JPH10287679A

JPH10287679A - Ｔａｎ−２４８３関連化合物、その製造法および用途

Info

Publication number: JPH10287679A
Application number: JP9093354A
Authority: JP
Inventors: Kozo Hayashi; 浩三林; Masayuki Takizawa; 正之瀧澤; Kenichi Noguchi; 憲一野口
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1997-04-11
Filing date: 1997-04-11
Publication date: 1998-10-27

Abstract

(57)【要約】【課題】チロシンキナーゼ阻害薬の提供。【解決手段】一般式【化１】〔式中、Ｒ¹は置換されていてもよい水酸基を、Ｒ²は−
ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃又は−（ＣＨ₂）ＣＨ₃を、【化２】は単結合または二重結合であることを示す〕で表わされ
る化合物またはその塩、その製造法、その生産糸状菌Ｎ
Ｆ２３２９、該化合物またはその塩を含有してなる骨疾
患（例、骨粗鬆症）の治療・予防剤、該化合物またはそ
の塩を含有してなるチロシンキナーゼ阻害薬。【効果】本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩は、チロシ
ンキナーゼ（例、ｃ−ｓｒｃキナーゼ）阻害作用を有し
ており、チロシンキナーゼに起因する疾患、例えば、骨
粗鬆症等の骨疾患、膀胱癌や乳癌等の悪性腫瘍、慢性関
節リウマチや骨関節炎等の関節疾患、急性ウイルス脳炎
や急性膵炎等の炎症性疾患などの治療・予防剤として有
用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、チロシンキナーゼ
阻害作用を有し、骨粗鬆症等の治療・予防剤として有用
な新規化合物およびその製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】骨組織では骨吸収と骨形成がバランスを
保ちながら常に繰り返され、骨の恒常性が維持されてお
り、骨粗鬆症などの骨疾患は、このバランスが骨吸収側
に傾くことによって引き起こされる。近年、骨吸収には
破骨細胞のｃ−ｓｒｃキナーゼが重要な役割を果たして
いると考えられ、そのためチロシンキナーゼの阻害剤で
あるマイコトリエニンなどが骨疾患の治療や予防に有用
であると考えられている〔ディー・フォイエルバッハ
（D. Feuerbach）ら、ザ・ジャーナル・オブ・バイオロ
ジカル・ケミストリー（The Journal of Biological Ch
emistry）、270巻、25949頁（1995）〕。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】現在、骨疾患（例、骨
粗鬆症）の治療および予防にはエストロゲン剤、カルシ
トニン、ビスフォスフォン酸等の骨吸収抑制物質が用い
られている。しかしながら、これらの治療薬を投与する
場合、投与対象が限定されたり、効果が不確実である場
合もあり、十分な効果が得られているとはいえない。ま
た、現在のところ破骨細胞のｃ−ｓｒｃキナーゼに対
し、満足な阻害作用を有する化合物は得られていない。
そこで、チロシンキナーゼ、その中でも最近、骨吸収に
主な役割を果たしていることが明らかになりつつあるｃ
−ｓｒｃキナーゼを阻害する薬剤を見いだすことが出来
れば、骨粗鬆症などの骨疾患の治療・予防剤として使用
することができる。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記した
課題に鑑み、鋭意検討した結果、ＴＡＮ−２４８３Ａお
よびＢと命名した新規化合物を糸状菌に属する微生物の
培養液中より単離する事に成功し、これら化合物が強力
なｃ−ｓｒｃキナーゼ阻害作用を有し、さらに骨吸収抑
制作用を示することを見いだした。本発明者らは、これ
らの知見に基づき、さらに研究を重ね、本発明を完成す
るに至った。

【０００５】すなわち、本発明は、（１）一般式

【化６】〔式中、Ｒ¹は置換されていてもよい水酸基を、Ｒ²は−
ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃または−（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃を、

【化７】は単結合または二重結合であることを示す〕で表わされ
る化合物またはその塩、

【０００６】（２）Ｒ¹が式−ＯＲ³（Ｒ³はそれぞれＣ
_1-6アルコキシ、アミノ、ハロゲン原子もしくはカルボ
キシルで置換されていてもよいＣ_1-19炭化水素基または
Ｃ_1-13アシル基を示す）で表わされる基を示す第（１）
項記載の化合物、（３）Ｒ³が(1)Ｃ_1-6アルコキシで置
換されていてもよいＣ_1-8アルキル基、(2)C_2-8アルケニ
ル基、(3)Ｃ_7-19アラルキル基、(4)アミノもしくはカル
ボキシルで置換されていてもよいＣ_1-6アルカノイル
基、(5)Ｃ_3-6アルケノイル基、(6)Ｃ_4-7シクロアルキル
カルボニル基、(7)Ｃ_7-11アロイル基、または(8)ハロゲ
ン原子で置換されていてもよいＣ_8-13アリールアルカノ
イル基である第（２）項記載の化合物、（４）Ｒ¹がＣ
_1-6アルカノイルで置換されていてもよい水酸基を示す
第（１）項記載の化合物、（５）Ｒ¹が水酸基である第
（１）項記載の化合物、（６）

【化８】が二重結合である第（１）項記載の化合物、

【０００７】（７）化合物が式

【化９】で表わされる化合物ＴＡＮ−２４８３Ａ、または式

【化１０】で表わされる化合物ＴＡＮ−２４８３Ｂである第（１）
項記載の化合物、

【０００８】（８）糸状菌に属し、第（７）項記載の化
合物ＴＡＮ−２４８３Ａおよび／またはＢを生産する能
力を有する微生物を培地に培養し、培養物中に化合物Ｔ
ＡＮ−２４８３Ａおよび／またはＢを生成蓄積せしめ、
これを採取することを特徴とする第（７）項記載の化合
物ＴＡＮ−２４８３Ａおよび／またはＢの製造法、
（９）微生物が糸状菌ＮＦ２３２９（ＦＥＲＭＢＰ−
５９０５）である第（８）項記載の製造法、（１０）糸
状菌ＮＦ２３２９（ＦＥＲＭＢＰ−５９０５）、（１
１）第（１）項記載の化合物またはその塩を含有してな
る医薬、（１２）骨疾患の治療・予防剤である第（１
１）項記載の医薬、（１３）骨疾患が骨粗鬆症である第
（１２）項記載の医薬、および（１４）第（１）項記載
の化合物またはその塩を含有してなるチロシンキナーゼ
阻害薬を提供する。

【０００９】上記式中、Ｒ¹で表わされる置換されてい
てもよい水酸基における置換基としては、置換されてい
てもよい炭化水素基または置換されていてもよいアシル
基などが用いられる。炭化水素基としては、炭素数１な
いし１９の炭化水素基などが用いられ、具体的には、
(1)炭素数１ないし８のアルキル基（例、メチル、エチ
ル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、se
c−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプ
チル、オクチル等、特に炭素数１ないし４のアルキル
基）、(2)炭素数２ないし８のアルケニル基（例、ビニ
ル、アリル、イソプロペニル、１−プロペニル、２−ブ
テニル、３−ブテニル、２−ヘキセニル、２−オクテニ
ル等、特に、炭素数２ないし４のアルケニル基）、(3)
炭素数２ないし８のアルキニル基（例、エチニル、１−
プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチ
ニル、３−ブチニル、２−ヘキシニル、２−オクチニル
等、特に、炭素数２ないし４のアルキニル基）、(4)炭
素数３ないし６のシクロアルキル基（例、シクロプロピ
ル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル
等）、(5)炭素数６ないし１４のアリール基（例、フェ
ニル、ナフチル等）および (6)炭素数７ないし１９のア
ラルキル基（例、ベンジル，フェネチルなどのフェニル
−Ｃ_1-6アルキル基、ベンズヒドリルなどのジフェニル
−Ｃ_1-6アルキル基、トリチル等）などが用いられる。
これら炭化水素基の中でも、例えば、(1)炭素数１ない
し８のアルキル基、(2)炭素数２ないし８のアルケニル
基、(3)炭素数７ないし１９のアラルキル基などが好ま
しい。

【００１０】このような炭化水素基は、置換可能な位置
に、例えば、(ｉ)(a)炭素数１ないし４のアルキル基
（例、メチル，エチル，プロピル，イソプロピル，ブチ
ル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル等）、(b)炭
素数１ないし６のアルカノイル基（例、ホルミル、アセ
チル，プロピオニル，イソプロピオニル、ブチリル、イ
ソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘ
キサノイル等）、(c)１ないし３個の炭素数１ないし４
のアルキルで置換されていてもよい炭素数７ないし１１
のアロイル基（例、ベンゾイル、p-トルオイル、ナフト
イル等）、(d)炭素数２ないし７のアルコキシカルボニ
ル基（例、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、
プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、tert-ブ
トキシカルボニル等）および (e)炭素数８ないし１４の
アラルキルオキシカルボニル基（例、ベンジルオキシカ
ルボニル，フェネチルオキシカルボニルなどのフェニル
−Ｃ_1-6アルキルカルボニル等）から選ばれる１ないし
２個の置換基を有していてもよいアミノ基、(ii)(a)炭
素数１ないし６のアルキル基（例、メチル，エチル，プ
ロピル，イソプロピル，ブチル、イソブチル、sec-ブチ
ル、tert-ブチル等）、(b)炭素数７ないし１２のアラル
キル基（例、ベンジル，フェネチルなどのフェニル−Ｃ
_1-6アルキル等）、(c)炭素数１ないし６のアルカノイル
基（例、ホルミル、アセチル，プロピオニル，イソプロ
ピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル、イソバ
レリル、ピバロイル、ヘキサノイル等）および(d)１な
いし３個の炭素数１ないし４のアルキルで置換されてい
てもよい炭素数７ないし１１のアロイル基（例、ベンゾ
イル、p-トルオイル、ナフトイル等）から選ばれる置換
基を有していてもよい水酸基、

【００１１】(iii)(a)炭素数１ないし４のアルキル基
（例、メチル，エチル，プロピル，イソプロピル，ブチ
ル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル等）、(b)炭
素数７ないし１２のアラルキル基（例、ベンジル，フェ
ネチルなどのフェニル−Ｃ_1-6アルキル等）、(c)炭素数
１ないし６のアルカノイル基（例、ホルミル、アセチ
ル，プロピオニル，イソプロピオニル、ブチリル、イソ
ブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、ヘキ
サノイル等）および(d)１ないし３個の炭素数１ないし
４のアルキルで置換されていてもよい炭素数７ないし１
１のアロイル基（例、ベンゾイル、p-トルオイル、ナフ
トイル等）から選ばれる置換基を有していてもよいメル
カプト基、(iv)カルボキシル基、(ｖ)カルバモイル基、
(vi)炭素数２ないし７のアルコキシカルボニル基（例、
メトキシカルボニル，エトキシカルボニル等）、(vii)
炭素数８ないし１４のアラルキルオキシカルボニル基
（例、ベンジルオキシカルボニル等）、(viii)ニトロ基
で置換されていてもよいグアニジル基、(ix)ニトロ基、
(ｘ)ハロゲン原子（例、フッ素，塩素，臭素，よう素
等）、および(xi)炭素原子以外に酸素、硫黄、窒素等か
ら選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含む５または６
員の複素環、またはそれとベンゼン環もしくは炭素原子
以外に酸素原子，硫黄原子，酸素原子等から選ばれる１
ないし３個のヘテロ原子を含む５または６員の複素環と
の縮合複素環基（例、チエニル、フリル、ピロリル、チ
アゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、イミダゾ
リル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリミ
ジル、キノリル、インドリル等）などから選ばれる１な
いし３個の置換基を有していてもよい。

【００１２】また、Ｒ¹で示される炭化水素基が炭素数
３ないし６のシクロアルキル基、炭素数６ないし１４の
アリール基または炭素数７ないし１９のアラルキル基の
場合、上記した(ｉ)〜(xi)の置換基、(xii)炭素数１な
いし８のアルキル基（例、メチル、エチル、プロピル、
イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、ter
t−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル
等）、(xiii)炭素数２ないし８のアルケニル基（例、ビ
ニル、アリル、イソプロペニル、１−プロペニル、２−
ブテニル、３−ブテニル、２−ヘキセニル、２−オクテ
ニル等）、(xiv)炭素数２ないし８のアルキニル基
（例、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１
−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、２−ヘキシ
ニル、２−オクチニル等）などから選ばれる１ないし３
個の置換基を有していてもよい。Ｒ¹で示される炭化水
素基の置換基としては、上記したものの中でも、Ｃ_1-6
アルコキシ基などが好ましい。

【００１３】アシル基としては、例えば、有機カルボン
酸またはアミノ酸由来のアシル基が用いられる。有機カ
ルボン酸由来のアシル基としては、例えば、炭素数１な
いし１３のアシルなどが用いられる。具体的には、(1)
炭素数１ないし６のアルカノイル基（例、ホルミル、ア
セチル、プロピオニル、イソプロピオニル、ブチリル、
イソブチリル、バレリル、イソバレリル、ピバロイル、
ヘキサノイル等）、(2)炭素数３ないし６のアルケノイ
ル基（例、アクリロイル、メタクリロイル、クロトノイ
ル、イソクロトノイル等）、(3)炭素数４ないし７のシ
クロアルキルカルボニル基（例、シクロプロピルカルボ
ニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボ
ニル、シクロヘキシルカルボニル等）、(4)炭素数７な
いし１１のアロイル基（例、ベンゾイル、ナフトイル
等）、(5)炭素数８ないし１３のアリールアルカノイル
基（例、フェニルアセチル、フェニルプロピオニル、フ
ェニルブチリルなどのフェニル−Ｃ_2-6アルカノイル
等）および (6)炭素数９ないし１３のアリールアルケノ
イル基（例、シンナモイル、アトロポイルなどのフェニ
ル−Ｃ_2-6アルケノイル等）などが用いられる。上記有
機カルボン酸由来のアシル基の中でも、例えば、(1)炭
素数１ないし６のアルカノイル基、(2)炭素数３ないし
６のアルケノイル基、(3)炭素数４ないし７のシクロア
ルキルカルボニル基、(4)炭素数７ないし１１のアロイ
ル基、(5)炭素数８ないし１３のアリールアルカノイル
基などが好ましく用いられ、特に、炭素数１ないし６の
アルカノイル基が好ましい。

【００１４】アミノ酸由来のアシル基としては、例え
ば、天然型あるいは非天然型アミノ酸由来のアシル基
（例、グリシル、Ｌ-およびＤ-アラニル、Ｌ-およびＤ-
バリル、Ｌ-およびＤ-ロイシル、Ｌ-およびＤ-イソロイ
シル、Ｌ-およびＤ-プロリル、Ｌ-およびＤ-ヒドロキシ
プロリル、Ｌ-およびＤ-フェニルアラニル、Ｌ-および
Ｄ-トリプトファニル、Ｌ-およびＤ-セリル、Ｌ-および
Ｄ-トレオニル、Ｌ-およびＤ-チロシル、Ｌ-およびＤ-
アスパラギル、Ｌ-およびＤ-アスパラギニル、Ｌ-およ
びＤ-グルタミル、Ｌ-およびＤ-グルタミニル、Ｌ-およ
びＤ-メチオニル、Ｌ-およびＤ-システイニル、Ｌ-およ
びＤ-シスチル、Ｌ-およびＤ-リシル、Ｌ-およびＤ-ア
ルギニル、Ｌ-およびＤ-ヒスチジル等）などが用いられ
る。これらアシル基は、置換可能な位置に、前述の炭化
水素基における置換基と同様の置換基を１ないし３個有
していてもよい。なかでも、アミノ基、Ｃ_1-6アルコキ
シ基、ハロゲン原子、カルボキシル基などが好ましい。

【００１５】上記式中、

【化１１】は単結合または二重結合を示す。したがって、一般式
〔Ｉ〕で表わされる化合物には、式

【００１６】

【化１２】

【００１７】

【化１３】

【００１８】

【化１４】または

【００１９】

【化１５】〔式中、Ｒ¹は前記と同意義を示す〕で表わされる化合
物が含まれる。

【００２０】上記式中、Ｒ¹としては、式−ＯＲ³（Ｒ³
はそれぞれＣ_1-6アルコキシ、アミノ、ハロゲン原子も
しくはカルボキシルなどで置換されていてもよいＣ_1-19
炭化水素基またはＣ_1-13アシル基を示す）で表わされる
基などが好ましい。なかでも、Ｒ³としては、例えば、
(1)１〜３個のＣ_1-6アルコキシで置換されていてもよい
Ｃ_1-8アルキル基、(2)Ｃ_2-8アルケニル基、(3)Ｃ_7-19ア
ラルキル基（例、ベンジル基などのフェニル−Ｃ_1-6ア
ルキル基）、(4)１〜３個のアミノもしくはカルボキシ
ルなどで置換されていてもよいＣ_1-6アルカノイル基、
(5)Ｃ_3-6アルケノイル基、(6)Ｃ_4-7シクロアルキルカル
ボニル基、(7)Ｃ_7-11アロイル基（例、ベンゾイル
基）、(8)１〜３個のハロゲン原子で置換されていても
よいＣ_8-13アリールアルカノイル基などが好ましい。特
に、Ｒ¹としては、Ｃ_1-6アルカノイルで置換されていて
もよい水酸基が好ましく、なかでも水酸基が好適であ
る。Ｒ²としては、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃が好ましい。上記
式中、

【化１６】としては、二重結合が好ましい。

【００２１】本発明の化合物〔Ｉ〕は、少なくとも４個
の不斉炭素を持つため１６種以上の立体異性体が存在し
うるが、それらの各種異性体およびそれらの混合物も本
発明に含まれる。本発明の化合物〔Ｉ〕が二重結合を有
する場合、シスおよびトランス異性体が存在しうるが、
それらの各異性体およびそれらの混合物も本発明に含ま
れる。本発明の化合物〔Ｉ〕としては、Ｒ¹およびＲ²と
して上記した基を組み合わせた全ての化合物が好ましく
用いられ、なかでも好ましい具体例を〔表１〕〜〔表
４〕に示す。

【００２２】

【表１】

【００２３】

【表２】

【００２４】

【表３】

【００２５】

【表４】

【００２６】これら化合物の中でも、特に、後述の実施
例によって得られた下記化合物１〜４が好適である。

【化１７】

【００２７】

【化１８】

【００２８】

【化１９】

【００２９】

【化２０】

【００３０】

【発明の実施の形態】糸状菌ＮＦ２３２９株は以下の性
質を示す。ａ）形態的特徴本菌株ＮＦ２３２９は麦芽エキス寒天培地、バレイショ
・ブドウ糖寒天培地やオートミール寒天培地等で生育す
る。気生菌糸は分枝を繰り返し、無色で隔壁を有し、表
面は滑らかである。その直径は約１．２μｍ〜２．８μ
ｍで、しばしば最大約１４．７μｍの菌糸束を形成す
る。ｂ）寒天培地上での性状（１）麦芽エキス寒天培地：生育は良好で、培地上での
拡がりは遅く、24℃、２週間後のコロニーの直径は約３
０ｍｍである。表面はやや盛り上がった羊毛状の菌糸体
よりなり、外縁は不規則に縁取られている。気生菌糸の
発達は良好であるが、分生子および子嚢果など特徴のあ
る器官の形成は認められない。中央部は灰白色または部
分的に茶褐色から暗褐色を呈し、中間部から周辺部にか
けて白色から灰白色を呈する。裏面中央部は淡黄白色ま
たは部分的に淡褐色を呈し、中間部から周辺部にかけて
淡黄色を呈する。可溶性色素の生成は認められない。（２）バレイショ・ブドウ糖寒天培地：生育は良好で、
培地上での拡がりは遅く、２４℃、２週間後のコロニー
の直径は約２５ｍｍである。表面は盛り上がった羊毛状
からしわ状の菌糸体よりなり、外縁は不規則に縁取られ
ている。気生菌糸の発達は良好であるが、分生子および
子嚢果など特徴のある器官の形成は認められない。中央
部は灰白色または部分的に茶褐色を呈し、中間部から周
辺部にかけて白色から灰白色を呈する。裏面中央部は淡
黄白色または部分的に淡灰褐色を呈し、中間部から周辺
部にかけて淡黄色を呈する。可溶性色素の生成は認めら
れない。

【００３１】（３）ツァペック寒天培地：生育は著しく
貧弱で、24℃、２週間後のコロニーはわずかに生育して
いるだけである。表面はやや盛り上がった菌糸体よりな
っていた。気生菌糸の発達は貧弱であり、分生子および
子嚢果など特徴のある器官の形成は認められない。中央
部から周辺部にかけてほとんど透明の象牙色から淡白色
を呈する。裏面も同様に中央部から周辺部にかけてほと
んど透明の象牙色から淡白色を呈する。可溶性色素の生
成は認められない。（４）オートミール寒天培地：生育は良好で、培地上で
の拡がりは遅く、２４℃、２週間後のコロニーの直径は
約２５ｍｍであった。表面はビロード状からやや盛り上
がった羊毛状の菌糸体よりなり、外縁は不規則に縁取ら
れている。気生菌糸の発達は良好であるが、分生子およ
び子嚢果など特徴のある器官の形成は認められない。中
央部は灰白色または部分的に茶褐色から暗褐色を呈し、
中間部から周辺部にかけて白色から灰白色を呈する。裏
面中央部は淡黄白色または部分的に淡褐色を呈し、中間
部から周辺部にかけて淡黄色を呈する。可溶性色素の生
成は認められない。

【００３２】ｃ）生理学的性状本菌株の生育条件をバレイショ・ブドウ糖寒天培地で調
べた。生育温度範囲は６℃〜２８℃で、至適温度は１４
℃〜２５℃であった。またｐＨ３〜ｐＨ９のいずれでも
生育は良好であった。なお、以上の結果から本菌株は糸
状菌に属することは明らかであるが、上記の培地上で分
生子および子嚢果など特徴のある器官の形成が認められ
なかったことから、本菌株を分類学上の位置に帰属させ
ることができなかった。従って、本菌株を糸状菌ＮＦ２
３２９（Filamentous fungus NF2329）と称することに
した。本菌株は、平成９年４月９日に通商産業省工業技
術院生命工学工業技術研究所（ＮＩＢＨ）に受託番号Ｆ
ＥＲＭＢＰ−５９０５として、また平成９年３月１８
日に財団法人発酵研究所（ＩＦＯ）に受託番号ＩＦＯ
３２９２１として、それぞれ寄託されている。

【００３３】本発明の化合物は、この菌株に限らず、遺
伝子操作技術を含め、自体公知の方法により、それから
誘導される本化合物の生産能を有する変異株をはじめ、
当該生産能を有する微生物を培地中で培養し、本化合物
を培地中に生成蓄積せしめ、それを採取することにより
製造できる。本発明の化合物の生産菌の培養に用いる培
地は、該菌が利用し得る栄養源を含むものなら液状でも
固体状でもよいが、大量に培養するときに液体培地を用
いるのがより適当である。培地には、当該化合物生産菌
が同化し得る炭素源、窒素源、無機物質、微量栄養源を
適宜配合する。炭素源としては、例えばグルコース、乳
糖、ショ糖、麦芽糖、デキストリン、澱粉、グリセリ
ン、マンニトール、ソルビトール、油脂類（綿実油、大
豆油、ラード油、チキン油など）、n-パラフィンなど
が、窒素源としては、例えば、肉エキス、酵母エキス、
乾燥酵母、大豆粉、コーン・スティープ・リカー、ペプ
トン、生大豆粉、綿実粉、トマトペースト、ピーナッツ
ミール、廃糖蜜、尿素、アンモニア塩類（硫酸アンモニ
ウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アン
モニウムなど）などを用いる。さらに、ナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む塩類、
鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、ニッケルなどの金属塩
類、りん酸、ほう酸、硫酸などの塩類や酢酸、プロピオ
ン酸などの有機酸の塩類を適宜用いてもよい。その他、
アミノ酸（グリシン、グルタミン酸、アスパラギン酸、
アラニン、リシン、メチオニン、プロリンなど）、ペプ
チド（ジペプチド、トリペプチドなど）、ビタミン類
（Ｂ₁、Ｂ₂、ニコチン酸、Ｂ₁₂、Ｃなど）、核酸類（プリ
ン、ピリミジン、その誘導体など）などを含有させても
よい。もちろん、培地中のｐＨを調整する目的で無機ま
たは有機の酸またはアルカリ類、緩衝剤などを加え、あ
るいは消泡の目的で油脂類、界面活性剤などの適量を添
加して差し支えない。

【００３４】培養の手段は静置培養、振とう培養あるい
は通気撹拌培養法等の手段を用いても良い。大量の処理
には、いわゆる深部通気撹拌培養によるものが望まし
い。培養の条件は培地の状態、組成、菌株の種類、培養
の手段によって異なるが、通常、約１２℃〜３７℃の温
度、初発ｐＨ約５〜９付近を選択するのがよい。とりわ
け培養中期の温度は約１４℃〜３０℃の温度、初発ｐＨ
約６〜８の条件が望ましい。培養時間も前記の諸条件に
より一定しないが、諸生理活性物質濃度が最大となるま
で培養するのが望ましい。これに要する時間は、液体培
地を用いる振とう培養または通気撹拌培養の場合、通常
約１〜１４日間である。培養液から目的とする化合物を
採取する方法を以下に述べる。例えば、本発明の化合物
ＴＡＮ−２４８３ＡおよびＢは脂溶性であるので、この
性質を利用する一般手段を採用すればよい。まず培養液
または培養濾過液を水と混和しない有機溶媒、例えばジ
クロロメタン等のハロゲン化炭化水素類、酢酸エチル等
のエステル類、メチルイソブチルケトン等のケトン類あ
るいはイソブチルアルコール等のアルコール類などを加
え、本発明化合物を抽出する。得られた有機溶媒層を水
で洗浄後、濃縮すると本発明化合物を含有する粗物質が
得られる。

【００３５】粗物質をさらに精製し、純粋な本発明化合
物を得るには、周知の種々のクロマトグラフィー法が有
利に用いられる。担体としては活性炭、シリカゲル、微
結晶セルロース、吸着性樹脂など化合物の吸着性の差を
利用するもの、または分子ふるい性樹脂など化合物の分
子量の差を利用するもの等が有利に用いられる。これら
担体から目的とする化合物を溶出するためには担体の種
類、性質によって組み合わせが異なるが、適当な有機溶
媒（例、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化
炭化水素類、ヘキサン、シクロヘキサン等の脂肪族炭化
水素類、トルエン等の芳香族炭化水素類、酢酸エチル等
のエステル類、アセトン等のケトン類、メタノール、エ
タノール、イソプロピルアルコール、イソブチルアルコ
ール等のアルコール類、アセトニトリル等のニトリル類
など）、有機酸（例、酢酸、ぎ酸等）、水溶液〔例え
ば、水、アルカリ（例、水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム、炭酸水素ナトリウム等）含有水溶液、酸（例、塩
酸、酢酸、ぎ酸、りん酸等）含有水溶液、塩類含有水溶
液（例、食塩水、酢酸緩衝液、りん酸緩衝液等）など〕
の単独あるいは適宜の割合の混合溶媒が用いられる。さ
らに詳しくは、担体としてクロマト用活性炭（武田薬品
工業社製），キーゼルゲル６０（メルク社製、ドイ
ツ）、微結晶セルロース〔例、アビセル（旭化成社
製）、フナセル（フナコシ株式会社製）等〕、吸着性樹
脂〔例、ダイヤイオンＨＰ−２０またはＳＰ−２０７
（三菱化成社製）、アンバーライトＸＡＤ−ＩまたはII
（ローム・アンド・ハース社製、米国）等〕、分子ふる
い性樹脂〔例、セファデックスＬＨ−２０（ファルマシ
ア社製，スウェーデン）等〕などが有利に用いられる。

【００３６】さらに、化合物を精製する場合に、分取用
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法も有利に用
いられる。この方法を適用する場合、担体としてはオク
タデシルシラン（ＯＤＳ）系、ポリマー系およびシリカ
ゲル系のものが有利に用いられる。例えばＯＤＳの場
合、ＹＭＣゲルＯＤＳ（ワイエムシイ社製）あるいは
ＴＳＫゲルＯＤＳ（東ソー社製）などが、ポリマー系
の場合、ポリマーにオクタデシル基を導入したＯＤＰ
（旭化成社製）あるいはポリマーにポリアミンを導入し
たＮＨ２Ｐ（旭化成社製）などが用いられ、移動相とし
てはメタノールあるいはアセトニトリルと水あるいは酸
または塩類含有水溶液の混合溶液が有利に用いられる。
シリカゲル系の場合は、例えば、球状シリカゲルを高圧
充填したＹＭＣゲルＳＩＬ（ワイエムシイ社製）やＴ
ＳＫゲルＳｉｌｉｃａ−６０（東ソー社製）などが用
いられる。移動相としては、有機溶媒（例、ジクロロメ
タン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ヘキサ
ン、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類、トルエン等
の芳香族炭化水素類、酢酸エチル等のエステル類、アセ
トン等のケトン類、メタノール、エタノール、イソプロ
ピルアルコール、イソブチルアルコール等のアルコール
類、アセトニトリル等のニトリル類など）、有機酸
（例、酢酸、ぎ酸等）あるいは水などの単独あるいは適
宜の割合の混合溶媒が有利に用いられる。後述する実施
例２で得られたＴＡＮ−２４８３Ａ（化合物１）および
Ｂ（化合物２）の上記構造式は、物理化学的データおよ
びＮＭＲスペクトルの詳細な検討などにより決定した。

【００３７】次に、上記化合物〔Ｉ〕またはその塩の製
造法について述べる。なお、反応に際して、原料の反応
に関与すべきでない官能基の保護、ならびにその保護基
の脱離などは、自体公知の手段から適宜選択しうる。一
般式〔Ｉ〕においてＲ¹が炭化水素基で置換された水酸
基である化合物またはその塩は、例えば、一般式〔Ｉ〕
においてＲ¹が水酸基である化合物またはその塩を、塩
基の存在下、脱離基を有する化合物と反応させることに
より製造することができる。脱離基を有する化合物と
は、化学反応によって容易に置換される官能基を有する
化合物を表わし、具体的には、ハロゲン化物（例、よう
化メチル、よう化エチル、よう化プロピル、よう化イソ
プロピル、よう化ブチル、よう化ペンチル、臭化アリ
ル、臭化ベンジル等）、スルホン酸エステル類（例、メ
タンスルホン酸メチル、p-トルエンスルホン酸メチル、
p-トルエンスルホン酸エチル、ベンゼンスルホン酸メチ
ル、トリフルオロメタンスルホン酸メチル、トリフルオ
ロメタンスルホン酸エチル等）、硫酸エステル類（例、
ジメチル硫酸、ジエチル硫酸等）などが用いられる。塩
基としては、例えば、水素化アルカリ金属（例、水素化
ナトリウム、水素化カリウム等）、水素化アルカリ土類
金属（例、水素化カルシウム等）、アルカリ金属のアル
コキシド（例、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエト
キシド等）、アルカリ金属の水酸化物（例、水酸化ナト
リウム，水酸化カリウム等）、アルカリ金属の炭酸塩
（例、炭酸ナトリウム，炭酸カリウム、炭酸水素ナトリ
ウム等）、アルカリ土類金属の水酸化物（例、水酸化カ
ルシウム等）、３級アミン（例、トリメチルアミン，ト
リエチルアミン，トリプロピルアミン，N-メチルピペリ
ジン，N-メチルピロリジン，シクロヘキシルジメチルア
ミン，N-メチルモルホリン等）、２級アミン（例、ジ-n
-ブチルアミン，ジイソブチルアミン，ジシクロヘキシ
ルアミン等）、芳香族塩基（例、ピリジン、4-ジメチル
アミノピリジン、ルチジン、コリジン等），アルキルリ
チウム（例、メチルリチウム、ブチルリチウム等）など
が用いられる。

【００３８】本反応は、通常反応に悪影響を与えない溶
媒中で行なわれる。該溶媒としては、例えば、アミド類
（例、ホルムアミド、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-
ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン等）、スル
ホキシド類（例、ジメチルスルホキシド等）、芳香族塩
基類（例、ピリジン等）、ハロゲン化炭化水素類（例、
クロロホルム，ジクロロメタン等）、エーテル類（例、
ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン
等）、ニトリル類（例、アセトニトリル等）、エステル
類（例、酢酸エチル，ぎ酸エチル等）など、あるいはこ
れらの適宜の割合の混合物などが用いられる。反応温度
は、反応が進行する限り特に限定されないが、通常約−
７０℃〜１５０℃、好ましくは約−３０℃〜８０℃で行
なわれる。反応時間は、用いられる原料，塩基，反応温
度，溶媒の種類により異なるが、通常数十分から数十時
間反応させる。

【００３９】一般式〔Ｉ〕においてＲ¹がアシル基で置
換された水酸基である化合物またはその塩は、例えば、
一般式〔Ｉ〕においてＲ¹が水酸基である化合物または
その塩を、アシル化反応に付すことにより製造すること
ができる。水酸基のアシル化は、溶媒中で原料化合物と
アシル化剤、例えば、有機酸（例、有機カルボン酸等）
あるいはその反応性誘導体を反応させることにより行な
うことができる。有機酸の反応性誘導体としては、例え
ば、酸ハライド、酸無水物、活性エステルなどが用いら
れ，このような反応性誘導体を具体的に述べると次の通
りである。１）酸ハライドここで酸ハライドとしては、例えば、酸クロリド，酸ブ
ロミドなどが用いられる。２）酸無水物ここで酸無水物としては、例えば、脂肪族カルボン酸
（例，酢酸，吉草酸，ヘキサン酸等）または芳香族カル
ボン酸（例，安息香酸等）からなる混合酸無水物あるい
は対称型酸無水物などが用いられる。３）活性エステルここで活性エステルとしては、例えば、メチルエステ
ル，エチルエステル，メトキシメチルエステル，プロパ
ルギルエステル，4-ニトロフェニルエステル，2,4-ジニ
トロフェニルエステル，トリクロロフェニルエステル，
ペンタクロロフェニルエステル，メシルフェニルエステ
ルなどのエステルの他，1-ヒドロキシ-1H-2-ピリドン，
N-ヒドロキシこはく酸イミド，N-ヒドロキシフタールイ
ミド, 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBT)などとの
エステルが用いられる。カルボン酸と直接反応させる場
合には、例えば、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミ
ド（DCC）、塩酸 1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピ
ル)カルボジイミド(WSC），N,N'-ジイソプロピルカルボ
ジイミド（DIC）などの縮合剤が用いられる。これらの
縮合剤は、上述の活性エステル、例えば、1-ヒドロキシ
-1H-2-ピリドン，N-ヒドロキシこはく酸イミド、N-ヒド
ロキシフタルイミド、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール
(HOBT)などとのエステル合成に用いてもよい。

【００４０】本反応において塩基の存在下実施される場
合があり、用いられる塩基としては、例えば、３級アミ
ン（例、トリメチルアミン，トリエチルアミン，トリプ
ロピルアミン，N-メチルピペリジン，N-メチルピロリジ
ン，シクロヘキシルジメチルアミン，N-メチルモルホリ
ン等）、２級アミン（例、ジ-n-ブチルアミン，ジイソ
ブチルアミン，ジシクロヘキシルアミン等）、芳香族塩
基（例、ピリジン、4-ジメチルアミノピリジン、ルチジ
ン、コリジン等）、アルカリ金属の水酸化物（例、水酸
化ナトリウム，水酸化カリウム等）、アルカリ金属の炭
酸塩（例、炭酸ナトリウム，炭酸カリウム、炭酸水素ナ
トリウム等）、アルカリ土類金属の水酸化物（例、水酸
化カルシウム等）などが用いられる。本反応は、通常反
応に悪影響を与えない溶媒中で行なわれる。該溶媒とし
ては、例えば、アミド類（例、ホルムアミド、N,N-ジメ
チルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチ
ルピロリドン等）、スルホキシド類（例、ジメチルスル
ホキシド等）、芳香族塩基類（例、ピリジン等）、ハロ
ゲン化炭化水素類（例、クロロホルム，ジクロロメタン
等）、エーテル類（例、ジエチルエーテル、テトラヒド
ロフラン、ジオキサン等）、ニトリル類（例、アセトニ
トリル等）、エステル類（例、酢酸エチル，ぎ酸エチル
等）など、あるいはこれらの適宜の割合の混合物などが
用いられる。反応温度は、反応が進行する限り特に限定
されないが、通常約−５０℃〜１５０℃、好ましくは約
−３０℃〜８０℃で行なわれる。反応時間は、用いられ
る原料、塩基、反応温度、溶媒の種類により異なるが、
通常数十分から数十時間反応させる。

【００４１】一般式〔Ｉ〕において、

【化２１】が単結合を示す化合物もしくは（および）Ｒ²が−（Ｃ
Ｈ₂）₂ＣＨ₃を示す化合物またはそれらの塩は、例え
ば、一般式〔Ｉ〕において

【化２２】が二重結合を示す化合物もしくは（および）Ｒ²が−Ｃ
Ｈ＝ＣＨＣＨ₃を示す化合物またはそれらの塩を、還元
反応に付すことにより製造することができる。

【００４２】還元反応は、還元剤を用いて好適に実施さ
れる。還元剤としては、例えば、金属水素化合物（例、
水素化リチウムアルミニウム、水素化ほう素ナトリウ
ム、シアノ水素化ほう素ナトリウム、ジボラン等）等が
用いられる。また二重結合の還元は、例えばパラジウム
触媒（例、パラジウム／硫酸バリウム、パラジウム活性
炭素、パラジウム黒等）、白金触媒（例、酸化白金、白
金黒等）またはロジウム触媒等を用いた接触水素添加に
よっても好適に実施される。本反応は酸の存在下で実施
してもよい。用いられる酸としては、例えば、鉱酸
（例、塩酸、硫酸等）、有機酸（例、酢酸、プロピオン
酸、トリフルオロ酢酸等）、ルイス酸（例、塩化アルミ
ニウム、三フッ化ほう素、四塩化チタン等）等が挙げら
れる。反応は、反応に悪影響を与えない溶媒中で行なわ
れる。該溶媒としては、例えば、アミド類（例、ホルム
アミド、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセ
トアミド、N-メチルピロリドン等）、スルホキシド類
（例、ジメチルスルホキシド等）、芳香族塩基類（例、
ピリジン等）、ハロゲン化炭化水素類（例、クロロホル
ム，ジクロロメタン等）、エーテル類（例、ジエチルエ
ーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等）、ニトリ
ル類（例、アセトニトリル等）、エステル類（例、酢酸
エチル，ぎ酸エチル等）、アルコール類（例、メタノー
ル、エタノール、tert-ブタノール等）、水など、ある
いはこれらの適宜の割合の混合物などが挙げられる。反
応温度は、反応が進行する限り特に限定されないが，通
常約−５０℃ないし約１５０℃、好ましくは約−３０℃
ないし約８０℃で行われる。反応時間は、用いられる原
料、触媒、反応温度、溶媒の種類により異なるが、通常
数十分から数十時間反応させる。

【００４３】上述の製造法によって得られた化合物
〔Ｉ〕は、塩として用いてもよく、好ましくは、薬理学
的に許容される塩が用いられる。このような塩として
は、化合物〔Ｉ〕が酸性基を有する場合、例えば、アル
カリ金属（例、ナトリウム、カリウム等）との塩、アル
カリ土類金属（例、カルシウム、マグネシウム等）との
塩などの塩基付加塩が挙げられる。化合物〔Ｉ〕が塩基
性基を有する場合、例えば、無機酸（例、塩酸、硫酸、
りん酸等）との塩あるいは有機酸（例、酢酸、プロピオ
ン酸、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、シュウ酸、メタン
スルホン酸等）との塩などの酸付加塩が挙げられる。

【００４４】本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩は、例
えば、チロシンキナーゼ（例、ｃ−ｓｒｃキナーゼ）阻
害作用を有しており、チロシンキナーゼに起因する疾
患、例えば、骨粗鬆症等の骨疾患、膀胱癌や乳癌等の悪
性腫瘍、慢性関節リウマチや骨関節炎等の関節疾患、急
性ウイルス脳炎や急性膵炎等の炎症性疾患などの治療・
予防剤として有用である。本発明の化合物〔Ｉ〕または
その塩は、毒性も低く、ヒトまたは哺乳動物（例、ラッ
ト、マウス、ウサギ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ヒツ
ジ、サル等）に対して、安全に用いられる。化合物
〔Ｉ〕またはその塩を、例えばヒトに投与する場合は、
それ自体あるいは適宜の薬理学的に許容される担体、賦
形剤、希釈剤と混合し、医薬組成物として経口的または
非経口的に安全に投与することができる。上記医薬組成
物としては、経口剤として、例えば散剤、顆粒剤、カプ
セル剤、錠剤等が、非経口剤として、例えば注射剤、点
滴剤、外用剤（例、経鼻投与製剤、経皮製剤等）、坐剤
（例、直腸坐剤、膣坐剤等）等が用いられる。これらの
製剤は、製剤工程において通常一般に用いられる自体公
知の方法により製造することができる。

【００４５】経口剤は、本発明の化合物〔Ｉ〕またはそ
の塩に、例えば、賦形剤（例、乳糖、白糖、デンプン、
マンニトールなど）、崩壊剤（例、炭酸カルシウム、カ
ルボキシメチルセルロースカルシウムなど）、結合剤
（例、α化デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチル
セルロース、ポリビニールピロリドン、ヒドロキシプロ
ピルセルロースなど）または滑沢剤（例、タルク、ステ
アリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６００
０など）などを添加して圧縮成形し、次いで必要によ
り、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のた
め自体公知の方法でコーティングすることにより製造す
ることができる。コーティング剤としては、例えば、エ
チルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリオ
キシエチレングリコール、セルロースアセテートフタレ
ート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート
およびオイドラギット（ローム社製、ドイツ，メタアク
リル酸・アクリル酸共重合物）などが用いられる。注射
剤は、本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩を分散剤
（例、ツイーン(Tween)８０（アトラスパウダー社製、
米国）、ＨＣＯ６０（日光ケミカルズ製）、ポリエチ
レングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギ
ン酸ナトリウムなど）、保存剤（例、メチルパラベン、
プロピルパラベン、ベンジルアルコール、クロロブタノ
ールなど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム、グリセリ
ン、ソルビトール、ブドウ糖など）などと共に水性注射
剤として、あるいはオリーブ油、ゴマ油、綿実油、コー
ン油などの植物油、プロピレングリコールなどに溶解、
懸濁あるいは乳化して油性注射剤として成形することに
より製造することができる。

【００４６】外用剤は、本発明の化合物〔Ｉ〕またはそ
の塩を固状、半固状または液状の組成物とすることによ
り製造される。例えば、上記固状の組成物は、本発明の
化合物〔Ｉ〕をそのまま、あるいは賦形剤（例、ラクト
ース、マンニトール、デンプン、微結晶セルロース、白
糖など）、増粘剤（例、天然ガム類、セルロース誘導
体、アクリル酸重合体など）などを添加、混合して粉状
とすることにより製造することができる。上記液状の組
成物は、注射剤の場合とほとんど同様で、油性あるいは
水性懸濁剤とすることにより製造される。半固状の組成
物は、水性または油性のゲル剤、あるいは軟膏状のもの
がよい。また、これらの組成物は、いずれもｐＨ調節剤
（例、炭酸、りん酸、クエン酸、塩酸、水酸化ナトリウ
ムなど）、防腐剤（例、パラオキシ安息香酸エステル
類、クロロブタノール、塩化ベンザルコニウムなど）な
どを含んでいてもよい。坐剤は、本発明の化合物〔Ｉ〕
またはその塩を油性または水性の固状、半固状あるいは
液状の組成物とすることにより製造することができる。
該組成物に用いる油性基剤としては、例えば、高級脂肪
酸のグリセリド〔例、カカオ脂、ウイテプゾル類（ダイ
ナマイトノーベル社製）など〕、中級脂肪酸〔例、ミグ
リオール類（ダイナマイトノーベル社製）など〕、ある
いは植物油（例、ゴマ油、大豆油、綿実油など）などが
挙げられる。水性基剤としては、例えばポリエチレング
リコール類、プロピレングリコールなどが挙げられる。
また、水性ゲル基剤としては、例えば天然ガム類、セル
ロース誘導体、ビニール重合体、アクリル酸重合体など
が挙げられる。

【００４７】本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩の製剤
中の含量は、通常約０．１ないし１００重量／重量％で
ある。本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩をヒトに用い
る場合の投与量は、対象疾病の種類、患者の年齢、投与
ルートなどで変動し得るが、例えば、骨粗鬆症の治療目
的で経口的に投与する場合、通常有効成分として、１日
成人（体重５０Ｋｇ）１人当たり約２ｍｇ〜１ｇ、とり
わけ約１０ｍｇ〜５００ｍｇの化合物〔Ｉ〕またはその
塩を用いることが好ましい。これらの製剤は、１日１〜
３回に分けて投与することができる。本発明の化合物
〔Ｉ〕またはその塩を、例えば、骨粗鬆症の治療のため
に、注射剤として非経口的に皮下、静脈内または筋肉内
に投与する場合、その投与量は１日成人１人当たり約１
ｍｇ〜２００mｇ、好ましくは２ｍｇ〜１００ｍｇであ
る。

【００４８】

【実施例】以下に実施例および試験例を挙げて、本発明
を更に具体的に説明するが、これによって本発明が限定
されるものではない。なお、培地におけるパーセント
（％）は、特に断りのない限り、重量／容量パーセント
を表す。混合溶媒において混合比を示した数値は各溶媒
の容量混合比である。ＮＭＲスペクトルは、ブルカーＤ
ＰＸ−３００型スペクトルメーター（¹H NMR; 300MHz,
¹³C NMR; 75MHz）を用いて測定した。内部基準として、
テトラメチルシランを用い、全δ値をppmで示した。ま
た、本明細書中の記号は次のような意味を有する。s：
シングレット，d：ダブレット、t：トリプレット、ｑ：
カルテット、dd：ダブルダブレット、dt:ダブルトリプ
レット、ddq：ダブルダブルカルテット、ddd：ダブルダ
ブルダブレット、m：マルチプレット，br：幅広い、Q：
４級炭素、CH：メチン、CH₂:メチレン、CH₃:メチル

【００４９】

【実施例１】ＴＡＮ−２４８３ＡおよびＢの生産バレイショ・ブドウ糖斜面寒天培地に培養した糸状菌Ｎ
Ｆ２３２９株を２００ｍｌ容三角フラスコ内のグルコー
ス２％、可溶性澱粉３％、生大豆１％、コーン・スティ
ープ・リカー０．３％、ペプトン０．５％、食塩０．３
％、酵母エキス０．１％、炭酸カルシウム０．５％を含
む４０ｍｌの種培地（ｐＨ７．０）に接種し、２４℃、
７日間回転振とう機上で培養した。この培養液１ｍｌ
を２００ｍｌ容三角フラスコ内のグルコース０．５％、
マンニトール５％、こはく酸１．０％、コーン・スティ
ープ・リカー０．２％、りん酸一カリウム０．１％、硫
酸マグネシウム０．３％を含む４０ｍｌの主培地（ｐＨ
６．０）に接種し、２４℃、８日間回転振とう機上で培
養し、主培養液を得た。

【００５０】

【実施例２】ＴＡＮ−２４８３Ａ（化合物１）およびＴ
ＡＮ−２４８３Ｂ（化合物２）の単離実施例１で得られた培養液（４．２リットル）のｐＨを
６．６に調整後、遠心分離を行った。得られた上清液
（４．０リットル）に酢酸エチル（４．０リットル）を
加え、３０分間攪拌した後、濾過補助剤（ハイフロスー
パーセル、ジョンズ・マンビル・プロダクト社製、米
国）を用いて濾過した。有機層を分離後、２％炭酸水素
ナトリウム水（１．５リットル）、Ｎ／１０００塩酸
（２ｘ１．０リットル）および水（１．０リットル）で
順次洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、
濃縮乾固し粗油状物（４３０ｍｇ）を得た。これをシリ
カゲル（キーゼルゲル６０、２５ｇ）のカラムクロマト
グラフィーに付し、ヘキサン／酢酸エチル〔９：１（２
００ｍｌ）、４：１（２００ｍｌ）〕で洗浄後、ヘキサ
ン／酢酸エチル（２：１、４ｘ５０ｍｌ、フラクション
１−４）で溶出分画した。フラクション３および４を濃
縮乾固してＴＡＮ−２４８３ＡおよびＢの混合物（１３
８ｍｇ）を得た。この混合物を分取ＨＰＬＣ〔カラム；
YMC-Pack SH-043-15, SIL（ワイエムシイ社製）、移動
相；０．１％(v/v)メタノール／クロロホルム、流速；
１０ｍｌ／分〕に付し、溶出容量１６０〜１９０ｍｌの
画分を集め、減圧下濃縮乾固して、ＴＡＮ−２４８３Ａ
（化合物１、４０ｍｇ）を無色針状晶として得た。これ
をヘキサン／酢酸エチルより再結晶化し、ＴＡＮ−２４
８３Ａを無色柱状晶として得た。一方、溶出容量２１０
−２３０ｍｌの画分を集め、減圧下濃縮乾固して、ＴＡ
Ｎ−２４８３Ｂ（化合物２、３０ｍｇ）を無色油状物と
して得た。

【００５１】〔ＴＡＮ−２４８３Ａ〕１）外観：無色柱状晶２）融点：７８−７９℃ ３）比旋光度：−２９２゜（c 0.59,クロロホルム，23
℃) ４）分子量：ＦＡＢ−マススペクトル；m/z ２１１（Ｍ
＋Ｈ)⁺ ５）高分解能ＦＡＢ−マススペクトル：m/z ２１１．０
９５６（C₁₁H₁₄O₄＋H)⁺としたときの計算値：２１１．０９７
０６）分子式：C₁₁H₁₄O₄ ７）ＩＲスペクトル：KBr 錠剤中，主な吸収を示す（波
数，cm^-1)。（図１） 3520, 1760, 1205, 1055, 1030 ８）¹³C-NMR スペクトル：75 Mz, 重クロロホルム中，
δppm （図２） 166.6(Q), 133.5(CH), 133.4(Q), 131.3(CH), 125.6(C
H), 79.9(CH), 79.7(CH),79.0(CH), 64.1(CH), 18.8(CH
₃), 18.1(CH₃) ９）呈色反応：陽性；リンモリブデン酸、濃硫酸、よう素、過マンガン
酸カリウム陰性；ドラーゲンドルフ、坂口試薬、ニンヒドリン、モ
ーリッシュ試薬１０）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）：カラム；YMC-Pack A-012, SIL, 6.0 x 150 mm（ワイエ
ムシイ社製）移動相；ヘキサン／イソプロピルアルコール（９５：
５）流速；２.０ml／分検出法；ＵＶ（214 nm）保持時間；９．１分１１）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体；シリカゲル６０Ｆ₂₅₄(メルク社製，ドイツ）展開溶媒；クロロホルム／メタノール（１９：１）Ｒｆ値；０．５０

【００５２】〔ＴＡＮ−２４８３Ｂ〕１）外観：無色油状物２）比旋光度：−１３５゜（c 1.1,クロロホルム，23
℃) ３）分子量：ＦＡＢ−マススペクトル；m/z ２１１
（Ｍ＋Ｈ)⁺ ４）高分解能ＦＡＢ−マススペクトル：m/z ２１１．０
９６１（C₁₁H₁₄O₄＋H)⁺としたときの計算値：２１１．０９７
０５）分子式：C₁₁H₁₄O₄ ６）ＩＲスペクトル：KBr 錠剤中，主な吸収を示す（波
数，cm^-1)。 3425, 1760, 1200, 1040 ７）¹³C-NMR スペクトル：75 Mz, 重クロロホルム中，
δppm 166.2(Q), 135.7(CH), 134.7(CH), 131.2(Q), 124.4(C
H), 77.7(CH), 77.0(CH),70.0(CH), 64.4(CH), 18.2(CH
₃), 15.3(CH₃) ８）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）：カラム；YMC-Pack A-012, SIL, 6.0 x 150 mm（ワイエ
ムシイ社製）移動相；ヘキサン／イソプロピルアルコール（９５：
５）流速；２.０ml／分検出法；ＵＶ（214 nm）保持時間；８．２分９）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：担体；シリカゲル６０Ｆ₂₅₄(メルク社製，ドイツ）展開溶媒；クロロホルム／メタノール（１９：１）Ｒｆ値；０．４８

【００５３】

【実施例３】化合物１（５．０ｍｇ）をピリジン（０．
５ｍｌ）に溶解後、無水酢酸（０．５ｍｌ）を加え室温
で２時間攪拌した。反応混合液を濃縮後、酢酸エチル
（２０ｍｌ）で希釈し、Ｎ／５０塩酸および水で順次洗
浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで脱水後、濃縮乾
固して粗油状物を得た。これをシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー（５．０ｍｌ）に付し、ヘキサンおよびヘ
キサン／酢酸エチル（９０：１０）で洗浄後、ヘキサン
／酢酸エチル（８０：２０）で溶出した。溶出画分を濃
縮乾固して化合物３（６．０ｍｇ）を無色油状物として
得た（収率１００％）。¹ H-NMR (CDCl₃)δppm; 1.59 (3H, d, J = 6.2 Hz), 1.7
6 (3H, d, J = 6.5 Hz),2.10 (3H, s), 4.14 (1H, dd,
J = 6.4, 3.0 Hz), 4.26 (1H, dt, J =7.7, 2.4Hz), 4.
37 (1H, m), 5.35 (1H, m), 5.51 (1H, ddq, J = 15.5,
6.4, 1.6 Hz),5.90 (1H, ddq, J = 15.5, 1.0, 6.5 H
z), 6.74 (1H, dd, J = 3.8, 2.4 Hz) IR (KBr, cm^-1); 1780, 1745, 1230, 1200, 1030

【００５４】

【実施例４】化合物１（１０ｍｇ）をメタノール（１．
０ｍｌ）に溶解し、水素化ほう素ナトリウム（２．０ｍ
ｇ）を加え室温で１５分間攪拌した。反応混合液を濃縮
後、酢酸エチル（３０ｍｌ）で希釈し、Ｎ／５０塩酸お
よび飽和食塩水で順次洗浄した。有機溶媒層を無水硫酸
ナトリウムで脱水後濃縮乾固して、白色粉末を得た。こ
れをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５．０ｍ
ｌ）に付し、ヘキサン／酢酸エチル（８０：２０、７
０：３０、６０：４０）で順次洗浄後、ヘキサン／酢酸
エチル（５０：５０）で溶出した。溶出画分を濃縮乾固
して化合物４（９．８ｍｇ）を白色粉末として得た（収
率９７％）。¹ H-NMR (CDCl₃)δppm: 1.34 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.7
4 (3H,d, J = 6.5 Hz),2.05 (1H, ddd, J = 14.9, 7.4,
3.3 Hz), 2.59 (1H, m), 2.61 (1H, m), 3.74(1H, m),
3.83 (1H, br dd, J = 5.7, 0.8 Hz), 4.14 (1H, d, J
= 4.4 Hz), 4.68 (1H, q, J = 6.9 Hz), 5.56 (1H, dd
q, J = 15.5, 5.7, 1.6 Hz), 5.85 (1H,ddq, J = 15.5,
1.2, 6.5 Hz） IR (KBr, cm^-1); 3460, 1775, 1160, 1095

【００５５】

【試験例１】ｃ−ｓｒｃキナーゼ阻害活性測定ヒト組み換え体ｃ−ｓｒｃキナーゼ（生化学工業製）１
ｕｎｉｔ、１μＭビオチン化ｃｄｃ２キナーゼ基質ペ
プチド（ベーリンガー・マンハイム社製）、２５μＭ
オルトバナジン酸ナトリウム、５ｍＭ塩化マンガン、
２５ｍＭ塩化マグネシウム、５０ｍＭトリス塩酸緩
衝液（ｐＨ７．０）および種々の濃度の検体を含む反応
液４０μｌに１．５ｍＭのＡＴＰを１０μｌ加えて反応
を開始し、３０℃で３０分間保温した後、３ｍＭのピセ
アタンノールを含む反応停止液を１２μｌ添加した。り
ん酸化された基質ペプチド中のチロシンは、チロシンキ
ナーゼアッセイキット（ベーリンガー・マンハイム社
製）を用いて定量した。なお、検体を加えないで同様に
反応させたもののりん酸化チロシン量を１００％とし、
５０％阻害に必要な各検体の濃度をＩＣ₅₀値として示し
た。結果を〔表５〕に示す。

【００５６】

【表５】表５より、ＴＡＮ−２４８３Ａ（化合物１）が優れたｃ
−ｓｒｃキナーゼ阻害活性を有することが分かった。

【００５７】

【試験例２】骨吸収抑制活性の測定８〜１０週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの大腿骨を無菌的
に摘出し、１０％熱不活化牛胎児血清、ペニシリンＧ
５０単位／ｍｌ、ストレプトマイシン５０単位／ｍｌ
を含むハムＦ１２培地（以下、培養液と称する）にて骨
髄腔を洗浄した後、培養液１ｍｌあたり骨を１本づつ加
えて、３７℃、５％炭酸ガス、９５％空気の条件下で３
時間前培養した。この骨をＰＴＨ（副甲状腺ホルモ
ン）（ペプチド研究所製、終濃度１μＭ）および試験化
合物（終濃度１０μＭ）を加えた１ｍｌの培養液に移
し、さらに７日間培養後、培地中に蓄積したカルシウム
の総量をカルシウムＥテストワコー（和光純薬社製）で
測定した。試験化合物の骨吸収抑制活性は、以下の式に
より求めた。結果を〔表６〕に示す。骨吸収抑制活性（％）＝１００ｘ（Ｃｐ−Ｃｓ）／（Ｃ
ｐ−Ｃｃ）Ｃｃ：ＰＴＨおよび試験化合物のいずれも含まない培養
液中の総カルシウム量Ｃｐ：ＰＴＨを加えたときの培養液中の総カルシウム量Ｃｓ：ＰＴＨおよび試験化合物の両方を加えたときの培
養液中の総カルシウム量

【００５８】

【表６】表６より、ＴＡＮ−２４８３Ａ（化合物１）が優れた骨
吸収抑制活性を有することが分かった。

【００５９】

【発明の効果】本発明の化合物〔Ｉ〕またはその塩は、
チロシンキナーゼ（例、ｃ−ｓｒｃキナーゼ）阻害作用
を有しており、チロシンキナーゼに起因する疾患、例え
ば、骨粗鬆症等の骨疾患、膀胱癌や乳癌等の悪性腫瘍、
慢性関節リウマチや骨関節炎等の関節疾患、急性ウイル
ス脳炎や急性膵炎等の炎症性疾患などの治療・予防剤と
して有用である。

【００６０】

【図面の簡単な説明】

【図１】ＴＡＮ−２４８３ＡのＩＲスペクトルを示す。
横軸は波数（cm^-1）を、縦軸はＫＢｒ錠剤中の主な吸収
を示す。

【図２】ＴＡＮ−２４８３Ａの¹³ＣＮＭＲスペクトル
（７５ＭＨｚ、重クロロホルム中）を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/365 ＡＥＤＡ６１Ｋ 31/365 ＡＥＤＣ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｎ 1/14 ＡＣ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｄ //(Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 17/18 Ｃ１２Ｒ 1:645）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】〔式中、Ｒ¹は置換されていてもよい水酸基を、Ｒ²は−
ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃または−（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃を、【化２】は単結合または二重結合であることを示す〕で表わされ
る化合物またはその塩。
【請求項２】Ｒ¹が式−ＯＲ³（Ｒ³はそれぞれＣ_1-6アル
コキシ、アミノ、ハロゲン原子もしくはカルボキシルで
置換されていてもよいＣ_1-19炭化水素基またはＣ_1-13ア
シル基を示す）で表わされる基を示す請求項１記載の化
合物。
【請求項３】Ｒ³が(1)Ｃ_1-6アルコキシで置換されてい
てもよいＣ_1-8アルキル基、(2)Ｃ_2-8アルケニル基、(3)
Ｃ_7-19アラルキル基、(4)アミノもしくはカルボキシル
で置換されていてもよいＣ_1-6アルカノイル基、(5)Ｃ
_3-6アルケノイル基、(6)Ｃ_4-7シクロアルキルカルボニ
ル基、(7)Ｃ_7-11アロイル基、または(8)ハロゲン原子で
置換されていてもよいＣ_8-13アリールアルカノイル基で
ある請求項２記載の化合物。
【請求項４】Ｒ¹がＣ_1-6アルカノイルで置換されていて
もよい水酸基を示す請求項１記載の化合物。
【請求項５】Ｒ¹が水酸基を示す請求項１記載の化合
物。
【請求項６】【化３】が二重結合を、Ｒ²が−ＣＨ＝ＣＨＣＨ₃を示す請求項１
記載の化合物。
【請求項７】化合物が式【化４】で表わされる化合物ＴＡＮ−２４８３Ａ、または式【化５】で表わされる化合物ＴＡＮ−２４８３Ｂである請求項１
記載の化合物。
【請求項８】糸状菌に属し、請求項７記載の化合物ＴＡ
Ｎ−２４８３Ａおよび／またはＢを生産する能力を有す
る微生物を培地に培養し、培養物中に化合物ＴＡＮ−２
４８３Ａおよび／またはＢを生成蓄積せしめ、これを採
取することを特徴とする請求項７記載の化合物ＴＡＮ−
２４８３Ａおよび／またはＢの製造法。
【請求項９】微生物が糸状菌ＮＦ２３２９（ＦＥＲＭ
ＢＰ−５９０５）である請求項８記載の製造法。
【請求項１０】糸状菌ＮＦ２３２９（ＦＥＲＭＢＰ−
５９０５）。
【請求項１１】請求項１記載の化合物またはその塩を含
有してなる医薬。
【請求項１２】骨疾患の治療・予防剤である請求項１１
記載の医薬。
【請求項１３】骨疾患が骨粗鬆症である請求項１２記載
の医薬。
【請求項１４】請求項１記載の化合物またはその塩を含
有してなるチロシンキナーゼ阻害薬。