JP3198393B2 - 抗腫瘍性抗生物質ｔａｎ−１５１８関連化合物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明はトポイソメラーゼＩ阻害
活性を有し抗腫瘍作用を示すＴＡＮ−１５１８Ａ，Ｂお
よびその誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】特開平１−１９３２７９号公報および日
本農芸化学会（福岡）講演要旨集，講演番号２Jal, １
９９０年にＳＦ２５７５が記載されている。その構造式
は下式で 示される。

【化２】 しかしながら、本発明の化合物とは構造が異なり、トポ
イソメラーゼＩ阻害作用についてはなんら記載が無い。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】悪性腫瘍による死亡例
は年々増加の一途をたどっており、有効な新しい治療法
の開発が切望されている。中でも、化学療法の分野で
は、現在使用されている抗腫瘍剤の効果が充分なものと
は言えず、悪性腫瘍を完全に抑制できる新しい抗腫瘍剤
の開発が求められている。特に最近では、腫瘍細胞のＤ
ＮＡトポイソメラーゼＩを阻害する化合物が腫瘍の増殖
を強力に阻害することが明らかにされ、この酵素に対す
る阻害剤の開発が望まれている〔エル．エフ．リウ（L.
F.Liu）、アニュアル レビュー オブ バイオケミス
トリー（Annual Review of Biochemistry）第５８巻、
３５１頁（１９８９年）〕。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、かかる現
状に鑑みて、新たな観点から研究を重ねた結果、土壌か
ら分離された多数の微生物中、ある種の微生物が新規物
質を産生すること、該微生物がストレプトミセス属菌に
属すること、該微生物を適宜の培地に培養することによ
って、動物細胞由来のＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害活
性を有する化合物を培地中に蓄積せしめ、この活性化合
物を単離した後、これをＴＡＮ−１５１８ＡおよびＢと
命名した。ＴＡＮ−１５１８ＡおよびＢはアルカリ加水
分解によりカルボキシル基を有する化合物を与えた。こ
れらの知見に基づき本発明者らは、さらにＴＡＮ−１５
１８Ａ，Ｂおよびその誘導体について検討を進めた結
果、本発明を完成した。すなわち本発明は、１）一般式
〔I〕

【化３】 〔式中、Ｒ¹，Ｒ²，Ｒ³はそれぞれ水素またはアシル基
を示し、Ｒ⁴は水素またはアルキル基を示し、Ｒ⁵は水素
またはメチル基を示す。ただし、Ｒ¹が２−ヒドロキシ
ベンゾイルで、Ｒ²が（Ｚ）−２−メチル−２−ブテノ
イルであり、かつＲ³，Ｒ⁴がともに水素の場合にはＲ⁵
は水素を示す。〕で表される化合物またはその塩、 ２）ストレプトミセス属に属し一般式［Ｉ］中Ｒ¹が２
−ヒドロキシベンゾイル、Ｒ²が（Ｚ）−２−メチル−
２−ブテノイル、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵がともに水素であるＴ
ＡＮ−１５１８Ａまたは一般式［Ｉ］中Ｒ¹が２−ヒド
ロキシベンゾイル、Ｒ²が（Ｚ）−２−エチル−２−ブ
テノイル、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵がともに水素であるＴ ＡＮ−
１５１８Ｂを生産する能力を有する微生物を培地に培養
し、培養物中に該化合物を生成蓄積せしめ、これを採取
することを特徴とするＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢまた
はそれらの塩の製造法および ３）一般式〔I〕で表される化合物またはその塩を含有
してなる抗腫瘍剤に関する。

【０００５】一般式〔I〕に関し、Ｒ¹，Ｒ²またはＲ³で
表されるアシル基としては、有機カルボン酸から誘導さ
れるアシル基が挙げられる。該アシル基としては、好ま
しくは例えば、アルカノイル基，好ましくは炭素数７ま
でのアルカノイル基（ホルミル，アセチル，プロピオニ
ル，ブチリル，イソブチリル，２−メチルブチリル，ペ
ンタノイル，ヘキサノイル，２−エチルブチリル，ヘプ
タノイル等），特に好ましくは炭素数４までのアルカノ
イル基、アルケノイル基，好ましくは炭素数７までのア
ルケノイル基〔例、（Ｚ）−２−メチル−２−ブテノイ
ル，（Ｚ）−２−エチル−２−ブテノイル，アクリロイ
ル，メタクリロイル，クロトノイル，イソクロトノイル
等〕，特に好ましくは炭素数５までのアルケノイル基、
アリールカルボニル基，好ましくは炭素数１５までのア
リールカルボニル基（ベンゾイル，１−または２−ナフ
タレンカルボニル等），特に好ましくは炭素数１１まで
のアリールカルボニル基、アルコキシカルボニル基，好
ましくは炭素数７までのアルコキシカルボニル基（例、
メトキシカルボニル，エトキシカルボニル，プロポキシ
カルボニル，イソプロポキシカルボニル，ブトキシカル
ボニル，イソブトキシカルボニル，sec−ブトキシカル
ボニル，tert−ブトキシカルボニル等），特に好ましく
は炭素数３までのアルコキシカルボニル基、アリールオ
キシカルボニル基，好ましくは炭素数１５までのアリー
ルオキシカルボニル基（例、フェノキシカルボニル，２
−ナフチルオキシカルボニル等），特に好ましくは炭素
数１１までのアリールオキシカルボニル基、アラルキル
カルボニル基，好ましくは炭素数２０までのアラルキル
カルボニル基（例、ベンジルカルボニル，フェネチルカ
ルボニル，フェニルプロピルカルボニル，ナフチルエチ
ルカルボニル等），特に好ましくは炭素数１３までのア
ラルキルカルボニル基、芳香族複素環カルボニル基，好
ましくは５から６員芳香族複素環カルボニル基〔例、２
−，３−または４−ピロリルカルボニル，３−，４−ま
たは５−ピラゾリルカルボニル，２−，４−または５−
イミダゾリルカルボニル，１,２,３−トリアゾール−４
−イルカルボニル，１,２,４−トリアゾール−３−イル
カルボニル，１Ｈ−または２Ｈ−テトラゾール−５−イ
ルカルボニル，２−または３−フリルカルボニル，２−
または３−チエニルカルボニル，２−，４−または５−
オキサゾリルカルボニル，３−，４−または５−イソキ
サゾリルカルボニル，１,２,３−オキサジアゾール−４
−または５−イルカルボニル，１,２,４−オキサジアゾ
ール−３−または５−イルカルボニル，１,２,５−オキ
サジアゾール−３−または−４−イルカルボニル１,３,
４−オキサジアゾール−２−または−５−イルカルボニ
ル，２−，４−または５−チアゾリルカルボニル，３
−，４−または５−イソチアゾリルカルボニル，１,２,
３−チアジアゾール−４−または５−イルカルボニル，
１,２,４−チアジアゾール−３−または５−イルカルボ
ニル，１,２,５−チアジアゾール−３−または４−イル
カルボニル，１,３,４−チアジアゾール−２−または５
−イルカルボニル，２−または３−ピロリジニルカルボ
ニル，２−，３−または４−ピリジルカルボニル，２
−，３−または４−ピリジル−Ｎ−オキシドカルボニ
ル，３−または４−ピリダジニルカルボニル，３−また
は４−ピリダジニル−Ｎ−オキシドカルボニル，２−，
４−または５−ピリミジニルカルボニル，２−，４−ま
たは５−ピリミジニル−Ｎ−オキシドカルボニル，ピラ
ジニルカルボニル，２−，３−または４−ピペリジニル
カルボニル，ピペラジニルカルボニル，３Ｈ−インドー
ル−２−または３−イルカルボニル，２−，３−または
４−ピラニルカルボニル，２−，３−または４−チオピ
ラニルカルボニル，３−，４−，５−，６−，７−また
は８−キノリルカルボニル，ピリド〔２，３−ｄ〕ピリ
ミジニルカルボニル（例、ピリド〔２，３−ｄ〕ピリミ
ジン−２−イルカルボニル），１,５−，１,６−，１,
７−，１,８−，２,６−または２,７−ナフチリジニル
カルボニル （例、１,５−ナフチリジン−２−または３
−イルカルボニル），チエノ〔２，３−ｄ〕ピリジルカ
ルボニル（例、チエノ〔２，３−ｄ〕ピリジン−３−イ
ルカルボニル，ピラジノキノリルカルボニル（例、ピラ
ジノ〔２，３−ｂ〕キノリン−２−イルカルボニル），
クロメニルカルボニル（例、２Ｈ−クロメン−２−また
は３−イルカルボニル等））等〕、芳香族複素環アルカ
ノイル基，好ましくは５から６員芳香族複素環炭素数６
までのアルカノイル基〔例、２−ピロリルアセチル，２
−チエニルアセチル，２−チエニルプロパノイル，３−
フリルアセチル，２−チアゾリルアセチル，（１,２,４
−チアジアゾール−５−イル）アセチル，２−，３−ま
たは４−ピリジルアセチル，２−イミダゾリルアセチ
ル，５−イソオキサゾリルアセチル等〕，特に好ましく
は５から６員芳香族複素環炭素数３までのアルカノイル
基、非芳香族複素環カルボニル基，好ましくは４から６
員非芳香族複素環基（例、アゼチジニルカルボニル，２
−または３−ピロリジニルカルボニル，２−，３−また
は４−ピペリジニルカルボニル，２−ピペラジニルカル
ボニル，２−または３−モルホリニルカルボニル等）が
用いられる。

【０００６】上述のアシル基は置換基を有していてもよ
い。該置換基としては、例えばニトロ、ハロゲン（例、
フッ素，塩素，臭素等）、ヒドロキシル、カルバモイ
ル、炭素数１から４のアルキル基（例、メチル，エチ
ル，プロピル，イソプロピル，ブチル等）、炭素数１か
ら４のアルコキシ基（例、メトキシ，エトキシ，プロポ
キシ，イソプロポキシ，ブトキシ等）、炭素数３から６
のシクロアルキル基（例、シクロプロピル，シクロブチ
ル，シクロペンチル，シクロヘキシル等）、エステル化
されていてもよいカルボキシル、炭素数６から１４のア
リール基（例、フェニル，ナフチル等）、炭素数７から
１７のアラルキル基（例、ベンジル，フェネチル，ナフ
チルメチル等）、５から６員芳香族複素環基（例、２−
ピロリル，チアゾリル，イミダゾリル，１,２,３−トリ
アゾリル，テトラゾリル，２−または３−ピリジル，２
−ピリミジニル等）、４から６員非芳香族複素環基
（例、アゼチジニル，チエタニル，ピロリジニル，ピペ
リジニル，ピペリジル，モルホリニル等）、アミノ、炭
素数１から３のアルキル置換アミノ（例、メチルアミ
ノ，エチルアミノ，プロピルアミノ，イソプロピルアミ
ノ等）、炭素数１から３のアルキルジ置換アミノ（例、
ジメチルアミノ，ジエチルアミノ，ジイソプロピルアミ
ノ等）等が挙げられる。上記アシル基が置換基を有して
いる場合の置換基の数は、１から４、好ましくは１から
３である。一般式〔Ｉ〕に関し、Ｒ¹，Ｒ²の好ましい例
としては、例えば（１）水素、（２）ハロゲン（例、フ
ッ素，塩素，臭素等），炭素数１から４のアルコキシ基
（例、メトキシ，エトキシ，プロポキシ，イソプロポキ
シ，ブトキシ等）等で１から３個置換されていてもよい
炭素数７までのアルカノイル基、（３）炭素数１から４
までのアルキル基（例、メチル，エチル，プロピル，イ
ソプロピル，ブチル等）等で１から３個置換されていて
もよい炭素数７までのアルケノイル基、（４）ハロゲン
（例、フッ素，塩素，臭素等），ヒドロキシル，炭素数
１から４のアルコキシ基（例、メトキシ，エトキシ，プ
ロポキシ，イソプロポキシ，ブトキシ等），アミノ等で
１から３個置換されていてもよい炭素数１５までのアリ
ールカルボニル基が挙げられる。さらに特に好ましく
は、炭素数１から６までのアルカノイル基、炭素数１か
ら４までのアルコキシ基（例、メトキシ，エトキシ，プ
ロポキシ，イソプロポキシ，ブトキシ等）で１から３個
置換されていてもよい炭素数７までのアルケノイル基、
ヒドロキシルで１から３個置換されていてもよい炭素数
１１までのアリールカルボニル基が挙げられる。一般式
［Ｉ］に関し、Ｒ³の好ましい例としては、例えば水
素、ハロゲン（例、フッ素，塩素，臭素等）、炭素数１
から４のアルコキシ基（例、メトキシ，エトキシ，プロ
ポキシ，イソプロポキシ，ブトキシ等）で１から３個置
換されていてもよい炭素数７までのアルカノイル基が挙
げられる。さらに好ましくは、水素、ハロゲン（例、フ
ッ素，塩素，臭素等）で１から３個置換されていてもよ
い炭素数５までのアルカノイル基が挙げられる。

【０００７】一般式［Ｉ］に関し、Ｒ⁴で表されるアル
キル基としては、好ましくは、例えば炭素数１から１２
の直鎖もしくは分枝状のアルキル基（例、メチル，エチ
ル，プロピル，イソプロピル，ブチル，ｔ−ブチル，ヘ
キシル，２−メチル−ヘキシル，ヘプチル，ドデカニル
等）が挙げられる。さらに好ましくは、炭素数１から６
の直鎖もしくは分枝状のアルキル基（例、メチル，エチ
ル，プロピル，イソプロピル，ブチル，ｔ−ブチル，ヘ
キシル等）であり、特に好ましくは炭素数１から３の直
鎖もしくは分枝状のアルキル基（例、メチル，エチル，
プロピル，イソプロピル等）である。Ｒ⁴の好ましい例
としては、例えば水素、炭素数１から３の直鎖もしくは
分枝状のアルキル基（例、メチル，エチル，プロピル，
イソプロピル等）が挙げられる。さらに特に好ましく
は、水素，メチル，エチルが挙げられる。Ｒ⁵は水素が
好ましい。さらに本発明は一般式

【化４】 〔式中、Ｒ¹'，Ｒ²'はそれぞれ水素またはアシル基を示
す。〕で表される化合物またはその塩を提供する。
Ｒ¹'，Ｒ²'で表されるアシル基は、前記Ｒ¹，Ｒ²で表さ
れるアシル基と同意義を有する。

【０００８】一般式〔Ｉ〕においてＲ¹が２−ヒドロキ
シベンゾイル、Ｒ²が（Ｚ）−２−メチル−２−ブテノ
イル、Ｒ³，Ｒ⁴，Ｒ⁵がともに水素であるＴＡＮ−１５
１８ＡおよびＲ¹が２−ヒドロキシベンゾイル、Ｒ²が
（Ｚ）−２−エチル−２−ブテノイル、Ｒ³，Ｒ⁴がとも
に水素、Ｒ⁵がメチルであるＴＡＮ−１５１８Ｂまたは
それらの塩は、微生物を用いて製造される。ＴＡＮ−１
５１８ＡまたはＢを生産する微生物としてはストレプト
ミセス属に属し、ＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢを産生す
る能力を有する微生物であればいずれのものでもよい。
その例としては、兵庫県で採取した土壌より分離された
ＡＬ−１６０１２株が挙げられ、本菌株をインターナシ
ョナル・ジャーナル・オブ・システマティック・バクテ
リオロジー（International Journal of Systematic Ba
cteriology）１６巻 ３１３頁〜３４０頁（１９６６
年）記載の方法に準じて検討した結果、その菌学的性質
は下記のとおりである。なお、各種培地上の性質はとく
に指示しない限り、２８℃で１４日間培養し、常法に従
って観察したものであり、色調はカラー・ハーモニー・
マニュアル（Color Harmony Manual）第４版〔コンティ
ナー・コーポレーション・オブ・アメリカ（Container
Corporation of America）、１９５８年発行〕によっ
た。

【０００９】（I）形態的特徴 基生菌糸は、湾曲又はコイル状に伸長し分岐している。
気菌糸及び胞子の形成、胞子嚢及び輪生糸は認められな
い。 （II）各種培地上での生育状態 各種培地における生育の程度（Ｇ）、気菌糸の生育及び
色調（ＡＭ）、裏面の色調（Ｒ）、可溶性色素の有無及
び色調（ＳＰ）などについて以下に列記する。

【表１】 ──────────────────────────────────── (a)シュウクロース・ Ｇ ：生育せず 硝酸塩寒天培地 ＡＭ： Ｒ ： ＳＰ： ──────────────────────────────────── (b)グルコース・アスパラギン Ｇ ：良好、茶褐色（3ne〜3ng） 寒天培地 ＡＭ：なし Ｒ ：黄褐色（2le）〜茶褐色（3ng） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (c)グリセリン・アスパラギン Ｇ ：中程度、淡黄褐色（2ga）〜淡褐色（2lc） 寒天培地 限局性 ＡＭ：なし Ｒ ：淡黄褐色（2ga）〜（2ia） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (d)スターチ・無機塩 Ｇ ：良好、淡黄灰色（2gc） 寒天培地 ＡＭ：なし Ｒ ：象牙色（2ea）〜淡黄灰色（2gc） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (e)チロシン寒天培地 Ｇ ：中程度、淡黄褐色（2ga）〜淡褐色（2ic） ＡＭ：なし Ｒ ：象牙色（2ea）〜（2ga） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (f)栄養寒天培地 Ｇ ：貧弱、象牙色（2ea） ＡＭ：なし Ｒ ：象牙色（2ea） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (g)イースト・麦芽寒天培地 Ｇ ：良好、淡黄灰色（2gc）〜褐色（2pg） ＡＭ：なし Ｒ ：黄灰色（2le）〜褐色（2pe） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (h)オートミール寒天培地 Ｇ ：良好、淡黄灰色（2gc）〜褐色（2ne） ＡＭ：なし Ｒ ：淡黄褐色（2la）〜淡褐色（2lc） ＳＰ：なし ──────────────────────────────────── (i)ペプトン・イースト・鉄 Ｇ ：極貧弱、淡黄褐色（2ga） 寒天培地 ＡＭ：なし Ｒ ：淡褐色（2ic） ＳＰ：なし ────────────────────────────────────

【００１０】 （III）生理的性質 (a) 生育温度範囲 ：１５〜３３℃ 最適生育温度範囲 ：１８〜２６℃ (b) 硝酸の還元 ：陰性 (c) ゼラチンの液化 ：陰性 （グルコース・ペプトン・ゼラチン培地） (d) 澱粉の加水分解 ：陽性 (e) 脱脂乳の凝固 ：陰性 脱脂乳のペプトン化 ：陰性 (f) メラニン様色素の生成 チロシン寒天培地 ：陰性 ペプトン・イースト・鉄寒天培地 ：陰性 (g) 炭素源の資化性（プリードハム・ゴットリープ寒天培地） Ｌ−アラビノース ： ± (注)＋＋：比較的良好な生育 Ｄ−キシロース ： − ＋ ：生育を認める Ｄ−グルコース ： ＋ ± ：＋又は−の判定が困難 Ｄ−フラクトース ： ＋ − ：生育せず シュクロース ： − イノシトール ： − Ｌ−ラムノース ： − ラフィノース ： ± Ｄ−マンニット ： − 対 象 ： −

【００１１】（IV）化学分類学的性質 グルコース１％、トリプトン１％、酵母エキス０．６％
（ｐＨ７.０）からなる培地を用いて、２８℃、３日間
培養した後「放線菌の同定実験法」日本放線菌学会編
（昭和６３年）記載の方法に準じて、生菌体及び細胞壁
画分を調製した。以下の分析は、上記文献記載の方法に
準じて行った。 ａ）アミノ酸の分析 細胞壁画分を６Ｎ塩酸を用いて１０５℃、１８時間加水
分解して得られた加水分解物を、高速液体クロマトグラ
フィー（ＨＰＬＣ，島津ＬＣ−６ＡＤ，和光／ＰＴＣア
ミノ酸分析システム）を用い分析した。さらに、ジアミ
ノピメリン酸（以下、ＤＡＰと略称することもある）の
光学異性体は、二村らの方法に従って、ＨＰＬＣ（島津
ＬＣ−６ＡＤ，カラム：コスモシル５Ｃ−１８）で分析
した。その結果、細胞壁アミノ酸組成として、グルタミ
ン酸，グリシン，アラニン及びジアミノピメリン酸（Ｄ
ＰＡ）が検出され、そのモル比はほぼ１：２：２：１を
示し、細胞壁タイプＩ型に属すると考えられる。又、ジ
アミノピメリン酸はＬＬ体であった。 ｂ）メナキノンの分析 乾燥菌体を、クロロホルム−メタノール混液（２：１
v/v）で、室温、１８時間抽出、濃縮し、得られた濃縮
物を、ＨＰＬＣ（島津ＬＣ−６ＡＤ カラム：ゾルバッ
クス（Zorbax）ＯＤＳ４.５×１５０mm 移動相：メタ
ノール：イソプロピルエーテル＝７：２ v/v）で分析
した。その結果、メナキノンの組成は、ＭＫ−９
（Ｈ₀）、ＭＫ−９（Ｈ₂）、ＭＫ−９（Ｈ₄）であり、
ＭＫ−９（Ｈ₂）が主体であった。

【００１２】以上の結果から本菌株は、気菌糸及び胞子
の形成は認められなかったが、ジアミノピメリン酸がＬ
Ｌ体であることやメナキノンがＭＫ−９主体であること
などからストレプトマイセス（Streptomyces）属に属す
ると考えられ、ストレプトマイセス エスピー・ＡＬ−
１６０１２（Streptomyces sp. ＡＬ−１６０１２）と
命名された。ＡＬ−１６０１２株は、平成３年１０月２
１日財団法人・発酵研究所（ＩＦＯ）に受託番号ＩＦＯ
１５２４２として寄託され、また、平成３年１１月２
５日にブタペスト条約の下、通商産業省工業技術院微生
物工業技術研究所（ＦＲＩ）に受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ
−３６６０として寄託されている。ストレプトマイセス
属に属するＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ生産菌は、他の
放線菌の場合と同様に、たとえば紫外線、エックス線、
放射線などの照射、単胞子分離、種々の変異処理、その
他の手段で変異させることが出来、このような変異株あ
るいは自然に得られる突然変異株であっても、上記した
分類学的性状との比較において実質的に別種とするに足
らず、しかも当該化合物を生産する性質を有するもの
は、すべて本発明方法に利用し得る。

【００１３】ＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ生産菌の培養
に用いられる培地は該菌が利用し得る栄養源を含むもの
なら、液状でも固状でもよいが、大量に処理するときに
は液体培地を用いるのがより適当である。培地には、当
該生産菌が同化し得る炭素源、窒素源、無機物質、微量
栄養源が適宜配合される。炭素源としては、たとえばグ
ルコース、ラクトース、シュークロース、マルトース、
デキストリン、スターチ、グリセリン、マンニトール、
ソルビトール、油脂類（例、大豆油、ラード油、チキン
油など）、ｎ−パラフィンその他が、窒素源としては、
たとえば肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母、大豆粉、コ
ーン・スティープ・リカー、ペプトン、棉実粉、廃糖
蜜、尿素、アンモニウム塩類（例、硫酸アンモニウム、
塩化アンモニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモニウ
ムなど）その他が用いられる。さらに、ナトリウム、カ
リウム、カルシウム、マグネシウムなどを含む塩類、
鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、ニッケルなどの金属塩
類、リン酸、ホウ酸などの塩類や酢酸、プロピオン酸な
どの有機酸の塩類が適宜用いられる。その他、アミノ酸
（例、グルタミン酸、アスパラギン酸、アラニン、リジ
ン、メチオニン、プロリンなど）、ペプチド（例、ジペ
プチド、トリペプチドなど）、ビタミン類（例、Ｂ_１、
Ｂ₂、ニコチン酸、Ｂ₁₂、Ｃなど）、核酸類（例、プリ
ン、ピリミジン、その誘導体など）等を含有させてもよ
い。もちろん、培地のpＨを調節する目的で無機また
は有機の酸またはアルカリ類、緩衝剤等を加え、あるい
は消泡の目的で油脂類、界面活性剤等の適量を添加して
差し支えない。液体培養に際しては、培地のpＨ は中性
付近、特にpＨ５．５〜７が好ましい。培養温度は約２
４℃〜３０℃、培 養時間は約４８時間〜１６８時間が
好ましい。培養の経過に伴って生産されるＴＡＮ−１５
１８ＡおよびＢの力価は細胞毒性を指標とする液体希釈
法に従って定量される。通常、約３〜６日間の培養でＴ
ＡＮ−１５１８ＡまたはＢの生産量は最高に達する。

【００１４】培養物から目的とする化合物ＴＡＮ−１５
１８ＡおよびＢを採取する方法を以下に述べる。該化合
物は中性で脂溶性を示すため、この性質を利用する一般
的手段を採用すればよい。まず培養物をpＨ２ないし
９、好ましくはpＨ２．５ないし８に調整後、水と混和
しない有機溶媒たとえばクロロホルム，ジクロルメタン
等のハロゲン化炭化水素類、酢酸エチル等のエステル
類、メチルイソブチルケトン等のケトン類、ブタノー
ル，ペンタノール等の高級アルコール類等を加え、ＴＡ
Ｎ−１５１８Ａを抽出する。抽出液を重曹水および水で
洗浄後、有機溶媒層を濃縮するとＴＡＮ−１５１８Ａを
含有する粗物質が得られる。粗物質をさらに精製し、純
粋なＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢを得るには種々のクロ
マトグラフィー法が有利に用いられる。担体としてはシ
リカゲル、結晶セルロース、セファデックスＬＨ−２０
（ファルマシア社製、スウエーデン）などが用いられ、
これらは通常カラムクロマトグラフィー法で行われる。
カラムから活性物質を溶出するには適当な有機溶媒たと
えばｎ−ヘキサン，トルエン等の炭化水素類、クロロホ
ルム，ジクロルメタン，ジクロルエタン等のハロゲン化
炭化水素類、アセトン等のケトン類、酢酸エチル等のエ
ステル類、メタノール，エタノール等のアルコール類、
酢酸，ギ酸等の有機酸類等が用いられる。これらは一種
のみで、または二種以上適当な割合で混合して用いても
よい。また、分取用高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）によってもＴＡＮ−１５１８ＡおよびＢを精製す
ることができる。担体としてはオクタデシルシラン（Ｏ
ＤＳ）系およびシリカゲル系のものが有利に用いられ
る。例えばＯＤＳの場合、メタノールあるいはアセトニ
トリルと塩類含有水溶液の混合溶液が有利に用いられ
る。溶出液を濃縮、あるいは水溶液の場合は水と混和し
ない適当な有機溶媒で抽出して濃縮し、残渣を粉末化す
るか、濃縮残渣を適当な結晶化溶媒たとえば石油ベンジ
ル，石油エーテル，ｎ−ヘキサン等の炭化水素類、ジエ
チルエーテル，ジイソプロピルエーテル等のエーテル
類、クロロホルム，ジクロルエタン等のハロゲン化炭化
水素類、酢酸エチル等のエステル類、メタノール，エタ
ノール等のアルコール類等これらの単独あるいは混合液
で溶解し、冷所で放置すると結晶が得られる。

【００１５】ＴＡＮ−１５１８ＡおよびＢの構造式は下
式により表される。

【化５】 一般式〔I〕においてＲ¹，Ｒ²，Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵が共
に水素である化合物（ジデアシルＴＡ Ｎ−１５１８
Ａ）またはその塩，Ｒ¹が２−ヒドロキシベンゾイルで
Ｒ²，Ｒ³，Ｒ⁴およびＲ⁵がともに水素である化合物
（４′−デアシルＴＡＮ−１５１８Ａ）またはその塩
は、ＴＡＮ−１５１８Ａまたはその塩をアルカリ加水分
解することにより製造することができる。ジデアシルＴ
ＡＮ−１５１８Ａまたはその塩は、４´−デアシルＴＡ
Ｎ−１５ １８Ａまたはその塩をアルカリ加水分解する
ことによっても製造することができる。反応は、通常反
応を阻害しない水溶性溶媒にＴＡＮ−１５１８Ａまたは
４′−デアシルＴＡＮ−１５１８Ａを溶解もしくは懸濁
させ、これに塩基の水溶液を加えて行われる。上記水溶
性溶媒としては、例えばメタノール，エタノール等のア
ルコール類、アセトン、ジメチルスルホキシド、ジメチ
ルホルムアミド，ジメチルアセトアミド等のアミド類、
ジオキサン等が挙げられる。これらは単独であるいは二
種以上適当な割合で混合して用いられる。加水分解に使
用される塩基としては、例えば、アルカリ金属水酸化物
（例、水酸化カリウム，水酸化ナトリウム等）、アルカ
リ金属アルコラート（例、ナトリウムメチラート，カリ
ウム tert−ブチラート等）、アルカリ金属炭酸塩
（例、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等）等が用いられ
る。これらの中で、アルカリ金属水酸化物が好ましい。
塩基の使用量は、ＴＡＮ−１５１８Ａあるいは４´−デ
アシルＴＡＮ−１５１８Ａに対し、約１から２０当量、
好ましくは約２から１０当量である。反応温度は、とく
に限定されないが、通常約−５から６０℃、好ましくは
約０から５０℃である。反応時間は、数分から数十時間
程度（例えば５分から３０時間等）である。

【００１６】

【化６】

【化７】 同様にして、一般式〔I〕においてＲ¹，Ｒ²，Ｒ³および
Ｒ⁴が共に水素で、Ｒ⁵がメチルである化合物（ジデアシ
ルＴＡＮ−１５１８Ｂ）またはその塩、Ｒ¹が２−ヒド
ロキシベンゾイルで、Ｒ²，Ｒ³およびＲ⁴がともに水素
で、Ｒ⁵がメチルである化合物（４′−デアシルＴＡＮ
−１５１８Ｂ）またはその塩は、ＴＡＮ−１５１８Ｂま
たはその塩をアルカリ加水分解することによっても製造
することができるし、ジデアシルＴＡＮ−１５１８Ｂま
たはその塩は、４′−デアシルＴＡＮ−１５１８Ｂまた
はその塩をアルカリ加水分解することによっても製造す
ることができる。一般式〔I〕で表される化合物または
その塩は、上記ＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ，ジデアシ
ルＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ，４′−デアシルＴＡＮ
−１５１８ＡまたはＢ、またはそれらの塩を出発原料と
して以下に示す方法により製造することができる。

【００１７】一般式〔I〕においてＲ⁴が水素である化合
物またはその塩は、ＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ，ジデ
アシルＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ，４′−デアシルＴ
ＡＮ−１５１８ＡまたはＢ、またはそれらの塩をアシル
化することにより製造することができる。本反応に用い
られるアシル化剤としては、例えば上述のアシル基を誘
導する有機カルボン酸の反応性誘導体が挙げられる。該
反応性誘導体としては、例えば常法に従って製造するこ
とができる酸ハライド，酸無水物，アミド化合物，活性
エステル，活性チオエステル等が用いられる。このよう
な反応性誘導体を具体的に述べると次のとおりである。 １）酸ハライド：ここで好ましい酸ハライドとしては、
たとえば酸クロリド，酸ブロミド等が用いられる。 ２）酸無水物：ここで好ましい酸無水物としては、たと
えばモノアルキル炭酸混合酸無水物，脂肪族カルボン酸
（たとえば、酢酸、ピバル酸、吉草酸、イソ吉草酸、ト
リクロル酢酸等）からなる混合酸無水物、芳香族カルボ
ン酸（たとえば、安息香酸等）からなる混合酸無水物、
対称型酸無水物等が用いられる。 ３）アミド化合物：ここで好ましいアミド化合物として
は、たとえばピラゾール，イミダゾール，４−置換イミ
ダゾール，ジメチルピラゾール，ベンゾトリアゾール等
の環内の窒素にアシル基が結合した化合物が用いられ
る。 ４）活性エステル：ここで好ましい活性エステルとして
は、たとえばメチルエステル，エチルエステル，メトキ
シメチルエステル，プロパルギルエステル，４−ニトロ
フェニルエステル，２,４−ジニトロフェニルエステ
ル，トリクロロフェニルエステル，ペンタクロ ロフェ
ニルエステル，メシルフェニルエステル等のエステルの
他、１−ヒドロキシ−１Ｈ−２−ピリドン，Ｎ−ヒドロ
キシサクシンイミド，Ｎ−ヒドロキシフタルイミド，Ｎ
−ヒドロキシベンゾトリアゾール等とのエステル等が用
いられる。 ５）活性チオエステル：ここで活性チオエステルとして
は、たとえば２−ピリジルチオール，２−ベンズチアゾ
リルチオール等の複素環チオール等とのチオエステル等
が用いられる。以上のような各種反応性誘導体は、カル
ボン酸の種類によって適宜選択される。

【００１８】本反応は塩基もしくは酸の存在下実施され
る場合がある。用いられる塩基としては、たとえばトリ
メチルアミン，トリエチルアミン，トリプロピルアミ
ン，トリ−ｎ−ブチルアミンなどの脂肪族第三アミン、
Ｎ−メチルピペリジン，Ｎ−メチルピロリジン，シクロ
ヘキシルジメチルアミン，Ｎ−メチルモルホリンなどの
第三アミン、たとえばジ−ｎ−ブチルアミン，ジイソブ
チルアミン，ジシクロヘキシルアミンなどのジアルキル
アミン、たとえばピリジン，ルチジン，γ−コリジンな
どの芳香族アミン、たとえばリチウム，ナトリウム，カ
リウムなどのアルカリ金属、たとえばカルシウム，マグ
ネシウムなどのアルカリ土類金属等の水酸化物または炭
酸塩などが挙げられる。用いられる酸としては、たとえ
ば四塩化チタン、塩化アルミニウム、三フッ化ホウ素−
エーテルコンプレックス等のルイス酸、たとえば硫酸等
の鉱酸、たとえばトリフルオロ酢酸等の有機酸などが挙
げられる。本反応において、原料化合物に対してカルボ
ン酸の反応性誘導体を通常約当量用いるが、反応に支障
のないかぎり過剰に用いることもできる。塩基もしくは
酸を用いる場合、塩基もしくは酸の使用量は、用いられ
るＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ、ジデアシルＴＡＮ−１
５１８ＡまたはＢ、４′−デアシルＴＡＮ−１５１８Ａ
またはＢまたはそれらの塩、カルボン酸の反応性誘導体
の種類、他の反応条件によって異なるが、化合物に対し
て通常約当量ないし３０当量、好ましくは約当量ないし
１０当量である。酸を用いる場合には、酸の使用量が化
合物に対して触媒量で済むこともある。本反応は、通常
反応を阻害しない溶媒中で行われる。該溶媒としては、
たとえばジオキサン，テトラヒドロフラン，ジエチルエ
ーテル，ジイソプロピルエーテル，プロピレンオキシ
ド，ブチレンオキシドなどのエーテル類、たとえば酢酸
エチル，ギ酸エチルなどのエステル類、たとえばクロロ
ホルム，ジクロロメタン，１，２−ジクロロエタン，
１,１,１−トリクロルエタンなどのハロゲン化炭化水素
類、たとえばベンゼン，トルエン，ｎ−ヘキサンなどの
炭化水素類、たとえばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド，
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドなどのアミド類、たとえ
ばアセトニトリルなどのニトリル類など通常の有機溶媒
が単独または混合して用いられる。また、前述の塩基も
しくは酸のうち液体のものは溶媒を兼ねて使用すること
もできる。また、アセチル化の際に酸を共存させる場合
には、溶媒として酢酸を用いることもできる。反応温度
は、反応が進行するかぎり特に限定されないが、通常約
−５０℃ないし１５０℃好ましくは約−３０℃ないし８
０℃で行われる。反応時間は、用いられる原料、塩基も
しくは酸、反応温度、溶媒の種類により異なるが、通常
数十分間から数十時間で反応は終了するが、ときに数十
日間を要することもある。

【００１９】一般式〔I〕においてＲ¹が２−ヒドロキシ
ベンゾイル、Ｒ²が２−メチルブタノイル、Ｒ³，Ｒ⁴お
よびＲ⁵が共に水素である化合物（ジヒドロＴＡＮ−１
５１８Ａ）またはその塩は、ＴＡＮ−１５１８Ａまたは
その塩を水素気流下、触媒を用い接触還元することによ
って得られる。本反応に用いられる触媒としては、例え
ばパラジウム触媒（たとえば、パラジウム炭素、パラジ
ウム黒、酸化パラジウムなど）、白金触媒（たとえば、
酸化白金、白金黒など）等の通常接触還元に用いられる
触媒が挙げられる。本反応は、通常反応を阻害しない溶
媒にＴＡＮ−１５１８Ａもしくはその塩を溶解もしくは
懸濁させ、これに上記触媒を加え、水素気流下で行われ
る。上記溶媒としては、例えばメタノール，エタノール
などのアルコール類、例えば酢酸エチル，ギ酸エチルな
どのエステル類など通常の有機溶媒が単独または２種類
以上を適宜の割合に混合して用いられる。本反応におい
て、ＴＡＮ−１５１８Ａに対し触媒を通常使用量用い
る。その使用量は触媒の種類、他の反応条件によって異
なるが、ＴＡＮ−１５１８Ａ１重量部に対し約０．０１
から５０重量部、好ましくは約０．１から３０重量部が
用いられる。反応温度は、反応が進行するかぎり特に限
定されないが、通常約−５０℃ないし１５０℃、好まし
くは約−３０℃ないし８０℃で行われる。反応時間は、
数分から数十時間程度（例えば５分から３０時間程度）
である。同様にして、一般式〔I〕においてＲ¹が２−ヒ
ドロキシベンゾイル、Ｒ²が２−エチルブタノイル、Ｒ³
およびＲ⁴が共に水素、Ｒ⁵がメチルである化合物（ジヒ
ドロＴＡＮ−１５１８Ｂ）またはその塩は、ＴＡＮ−１
５１８Ｂまたはその塩を接触還元することによって得ら
れる。

【００２０】一般式〔I〕においてＲ⁴がアルキル基であ
る化合物またはその塩は、上記一般式〔I〕においてＲ⁴
が水素である化合物またはその塩をアルキル化反応に付
すことにより製造することができる。本反応は、通常反
応を阻害しない溶媒中で行われる。本アルキル化反応
は、該溶媒に一般式〔I〕においてＲ⁴が水素である化合
物またはその塩を溶解もしくは懸濁させ、これにアルキ
ル化剤を加えて行われる。上記溶媒としては、例えばメ
タノール，エタノール等のアルコール類、たとえばジオ
キサン，テトラヒドロフラン，ジエチルエーテル，ジイ
ソプロピルエーテル，プロピレンオキシド，ブチレンオ
キシドなどのエーテル類、たとえば酢酸エチル，ギ酸エ
チルなどのエステル類、たとえばクロロホルム，ジクロ
ロメタン，１，２−ジクロロエタン，１，１，１−トリ
クロルエタンなどのハロゲン化炭化水素類、たとえばベ
ンゼン，トルエン，ｎ−ヘキサンなどの炭化水素類、た
とえばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド，Ｎ，Ｎ−ジメチ
ルアセトアミドなどのアミド類、たとえばアセトニトリ
ルなどのニトリル類など通常の有機溶媒が単独または２
種類以上を適宜の割合で混合して用いられる。 本反応
に用いられるアルキル化剤としては、例えばジアゾアル
カン（たとえば、ジアゾメタン，ジアゾエタンなど）等
が用いられる。該アルキル化剤は、一般式〔I〕におい
てＲ⁴が水素である化合物に対し通常約当量ないし大過
剰量、好ましくは約当量ないし１００当量を用いる。反
応温度は、反応が進行するかぎり特に限定されないが、
通常約−５０℃ないし１５０℃、好ましくは約−３０℃
ないし８０℃で行われる。反応時間は、数分から数十時
間程度（例えば５分から３０時間程度）である。

【００２１】化合物〔I〕は塩としても用いられる。こ
のような塩としては薬理学的に許容される塩、例えばナ
トリウム塩，カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシ
ウム塩，マグネシウム塩などのアルカリ土金属塩、アン
モニウム塩などが挙げられる。上記ＴＡＮ−１５１８Ａ
またはＢ，ジデアシルＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢ，
４′−デアシルＴＡＮ−１５１８ＡまたはＢの塩も化合
物〔I〕と同様なものが挙げられる。化合物〔I〕の塩は
自体公知の手段に従い製造される。例えば化合物〔I〕
の水溶液あるいは水懸濁液にアルカリ金属またはアルカ
リ土金属水酸化物（例、水酸化ナトリウム，水酸化カリ
ウム，水酸化マグネシウム，水酸化カルシウム等）三級
アミン（例、トリエチルアミンのような脂肪族三級アミ
ン、ピリジン，４−ジメチルアミノピリジン，α−，β
−またはγ−ピコリンのような芳香族三級アミン）等の
塩基とを混合することによって製造することができる。
かくして得られる化合物〔I〕またはその塩は反応混合
物から自体公知の手段、たとえば抽出、濃縮、中和、濾
過、結晶化、再結晶、カラムクロマトグラフィー、薄層
クロマトグラフィーなどの手段を用いることによって単
離，精製することができる。化合物〔Ｉ〕またはその塩
はイン・ビトロ（in vitro）およびイン・ビボ（inviv
o）試験で抗腫瘍作用を示し、ヒトや哺乳動物の悪性腫
瘍の治療に用いることができる。該悪性腫瘍としては、
例えば上皮性悪性腫瘍（例、大腸がん，肺がん，胃が
ん，肝がん，偏平上皮がん等）、非上皮性悪性腫瘍
（例、細網肉腫，骨肉腫，リンパ肉腫等）、混合性悪性
腫瘍（例、副腎腫瘍等）等が挙げられる。化合物〔Ｉ〕
またはその塩は、毒性も低く安全に用いられる。化合物
〔I〕またはその塩をヒトに投与する場合は、それ自体
あるいは適宜の薬理学的に許容される担体、賦形剤、希
釈剤と混合し、医薬組成物として経口的または非経口的
に安全に投与することができる。上記医薬組成物として
は、注射剤、経口投与製剤（例、散剤、顆粒剤、カプセ
ル剤、錠剤）、外用剤（例、経鼻投与製剤、経皮製剤な
ど）、坐剤（例、直腸坐剤、膣坐剤）などが挙げられ
る。これらの製剤は、製剤工程において通常一般に用い
られる自体公知の方法により製造することができる。た
とえば、本発明の化合物〔I〕またはその塩は分散剤
（例、ツイーン(Tween)８０（アトラスパウダー社製、
米国），ＨＣＯ６０（日光ケミカルズ製）ポリエチレン
グリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸
ナトリウムなど）、保存剤（例、メチルパラベン、プロ
ピルパラベン、ベンジールアルコール、クロロブタノー
ルなど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム、グリセリ
ン、ソルビトール、ブドウ糖など）などと共に水性注射
剤に、あるいはオリーブ油、ゴマ油、ラッカセイ油、綿
実面、コーン油などの植物油、プロピレングリコールな
どに溶解、懸濁あるいは乳化して油性注射剤に成形し、
注射剤とすることができる。

【００２２】たとえば経口投与製剤にするには、自体公
知の方法に従い、本発明の化合物〔I〕またはその塩を
たとえば賦形剤（例、乳糖、白糖、デンプンなど）、崩
壊剤（例、デンプン、炭酸カルシウムなど）、結合剤
（例、デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセル
ロース、ポリビニールピロリドン、ヒドロキシプロピル
セルロースなど）または滑沢剤（例、タルク、ステアリ
ン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００な
ど）などを添加して圧縮成形し、次いで必要により、味
のマスキング、直溶性あるいは持続性の目的のため自体
公知の方法でコーティングすることにより経口投与製剤
とすることができる。そのコーティング剤としては、例
えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセル
ロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロ
ピルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、ツイ
ーン８０、ブルロニックＦ６８、セルロースアセテート
フタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタ
レート、ヒドロキシメチルセルロースアセテートサクシ
ネート、オイドラギット（ローム社製，西ドイツ，メタ
アクリル酸・アクリル酸共重合）および酸化チタン，ベ
ンガラ等の色素が用いられる。たとえば外用剤とするに
は、自体公知の方法に従い、本発明の化合物〔I〕また
はその塩を固状、半固状または液状の経鼻投与剤とする
ことができる。たとえば、上記固状のものとしては、化
合物〔I〕またはその塩をそのまま、あるいは賦形剤
（例、グリコール、マンニトール、デンプン、微結晶セ
ルロースなど）、増粘剤（例、天然ガム類、セルロース
誘導体、アクリル酸重合体など）などを添加、混合して
粉状の組成物とする。上記液状のものとしては、注射剤
の場合とほとんど同様で、油性あるいは水性懸濁剤とす
る。半固状の場合は、水性または油性のゲル剤、あるい
は軟膏状のものがよい。また、これらはいずれも、ｐＨ
調節剤（例、炭酸、リン酸、クエン酸、塩酸、水酸化ナ
トリウムなど）、防腐剤（例、パラオキシ安息香酸エス
テル類、クロロブタノール、塩化ベンザルコニウムな
ど）などを加えてもよい。

【００２３】たとえば坐剤とするには、自体公知の方法
にしたがい、本発明の化合物〔I〕またはその塩を油性
または水性の固状、半固状あるいは液状の坐剤とするこ
とができる。上記組成物に用いる油性基剤としては、化
合物〔I〕またはその塩を溶解しないものであればよ
く、たとえば高級脂肪酸のグリセリド〔例、カカオ脂、
ウイテプゾル類（ダイナマイトノーベル社製）など〕、
中級脂肪酸〔例、ミグリオール類（ダイナマイトノーベ
ル社製）など〕、あるいは植物油（例、ゴマ油、大豆
油、綿実油など）などが挙げられる。また、水性基剤と
しては、たとえばポリエチレングリコール類、プロピレ
ングリコール、水性ゲル基剤としては、たとえば天然ガ
ム類、セルロース誘導体、ビニール重合体、アクリル酸
重合体などが挙げられる。化合物〔Ｉ〕またはその塩を
ヒトに用いる場合の投与量は対象の疾患、投与経路、治
療する患者個々の年齢及び疾病の程度によって変動し得
るが、通常、体重５０ｋｇの成人患者の場合有効成分１
日約０．１〜２００mg、好ましくは約１〜１５０mgが疾
患の治療に用いられる。さらに好ましくは約５〜１００
ｍｇが用いられる。また本発明の化合物〔I〕またはそ
の塩を外用剤としても用いる場合、たとえばワセリン、
ラノリンを基剤として、１ｇあたり通常約０．１から１
００mg含有する軟膏剤として、皮膚あるいは、粘膜など
の腫瘍の治療に用いることができる。

【００２４】

【実施例】以下に実施例を挙げて、本発明をさらに具体
的に説明するが、これによって本発明が限定されるもの
ではない。培地におけるパーセント（％）は、とくに断
りのない限り重量／容量パーセントを表わす。また、混
合溶媒において混合比を示した数値は各溶媒の容量混合
比である。¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは内部
基準としてテトラメチルシランを用いて（７５ＭＨｚ）
型スペクトルメーターで測定し、全δ値をppmで示し
た。実施例中Ｑは４級炭素を意味する。 実施例１ 酵母エキス・麦芽エキス斜面寒天培地に培養したストレ
プトミセス・エス・ピー ＡＬ−１６０１２株を２００
ml容三角フラスコ内のグルコース２％、可溶性澱粉３
％、生大豆粉１％、コーン・スティープ・リカー１％、
ペプトン０．５％、ＮaＣl ０．３％、ＣaＣＯ₃ ０．
５％を含む４０mlの種培地（pＨ７．０）に接種し、２
８℃、４８時間回転振盪機上で培養し、種培養液を得
た。この種培養液１mlを２００ml容三角フラスコ内の可
溶性澱粉３％、綿実粉０．５％を含む４０mlの主培地
（pＨ６．５）に移植し、２４℃、６日間回転振盪機上
で培養し、主培養液を得た。

【００２５】実施例２ 実施例１で得られた培養液（１２リットル）を６Ｎ塩酸
でpＨ２．０に補正し、酢酸エチル（１２リットル）で
抽出した。抽出液をハイフロスーパーセル（ジョンズ・
マンビル社製，米国）を用いてろ過し、得られた有機溶
媒層を２％炭酸水素ナトリウム水（５リットル）および
水（５リットル）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥
後、濃縮し粗物質（５．１ｇ）を得た。この粗物質をク
ロロホルムで充填したシリカゲル（４００ml）のカラム
クロマトグラフィーに付した。クロロホルム（６００m
l）で洗浄後、クロロホルム−メタノール〔３０：１
（９００ml），２０：１（１リットル），１５：１（６
００ml），１０：１（４００ml）〕で順次溶出し、２
０：１（１リットル）および１５：１（６００ml）で溶
出される活性画分を濃縮後、メタノール飽和ｎ−ヘキサ
ンで洗浄し、ＴＡＮ−１５１８Ａの粗粉末（２．２ｇ）
を得た。この粉末を分取ＨＰＬＣ〔担体：ＯＤＳ，ＹＭ
Ｃ−Ｐack Ｓ−３６３，Ｉ−１５（山村化学研究所社
製），移動相；６６％ アセトニトリル／０．０１Ｍリ
ン酸緩衝液（pＨ３．０）〕に付し、ＨＰＬＣで 単一ピ
ークを示す画分を集め濃縮，酢酸エチル抽出，水洗後、
濃縮乾固してＴＡＮ−１５１８Ａ（１５０mg）の粉末を
得た。

【００２６】実施例３ 実施例１に示した種培養液５mlを２０００ml容坂口フラ
スコ内の、実施例１と同じ種培地５００mlに移植し、２
８℃、４８時間往復振盪機上で培養した。得られた培養
液５００mlを２００リットル容ステンレス・スチール・
タンク内の、実施例１と同じ主培地１２０リットルに移
植し、２４℃、通気１２０リットル／分、撹拌１８０回
転／分、内圧１kg／cm²の条件で６日間培養し、主培養
液を得た。

【００２７】実施例４ 実施例３で得られた培養液（１００リットル）を６Ｎ塩
酸でpＨ２．０に調整し、酢酸エチル（５０リットル）
で抽出した。抽出液をラヂオライト（４．５kg，昭和化
学社製）を用いてろ過し、得られた有機溶媒層を２％炭
酸水素ナトリウム水（２０リットル）および水（２０リ
ットル）で２回洗浄し濃縮した。残渣にｎ−ヘキサンを
加え粉末（５９ｇ）を得た。この粉末をクロロホルムで
充填したシリカゲル（２リットル）のカラムクロマトグ
ラフィーに付した。クロロホルム（４リットル）で洗浄
後、クロロホルム−メタノール〔１００：１（２リット
ル），８０：１（４リットル），５０：１（６リット
ル），３０：１（７リットル），１０：１（３リット
ル）〕で順次溶出し、３０：１（３リットル），１０：
１（３リットル）で溶出される活性画分を濃縮後、ｎ−
ヘキサンを加え粉末（２０ｇ）を得た。この粉末（１６
ｇ）をクロロホルム−ギ酸（１００：２）で充填したシ
リカゲル（２リットル）のカラムクロマトグラフィーに
付した。クロロホルム−ギ酸（１００：２，４リット
ル）で洗浄後、クロロホルム−メタノール−ギ酸の溶媒
系で溶出分画した。９９：１：２（２リットル）および
９０：１０：２（０．６リットル）で洗浄後、９０：１
０：２（０．６〜３．６リットル）および８５：１５：
２（２リットル）で溶出される画分を集め、濃縮乾固し
てＴＡＮ−１５１８Ａの粗粉末（３．３ｇ）を得た。こ
の粉末をさらに、メタノールを溶出溶媒とするセファデ
ックスＬＨ−２０（２リットル）のカラムクロマトグラ
フィーにより精製を行ない、ＴＡＮ−１５１８Ａの黄色
粉末（１．９ｇ）を得た。

【００２８】ＴＡＮ−１５１８Ａ (１)外観：黄色粉末 (２)旋光度：〔α〕_D ²⁵＋１９０°（ｃ＝０．６，クロ
ロホルム） (３)分子量：m／z ７６３（Ｍ⁺），（ＦＤマス・スペク
トルより） (４)元素分析値：（％） 実測値；Ｃ，60.72； Ｈ，5.51； Ｎ，1.76 計算値；Ｃ，61.33； Ｈ，5.41； Ｎ，1.83 (５)分子式：Ｃ₃₉Ｈ₄₁ＮＯ₁₅ (６)紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：極大値nm（ε）
〔図１〕 メタノール中；206(49,600), 227(肩，28,600), 243
(肩，24,400), 270(肩,17,500), 315(10,700), 368(15,
600) メタノール−１ＮＨＣl(９：１)中；207(38,900), 225
(29,800), 243(26,700), 317(14,100),355(18,000) メタノール−１ＮＮaＯＨ(９：１)中；246(20,600), 27
0(17,800), 385(17,900) (７)赤外部吸収（ＩＲ）スペクトル：ＫＢr錠剤中、主
な吸収を示す（波数，cm^-1）〔図２〕 3410, 2980, 2940, 1660, 1610, 1430, 1290, 1240, 11
60, 1080, 840, 760,700, 570 (８)¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５ＭＨ
z，重ジメチルスルホキシド中，δppm〔図３〕 192.2(Q), 192.0(Q), 189.0(Q), 175.9(Q), 173.1(Q),
167.2(Q), 166.8(Q),160.0(Q), 158.10(Q), 147.3(Q),
136.8(CH), 135.8(CH), 133.7(CH),130.2(CH), 128.6
(Q), 127.7(Q), 119.4(CH), 117.6(CH), 114.8(CH),11
4.5(Q), 113.1(Q), 106.0(Q), 95.4(Q), 77.9(Q), 77.5
(CH), 75.1(Q),73.6(CH), 70.3(CH), 70.1(CH), 69.1(C
H), 50.2(CH₃), 40.9(CH),40.3(CH₂), 34.9(CH), 24.3
(CH₃), 20.2(CH₃), 19.0(CH₂), 18.0(CH₃),15.4(CH₃). (９)呈色反応： 陽性；リンモリブデン酸，濃硫酸，過マンガン酸カリウ
ム反応 陰性；ニンヒドリン，ドラーゲンドルフ，坂口反応 (10)高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）： 担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−Ｐack Ａ−３１２ 移動相；７５％アセトニトリル／０.０１Ｍリン酸緩衝
液（pＨ３） 流速；２ml／min 検出法；ＵＶ吸収，２１４nm 溶出時間；３．８min (11)薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）： 担体；シリカ・ゲル(Silica gel) ６０Ｆ₂₅₄〔イー・メ
ルク・エー・ジー（E.Merck AG.）〕 展開溶媒；クロロホルム：メタノール：ギ酸（９０：１
０：２） Ｒｆ値；０．４５ (12)性質：弱酸性脂溶性物質

【００２９】実施例５ ジデアシルＴＡＮ−１５１８Ａ ＴＡＮ−１５１８Ａ（２００mg）をメタノール（１０m
l）に溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１０６５
μl）を加え室温で６時間撹拌した。メタノールを減圧
下除去し、酢酸エチル（５０ml）で希釈し、０．０１Ｎ
塩酸水溶液および水で２回（各３０ml）洗浄し、硫酸ナ
トリウムで乾燥後、濃縮乾固して黄色粉末（１７０mg）
を得た。これを分取ＨＰＬＣ〔担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−
Ｐack Ｓ− ３６３，Ｉ−１５，移動相；２０％アセト
ニトリル／０．０１Ｍリン酸緩衝液（pＨ３．０）〕に
付し、ＨＰＬＣで単一ピークを示す画分を集め濃縮、酢
酸エチル抽出、水洗後濃縮乾固して、ジデアシルＴＡＮ
−１５１８Ａ（９８mg）を得た。 ジデアシルＴＡＮ−１５１８Ａ 紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：極大値nm（ε） メタノール中；226(25,700), 260(22,200), 365(18,50
0) １ＮＮaＯＨ：メタノール（１：１９）中；236(25,70
0), 267(20,500), 381(20,800) １ＮＨＣl：メタノール（１：１９）中；226(25,900),
255(24,500), 357(20,500) 分子量：m／z ５６２（Ｍ＋Ｈ）⁺ 元素分析値：Ｃ₂₇Ｈ₃₁ＮＯ₁₂・1/2Ｈ₂Ｏとして 計算値；Ｃ，56.84； Ｈ，5.65； Ｎ，2.45； 実測値；Ｃ，56.60； Ｈ，5.59； Ｎ，2.42 赤外部吸収（ＩＲ）スペクトル：ＫＢr錠剤中，主な吸
収を示す(波数，cm^-1) 3400, 2980, 2940, 1610, 1560, 1430, 1290, 1240, 10
60, 850, 790,680, 660, 610¹³ Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨz，重ジメチルスルホキシド
中，δppm）：195.9(Q), 192.1(Q), 191.6(Q), 1
77.0(Q), 173.4(Q),157.9(Q), 147.1(Q), 133.5
(CH), 129.1(Q), 114.7(CH),114.4(Q), 106.0(Q),
95.3(Q), 77.9(Q), 77.1(CH),76.0(CH), 7
5.6(Q), 71.7(CH), 70.1(CH), 66.7(CH),50.1(C
H₃), 42.7(CH), 40.1(CH₂), 35.0(CH), 24.2(C
H₃),18.3(CH₃), 17.9(CH₂)

【００３０】実施例６ ４′−デアシルＴＡＮ−１５１
８Ａ ＴＡＮ−１５１８Ａ（５００mg）を１Ｎ水酸化ナトリウ
ム水溶液（３．３ml）に溶解し、室温で１時間３０分放
置した。反応液に１Ｎ塩酸を加えpＨ２とした後、酢酸
エチル（５０ml）で抽出した。得られた有機溶媒層を水
洗し、硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮乾固して黄色粉末
（５１０mg）を得た。この粉末をシリカゲルに吸着さ
せ、クロロホルム：メタノール：ギ酸（９７：１：２，
９６：２：２，）で順次洗浄し、クロロホルム：メタノ
ール：ギ酸（９３：５：２）で溶出した。溶出液を濃縮
後、エーテルで処理し、４′−デアシルＴＡＮ−１５１
８Ａ（２９０mg）を得た。 分子量：m／z ６８２（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＳＩ−マス・スペ
クトルより） 元素分析値：Ｃ₃₄Ｈ₃₅ＮＯ₁₄として 計算値；Ｃ，59.91； Ｈ，5.18； Ｎ，2.05； 実測値；Ｃ，59.46； Ｈ，5.49； Ｎ，1.80 紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：極大値nm（ε） メタノール中；205(49,400), 228(肩,24,200), 241(26,
600), 268(肩,20,400) 314(11,900), 365(17,700) １ＮＨＣl：メタノール（１：１９）中；206(40,200),
227(23,500), 244(26,600), 268(肩,20,400),318(14,00
0), 355(19,100) １ＮＮaＯＨ：メタノール（１：１９）中；242(26,90
0), 267(肩,18,000), 381(20,100) 赤外部吸収（ＩＲ）スペクトル：ＫＢr錠剤中，主な吸
収を示す(波数,cm^-1) 3400, 2940, 1660, 1610, 1430, 1290, 1240, 1160, 10
80, 840, 760, 700,570¹³ Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨz，重ジメチルスルホキシド
中，δppm）：192.2(Q), 192.1(Q), 189.0(Q), 1
75.8(Q), 173.1(Q),167.2(Q), 159.9(Q), 158.0
(Q), 147.1(Q), 135.8(CH),133.7(CH), 130.2(C
H), 129.2(Q), 119.4(CH), 117.6(CH),114.7(CH),
114.4(Q), 113.2(Q), 105.9(Q), 95.3(Q),77.9
(Q), 77.1(CH), 76.0(CH), 75.1(Q), 71.8(C
H),70.1(CH), 70.1(CH), 50.2(CH₃), 40.8(CH),
40.1(CH₂),34.9(CH), 24.3(CH₃), 19.0(CH₂), 18.
3(CH₃)

【００３１】実施例７ 実施例３と同様の方法で得られた培養液（３４００リッ
トル）をラヂオライトを用いて濾過し、得られた濾液
（３５００リットル）を６３％硫酸でｐＨ２．０に調整
後、酢酸エチル（１２００リットル）で抽出した。得ら
れた有機溶媒層を２％炭酸水素ナトリウム水（３００リ
ットル）および水（３００リットル）で２回洗浄し濃縮
した。残渣にｎ−ヘキサンを加え粉末（２５０ｇ）を得
た。この粉末をシリカゲル（８リットル）カラムクロマ
トグラフィーに付した。トルエン−酢酸エチル−ギ酸
〔９５：５：２（１２リットル），９２：８：２（１０
リットル），９０：１０：２（１０リットル），８８：
１２：２（１０リットル）〕で順次溶出し、８８：１
２：２（７リットル）で溶出される画分を濃縮後、残渣
にメタノールを加え、析出した粉末を濾別した。得られ
た濾液を濃縮・乾固して、ＴＡＮ−１５１８Ｂを含む粉
末（４．２ｇ）を得た。この粉末を再度シリカゲル（２
００ml），トルエン−酢酸エチル−ギ酸（９９：１：
１）を用いるカラムクロマトグラフィーに付した。トル
エン−酢酸エチル−ギ酸〔９８：２：２（８００ml），
９５：５：２（１リットル），９２：８：２（６００m
l），９０：１０：２（６００ml）〕で順次溶出し、９
０：１０：２（５００ml）で溶出される画分を濃縮し、
残渣を得た。この残渣にメタノールを加え、析出した粉
末を濾別した。得られた濾液を濃縮、乾固して、残渣
（７１５mg）を得た。この残渣を分取ＨＰＬＣ〔担体；
ＯＤＳ，ＹＭＣ−Ｐack Ｓ−３６３ Ｉ−１５，移動
相；７３％アセトニトリル／０．０１Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ３）〕に付した。ＨＰＬＣで単一ピークを示す画
分を集め、アセトニトリルを留去後、酢酸エチルにて抽
出した。酢酸エチル層を水洗後濃縮乾固してＴＡＮ−１
５１８Ｂ（７０mg）の黄色粉末を得た。 ＴＡＮ−１５１８Ｂ (１)外観：黄色粉末 (２)旋光度：〔α〕_D ²⁵＋２０６°（ｃ＝０．５，クロ
ロホルム） (３)分子量：m／z ７９２（Ｍ＋Ｈ）⁺ (４)元素分析値：Ｃ₄₁Ｈ₄₅ＮＯ₁₅・０．５Ｈ₂Ｏとして 計算値；Ｃ，61.42； Ｈ，5.71； Ｎ，1.81 実測値；Ｃ，61.24； Ｈ，5.75； Ｎ，1.73 (５)分子式：Ｃ₄₁Ｈ₄₅ＮＯ₁₅ (６)紫外部吸収（ＵＶ）スペクトル：極大値nm（ε） メタノール中；205(56,800), 226(肩，32,800), 241
(肩，29,200), 270(19,600), 310(12,800), 375(17,60
0) メタノール−１ＮＨＣl(１９：１)中；207(45,200), 22
5(31,200), 245(28,000), 320(14,400),355(18,400) メタノール−１ＮＮaＯＨ(１９：１)中；243(28,800),
388(19,200) (７)赤外部吸収（ＩＲ）スペクトル：ＫＢr錠剤中、主
な吸収を示す（波数，cm^-1） 3410, 2970, 1660, 1610, 1560, 1430, 1290, 1240, 11
60, 840, 760 (８)¹³Ｃ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル：７５ＭＨ
z，重ジメチルスルホキシド中，δppm 192.3(Q), 189.4(Q), 189.2(Q), 173.9(Q), 172.9(Q),
167.0(Q), 167.0(Q),159.9(Q), 158.1(Q), 147.2(Q), 1
35.8(CH), 134.3(Q), 134.0(CH),133.8(CH), 130.2(C
H), 128.6(Q), 119.4(CH), 117.6(CH), 114.8(CH),114.
4(Q), 113.3(Q), 108.2(Q), 95.8(Q), 80.9(Q), 77.7
(Q), 77.4(CH),73.6(CH), 70.3(CH), 69.4(CH), 69.1(C
H), 54.2(CH₃), 50.2(CH₃),40.4(CH₂), 36.5(CH), 34.9
(CH), 27.0(CH₂), 24.4(CH₃), 19.2(CH₂),18.0(CH₃), 1
5.2(CH₃), 13.5(CH₃) (９)呈色反応： 陽性；リンモリブデン酸，濃硫酸，過マンガン酸カリウ
ム反応 陰性；ニンヒドリン，ドラーゲンドルフ，坂口反応 (10)高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）： 担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−Ｐack Ａ−３１２ 移動相；７５％アセトニトリル／０.０１Ｍリン酸緩衝
液（pＨ３） 流速；２ml／min 検出法；ＵＶ吸収，２１４nm 溶出時間；６．７min (11)薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）： 担体；Silica gel ６０Ｆ₂₅₄（E. Merck AG.） 展開溶媒；クロロホルム：メタノール：ギ酸（９０：１
０：２） Ｒｆ値；０．４５ (12)性質：弱酸性脂溶性物質

【００３２】実施例８ ３′−Ｏ−アセチルＴＡＮ−１
５１８Ａ ＴＡＮ−１５１８Ａ（１００mg）を酢酸（２．０ml）に
溶解し、無水酢酸（３７μl）および三フッ化ホウ素−
エーテルコンプレックス（８．１μl）を加え、室温で
１時間半撹拌した。反応混合物を濃縮、乾固し、得られ
た残渣を分取ＨＰＬＣ〔担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−Ｐack
ＳＨ−３４３，Ｓ−１５，移動相；７５％アセトニト
リル／０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３．０）〕に付し
た。ＨＰＬＣ分析で単一ピークを示す画分を集め、アセ
トニトリルを留去後、酢酸エチルにて抽出した。酢酸エ
チル層を水洗後、濃縮し、酢酸エチル−ヘキサンから粉
末化することにより、３′−Ｏ−アセチルＴＡＮ−１５
１８Ａ（６９mg）が淡黄色粉末として得られた。 ３′−Ｏ−アセチルＴＡＮ−１５１８Ａ ＵＶスペクトル：極大値 nm（ε） メタノール中；223(肩，30,200), 240(肩，26,600), 26
0(肩，18,100),314(11,300), 367(16,500) メタノール−１ＮＨＣｌ（１９：１）中；223(31,400),
240(肩，26,600), 318(12,900), 357(17,700) メタノール−１ＮＮaＯＨ（１９：１）中；240(肩，27,
800), 265(肩，20,100), 380(19,700) 元素分析値：Ｃ₄₁Ｈ₄₃ＮＯ₁₆として 計算値；Ｃ，61.11； Ｈ，5.38； Ｎ，1.74； 実測値；Ｃ，60.79； Ｈ，5.35； Ｎ，1.71 ＩＲスペクトル：ＫＢr錠剤中，主な吸収を示す（波
数，cm^-1） 3400, 2980, 2940, 1725, 1685, 1655, 1615, 1585, 15
60, 1430, 1295,1240, 1155, 845, 760¹ Ｈ ＮＭＲ（300MHz，重ジメチルスルホキシド中,δpp
m） 1.04(3H,s), 1.16(3H,d), 1.57(1H,m), 1.66(1H,m), 1.
83(3H,m),1.88(3H,dq), 1.94(3H,s), 2.16(1H,m), 2.35
(1H,m), 2.85(1H,m),3.18(3H,s), 3.48(1H,dd), 3.83(1
H,m), 4.81(1H,t), 4.98(1H,br d),5.20(1H,ddd), 6.11
(1H,qq), 6.30(1H,d), 6.98(1H,d), 7.02(1H,br t),7.0
4(1H,br d), 7.25(1H,br), 7.56(1H,ddd), 7.74(1H,d),
7.85(1H,dd),9.37(2H,br), 10.35(1H,s), 12.22(1H,b
r), 14.91(1H,br), 17.23(1H,br)

【００３３】実施例９ ３′−Ｏ−ブチリルＴＡＮ−１
５１８Ａ ＴＡＮ−１５１８Ａ（１００mg）をジエチルエーテル
（２．０ml）に溶解し、ブチリルクロリド（２０μｌ）
および三フッ化ホウ素−エーテルコンプレックス（８１
μｌ）を加え、室温にて７時間撹拌した。反応混合物を
酢酸エチルで希釈後、水洗し、酢酸エチル層を濃縮し
た。得られた残渣を分取ＨＰＬＣ〔担体；ＯＤＳ，ＹＭ
Ｃ−Ｐack ＳＨ−３４３，Ｓ−１５，移動相；８０％
アセトニトリル／０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３．
０）〕に付した。ＨＰＬＣ分析で単一ピークを示す画分
を集め、アセトニトリルを留去後、酢酸エチルにて抽出
した。酢酸エチル層を水洗後、濃縮し、酢酸エチル−ヘ
キサンから粉末化することにより、３′−Ｏ−ブチリル
ＴＡＮ−１５１８Ａ（６５mg）が淡黄色粉末として得ら
れた。 ３′−Ｏ−ブチリルＴＡＮ−１５１８Ａ ＵＶスペクトル：極大値 nm（ε） メタノール中；227(肩，36,700), 265(肩，23,600), 30
5(肩，11,800),375(19,000) メタノール−１ＮＨＣｌ（１９：１）中；223(37,900),
241(肩，31,200), 318(14,300), 356(19,400) メタノール−１ＮＮaＯＨ（１９：１）中；240(肩，33,
700), 265(肩，24,000), 380(21,500) 元素分析値：Ｃ₄₃Ｈ₄₇ＮＯ₁₆・1/2Ｈ₂Ｏとして 計算値；Ｃ，61.28； Ｈ，5.74； Ｎ，1.66； Ｏ，3
1.32 実測値；Ｃ，61.08； Ｈ，5.67； Ｎ，1.64 IRスヘ゜クトル:KBr錠剤中，主な吸収を示す（波数，cm^-1） 3420, 1725, 1685, 1655, 1615, 1585, 1560, 1430, 12
95, 1250, 1235, 1155¹Ｈ ＮＭＲ（300MHz，重ジメチ
ルスルホキシド中,δppm） 0.81(3H,t), 1.04(3H,s), 1.16(3H,d), 1.47(2H,m), 1.
59(1H,m),1.65(1H,m), 1.82(3H,m), 1.89(3H,dq), 2.15
(1H,m), 2.18(2H,m),2.35(1H,m), 2.84(1H,m), 3.18(3
H,s), 3.47(1H,dd), 3.83(1H,m),4.82(1H,t), 4.98(1H,
br d), 5.21(1H,ddd), 6.14(1H,qq), 6.29(1H,d),6.98
(1H,d), 7.01(1H,br t), 7.04(1H,br d), 7.24(1H,br),
7.56(1H,ddd),7.74(1H,d), 7.85(1H,dd), 9.36(2H,b
r), 10.34(1H,s), 12.22(1H,br),14.92(1H,br), 17.24
(1H,br)

【００３４】実施例１０ ジヒドロＴＡＮ−１５１８Ａ 水で湿らせたパラジウム黒（３０mg）にメタノール（５
０ml）を加え水素ガスを通じつつ撹拌後、ＴＡＮ−１５
１８Ａ（１５０mg）を含むメタノール溶液（５０ml）を
加え水素気流下常圧で７時間撹拌した。反応液より触媒
を濾別後、濾液を濃縮し、粗粉末（１５０mg）を得た。
これを分取ＨＰＬＣ〔担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−Ｐack
Ｓ−３６３，Ｉ−１５，移動相；６８％アセトニトリル
／０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３）〕に付し、ＨＰＬ
Ｃで単一ピークを示す画分を集め濃縮，酢酸エチル抽
出，水洗後濃縮乾固して、ＴＡＮ−１５１８Ａ接触還元
体（１０１mg）を黄色粉末として得た。 ＴＡＮ−１５１８Ａ接触還元体 ＵＶλ_max ^MeOHnm(ε)：203(48,700), 240(26,300), 267
(19,400), 310(11,600),372(17,400) １ＮＨＣｌ：ＭeＯＨ(1:19)：207(38,700), 245(26,70
0), 355(19,400) １ＮＮaＯＨ：ＭeＯＨ(1:19)：242(24,800), 380(19,40
0) ＩＲ（ＫＢr,cm^-1）：3410, 2970, 1660, 1610, 1560,
1430, 1290, 1240,1200, 1160, 1080, 840, 760 元素分析値：Ｃ₃₉Ｈ₄₃ＮＯ₁₅・１／２Ｈ₂Ｏとして 計算値：Ｃ, 60.38; Ｈ, 5.71; Ｎ, 1.81 実測値：Ｃ, 60.48; Ｈ, 5.68; Ｎ, 1.82 ＭＳ ＳＩ−ＭＳ m／z ７６６（Ｍ＋Ｈ）^{+ 13} Ｃ ＮＭＲ（75MHz,DMSO-d6,δppm）：192.2(Q), 19
2.0(Q), 189.1(Q), 175.9(Q), 175.31and175.27*(Q),17
3.1(Q), 167.2(Q), 159.9(Q), 158.1(Q), 147.3(Q), 13
5.8(CH),133.7(CH), 130.2(CH), 128.6(Q), 119.4(CH),
117.6(CH), 114.8(CH),114.5(Q), 113.2(Q), 106.0
(Q), 95.0(Q), 77.9(Q), 77.4and77.3*(CH),75.1(Q), 7
3.53and73.48*(CH), 70.3(CH), 70.1(CH), 69.0(CH), 5
0.2(CH₃),40.9(CH), 40.5(CH), 40.3(CH₂), 34.9(CH),
26.2and26.1*(CH₂), 24.3(CH₃),19.0(CH₂), 17.91and1
7.87*(CH₃), 16.5and16.4*(CH₃), 11.32and11.26*(CH₃) * ジアステレオマーの混合物である為シグナルが２本観
測される。

【００３５】実施例１１ １２−Ｏ−メチルＴＡＮ−１
５１８Ａ ＴＡＮ−１５１８Ａ（２００mg）を酢酸エチル（２．０
ml）に溶解し、ジアゾメタンのジエチルエーテル溶液を
加え、室温にて３０分間放置した。反応混合物を濃縮
し、残渣を分取ＨＰＬＣ〔担体；ＯＤＳ，ＹＭＣ−ＳＨ
３４３，Ｓ−１５，移動相；５０％アセトニトリル／
０．０２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ３．０），流速；１０ml
／分〕に付した。保持時間４８、５分のピークの画分を
集め、アセトニトリルを留去後、酢酸エチルにて抽出し
た。酢酸エチル層を水洗後、濃縮すると、黄色粉末２１
mgが得られた。この粉末（１５mg）を８０％アセトニト
リル／０．０１Ｍ塩酸（１５ml）に溶解し、室温にて２
０時間放置した。反応混合物を濃縮してアセトニトリル
を留去後、酢酸エチルにて抽出した。酢酸エチル層を水
洗後、濃縮し、酢酸エチル−ヘキサンから粉末化するこ
とにより、１２−Ｏ−メチルＴＡＮ−１５１８Ａ（１４
mg）が淡黄色粉末として得られた。 １２−Ｏ−メチルＴＡＮ−１５１８Ａ ＵＶスペクトル：極大値 nm（ε） メタノール中；221(肩，39,200), 240(肩，30,300), 26
6(23,300),310(17,500), 347(12,000) メタノール−１ＮＨＣｌ（１９：１）中；220(肩，38,5
00), 240(肩，29,900), 263(肩，24,100),310(17,500),
345(12,000) メタノール−１ＮＮaＯＨ（１９：１）中；241(肩，29,
500), 272(24,100), 337(16,700) ＩＲスペクトル：ＫＢr錠剤中，主な吸収を示す（波
数，cm^-1） 3435, 1685, 1635, 1615, 1590, 1570, 1560, 1440, 14
30, 1290, 1265,1245, 1240, 1160, 1075¹ Ｈ ＮＭＲ（300MHz，重ジメチルスルホキシド中,δpp
m） 1.10(3H,s), 1.11(3H,d), 1.45-1.60(2H,m), 1.87(3H,b
r s), 1.94(3H,br d),2.11(1H,m), 2.23(1H,m), 2.71(1
H,m), 3.09(3H,s), 3.55-3.65(2H,m),3.80(1H,m), 3.84
(3H,s), 4.59(1H,t), 4.82(1H,br d), 5.11(1H,d),6.11
(1H,br q), 6.28(1H,br d), 6.95(1H,d), 7.00(1H,br
t),7.03(1H,br d), 7.56(1H,ddd), 7.69(1H,d), 7.85(1
H,dd), 9.33(2H,br),10.37(1H,br), 13.60(1H,br), 17.
45(1H,br)

【００３６】製剤例１ 上記実施例４によって得られたＴＡＮ−１５１８Ａを用
いて、下記に示す処方の全成分を混和し、ゼラチンカプ
セルに充填し、カプセル１個当たり、５０mgのＴＡＮ−
１５１８Ａを含有するカプセル剤を製造した。 ＴＡＮ−１５１８Ａ ５０mg 乳糖 １００mg コーンスターチ ４０mg ステアリン酸マグネシウム １０mg 合 計 ２００mg 製剤例２ 上記実施例４によって得られたＴＡＮ−１５１８Ａとス
テアリン酸マグネシウムを可溶性デンプンの水溶液で顆
粒化し、乾燥後、乳糖およびコーンスターチと混合し
た。混合物を圧縮成型し、下記に示す処方の錠剤を製造
した。 ＴＡＮ−１５１８Ａ ５０ｍｇ 乳糖 ６５ｍｇ コーンスターチ ３０mg 可溶性デンプン ３５mg ステアリン酸マグネシウム ２０mg 合 計 ２００mg 製剤例３ 上記実施例４によって得られたＴＡＮ−１５１８Ａを３
０％（w/v）ポリエチレングリコール４００を含む生理
食塩水に溶解してＴＡＮ−１５１８Ａの０．１％溶液を
調製し、滅菌濾過して、バイアルに５０mlずつ分注し
た。バイアル１個当たり、５０mgのＴＡＮ−１５１８Ａ
を含有する静注剤を製造した。

【００３７】試験例１ 子牛胸腺由来のＤＮＡトポイソメラーゼＩに対するＴＡ
Ｎ−１５１８Ａの阻害作用を〔表２〕に示す。

【表２】 ＴＡＮ−１５１８ＡのＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害作用 ───────────────────────────── ＴＡＮ−１５１８Ａ濃度(μg/ml) 阻害作用＊1) ───────────────────────────── ７５ ＋ ３７.５ ＋ １８.８ ＋ ９.４ ± ４.７ − ───────────────────────────── ＊1)＋，阻害作用陽性； ±，阻害作用疑陽性； −，阻害作用陰性 測定法：pＢＲ３２２ＤＮＡ（和光純薬社製）０．５μg
を含む２０μlの緩衝液〔３５mＭトリス塩酸液（pＨ８.
０），７２mＭ ＫＣl，５mＭ ＭgＣl₂，５mＭジチオス
レイトール，５mＭスペルミジン，０．０１％牛血清ア
ルブミン〕に子牛胸腺由来ＤＮＡトポイソメラーゼＩ
（宝酒造社製）１単位と適宜の濃度のＴＡＮ−１５１８
Ａを加えて３７℃で３０分間反応させた。この反応液を
常法に従って０．７％アガロースを用いるゲル電気泳動
で分析し、スーパーコイル状ＤＮＡの減少を指標として
酵素活性を判定した。

【００３８】試験例２ ＴＡＮ−１５１８Ａのマウスおよびヒト腫瘍細胞に対す
る増殖阻害作用を〔表３〕に示す。

【表３】 ＴＡＮ−１５１８Ａの腫瘍細胞増殖阻害作用 ─────────────────────────────── 腫瘍細胞 ５０％阻害濃度(ng/ml) ─────────────────────────────── マウス由来 Ｂ１６ メラノーマ(melanoma) １８.３ Ｐ−８１５ マストシトマ(mastocytoma) ８.０ ＥＬ−４ チオマ(thymoma) ８.４ ヒト由来 ＨeＬaＳ３ エピセロイド・カルシノーマ (epitheloid carcinoma) ５.８ ＷiＤr コロン・アデノカルシノーマ (colon adenocarcinoma) ８８.２ Ａ５４９ ラング・アデノカルシノーマ (lung adenocarcinoma) １６５.１ Ｇ３６１ マリグナント・メラノーマ (malignant melanoma) ４４.３ ─────────────────────────────── 測定法：腫瘍細胞２×１０⁴／ml（Ｂ１６のみ５×１０⁴
／ml）、５μＭ ２−メルカプトエタノール，２mＭ
Ｌ−グルタミン，２０μg／mlゲンタミシン（フロー・
ラボラトリーズ社製，スコットランド），１０％牛胎児
血清〔ウィッタカー・エム・エー・バイオプロダクツ社
（以下ＭＡＢと略記）製，米国〕を含むイーグルＭＥＭ
培地〔ＭＡＢ；Ｐ−８１５とＥＬ−４の場合はＲＰＭＩ
−１６４０培地（ＭＡＢ）〕にＴＡＮ−１５１８Ａを適
宜加え、３７℃，５％炭酸ガス下で３日間培養した後、
ＭＴＴ還元法〔多田ら，ジャーナル・オブ・イムノロジ
カル・メソード（Journal of Immunological Method）
第９３巻，１５７頁，１９８６年〕で腫瘍細胞の増殖を
測定した。

【００３９】試験例３ ＴＡＮ−１５１８ＡをＰ３８８リューケミアまたはＢ−
１６メラノーマによるマウスの抗腫瘍性テストに付した
ところ、腹腔内投与したとき１０〜３０mg／kgの投与量
で有効であった。 毒性試験 ＴＡＮ−１５１８Ａをマウスに４００mg／kg経口投与し
ても死亡例を認めなかった。

【００４０】

【発明の効果】本発明の化合物〔I〕またはその塩は優
れたＤＮＡトポイソメラーゼＩ阻害作用および抗腫瘍作
用を示し、ヒトや哺乳動物の悪性腫瘍の治療に用いるこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＴＡＮ−１５１８ＡのＵＶスペクトル

【図２】ＴＡＮ−１５１８ＡのＩＲスペクトル

【図３】ＴＡＮ−１５１８Ａの¹³Ｃ ＮＭＲスペクトル

【符号の説明】

【化８】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｒ 1:465） (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 309/10 A61K 31/35 A61P 35/00 C12P 29/00 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ) ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式 【化１】 または 【化２】 で表される化合物またはその塩。
2. 【請求項２】式 【化３】 で表される請求項１記載の化合物またはその塩。
3. 【請求項３】ストレプトミセス属に属し、請求項１記載
   の化合物を生産する能力を有する微生物を培地に培養
   し、培養物中に該化合物を生成蓄積せしめ、これを採取
   することを特徴とする請求項１記載の化合物またはその
   塩の製造法。
4. 【請求項４】請求項１記載の化合物またはその塩を含有
   してなる抗腫瘍剤。