JPH07126202A - 化合物ｔａｎ−１７８６およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】鎮痛抗炎症剤として有用な新規化合物の提供。 【構成】一般式 【化１】 （式中、Ｒ¹およびＲ³は水酸基を、Ｒ²およびＲ⁴はエー
テル化またはエステル化されていてもよい水酸基を示
し、Ｒ¹とＲ²とが相合わさって結合手を形成するか、ま
たはＲ²とＲ³とが相合わさって−Ｏ−を形成していても
よく、ｍおよびｎは各々０ないし７の整数で、ｍ＋ｎ＝
７を示す）で表される化合物を含有してなる鎮痛抗炎症
剤。 【効果】本発明の化合物は、サブスタンスＰの受容体結
合阻害作用を有し、毒性は低く、鎮痛抗炎症剤として有
用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は鎮痛抗炎症剤として有用
な新規イソプレノイド化合物ＴＡＮ−１７８６に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】サブスタンスＰはサブスタンスＫ（ニュ
ーロキニンＡ）、ニューロキニンＢと共にタキキニン群
に属するペプチドで、多様な生理活性を示すことが知ら
れ〔フィジオロジカル・プレビューズ（Physiological
Previws），１，１（１９９１）〕、特に、脊髄後根に
投射する無髄知覚神経の痛覚に係わる神経伝達物質とし
て、また炎症のメディエイターとして重要な働きをして
いることからその拮抗物質は鎮痛抗炎症剤としての応用
が期待されている。これまでにサブスタンスＰ受容体拮
抗作用を有する化合物としては、放射菌の代謝産物ＷＳ
−８３２５およびその誘導体（特開平３−１４８２２７
号公報）、その関連ペプチド（特開平３−２７３９９号
公報）、サイクリックペプチド（特開平３−２１９７号
公報）などが知られている。またイソプレノイド化合物
として、ジムノピリン（gymnopilin）〔テトラヘドロン
・レタース（Tetrahedron Letters），２４，１７３１
（１９８３）〕、グリソプレニン（glisoprenin）〔ジ
ャーナル・オブ・アンチビオティックス（Journal of A
ntibiotics）, ４５，１６６９（１９９２）〕などが知
られているが、これらにはサブスタンスＰ受容体拮抗阻
害作用および鎮痛抗炎症についての記述はない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】鎮痛抗炎症剤は、慢性
リューマチ、神経痛、骨そしょう症、末期癌などの患者
にとって必要不可欠な薬であり、優れた効果や新しい作
用機作を有する化合物が求められている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、かかる現
状に鑑み新規な骨格を有するサブスタンスＰ受容体拮抗
物質を見いだすことができれば従来にない新しい型の鎮
痛抗炎症剤が得られると確信し、その起源を微生物代謝
産物に求め、鋭意研究を重ねた。その結果、土壌から分
離された多数の微生物中、ある種の微生物が新規物質を
産生すること、該微生物がグリオクラディウム属菌に属
すること、該微生物を適宜の培地に培養することにより
サブスタンスＰ受容体に強力に拮抗する活性化合物を培
地中に蓄積しうることを知り、これを単離し、これを化
合物ＴＡＮ−１７８６と称し、各成分を化合物ＴＡＮ−
１７８６Ａ，Ｂ，ＣおよびＤ（以下、ＴＡＮ−１７８６
Ａ，Ｂ，ＣおよびＤと略称することもある）と命名し
た。本発明者らは、これらの化合物の物理化学的および
生物学的性質からこれらが新規物質であることを確か
め、さらに検討を加えた結果、本発明を完成した。

【０００５】本発明は、 （１）一般式

【化３】 （式中、Ｒ¹およびＲ³は水酸基を、Ｒ²およびＲ⁴はエー
テル化またはエステル化されていてもよい水酸基を示
し、Ｒ¹とＲ²とが相合わさって結合手を形成するか、ま
たはＲ²とＲ³とが相合わさって−Ｏ−を形成していても
よく、ｍおよびｎは各々０ないし７の整数で、ｍ＋ｎ＝
７を示す）で表される化合物を含有してなる鎮痛抗炎症
剤、 （２）一般式

【化４】 （式中、Ｒ¹'およびＲ³'は水酸基を、Ｒ²'およびＲ⁴'は
エーテル化またはエステル化されていてもよい水酸基を
示し、Ｒ¹'とＲ²'とが相合わさって結合手を形成する
か、またはＲ²'とＲ³'とが相合わさって−Ｏ−を形成し
ていてもよく、ｍ'およびｎ'は各々０ないし７の整数
で、ｍ'＋ｎ'＝７を示す）で表される化合物（ただし
ｍ'＝３の場合、Ｒ⁴'はエーテル化またはエステル化さ
れた水酸基を示す）、 （３）Ｒ¹'およびＲ⁴'がともに水酸基で、Ｒ²'とＲ³'と
が相合わさって−Ｏ−を形成し、ｍ'＝４である上記
（２）項記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ、 （４）Ｒ¹'とＲ²'とが相合わさって結合手を形成し、Ｒ
³'およびＲ⁴'がともに水酸基で、ｍ'＝４である上記
（２）項記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ｂ、 （５）Ｒ¹'、Ｒ²'、Ｒ³'およびＲ⁴'がともに水酸基で、
ｍ'＝４である上記（２）項記載の化合物ＴＡＮ−１７
８６Ｃ、および （６）Ｒ¹'が水酸基で、Ｒ²'とＲ³'とが相合わさって−
Ｏ−を形成し、Ｒ⁴'が１−α−マンノピラノース残基で
エーテル化された水酸基で、ｍ'＝４である上記（２）
項記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ｄを提供するものであ
る。

【０００６】上記一般式（I）に関し、Ｒ²またはＲ⁴で
表されるエーテル化された水酸基は、Ｒ²またはＲ⁴が一
般式（II）−ＯＲ⁵で表される基である。Ｒ⁵としては、
例えばアルキル基、アリール基、アラルキル基、糖残基
等があげられる。アルキル基としては、例えばメチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチ
ル、ペンチル、ヘキシル等の炭素数１ないし６の直鎖状
もしくは分枝状のアルキル基等が挙げられる。アリール
基としては、例えばフェニル、トリル、キシリル、ビフ
ェニル、１−または２−ナフチル、１−、２−または９
−アントリル、１−、２−、３−、４−または９−フェ
ナントリル、１−、２−、４−、５−または６−アズレ
ニル等の炭素数６ないし１４のアリール等が挙げられ
る。アラルキル基としては、例えばベンジル、１−フェ
ニルエチル、２−フェニルエチル、１−フェニルプロピ
ル、２−フェニルプロピル、３−フェニルプロピル、ジ
フェニルメチル、ｏ、ｍまたはｐ−メチルベンジル、
ｏ、ｍまたはｐ−エチルベンジル、ｏ、ｍまたはｐ−イ
ソプロピルベンジル、ｏ、ｍまたはｐ−tert−ブチルベ
ンジル、２，３−、２，４−、２，５−、２，６−、
３，４−または３，５−ジメチルベンジル、２,３,４
−、３,４,５−または２,４,６−トリメチルベンジル、
５−イソプロピル−２−メチルベンジル、２−イソプロ
ピル−５−メチルベンジル、２−メチル−５−tert−ブ
チルベンジル、２，４−、２，５−または３，５−ジイ
ソプロピルベンジル、３，５−ジ−tert−ブチルベンジ
ル、１−（２−メチルフェニル）エチル、１−（３−メ
チルフェニル）エチル、１−（４−メチルフェニル）エ
チル、１−（２−イソプロピルフェニル）エチル、１−
（３−イソプロピルフェニル）エチル、１−（４−イソ
プロピルフェニル）エチル、１−（２−tert−ブチルフ
ェニル）エチル、１−（４−tert−ブチルフェニル）エ
チル、１−（２−イソプロピル−４−メチルフェニル）
エチル、１−（４−イソプロピル−２−メチルフェニ
ル）エチル、１−（２，４−ジメチルフェニル）エチ
ル、１−（２，５−ジメチルフェニル）エチル、１−
（３，５−ジメチルフェニル）エチル、１−（３，５−
ジ−tert−ブチルフェニル）エチル、ベンズヒドリル等
の炭素数７ないし１６個のアラルキル基等が挙げられ
る。

【０００７】糖残基としては、例えば１−α−リボフラ
ノシル、１−β−リボフラノシル、２−α−キシロフラ
ノシル、２−β−キシロフラノシル、２−α−リブロフ
ラノシル、２−β−リブロフラノシル、２−デオキシ−
１−α−リボフラノシル、２−デオキシ−１−β−リボ
フラノシル等の５単糖残基、例えば１−α−マンノピラ
ノシル、１−β−マンノピラノシル、１−α−グルコピ
ラノシル、１−β−グルコピラノシル、１−α−ガラク
トピラノシル、１−β−ガラクトピラノシル、１−α−
ラムノピラノシル、１−β−ラムノピラノシル、１−α
−フコピラノシル、１−β−フコピラノシル、１−α−
グルコサミノピラノシル、１−β−グルコサミノピラノ
シル、１−α−ガラクトサミノピラノシル、１−β−ガ
ラクトサミノピラノシル、１−α−グルクロノピラノシ
ル、１−β−グルクロノピラノシル、１−α−ガラクツ
ロノピラノシル、１−β−ガラクツロノピラノシル、２
−α−フルクトピラノシル、２−β−フルクトピラノシ
ル、２−α−フルクトフラノシル、２−β−フルクトフ
ラノシル、Ｎ−アセチル−１−α−グルコサミノピラノ
シル、Ｎ−アセチル−１−β−グルコサミノピラノシ
ル、Ｎ−アセチル−１−α−ガラクトサミノピラノシ
ル、Ｎ−アセチル−１−β−ガラクトサミノピラノシル
等の６単糖残基、例えばＮ−アセチル−２−α−ノイラ
ミノピラノシル、Ｎ−アセチル−２−β−ノイラミノピ
ラノシル等の９単糖残基などが挙げられる。このうち好
ましくは、１−α−リボフラノシル、１−β−リボフラ
ノシル等の５単糖残基、１−β−マンノピラノシル、１
−α−グルコピラノシル、１−β−グルコピラノシル、
１−α−ガラクトピラノシル、１−β−ガラクトピラノ
シル、１−α−ラムノピラノシル、１−β−ラムノピラ
ノシル、１−α−フコピラノシル、１−β−フコピラノ
シル、１−α−グルコサミノピラノシル、１−β−グル
コサミノピラノシル、１−α−ガラクトサミノピラノシ
ル、１−β−ガラクトサミノピラノシル、１−α−グル
クロノピラノシル、１−β−グルクロノピラノシル、１
−α−ガラクツロノピラノシル、１−β−ガラクツロノ
ピラノシル等の６単糖残基である。Ｒ²またはＲ⁴で表さ
れるエステル化された水酸基は、Ｒ²またはＲ⁴が一般式
（III）−ＯＲ⁶で表される基である。Ｒ⁶としては、例
えばアシル基が挙げられる。アシル基として好ましく
は、有機カルボン酸から誘導されるアシル基が挙げられ
る。好ましい例としては、ホルミル基、アルカノイル
（アルキルカルボニル）基、アリールカルボニル基、ア
ラルキルカルボニル基、アルキルオキシカルボニル基、
複素環カルボニル基などが挙げられる。上記アシル基
は、好ましくは、アルカノイル、アリールカルボニルお
よびアルキルオキシカルボニルである。アルカノイル
（アルキルカルボニル）およびアルキルオキシカルボニ
ルにおけるアルキル、アリールカルボニルにおけるアリ
ール、アラルキルカルボニルにおけるアラルキル、上記
のアルキル、アリール、アラルキルが用いられる。複素
環カルボニルにおける複素環基としては、１〜４個の窒
素原子、酸素原子および／または硫黄原子を含む５また
は６員の複素環基があげられ、その具体例としては、例
えばピロリジノ、２−オキソピロリジノ、ピロリジニ
ル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、フリル、チ
エニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾ
リル、チアゾリル、ピペリジノ、ピペリジニル、ピリジ
ル、ピリダジニル、ピラジニル、ピペラジニル、ピリミ
ジニル、インドリル、１,２,３−トリアゾリル、１,２,
４−トリアゾリル、１,３,４−トリアゾリル、テトラゾ
リル、１，３−ジオキソラニル、モルホリノ、モルホリ
ニルなどが挙げられる。さらに該複素環基は５又は６員
環（例、ベンゼン、ピリジン、シクロヘクサンなど）と
縮合して２環性縮合環基（例、８−キノリル、８−プリ
ニルなど）を形成していてもよい。

【０００８】該アシル基はさらに好ましくは炭素数２〜
７のもの（例、アセチル、プロピオニル、ブチリル、イ
ソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ベ
ンゾイル、ホルミルオキシ、メトキシカルボニル、エト
キシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキ
シカルボニル、ブトキシカルボニル、tert−ブトキシカ
ルボニル、イソブトキシカルボニルなど）である。上記
アルキル基、アリール基、アラルキル基、アシル基、複
素環基は、適当な置換基（例、ヒドロキシ基、カルボキ
シル基、Ｃ_1-6アルキルで置換されていてもよいアミノ
基など）で１または２個置換されていてもよい。上記一
般式（I'）中のＲ¹'、Ｒ²'、Ｒ³'、およびＲ⁴'は、それ
ぞれ上記Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、およびＲ⁴で表される基と同様
のものが挙げられる。一般式（I）および（I'）に関
し、ｍまたはｍ’は、それぞれ３または４が好ましい。
特に４が好ましい。上記一般式（I）および（I'）中、
立体異性体が各々存在するが、それらの各異性体および
それらの混合物も本発明に含まれる。また一般式（I）
および（I'）で表される化合物は、塩を形成していても
よい。例えば分子中にアミノ基等の塩基性基を有する場
合、酸付加塩を形成し、またカルボキシル基等の酸性基
を有する場合、塩基塩を形成してもよい。本発明のＴＡ
Ｎ−１７８６Ａ、ＴＡＮ−１７８６Ｂ、ＴＡＮ−１７８
６ＣおよびＴＡＮ−１７８６Ｄは、ＴＡＮ−１７８６
Ａ、ＴＡＮ−１７８６Ｂ、ＴＡＮ−１７８６Ｃおよび／
またはＴＡＮ−１７８６Ｄを生産する能力を有する微生
物を培地に培養し、培養物中に該化合物を生成、蓄積せ
しめ、これを採取することにより製造される。本発明の
ＴＡＮ−１７８６Ａ、ＴＡＮ−１７８６Ｂ、ＴＡＮ−１
７８６ＣまたはＴＡＮ−１７８６Ｄの製造に用いること
ができる微生物としては、グリオクラディウム属に属
し、ＴＡＮ−１７８６Ａ、ＴＡＮ−１７８６Ｂ、ＴＡＮ
−１７８６ＣまたはＴＡＮ−１７８６Ｄを生産する菌で
あればいずれでもよい。例えば静岡県の土壌より分離さ
れた糸状菌ＦＬ−３８４８８株が挙げられる。

【０００９】ＦＬ−３８４８８株の菌学的性状を以下に
示す。 （ａ）形態的特徴 本菌株ＦＬ−３８４８８株は麦芽エキス寒天培地、バレ
イショ・ブドウ糖寒天培地およびオートミール寒天培地
に良好に生育し、ツァペック寒天培地に中程度に生育す
る。気中菌糸は無色で表面は滑面であり隔壁を有する。
分枝を繰り返すが、所々で多数集まって束状又はなわ状
に重なる。分生子柄は無色で表面は滑面であり隔壁を有
する。なわ状菌糸より生ずることが多く、菌糸から単生
し、２〜３回分枝し、長さ１００μm前後、幅２〜３μm
である。フィアライドは無色で表面は滑面であり、３〜
５本が密生する。円筒形で先が細く、１０〜２０μm×
２．０〜３．０μmである。分生子はフィアロ型で一細
胞であり、連鎖せず楕円形ないし腎臓形である。無色で
表面は滑面、フィアライドの先端に粘質で塊状に集合
し、大きさは４．０〜１０×３．０〜４．５μmであ
る。 （ｂ）各寒天培地上における性状 １）麦芽エキス寒天培地 生育は良好で培地上では速やかに拡がり、２４℃、２週
間後のコロニーの直径は５０〜５８mmであった。表面は
平坦で、羊毛状の菌糸体よりなり、外縁はやや不規則に
縁取られている。中央部から中間部にかけて白色から淡
黄色、周辺部は淡黄色を呈する。裏面は淡黄色を呈す
る。可溶性色素の生成は認められない。

【００１０】２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地 生育は良好で培地上では速やかに拡がり、２４℃、２週
間後のコロニーの直径は５８〜６０mmであった。表面は
やや盛り上がった羊毛状〜なわ状の菌糸体よりなり、外
縁はやや不規則に縁取られている。中央部は白色から淡
黄色、中間部は白色から淡橙色、周辺部は白色から淡灰
黄色を呈する。裏面は淡黄褐色、淡橙色、淡黄色を呈す
る。可溶性色素の生成は認められない。ｐＨ３〜ｐＨ１
２のいずれでも生育し、生育温度範囲は９℃〜３２℃で
２４℃〜２８℃が至適生育温度である。３５℃では生育
しない。 ３）ツァペック寒天培地 生育は中程度で、２４℃、２週間後のコロニーの直径は
４１mmであった。表面は平坦で、羊毛状の菌糸体よりな
り、外縁はやや不規則に縁取られている。中央部から周
辺部にかけて淡灰白色を呈する。裏面は、中央部から周
辺部にかけて象牙色を呈する。可溶性色素の生成は認め
られない。 ４）オートミール寒天培地 生育は良好で培地上では速やかに拡がり、２４℃２週間
後のコロニーの直径は７８mmであった。表面はやや盛り
上がった羊毛状〜なわ状の菌糸体よりなり、外縁は規則
正しく縁取られている。中央部から周辺部にかけて淡橙
色を呈する。裏面は、淡黄色を呈する。可溶性色素の生
成は認められない。

【００１１】以上の諸性質を、D. Malloch著、宇田川俊
一訳「かびの分離・培養と同定」（昭和５８年、医歯薬
出版株式会社）５１頁記載の同定検索表と照合すると本
菌株は、胞子は１細胞からなり、コロニー、分生子及び
その他の器官は無色又はピンク色で、分生子柄は単生、
先端は密にブラシ状に分枝した組織となり、先細のフィ
アライドを生じる、フィアライドからは湿った分生子の
集塊が形成されることから、グリオクラディウム（Glio
cladium）属に属することが明らかである。更にC. V. S
ubramanian ら著「ピポミセテス(HYPHOMYCETES)」（１
９７１．インディアン・カウンシル・オブ・アグリカルチ
ャル・リサーチ・ニューデリー(IndianCouncil of Agricu
ltural Research New Delhi））記載のグリオクラディ
ウム（Gliocladium）属かびの諸性質と照合すると、本
菌株のコロニーは淡黄色から淡橙色、分生子は楕円形な
いし腎臓形で、大きさは４−１０×３．０−４．５μm
であることから、グリオクラディウム ロゼウム（Glioc
ladium roseum）群に属すると考えられる。したがっ
て、本菌株をグリオクラディウム ロゼウム（Gliocladi
um roseum）ＦＬ−３８４８８と同定した。本菌株は、
平成５年１０月７日より受託番号ＩＦＯ ３２５９１と
して、財団法人発酵研究所（ＩＦＯ）に、また平成５年
１０月２７日より受託番号ＥＦＲＭＰ−１３９２９とし
て通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所にそれ
ぞれ寄託されている。グリオクラディウム属に属するＴ
ＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤ生産菌は、自体公知
の方法、たとえば紫外線、放射線などの照射、単細胞分
離、種々の変異処理、その他の手段で変異させることが
でき、このような変異株あるいは自然に得られる突然変
異株であっても、上記した分類学的性状との比較におい
て実質的に別種とするに足らず、しかも当該化合物を生
産する性質を有するものは、すべて本発明方法に利用し
得る。

【００１２】ＴＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤ生産
菌の培養に用いる培地は、該菌が利用し得る栄養源を含
むものなら液状でも固状でもよいが、大量に処理すると
きには液体培地を用いるのがより適当である。培地に
は、当該化合物生産菌が同化し得る炭素源、窒素源、無
機物質、微量栄養源を適宜配合する。炭素源としては、
たとえばブドウ糖、乳糖、ショ糖、麦芽糖、デキストリ
ン、澱粉、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、
油脂類（例、大豆油、ラード油、チキン油など）、ｎ−
パラフィンなどが、窒素源としては、例えば、肉エキ
ス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コーン・スティー
プ・リカー、ペプトン、綿実粉、廃糖蜜、尿素、アンモ
ニウム塩類（例、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウ
ム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモニウムなど）などを
用いる。さらに、ナトリウム、カリウム、カルシウム、
マグネシウムなどを含む塩類、鉄、マンガン、亜鉛、コ
バルト、ニッケルなどの金属塩類、リン酸、ホウ酸など
の塩類や酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類を適宜
用いてもよい。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、
アスパラギン酸、アラニン、リジン、メチオニン、プロ
リンなど）、ペプチド（例、ジペプチド、トリペプチド
など）、ビタミン類（例、Ｂ₁、Ｂ₂、ニコチン酸、
Ｂ₁₂、Ｃなど）、核酸類（例、プリン、ピリミジン、そ
の誘導体など）などを含有させてもよい。もちろん、培
地のｐＨを調節する目的で無機または有機の酸またはア
ルカリ類、緩衝剤などを加え、あるいは消泡の目的で油
脂類、界面活性剤などの適量を添加してもよい。液体培
養に際しては、培地のｐＨは中性付近、特にｐＨ６〜８
が好ましい。培養温度は約２０℃〜３０℃、培養時間は
約４８時間〜１６８時間が好ましい。通常、４〜５日の
培養でＴＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤの生産量は
最高に達する。培養物から目的とする化合物ＴＡＮ−１
７８６Ａ，Ｂ，ＣおよびＤを採取する方法を以下に述べ
る。これらは油溶性物質で中性を示すため、この性質を
利用する自体公知の方法を採用すればよい。またこれら
各成分は菌体および濾液中に含まれるため、例えば次の
ような方法が採用される。

【００１３】培養液をｐＨ１．５ないし１２好ましくは
ｐＨ２ないし１０に調整後、水と混和しない有機溶媒、
例えばクロロホルム、酢酸エチル、メチルイソブチルケ
トンまたはブタノールなどを加え、１０分ないし２０時
間、好ましくは２０分ないし４時間撹拌混和する。混合
液はろ過助剤を加えてろ過、あるいは遠心分離によって
菌体を除去して有機溶媒層を得る。あるいは培養液をｐ
Ｈ１．５ないし１２、好ましくはｐＨ２ないし１０に調
整後、ろ過助剤を加えてろ過、あるいは遠心分離によっ
て菌体を得る。得られた菌体を適当な有機溶媒、たとえ
ばメタノール、エタノール、２−プロパノール、アセト
ン、アセトニトリル、ジクロロメタン、酢酸エチル、メ
チルイソブチルケトンあるいはブタノールなどを加えて
１０分ないし２０時間、好ましくは２０分ないし４時間
撹拌混和し、ろ過または遠心分離等によって菌体を除去
する。得られたろ液または上清層を濃縮し、水と混和し
ない有機溶媒、例えばジクロロメタン、酢酸エチル、メ
チルイソブチルケトンまたはブタノールなどを加えて希
釈液を得る。得られた有機溶媒層あるいは希釈液を水で
洗浄後、濃縮することにより、或いは適当な塩類、例え
ば食塩、重曹、炭酸ナトリウム、塩化アンモニウムな
ど、或いは適当な酸類、例えば希塩酸、クエン酸等の水
溶液で洗浄し、さらに水で洗浄後、濃縮することにより
ＴＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤを含有する粗物質
が得られる。

【００１４】粗物質をさらに精製し、純粋なＴＡＮ−１
７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤを得るには種々のクロマトグ
ラフィー法が有利に用いられる。担体としてはシリカゲ
ル、結晶セルロース、吸着性樹脂たとえばダイヤイオン
ＨＰ−２０（三菱化成社製）、アンバーライトＸＡＤ−
IまたはII（ローム アンド ハース社製、米国）、セ
ファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社製、スウエー
デン）などが用いられ、これらは通常カラムクロマトグ
ラフィー法で行われる。カラムから活性物質を溶出する
には担体の種類によって異なるが、適当な有機溶媒、例
えばジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセト
ン、２−プロパノール、メタノールなどの単独あるいは
これらの混合溶媒が、または水と混和し得る有機溶媒、
例えばアセトン、アセトニトリル、メタノールなどと水
溶液、例えば水、希アルカリ水、希酸水、緩衝液などと
の混合溶媒が用いられる。また、分取用高速液体クロマ
トグラフィー（ＨＰＬＣ）によってもＴＡＮ−１７８６
Ａ，Ｂ，ＣまたはＤを精製することができる。担体とし
てはオクタデシルシラン（ＯＤＳ）系およびシリカゲル
系のものが有利に用いられる。例えばＯＤＳの場合、メ
タノールあるいはアセトニトリルと水或いは塩類含有水
溶液の混合溶液が有利に用いられる。活性物質を含む有
機溶媒溶出液を濃縮、あるいは水溶液を含む場合は水と
混和しない適当な有機溶媒で抽出して濃縮乾固すると純
粋なＴＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣまたはＤが無色の油状
物或いは白色の粉末として得られる。

【００１５】ＴＡＮ−１７８６Ａ、Ｂ、ＣおよびＤは中
性脂溶性物質で、共通する性状として、呈色反応では過
マンガン酸カリウム、リンモリブデン酸、モーリッシュ
に対して陽性を示し、バートン、ドラーゲンドルフ、ニ
ンヒドリンに対して陰性を示す。また以下の分析用ＨＰ
ＬＣ及び薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）における挙
動を〔表１〕に示す。

【表１】 ────────────────────────────── ＨＰＬＣ保持時間(min) ＴＬＣ(Ｒf値) ────────────────────────────── TAN-1786A ７.２ ０.６９ TAN-1786B １０.６ ０.７５ TAN-1786C ４.０ ０.４３ TAN-1786D ４.９ ０.３４ ────────────────────────────── ＨＰＬＣ条件：担体；ODS, YMC-Pack A-312 移動相；８５％ メタノール水 流速；２ml／min 検出法；ＵＶ吸収，２１４nm ＴＬＣ条件： 担体；Silica gel 60 F254（E. Merck A
G.） 展開溶媒；酢酸エチル：2-プロパノール：水（１０：
２：１） 次に、後述する実施例で得られたＴＡＮ−１７８６Ａ，
Ｂ，ＣおよびＤの物理化学的性状を示す。

【００１６】ＴＡＮ−１７８６Ａ （1）外観：無色油状物 （2）分子量：m／z ７３６(Ｍ⁺)，（ＥＩマス・スペク
トルより） （3）分子式：Ｃ₄₅Ｈ₈₄Ｏ₇（７３６） （4）紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：メタノール中
〔図１〕末端吸収 （5）赤外部吸収(ＩＲ)スペクトル：ＫＢr錠剤中、主な
吸収を示す（波数,cm^-1）〔図２〕 3390, 2970, 2940, 1640, 1460, 1380, 1170, 1060, 10
20 （6）¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５MHz、
重メタノール中、δppm〔図３〕 139.4(Q), 136.2(Q), 136.0(Q), 125.5(CH), 125.3(C
H), 125.0(CH),86.1/87.0(CH), 84.7(Q), 73.5(Q), 73.
4(Q), 72.6(Q), 59.4(CH₂),43.5(CH₂), 43.4(CH₂), 42.
3(CH₂), 41.3(CH₂), 40.9(CH₂), 40.8(CH₂),37.8(CH₂),
27.7(CH₂), 27.6(CH₂), 27.5(CH₂), 27.1(CH₃), 27.0
(CH₃),26.9(CH₃), 25.9(CH₃), 25.8(CH₃), 23.3(CH₂),
20.2(CH₂), 19.4(CH₂),16.3(CH₃), 16.1(CH₃), 16.0(CH
₃)

【００１７】ＴＡＮ−１７８６Ｂ （1）外観：白色粉末 （2）分子量：m／z ７２０(Ｍ⁺)，（ＥＩマス・スペク
トルより） （3）分子式：Ｃ₄₅Ｈ₈₄Ｏ₆（７２０） （4）紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：メタノール中
〔図４〕末端吸収 （5）赤外部吸収(ＩＲ)スペクトル：ＫＢr錠剤中、主な
吸収を示す（波数,cm^-1）〔図５〕 3380, 2950, 2910, 1460, 1380, 1180, 940 （6）¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５MHz、
重メタノール中、δppm〔図６〕 139.3(Q), 136.1(Q), 135.9(Q), 131.9(Q), 125.8(CH),
125.5(CH),125.2(CH), 124.9(Q), 73.4(Q), 73.3(Q),
73.3(Q), 59.4(CH₂),43.4(CH₂), 43.2(CH₂), 42.6(C
H₂), 42.2(CH₂), 41.3(CH₂), 40.8(CH₂),40.7(CH₂), 2
7.6(CH₂), 27.4(CH₂), 27.0(CH₃), 26.9(CH₃), 26.9(CH
₃),25.9(CH₃), 23.7(CH₂), 23.2(CH₂), 19.3(CH₂), 17.
7(CH₃), 16.3(CH₃),16.1(CH₃), 16.0(CH₃)

【００１８】ＴＡＮ−１７８６Ｃ （1）外観：白色粉末 （2）分子量：m／z ７５５(Ｍ⁺)，（ＳＩマス・スペク
トルより） （3）元素分析値：（％）（水分１.５モルとして） 実測値；Ｃ，69.03； Ｈ，11.31； Ｎ，0.00 計算値；Ｃ，69.10； Ｈ，11.47； Ｎ，0.00 （4）分子式：Ｃ₄₅Ｈ₈₆Ｏ₈（７５４） （5）紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：メタノール中
〔図７〕末端吸収 （6）赤外部吸収(ＩＲ)スペクトル：ＫＢr錠剤中、主な
吸収を示す（波数,cm^-1）〔図８〕 3390, 2940, 1670, 1460, 1380, 1160, 1080, 1000, 92
0 （7）¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５MHz、
重メタノール中、δppm〔図９〕 139.3(Q), 136.1(Q), 135.9(Q), 125.5(CH), 125.2(C
H), 124.9(CH),80.4(CH), 73.8(Q), 73.4(Q), 73.3(Q),
73.3(Q), 59.4(CH₂),43.8(CH₂), 43.4(CH₂), 42.2(C
H₂), 41.3(CH₂), 40.8(CH₂), 40.7(CH₂),40.1(CH₂), 2
7.6(CH₂), 27.4(CH₂), 27.0(CH₃), 26.9(CH₃), 26.8(CH
₃),26.6(CH₂), 25.6(CH₃), 25.1(CH₃), 23.2(CH₂), 19.
3(CH₂), 16.3(CH₃),16.1(CH₃), 16.0(CH₃)

【００１９】ＴＡＮ−１７８６Ｄ （1）外観：白色粉末 （2）分子量：m／z ８９９(Ｍ⁺)，（ＳＩマス・スペク
トルより） （3）元素分析値：（％）（水分０.５モルとして） 実測値；Ｃ，67.31； Ｈ，10.58； Ｎ，0.00 計算値；Ｃ，67.44； Ｈ，10.54； Ｎ，0.00； Ｏ，22.
02 （4）分子式：Ｃ₅₁Ｈ₉₄Ｏ₁₂（８９８） （5）紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：メタノール中
〔図１０〕末端吸収 （6）赤外部吸収(ＩＲ)スペクトル：ＫＢr錠剤中、主な
吸収を示す（波数,cm^-1）〔図１１〕 3390, 2940, 1660, 1460, 1380, 1170, 1070, 1030 （7）¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５MHz、
重メタノール中、δppm〔図１２〕 142.2(Q), 136.2(Q), 135.9(Q), 125.4(CH), 125.1(C
H), 121.4(CH),99.8(CH), 86.0/86.9(CH), 84.6/84.5
(Q), 78.2(CH), 75.3(CH),73.4(Q), 73.3(Q), 72.5(C
H), 72.5/72.3(Q), 68.5(CH), 65.8(CH₂),62.8(CH₂), 4
3.4(CH₂), 43.3(CH₂), 42.2/42.8(CH₂), 41.3(CH₂),40.
8(CH₂), 40.7(CH₂), 37.7/38.0(CH₂), 27.6/27.7(CH₂),
27.6(CH₂),27.3(CH₂), 27.0(CH₃), 26.9(CH₃), 26.9(C
H₃), 25.8/26.1(CH₃),25.8/25.5(CH₃), 25.7(CH₃), 23.
2(CH₂), 20.1(CH₂), 19.3(CH₂),16.5(CH₃), 16.2(CH₃),
16.0(CH₃)

【００２０】以上のデータおよびＮＭＲスペクトルの詳
細な検討からＴＡＮ−１７８６Ａ，Ｂ，ＣおよびＤの構
造式は下記のように推定された。

【化５】 一般式（I）および（I'）で表される化合物は、例え
ば、ＴＡＮ−１７８６Ａ，ＢまたはＣを、エーテル化ま
たはエステル化反応に付すことにより製造することがで
きる。 エーテル化反応は自体公知の方法、例えば原料
化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ，ＢまたはＣをエーテル化す
ることにより行われる。例えば化合物ＴＡＮ−１７８６
Ａ，ＢまたはＣと（１）ハロゲン化物および塩基とを反
応させる方法、（２）置換されていてもよい低級アルコ
ール類、置換されていてもよいアリールアルカノール類
またはベンズヒドロール類等の対応するスルホン酸エス
テルおよび塩基とを反応させる方法、（３）ジアゾ化合
物とを反応させる方法、または（４）硫酸エステル類と
を反応させる方法、または原料化合物をアセタール型エ
ーテル化反応やグルコシル反応に付す方法等が採用され
る。上記ハロゲン化物としては例えばハロゲン化アルキ
ル（例、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、ヨウ化プロピ
ル、臭化アリル、臭化ベンジル、臭化-tert-ブチル、臭
化トリフェニルメチル、塩化メトキシメチル、塩化メチ
ルチオメチル、塩化テトラヒドロピラニルなど）、ハロ
ゲン化シリル（例、塩化トリメチルシリル、塩化トリエ
チルシリル、塩化トリイソプロピルシリル、塩化-tert-
ブチルジメチルシリル、塩化-tert-ブチルジフェニルシ
リルなど）などが挙げられる。上記スルホン酸エステル
としては、例えば置換されていてもよい低級アルコール
類（例、メタノール、エタノール、イソプロパノール、
tert-ブタノール、シアノメチルアルコール、ベンゾイ
ルメチルアルコールなど）、置換されていてもよいアリ
ールアルカノール類（例、低級(C_1〜6)アルキル基、低
級(C_1〜6)アルコキシ基もしくはハロゲン原子によって
置換されていてもよいベンジルアルコール類、またはベ
ンズヒドロール類（例、ベンズヒドロール、ｐ−ニトロ
ベンジルアルコール、ｐ−メトキシベンジルアルコー
ル、2,4,6-トリメチルベンジルアルコールなど））など
の対応するスルホン酸エステル（例、ベンゼンスルホン
酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステル、メタン
スルホン酸エステル、トリフルオロメタンスルホン酸エ
ステルなど）等が挙げられる。これらハロゲン化物およ
びスルホン酸エステルの使用量は、それぞれ原料化合物
に対し、約０．１ないし５０当量、好ましくは約１ない
し１０当量である。塩基としては、例えば無機塩基
（例、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水素化ナトリ
ウム、水素化カルシウムなど）、有機塩基（例、リチウ
ムジイソプロピルアミド、リチウムビストリメチルシリ
ルアミド、リチウムジシクロヘキシルアミド、リチウム
シクロヘキシルイソプロピルアミドなどのリチウムアミ
ド類、メチルリチウム、エチルリチウム、n-,sec-,およ
びtert-ブチルリチウム、フェニルリチウムなどのアル
キルリチウム類、メチルマグネシウムブロミド、エチル
マグネシウムブロミド、ブチルマグネシウムブロミド、
フェニルマグネシウムブロミドなどのグリニヤ試薬類、
ピリジン、2,4,6-トリメチルピリジン、ピコリン、４−
ジメチルアミノピリジン、2,6-ルチジン、イミダゾール
などの芳香族アミン類、トリエチルアミン、ジイソプロ
ピルエチルアミン、ジメチルアニリンなどの３級アミン
類）等が用いられる。塩基の使用量としては、通常原料
化合物に対して、約０．１ないし５０当量、好ましくは
約１ないし１０当量である。上記ジアゾ化合物としては
例えばジアゾメタン、トリメチルシリルジアゾメタン、
ジフェニルジアゾメタンなどが挙げられる。上記硫酸エ
ステル類としては例えばジメチル硫酸、ジエチル硫酸な
どが挙げられる。ジアゾ化合物および硫酸エステル類の
使用量は、それぞれ原料化合物に対し、約１ないし１０
０当量、好ましくは約２ないし３０当量である。またア
セタール型エーテル化反応は自体公知の方法により行わ
れる。例えば化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ,ＢまたはＣに
酸触媒下、例えばヘミアセタール類（例、ジヒドロピラ
ン、２-メトキシプロペン、エチルビニルエーテル、イ
ソプロピルビニルエーテルなど）、保護されていてもよ
い糖残基のヘミアセタール類（例、保護されていてもよ
いグルカール類、保護されていてもよいガラクタール類
など）等を反応させる方法が挙げられる。触媒として用
いられる酸としては、例えばハロ酢酸（例、トリフルオ
ロ酢酸など）、ハロゲン化水素酸（例、塩化水素酸、臭
化水素酸など）、スルホン酸（例、ベンゼンスルホン
酸、p-トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフ
ルオロメタンスルホン酸、D-カンファースルホン酸な
ど）、ルイス酸（例、亜鉛−酢酸、３フッ化ホウ素エー
テル錯体、ヨードトリメチルシラン、トリフルオロメタ
ンスルホン酸トリメチルシリルエステル、四フッ化チタ
ン、四塩化チタン、塩化第１スズ、過塩素酸銀、トリフ
ルオロメタンスルホン酸無水物など）等が用いられる。
グリコシル化反応は自体公知の方法により行われる
［例、有機合成化学協会誌、50,378~390(1992)］。例え
ば化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ,ＢまたはＣに酸触媒下、
保護されていてもよいグリコシル供与体（例、ハロゲン
化糖、チオグリコシド、1-O-アシル糖、炭酸エステル化
糖、リン酸エステル化糖、糖イミデート、4-ペンテニル
チオグリコシド等）などと反応させる方法が挙げられ
る。触媒として用いられる酸としては、上記の酸と同様
のものが用いられる。これら触媒の使用量は原料化合物
のエーテル化を促進し得る触媒量程度でよく、通常原料
化合物１モルに対して約０.００１ないし１０モル、好
ましくは約０.００１ないし５モルである。上記エーテ
ル化反応は溶媒の存在下に行なうことができる。溶媒と
しては、反応を阻害しないものであれば特に限定されな
い。例えば無水ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、
Ｎ−メチルピロリドンなどのアミド類、ジメチルスルホ
キサイドなどのスルホキシド類、ピリジンなどの芳香族
アミン類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジ
オキサン、エチレングリコールジメチルエーテルなどの
エーテル類、アセトニトリルなどのニトリル類、ペンタ
ン、ヘキサン、ベンゼン、トルエンなどの炭化水素類、
ジクロロメタン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水
素類、アセトン、エチルメチルケトンなどのケトン類、
あるいはこれらの適宜の割合の混合物などが挙げられ
る。反応温度は、反応に使用されうることが知られてい
る範囲から適宜選択される。具体的には、例えば通常約
−１００℃〜１００℃の範囲から適宜選択される。反応
時間は、反応に要することが知られている範囲から適宜
選択される。具体的には、例えば数分から７日程度反応
させる。

【００２１】エステル化反応は自体公知の方法、例えば
化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ，ＢまたはＣをアシル化する
ことにより行われる。本反応に用いられるアシル化剤と
しては、例えば上記Ｒ^６中のアシル基を誘導する有機カ
ルボン酸またはその反応性誘導体が用いられる。カルボ
ン酸の反応性誘導体としては、例えば常法に従って製造
することができる酸ハライド、酸無水物、活性アミド、
活性エステル、活性チオエステル等が用いられる。この
ような反応性誘導体を具体的に述べると次のとおりであ
る。 １）酸ハライド：例えば酸クロリド、酸ブロミド等が用
いられる。 ２）酸無水物：例えば対称型酸無水物、モノＣ_1-6アル
キル炭酸混合無水物、脂肪族カルボン酸（例、酢酸、ピ
バル酸、吉草酸、イソ吉草酸、トリクロル酢酸等）から
なる混合酸無水物、芳香族、芳香族カルボン酸（例、安
息香酸等）からなる混合酸無水物等が用いられる。対称
型酸無水物としては、例えば無水酢酸、無水プロピオン
酸、無水ブタン酸等のＣ_1-6アルキルカルボン酸無水物
などがあげられる。 ３）活性アミド：例えばピラゾール、イミダゾール、４
−置換イミダゾール、ジメチルピラゾール、ベンゾトリ
アゾール等とのアミドが用いられる。 ４）活性エステル：例えばメトキシメチルエステル、１
−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、Ｎ−ヒドロ
キシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド
エステル、４−ニトロフェニルエステル、２，４−ジニ
トロフェニルエステル、トリクロロフェニルエステル、
プロパルギルエステル、ペンタクロロフェニルエステル
等のエステルのほか、１−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ピリ
ドン、Ｎ−ヒドロキシサクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシ
フタルイミド等とのエステル等が用いられる。 ５）活性チオエステル：例えば２−ピリジルチオール、
２−ベンゾチアゾリルチオールなどの複素環チオール等
とのチオエステル等が用いられる。

【００２２】以上のような各種反応性誘導体は、カルボ
ン酸の種類によって適宜選択される。また、該アシル化
剤として、スルホン酸アシルを導入しうるスルホン酸の
反応性誘導体、例えば、メタンスルホニルクロリド、ベ
ンジルスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルク
ロリド等の酸ハライド、無水メタンスルホン酸、無水ｐ
−トルエンスルホン酸等の対称型酸無水物を用いてもよ
い。カルボン酸、その反応性誘導体またはスルホン酸の
反応性誘導体等のアシル化剤は、原料化合物ＴＡＮ−１
７８６Ａ、ＢまたはＣの各１モルに対し、例えば約１モ
ル以上使用してもよく、約１ないし３０モル程度が好ま
しい。本反応は反応を阻害しない溶媒中、あるいは溶媒
の非存在下に行われる。反応を阻害しない溶媒として
は、例えばアセトン等のケトン類；ジエチルエーテル、
テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；酢
酸、プロピオン酸等のカルボン酸類；アセトニトリル等
のニトリル類；ベンゼン、トルエン、キシレン等の炭化
水素類；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジク
ロロエタン等のハロゲン化炭化水素類；酢酸エチル等の
エステル類；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトア
ミド等のアミド類；トリエチルアミン、トリブチルアミ
ン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、
Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン等の三級アミン；ピリジン、
ピコリン、ルチジン、コリジン等のピリジン類等が用い
られる。これらは一種のみで、または二種以上適当な割
合で混合して用いてもよい。

【００２３】本アシル化反応は、原料化合物のアシル化
を促進しうる触媒を用いることによりさらに有利に進行
する。そのような触媒としては、例えば塩基触媒、酸触
媒が用いられる。塩基触媒としては、例えば三級アミン
〔例、トリエチルアミンのような脂肪族三級アミン、ピ
リジン、α−、β−またはγ−ピコリン、２，６−ルチ
ジン、４−ジメチルアミノピリジン、４−（１−ピロリ
ジニル）ピリジン、ジメチルアニリン、ジエチルアニリ
ンのような芳香族三級アミン等〕、ハロゲン化アルカリ
金属（例、フッ化カリウム、無水ヨウ化リチウム等）、
有機酸塩（例、酢酸ナトリウム）などが用いられる。酸
触媒としては、例えばルイス酸（例、無水塩化亜鉛、無
水塩化アルミニウム（ＡlＣl₃）、四塩化チタン（ＴiＣ
l₄）、四塩化錫（ＳnＣl₄）、五塩化アンチモン、塩化
コバルト、塩化第二銅、三フッ化ホウ素エーテラート
等）、無機強酸（例、硫酸、過塩素酸、塩化水素、臭化
水素等）、有機強酸（例、ベンゼンスルホン酸、ｐ−ト
ルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢
酸、カンファースルホン酸等）、酸性イオン交換樹脂
（例、ポリスチレンスルホン酸）などが用いられる。上
記の触媒のなかでもカンファースルホン酸、ピリジン、
４−ジメチルアミノピリジンなどが好ましい。触媒の使
用量は原料化合物のカルボン酸によるアシル化を促進し
得る触媒量程度でよく、通常原料化合物１モルに対して
約０．００１ないし１０モル、好ましくは約０．００１
ないし１モルである。反応温度は特に限定されないが、
通常約−３０から１００℃、好ましくは約１０から５０
℃である。反応時間は数分から数十時間程度（例えば約
５分から３０時間など）である。かくして得られる目的
化合物（I）または（I'）は、自体公知の手段、例えば
濃縮、液性変換、転溶、溶媒抽出、凍結乾燥、結晶化、
再結晶、分留、クロマトグラフィーなどにより単離精製
することができる。

【００２４】以下に実施例１で得られたＴＡＮ−１７８
６Ｃの生物活性について説明する。 試験例１ ラジオ・リガンド・レセプター結合阻害活性試験 〔方法〕アール・キリオン（R. Qirion）およびシー・
ピラピル（C. Pilapil）〔ニューロペプタイド（Neurop
eptide）４，３２５（１９８４）〕の方法を改変して用
いた。受容体はウィスターラット（雄、８週齢、チャー
ルス リバー社製）の脳から調製した。ラットを断頭に
よって犠牲にし、前脳を取り出し、１匹当たり３０mlの
１２０mＭ塩化ナトリウム、５mＭ塩化カリウムを含む１
５０mＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）中でポリトロ
ン・ホモゲナイザー〔キネマチカ（kinematika）社製、
ドイツ〕を用いて破砕し、４０,０００×ｇで２０分遠
心した。沈渣を３０mlの３００mＭ塩化カリウムと１０m
Ｍエチレンジアミン四酢酸を含む５０mＭトリス塩酸緩
衝液（ｐＨ７．４）中に懸濁し、氷冷下に３０分緩やか
に撹拌する。懸濁液を４０,０００×ｇで２０分間遠心
し、沈渣を３０mlの５０mＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ
７．４）で洗浄し、受容体標品として凍結（−８０℃）
保存した。この標品を１．５mg／mlの蛋白濃度になるよ
うに反応緩衝液〔５０mＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．
４）、０．０２％牛血清アルブミン、１mＭフェニルメ
チルスルホニルフルオリド、２μg／mlキモスタチン、
４０μg／バシトラシン、３mＭ塩化マンガン〕に懸濁
し、１００μl容量を反応に使用した。サンプルおよび
¹²⁵Ｉ−ＢＨＳＰ（０．４６KBq）を加え、０．２mlの反
応緩衝液中で２５℃、３０分反応させた。サブスタンス
Ｐを、その濃度が２×１０^-6Ｍとなるように添加し、非
特異的結合量を求めた。反応後、セルハーベスター〔２
９０ＰＨＤ、ケンブリッジ・テクノロジー・インコーポ
レイション（Cambridge Technology, Inc.）社製、英
国〕を用いて、グラスフィルター〔ＧＦ／Ｂ，ワットマ
ン（Whatman）社製、米国〕上に急速ろ過して反応停止
し、２５０μlの０．０２％牛血清アルブミンを含む５
０mＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）で３回洗浄し、
フィルター上に残った放射活性をガンマ・カウンターで
測定した。フィルターは使用前に０．１％ポリエチレン
イミンに一昼夜浸漬後風乾したものを用いた。 〔結果〕化合物ＴＡＮ−１７８６Ｃは、４．８μg／ml
で５０％阻害を示した。

【００２５】試験例２ モルモット回腸収縮阻害作用測定 一昼夜断食させたモルモット（Std Hartley, 雄，２５
０ｇ，日本エスエルシー）から、脳震盪後、頸動脈より
放血し、回腸を取り出した。約３cmの断片を、２０mlの
タイロード緩衝液で満たしたマグヌス管中に、０．５ｇ
の張力をかけて懸垂した。この間、３７℃に保温し、混
合ガス（９５％Ｏ₂、５％ＣＯ₂）を小泡にして通気し
た。サンプルを加えて５分間安定させ、２×１０^-9Ｍの
サブスタンスＰを添加して回腸を収縮させ、サンプル無
添加の収縮度を１００％とし、サンプル添加による阻害
度を百分率で示した。収縮は等張力トランスデューサ
（ＭＥ−４０１３、駿河電子社製）を用い、記録計（レ
クチホリー８Ｋ、日本電子三栄社製）上に記録した。サ
ンプルの活性は最大収縮の５０％阻害を示す濃度をＥＤ
₅₀値として示した。 〔結果〕ＴＡＮ−１７８６Ｃは、１．５６μg／mlでサ
ブスタンスＰによる最大収縮の５０％（ＥＤ₅₀）を阻害
した。

【００２６】本発明の化合物はサブスタンスＰ受容体結
合阻害作用を有し、低毒性で、哺乳動物（例、イヌ、ネ
コ、ウシ、ウマ、ヤギ、家兎、マウス、ラット、サル、
ヒト等）の鎮痛抗炎症剤として有用である。かかる本発
明の鎮痛抗炎症剤は、常法に従い一般式（I）で表され
る化合物を薬理学的に許容される担体と混合することに
より得られる。本剤は、非経口剤として、たとえば外用
剤、注射剤、点滴剤、液剤、懸濁液剤および坐剤等、経
口剤としてたとえばカプセル剤、錠剤、シロップ剤、散
剤、顆粒剤等またはそのほかの医薬として適切な剤型で
提供される。これらは自体公知の方法によって製造され
る。非経口剤、例えば注射剤を製造する際には、該化合
物に等張化剤（例、グルコース、ソルビトール、マンニ
トール、塩化ナトリウム、グリセンなど）、保存剤
（例、ベンジルアルコール、クロロブタノール、パラヒ
ドロキシ安息香酸メチルなど）、抗凝固剤（例、デキス
トラン硫酸、ヘパリンなど）、溶解補助剤（例、シクロ
デキストリン類、ツイーンなど）、安定化剤（例、ポリ
エチレングリコール、ポリ乳酸など）などを加えてもよ
い。投与に当たっては、慣用の水性希釈剤中に溶解し、
液剤として用いる。希釈剤としてはぶどう糖水溶液、生
理食塩水、リンゲル液、栄養補給剤液などが含まれる。

【００２７】たとえば外用剤とするには、自体公知の方
法に従い、本発明の化合物（I）を固状、半固状または
液状の外用投与剤とすることができる。たとえば、上記
固状のものとしては、化合物（I）をそのまま、あるい
は賦形剤（例、グリコール、マンニトール、デンプン、
微結晶セルロースなど）、増粘剤（例、天然ガム類、セ
ルロース誘導体、アクリル酸重合体など）などを添加、
混合して粉状の組成物とする。上記液状のものとして
は、注射剤の場合とほとんど同様で、油性あるいは水性
懸濁剤とする。半固状の場合は、水性または油性のゲル
剤、あるいは軟膏状のものがよい。また、これらはいず
れもｐＨ調節剤（例、炭酸、リン酸、クエン酸、塩酸、
水酸化ナトリウムなど）、防腐剤（例、パラオキシ安息
香酸エステル類、クロロブタノール、塩化ベンザルコニ
ウムなど）などを加えてもよい。

【００２８】たとえば坐剤とするには、自体公知の方法
に従い、本発明の化合物（I）を油性または水性の固
状、半固状あるいは液状の坐剤とすることができる。上
記組成物に用いる油性基剤としては、化合物（I）を溶
解しないものであればよく、たとえば高級脂肪酸のグリ
セリド〔例、カカオ脂、ウイテプゾル類（ダイナマイト
ノーベル社製）など〕、中級脂肪酸〔例、ミグリオール
類（ダイナマイトノーベル社製）など〕、あるいは植物
油（例、ゴマ油、大豆油、綿実油など）などが挙げられ
る。また、水性基剤としては、たとえばポリエチレング
リコール類、プロピレングリコール、水性ゲル基剤とし
ては、たとえば天然ガム類、セルロース誘導体、ビニー
ル重合体、アクリル酸重合体などが挙げられる。経口剤
を製造する際には添加剤、たとえば賦形剤（例、乳糖、
白糖、デンプンなど）、結合剤（例、デンプン、アラビ
アゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニールピ
ロリドン、ヒドロキシプロピルセルロースなど）、崩壊
剤（例、デンプン、炭酸カルシウムなど）、滑沢剤
（例、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレ
ングリコール６０００など）、着色剤（例、ベンガラな
ど）、矯味剤、安定化剤などが含まれていても良い。本
発明の鎮痛抗炎症剤は経口的または非経口的に投与さ
れ、ヒトに用いる投与量は対象の疾患、投与経路、治療
する患者個々の年齢及び疾病の程度によって変動し得る
が、通常、体重５０kgの成人患者の場合有効成分（該化
合物の含量として）１日約０．５〜５００mg、好ましく
は約１〜２００mgが疾患の治療に用いられる。

【００２９】

【実施例】以下に実施例をあげて本発明を更に詳しく説
明するが、これによって本発明が限定されるものではな
い。なお、培地におけるパーセント（％）は、特に断り
のない限り、重量／容量パーセントを表示する。 実施例１ ポテト・デキストロース・ブロス（ディフコ社製、米
国）２４ｇ、寒天２０ｇと水１リーターからなる斜面培
地上で、２８℃で、７日間培養したグリオクラディウム
ロゼウム（Gliocladium roseum）ＦＬ−３８４８８株
を２％ブドウ糖、３％麦芽糖、１．５％生大豆粉、１．
０％コーン・スティープ・リカー（ＣＳＬ）、０．５％
ポリペプトン、０．３％酵母エキス、０．３％塩化ナト
リウムを含む５００mlの種培地（ｐＨ６．０）に接種
し、２リーター容坂口フラスコで、２８℃、４８時間、
往復振盪機上で培養し、種培養を得た。得られた種培養
液１リーターを２００リーター容ステンレスタンク内の
１２０リーターの５％グルコース、２％生大豆粉、０．
２％ポリペプトン、０．５％炭酸カルシウム、０．０５
％アクトコール（武田薬品工業社製）、０．０２％シリ
コンを含む主発酵培地（ｐＨ７．２）に移植し、２８
℃、通気量・１２０リーター／分、撹拌・１５０回転／
分、内圧・１kg／cm²の条件で、４日間培養した。得ら
れた培養液（２．２リーター）から得られた菌体を８０
％メタノール水（１．８リーター）と１時間撹拌混和し
た。得られたろ液を濃縮乾固後、水（１．８リーター）
に溶かし、酢酸エチル（０．９リーター，２回）で抽出
した。得られた有機層を０．０１Ｎ塩酸、２％炭酸水素
ナトリウム、水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウム
を用いて乾燥し、減圧下濃縮、乾固して油状物（２７５
mg）を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（２０ｇ）に付し酢酸エチル（１２０ml）、酢酸エチ
ル：メタノール＝１９：１（６０ml）で洗浄後、活性区
分を酢酸エチル：メタノール（１９：１，１００ml、次
いで９：１，２０ml）で溶出した。溶出液を合わせて減
圧下濃縮し、ＴＡＮ−１７８６ＡおよびＢの混合物（１
４９mg）を得た。このＴＡＮ−１７８６ＡおよびＢの混
合物を分取用逆相系高速液体クロマトグラフィー〔ＨＰ
ＬＣ，担体：YMC-Pack D-ODS-５, ワイエムシィ社、日
本、移動相：７０％アセトニトリル水、流速：１０ml／
min、検出法：ＵＶ吸収２１４nm〕に付した。溶出容量
５４−１０８ml（Ａ画分）及び１９８−２８８ml（Ｂ画
分）を各々減圧下濃縮、酢酸エチル抽出し、抽出有機層
を水洗後、無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥、減圧下濃
縮乾固、さらにｎ−ヘキサン、酢酸エチルを加えた後減
圧下で濃縮乾固し、ＴＡＮ−１７８６Ａ白色粉末（２６
mg）、ＴＡＮ−１７８６Ｂ白色粉末（５６mg）を得た。

【００３０】実施例２ 実施例１で得られた培養液（１０６リーター）を酢酸エ
チル（１００リーター）と３０分間撹拌混和し、得られ
た有機層を０．０１Ｎ塩酸、２％炭酸水素ナトリウム、
水で順次洗浄した後、減圧下で約４．０リーターまで濃
縮した。濃縮液を無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、
減圧下濃縮、油状となったところをメタノールで分配、
メタノール層を濃縮乾固し、油状物（約 １００ｇ）を
得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５
００ｇ）に付し酢酸エチル：メタノール（１９：１，４
リーター、次いで９：１，１．５リーター）で洗浄後、
活性区分を酢酸エチル：メタノール＝９：１（３．５リ
ーター）で溶出した。溶出液を合わせて減圧下濃縮し、
油状物（８．０８ｇ）を得た。この油状物をシリカゲル
カラムクロマトグラフィー（１５０ｇ）に付し酢酸エチ
ル：２−プロパノール＝９：１（１．８リーター）で洗
浄後、ＴＡＮ−１７８６Ｃ画分を酢酸エチル：２−プロ
パノール（９：１，０．９リーターついで１７：３，
１．２リーター）で溶出した。さらに酢酸エチル：２−
プロパノール（１７：３，０．７５リーターついで４：
１，０．１５リーター）で洗浄後、ＴＡＮ−１７８６Ｄ
画分を酢酸エチル：２−プロパノール（４：１，０．７
５リーターついで７：３，０．６リーター）で溶出し
た。溶出液を各々合わせて減圧下濃縮し、ＴＡＮ−１７
８６Ｃ油状物（２．８６ｇ）、ＴＡＮ−１７８６Ｄ油状
物（１．２４ｇ）を得た。ＴＡＮ−１７８６Ｃの油状物
をＨＰＬＣ〔担体：YMC-Pack SH−363−15 S−15 120
A ODS, ワイエムシィ社、移動相：８０％メタノール
水、流速：２０ml／min.、検出法：ＵＶ吸収２１４nm〕
に付した。溶出容量５００−７８０mlをＴＡＮ−１７８
６ＡおよびＢと同様に処理した後、ジクロロメタンを加
えて濃縮乾固し、ＴＡＮ−１７８６Ｃの白色粉末（８３
２mg）を得た。ＴＡＮ−１７８６Ｄの油状物をＨＰＬＣ
〔担体：前出、移動相：８２％メタノール水〕に付し
た。溶出容量５２０−６６０mlをＴＡＮ−１７８６Ｃと
同様に処理し、ＴＡＮ−１７８６Ｄの白色粉末（１１６
mg）を得た。

【００３１】実施例３ 化合物ＴＡＮ−１７８６Ｃ（１１.７mg，純度72％）を
ピリジン（０.３０ml）および無水酢酸（０.１５ml）に
溶解し、室温で１４時間攪拌した。反応液から溶媒を留
去後、酢酸エチル−ヘキサン（９:１、10ml）で希釈
し、０.０５Ｎ塩酸、１０％塩化アンモニウム水、２％
炭酸水素ナトリウム水、水および飽和食塩水の各々１０
mlで洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥、濃縮乾固して粗粉
末（１１mg）を得た。これをシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（１０ml）に付し、酢酸エチル−アセトン
（７:３）で溶出される画分を集めて濃縮乾固し、１,３
４−Ｏ−ジアセチル ＴＡＮ−１７８６Ｃの白色粉末
（７.９mg）を得た。¹³ Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５ＭＨz、重
メタノール中、 δ ppm;172.9(Q),143.1(Q),136.3(Q),135.9(Q),125.5(C
H),124.9(CH),119.8(CH),81.5(CH),73.4(Q),73.3(Q)，7
3.0(Q),72.8(Q),62.3(CH₂),43.4(CH₂),43.9(CH₂),42.2
(CH₂),41.3(CH₂),40.8(CH₂),40.5(CH₂),39.3(CH₂),27.6
(CH₂),27.2(CH₂),27.0(CH₃),26.9(CH₃),26.7(CH₃),26.0
(CH₃),25.7(CH₃),25.0(CH₂),23.2(CH₂),21.1(CH₃),21.0
(CH₃),19.3(CH₂),19.2(CH₂),16.5(CH₃),16.2(CH₃),16.0
(CH₃)

【００３２】製剤例１ 実施例２によって得られたＴＡＮ−１７８６Ｃを用い
て、下記に示す処方の全成分を混和し、ゼラチンカプセ
ルに充填し、カプセル１個当たり、３０mgのＴＡＮ−１
７８６Ｃを含有するカプセル剤を製造した。 ＴＡＮ−１７８６Ｃ ３０mg 乳糖 １００mg コーンスターチ ４０mg ステアリン酸マグネシウム １０mg 合 計 １８０mg 製剤例２ 実施例２によって得られたＴＡＮ−１７８６Ｃとステア
リン酸マグネシウムを可溶性デンプンの水溶液で自体公
知の方法に従って顆粒化し、乾燥後、乳糖およびコーン
スターチと混合した。混合物を圧縮成型し、下記に示す
処方の錠剤を製造した。 ＴＡＮ−１７８６Ｃ ３０mg 乳糖 ６５mg コーンスターチ ３０mg 可溶性デンプン ３５mg ステアリン酸マグネシウム ２０mg 合 計 １８０mg 製剤例３ 実施例２によって得られたＴＡＮ−１７８６Ｃを３０％
（w/v）ポリエチレングリコール４００を含む生理食塩
水に溶解してＴＡＮ−１７８６Ｃの０．０５％溶液を調
製し、滅菌ろ過して、バイアルに３０mlずつ分注した。
バイアル１個当たり、１５mgのＴＡＮ−１７８６Ｃを含
有する静注剤を製造した。

【００３３】

【発明の効果】本発明の化合物は、サブスタンスＰの受
容体結合阻害作用を有し、毒性は低く、鎮痛抗炎症剤と
して有用である。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＴＡＮ−１７８６ＡのＵＶスペクトル。

【図２】ＴＡＮ−１７８６ＡのＩＲスペクトル。

【図３】ＴＡＮ−１７８６Ａの¹³ＣＮＭＲスペクトル。

【図４】ＴＡＮ−１７８６ＢのＵＶスペクトル。

【図５】ＴＡＮ−１７８６ＢのＩＲスペクトル。

【図６】ＴＡＮ−１７８６Ｂの¹³ＣＮＭＲスペクトル。

【図７】ＴＡＮ−１７８６ＣのＵＶスペクトル。

【図８】ＴＡＮ−１７８６ＣのＩＲスペクトル。

【図９】ＴＡＮ−１７８６Ｃの¹³ＣＮＭＲスペクトル。

【図１０】ＴＡＮ−１７８６ＤのＵＶスペクトル。

【図１１】ＴＡＮ−１７８６ＤのＩＲスペクトル。

【図１２】ＴＡＮ−１７８６Ｄの¹³ＣＮＭＲスペクト
ル。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｃ 43/178 Ｃ 7419−4Ｈ Ｃ０７Ｄ 307/12 Ｃ１２Ｐ 7/02 8114−4Ｂ

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 【化１】 （式中、Ｒ¹およびＲ³は水酸基を、Ｒ²およびＲ⁴はエー
   テル化またはエステル化されていてもよい水酸基を示
   し、Ｒ¹とＲ²とが相合わさって結合手を形成するか、ま
   たはＲ²とＲ³とが相合わさって−Ｏ−を形成していても
   よく、ｍおよびｎは各々０ないし７の整数で、ｍ＋ｎ＝
   ７を示す）で表される化合物を含有してなる鎮痛抗炎症
   剤。
2. 【請求項２】一般式 【化２】 ’ （式中、Ｒ^１’およびＲ³'は水酸基を、Ｒ²'およびＲ⁴'
   はエーテル化またはエステル化されていてもよい水酸基
   を示し、Ｒ¹'とＲ²'とが相合わさって結合手を形成する
   か、またはＲ²'とＲ³'とが相合わさって−Ｏ−を形成し
   ていてもよく、ｍ'およびｎ'は各々０ないし７の整数
   で、ｍ'＋ｎ'＝７を示す）で表される化合物（ただし
   ｍ'＝３の場合、Ｒ⁴'はエーテル化またはエステル化さ
   れた水酸基を示す）。
3. 【請求項３】Ｒ¹'およびＲ⁴'がともに水酸基で、Ｒ²'と
   Ｒ³'とが相合わさって−Ｏ−を形成し、ｍ'＝４である
   請求項２記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ａ。
4. 【請求項４】Ｒ¹'とＲ²'とが相合わさって結合手を形成
   し、Ｒ³'およびＲ⁴'がともに水酸基で、ｍ'＝４である
   請求項２記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ｂ。
5. 【請求項５】Ｒ¹'、Ｒ²'、Ｒ³'およびＲ⁴'がともに水酸
   基で、ｍ'＝４である請求項２記載の化合物ＴＡＮ−１
   ７８６Ｃ。
6. 【請求項６】Ｒ¹'が水酸基で、Ｒ²'とＲ³'とが相合わさ
   って−Ｏ−を形成し、Ｒ⁴'が１−α−マンノピラノース
   残基でエーテル化された水酸基で、ｍ'＝４である請求
   項２記載の化合物ＴＡＮ−１７８６Ｄ。