ
ルシカリア(Ｇilbertella persicaria)(たとえばＡＴ
ＣＣ３８５９１)、サッカロポリスポラ・ヒルスタ(Ｓac
charopolyspora hirsuta)(たとえばＡＴＣＣ２７８７
５、２７８７６または２０５０１)、サッカロポリスポ
ラ・エリスラ(Ｓaccharopolyspora erythraea)(たとえ
ばＡＴＣＣ１１６３５)等が挙げられる。特に好ましい
のは、アミコラータ・オートトロフィカ(たとえばＡＴ
ＣＣ３５２０４)およびサッカロポリスポラ・ヒルスタ
(たとえばＡＴＣＣ２０５０１)である。
【００１５】微生物の使用に関し、上述の変換を触媒す
る能力を有するいずれの微生物細胞性物質をも使用し
て、本発明方法を実施しうる。細胞は、元の状態の湿潤
細胞、あるいは凍結乾燥、噴霧乾燥または加熱乾燥など
による乾燥細胞の状態で使用しうる。また細胞は、破壊
細胞または細胞抽出物などの処理細胞物質の状態でも使
用しうる。細胞または細胞性物質、たとえば単離真菌菌
糸体は、フリー状態で、または物理的吸着あるいは閉じ
込めなどによって支持体に固定して使用することができ
る。本発明方法の実施に際し、少なくとも１種の微生物
を使用しうる。
る能力を有するいずれの微生物細胞性物質をも使用し
て、本発明方法を実施しうる。細胞は、元の状態の湿潤
細胞、あるいは凍結乾燥、噴霧乾燥または加熱乾燥など
による乾燥細胞の状態で使用しうる。また細胞は、破壊
細胞または細胞抽出物などの処理細胞物質の状態でも使
用しうる。細胞または細胞性物質、たとえば単離真菌菌
糸体は、フリー状態で、または物理的吸着あるいは閉じ
込めなどによって支持体に固定して使用することができ
る。本発明方法の実施に際し、少なくとも１種の微生物
を使用しうる。
【００１６】本発明方法は、使用する微生物の生長に続
いて実施されてよく、たとえば出発物質である化合物
(ＩＩ)の存在下あるいは非存在下で微生物を生長させ、
微生物物質を回収し、好ましくは洗浄し(たとえば水
で)、次いで得られる微生物物質を出発物質である化合
物(ＩＩ)と接触せしめる。また本発明方法は、現場での
発酵および反応によって、すなわち、活発に生長する微
生物存在下の反応によっても実施することができる。反
応は、静かな(静止)状態下、または撹拌を用いて行うこ
とができる。出発物質の化合物(ＩＩ)を活発に生長する
培養物に加えるときは、フラスコ振盪培養あるいは通気
兼撹拌などの撹拌の使用が好ましい。かかる場合に、消
泡剤を使用しうる。
いて実施されてよく、たとえば出発物質である化合物
(ＩＩ)の存在下あるいは非存在下で微生物を生長させ、
微生物物質を回収し、好ましくは洗浄し(たとえば水
で)、次いで得られる微生物物質を出発物質である化合
物(ＩＩ)と接触せしめる。また本発明方法は、現場での
発酵および反応によって、すなわち、活発に生長する微
生物存在下の反応によっても実施することができる。反
応は、静かな(静止)状態下、または撹拌を用いて行うこ
とができる。出発物質の化合物(ＩＩ)を活発に生長する
培養物に加えるときは、フラスコ振盪培養あるいは通気
兼撹拌などの撹拌の使用が好ましい。かかる場合に、消
泡剤を使用しうる。
【００１７】微生物の生長は、当業者によって、たとえ
ば炭素および窒素源などの栄養素および微量元素を含有
する適当な培地の使用によって達成される。同化しうる
炭素源の具体例としては、グルコース、グリセロール、
マルトース、デキストリン、スターチ、ラクトース、ス
クロース、糖密、大豆油、綿実油等が挙げられる。同化
しうる窒素源の具体例としては、大豆ミール、ピーナッ
ツミール、綿実ミール、魚ミール、コーン浸出液、ペプ
トン、米ぬか、肉エキス、酵母、酵母エキス、硝酸ナト
リウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等が挙げ
られる。かかる培地に、塩化ナトリウム、リン酸塩、炭
酸カルシウムなどの無機塩を加えてもよい。また少量の
金属塩または重金属を加えてもよい。
ば炭素および窒素源などの栄養素および微量元素を含有
する適当な培地の使用によって達成される。同化しうる
炭素源の具体例としては、グルコース、グリセロール、
マルトース、デキストリン、スターチ、ラクトース、ス
クロース、糖密、大豆油、綿実油等が挙げられる。同化
しうる窒素源の具体例としては、大豆ミール、ピーナッ
ツミール、綿実ミール、魚ミール、コーン浸出液、ペプ
トン、米ぬか、肉エキス、酵母、酵母エキス、硝酸ナト
リウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等が挙げ
られる。かかる培地に、塩化ナトリウム、リン酸塩、炭
酸カルシウムなどの無機塩を加えてもよい。また少量の
金属塩または重金属を加えてもよい。
【００１８】微生物の生長の種々の段階で、同一または
異なる培地を使用しうる。微生物の生長に好ましい培地
は、後記実施例に記載のもので、該培地は本発明方法で
採用する微生物の生長に使用しうる。酵素を用いると
き、上述の微生物から誘導される酵素が好ましく、ある
いは合成または他の方法で製造したものでもよい。たと
えば、これらの酵素は遺伝子工学設計の宿主細胞から誘
導しうる。遺伝子工学設計の宿主細胞自体、あるいは他
の方法で変性された細胞の使用も意図されるが、この場
合、かかる細胞は上記列挙した属の微生物から誘導され
る酵素の構造を有する酵素を産生しうることが条件であ
る。
異なる培地を使用しうる。微生物の生長に好ましい培地
は、後記実施例に記載のもので、該培地は本発明方法で
採用する微生物の生長に使用しうる。酵素を用いると
き、上述の微生物から誘導される酵素が好ましく、ある
いは合成または他の方法で製造したものでもよい。たと
えば、これらの酵素は遺伝子工学設計の宿主細胞から誘
導しうる。遺伝子工学設計の宿主細胞自体、あるいは他
の方法で変性された細胞の使用も意図されるが、この場
合、かかる細胞は上記列挙した属の微生物から誘導され
る酵素の構造を有する酵素を産生しうることが条件であ
る。
【００１９】反応条件 本発明方法は、水性培地(たとえば緩衝水性培地)で行っ
てよい。水性相は便宜上、水、好ましくは脱イオン水、
あるいは適当水性緩衝剤溶液、特にリン酸塩緩衝剤溶液
である。本発明のヒドロキシル化法にあっては、水性培
地の使用が好ましい。
てよい。水性相は便宜上、水、好ましくは脱イオン水、
あるいは適当水性緩衝剤溶液、特にリン酸塩緩衝剤溶液
である。本発明のヒドロキシル化法にあっては、水性培
地の使用が好ましい。
【００２０】また本発明での反応は、有機培地または有
機培地と水性培地の混合物である培地で行ってもよい。
有機または有機／水性培地の使用は、出発物質として水
溶性の小さい化合物(ＩＩ)、たとえばＺがラクトン基で
ある化合物(ＩＩ)の可溶化を高めうる。水溶性の小さい
出発物質は、たとえばメチルまたはエチルアルコールな
どの有機溶剤に溶解し、該溶液を変換用の水性培地に加
えることができる。かかる有機培地を形成する液体は水
に不混和性であってよく、あるいは好ましくは、水に混
合性のものであってよい。有機培地の具体例としては、
トルエン、ヘキサン、ベンゼン、アセトン、ジメチルス
ルホキシド、シクロヘキサン、キシレン、トリクロロト
リフルオロエタン、メチルもしくはエチルアルコールま
たはブタノールなどのアルカノール等が挙げられる。
機培地と水性培地の混合物である培地で行ってもよい。
有機または有機／水性培地の使用は、出発物質として水
溶性の小さい化合物(ＩＩ)、たとえばＺがラクトン基で
ある化合物(ＩＩ)の可溶化を高めうる。水溶性の小さい
出発物質は、たとえばメチルまたはエチルアルコールな
どの有機溶剤に溶解し、該溶液を変換用の水性培地に加
えることができる。かかる有機培地を形成する液体は水
に不混和性であってよく、あるいは好ましくは、水に混
合性のものであってよい。有機培地の具体例としては、
トルエン、ヘキサン、ベンゼン、アセトン、ジメチルス
ルホキシド、シクロヘキサン、キシレン、トリクロロト
リフルオロエタン、メチルもしくはエチルアルコールま
たはブタノールなどのアルカノール等が挙げられる。
【００２１】出発物質は、反応培地に加えるに先立ち、
たとえば水またはアルコールに溶解することが好まし
い。反応培地は、液体培地１ml当り、約０.５〜３mgの
化合物(ＩＩ)(出発物質)を含有することが好ましい。反
応培地のpＨは、約６.０〜７.５が好ましい。本発明の
ヒドロキシル化反応を実施するため、水または有機アル
コール(たとえばメチルもしくはエチルアルコールなど
のアルカノール)を加えてもよい。これらの物質は、化
合物(ＩＩ)(出発物質)に対してモル過剰、好ましくは多
大モル過剰をもたらす量で使用することが好ましい。
たとえば水またはアルコールに溶解することが好まし
い。反応培地は、液体培地１ml当り、約０.５〜３mgの
化合物(ＩＩ)(出発物質)を含有することが好ましい。反
応培地のpＨは、約６.０〜７.５が好ましい。本発明の
ヒドロキシル化反応を実施するため、水または有機アル
コール(たとえばメチルもしくはエチルアルコールなど
のアルカノール)を加えてもよい。これらの物質は、化
合物(ＩＩ)(出発物質)に対してモル過剰、好ましくは多
大モル過剰をもたらす量で使用することが好ましい。
【００２２】本発明方法で微生物細胞を用いる場合、そ
の添加量は、化合物(ＩＩ)(出発物質)１mg当り約１０〜
１０００mgの量が好ましい。本発明方法で酵素を用いる
場合、その添加量は、化合物(ＩＩ)(出発物質)１mg当り
約１〜１００mgの量が好ましい。反応培地は、約２７〜
４０℃の温度に保持することが好ましく、最も好ましく
は、約２８〜３４℃に保持する。反応時間は、微生物細
胞によって産生される酵素の量、あるいは微生物細胞の
使用量、およびその比活性に応じて、適当に変えること
ができる。反応時間の典型例は、約２.５〜７２時間で
ある。なお、反応時間は、反応温度の上昇および／また
は反応溶液に加える酵素量の増大によって、縮小しても
よい。
の添加量は、化合物(ＩＩ)(出発物質)１mg当り約１０〜
１０００mgの量が好ましい。本発明方法で酵素を用いる
場合、その添加量は、化合物(ＩＩ)(出発物質)１mg当り
約１〜１００mgの量が好ましい。反応培地は、約２７〜
４０℃の温度に保持することが好ましく、最も好ましく
は、約２８〜３４℃に保持する。反応時間は、微生物細
胞によって産生される酵素の量、あるいは微生物細胞の
使用量、およびその比活性に応じて、適当に変えること
ができる。反応時間の典型例は、約２.５〜７２時間で
ある。なお、反応時間は、反応温度の上昇および／また
は反応溶液に加える酵素量の増大によって、縮小しても
よい。
【００２３】ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤の製造 ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ(３−ヒドロキシ−３−メチ
ルグルタリル補酵素Ａリダクターゼ、ＥＣ１.１.１.３
４)は、コレステロール生合成の基本酵素である。この
酵素の抑制剤は、抗コレステロール血症剤として、すな
わち、血漿コレステロール量の低下または維持の用途が
認められる。ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤は、高
コレステロール血症の治療や予防に加えて、アテローム
硬化症、高リポタンパク血症、および／または高リピド
血症の治療や予防の用途も認められる。
ルグルタリル補酵素Ａリダクターゼ、ＥＣ１.１.１.３
４)は、コレステロール生合成の基本酵素である。この
酵素の抑制剤は、抗コレステロール血症剤として、すな
わち、血漿コレステロール量の低下または維持の用途が
認められる。ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤は、高
コレステロール血症の治療や予防に加えて、アテローム
硬化症、高リポタンパク血症、および／または高リピド
血症の治療や予防の用途も認められる。
【００２４】上記化合物(ＩＩ)は(たとえばメチルコン
パクチン)それ自体、ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活
性を呈することができ、および／またはＨＭＧ−ＣoＡ
リダクターゼ抑制活性を有する他の化合物の製造の中間
体として使用しうる。後者の場合、本発明はさらに、上
記本発明方法に従ってヒドロキシル化を行った後、形成
されるヒドロキシル化生成物をＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤の製造に用いる(たとえば各種基を脱保護、
付加または他の方法で変性する)方法から成る方法を提
供する。好ましくは、このようにして製造した抑制剤
は、その製造原料のヒドロキシル化生成物が有しうるよ
うなＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活性と比べて該活
性が増大している。
パクチン)それ自体、ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活
性を呈することができ、および／またはＨＭＧ−ＣoＡ
リダクターゼ抑制活性を有する他の化合物の製造の中間
体として使用しうる。後者の場合、本発明はさらに、上
記本発明方法に従ってヒドロキシル化を行った後、形成
されるヒドロキシル化生成物をＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤の製造に用いる(たとえば各種基を脱保護、
付加または他の方法で変性する)方法から成る方法を提
供する。好ましくは、このようにして製造した抑制剤
は、その製造原料のヒドロキシル化生成物が有しうるよ
うなＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制活性と比べて該活
性が増大している。
【００２５】本発明方法に従って得られるＨＭＧ−Ｃo
Ａリダクターゼ抑制剤は、たとえば、当業者にとって公
知の方法に従い選ばれた方式および用量で、哺乳動物
(特にヒト)に投与することができる。
Ａリダクターゼ抑制剤は、たとえば、当業者にとって公
知の方法に従い選ばれた方式および用量で、哺乳動物
(特にヒト)に投与することができる。
【００２６】本発明のＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制
剤の特に好ましい製造法は、(Ａ)Ｒが
剤の特に好ましい製造法は、(Ａ)Ｒが
【化１４】 およびＲ2がＨである化合物(ＩＩa)、またはその塩を、
アミコラータ・オートトロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)
またはサッカロポリスポラ・ヒルスタの亜種コベンシス
(kobensis)(ＡＴＣＣ２０５０１)でヒドロキシル化し
て、式：
アミコラータ・オートトロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)
またはサッカロポリスポラ・ヒルスタの亜種コベンシス
(kobensis)(ＡＴＣＣ２０５０１)でヒドロキシル化し
て、式：
【化１５】 の構造を有するメチルプラバスタチンまたはそのアルカ
リ金属（特にナトリウムまたはリチウム)塩を得ること
から成る。
リ金属（特にナトリウムまたはリチウム)塩を得ること
から成る。
【００２７】
【実施例】次に挙げる実施例は、本発明の好ましい具体
例を示すが、特許請求の範囲に記載の技術的範囲または
精神を限定するものではない。これらの実施例で用いる
培地の成分は、以下の通りである。 培地 培地組成 Ｆ７ 麦芽エキス１０g／Ｌ、酵母エキス１０g／Ｌ、ペプトン１g／Ｌ、 デキストロース２０g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(オートクレーブに よる滅菌処理の前にpＨ７.０に調整) Ｋ２８ 薬物培地(Ｐharmamedia)２５g／Ｌ、セレロース６９g／Ｌ、ＣaＣ Ｏ3９g／Ｌ、Ｋ2ＨＰＯ4 ０.１g／Ｌ、全体を水道水で１Ｌ(オー トクレーブによる滅菌処理の前にpＨ６.８〜７.０に調整) Ｆ４ トリプトン５g／Ｌ、麦芽エキス３g／Ｌ、グルコース１０g／Ｌ、 酵母エキス３g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(オートクレーブ中滅菌) Ｆ４６ グリセロール１０g／Ｌ、マルトース４０g／Ｌ、トーストしたニヌ トリゾイ(Ｎutrisoy)粉末３０g／Ｌ、ペプトン１０g／Ｌ、噴霧乾 燥したコーン浸出液１０g／Ｌ、ＭgＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０.５g／Ｌ 、全体を水道水で１Ｌ(オートクレーブによる滅菌処理の前にpＨ５ .３に調整)
例を示すが、特許請求の範囲に記載の技術的範囲または
精神を限定するものではない。これらの実施例で用いる
培地の成分は、以下の通りである。 培地 培地組成 Ｆ７ 麦芽エキス１０g／Ｌ、酵母エキス１０g／Ｌ、ペプトン１g／Ｌ、 デキストロース２０g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(オートクレーブに よる滅菌処理の前にpＨ７.０に調整) Ｋ２８ 薬物培地(Ｐharmamedia)２５g／Ｌ、セレロース６９g／Ｌ、ＣaＣ Ｏ3９g／Ｌ、Ｋ2ＨＰＯ4 ０.１g／Ｌ、全体を水道水で１Ｌ(オー トクレーブによる滅菌処理の前にpＨ６.８〜７.０に調整) Ｆ４ トリプトン５g／Ｌ、麦芽エキス３g／Ｌ、グルコース１０g／Ｌ、 酵母エキス３g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(オートクレーブ中滅菌) Ｆ４６ グリセロール１０g／Ｌ、マルトース４０g／Ｌ、トーストしたニヌ トリゾイ(Ｎutrisoy)粉末３０g／Ｌ、ペプトン１０g／Ｌ、噴霧乾 燥したコーン浸出液１０g／Ｌ、ＭgＳＯ4・７Ｈ2Ｏ ０.５g／Ｌ 、全体を水道水で１Ｌ(オートクレーブによる滅菌処理の前にpＨ５ .３に調整)
【００２８】 培地 培地組成 Ｍ１２４ セレロース１０g／Ｌ、ＮＺアミンＢ １５g／Ｌ、酵母エキス１ ０g／Ｌ、ＮaＣl ５g／Ｌ、ＣaＣＯ3 １g／Ｌ、全体を水道水 で１Ｌ(オートクレーブによる滅菌処理の前にpＨ６.８〜７.０ に調整) ブイヨン１ ビーフインフュージョン３００g／Ｌ、カザミノ酸，テクニカル (注１) １７.５g／Ｌ、スターチ１.５g／Ｌ、全体を蒸留水または脱イ オン水で１Ｌ(沸とう加熱して完全溶解、最終pＨ７.４) ブイヨン２ トリプチケース・ペプトン１７g／Ｌ、フィトン・ペプトン３g／ (注２) Ｌ、ＮaＣl ５g／Ｌ、Ｋ2ＨＰＯ4２.５g／Ｌ、デキストロース ２.５g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(アートクレーブ中滅菌) Ｙ１７ 酵母窒素ベース６.７g／Ｌ、グルコース５０g／Ｌ、シグマ(Ｓi gma)アデニンＨＣl ０.０９g／Ｌ、シグマ１−チロシン０.０ ６g／Ｌ、ディフコ(Ｄifco)カザミノ酸２g／Ｌ(沸とう加熱およ びミックス)、寒天２０g／Ｌ、全体を蒸留水で１Ｌ(オートクレ ーブ中滅菌) 注１)ミューラー−ヒントン(Ｍueller−Ｈinton)ブイヨ
ン(ディフコ商標) 注２)トリプチケースソイブイヨン(ＢＢＬ商標)
ン(ディフコ商標) 注２)トリプチケースソイブイヨン(ＢＢＬ商標)
【００２９】実施例１ １本の凍結バイアルのアミコラータ・オートトロフィカ
(ＡＴＣＣ３５２０４)および１本の凍結バイアルのサッ
カロポリスポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２
０５０１)を解凍し、これらを別々のそれぞれ１００ml
のＦ４培地を含有する５００mlフラスコへ接種するのに
用いる。各フラスコを約２８０rpm，２５℃の振盪器に
設置し、７２時間振盪する。７２時間Ａ.オートトロフ
ィカ培養ブイヨンの各２.５mlアリコートを用い、５０m
lのＦ７培地含有の６つの２５０mlフラスコおよび５０m
lのＫ２８培地含有の６つの２５０mlフラスコへ接種す
る。同様に、７２時間Ｓ.ヒルスタ培養ブイヨンの各２.
５mlアリコートを用い、５０mlのＦ７培地含有の６つの
２５０mlフラスコおよび５０mlのＫ２８培地含有の６つ
の２５０mlフラスコへ接種する。この結果、トータル２
４のフラスコが存在する。２４全てのフラスコを振盪器
に設置し、約２８０rpm，２５℃で振盪する。２４時間
の振盪後、それぞれ培養した３つのＦ７フラスコおよび
３つのＫ２８フラスコに、フィルター滅菌した５mg／ml
のメチルコンパクチン塩溶液１mlを無菌的に加える。
(塩溶液はラクトンから、該ラクトンを最小量のエタノ
ールに溶解し、約１５mlの水を加え[幾つかの沈澱物が
生成]、pＨを約１１.８に調整し、沈澱物が溶解するま
で６５℃ウォーターバスで培養し、次いでpＨを注意深
く７.５まで降下せしめることによって製造する。蒸留
水を加えて、計算濃度を５mg／mlに調整する。)この時
点で、新しい２つのフラスコを追加し、各培地の非接種
フラスコに塩を投入して、非生物学的変性の対照とす
る。以後、これらのフラスコに、接種したフラスコと同
じ処理を行う。
(ＡＴＣＣ３５２０４)および１本の凍結バイアルのサッ
カロポリスポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２
０５０１)を解凍し、これらを別々のそれぞれ１００ml
のＦ４培地を含有する５００mlフラスコへ接種するのに
用いる。各フラスコを約２８０rpm，２５℃の振盪器に
設置し、７２時間振盪する。７２時間Ａ.オートトロフ
ィカ培養ブイヨンの各２.５mlアリコートを用い、５０m
lのＦ７培地含有の６つの２５０mlフラスコおよび５０m
lのＫ２８培地含有の６つの２５０mlフラスコへ接種す
る。同様に、７２時間Ｓ.ヒルスタ培養ブイヨンの各２.
５mlアリコートを用い、５０mlのＦ７培地含有の６つの
２５０mlフラスコおよび５０mlのＫ２８培地含有の６つ
の２５０mlフラスコへ接種する。この結果、トータル２
４のフラスコが存在する。２４全てのフラスコを振盪器
に設置し、約２８０rpm，２５℃で振盪する。２４時間
の振盪後、それぞれ培養した３つのＦ７フラスコおよび
３つのＫ２８フラスコに、フィルター滅菌した５mg／ml
のメチルコンパクチン塩溶液１mlを無菌的に加える。
(塩溶液はラクトンから、該ラクトンを最小量のエタノ
ールに溶解し、約１５mlの水を加え[幾つかの沈澱物が
生成]、pＨを約１１.８に調整し、沈澱物が溶解するま
で６５℃ウォーターバスで培養し、次いでpＨを注意深
く７.５まで降下せしめることによって製造する。蒸留
水を加えて、計算濃度を５mg／mlに調整する。)この時
点で、新しい２つのフラスコを追加し、各培地の非接種
フラスコに塩を投入して、非生物学的変性の対照とす
る。以後、これらのフラスコに、接種したフラスコと同
じ処理を行う。
【００３０】同様に、それぞれ培養した３つのＦ７フラ
スコおよび３つのＫ２８フラスコに、滅菌５００＋μg
／ml用量のコンパクチンを加える。新しい２つのフラス
コを追加し、各培地の非接種フラスコに、コンパクチン
を投入する。(接種コンパクチンフラスコの使用目的
は、コンパクチンのヒドロキシル化が正常に起っている
ことを示す、陽性対照としての役目を果すことである。
非接種フラスコは、基質の可能性のある非生物学的変化
のための対照として役立つ。)振盪をさらに２４時間再
開する。次いで全てのフラスコに、前に投入したものと
同じ２回目用量の塩を入れる。さらにまた振盪を２４時
間再開した後、それぞれ培地−基質組合せにつき１つを
含む、８つのフラスコの培養物を回収する(時間Ｔ1に
て)。回収フラスコのブイヨンを、基質およびヒドロキ
シル化生成物のアッセイに付す。さらに２４時間の振盪
後、１０メチルコンパクチン塩サンプルおよび１０コン
パクチンサンプルを含む、残った２０のフラスコの培養
物を回収する(時間Ｔ2にて)。これらのブイヨンを適当
な基質−生成物アッセイに付す。
スコおよび３つのＫ２８フラスコに、滅菌５００＋μg
／ml用量のコンパクチンを加える。新しい２つのフラス
コを追加し、各培地の非接種フラスコに、コンパクチン
を投入する。(接種コンパクチンフラスコの使用目的
は、コンパクチンのヒドロキシル化が正常に起っている
ことを示す、陽性対照としての役目を果すことである。
非接種フラスコは、基質の可能性のある非生物学的変化
のための対照として役立つ。)振盪をさらに２４時間再
開する。次いで全てのフラスコに、前に投入したものと
同じ２回目用量の塩を入れる。さらにまた振盪を２４時
間再開した後、それぞれ培地−基質組合せにつき１つを
含む、８つのフラスコの培養物を回収する(時間Ｔ1に
て)。回収フラスコのブイヨンを、基質およびヒドロキ
シル化生成物のアッセイに付す。さらに２４時間の振盪
後、１０メチルコンパクチン塩サンプルおよび１０コン
パクチンサンプルを含む、残った２０のフラスコの培養
物を回収する(時間Ｔ2にて)。これらのブイヨンを適当
な基質−生成物アッセイに付す。
【００３１】結果を下記表１および２に示す。
【表１】
【表２】
【００３２】実施例２ １本の凍結バイアルのサッカロポリスポラ・ヒルスタ亜
種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)を解凍し、これを１
００mlのＦ４培地を含有する５００mlフラスコへ接種す
るのに用いる。フラスコを約２８０rpm，２５℃の振盪
器に設置し、７２時間振盪する。７２時間ブイヨンのア
リコートを用い、４５mlのＫ２８培地含有の２つの２５
０mlフラスコに接種する。２つのフラスコを振盪器に設
置し、約２８０rpm，２５℃で振盪する。２４時間の振
盪後、メチルコンパクチン塩を水に溶解して溶液を得、
これをフィルター滅菌する。この溶液の一部を、１つの
Ｋ２８フラスコに加える。６時間後、同フラスコに上記
溶液の同量部を加える。第２Ｋ２８フラスコにも、第３
非接種Ｋ２８フラスコと同様に一部の溶液を入れる。３
つ全てのフラスコを振盪器に設置し、振盪を１８時間再
開する。
種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)を解凍し、これを１
００mlのＦ４培地を含有する５００mlフラスコへ接種す
るのに用いる。フラスコを約２８０rpm，２５℃の振盪
器に設置し、７２時間振盪する。７２時間ブイヨンのア
リコートを用い、４５mlのＫ２８培地含有の２つの２５
０mlフラスコに接種する。２つのフラスコを振盪器に設
置し、約２８０rpm，２５℃で振盪する。２４時間の振
盪後、メチルコンパクチン塩を水に溶解して溶液を得、
これをフィルター滅菌する。この溶液の一部を、１つの
Ｋ２８フラスコに加える。６時間後、同フラスコに上記
溶液の同量部を加える。第２Ｋ２８フラスコにも、第３
非接種Ｋ２８フラスコと同様に一部の溶液を入れる。３
つ全てのフラスコを振盪器に設置し、振盪を１８時間再
開する。
【００３３】次いで第１フラスコに、３回目用量を入れ
る。６時間後、第１フラスコに４回目用量(最終)を入
れ、第２フラスコに２回目用量(最終)を入れ、そして非
接種フラスコに２回目用量(最終)を入れる。さらに４２
時間の振盪後、３つのフラスコの培養物を回収し、かか
る全てのブイヨンをメチルコンパクチンおよびメチルプ
ラバスタチンのアッセイに付す。結果を下記表３に示
す。
る。６時間後、第１フラスコに４回目用量(最終)を入
れ、第２フラスコに２回目用量(最終)を入れ、そして非
接種フラスコに２回目用量(最終)を入れる。さらに４２
時間の振盪後、３つのフラスコの培養物を回収し、かか
る全てのブイヨンをメチルコンパクチンおよびメチルプ
ラバスタチンのアッセイに付す。結果を下記表３に示
す。
【表３】
【００３４】実施例３ それぞれ１本の凍結バイアルのアミコラータ・オートト
ロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)、ストレプトミセス・カ
リホルニカス(ＡＴＣＣ１５４３６)、アミコラータ・ハ
イドロカーボンオキシダンス(Amycolata hydrocarbonox
ydans)(ＡＴＣＣ１５１０４)、アミコラトプシス・メデ
ィターラネイ(ＡＴＣＣ２１４１１)、アミコラトプシス
・ファスティディオーサ(Amycolatopsis fastidiosa)
(ＡＴＣＣ３１１８１)およびサッカロポリスポラ・ヒル
スタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)を解凍し、こ
れらを１００mlのＦ７培地を含有する５００ml発芽フラ
スコへ接種するのに用いる。全てのフラスコを約２８０
rpm，２５℃の振盪器に設置し、７２時間振盪する。各
発芽フラスコの１０mlアリコートを用い、それぞれ１２
０mlのＫ２８培地含有の別々のフラスコに接種する。次
いで、全てのフラスコを振盪器へ戻す。２４時間後、各
フラスコに５００μg／mlのフィルター滅菌したコンパ
クチン(酸型)を加える。再度、フラスコを振盪器へ戻
す。さらに２４時間後、各フラスコから１５mlアリコー
トを取出し、後のアッセイのため凍結する(Ｔ1)。２回
目５００μg／ml用量の滅菌酸型コンパクチンを各フラ
スコに加え、該フラスコを振盪器へ戻す。その２４時間
後に、各フラスコから２回目の１５mlアリコートを取出
し、後のアッセイのため凍結する(Ｔ2)。さらに２４時
間後、各フラスコから最終１５mlアリコートを取出し、
後のアッセイのため凍結する(Ｔ3)。
ロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)、ストレプトミセス・カ
リホルニカス(ＡＴＣＣ１５４３６)、アミコラータ・ハ
イドロカーボンオキシダンス(Amycolata hydrocarbonox
ydans)(ＡＴＣＣ１５１０４)、アミコラトプシス・メデ
ィターラネイ(ＡＴＣＣ２１４１１)、アミコラトプシス
・ファスティディオーサ(Amycolatopsis fastidiosa)
(ＡＴＣＣ３１１８１)およびサッカロポリスポラ・ヒル
スタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)を解凍し、こ
れらを１００mlのＦ７培地を含有する５００ml発芽フラ
スコへ接種するのに用いる。全てのフラスコを約２８０
rpm，２５℃の振盪器に設置し、７２時間振盪する。各
発芽フラスコの１０mlアリコートを用い、それぞれ１２
０mlのＫ２８培地含有の別々のフラスコに接種する。次
いで、全てのフラスコを振盪器へ戻す。２４時間後、各
フラスコに５００μg／mlのフィルター滅菌したコンパ
クチン(酸型)を加える。再度、フラスコを振盪器へ戻
す。さらに２４時間後、各フラスコから１５mlアリコー
トを取出し、後のアッセイのため凍結する(Ｔ1)。２回
目５００μg／ml用量の滅菌酸型コンパクチンを各フラ
スコに加え、該フラスコを振盪器へ戻す。その２４時間
後に、各フラスコから２回目の１５mlアリコートを取出
し、後のアッセイのため凍結する(Ｔ2)。さらに２４時
間後、各フラスコから最終１５mlアリコートを取出し、
後のアッセイのため凍結する(Ｔ3)。
【００３５】全てのサンプルを解凍し、アッセイに付
す。結果を下記表４〜６に示す。
す。結果を下記表４〜６に示す。
【表４】
【表５】
【表６】
【００３６】実施例４ ４６時間培養のサッカロポリスポラ・ヒルスタ亜種コベ
ンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)(２８℃で生長)およびアミ
コラータ・オートトロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)(２
５℃で生長)を用い、各種培地のフラスコ(５０ml培地／
２５０mlフラスコ)に接種する。フラスコ１つに、５ml
の接種物を用いる。以下の培地：Ｆ７、Ｆ４６、Ｋ２
８、Ｍ１２４、ブイヨン１(ミューラー−ヒントン)、ブ
イヨン２[トリプチケースソイブイヨン(ＴＳＢ)]または
Ｙ１７のそれぞれを含有する２つの別々のフラスコに、
Ｓ.ヒルスタを接種する。各培地の一方のフラスコを約
２８０rpm，２５℃の振盪器に設置し、各培地の他方の
フラスコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置する。
別途Ｆ７培地およびＫ２８培地のそれぞれのフラスコに
接種し、３２℃のウォーターバス振盪器に置く。
ンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)(２８℃で生長)およびアミ
コラータ・オートトロフィカ(ＡＴＣＣ３５２０４)(２
５℃で生長)を用い、各種培地のフラスコ(５０ml培地／
２５０mlフラスコ)に接種する。フラスコ１つに、５ml
の接種物を用いる。以下の培地：Ｆ７、Ｆ４６、Ｋ２
８、Ｍ１２４、ブイヨン１(ミューラー−ヒントン)、ブ
イヨン２[トリプチケースソイブイヨン(ＴＳＢ)]または
Ｙ１７のそれぞれを含有する２つの別々のフラスコに、
Ｓ.ヒルスタを接種する。各培地の一方のフラスコを約
２８０rpm，２５℃の振盪器に設置し、各培地の他方の
フラスコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置する。
別途Ｆ７培地およびＫ２８培地のそれぞれのフラスコに
接種し、３２℃のウォーターバス振盪器に置く。
【００３７】それぞれＦ７培地およびＫ２８培地の２つ
の別々のフラスコに、Ａ.オートトロフィカを接種す
る。各培地の一方の接種フラスコを約２８０rpm，２５
℃の振盪器に設置し、各培地の他方の接種フラスコを約
２８０rpm，２８℃の振盪器に設置する。２４時間後、
各フラスコに５００μg／g用量のフィルター滅菌したコ
ンパクチン(酸型)を加える。これらのフラスコを、同温
度の振盪器へ戻す。さらに２４時間後、各フラスコから
１０mlアリコートを取出し、後のアッセイのため凍結す
る(Ｔ1)。各フラスコに、２回目の５００μg／g用量の
滅菌酸型コンパクチンを加え、これらのフラスコを再
度、同温度の振盪器へ戻す。さらに４８時間後、２回目
の１０mlアリコートを採取する(Ｔ2)。Ｔ1サンプルを解
凍し、Ｔ2サンプルと共にアッセイに付す。結果を下記
表７〜９に示す。
の別々のフラスコに、Ａ.オートトロフィカを接種す
る。各培地の一方の接種フラスコを約２８０rpm，２５
℃の振盪器に設置し、各培地の他方の接種フラスコを約
２８０rpm，２８℃の振盪器に設置する。２４時間後、
各フラスコに５００μg／g用量のフィルター滅菌したコ
ンパクチン(酸型)を加える。これらのフラスコを、同温
度の振盪器へ戻す。さらに２４時間後、各フラスコから
１０mlアリコートを取出し、後のアッセイのため凍結す
る(Ｔ1)。各フラスコに、２回目の５００μg／g用量の
滅菌酸型コンパクチンを加え、これらのフラスコを再
度、同温度の振盪器へ戻す。さらに４８時間後、２回目
の１０mlアリコートを採取する(Ｔ2)。Ｔ1サンプルを解
凍し、Ｔ2サンプルと共にアッセイに付す。結果を下記
表７〜９に示す。
【００３８】
【表７】
【表８】
【表９】
【００３９】実施例５ ２５℃のＦ４培地で生長した６７時間培養の各種微生物
を用い、これらを５０mlのＦ７培地含有の２５０mlフラ
スコ、および５０mlのＫ２８培地含有の２５０mlフラス
コに接種する。フラスコ１つに、５mlの接種物を用い
る。用いた微生物は、セルロモナス・セルランス(Cellu
monas cellulans)(ＡＴＣＣ１２８３０)、エルスコビア
・サンシネオリティカ(Oerskovia xanthineolytica)(Ａ
ＴＣＣ２７４０２)、プロミクロモノスポラ・シトレ(Pr
omicromonospora citrea)(ＡＴＣＣ１５９０８)、サッ
カロモノスポラ・ビリディス(Saccharomonospora virid
is)(ＡＴＣＣ１５７３６)、サッカロポリスポラ・ヒル
スタ(ＡＴＣＣ２７８７５)、サッカロスリックス・オス
トラリエンシス(ＡＴＣＣ３１４９７)およびストレプト
ミセス・ハルステジィ(Streptomyces halstedii)(ＡＴ
ＣＣ１３４４９)である。サッカロモノスポラ・ビリデ
ィスおよびＳ.ヒルスタ(ＡＴＣＣ２７８７５)変換フラ
スコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置し、他の培
養物は約２８０rpm，２５℃の振盪器に設置する。な
お、サッカロポリスポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(Ａ
ＴＣＣ２０５０１)対照を、２５℃と２８℃の両方で用
いる。
を用い、これらを５０mlのＦ７培地含有の２５０mlフラ
スコ、および５０mlのＫ２８培地含有の２５０mlフラス
コに接種する。フラスコ１つに、５mlの接種物を用い
る。用いた微生物は、セルロモナス・セルランス(Cellu
monas cellulans)(ＡＴＣＣ１２８３０)、エルスコビア
・サンシネオリティカ(Oerskovia xanthineolytica)(Ａ
ＴＣＣ２７４０２)、プロミクロモノスポラ・シトレ(Pr
omicromonospora citrea)(ＡＴＣＣ１５９０８)、サッ
カロモノスポラ・ビリディス(Saccharomonospora virid
is)(ＡＴＣＣ１５７３６)、サッカロポリスポラ・ヒル
スタ(ＡＴＣＣ２７８７５)、サッカロスリックス・オス
トラリエンシス(ＡＴＣＣ３１４９７)およびストレプト
ミセス・ハルステジィ(Streptomyces halstedii)(ＡＴ
ＣＣ１３４４９)である。サッカロモノスポラ・ビリデ
ィスおよびＳ.ヒルスタ(ＡＴＣＣ２７８７５)変換フラ
スコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置し、他の培
養物は約２８０rpm，２５℃の振盪器に設置する。な
お、サッカロポリスポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(Ａ
ＴＣＣ２０５０１)対照を、２５℃と２８℃の両方で用
いる。
【００４０】２４時間後、各フラスコに５００μg／g用
量のコンパクチンを加える。さらに２４時間後に、各フ
ラスコに２回目の５００μg／g用量のコンパクチンを加
える。９６時間後、各フラスコから１５mlアリコートを
取出し、後のアッセイのため−５０℃で凍結する。これ
らのサンプルを解凍し、アッセイに付す。結果を下記表
１０および１１に示す。
量のコンパクチンを加える。さらに２４時間後に、各フ
ラスコに２回目の５００μg／g用量のコンパクチンを加
える。９６時間後、各フラスコから１５mlアリコートを
取出し、後のアッセイのため−５０℃で凍結する。これ
らのサンプルを解凍し、アッセイに付す。結果を下記表
１０および１１に示す。
【００４１】
【表１０】
【表１１】
【００４２】実施例６ ８つのＡＴＣＣムコラレス(Mucorales、ケカビ目)真菌
および１つのスタウロホマ(Staurophoma)種ＡＴＣＣ１
４２８８を、よく生長した斜面培養から、Ｆ４培地の発
芽フラスコ(１００mlのＦ４培地／５００mlフラスコ)に
接種し、２５℃のスロー振盪器(約２００rpm)に設置す
る。８つのムコラレス真菌は、アブシディア・ラモサ(A
bsidia ramosa)(ＡＴＣＣ１１６１３)、シルシネラ・ム
スカ(Circinella muscae)(ＡＴＣＣ１６００８)、カニ
ングハメラ・エチヌラタ(Cunninghamella echinulata)
変異菌エチヌラタ(ＡＴＣＣ３６１９０)、カニングハメ
ラ・エチヌラタ変異菌エレガンス(elegans)(ＡＴＣＣ８
６８８Ａ)、ジルベールテラ・ペルシカリア(ＡＴＣＣ３
８５９１)、リゾムーコル・ミエヘイ(Rhizomucor miehe
i)(ＡＴＣＣ２６９１２)、リゾプス・オリゴスポラス(R
hizopus oligosporus)(ＡＴＣＣ２２９５９)およびリゾ
プス・ストロニファー(Rhizopus stolonifer)(ＡＴＣＣ
１４０３７)である。７２時間の振盪後、全ての発芽フ
ラスコ内の生長は、１つの大きな固体真菌集団である
Ｃ.エチヌラタ変異菌エチヌラタブイヨンの場合を除
き、良好である。この真菌集団を捨てる。残りの７つの
ムコラレスフラスコ、および１つのスタウロホマフラス
コをそれぞれ用い、Ｆ７培地およびＫ２８培地の生変換
フラスコ(２５０mlフラスコ当り５０ml培地を含有)に接
種する。フラスコ１つに、２mlの接種物を用いる。全て
のフラスコを２５℃の一定スピード(約２８０rpm)振盪
器に設置する。
および１つのスタウロホマ(Staurophoma)種ＡＴＣＣ１
４２８８を、よく生長した斜面培養から、Ｆ４培地の発
芽フラスコ(１００mlのＦ４培地／５００mlフラスコ)に
接種し、２５℃のスロー振盪器(約２００rpm)に設置す
る。８つのムコラレス真菌は、アブシディア・ラモサ(A
bsidia ramosa)(ＡＴＣＣ１１６１３)、シルシネラ・ム
スカ(Circinella muscae)(ＡＴＣＣ１６００８)、カニ
ングハメラ・エチヌラタ(Cunninghamella echinulata)
変異菌エチヌラタ(ＡＴＣＣ３６１９０)、カニングハメ
ラ・エチヌラタ変異菌エレガンス(elegans)(ＡＴＣＣ８
６８８Ａ)、ジルベールテラ・ペルシカリア(ＡＴＣＣ３
８５９１)、リゾムーコル・ミエヘイ(Rhizomucor miehe
i)(ＡＴＣＣ２６９１２)、リゾプス・オリゴスポラス(R
hizopus oligosporus)(ＡＴＣＣ２２９５９)およびリゾ
プス・ストロニファー(Rhizopus stolonifer)(ＡＴＣＣ
１４０３７)である。７２時間の振盪後、全ての発芽フ
ラスコ内の生長は、１つの大きな固体真菌集団である
Ｃ.エチヌラタ変異菌エチヌラタブイヨンの場合を除
き、良好である。この真菌集団を捨てる。残りの７つの
ムコラレスフラスコ、および１つのスタウロホマフラス
コをそれぞれ用い、Ｆ７培地およびＫ２８培地の生変換
フラスコ(２５０mlフラスコ当り５０ml培地を含有)に接
種する。フラスコ１つに、２mlの接種物を用いる。全て
のフラスコを２５℃の一定スピード(約２８０rpm)振盪
器に設置する。
【００４３】２４時間後、２つの非接種フラスコ、Ｆ７
培地およびＫ２８培地の各１つを含む、全てのフラスコ
に、５００μg／ml用量のコンパクチンを入れる。全て
のフラスコを、２８０rpm，２５℃の振盪器へ戻す。さ
らに２４時間後、全てのフラスコに２回目の５００μg
／ml用量のコンパクチンを入れ、次いで振盪器へ戻す。
さらに４８時間後、各フラスコから１５〜２０mlのサン
プルを取り、アッセイに付す。結果は、以下の通りであ
る。ジルベールテラ・ペルシカリアＦ７−コンパクチン
６２１μg／g；プラバスタチン２７４μg／g；プラバス
タチン：副生物の比２.３：１；およびＫ２８−コンパ
クチン８２２μg／g；プラバスタチン５４μg／g；プラ
バスタチン：副生物の比３.４：１。他の培養物の２つ
は、せいぜい、痕跡量のプラバスタチンが認められる
(アブシディアおよびリゾプス・オリゴスポラス)。他の
全てはプラバスタチンに対して陰性であった。
培地およびＫ２８培地の各１つを含む、全てのフラスコ
に、５００μg／ml用量のコンパクチンを入れる。全て
のフラスコを、２８０rpm，２５℃の振盪器へ戻す。さ
らに２４時間後、全てのフラスコに２回目の５００μg
／ml用量のコンパクチンを入れ、次いで振盪器へ戻す。
さらに４８時間後、各フラスコから１５〜２０mlのサン
プルを取り、アッセイに付す。結果は、以下の通りであ
る。ジルベールテラ・ペルシカリアＦ７−コンパクチン
６２１μg／g；プラバスタチン２７４μg／g；プラバス
タチン：副生物の比２.３：１；およびＫ２８−コンパ
クチン８２２μg／g；プラバスタチン５４μg／g；プラ
バスタチン：副生物の比３.４：１。他の培養物の２つ
は、せいぜい、痕跡量のプラバスタチンが認められる
(アブシディアおよびリゾプス・オリゴスポラス)。他の
全てはプラバスタチンに対して陰性であった。
【００４４】実施例７ Ｆ４培地中２日、３日および４日経過したサッカロポリ
スポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)
接種物を用い(１００mlのＦ４培地／５００mlフラス
コ、それぞれ凍結バイアルで接種)、Ｋ２８培地の生変
換フラスコ(５０mlのＫ２８／２５０mlフラスコ)に接種
する。５mlの接種物を用い、各発芽フラスコから３つの
Ｋ２８培地フラスコに接種する。３日経過の発芽フラス
コの接種物を用い、異なる容量の接種物で３回Ｋ２８培
地フラスコに接種する。詳しくは、０.２５ml、１.０m
l、２.５ml、７.５mlおよび１０ml容量を用いた。全て
のフラスコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置す
る。２４時間後、各フラスコに５００μg／ml用量のコ
ンパクチンナトリウム塩を加える。さらに２４時間後
に、各フラスコに１０００μg／ml用量のコンパクチン
ナトリウムを加える。４８時間後に、２５のフラスコの
培養物を回収し、アッセイに付す。結果は、下記表１２
の通りである。
スポラ・ヒルスタ亜種コベンシス(ＡＴＣＣ２０５０１)
接種物を用い(１００mlのＦ４培地／５００mlフラス
コ、それぞれ凍結バイアルで接種)、Ｋ２８培地の生変
換フラスコ(５０mlのＫ２８／２５０mlフラスコ)に接種
する。５mlの接種物を用い、各発芽フラスコから３つの
Ｋ２８培地フラスコに接種する。３日経過の発芽フラス
コの接種物を用い、異なる容量の接種物で３回Ｋ２８培
地フラスコに接種する。詳しくは、０.２５ml、１.０m
l、２.５ml、７.５mlおよび１０ml容量を用いた。全て
のフラスコを約２８０rpm，２８℃の振盪器に設置す
る。２４時間後、各フラスコに５００μg／ml用量のコ
ンパクチンナトリウム塩を加える。さらに２４時間後
に、各フラスコに１０００μg／ml用量のコンパクチン
ナトリウムを加える。４８時間後に、２５のフラスコの
培養物を回収し、アッセイに付す。結果は、下記表１２
の通りである。
【表１２】 注＊)６７２μg／gコンパクチンの１つのフラスコと、
痕跡量を示す２つのフラスコを平均した結果 ＊＊)２つのフラスコの平均；汚染の可能性がある３ツ
目のフラスコは無視
痕跡量を示す２つのフラスコを平均した結果 ＊＊)２つのフラスコの平均；汚染の可能性がある３ツ
目のフラスコは無視
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 7/40 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 7/40 Ｃ１２Ｒ 1:645） (72)発明者 ポール・エム・チノ アメリカ合衆国ニュージャージー州バウン ド・ブルック、クレスト・ドライブ４番 (72)発明者 ラズロ・ザルカ アメリカ合衆国ニュージャージー州イース ト・ブランズウィック、ウェリントン・ロ ード５番
Claims (20)
- 【請求項１】 式: 【化１】 (式中、Ｒはアルキルまたはアリール;Ｚは式: 【化２】 の開鎖成分基または式: 【化３】 のラクトン基;およびＲ2は水素、アルキル、アンモニウ
ム、アルキルアンモニウムまたはアルカリ金属である)
の化合物(Ｉ)またはその部分もしくは完全水素化類縁体
あるいは塩の製造法であって、式: 【化４】 (式中、Ｒ,ＺおよびＲ2は式Ｉの場合と同意義である)の
化合物(ＩＩ)またはその部分もしくは完全水素化類縁体
あるいは塩を、該化合物(ＩＩ)またはその塩のヒドロキ
シル化を触媒して、上記化合物(Ｉ)またはその塩を形成
しうる微生物と、または該微生物から誘導される酵素あ
るいは該酵素の構造を有する酵素と接触せしめ、次いで
ヒドロキシル化を行う工程から成り、 上記微生物はノカルジア属、アミコラータ属、サッカロ
ポリスポラ属、ストレプトミセス属、アミコラトプシス
属、サッカロスリックス属またはジルベールテラ属から
選ばれ、但し、化合物(ＩＩ)がコンパクチンのとき、微
生物はアミコラータ属、ノカルジア属またはストレプト
ミセス属でないことを特徴とする製造法。 - 【請求項２】 Ｚが開鎖成分基である請求項１に記載の
製造法。 - 【請求項３】 Ｒがアルキルである請求項２に記載の製
造法。 - 【請求項４】 式: 【化５】 の化合物またはその部分もしくは完全水素化類縁体ある
いはアルカリ金属塩を製造する請求項１に記載の製造
法。 - 【請求項５】 化合物(ＩＩ)を微生物と接触せしめる請
求項１に記載の製造法。 - 【請求項６】 微生物が、アミコラータ・オートトロフ
ィカＡＴＣＣ３５２０４、ストレプトミセス・カリホル
ニカスＡＴＣＣ１５４３６、アミコラトプシス・メディ
ターラネイＡＴＣＣ２１４１１、サッカロスリックス・
オストラリエンシスＡＴＣＣ３１４９７、ジルベールテ
ラ・ペルシカリアＡＴＣＣ３８５９１、サッカロポリス
ポラ・ヒルスタＡＴＣＣ２７８７５、サッカロポリスポ
ラ・ヒルスタＡＴＣＣ２７８７６、サッカロポリスポラ
・ヒルスタＡＴＣＣ２０５０１またはサッカロポリスポ
ラ・エリスラＡＴＣＣ１１６３５である請求項５に記載
の製造法。 - 【請求項７】 微生物が、アミコラータ・オートトロフ
ィカＡＴＣＣ３５２０４またはサッカロポリスポラ・ヒ
ルスタＡＴＣＣ２０５０１である請求項６に記載の製造
法。 - 【請求項８】 化合物(ＩＩ)を水またはアルコールに溶
解した後、微生物または酵素と接触せしめる請求項１に
記載の製造法。 - 【請求項９】 化合物(ＩＩ)と微生物または酵素との接
触工程を、水性培地中で行う請求項１に記載の製造法。 - 【請求項１０】 水性培地１ml当りに約０.５〜３mgの
化合物(ＩＩ)を含ませる請求項９に記載の製造法。 - 【請求項１１】 水性培地のpＨが約６.０〜７.５であ
る請求項９に記載の製造法。 - 【請求項１２】 水性培地の温度が約２７〜４０℃であ
る請求項９に記載の製造法。 - 【請求項１３】 水性培地の温度が約２８〜３４℃であ
る請求項１２に記載の製造法。 - 【請求項１４】 化合物(ＩＩ)と微生物または酵素との
接触工程を、約２.５〜７２時間続行する請求項１に記
載の製造法。 - 【請求項１５】 Ｚがラクトン基である請求項１に記載
の製造法。 - 【請求項１６】 化合物(ＩＩ)を微生物または酵素と接
触せしめる前に、加水分解しておく請求項１５に記載の
製造法。 - 【請求項１７】 化合物(Ｉ)をＨＭＧ−ＣoＡリダクタ
ーゼ抑制剤の製造に用いる請求項１に記載の製造法。 - 【請求項１８】 請求項１に記載の方法に従って、化合
物(ＩＩ)またはその塩をヒドロキシル化して、化合物
(Ｉ)またはその塩を得る工程から成ることを特徴とする
ＨＭＧ−ＣoＡリダクターゼ抑制剤の製造法。 - 【請求項１９】 請求項１に記載の方法に従って製造し
た化合物から成ることを特徴とする血漿コレステロール
量の低下または維持用組成物。 - 【請求項２０】 請求項１に記載の方法に従って製造し
た化合物から成ることを特徴とするアテローム硬化症の
治療用組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US141316 | 1993-10-22 | ||
| US08/141,316 US6043064A (en) | 1993-10-22 | 1993-10-22 | Enzymatic hydroxylation process for the preparation of HMG-CoA reductase inhibitors and intermediates thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07184670A true JPH07184670A (ja) | 1995-07-25 |
| JP3683606B2 JP3683606B2 (ja) | 2005-08-17 |
Family
ID=22495167
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP25654894A Expired - Fee Related JP3683606B2 (ja) | 1993-10-22 | 1994-10-21 | ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ抑制剤およびその中間体の酵素ヒドロキシル化製造法 |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6043064A (ja) |
| EP (1) | EP0649907B1 (ja) |
| JP (1) | JP3683606B2 (ja) |
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