JPH0676363B2

JPH0676363B2 - テクネチウム９９ｍのプロピレンアミンオキシムとの複合体

Info

Publication number: JPH0676363B2
Application number: JP61053508A
Authority: JP
Inventors: ルイス・ルーベン・キヤニング; デービツド・ピーター・ノウオトニツク; ルデイ・ドミニク・ネイリンクス; イアン・マイケル・パイパー
Original assignee: アマーシヤム・インターナシヨナル・ピーエルシー
Priority date: 1985-03-11
Filing date: 1986-03-11
Publication date: 1994-09-28
Anticipated expiration: 2009-09-28
Also published as: EP0194843A3; AU577931B2; DE3687467T2; JP2547515B2; CA1243329A; EP0194843B1; JPH06184078A; HK97997A; CA1252481C; US4789736A; DE3687467D1; AU5460986A; JPS61225159A; EP0194843A2

Description

【発明の詳細な説明】産業上の利用分野テクネチウム‐99m（Tc-99m）はインビボ診断の臓器イ
メージングおよび他の方式への有効な放射性核種であ
る。Tc-99mの錯体は身体の大部分の研究に使用されてい
る。

本発明は診断用薬剤として有効なテクネチウム‐99mの
錯体、特に血液‐脳関門を通過し、診断を可能にする時
間脳中に保持される錯体に関する。

欧州特許明細書第123504号が還元条件下、非置換または
置換アルキレン基に２または３個の炭素原子を含むアル
キレンアミンオキシムをTc-99m過テクネチウム酸塩水溶
液と複合させることにより形成されうる診断用放射性薬
剤として有効なテクネチウム‐99mの親油性大環状錯体
を示した。この錯体は正味零の電荷のコアを持ち、O-H-
O閉環結合を含み、非経口投与に十分安定でシンチレー
シヨンスキヤンニングによりイメージングするもので、
存在するアルキレン置換基は身体イメージングへの適用
に放射性核種を適合させるのに有効な性質のものであ
る。好適な錯体は式：（ただし、各R¹,R⁴およびR⁵は水素または（C₁-C₁₂）ア
ルキルであり、R²およびR³の各々は、水素、ヒドロキシ
ル、（C₁-C₁₂）アルコキシル、（C₁-C₂₂）炭化水素（ア
ルキル、アルケニル、アルカリール、アラルキルまたは
アリール）または（C₁-C₂₀）アミンであるか、またはR²
およびR³が一緒になつて結合炭素原子と共に、アミン置
換されうる環状脂肪族基を形成する）を持つと考えられ
ている。

本発明は前述の欧州特許明細書の発明の範囲内に入る
が、そこでは特別に記述されていないが、特に脳内保持
を重視する場合に興味ある性質を示す一連の錯体を形成
するためのリガンドに関する。

本発明は、診断用放射性薬剤として有効な錯体を形成す
るための式1: のプロピレンアミンオキシムリガンドを提供する。

前述の欧州特許明細書により他のプロピレンアミンオキ
シムと伴に式１の化合物も２個の不整炭素原子を持つの
で３種の立体異性体の型が存在する。本発明のもう１つ
の重要な点は、これらの立体異性体のTc-99m錯体のイン
ビボにおける性質の間に重大な差異があるという予期し
なかつた発見である。

式１の化合物の場合、リガンドには３種の異性体が存在
する。以下の図表は、いかにして化合物１に光学不活性
なmeso-ジアステレオマーおよび光学活性なd-およびl-
対掌体という形態が生ずるかを示す。

異性現象は３位と９位の炭素原子が不整であるために生
ずる。meso-ジアステレオマーはdl-ジアステレオマー
（d-およびl-対掌体のラセミ体混合物）とは明らかに異
なる。例えば、融点が異なりHPLC系での、保持時間も異
なる。２種のジアステレオマーからのTc-99m錯体はイン
ビボでの性質（ラツトの脳への取込み％i.d.）が著しく
異なる。

更に化合物１のd-およびl-対掌体が互いに、およびその
２種の対掌体のラセミ体混合物とmeso-ジアステレオマ
ーとが、異なつた物理的、生物的性質を示すことも決定
されている。また、上記の式２の他の化合物でも同様の
差異が生ずると予想される。

２種のジアステレオマーのTc-99m錯体のインビボにおけ
る性質の差異も驚く程のものである。これらの錯体は受
動的な拡散機構によつて血液‐脳関門を通過すると考え
られる。膜経由に拡散するという分子の能力は親油性で
プラスに、分子量でマイナスとなる。これによれば、２
種の異性体の分子量が同じであり、Tc-99m錯体の親油性
も極めて近似していると考えられるので、脳における放
射活性量による差異は比較的小さいと予想される。従つ
て２種の異性体の脳吸収における差異の大きさは驚く程
のものである；化合物１の場合は係数2.3である。dl-異
性体の方が良好である。

同様に、化合物１のd-とl-対掌体の脳吸収でも驚く程の
差異がある；ラツトによる研究では係数1.6である。

前述の３種の各立体異性体はそれ自身、２個のオキシム
基のＣ＝Ｎ結合の回転障害により３種の異性形態が存在
する。その異性体も異なつた物理的性質（m.p.、b.p）
を示し、クロマトグラフイー技法（TLCおよびHPLC）に
より分離できる。それらの相互変換は一般に容易であ
り、鉱酸やルイス酸、塩基または金属イオンにより触媒
される。

化合物１は２個のオキシム基により３種の異性体が可能
である。

EZはZEと同じである。ｄとｌ異性体と同様の考察を適用
する、すなわち各々は３種（EE,ZZおよびEZ）のオキシ
ム異性体を持つ。かさの大きな基が最も離れているEEが
熱力学的に好適な異性体であると期待される。化合物１
のHPLC分析（実施例11A）は２本の主要なピーク（meso-
およびdl-ジアステレオマーのEEオキシム異性体と同定
された）と４本の小ピーク（各ジアステレオマーのEZお
よびZZオキシム異性体と暫定的に帰属された）を示し
た。多分EE,EZおよびZZ異性体は異なつた生体分布性を
示すTc-99m錯体を形成する。

プロピレンアミンオキシムリガンドは前述の欧州特許明
細書第123504号に一般的に記述されたような標準的な化
学的経路により合成されうる。好適な合成経路を以下の
実施例１に記述する。

化合物は一般に３種の異性体全ての混合物として得られ
る。meso-異性体は溶解性の異なる溶媒からの分別結晶
を繰り返すという通常の方法でdl-異性体から分離しう
る。異性体の分析および分取はHPLCも有効である。d-お
よびl-対掌体は酒石酸のような光学異性の有機酸を使用
する通常の方法で分離しうる。分離方法は以下の実施例
２〜６に詳述する。

プロピレンアミンオキシムリガンドと過テクネチウム酸
塩（ジエネレータ溶出液からのTcO₄ ^-）との複合反応は
還元条件下、水溶液または水性／有機溶液中で実施しう
る。スズ塩が還元剤として便利であるが、この型の反応
には他の還元剤も良く知られており、使用可能である。
本発明の錯体は強く結合したTc-99mを含むので、リガン
ド交換工程により二者択一的に合成されうる。複合リガ
ンドの存在下に過テクネチウム酸塩を還元することによ
るTc-99m錯体の合成は良く知られており、本発明の場合
にも利用できる。現在これらの錯体は構造３を持つと考えられている。化合物１のTc-99m錯体（分離
されていない（dl/meso混合物）は：１）ラツトおよびヒトの脳における良好な吸収。

２）放射活性の脳から他器官へのゆつくりした除去を示
し、断層イメージングを従来の回転ガンマカメラ装置で
実施できる。

前述の欧州特許明細書には、次式：の錯体が開示されている。以下、この化合物を化合物２
と称する。化合物２のTc-99m錯体と比較して化合物１の
Tc-99m錯体の利点は：１）インビトロでの安定性がはるかに良好（下記の実施
例７参照）。

２）人体中における活性の血液および組織バツクグラン
ドの鮮明さがより良い。

３）化合物２の錯体はインビトロにおける急速な分解の
ため放射性医薬品には適当でないが、化合物１の錯体は
インビトロでは分解が遅いので理想的に適用される（下
記の実施例７参照）ことである。

化合物1-（dl-異性体）の錯体は、脳保持および脳イメ
ージングに関する限り、meso-異性体よりも驚く程秀れ
ている。対照的に、化合物２（dl-異性体）および化合
物２（meso-異性体）の錯体は脳吸収において大した差
異を示さない（下記の実施例10）参照）。

化合物１（分離されていないdl/meso混合物およびdl-異
性体の両方）の錯体は他に次のような興味ある予期せぬ
性質をも示す：・良好な腫瘍血流測定剤〔ジヤーナルオブヌクリ
アメデイシン（Journal of Nuclear Medicine）に
投稿されたV.R.マツクレデイー（McCready）らによる未
発表論文〕。

・血液細胞、特に白血球の良好な標識剤（下記の実施
例12参照）。

・化合物３〜13（下記の実施例８参照）の生体分布性
は、これらの化合物が診断用薬剤として、dl/meso異性
体を分離しない形状と分離した形状の両方の種々の使用
法をも示唆する。

・心筋潅流イメージングに有効。

以下の実施例は本発明を例証するものである。

実施例実施例１化合物１の合成 1A. 4,8-ジアザ‐3,6,6,9-テトラメチル‐3,8-ウンデ
カジエン‐2,10-ジオンビスオキシム 2,3-ブタンジオンモノオキシム（11.66g,115.4mmol）を
酢酸（５μ）含有ベンゼン（50cm³）に溶解し、デイ
ーン‐スターク（Dean-Stark）トラツプを取付けた容器
中、窒素気流下還流した。これに2,2-ジメチル‐1,3-プ
ロパンジアミン（5.00g,5.88cm³,49mmol）のベンゼン
（100cm³）溶液を５時間で添加した。生じた黄褐色溶液
を更に窒素気流下16時間還流し、次に室温に冷却した。
生成した固体を吸引過し、少量の冷（−40℃）アセト
ニトリルで洗浄すると微細な白色粉末として生成物が得
られた。

真空下で２時間乾燥した後、7.9g（60％収率）の生成物
が得られた、m.p.131℃‐134℃。得られた生成物は微量
（約２％‐５％）の出発原料のケトオキシムを含む（¹H
NMRで見られる）が、ベンゼンから一回再結晶すると
完全に除去され、132℃‐135℃で融ける生成物が得られ
た。

NMR（¹H,60MHz,CDCl₃）： δ3.3（4H,brs,CH₂N）,2.1（6H,s,CH₃-C＝Ｎ）,2.0（6
H,s,CH₃-C＝Ｎ）,1.1（6H,s,（CH₃）₂C）ppm. 1. 4,8-ジアザ‐3,6,6,9-テトラメチルウンデカン‐2,
10-ジオンbis オキシムジイミン（75g,287mmol）を０℃で95％エタノール（690
cm³）中でスラリーにした。水素化ホウ素ナトリウム（1
0.9g,287mmol）を0.5時間で一部づつ添加し、混合物を
０℃で２時間攪拌した。水（230cm³）を添加し、混合物
を更に２時間よく攪拌した。エタノールを真空下除去
し、水（140cm³）を更に添加した。pHを約11に調整し、
生じた白色固体を過し、少量の水で洗浄し真空下乾燥
すると粗生成物が得られた。熱アセトニトリルから２回
再結晶すると純粋な生成物が得られた、62.5g（80％）
m.p.144℃‐145℃。

NMR（¹H,200MHz,DMSO）： δ10.24（2H,s,OH）3.13（2H,q,CHMe）， 2.12（14,m,CH₂N）.1.65（6H,s,MeC＝Ｎ）， 1.07（6H,d,CHMe）,0.78（6H,s,CMe₂）ppm. 参考例１比較のため、以下の構造を有する化合物を合成した。

2,3-ペンタンジオン‐3-オキシムの合成 2-ペンタノン（102g）、エーテル（400ml）および濃塩
酸（15cm³）の混合物をよく撹拌し、激しい還流を保持
するのに十分な速度でメチルニトリルを通気した。メチ
ルニトリルガスは青酸ナトリウム（112g）、メタノール
（66g）および水（75cm³）からなるスラリーを撹拌し、
そこに濃硫酸（100cm³）と水（95cm³）の混合物を滴加
して生成させる。添加完了後、混合物を飽和重炭酸ナト
リウム水溶液（300cm³中32g）で中和した。エーテル層
を分離し、水層は更にエーテルで抽出した。有機層を一
緒にし、乾燥し、真空下濃縮すると黄色油状物が得ら
れ、放置しておくと結晶化した。熱ヘキサンからの再結
晶で純粋な生成物が得られた、（67g）,m.p.54-5℃。

以下のものが同様の方法で合成された（収率および融
点）： 2,3-ペンタンジオン‐2-オキシム（46％,m.p. 59-61
℃）。

2,3-ヘキサンジオン‐3-オキシム（64％,m.p. 42-3
℃）。

1,2-プロパンジオン‐1-オキシム（18％,m.p. 61-5
℃）。

2-メチル‐3,4-ペンタンジオン‐3-オキシム（45％,m.
p. 72-75℃）。

化合物2A〜13Aの合成以下のジイミンを実施例１と同様の方法で合成した（収
率および融点）：・4,8-ジアザ‐3,9-ジメチル‐3,8-ウンデカジエン‐2,
10-ジオンビスオキシム（2A），（51％,m.p.91-2℃）。

・4,8-ジアザ‐3,9-ジエチル‐3,8-ウンデカジエン‐2,
10-ジオンビスオキシム（3A），（68％,m.p.76-8℃）。

・5,9-ジアザ‐4,10-ジメチル‐4,9-トリデカジエン‐
3,11-ジオンビスオキシム（4A），（31％,m.p.143.5-14
4.5℃）。

・6,10-ジアザ‐5,10-ペンタデカジエン‐4,12-ジオン
ビスオキシム（5A），（30％,m.p.130-1℃）。

・59-ジアザ‐4,7,7,10-テトラメチル‐4,9-トリデカジ
エン‐3,11-ジオンビスオキシム（6A），（49％,m.p.79
-82℃）。

・4,8-ジアザ‐6,6-ジエチル‐3,9-ジメチル‐3,8-ウン
デカジエン‐2,10-ジオンビスオキシム（7A），（67％,
m.p. 168-9℃）。

・6,10-ジアザ‐5,8,8,11-テトラメチル‐5,10-ペンタ
デカジエン‐4,12-ジオンビスオキシム（8A），（32％,
m.p.91-3℃）。

・3,7-ジアザ‐2,8-ジメチル‐2,7-ノナジエン‐1,9-ジ
オンビスオキシム（9A），（87％,m.p.124℃分解）。

・4,8-ジアザ‐3,9-ジフエニル‐3,8-ウンデカジエン‐
2,10-ジオンビスオキシム（10A），（59％,m.p.169-172
℃）。

・4,8-ジアザ‐3,6,9-トリメチル‐3,8-ウンデカジエン
‐2,10-ジオンビスオキシム（11A），（70％，油状
物）。

・4,8-ジアザ‐3,6,7,9-テトラメチル‐3,8-ウンデカジ
エン‐2,10-ジオンビスオキシム（12A），（98％，油状
物）。

・5,9-ジアザ‐2,4,10,12-テトラメチル‐4,9-トリデカ
ジエン‐3,11-ジオンビスオキシム（13A），（27％,m.
p.120℃）。

化合物２〜13の合成以下のリガンドを実施例１と同様の方法で合成した（収
率，融点,NMRデータ）：・4,8-ジアザ‐3,9-ジメチルウンデカン‐2,10-ジオン
ビスオキシム（２），（18％,m.p. 119-122℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆−DMSO）：δ10.2（2H,s,OH）,3.2
（2H,q,CH）,2.3（4H,t,CH₂N）， 1.65（6H,s,N＝CMe）,1.44（2H,m,CH₂）， 1.04（6H,d,CH）ppm. ・4,8-ジアザ‐3,9-ジエチルウンデカン‐2,10-ジオン
ビスオキシム（３），（76％，油状物）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO:δ10.28（2H,s,OH）,2.90（2
H,m,CH）,2.3（4H,brm,CH₂N）,2.19（4H,q,CH₂Me）,1.6
1（6H,s,N＝CMe）,1.4（2H,m,CH₂）,0.98および0.76（6
H,t,CH₃）ppm. ・5,9-ジアザ‐4,10-ジメチルトリデカン‐3,11-ジオン
ビスオキシム（４），（59％，油状物）。

NMR（¹H,200MHz,CDCl₃）：δ3.33（2H,q,CH）,2.61（4
H,q,N＝CCH₂）,2.18（4H,m,CH₂N）,1.68（2H,m,CH₂）,
1.24および1.13（12H,m,CH₂）ppm. ・6,10-ジアザ‐5,11-ジメチルペンタデカン‐4,12-ジ
オンビスオキシム（５），（57％，油状物）。

NMR（¹H,200MHz,CDCl₃）：δ3.31（2H,q,CH）,2.62（4
H,m,N＝CCH₂）,2.40（4H,m,CH₂N）,1.57（6H,m,CH₂C
H₂）,1.23（6H,m,CHMe）,0.97（6H,t,CH₃）ppm. ・5,9-ジアザ‐4,7,7,10-テトラメチルトリデカン‐3,1
1-ジオンビスオキシム（６），（33％,m.p. 120-1
℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO）：δ10.2（2H,s,OH）,3.15
（2H,q,CH）,2.2（8H,brm,CH₂N＋Ｎ＝CCH₂）,1.13（6H,
d,CH₃）,1.05（6H,t,CH₃）,0.78（6H,s,CMe₂）ppm. ・4,8-ジアザ‐6.6-ジエチル‐3,9-ジメチルウンデカン
‐2,10-ジオンビスオキシム（７），（10％,m.p. 142-
4℃）。

NMR（¹H,200MHz,CDCl₃）：δ3.36（2H,m,CH）,2.39（4
H,s,CH₂N）,1.85（6H,s,C＝NMe）,1.25（10H,m,CH _２Me
＋CHCH _３）,0.76（6H,m,CH₃）ppm. ・6,10-ジアザ‐5,8,8,11-テトラメチルペンタデカン‐
4,12-ジオンビスオキシム（８），（５％,m.p. 134-5
℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO）：δ3.19（2H,q,CH）,2.30
（4H,s,CH₂N）,2.25（4H,m,N＝CCH₂）,1.49（4H,brm,CH
₂CH₃）,1.13（6H,d,CHMe）,0.90（12H,m,CH₃）ppm. ・3,7-ジアザ‐2,8-ジメチルノナン‐1,9-ジオンビスオ
キシム（９），（13％,m.p. 111-4℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆−DMSO）：δ10.46（2H,brs,OH）,7.
05および6.45（2H,d,N＝CH）,3.15（2H,m,CH）,2.44（4
H,brm,CH₂N）,1.47（2H,m,CH₂CH₂）,1.07（6H,d,Me）pp
m. ・4,8-ジアザ‐3,9-ジフエニルウンデカン‐2,10-ジオ
ンビスオキシム（10），（22％,m.p. 101-5℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO）：δ10.50（2H,brs,OH）,7.3
（10H,m,Ph）,4.29（2H,s,CHPh）,2.48（4H,m,CH₂N）,
1.63（2H,brm,CH₂CH₂）,1.54（6H,s,CH₃）ppm. ・4,8-ジアザ‐3,6,9-トリメチルウンデカン‐2,10-ジ
オンビスオキシム（11），（40％，油状物）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO）：δ3.3（2H,q,CH）,2.4（4
H,m,CH₂）,1.8.（6H,s,CH₃）,1.16（6H,d,CH₃）,0.7〜
1.4（1H,m,CH）,0.85（3H,d,CH₃）ppm。

・4,8-ジアザ‐3,5,7,9-テトラメチルウンデカン‐2,10
-ジオンビスオキシム（12），（５％,m.p. 138-145
℃）。

NMR（¹H,200MHz,d₆-DMSO）：δ2.5（2H,m,CH）,1.65（6
H,s,CH₃）,1.23（2H,t,CH₃）,1.01（6H,d,CH₃）,0.85
（6H,m,CH₃）ppm. ・5,9-ジアザ‐2,4,10,12-テトラメチルトリデカン‐3,
11-ジオンビスオキシム（13），（5.4％,m.p.127-128
℃）。

NMR（¹H,200MHz,CDCl₃）：δ3.4-3.6（2H,q,CH）,2.5-
2.8（4H,m,CH₂）,2.3-2.5（2H,m,CH）,1.6-1.8（2H,m,C
H₂）,1.4（6H,d,CH₃）,1.15（12H,d,CH₃）ppm. 実施例２化合物１のmeso-とd,l-立方異性体の分離 A.HPLC meso-とd,l-ジアステレオマーの分析的分離は市販のデ
ユアルポンプクロマトグラフ系に接続した５μｍシリカ
ゲル微小球を詰めた250×4.6mmステンレススチールカラ
ムを用いた順層HPLCによつて行なつた。可変式UV検出器
を210mmに設定して検出し、検出器からの出力をチヤー
ト記録計およびピーク積分をプログラムしたマイクロコ
ンピユータに接続した。

使用した溶媒系は85％メタノールと15％0.4Mアンモニア
水（V/V）の混合液であつた。この溶媒系使用によるカ
ラムでの分解の可能性を排除するため、15μｍ〜25μｍ
のシリカゲル粒子を詰めたプレカラムを試料注入器の前
の溶媒経路に入れる。用いた流速は1ml/minであつた。

化合物１のジアステレオマーの混合物からなる試料を10
mg/mlの濃度でメタノールに溶解し、10μを分析し
た。ベースライン分解能はテーリングの認められないこ
とにより認められ、8.90分と9.87分の保持時間は、それ
ぞれmeso-E.E-およびd,l-E,E-異性体として記録され
た。

B.分別結晶 meso-4,8-ジアザ‐3,6,6,9-テトラメチルウンデカン‐
2,10-ジオンビスオキシム水処理から直接得られた粗生成物試料（38g,比率60:40,
meso:dl）を熱アセトニトリルから連続的に４回再結晶
すると微細白色針状晶として純粋なmeso異性体が得られ
た（10.5g）、m.p.149.5-150℃。

dl-4,8-ジアザ‐3,6,6,9-テトラメチルウンデカン‐2,1
0-ジオンビスオキシム粗生成物試料（9.8g,比率50:50）を熱アセトニトリルか
ら２回再結晶するとdl-濃縮物（4.6g,比率47:53,meso:d
l）が得られた。２回目の結晶化からの液を室温にし
た。少量の結晶（220mg,比率20:80,meso:dl）を除去
し、液を真空下で濃縮するとdl-濃縮物（1.41g,比率2
2:78,meso:dl）が得られた。酢酸エチルからゆつくり再
結晶すると大きな透明結晶として純粋なdl異性体が得ら
れた（82mg）,m.p.129-130℃。

実施例３Ｘ線結晶学Ｘ線結晶学に適当な結晶は分離したジアステレオマーを
メタノールから結晶化することにより得られた。構造決
定の詳細は以下に示す。その決定によれば8.90分のHPLC
保持時間のジアステレオマー（実施例2A）はmeso-ジア
ステレオマーであり、9.87分の保持時間のジアステレオ
マーはdl-ジアステレオマーであることが示された。両
方の場合とも、オキシム基の立体配置はEEである。

ａ）meso異性体 C₁₃H₂₈N₄O₂・1/2H₂O,M＝281,斜方晶，空間群P2₁2₁2,a＝
16.946,b＝15.565,c＝6.318Å,V＝1666,46Å³,Z＝4,Dc
＝1.119g/cm³,F（000）＝618,μ（Mo-Kx）＝0.47/cm,強
度1716がフイリツプス（Philips）PW1100 Ｘ線回析計
で記録された（３＜θ＜25゜）。Ｆ＞６αＦによる1036
反射はR.0.064。

ｂ）dl異性体 C₁₃H₂₈N₄O₂,M＝272,単斜晶，空間群C2/C,a＝6.763,b＝1
0.92,c＝23.863Å,V＝1600.78Å³,Z＝4,Dc＝1.128g/c
m³,F（000）＝600,（Mo−Ｋ）＝0.49/cm,F＞６αＦによ
る861反射はR0.071。

実施例４化合物１のmeso-およびdl-ジアステレオマーの¹Hおよび
¹³C NMRスペクトル 1. ¹H NMRスペクトル¹ H NMRスペクトルはブルーカー（Bruker）AM-500FT N
MR分光計を用いて500MH₃でd₆-DMSO中で測定した。以下
のように帰属した。（炭素原子の番号については上記
「化合物１のジアステレオマー」の図を参照せよ）： d,l-ジアステレオマーでは、C₆に付いたメチル基は同等
の環境にあり、単一のシグナルを示すはずである。これ
は0.7835ppmのシングレツトに帰属される。meso-ジアス
テレオマーではC₆に付いたメチル基は異なつた環境にあ
り、２本のシングレツトが見られるはずである。これら
は0.7748と0.7779ppmのシングレツトに帰属される。

2.¹³C NMRスペクトル¹³ C NMRスペクトルはブルーカーAM-250FT NMR分光計
または日本電子FX-200 FT NMR分光計を用いd₆-DMSOま
たはd₄-MeOH中で測定した。以下のように帰属した。

帰属はオフレゾナンスおよび選択的プロトンデカツプリ
ング実験により支持された。

プロトンスペクトルと同様にC₆のジェム‐ジメチル基へ
の帰属が２種の異性体で異なる。異性体間の最も明白か
区別は炭素C₅とC₇のシグナルに見られ、dl-ジアステレ
オマーでのシグナルはmeso-ジアステレオマーでの相当
するシグナルより約0.55ppm低磁場に見られる。これら
のシグナルの相対的積分値は広範囲の化合物に対してHP
LCから得られた異性体の比率の値と近似のものであつ
た。化学シフト/ppm 帰属 8.9485 CH₃-C₂＋CH₃-C₁₀ 19.3809 CH₃-C₃＋CH₃-C₉ （mseo-） 19.4037 CH₃-C₃＋CH₃-C₉ （d,l-） 25.0265 CH₃-C₆（meso-） 25.0421 25.0794 CH₃-C₆（d,l-） 35.3182 C₆ （d,l-） 35.3731 C₆ （meso-） 57.8070 C₅＋C₇ （meso-） 58.3569 C₅＋C₇ （d,l-） 58.9974 C₃＋C₉ （meso-） 59.0111 C₃＋C₉ （d,l-） 161.3406 C₂＋C₁₀（d,l-） 161.4497 C₂-C₁₀（meso-）実施例５化合物１のd-およびl-対掌体の分離化合物１のジアステレオマーを熱エタノール溶液中で当
量のL-（＋）‐酒石酸で処理した。溶液を冷却し、白色
固体を過し、３回再結晶すると一方の対掌体の（＋）
‐酒石酸塩が得られた▲〔α〕²⁵ _Ｄ▼＝28.08゜（Ｃ＝2.5,H₂O）。m.p.173-175℃。

上記生成物からの液を濃縮し、塩を分解し、水に溶解
し、pH9の塩基性にして、白色固体を過すると（未知
の対掌体部分の）化合物１が得られた。これを酢酸エチ
ルから再結晶すると白色結晶が得られた。この試料を熱
エタノール溶液中で当量のD-（−）‐酒石酸で処理し、
生じた白色固体を３回再結晶するともう一方の対掌体の
（−）‐酒石酸塩が得られた。▲〔α〕²⁵ _Ｄ▼＝27.67
゜（Ｃ＝2.5,H₂O）。

m.p. 167.5-168℃。

得られた酒石酸塩の試料を上記の方法で遊離塩基に変換
するとd-およびl-化合物１の試料が得られた。（＋）−
酒石酸塩はl-化合物１、▲〔α〕²⁵ _Ｄ▼＝−2.52（Ｃ＝
4,MeOH）を生じ、（−）‐酒石酸塩はd-化合物１、▲
〔α〕²⁵ _Ｄ▼＝＋2.51゜（Ｃ＝4,MeOH）を生じた。

参考例２化合物２のmeso-とd,l型への分離化合物２のmeso-とd,l-型は実施例２で使用されたHPLC
条件を修正して分離された。違いは溶媒組成が85％MeOH
と15％（0.4M）アンモニア水から98％MeOHと２％アンモ
ニア水に変つたことと、分取カラムにおける流速が2ml/
minにしたことである。この条件下、速く溶出する異性
体の保持時間は約24分で、遅く溶出する異性体の保持時
間は約26分であつた。分取用HPLCで分離した異性体は、
HPLCで概算して約90％純度の試料であつた。¹H NMRス
ペクトルより、最初に溶出したジアステレオマーがmeso
-で、後がd,l-型であつた。

参考例３化合物４のd,l-とmeso-異性体の分離化合物４のd,l-とmeso-異性体の部分的な分離は、化合
物２に使用されたのと同条件のHPLCで行なわれた。結果
は、異性体の分離は劣つたが約70:30の比率の試料が得
られた。オキシムの異性化は極めて速く起こり、より良
い純度の試料を単離することはできなかつた。

実施例６化合物１のオキシム異性体の分離と標識化速い平衡化のため、化合物１の（E,Z）オキシム異性体
を単離成分として、特性を示すことは不可能であつた。
しかし（E,Z）オキシム異性体の標識化は、生じた溶液
を直ちに標識化することにより、（E,Z）オキシム異性
体に相当するHPLCピークを単離することによつて研究し
た。（E,E）異性体を用いた実験では、この条件下の標
識化は円滑に進行した。（E,Z）異性体では、ある程度
のHPLC法の非再現性と平衡過程のため一貫した結果が得
られなかつた。しかし、親油性種（通常約20％で、（E,
Z）異性体の再平衡による（E,E）異性体から多分導かれ
る）および若干多量の親水性種を含む多数の複合体が得
られた。

実施例７化合物１のTc-99m錯体の形成化合物１（dl/meso混合物）の1.0mgの滅菌凍結乾燥物と
15mgの酒石酸第一スズを窒素で置換した10mlのガラスび
んに封入し、Mo-99/Tc-99mジエネレータ系から得たTc-9
9m過テクネチウム酸塩の溶出液3-8mlと再構成した。生
じた混合物の分析は過テクネチウム酸塩（のより低い酸
化型のテクネチウムへの）還元およびリガンドによる還
元テクネチウムとの複合が室温で１分間放置で完了する
ことを示した。

化合物２〜13および個々の異性体やその対掌体のTc-99m
錯体も同様に合成された。

もう一方の一般的に好適な処方は0.5mgの化合物１（dl-
異性体）、4.5mgの塩化ナトリウムおよび7.6mgの塩化第
一スズ二水和物からなる。

Tc-99m錯体の分析薄層クロマトグラフイーシリカゲルを含ませたガラス繊維片は速くて正確な分析
系の支持層を形成する。20cm×2cmの２本の細片を各分
析に使用した。錯体含有溶液約５μを各細片の底から
1cmの位置に付け、一方の細片は塩水で、他方はメチル
エチルケトン（MEK）で展開した。

各細片に沿つた放射活性分布は、ピーク積分をプログラ
ムしたノバ（Nova）コンピユータに接続した100チヤン
ネルの分析系により処理して決定した。下の表にTc-99m
溶液の主要成分のRf値を示す。観察されたTc-99m錯体の
放射化学純度は一般に80％以上であつた。

錯体の安定性錯体の安定性を決定するため、化合物１および２（各場
合ともdl/meso混合物）のテクネチウム錯体の形成後の
時点で、薄層クロマトグラフイーによる放射化学純度の
決定を数回実施した。

代表的な結果を下表に示す。

化合物２の錯体のインビトロにおける安定性は化合物１
の錯体のよりかなり劣るらしい。この差異は重要であ
る。錯体の型をとらないTc-99mの％は化合物１よりも化
合物２で常に２倍以上多い。この放射化学的不純度はイ
ンビボでのバツクグランド放射線を増加し、有益な情報
を得ることがより困難あるいは不可能にさえなるであろ
う。

実施例８動物性体分布データ 0.1mlのTc-99m錯体溶液を５〜６頭のラツト（140〜220
g）に静脈注射（測方尾部静脈）で投与した。注入され
た投与量はTc-99m約1mciに等しかつた。注射後２分で３
頭のラツトを殺し、次に注射後１時間で３頭または２時
間で２頭殺した。解剖して以下の表に示した臓器および
血液試料を取り、放射活性を検査した。各臓器または組
織への吸収は、回収された全活性への百分率として算出
した。

本実験に使用したTc-99m錯体におけるジアステレオマー
の比率は、わからない。

静注後２分および１時間における結果は動物３頭の平均
である。

静注後２時間での結果は動物２頭の平均である。。

実施例９化合物１の分離したジアステレオマーを用いて、実施例
８の実験をくり返す。結果を下表に示し、実施例３にお
ける表中の化合物１（混合物）の結果と比較した。

脳吸収および保持における差異の理由は解明されていな
いが、２種の異性体のTc-99m錯体間の親油性における差
異のためではないらしい。この目的のため我らが開発し
た独特なHPLC法により、２種の異性体の親油性を比較
し、それらが区別できないとの結論を出した。

実施例10 単離した立体異性体からのTc-99m錯体のラツト生体分布
データ実施例11 臨床研究化合物１のdlとmeso、およびd,lとdlジアステレオマー
のTc-99m錯体の間の比較を含めた全ての臨床研究は、ア
バデイーン（Aberdeen）王立診療所で健康な志願被験者
に実施された。

ａ）化合物１のdlとmesoジアステレオマーの比較これは発表されている：「局所大脳血流のイメージングへの有力な薬剤としての
99mTc-HM-PAO立体異性体‐ヒト志願者による研究」シヤ
ープ（Sharp）PF,スミス（Smith）FW,ゲンメル（Gemme1
1）HGら、J.Nucl.Med.,1986,27.171-177ページ。

以下の表に静注27分後の臓器当りの注入された全活性の
平均％を示す。データは全身スキヤンニング装置を用い
た問題とした研究領域で得られる。

ｂ）化合物１のd,lとdl立体異性体の比較以下の表に静注30分後に健康な志願者内の注入量の％を
各立体異性体について３回の実験の平均で示す。

脳肝臓腎臓ｄ 3.76 12.66 1.46 ｌ 4.30 8.06 4.0 dl 4.16 10.73 3.03 健康な志願被験者における臨床研究以下のデータはヒト志願被験者における化合物１と２
（各場合とも分離していないdl/meso混合部）の錯体の
相対的な動作の比較を表わす。

ｉ）血液からの除去率 ii）全身分布ヒトにおける断層イメージング研究脳の断層像を健康な志願者に同じ錯体を用いて測定し
た。使用した装置はシングルベツド回転ガンマカメラと
ミニコンピユータシステムであつた。志願者の頭と肩の
360゜円形回転のガンマカメラにより64 25秒の像を蓄
積した。

脳の良質な断層像はミニコンピユータによる化合物１の
錯体を用いて得た像の再構成によつて得られた。化合物
２の錯体を用いて得た像は、軟組織部位への高い吸収か
ら生ずる高レベルのバツクグラント放射線のために、よ
り不良であつた。

実施例12 白血球のインビトロ標識化化合物１のテクネチウム‐99m錯体の溶液を以下のよう
にして作つた。0.5mgの化合物1;7.5mgの塩化第一スズ二
水和物および4.5mgの塩化ナトリウムを入れたガラスび
んを凍結乾燥し、窒化下で封じた。これに135mciのテク
ネチウムジエネレータからの過テクネチウム酸ナトリウ
ム溶出液5.0mlを添加した。34mlのくえん酸で血液凝固
阻止された血液からデキストラン沈澱法により混合した
白血球を得た。これを２回洗浄し、約0.25mg/mlのプロ
スタグランジンE₁を含んだ2.0mlのリン酸緩衝液に再び
懸濁させた。懸濁液を0.2mlの化合物１のテクネチウム
‐99m錯体の溶液と培養した。培養は室温で行ない、試
料を分析用に時々取つた。２分後には放射活性の60％が
血液細胞に会合し、５分後には83％、10分後には89％が
会合した。

この方法で製造したTc-99m標識白血球を排泄物抽出物を
しみ込ませた海綿を移植して生じる膿瘍を持つたラツト
に注射した。膿瘍の吸収は、In-111標識白血球によるも
のと同一であつた。

フロントページの続き (72)発明者ルデイ・ドミニク・ネイリンクスイギリス国バツキンガムシヤー，アマーシヤム，エルム・クローズ 20 (72)発明者イアン・マイケル・パイパーイギリス国ハートフオードシヤー，レツドボルン，シエパーズ・ロー 11 (56)参考文献特開昭60−69090（ＪＰ，Ａ) 特開昭61−143351（ＪＰ，Ａ) Ｉｎｔ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ１．，12（２），133−134（1985) ＡｃｔａＣｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．，Ｓｅｃｔ．Ｃ：Ｃｒｙｓｔ．Ｓｔｒｕｃｔ. Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｃ40（５），813−816 （1984) ｌｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６（11）, 2043−2046（1967)

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】次式：で表わされるプロピレンアミンオキシムリガンド。
【請求項２】dl-ジアステレオマーである、特許請求の
範囲第１項記載のリガンド。
【請求項３】1-エナンチオマーである、特許請求の範囲
第１項記載のリガンド。
【請求項４】d-エナンチオマーである、特許請求の範囲
第１項記載のリガンド。