JPH05509299A

JPH05509299A - 炎症の処置方法、並びにそれに使用するのに適した化合物および組成物

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Publication number: JPH05509299A
Application number: JP3510199A
Authority: JP
Inventors: ワイツバーグ、モッシュ; バーチ、ロナルド　マーティン
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1990-05-29
Filing date: 1991-05-17
Publication date: 1993-12-22
Also published as: AU7951591A; IE911823A1; FI925327A0; CA2083134A1; US5079260A; NZ238272A; EP0531443A1; IL98223A0; WO1991018596A1; FI925327A; ZA914102B; EP0531443A4

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】炎症の処置方法、並びにそれに使用するのに適した化合物および組成物関連出願の説明この出願は、１９８９年６月２２日付は出願の米国特許出願第０７／３６，９．　７１０号の部分継続出願である。

発明の背景技術分野本発明は、炎症症状の処置方法、並びにそれに使用するのに適した化合物および医薬組成物に関するものである。

背景の説明たとえばアトピー性皮膚炎、接触皮膚炎、乾癖、リューマチ性関節炎、糸球体腎炎、骨関節炎、紅斑性狼癒、硬皮症、喘息および刺戟性胃腸病のような炎症症状の処置は従来、たとえばアスピリン様の非ステロイド系抗炎症剤、グルココルチコイド、メトトレキセートおよびシクロホスファミドのような薬剤の使用を伴った。残念ながら、これら薬剤は一般に望ましくない副作用をもたらす。特に、非ステロイド系抗炎症剤はしばしば胃腸および腎臓の副作用をもたらす。グルココルチコイドは免疫系を抑制し、したがって偶発的な感染および内分泌症をもたらす。メトトレキセートは患者の死亡に関連し、シクロホスファミドは発癌性の傾向を有する。したがって、これら悪性の副作用を持たない炎症症状の新規な処置剤が必要とされる。

発明の目的本発明の一般的な目的は、従来技術で認められた抗炎症剤に伴う悪性の副作用を回避する炎症症状を有する患者の処置方法を提供することにある。さらに本発明の目的は、この種の方法に使用するのに適した化合物および医薬組成物を提供することにある。

本発明の他の目的および利点は以下の説明から当業者には明かとなるであろう。

発明の要点本発明は、たとえばアトピー性もしくは接触皮膚炎、乾痒、リューマチ性関節炎、糸球体腎炎、骨関節炎、紅斑性狼瘉、硬皮症、喘息または刺戟性胃腸病のような炎症症状を有する患者の処置方法に関する。さらに本発明は、この種の方法に使用するのに適した化合物および医薬組成物にも関するものである。

１具体例において本発明は、炎症症状の処置を必要とする動物に対しこの炎症症状を減少もしくは除去するの［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシまたは酸素であり：性アミノ酸の残基であり、Ｙは−Ｃｏ２Ｈ，−ＣＨ２０Ｈ，−ＣＯＮＲＲもしくは−ＣＯ２Ｒ１であり、ＲおよびＲ２は水素、アルキルもしくはアリールで■ あり。

ＲおよびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり。

ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロである］の少なくとも１種の化合物またはその医薬上許容しつる塩を投与する。二とからなる炎症症状の処置方法に関するものである。

他の具体例において本発明は、抗炎症作用をもたらすのに充分な量の式Ｉ（上記）の化合物を医薬上許容しつるキャリヤと共に含んでなる医薬組成物に関するものである。

他の具体例において本発明は、一般にＸ１ＱＳＲ３、しくはその塩）であればＸが酸素でなく、さらにＡもしくはＢが独立して水素もしくはハロゲンであり、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、かつＹが−Ｃ０２Ｈ（もしくはその塩）であればＣ′が芳香族アミノ酸残基でない式Ｉの化合物に関するものである。しかしながら、本発明はＮ−［９Ｈ−（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−を一ロイシンおよびＮ−［（９Ｈ−（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ネオペンチルグリシンを包含する。

発明の詳細な説明本発明による炎症症状の処置方法に使用するのに適し［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシもしくは酸素てあり：ミノ酸の残基であり、Ｙは−Ｃｏ２Ｈ，−ＣＨ２０Ｈ。

リール）、アラルキル（有利には（Ｃ，１２）アル（Ｃ１−９）アルキル）、アルコキシ（有利には（Ｃ）、アルコキシアルキル（有利には（Ｃ）アルコキシ（Ｃ）アルキル）、ハロゲンもしくはニトロである］により示される。

上記炭化水素は未置換であっても或いはＣアルキル基により置換されてもよい。

ここで用いる「親油性アミノ酸」と言う用語は、その範囲内に遊離ヒドロキシ基、遊離チオール基または塩基性窒素原子を持たない残基を有するアミノ酸を包含する。

上記化合物の医薬上許容しうる塩も、本発明に関する組成物および方法に使用することができる。

上記式■の成る種の化合物は当業界にて公知である［特に米国特許第３，８３５，１７５号および第３，９０６．０３１号（さらに第４，３９４，５１９号も参照）に開示された化合物参照コ。残余の化合物は本発明で初めて開示されると思われる。炎症の処置におけるこれら薬剤（公知および新規）の使用は従来記載されていない。

式■の公知化合物のうち、本発明の方法に使用するのに好適な化合物は化合物Ｎ −［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキン）カルボニル］−Ｌ−ロイシンである。

さらに、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ノルロイシンおよびＳ−ベンジル−β、β−ジメチルーＮ−［９Ｈ−（フルオレン −９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｄ−システィンも、本発明の方法に使用するのに好適な公知化合物である。

本発明の方法に使用するのに好適な式Ｉの新規な化合物は次の通りである　（ｉ）Ｒ、Ｒ、ＡおよびＢが水素であり、Ｘがメチレンであり、Ｑが親油性アミノ酸であるもの；　（ｉ　１）Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ａおよび／またはＢのそれぞれが少なくとも１信のアルキル置換基を示し、Ｑが親油性アミノ酸であるもの。本発明の方法に使用するのに最も好適な式■の新規な化合物は次の通りである：（１）Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ａがフルオレン環の４−位置に位置するメチル基であり、Ｂが水素であり、Ｑがアミノ酸ロイシンであるもの；（１１）Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ａがフルオレン環の４−位置に位置するメチル基であり、Ｂが水素であり、Ｑがアミノ酸ホモフェニルアラニンであるもの；および（ｊ　ｉ　ｉ）　ＲおよびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であす、Ａがフルオレン環の２＝位置に位置するメチル基であり、Ｂがフルオレン環の７−位置に位置するメチル基であり、Ｑがアミノ酸ロイシンであるもの。

式■の上記化合物は、当業界で知られた方法により製造することができる（下記実施例をも参照）。たとえば、Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルコーアミノ酸を製造する際に使用するのに適した合成法の詳細はり、Ａ、カルピノおよびＧ、Ｙ、ハンにより記載されている（米国特許第３，８３５．１７５号および第３，９０６，０３１号）（下記実施例をも参照）。

典型的には、９Ｈ−フルオレンが出発物質として使用される。これは、たとえば９Ｈ−フルオレンと蟻酸メチルとのナトリウムエトキシドの存在下における縮合に続く中間９Ｈ−フルオレン−９−カルボキシアルデヒドの還元により、対応の９Ｈ−フルオレン−９−イルメタノールまで変換される。或いは、９Ｈ−フルオレンをたとえば水素化ナトリウムもしくはナトリウムアミドのような強塩基の存在下にホルムアルデヒドと直接に縮合させて、９−メタノール誘導体を得ることもできる。α−炭素原子が置換された化合物は、選択９Ｈ−フルオレンとホルムアルデヒド以外のアルデヒドまたはたとえばアセトンもしくはアセトフェノンのようなケトンとの間の強塩基の存在下における反応により製造することができる。

９Ｈ−フルオレンのベンゾ融合環に対する置換基の導入は、たとえば直接的ハロゲン化もしくはニトロ化により公知方法で達成することができる。

９Ｈ−フルオレン−９−イルメタノールは９Ｈ−フルオレン−９−イルメタノールのへ口蟻酸塩、炭酸塩、チオ炭酸塩、イミジル炭酸塩または基（「離脱基」）を有する他の蟻酸誘導体まで変換され、離脱基はα−アミノ酸の核性窒素により容易に置換される。活性化９Ｈ−フルオレン−９−イルメタノールの得られたカルボニル誘導体をα−アミノカルボン酸と縮合させて、一般式■の９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル誘導体を生成させる。「離脱基」がハロゲン（特に塩素）であれば、反応はたとえばジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミドもしくはピリジンのような極性有機溶剤中でアルカリ性条件（好ましくは緩和）の下でたとえば０〜２５℃のような低温度にて約２〜３時間にわたり行なうことができる。好適溶剤はジオキサンと水との混液である。一般にＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）スルボニル］−アミノ酸が溶液から沈澱し、これをたとえば再結晶化により精製することができる。他の「離脱基」を使用するには若干高められた温度（たとえば２５〜５０℃）とより長い反応時間（たとえば８〜１２時間）とを必要とする。

後記する実施例は、本発明に関する新規な化合物を製造するための他の合成方式を含む。

可能であれば、式Ｉの化合物は有利には遊離酸として或いは各種の無機もしくは有機塩基との医薬上許容しうる塩として用いられる。典型的な塩はアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を包含するが、他の無毒性塩も使用しうろことが了解されよう。有利には、本発明の方法に使用するのに適した化合物はナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩、コリン塩もしくはエチレンジアミン塩として投与される。ナトリウム塩が好適である。

当業者には理解されるように、本発明の化合物はＤもしくはＬの光学異性体として存在することができ、または成る種の場合にはジアステリオマーおよびラセミ体としオレン環の７−位置に位置するメチル基であり、Ｑがロイシン、イソロイシンもしくはノルロイシンであるような化合物である。

好ましくは本発明の医薬組成物は、式■の活性成分を投与経路に応じ投与単位当り２５ｍｇ〜５００　ｍｇ、有利には約５０ｆｆ１ｇ〜２５０Ｂから選択される量にて含有する。

適する濃度および投与単位の寸法は当業者により容易に決定することができる。

本発明の組成物に使用される医薬キャリヤはたとえば固体もしくは液体型とすることができる。固体キャリヤの例は乳糖、ステアリン酸マグネシウム、白土、蔗糖、タルク、ステアリン酸、ゼラチン、寒天、ペクチンもしくはアカシャゴムである。組成物中に存在させる固体キャリヤの量は相当に変化するが、好ましくは約２５ｍｇ〜１ｇの範囲である。液体キャリヤの例はシロップ、落花生油、オリーブ油、ゴマ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（分子量２００〜４００）および水である。キャリヤもしくは希釈剤は当業者に周知にされた徐放性物質、たとえばグリセリンモノステアレートもしくはグリセリンジステアレートを単独で或いはワックスとの混合物として包含する。

上記したように、本発明の医薬組成物は投与単位形態物で存在することができる。たとえば、組成物は錠剤（好ましくは腸溶性被覆）、カプセル（好ましくは腸溶性被覆）、粉末、トローチ、ロイシン、吸入剤、シロップ、乳液、ゲル、軟膏、クリーム、ローション、経皮パッチ、座薬、無菌注射液、並びに液体懸濁物もしくは溶液の形態とすることができる。本発明の医薬組成物は、たとえば所望の製剤につき適するよう各成分の混合、粒状化および圧縮もしくは溶解など慣用技術によって作成される。

本発明による炎症症状の処置方法は、この種の処置を必要とする患者に、抗炎症作用を与えるのに充分な量の少なくとも１種の式Ｉの化合物（上記参照）を投与することからなっている。式■の化合物は経口、鼻腔内、局部的、経皮、非経口的または肛門内に所望の抗炎症作用を得る必要に応じて投与することができる。

式Ｉの活性成分（上記参照）は一般に約１００ｍｇ〜１ｇ１特に好ましくは約２００〜約５００ｍｙから選択される１日の投与量にて投与される。有利には、１日当り１回〜１週間当り１回にて等しい投与量を投与するのが好ましい。特定の炎症薄状の処置を行なうべく投与すべき活性成分の投与頻度および量は当業者により容易に決定することができる。肺の炎症症状については、エアロゾル容器内にフレオン（登録商標）（フルオロハイドロカーボン）または他の不活性噴射剤と共に活性薬物を入れたエアロゾル供給装置が特に有益である。この種のエアロゾル装置は約１００ａ＋ｃｇ〜約６５０　ｍｃｇの計量投与量を供給し、これを必要に応じ１度に１回または２回の割合で投与する。

実施例　３テトラデカノイルホルボルアセテート（１）によって生ずる耳浮腫の阻止ＣＦ−１ネズミ（体重２５〜３０ｇ、１群当り６匹）を用いた。試験化合物（Ｘが酸素であり、ＲＳＲ４、ＡおよびＢが水素であり、Ｑが表１に示される式Ｉの化合物）を腹腔内（１００ｍｇ／　ｋｇ）または局部的に次のように投与した。

腹腔的投与については、試験化合物をジメチルスルホキシドまたは０．５％メチルセルロースに溶解させ、１００μｍを刺戟剤（１００１！１ｇ／ｋｇ、ｉ　、ｐ。

）の３０分間前に注射した。局部投与については、試験化合物をアセトン、エタノールもしくはジメチルスルホキシドのいずれかに溶解し、５μ＋　（１００μ ｇ）を耳の上表面（ＩＬＩ１２）に施すと共に、さらに５μｍ　（１００μｇ）を耳の下表面（１ｃｍ２）に刺戟剤の投与の１５分間前に施した。刺戟剤テトラデカノイルホルボルアセテート（２００μｇ／ｍｌ）の溶液を耳の表面に加え、すなわち５μｍを上表面にかつ５μｍを下表面に加えた。

３時間の後、耳の厚さを耳たぼの中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１ｍｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを与えた比較動物と対比して耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。結果を表１に示す。

表　１テトラデカノイルホルボルアセテートにより生ずる耳浮腫の阻止阻止％　阻止％Ｌ−イソロイシン　４８　−− Ｌ−バリン　４６　−− Ｌ−ホモフェニルアラニン　３　−− Ｌ−アスパラギン　９　−− Ｄ−フェニルアラニン　３５　−− Ｌ−フェニルアラニン　７８　−一り一ロイシン　５４　２１Ｌ−ロイシン　５４　４１Ｌ−イソロイシン　４ｏ　３９Ｌ−メチオニン　１９　−− ピロキシカム　４０　−一［フエルデン（登録商標）］（比較標準）デキサメタソン　５０　−− （比較標準、ｌ　Ｑ　ｍｇ／　ｋｇ）の表面に加え、すなわち２０μ］を上表面にかつ２０μｍを下表面に加えた。２時間の後、耳の厚さを耳朶の中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０、Ｏｌｍｒｌｌまで測定した。データは、刺戟剤のみを与えた比較動物と対比して、耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。結果を表３に示す。

表　３キシレンにより生ずる耳浮腫の阻止阻止％　阻止％アミノ酸　腹腔内　局部Ｌ−グリシン　１２　２２Ｌ−アラニン　３９　２７Ｌ−バリン　２７　１９Ｌ−ホモフェニルアラニン　５７　２７Ｄ−フェニルアラニン　４５　−− Ｌ−フェニルアラニン　４９　５０Ｄ−ロイシン　３５　０Ｌ−ロイシン　４７　６６Ｌ−イソロイシン　４０　３９ピロキシカム　７４　−一実施例　６ＣＦ−１ネズミ　（体重２５〜３０ｇ、１群当り６匹）を用いた。試験化合物（Ｘが酸素であり、Ｒ、Ｒ。

ＡおよびＢが水素であり、Ｑが表４に示される式Ｉの化合物）を腹腔内（１００ｍｇ／　ｋｇ）にて次のように投与し−た。試験化合物をＤＭＳＯもしくは０．５％メチルセルロースに溶解させ、１００μＩを刺、戟剤の３０分間前に注射した。刺戟剤カブサイシン（２５ｍｇ／ｍｌ）を耳に加え、すなわち５μｍを上表面にかつ５μｍを下表面に加えた。３０分間の後、耳の厚さを耳たぼの中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１μｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを与えた比較動物と対比して、耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。結果を表４に示す。

表　４カブサイシンにより生ずる耳浮腫の阻止Ｌ−イソロイシン　４４Ｄ−Ｐｒｏ　−Ｄ−Ｔｒｐ”　３４物質Ｐ（比較標準、１０μｇ／耳１個当り）ＣＦ−１ネズミ　（体重２５〜３０ｇ、１群当り６匹）を用いた。ネズミを試験の２週間前に刺戟剤に対し感受性となし、その際アセトンにおけるオキサシロンの３％溶液１００μｍを動物の腹皮膚に滴下した。試験化合物（Ｘが酸素であり、Ｒ、Ｒ、ＡおよびＢが水素であす、Ｑが表５に示される式■の化合物）を腹腔内に次のように投与した。試験化合物をＤＭＳＯもしくは０．５％メチルセルロースに溶解させ、ｌＯＯμ＋（１００ｍｇ／ｋｇ）を刺戟剤の３０分間前に注射した。刺戟剤（すなわちアセトン中の３％オキサシロン）を耳の表面に加え、すなわち５μｍを上表面にかつ５μｍを下表面に加えた。

２４時間の後、耳の厚さを耳たぼの中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１ｍｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを与えた比較動物と対比して耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。結果を表５に示す。

表　５オキサシロンにより生ずる耳浮腫の阻止（１０ｍｇ／　ｋｇ）　、比較標準体！［２００〜２５０ｇの雄ＣＤラットを用いた。試験化合物（Ｘが酸素であり、ＲＳＲ、ＡおよびＢが水素であり、Ｑが表６に示される式■の化合物）をジメチルスルホキシドに溶解し、２００μｍのこの溶液（１００ｍｇ／　ｋｇ）を腹腔内に抗原投与の１時間前に注射した。

動物をイソフルランの吸入により麻酔し、次いで陰茎静脈を介し１ｍｌの塩水における２、５ｍｇのエバンス・ブルー染料と５．Ｑｍｇのヒト血清アルブミンとの溶液１ｍｌを注射した。この処理の後、直ちに３．６５ｍｇの抗体を含有するよう希釈した０、０３ｍ１の抗ヒトアルブミンを背中の中心線に沿って３箇所に皮下注射した。麻酔を止め、３時間の後に動物を殺した。皮膚を除去し、青色に着色した領域を切除した。皮膚パッチを、１１のＩＮ水酸化カリウムを含有する栓付チューブ内に３７℃にて１晩浸漬した。次いで５部の０．６Ｎ燐酸と１３部のアセトンとの混液９ｍｌをチューブに添加した。チューブ内容物を撹拌すると共に遠心分離し、上澄液の吸光度を６２０ｎｍにて測定した。データは、光源と抗体とのみを与えた比較動物と対比して、試験化合物による青色発色の阻止として計算した。結果を表６に示す。

表　６弱受動アルチュス反応阻止％Ｌ−ホモフェニルアラニン　７６Ｄ−フェニルアラニン　４７Ｄ−ロイシン　４２Ｌ−ロイシン　４８Ｌ−イソロイシン　３１コルチゾン　６４（比較標準、１ｍｇ／ｋｇ）実施例　９Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチルーＬ −ロイシン（ＮＰＣ１５２７トルエン（１００ｍｌ）におけるＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（１，６７ｇ、５ミリモル）の懸濁物に、パラホルムアルデヒド（Ｉｇ、３３．３ミリモル）と４− トルエンスルホン酸（１００ｍｇ、触媒量）とを添加した。この混合物を、共沸蒸留用のディージ・スターク装置にて３０分間にわたり還流させた。溶液を重炭酸ナトリウムの飽和溶液（×２）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。クロロホルムニトリフルオロ酢酸の１：１混液（５０ｍｌ）における得られた油状物に、室温にてトリエチルシラン（２，３８ａ＋１．１５ミリモル）を添加した。撹拌を２２時間続けた。溶剤を減圧除去し、油状物をエーテル：ヘキサンの混液から結晶化させた。ＥｔＯＡｃ：ヘキサンからの再結晶化により０．８５ｇ　（４６％）の生成物を無色固体（ｍｐ、１０１〜１０３℃）として得た。

実施例　１ＯＮ−（［９Ｈ−（４−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）− Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１５３９−ヒドロキシフルオレン−４−メタノール２５０ｍ１のＴＨＦにおける９−フルオレノン−４−カルボン酸（１４，８ｇ、６６ミリモル）の０℃の溶液に、ＴＨＦにおける１Ｍボラン−ＴＨＦ複合体の溶液（１５０ｍｌ、１５０ミリモル）を添加した。温度を徐々に室温まで高めた。室温にて１．５時間の後、水で反応を停止させた。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、有機層を水（×３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いて蒸発させた。

エーテルと微量のＥｔＯＡｃとからの再結晶化により１２．４ｇ　（８８，５％）のジオールを得た。

４−メチルフルオレン１：１のＥ　ｔ　ＯＡｃ　：　ＡｃＯＨにおける９−ヒドロキシフルオレン−４ −メタノール（２，６ｇ、１２．２ミリモル）の溶液に触媒量の木炭上の１０％パラジウムを添加した。この混合物を、１６００ｐｓ　＋にて室温で３日間にわたり水素によって処理した。触媒を除去し、溶剤を減圧下に蒸発させた。Ｍ　ｅ　Ｏ’Ｈからの再結晶化によ一１凸り１．７ｇ　（７７，０％）の生成物を淡黄色固体として得た。

４−メチル−９−フルオレンカルボン酸−７８℃の１２０ｕｌのＴＨＦにおける４−メチルフルオレン（４，１５ｇ、２３．０ミリモル）の溶液に、ヘキサンにおける２、４５ＭのＢｕＬｉの溶液（９，９ｍｌ、２４．２ミリモル）を添加した。溶液の色は暗赤色に変化し、沈澱が見られた。−７８℃にて４５分間の後、反応混合物に二酸化炭素ガス（過剰量）を導入した。色は直ちに消失し、−７８ ℃にて３０分間の後、反応混合物を室温まで加温した。反応混合物をエーテルおよび酢酸エチルで希釈し、カルボン酸塩を水で２回抽出した。水相を合してエーテルで洗浄し、次いで希塩酸で酸性化させた。得られた固体を濾過し、酢酸エチルに再溶解させ、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。得られた固体３．１５ｇ　（６１，６％）をさらに精製することなく次の工程に用いた。

４−メチル−９−フルオレンメタノール０℃の９０ｍ１のＴＨＦにおける４−メチル−９−フルオレンカルボン酸（３，１ｇ、１３．８ミリモル）の溶液に、ボラン−ＴＨＦの溶液（ＴＨＦ中ＬＭ１２７．６ｍｌ、２７．６ミリモル）を添加した。温度を徐々に高め、反応混合物を室温にて１晩撹拌した。反応を水で停止させ、ＥｔＯＡｃで希釈し、水（×３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。粗製化合物２゜８ｇ　（９６，５％）は、次の工程にそのまま移すのに充分純粋であった。

４−メチルフルオレニル−９−メトキシカルボニル−し−ロイシン０℃のトルエン２０ｍ１における４−メチル−９−フルオレンメタノール（２，５ｇ１１１．９ミリモル）の溶液にホスゲンの溶液（トルエン中２０％、１２ｇ、２４ミリモル）を添加した。室温にて２４時間の後、さらに過剰のホスゲンを導入した。５０℃にてさらに２時間および密封チューブ内で９０℃にて２時間の後、反応を停止させた。反応物を蒸発乾固させ、粗製油状物を２０ｍ１のジオキサンに溶解し、次いで１０％炭酸ナトリウム水溶液におけるし一ロイシン（３，１２ｇ、２３．８ミリモル）の４０ｍ１懸濁物に添加した。さらにジオキサンを添加して、スラリーを均買溶液に変化させた。反応は室温にて１５分間以内に完結した。ジオキサンの１部を減圧蒸発させ、混合物を水で希釈した。水相をエーテル（×３）で洗浄し、次いで希塩酸で酸性化させた。得られた生成物をクロロホルム中の１０％Ｍ　ｅ　ＯＨによりシリカ上で精製した。逆相シリカ（ＲＰ− １８，１：１〜４：６のＭｅＯＨ：水）でさらに精製して、９−００ｍ９−０Ｏ，６％）の生成物を無色固体（ｍｐ、１２０〜１２２℃）として得た。

実施例　１１Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９〜イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンメチルエステル（ＮＰＣ１５３３０１のジオキサンにおけるＬ−ロイシンメチルエステル塩酸塩（３，０ｇ、１６．５ミリモル）と重炭酸ナトリウム（大過剰）との懸濁物に９−フルオレンメトキシカルボニル−０−スクシンイミド（２，５ｇ　、７．４３ミリモル）を室温にて添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）で監視した。２時間の後、３０１の塩化メチレンを導入し、反応物を室温にて４８時間撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水（×２）と３％ＨＣＩ水溶液と水（×３）とブラインとで洗浄した。この溶液を硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。得られた油状物をヘキサン：エーテルから結晶化させて１．９ｇ　（６２％）の無色固体を得た。

実施例　１２Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンエチルエステル（ＮＰＣ１５３実施例１１に記載したと同じ手順によりＬ−ロイシンエチルエステル塩酸塩を９−フルオレンメトキシカルボニル−Ｏ−スクシンイミドで処理して反応を行なった：Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンメチルエステル。収率は５４．４％であった；ｍｐ、８６〜８７℃。

実施例　１３Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンベンジルエステル（ＮＰＣ１５８０ｍｌの塩化メチレンにおけるし一ロイシンベンジルエステルトシレート（５，８ｇ、１４．８ミリモル）の溶液を飽和重炭酸ナトリウムの水溶液（大過剰）と−緒に室温にて１５分間撹拌した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで９−フルオレンメトキシカルボニル−０ −スクシンイミド（２゜５ｇ、７．４ミリモル）を室温にて添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）により監視した。２時間の後、反応が完結した（ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃでＴＬＣにより監視）。しかしながら、これをさらに室温で４８時間撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで水（×２）と３％ＨＣＩ水溶液と水（×３）とブラインとで洗浄した。溶液を硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。得られた油状物をヘキサン：エーテルから結晶化させて２．２ｇ　（４８，７％）の無色固体（ｍｐ、９１〜９２℃）を得た。

実施例　１４２−　（Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミン） −４−メチルペンタノール（ＮＰＣ１５４２７）０℃のＴＨＦ　（２２田１）におけるＦ−ＭＯＣ−Ｌ−ロイシン（８ｇ、２２．６ミリモル）の溶液にボラン−ＴＨＦ複合体（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液、４５．３ＩＩｌｌ、４５゜３ミリモル）を添加した。０℃にて３時間撹拌した後、反応混合物をＭ　ｅ　ＯＨにおけるＡｃＯＨの１０％溶液でクエンチした。溶剤を減圧除去し、残留油状物をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）に溶解させた。有機溶液をＩＮ　ＨＣｌと水（×２）と重炭酸ナトリウムの飽和溶液とで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。残　゛留部状物をヘキサン中で４８時間撹拌した。沈殿物を集め、ＥｔＯＡｃ：ヘキサンから再結晶化させて３．７ｇ（４８，２％）の２−　［Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）アミノコ−４− メチルペンタノールを無色固体（ｍｐ、１３１〜１３３℃）として得た。

実施例　１５Ｎ−［９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルコーし一ロイシンー１ −グリセリンエステル（ＮＰＣ塩化メチレン（５０ｍｌ）におけるＮ−［９Ｈ− フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ＝ロイシン（５ｇ、１４．１ミリモル）とツルケタール（３，７ｇ。

２８．３ミリモル）との溶液にジシクロへキシルカルボジイミド（３，６５ｇ、１７．７ミリモル）を添加した。

１０分間の後、反応が完結した（ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃによるシリカ上でのＴＬＣで監視）。固体を濾別し、次いで溶剤を減圧除去した。次いで粗生成物をアセトン中のＨＣＩ（７０ｍｌ）で４８時間処理した。溶剤を減圧除去し、粗生成物をＥｔＯＡｃに溶解させた。有機溶剤を水（×３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。得られた油状物を、ヘキサン中の５０％〜７０％ＥｔＯＡｃを用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。ペンタンで得られた油状物をトリチル化した際に結晶化が生じて無色固体２．８６ｇ（２３，６％）（ｍｐ、７８〜８３℃）を与えた。

実施例　１６Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）プロピオニル］−Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１５４７６）９−（２−エチル−１，３−ジオキソラン−２−イル）フルオレンＢｕＬ　ｉの溶液（ヘキサン中２．３５Ｍ、２５．６ミリ、６０．２ミリモル）を、２００ｍ１のＴＨＦにおけるフルオレン（Ｌｏｇ、６０．２ミリモル）の冷却（−７８℃）溶液に徐々に添加した。反応混合物は暗赤色に変化し、固体が沈澱し始めた。３０分間の後、２−（２−ブロモエチル）−１，３−ジオキソラン（１２ｇ、６６．３ミリモル）を冷溶液に添加し、溶液を室温まで加温した。

ＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の５％ＥｔＯＡｃ）を用いて反応を監視した。２時間の後、反応を水で停止させ、生成物をＥｔＯＡｃに抽出した。有機層を水（× ３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。

ショートパスクロマトグラフィーにより８．３４ｇ　（５２％）の生成物を無色油状物として得た。

３−（フルオレン−９−イル）プロピオン酸０℃の３５０１のアセトンにおける９−［２−（２−エチル−１，３−ジオキソラン）］−フルオレン（８゜３ｇ、　ミリモル）の溶液に３５０１のジジーンズ試薬（この試薬は１６ｇの二酸化クロムと６４ｍ１の濃硫酸とを４００１の水に溶解して作成）を徐々に添加した。

酸化剤の添加に際し極めて強力な反応が観察された。全試薬を添加した後、温度を室温まで上昇させた。この反応混合物をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）により監視した。反応は５時間以内に完結した。

生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を充分に、水洗液が透明かつ無色となるまで水（×６）で洗浄した。ＭｅＯＨ＝水からの再結晶化により６．５ｇ　（８７，５％）を得た。

Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−り］一ロイシンｔ −ブチルエステル室の塩化メチレンにおける３−（フルオレン−９−イル）プロピオン酸（３，０ｇ、１２．６ミリモル）とロイシンｔ−ブチルエステル（２，５９ｇ、１３．８ミリモル）との溶液（６０ｍｌ）に１−（３−ジメチルアモミノプロピル）− ３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２゜６５ｇ、１３．８５リモル）を添加した。室温にて２時間の後、ＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡＣ）は反応の完結を示した。塩化メチレンを減圧除去し、次いでＥｔＯＡｃを導入した。

有機溶剤を水（×２）と炭酸カリウムの１０％水溶液と水とで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。得られた油状物を短いシリカカラムでヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃにより濾過した。蒸発後の収量は４．２５ｇ　（８２，８％）であった。

Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−］Ｌ−ロイシン：１のトリフルオロ酢酸：塩化メチレンにおけるＮ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−り］一ロイシンｔ−ブチルエステル４．２ｇ、１０゜３ミリモル）の溶液を室温にて１晩撹拌した。溶剤を減圧除去し、得られた油状物をＥｔＯＡｃ：ヘキサンから再結晶化させて１．５ｇ　（４１，２％）の生成物（ｍｐ。

１４３〜１４５℃）を得た。

実施例　１７Ｎ−（［９Ｈ−（２−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）− Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１５４２−メチルフルオレン酢酸エチル中の酢酸の１０％溶液２５０ｍ１における２−フルオレンカルボキシアルデヒド（１５ｇ、７７．１ミリモル）の溶液を、８０ｐｓｉの水素にて炭素上の２０％水酸化パラジウム（触媒量）により室温で２４時間にわたり水素化した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％酢酸エチル）により監視した。

触媒を濾去し、溶剤を蒸発させ、次いでエタノール：水（５：　１）から残留固体を再結晶化して９．６ｇ　（６９，０％）の生成物を無色固体として得た。

２−メチル−９−フルオレンカルボン酸−７８℃の１００ｍ１のＴＨＦにおける２−メチルフルオレン（６ｇ、３３．２ミリモル）の溶液にブチルリチウム（２，１８ｇ、３４．０ミリモル）を添加した。この反応混合物を１５分間撹拌し、次いでＣＯ２ガス（５ｇ、１１３．６ミリモル）をカニユーレにより一７８℃にて１５分間かけて導入した。この反応混合物を室温まで加温し、さらに２時間にわたり無色となるまで撹拌した。反応混合物を２５０ｍ１の水と１００ｍ１の酢酸エチルとで希釈し、層を分離させ、水相を酢酸エチル（３×５０１１）で洗浄し、次いで濃塩酸によりｐＨ２まで酸性化した。沈殿物を濾別し、水洗し、次いで乾燥して６．１ｇ　（８１，９％）の２−メチル−９−フルオレンカルボン酸を得た。

２−メチル−９−フルオレンメタノール０℃の３００ｍ１のＴＨＦにおける２− メチル−９−フルオレンカルボン酸（６ｇ、２６．８ミリモル）の溶液にＢＨ３ −ＴＨＦ複合体（５３，５＋ｎｌ、５３．５ミリモル）のＬＭ　ＴＨＦ溶液を添加した。反応混合物を１晩撹拌し、次いでメタノール中の１０％酢酸３０ｍ１でクエンチし、３００ｍ１の水で希釈した。層を分離させ、水相を酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出し、抽出物を合して硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させて無色油状物を得た。この油状物を２００ｍ１のへキサンで処理して結晶化を行なった。エタノール：水（４：　１）からの再結晶化により４．５５ｇ　（８０，６％）の２−メチル−９−フルオレンメタノールを得た。

Ｎ−（２−メチルフルオレニル−９−メトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシン１５ｍ１の塩化メチレンにおける２−メチル−９−フルオレンメタノール（２ｇ１９．５ミリモル）の溶液に、塩化メチレンにおける４、２Ｍホスゲン溶雇（１，８ｇ、１８．４ミリモル）を室温にて添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％酢酸エチル）により監視した。反応混合物を室温にて６日間にわたり撹拌した。

過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングによって除去した。溶剤を蒸発させて淡黄色の油状物を得た。１０ｍ１のジオキサンにおける油状物の溶液に室温にて、４２ｍ１の１０％炭酸カリウム水溶液と２１ｍ１のジオキサンとの混液におけるし一ロイシン（１，６２ｇ、１２．３ミリモル）の溶液を添加した。反応混合物を３時間撹拌し、次いで水（２０ｍｌ）により希釈した。水層を酢酸エチル（５Ｘ１０ｍｌ）で抽出し、次いでＨＣＩによりｐＨ２まで酸性化した。得られた油状物を酢酸エチル（４Ｘ３０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合し、ＩＮＨＣＩ（２Ｘ　３０　ｍｌ）で洗浄し、次いで水とブラインとで洗浄し、さらに溶剤を蒸発させた。粗生成物をＲＰ−１８シリカおよび溶出剤としてのメタノール：水の７：３混液を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。これにより１．３ｇ　（７４，７％）の所望の化合物を無色固体（ｍｐ、１２５〜１２７℃）として得た。

実施例　１８Ｎ−［（２−メトキシフルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１５４８９）２−メトキシ−９−フルオレノン５００ｍ１の塩化メチレンにおける２−ヒドロキシフルオレノン（５ｇ、２５．５ミリモル）の溶液１こ、ｌＮＮａＯＨ（４ｇ　、１００ミリモル）の溶液１００ｍ１と水２００ｍ１におけるｐ−メチルトシレート（９，５ｇ、５１ミリモル）の溶液と硫酸水素テトラブチルアンモニウム（０，２ｇ、触媒量）とを室温にて添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％酢酸エチル）により監視した。この反応混合物を室温にて１晩撹拌し、層を分離させた。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、次０．で蒸発させた。残留固体のショードックスクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中の５％酢酸エチル）１こより３．８ｇ　（７１，０％）のメチル化生成物を得た。

２−メトキシ−９−フルオレツール３ＱｍｌのＴＨＦにおける２−メトキシ−９−フルオレノン（６ｇ、２８．５ミリモル）の溶液にＢＨ３−ＴＨＥ複合体のＩＭ　ＴＨＦ溶液（６０ロ！１６０ミリモル）を０℃にて添加した。この反応混合物を室温にて６時間撹拌し、次いで水（１００ｍｌ）でクエンチした。得られた沈殿物を濾別し、水洗し、次いで乾燥させて５．６ｇ（９３，３％）の純粋な２−メトキシ−９−フルオレツールを得た。

２−メトキシフルオレン２−メトキシ−９−フルオレツール（５，５ｇ、２５゜９ミリモル）に無水酢酸（５０ｍｌ）を添加した。この反応混合物を５０〜６０℃まで３時間かけて加熱し、次いでメタノール（１００ｍｌ）で希釈し、次いで炭素上の２０％水酸化パラジウム（触媒量）により６０〜７０ｐｓｉの水素で１０時間にわたり水素化した。触媒を濾去し、溶剤を減圧除去した。メタノール：水からの再結晶化により２．６ｇの生成物を得た。濾液を少量の水で希釈することにより追加部分が得られた（０．２ｇ）。生成物の全量は２．８ｇ　（５５，２％）であった。

２−メトキシ−９−フルオレンカルボン酸−７８℃の５０ｍ１のＴＨＦにおける２−メトキシフルエレン（２，７ｇ、１３．８ミリモル）の溶液にｎ−ブつ− チルリチウム（０，９３ｇ、１４．５ミリモル）を添加した。この反応混合物を１５分間撹拌し、次いでＣ○２ガス（５ｇ、１１３．６ミリモル）をカニユーレにより＝７８℃にて１５分間導入した。この反応混合物を室温まで加温し、無色溶液が得られるまでさらに２時間撹拌した。反応混合物を１００ｍ１の水と１００ｍ１の酢酸エチルとで希釈した。層を分離させ、水相を酢酸エチル（５Ｘ　２５　ｍｌ）で洗浄し、さらに濃塩酸によりｐＨ１まで酸性化した。沈殿物を濾別し、水洗し、次いで乾燥させて２．２ｇ　（６６，７％）の２−メトキシ−９− フルオレンカルボン酸を無色固体として得た。

２−メトキシ−フルオレンメタノール０℃の１００の１のＴＨＦにおける２−メトキシ−９−フルオレンカルボン酸（２，２ｇ１９．２ミリモル）の溶液にＢＨ−ＴＨＦ複合体のＩＭ　ＴＨＦｍ液（２０ｍｌ、２０ミリモル）を添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、次いでメタノール中の１０％酢酸１０ｏ１でクエンチし、１００ｍ１の水で希釈した。層を分離させ、水相を酢酸エチル（３Ｘ２５ｍｌ）で抽出した。抽出物を合して硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。残留物をメタノール：水から結晶化させて１．８７ｇ　（８７，０％）の生成物を得た。

Ｎ−（［９Ｈ−（４−メチルフルオレン−９−イル）メトキシコカルボニル）− Ｌ−ロイシン２０ｍ１の無水塩化メチレンおよび１０ｍ１の無水ＴＨＦにおける２−メトキシ −９−フルオレンメタノール（１゜２ｇ、５．３ミリモル）の溶液に塩化メチレン中の４゜２Ｍホスゲン溶液（２，３８ｍ１．１０ミリモル）を室温にて添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％酢酸エチル）により監視した。

反応混合物を室温にて３時間撹拌した。過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングにより除去した。溶剤を蒸発させて淡黄色の油状物を得た。５ＩＩｌｌのジオキサンにおける油状物の溶液に１４ｍ１の炭酸カリウムの１０％水溶液および７１のジオキサンにおけるし一ロイシン（０，５３，４ミリモル）の溶液を室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、水（１００ｍｌ）で希釈した。水層を酢酸エチル（５×３０ｍ１）で抽出し、次いでＨＣＩによりｐＨ２まで酸性化させた。得られた油状物を酢酸エチル（３Ｘ３０ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を合してＩＮ　ＨＣＩ　（２Ｘ３０ｍｌ）で洗浄し、次いで水とブラインとで洗浄し、さらに溶剤を蒸発させた。粗生成物をエーテル：ヘキサン混液からの再結晶化により精製して、０．４ｇ　（１８，９％）の所望の生成物（ｍｐ、１２９〜１３１℃）を得た。

実施例　１９Ｎ−［９Ｈ−（２，３−ベンゾフルオレン−９−イル１０ｍ１の塩化メチレンにおける３、２０ｇ　（１７，１ミリモル）のＬ−ロイシンｔ−ブチルエステルの撹拌溶液に１．８３ｇ　（１７，２ミリモル）のＮａ　ＣＯ２を添加した。この混合物を１０分間撹拌し、５．００ｇ（１６，２ミリモル）の粗９−（２，３− ベンゾフルオレニル）メチルクロルホルメートを添加した。緩和な発熱反応が生じ、撹拌を１晩続けた。混合物を水中に注ぎ込み、水層を塩化メチレンで抽出した。有機層を合してブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶剤を減圧除去し、粗生成物を２５０ｇのフラッシュシリカゲルでクロマトグラフにかけ、ヘキサン中の１５％ＥｔＯＡｃで溶出させて４．７６ｇ　（６４％）のｔ−ブチルエステルを黄色固体（ｍ＋）、５１〜５５℃）として得た。

Ｎ−［９Ｈ−（２，３−ベンゾフルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］− Ｌ−ロイシン１０ｍ１の塩化メチレンにおける４、７６ｇ　（１０，３ミリモル）のＮ−［’ ）Ｈ−（２，３−ベンゾフルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン１−ブチルエステルの撹拌溶液に１０ｍ１のトリフルオロ酢酸を添加した。この混合物を１晩撹拌し、溶剤を減圧除去した。粗生成物を１７５ｇのフラッシュシリカゲルでクロマトグラフにかけ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ。

次いでヘキサン中の４０％ＥｔＯＡｃで溶出させて暗黄色固体を得た。ＥｔＯＡｃ：ヘキサンからの再結晶化により２．３５ｇ　（５６％）の分析上純粋な試料を淡黄色固体（ｍｐ、１６８〜１７７℃）として得た。

実施例　２ＯＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルエトキシ）カルボニル］　−り一ロイシン（ＮＰＣ１５５２１）２−（９−フルオレニル）エタノール７５ｍ１のＴＨＦにおける６、ＯＯｇ　（３６，１ミリモル）のフルオレンの撹拌された冷却（−７８℃）溶液に、ヘキサン中の１５．４ｍ１（３６，２ミリモル）の２．３５Ｍｎ−ＢｕＬｉを滴下した。得られた暗橙色混合物を１．５時間にわたり撹拌し、Ｅｔ２０における２６゜Ｑｍｌ（３６，４ミリモル）の１．４Ｍ酸化エチレンを添加した。得られた淡橙色混合物を徐々に室温まで３．５時間かけて加温し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液でクエンチし、次いで減圧濃縮した。残留物を水中に注ぎ込み、Ｅｔ２０で２回抽出した。有機層を合してブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶剤を減圧除去し、粗生成物を１５０ｇのフラッシュシリカゲルでクロマトグラフにかけ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃで溶出させて５．０５ｇ　（６７％）の所望のアルコールを白色固体（ｍｐ、９８〜９９℃）として得た。

２−（９−フルオレニル）エチルクロルホルメート１０ｍ１の塩化メチレンにおける４、５０ｇ　（２１，４ミリモル）の２−（９−フルオレニル）エタノールの撹拌された冷却（０°Ｃ）懸濁物に、塩化メチレンにおける１０．０ｍ１（４２，０ミリモル）の４．２Ｍホスゲンを添加した。得られた均質の黄色混合物を室温まで加温し、７２時間撹拌した。溶剤を減圧除去し、得られた暗緑色の粘性油状物を減圧乾燥して５．７４ｇ　（９８％）の粗製クロルホルメートを得、これをさらに精製することなく使用した。

Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンｔ −ブチルエステル１５ｍ１の塩化メチレンにおける３、４８ｇ　（１８，６ミリモル）のＬ−ロイシンｔ−ブチルエステルの撹拌溶液に２．ＯＯｇ　（１８，９ミリモル）のＮａ２ＣＯ３を添加した。この懸濁物を１５分間撹拌し、５．ＯＯｇ（１８，３ミリモル）の粗製２−（９−フルオレニル）エチルクロルホルメートを添加した。緩和な発熱反応が生じ、撹拌を１晩続けた。この混合物を水中に注ぎ込み、水層を塩化メチレンで抽出した。有機層を合してブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶剤を減圧除去し、粗生成物を４００ｇのフラツシュシリカゲルでクロマトグラフにかけ、ヘキサン中の１０％ＥｔＯＡｃで溶出させて６．６５ｇ　（８６％）のｔ−ブチルエステルを粘性の淡黄色油状物として得た。

Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシン１０ｍ１の塩化メチレンにおける６、６３ｇ　（１５，６ミリモル）のＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルエトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンｔ−ブチルエステルの撹拌溶液に１０ｍ１のトリフルオロ酢酸を添加した。この混合物を２．５時間撹拌し、溶剤を減圧除去した。粗生成物を１５０ｇのフラッシュシリカゲルでクロマトグラフにかけ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ、次いでヘキサン中の５０％ＥｔＯＡｃで溶出させて５．３２ｇ（９２％）の生成物を白色固体（ｍｐ、４２〜４３℃）Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンｔ−ブチルエステル（ＮＰＣ１塩化メチレン（５０ｍｌ）における９−フルオレンメトキシカルボニル−０−スクシンイミド（９ｇ、２６．７ミリモル）の溶液にロイシン−ｔ−ブチルエステル（５ｇ、２６．７ミリモル）を添加した。室温にて２４時間の後、反応混合物を水（×６）で充５）洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。ヘキサンからの再結晶化（極めて少量のＥｔＯＡｃを添加して溶解度を増大させた）により６．５ｇ　（５９，５％）の生成物を無色固体（ｍｐ、１８３〜１８４℃）として得た。

実施例　２２Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルコーム−ロイシンアミド（ＮＰＣ１５５２８）１０ｍｌのＴＨＦにおけるＮ−［（９Ｈ−フルオレン −９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンの酸塩化物（３，５ｇ、１０ミリモル）の溶液にＮＨ３（２９゜６％水溶液、１．２６ｍ１．２０ミリモル）を室温にて添加した。反応混合物を３０分間撹拌し、次いで１００ｍ１の水で希釈し、酢酸エチル（５Ｘ２０ｍｌ）で抽出した。

有機層を合して１０％炭酸カリウム溶液で抽出し、水とブラインとで洗浄し、脱水し、次いで蒸発させた。エタノールからの生成物の再結晶化により１．２６ｇ　（３６％）のＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−り一ロイシンアミドを無色固体（ｍｐ、７９〜８０℃）Ｎ−ＥＣ９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンメチルアミド（ＮＰＣ１５５２５０ｍ１のＴＨＦにおけるＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］− Ｌ−ロイシン酸塩化物（３，５ｇ、１０ミリモル）の溶液に、５０ｍ１のジクロルメタンにおけるメチルアミン（０，６２ｇ、２０ミリモル）の溶液を室温にて添加した。この反応混合物を３０分間撹拌し、溶剤を除去し、次いで残留物を１００ｍ１の酢酸エチルに溶解させた。この溶液を１０％炭酸カリウム水溶液と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。酢酸エチル／ヘキサン混液からの生成物の再結晶化により１．６７ｇ　（４６゜６％）のＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンメチルアミド（ｍｐ、１７３〜１７４℃）を得た。

実施例　２４Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−を一ロイシン（ＮＰＣ１５５７３）１００ｍｌのジクロルメタンにおけるＬ−ｔ−Ｌｅｕ（２ｇ、１５．３ミリモル）の溶液に室温にてＦ−ＭＯＣ−Ｏ−スクシンイミド（５，４ｇ、１６ミリモル）と少量のＤＭＡＰとを添加した。反応混合物を４８時間撹拌し、１０％炭酸カリウム水溶液（５０ｍｌ）を添加し、さらに混合物を５時間にわたり撹拌した。層を分離させ、水層を１０％炭酸カリウム溶液（５０ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（３Ｘ３０ｍｌ）で抽出し、次いでｐＨ１まで酸び４５ｍ１の１０％炭酸カリウム水溶液におけるし一ロイシン（１，９７ｇ、１５ミリモル）の溶液に室温にて添加した。反応混合物を２日間撹拌し、１５０ｍ１の水で希釈し、酢酸エチル（５Ｘ２５ｍｌ）で抽出した。水層をｐＨ１まで酸性化し、沈澱した油状物を酢酸エチル（３×５０ｍ１）で抽出し１、有機溶液をＩＮ　ＨＣｊ　（３ｘ２０ｍｌ）と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させて油状物を得、これをエーテル／ｌ−キサン混液中での攪拌により固化させた。化合物をメタノール：りロルホルム（９５：　５）の溶液を溶出剤として用いるシリカ上でのカラムクロマトグラフィーによって精製した。メタノール　水（７：　３）を用いるＲＰ−１８シリカでの第２のクロマトグラフィーにより１゜３ｇ　（２４，７％）の所望の化合物（ｍｐ、１２５〜１２８℃）を得た。

実施例　２６Ｎ−（［９Ｈ−（２，７−シメチルフルオレンー９−イル）メトキシ］カルボニル）　−Ｌ−ロイシン（ＮＰＣｌ　５６６９）４．４′−ジメチルジフェン酸メチルアンスラニル酸のジアゾ化＝２−アミノー５−メチル安息香酸（５０，０ｇ、３３０．８ミリモル）と水（１３６ｍｌ）と濃塩酸（９７，４ｍ１）との混合物に、１３６ｍ１の水における亜硝酸ナトリウム（２３，８ｇ。

３４０．０ミリモル）の溶液を０〜５℃で３０分間かけて添加した。得られたジアゾニウム溶液を濾過し、５℃未満の温度に保った後、さらに使用した。

４５４ｍ１の水における水和硫酸第二銅（１１４，０ｇ。

４５７．６ミリモル）の溶液を濃水酸化アンモニウム溶液（比重０．９０．１９０．４ｍ１）で処理した。水（１０８ｍｌ）における塩化ヒドロキシルアンモニウム（３２゜２ｇ１４６４．０ミリモル）の溶液に６Ｎ水酸化ナトリウム（７７ｍｌ）を５〜１０℃にて添加した。

得られたヒドロキシルアミン溶液を直ちに硫酸第二銅溶液に添加した。

５〜１０℃の得られた溶液に同温度にてジアゾニウム溶液を４０〜５０分間かけて（添加速度は毎分的１０１である）激しく撹拌しながら添加した。撹拌を５分間続け、次いで７０℃まで加熱し、さらに濃塩酸で酸性化した。この混合物を１晩静置させ、沈殿物を濾別し、水洗し、次いで４００ｍ１の１０％重炭酸ナトリウム溶液に溶解させた。この溶液をノリットで処理し、次いで濾過し、さらに６ＮＨＣ１で酸性化させた。沈澱した生成物の重量は４０．４ｇ　（９０，４％）であった。

２．７−シメチルフルオレノン４．４−ジメチルジフェン酸（２０，０ｇ、７４．０ミリモル）を砂浴にて３００〜３３０℃で２時間にわたり脱カルボキシル化が完了するまで（ガスが発生しなくなるまで）加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、得られたケーキをアセトンに溶解させた。アセトンの蒸発により黒色物質を得、これをヘキサン中の２５％酢酸エチル溶液で抽出した。溶剤の蒸発により粗製ケトンを得、これをさらにショートパスクロマトグラフィー（シリカ、ａ、ヘキサン、ｂ、ヘキサン中の５％酢酸エチル）でさらに精製した。これにより１０．１ｇ　（６５，４％）の２，７−シメチルフルオレノンを得た。

２．７−ジメチルフルオレン２．７−シメチルフルオレノン（７，０ｇ、３２．８ミリモル）とメタノール（１００ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍ１）と酢酸（２０ｍｌ）と水酸化パラジウム（炭素上２０％、水分含有量４４．４３％、０．５ｇ）との混合物を振とう器内で２６ｐｓ　ｉの水素にて４時間にわたり水素化した。反応をＴＬＣ（シリカ、１０％酢酸エチル／ヘキサン）で監視した。触媒を濾去し、溶剤を減圧除去した。メタノールでの残留物の処理により５．　７ｇ　（８９，３％の２．７−ジメチルフルオレンを得た。

２．７−シメチルー９−フルオレンカルボン酸−７８℃のＴＨＦ（１００ｍｌ）における２、７−ジメチルフルオレン（５，０ｇ、２５．７ミリモル）の溶液にブチルリチウム（１６，８ｍｌ、２６．０ミリモル）を添加した。この混合物を１５分間撹拌し、次いでＣＯ２ガス（５ｇ、１１３．６ミリモル）をカニユーレにより１５分間かけて一７８℃で導入した。この反応混合物を室温まで加温し、１晩にわたり撹拌し、水（１５０ｍｌ）で希釈した。層を分離させ、水層を酢酸エチル（５×２０１）で洗浄し、次いで濃塩酸で酸性化させた。生成した沈殿物を集め、水洗し、次いで乾燥して４．４ｇの２゜７−シメチルー９−フルオレンカルボン酸（７２，４％）を得た。

２．７−シメチルー９−フルオレンメタノールＴＨＦ　（１００ｍｌ）における２、７−シメチルー９−フルオレンカルボン酸（４，３ｇ、１８．０ミリモル）の溶液にＢＨ３−ＴＨＦ複合体のＩＭ　ＴＨＦ溶液（３６，０ｍｌ、３６．０ミリモル）を０℃にて添加した。反応混合物を室温にて１晩撹拌し、次いで水（１ ’００ｍ１）およびＨＣＩ（３ｍｌ）でクエンチした。酢酸エチル（５０ｍｌ）を添加した後、有機層を分離し、１０％炭酸カリウム溶液と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、さらに蒸発させて２．７−シメチルー９−フルオレンメタノール（３，０ｇ、７４．４％）を得た。

Ｎ−（［９Ｈ−（２，７−シメチルフルオレンー９−イル）メトキシコ力ルボニル）−Ｌ−ロイシン無水ＴＨＦと塩化メチレンとの混液（１：１．５０ｍ１）における２、７−シメチルー９−フルオレンメタノール（３，０ｇ、１３．４ミリモル）の溶液にホスゲンの４゜２Ｍ塩化メチレン溶液（４，８ｍｌ、２０．１ミリモル）を室温にて添加した。この反応混合物を室温にて１晩撹拌し、次いで追加ホスゲン（２，４ｍｌ、１０．　１　ミリモル）を添加し、反応混合物をさらに４時間撹拌した。過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングによって除去した。

溶剤を減圧除去し、残留物（淡桃色結晶）を１０ｍ１のジオキサンに溶解させ、次いで溶液を２５．０ｍｌのジオキサンと１０％炭酸カリウム溶液（４９，０ｍ１）とにおけるし−ロイシン（１，７１ｇ、１３．０ミリモル）の溶液に室温にて添加した。反応混合物を１晩撹拌し、ジオキサンを減圧除去し、次いで残留物を１５０＋ｎｌの水で希釈した。水層を酢酸エチル（５Ｘ２５ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を合して１０％炭酸カリウム溶液、次いで水により２回洗浄した。これら水層を最初の塩基水溶液と合し、得られた溶液を濃塩酸によりｐＨ１まで酸性化した。

生成した固体を濾別して乾燥させた。化合物をカラムクロマトグラフィー（シリカＲＰ−１８、メタノール：水、７・３）で精製した。これにより２．７４ｇ　（５７，３％）の所望の化合物（ｍｐ、１６３〜１６６℃）を得た。

実施例　２７Ｎ−（［９Ｈ−（２，７−シメチルフルオレンー９−イル）メトキシ］カルボニル）−Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ６．６−ジメチルジフェン酸メチルアンスラニル酸のジアゾ化：２−アミノ−３−メチル安息香酸（５０，０ｇ、３３０．８ミリモル）と水（１３６ｍｌ）と濃塩酸（９７，４ｍ１）との混合物に１３６ｍ１の水における亜硝酸ナトリウム（２３，８ｇ１３４０．０ミリモル）の溶液を０〜５℃にて３０分間かけて添加した。得られたジアゾニウム溶液を濾過し、５℃未満の温度に保った後、さらに使用した。

４５４ｍ１の水における水和硫酸第二銅（１１４，０ｇ　。

４５７．６ミリモル）の溶液を濃水酸化アンモニウム溶液（比重０．９０．１９０．４Ｉｌｌ）で処理した。水（１０８ｍｌ）における塩化ヒドロキシルアンモニウム（３２゜２ｇ、４６４−　０ミリモル）の溶液に６Ｎ水酸化ナトリウム（７７ｍｌ）を５〜１０℃にて添加した。得られたヒドロキシルアミン溶液を直ちに硫酸第二銅溶液に添加した。

得られた溶液を５〜１０℃まで冷却し、次いで同温度にてジアゾニウム溶液を４０〜５０分間かけて（添加速度は毎分的１０ｍ１である）激しく撹拌しながら添加した。

撹拌を５分間続け、次いで７０℃まで加熱し、濃塩酸で酸性化させた。この混合物を１晩静置した。沈殿物を濾別し、水洗し、次いで４００ｍ１の１０％重炭酸ナトリウム溶液に溶解させた。この溶液をノリットで処理し、次いでせ濾過すると共に６Ｎ　ＨＣＩで酸性化させた。沈澱した生成物の重量は３８．４ｇ　（８５，９％）であった。

４．５−ジメチルフルオレノン４．４−ジメチルジフェン酸（２０，０ｇ、７４．０ミリモル）にポリ燐酸（８３，４ｇ）を室温にて添加した。この混合物を油浴内で１２０〜１２１℃にて６．５時間にわたり、脱カルボキシル化が完了するまで（ガスの発生が止るまで）加熱した。反応混合物を６０℃まで冷却し、水（１，５０ｍ１）で希釈し、次いで室温まで冷却した。沈殿物を濾別し、水と１０％重炭酸ナトリウム溶液とで濾液が無色となるまで洗浄し、ヘキサン中の２５％酢酸エチル溶液で抽出し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶剤の蒸発により粗製ケトンを得、これをショートパスクロマトグラフィー（ヘキサン中の５％酢酸エチル）で精製した。これにより１０．８ｇ　（７０，４％）の４゜５−ジメチルフルオレノンを得た。

４．５−ジメチルフルオレン４．５−ジメチルフルオレノン（７，０ｇ、３２．８ミリモル）とメタノール（１００ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍｌ）と酢酸（２０ｍｌ）と水酸化パラジウム（炭素上２０％、水分含有量４４．４３％、１．０ｇ）との混合物を振とう器内で３５〜４０ｐｓｉの水素にて３．５時間にわたり水素化した。反応をＴＬＣ（シリカ、１０％酢酸エチル／ヘキサン）で監視した。触媒を濾去し、溶剤を減圧除去し、残留物を水（１５０ｍｌ）で希釈した。生成物を酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出し、硫酸マグネシウムで脱水した。溶剤の蒸発により５．８ｇ　（９１゜２％）の４．５−ジメチルフルオレンを得た。

４．５−ジメチル−９−フルオレンカルボン酸−７８℃の１００ｍ１のＴＨＦにおける４、５−ジメチルフルオレン（５，２ｇ、２７．０ミリモル）の溶液にブチルリチウム（１８，７ｍｌ、２９．０ミリモル）を添加した。この反応混合物を１５分間撹拌し、次いでＣ０２ガス（５ｇ、１１３．６ミリモル）をカニユーレにより１５分間かけて一７８℃にて導入した。反応混合物を室温まで加温し、次いで１晩撹拌した。水（１５０ｍｌ）を添加し、層を分離させ、水層を酢酸エチル（５Ｘ２０１）で洗浄し、次いで濃塩酸で酸性化させた。沈殿物を集め、水洗し、次いで乾燥して２，７−シメチルー９−フルオレンカルボン酸（４，２４ｇ、６５．９％）を得た。

４，５−ジメチル−９−フルオレンメタノール１００ＩＩｌｌのＴＨＦにおける４、５−ジメチル−９−フルオレンカルボン酸（４，２ｇ、１７．８ミリモル）の溶液にＢＨ３−ＴＨＦ複合体のＬＭ　ＴＨＦ溶液（２５゜Ｑｍｌ、２５．　０　ミリモル）を０℃にて添加した。この反応混合物を室温にて１晩撹拌し、次いで水（１００ｍｌ）およびＨＣＩ（３ｍｌ）でクエンチした。酢酸エチル（５０ｍ１）を添加した後、有機層を分離させ、１０％炭酸カリウム溶液と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させて４，５−ジメチル −９−フルオレンメタノール（３，０ｇ、７５．３％）を得た。

Ｎ−（［９Ｈ−（２，７−シメチルフルオレンー９−イル）メトキシ］カルボニル）−Ｌ＝ロイシン無水ＴＨＦと塩化メチレンとの混液（１：１．５０ｍ１）における２、７−シメチルー９−フルオレンメタノール（３，０ｇ、１３．４ミリモル）の溶液に、塩化メチレンにおけるホスゲンの４．２Ｍ溶液（４，８ｍｌ、２０゜１ミリモル）を室温にて添加した。反応混合物を室温にて４時間撹拌し、過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングによって除去した。溶剤を減圧除去し、残留物を１０１のジオキサンに溶解し、この溶液を２５．Ｑｍｌのジオキサンと４９．ｆ）ｍｌの１０％炭酸カリウム溶液とにおけるし一ロイシン（１，７１ｇ、１３．０ミリモル）の溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、ジオキサンを減圧除去し、さらに残留物を１５０ｍ１の水で希釈した。水層を酢酸エチル（５ｘ２５ｍｌ）で抽出し、有機抽出物を合して１０％炭酸カリウム水溶液および次いで水により２回洗浄した。これら水層を最初の塩基水溶液と合し、得られた溶液を濃塩酸によりｐＨ１まで酸性化した。沈殿物を濾過し、次いで乾燥させた。化合物をカラムクロマトグラフィー（シリカＲＰ−１８、メタノール：水、７：３）により精製した。これにより１゜９４ｇ　（３８，１％）の所望の化合物を白色固体（ｍｐ。

１３５〜１３９℃）として得た。

実施例　２８Ｎ−（９Ｈ−［３−（２−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニルコ）−Ｌ −ロイシン（ＮＰＣ１５６７１）３−（２−メチルフルオレン−９−イル）−１，３−ジオキソランＢｕＬ　ｉの溶液（ヘキサン中２．３５Ｍ、２０．５ｍｌ、４７．９ミリモル）を、２００ｍ１のＴＨＦにおける２−メチルフルオレン（８，２ｇ、４５．５ミリモル）の冷却（−７８℃）溶液に徐々に添加した。反応混合物は暗イル）メトキシメチルボニル）−Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１−フルオレンメタノール０℃のＴＨＦ　（１５０＋ｎｌ）におけるｌ−フルオレンカルボン酸（１０，０ｇ、４７．６ミリモル）の溶液にＴＨＦにおけるＢＨ３−ＴＨＦ複合体の１Ｍ溶液（８０１，８０ミリモル）を添加した。反応混合物を室温にて１晩貯蔵し、次いで３０の１のメタノールにおける１０％ＡｃＯＨでクエンチした。水（１０ｆ）ｍｌ）で希釈した後、水層を酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合して１０％炭酸カリウム水溶液と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。

残留物（白色結晶）をエーテルで洗浄し、次いで乾燥して１−フルオレンメタノール（６，４ｇ、６８．５％）を得た。

１−メトキシメチルフルオレン５０ｍ１のＴＨＦにおける１−フルオレンメタノール（５，０ｇ、２５．６ミリモル）の溶液にブチルリチウム溶液（１１，０ｍｌ、２６．０ミリモル）を−７８℃にて添加した。１５分間にわたり撹拌した後、イオドメタン（２５，１ｇ、１７６．１ミリモル）を導入した。反応混合物を室温にて３日間にわたり撹拌し、反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％酢酸エチル）により監視した。もはや出発物質が検出されなくなったら、直ちに反応を水（３０ｍｌ）で停止させた。有機層を分離し、水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネラムで脱水し、次いで蒸発させた。残留油状物のショートパスクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中の５％酢酸エチル）により４．５ｇ　（７０，０％）の１−メトキシメチルフルオレンを得た。

１−メトキシメチル−９−フルオレンカルボン酸−７８℃のＴＨＦｌｏｏｍｌにおける１−メトキシメチルフルオレン（４，５ｇ、２１．４ミリモル）の溶液にブチルリチウム（１０，０ｍｌ、２３．５ミリモル）を添加した。この反応混合物を１５分間撹拌し、次いでＣＯ２ガス（５ｇ、１１３．６ミリモル）をカニユーレにより１５分間かけて一７８℃で導入した。反応混合物を室温まで加温し、次いで無色になるまでさらに２時間撹拌し、水（１００ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍｌ）とで希釈した。層を分離させ、水層を酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で洗浄し、次いで濃塩酸により酸性化させた。得られた沈殿物を集め、水洗し、次いで乾燥して１−メトキシメチル−９−フルオレンカルボン酸（１，８ｇ、３３．１％）を得た。

１−メトキシメチル−９−フルオレンメタノール１００ｍ１のＴＨＦにおける１ −メトキシメチル−９−フルオレンカルボン酸（３，４ｇ、１３．４ミリモル）の溶液にＢＨ３−ＴＨＦ複合体のＬＭ　ＴＨＦ溶液（３０，０ｍｌ、３０．０ミリモル）を０℃にて添加した。反応混合物を室温にて１晩撹拌し、次いで水（１００ｍｌ）でクエンチした。有機層を１０％炭酸カリウム溶液と水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。残留油状物のショートパスクロマトグラフィー（シリカ、へ牛サン中の２５％酢酸エチル）により１ −メトキシメチル−９−フルオレンメタノール（２，６ｇ、７９．９％）を得た。

−（［９Ｈ−（１−メトキシメチルフルオレン−９−イル）メトキシメチルボニル）−Ｌ−ロイシン、１／４水塩無水ＴＨＦと塩化メチレンとの混液（１：１．５０ｍ１）における１−メトキシメチル−９−フルオレンメタノール（２，６ｇ、１０．７ミリモル）の溶液に、塩化メチレンにおけるホスゲンの４．２Ｍ溶液（３，８＋ｎｌ、１６゜１ミリモル）を室温にて添加した。この反応混合物を室温にて４時間撹拌し、過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングによって除去した。溶剤を除去し、残留油状物を１０ｍ１のジオキサンに溶解させ、この溶液を１８．０ｍｌのジオキサンおよび３７．５ｍｌの１０％炭酸カリウム溶液におけるＬ〜ロイシン（１，３１ｇ、１０．０ミリモル）の溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、２００ｍ１の水で希釈し、次いで酢酸エチル（５Ｘ　２０　ｍｌ）で抽出した。水層をｐＨ１まで酸性化させ、得られた油状物を酢酸エチル（３Ｘ５０ａ＋ｌ）で抽出し、有機溶液をＩＮ　ＨＣＩ　（３Ｘ２０ｍｌ）と水とブラインとで洗浄し、次いで硫酸マグネシウムで脱水し、さらに蒸発させて油状物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカＲＰ−１８，水中の６０％メタノール）により精製して１．６ｇ　（３７，４％）の所望の生成物（ｍｐ、６３〜６６℃）を得た。

実施例　３ＯＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ネオペンチルグリシン、１／４水塩（ＮＰＣ１５６７６）１０％炭酸カリウム水溶液（４０ｍｌ）におけるＬ−ネオペンチルグリシン（３，１ｇ、２１．５ミリモル）の溶液を、ジオキサン（１００ｍｌ）におけるＮ− （９−フルオレニルメトキシカルボニル）スクシンイミド（８゜Ｏｇ、２３．７ミリモル）の撹拌溶液に添加した。触媒量のＤＭＡＰを添加し、反応混合物を室温にて３時間撹拌した。大部分のキシレンを減圧蒸発させた。得られた水溶液をエーテル（×４）で洗浄し、水溶液をＨＣＩで酸性化させ、沈殿物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。ショートパスクロマトグラフィー（シリカ、ヘキサン中の２゜５％ＥｔＯＡｃ）により３．５ｇ　（４３，７％）を得た。

ｍｐ、７０〜７３℃。

実施例　３１Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）プロピオニル］−Ｌ−ｔ−ロイシン、１／４水塩（ＮＰＣ１５６Ｎ−［３−（９８−フルオレン−９−イル）プロピオニル］　−Ｌ−ｔ−ロイシン、１／４水塩塩化チオニルにおける３−（フルオレン−９−イル）プロピオン酸（２，４ｇ、ｉｏミリモル）の溶液を２時間にわたり還流させた。この反応混合物を冷却し、溶剤を減圧除去した。得られた３− （フルオレン−９−イル）プロピオン酸クロライドの溶液をジオキサン（２０ａ＋ｌ）に溶解し、次いで１０％炭酸ナトリウム水溶液（４０ｍｌ）におけるＬ− を−ロイシン（４ｇ、３０．５ミリモル）の溶液に添加した。反応混合物をその１部をメタノールでクエンチすることにより監視し、次いで得られたメチルエステルをＴＬＣ（クロロホルム中の１０％Ｍ　ｅ　ＯＨ）により監視した。１．５時間の後、水を添加し、大部分のジオキサンを減圧除去した。水層をジエチルエーテル（×３）で洗浄し、次いで１０％ＨＣＩにより−ｐＨ１まで酸性化した。

得られた沈殿物をショートバスクロマトグラフィー（シリカ、クロロホルム中の５％Ｍ　ｅ　ＯＨ）で精製して１．５ｇ　（４２，１％）を得た。ｍｐ、７９Ｎ −（９Ｈ−１３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ− ｔ−ロイシン、１／４水塩（ＮＰＣ１５８８５）２−　［２−（１−メチルフルオレン−９−イル）エチル］−１，３−ジオキソラン５０ｍ１のＴＨＦにおける１−メチルフルオレン（３゜２ｇ、１８．０ミリモル）にＢｕＬ　ｉのへキサン中の２゜３５Ｍ溶液（７，６５ｍ１．１８．０ミリモル）を−７８℃にて添加した。反応混合物を一７８℃にて２時間撹拌し、次いで２−ブロモ−１，３−ジオキソラン（３，６ｇ、１９．８ミリモル）を注射器により添加した。反応をＴＬＣ（シリカ、１０％酢酸エチル／ヘキサン）で監視した。反応混合物を室温にて２時間撹拌し、次いでＴＨＦを蒸発させた。残留物を酢酸エチルに溶解させ、この溶液を水洗し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで粗大シリカゲルとノリットとで処理し、さらに蒸発させて３−（フルオレン−９ −イル）プロピオニルクロライド３−（フルオレン−９−イル）プロピオン酸（１５゜０ｇ、６２．９ミリモル）にＳ　ＯＣｌ　２　（２０ｍｌ、過剰量）を室温にて添加した。この反応混合物を２時間沸騰させた。反応をＴＬＣ（シリカＲＰ−１８、水中の７０％メタノール）で監視した。過剰の塩化チオニルを減圧下に除去し、残留物を酢酸エチル／ヘキサン混液から結晶化させて１０．１ｇ　（６２，５％）の所望の生成物を得た。この生成物は特性化するには充分安定でなく、これを直ちに次の工程に使用した。

Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）プロピオニル］−Ｌ−ノルロイシン、１／４水塩２０ｍ１のジオキサンにおける粗製３−（フルオレン−９−イル）プロピオニルクロライド（結晶化せず）（４゜５ｇ、１７．５ミリモル）を、１００ｍ１の１０％炭酸ナトリウム水溶液および５０１のジオキサンにおけるＬ−ノルロイシン（２，７ｇ　、２０．．０ミリモル）の冷却（０℃）溶液に極めてゆっくり添加した。この反応混合物を室温にて１時間撹拌し、水（５０ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（２ｘ２５ｍｌ）で抽出した。水溶液を０℃まで冷却し、次いで１０％ＨＣＩによりｐＨ１まで酸性化した。半結晶残留物をメタノール／水から再結晶化させ、固体をエーテルで慎重に洗浄した後に純粋な試料が得られた。これにより１．７ｇ　（２７，４％）のＮ−［９Ｈ−（３−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−］Ｌ−ノルロイシン１／４水塩（ｍｐ、１６７〜１６９℃）Ｎ−［３ −（９Ｈ−フルオレン−９−イル）プロピオニル］−Ｌ−ホモフェニルアラニン、１／４水塩（ＮＰＣジオキサン（１５ｍｌ）における粗製３−（フルオレン− ９−イル）プロピオニルクロライド（実施例３３に記載、結晶化せず）（３，８ｇ、１４．７ミリモル）を、１０％炭酸ナトリウム水溶液（９０ｍｌ）および４５１のジオキサンにおけるし一ホモフェニルアラニン（２，７ｇ、１５．０ミリモル）の冷却（０℃）溶液に極めてゆっくり添加した。この反応混合物を室温にて１時間撹拌し、水（１００ｍｌ）で希釈し、次いで酢酸エチル（３×２５１）で抽出した。この水溶液を０℃まで冷却し、次いで１０％ＨＣＩによりｐＨ１まで酸性化した。沈殿物を濾別し、水洗し、脱水し、次いで慎重にエーテル（３Ｘ　５０　ｍｌ）で洗浄して１．７ｇ　（２８，６％）のＮ−［９Ｈ−（３−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−］Ｌ−ホモフェニルアラニン１／４水塩（ｍｐ、１６６〜１６８℃）を得た。

実施例　３５Ｎ−［３−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）プロピオニル］−Ｌ−フェニルアラニン（ＮＰＣ１５８９６）ジオキサン（４０ｍｌ）における３−（フルオレン− ９−イル）プロピオニルクロライド（実施例３３に記載；結晶化せず）（３，０ｇ、１１．７ミリモル）を、７５ｍ１の１０％炭酸カリウム溶液および３８ｍ１のジオキサンにおけるし一フェニルアラニン（２，０ｇ、１１．７ミリモル）の撹拌溶液に室温にて添加した。反応混合物を１晩撹拌し、ジオキサンを減圧下に除去した。残留物を水（１００ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（４Ｘ３０ｍｌ）で抽出した。水溶液をノリットで処理し、次いでｐＨ１まで酸性化した。沈殿物を濾別し、ＩＮ　ＭＣＩと水とで洗浄した後、乾燥させた。ショートパスクロマトグラフィー（ＲＰ−１８シリカ、５０％メタノール／水）により白色固体を得た。最終的に生成物をエーテルで洗浄して精製を行なった。得られたＮ−［９Ｈ− （３−フルオレン−９−イルプロピオニル）］−Ｌ−フェニルアラニンの収量は１．２ｇ　（２６，５％）であった。ｍｐ、１９４〜１９５℃）。

Ｎ−（［９Ｈ−（４−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）− Ｌ−ｔ−ロイシン（ＮＰＣ１無水ＴＨＦと塩化メチレンとの混液（１：１．５０ｍ１）における４−メチル−９−フルオレンメタノール（実施例１０から、４．５ｇ、２１．５ミリモル）の溶液に、塩化メチレンにおける４、２Ｍホスゲン溶液（６ｍ１．２５．０ミリモル）を室温にて添加した。この反応混合物を室温にて２４時間撹拌し、次いで過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングにより除去した。溶剤を減圧除去し、残留油状物をヘキサン（２００ＩＩｌｌ）で処理した。

固体を濾過により除去し、溶液を蒸発させた。得られた油状物をジオキサン（２５ｚｌ）に溶解し、次いでジオキサン（３４ｍｌ）と１０％炭酸カリウム水溶液（６８ｍｌ）との混液におけるＬ−を−ロイシン（２，９ｇ、２２．５ミリモル）の溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、水で希釈し、酢酸エチル（５Ｘ３０ｍｌ）で抽出した。水層をｐＨ１まで酸性化し、沈殿物を濾過し、水洗し、次いで乾燥させた。ショートパスクロマトクラフィー（ＲＰ−１８シリカ、７０％メタノール／水）により油状物を得た。この油状物を１０％炭酸カリウム水溶液の溶液に溶解し、希ＨＣＩで沈澱させた。メタノール／水（１：　１）からの再結晶化により１．４５ｇ　（１８，１％）の所望の化合物（ｍｐ、９１〜１２５℃）を得た。

実施例　３７Ｎ−（［９Ｈ−（１−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）− Ｌ−ノルロイシン（ＮＰＣ１無水ＴＨＦと塩化メチレンとの混液（１：１．９０＋ａｌ）における１−メチル−９−フルオレンメタノール（その合成については実施例２５に記載；４．７ｇ、３５．２ミリモル）の溶液に、塩化メチレンにおける４、２Ｍホスゲンの溶液（１７ｏ＋１．７０．４ミリモル）を室温にて添加した。この反応混合物を室温にて２４時間撹拌し、次いで過剰のホスゲンをアルゴンのバブリングにより除去した。溶剤を減圧除去し、得られた粗製１−メチル −９−フルオレニルメチルクロルホルメートの黄色油状物をそれぞれ１１．７ミリモルの３つの同一部分に分割した。

得られた１−メチル−９−フルオレニルメチルクロルホルメートの油状物をジオキサン（５０ｍｌ）に溶解し、次いでジオキサン（５０ｍｌ）と１０％炭酸カリウム水溶液（９０ｍｌ）との混液におけるＬ−ノルロイシン（２゜９ｇ、２３．６ミリモル）の溶液に室温にて添加した。

反応混合物を１晩撹拌し、水で希釈し、次いで有機不純物を酢酸エチル（５Ｘ３０ｍｌ）で抽出した。水層をｐＨ１まで酸性化し、沈殿物を濾過し、水洗し、次いで乾燥させた。ショートパスクロマトグラフィー（ＲＰ−１８シリカ、水中の５０％〜７０％メタノール）でさらに精製して２．１ｇ　（１６％）の所望の生成物（ｍｐ、１３０〜１３５℃）を得た。

実施例　３８Ｎ−（［９Ｈ−（１−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）− Ｌ−ｔ−ロイシン（ＮＰＣ１１−メチル−９−フルオレニルメチルクロルホルメートて実施例３７により作成；１１．７ミリモル）の溶液をジオキサン（５０ｍｌ）に溶解し、次いでジオキサン（５０ｍｌ）と１０％炭酸カリウム水溶液（９０ｍｌ）との混液におけるＬ−ノルロイシン（２，９ｇ、２３．６ミリモル）の溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、水で希釈し、次いで有機不純物を酢酸エチル（５ｘ３０ｍｌ）で抽出した。水層をｐＨ１まで酸性化し、沈殿物を濾過し、水洗し、次いで乾燥させた。ショートパスクロマトグラフィー（ＲＰ−１８シリカ、水中の５０％〜７０％メタノール）によりさらに精製して２．０５ｇ　（１５，６％）の所望の生成物（ｍｐ７８〜８１Ｎ−（［９Ｈ− （４−メチルフルオレン−９−イル）メトキシ］カルボニル）−Ｌ−ホモフェニルアラニン（ＮＰＣ１５９６１）１−メチル−９−フルオレニルメチルクロルホルメート（実施例３７により作成、１１．７ミリモル）の溶液をジオキサン（５０ｍｌ）に溶解し、次いでジオキサン（５０ｍｌ）と１０％炭酸カリウム水溶液（９０ｍｌ）との混液におけるし一ホモフェニルアラニン（４，２３ｇ。

２３．６ミリモル）の溶液に室温にて添加した。この反応スラリーを１晩撹拌し、水で希釈し、次いでｐＨ１まで酸性化した。得られた油状物を逆相ジョートノヤスクロマトグラフィ−（ＲＰ−１８シリカ、水中の６０％〜７５％メタノール）で精製して２．５ｇ　（１７％）の所望の生成物（ｍｐ１０４〜１１０℃）を得た。

実施例　４ＯＮ−（９Ｈ−［３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオニル］）− り一ロイシン（ＮＰＣ１５９２−［（２−メトキシフルオレン−９−イル）エチル］＝１，３−ジオキソランｎ−ＢｕＬｉの溶液（ヘキサン中２．５Ｍ、６．４ｍｌ、１６．０ミリモル）を、１００ｍ１のＴＨＦにおける２−メトキシフルオレン（実施例１０により作成；３．１ｇ。

１５．８ミリモル）の冷却（−７８℃）溶液にゆっくり添加した。この反応混合物は暗赤色となり、固体が沈澱し始めた。３０分間の後、２−（２−ブロモエチル）−１，，３−ジオキソラン（５，８ｇ、３２．Ｏミリモル）を冷溶液に添加し、この溶液を室温まで加温した。反応混合物を室温にて１晩撹拌し、ＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）を用いて反応を監視した。反応を水により停止させ、生成物をＥｔＯＡｃ中に抽出した。有機層を水（×３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。ショートパスクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）により３．２ｇ（６２，５％）の生成物を得た。

３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオン酸０℃のアセトン（１００ｍｌ）における２−［（２−メトキシフルオレン−９− イル）エチル］−１，３−ジオキソラン（３，１ｇ、１０．０ミリモル）の溶液にジョーンズ試薬（９０ｍｌ）　（この試薬は１６ｇのＣｒＯ３と１６１のＨ５Ｏ４（濃硫酸）とを１００ｍ１の水に溶解して作成）を添加した。反応混合物を室温にて１晩撹拌し、反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）により監視した。アセトンを蒸発させ、残留物を水（１００ｍｌ）で希釈した。

生成物をＥｔＯＡｃ中に抽出し、有機層を水（×６）により水洗物が透明になるまで充分洗浄し、次いで生成物をＩＮ　ＮａＯＨ溶液（３Ｘ　５０　ｍｌ）中に抽出し、水を再び酢酸エチル（ＩＸ３０１）で洗浄し、ｐＨ１まで酸性化した。

生成した油状物を酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル溶液を水とブラインとで洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。残留物を２５％酢酸エチル／ヘキサン混液に溶解し、この溶液を粗大シリカゲルの層によって濾過した。

濾液の蒸発により１．８ｇ　（６７，０％）の３−（２−メトキシフルオレン− ９−イル）プロピオン酸を得た。

３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオニル−クロライド３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオオン酸（１，６ｇ、５．２ミリモル）に５ＯＣＩ２　（２０ｍｌ、過剰量）を室温にて添加した。反応混合物を２時間沸騰させ、反応をＴＬＣ（シリカＲＰ’−１８，７０％メタノール／水）により監視した。過剰の塩化チオニルを減圧除去し、残留物（油状物）を次の工程にさらに精製することなく使用した。

Ｎ−（９Ｈ−［３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオニル］）− り一ロイシン４０１のジオキサンにおける上記化合物を、１０％炭酸ナトリウム溶液（４５ｍｌ）およびジオキサン（２１ｍｌ）におけるし−ロイシン（１，３ｇ、６．０ミリモル）の撹拌溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、ジオキサンを減圧除去し、残留物を水（１００ｍｌ）で希釈し、さらに酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出した。

水溶液をｐＨ１まで酸性化させ、油状物を酢酸エチルで抽出した。この溶液を水とブラインとで洗浄し、脱水し、次いで蒸発させた。ショートパスクロマトグラフィー（ＲＰシリカ、６０〜６５％メタノール／水）により０゜８５ｇ　（４４，３％）のＮ二（９Ｈ−［３−（２−メトキシフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ−ロイシン（’ｍｐ、１３５〜１３７℃）を得た。

実施例　４１Ｎ−（９Ｈ−［３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］　）　 −Ｌ−ホモフェニルアラニン（ＮＰＣ８０１のジオキサンにおける化合物３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル゛クロライド（その製造については実施例３２に記載；’４．０ｇ　、１４．８ミリモル）に、２０ｍ１の１０％炭酸ナトリウム水溶液におけるし一ホモフェニルアラニン（３，５ｇ、１９．５ミリモル）の溶液を室温にて添加した。この反応混合物を２時間撹拌し、大部分のジオキサンを減圧下に除去した。残留物をＨＣＩによりｐＨ１まで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を濃縮すると共に粗生成物を逆相シリカでのショートパスクロマトグラフィー（ＲＰ−１８シリカ、２５％次いで７０％メタノール／水）により精製して４．５ｇ　（７３％）のＮ−（９Ｈ−［３−（１ −メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ−ホモフェニルアラニン（ｍｐ、１３８〜１４０℃）Ｎ−（９Ｈ−［３−（４−メチルフルオレン−９− イル）プロピオニル］）−り一ロイシン、１／４水塩（ＮＰＣ２−［（４−メチルフルオレン−９−イル）エチル］−１，３−ジオキソランＢｕＬｉの溶液（ヘキサン中２．５Ｍ、２０．４ｍｌ、５１．０ミリモル）を、１００ｍ１のＴＨＦにおける４−メチルフルオレン（実施例１０により作成、９．０ｇ。

４９．８ミリモル）の冷却（−７８℃）溶液にゆっくり添加した。３０分間の後、２−　（２−ブロモエチル）−１，３−ジオキソラン（１８，９，１０５，０ミリモル）を冷溶液に添加し、この溶液を室温まで加温した。反応混合物を週末にわたり室温で撹拌した。ＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）を用いて反応を監視した。反応を水で停止させ、生成物をＥｔＯＡｃ中に抽出した。有機層を水（×３）で洗浄し、硫酸マグネシウムで脱水し、次いで蒸発させた。ショートパスクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）により１１．２ｇ　（８２，８％）の生成物を得た。

３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオン酸０℃のアセトン（１５０ｍｌ）における２−［（４−メチルフルオレン−９−イル）エチル］−１，３− ジオキソラン（１１，１ｇ、’　３９．６ミリモル）の溶液にジョーンズ試薬（１６ｇのＣ「０３と１６ｍ１のＨ２Ｓ０４（濃硫酸）とを１００ｍ１の水に溶解）を添加した。この反応混合物を室温にて１晩撹拌し、反応をＴＬＣ（シリカ、ヘキサン中の２５％ＥｔＯＡｃ）により監視した。

アセトンを蒸発させ、残留物を水（１００ｍｌ）で希釈した。生成物をＥｔＯＡｃ中に抽出し、有機層を水（×６）により水洗物が透明になるまで充分洗浄し、次いで生成物をＩＮ　ＮａＯＨ溶液（３Ｘ７０ｍｌ）中に抽出し、水を再び酢酸エチル（ＩＸ３０ｍｌ）で洗浄し、さらにｐＨ１まで酸性化した。生成した固体を濾別し、水洗し、次いで乾燥させた。これにより６．８ｇ　（６８，２％）の３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオン酸を得た。

３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニルクロライド３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオン酸（３，５ｇ、１３．９ミリモル）に５ＯＣ１２（２０１Ｉｌｌ、過剰量）を室温にて添加した。反応混合物を２時間にわたり沸騰させ、反応をＴＬＣ（シリカＲＰ−１８，７０％メタノール／水）により監視した。過剰の塩化チオニルを減圧除去し、残留物（油状物）を次の工程に精製することなく使用した。

Ｎ−（９Ｈ−［３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ −ロイシン、１／４水塩４０１のジオキサンにおける上記化合物を、１０％炭酸ナトリウム溶液（９０ｍｌ）およびジオキサン（４５ｍｌ）におけるし−ロイシン（２，６ｇ、２０．０ミリモル）の撹拌溶液に室温にて添加した。この反応混合物を１晩撹拌し、ジオキサンを減圧除去し、残留物を水（１００ｒｎｌ）で希釈し、次いで酢酸エチル（３Ｘ５０ｍｌ）で抽出した。水溶液をｐＨ１まで酸性化させ、固体を濾別し、水洗し、次いで乾燥させた。ショートパスクロマトグラフィー（ＲＰシリカ、６０〜６５％メタノール／水）により１．８ｇ　（６３，０％）のＮ　−（９Ｈ−［３−（４−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ−ロイシン（ｍｐ、１２５〜１２７℃）を得た。

実施例　４３Ｎ−（９Ｈ−［３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ −ノルロイシン、１／４水塩（ＮＰＣ１５９７６）８０ｍｌのジオキサンにおける化合物３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニルクロライド（その製造については実施例３２に記載、４．Ｏｆ、１４．８ミリモル）に、２０１の１０％炭酸ナトリウム水溶液におけるＬ−ノルロイシン（４、Ｏｆ、３０．５ミリモル）の溶液を室温にて添加した。この反応混合物を２時間撹拌し、大部分のジオキサンを減圧除去した。残留物をＨＣｌによりｐＨ１まで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。

有機抽出物を濃縮すると共に、粗生成物を逆相シリカでのショートパスクロマトグラフィー（ＲＰシリカ、２５％次いで７０％メタノール／水）により精製して２．６ｇ　（４８％）のＮ−（９Ｈ−［３−（１−メチルフルオレン−９−イル）プロピオニル］）−Ｌ−ノルロイシン（ｍｐ、１２８〜１３０℃）を得た。

実施例　４４テトラデカノイルホルボルアセテート（■■）により生ずる耳浮腫の阻止体重２５〜３０ｇのＣＦ−１ネズミを１群当り６匹にて使用した。試験化合物を次のように腹腔内または局部的に投与した。腹腔的投与については、試験化合物をジメチルスルホキシドもしくは０．５％メチルセルロースに溶解し、１００μ ｌを刺戟剤（１００ｍｇ／ｋｇＳｉ　、ｐ。

）の３０分間前に注射した。局部投与については、試験化合物をジメチルスルホキシド、アセトンもしくはエタノールに溶解し、次いで５μ＋　（１００μｇ）を耳の上側表面にかつさらに５μｍを耳の下側表面に刺戟剤の１５分間前に施した。刺戟剤テトセデカノイルホルボルアセテートの溶液（２００μｇ／ｌ）を耳の表面に加え、すなわち５μｍを上側表面かつ５μｍを下側表面に施した。３時間の後、耳の厚さを耳朶の中点の横端縁部に緩（（１ｏｏｓｅ　ｄｒａｇ）位置せしめたマイクロメータにより０゜０１ｍｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを施した比較動物と対比して、耳厚さの増大の阻止として計算した。

一般に２０％に等しい或いはそれより大きい阻止％は統計的に有意である（ｐ＜０．０５もしくはそれ以下、不対でないデータに対するスチューデントのｔ−試験）。

結果を表７に示す。

表７テトラデカノイルホルボルアセテートにより生ずる耳浮腫の阻止阻止％　阻止％腹腔内　局部ＮＰＣ（投与量、（投与量、化合物　Ｎｏ、ｍｇ／ｋｇ）　田ｇ／ｋｇ　）ピロキシカム　７（１０）（比較標準）　＋４（３０）４０　Ｆｌｏｏ）デキサメタソン　５Ｇ　（Ｉ［ｌ）（比較標準）４−メチルフルオレニル　１５３２５　３６（ＩＱ）−９−メトキシカルボニル　＋■（３０）−り一ロイシン　８２　Ｆ＋００）Ｎ−（９−フルオレニル　１５３２７　３７　（１Ｇ）メトキシカルボニル）− ６４（３０）Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン、　？？　（１００）エチルエステルＮ−（９−フルオレニル　１５３２８　４９　（１０）メトキシカルボニル）　 −４７（３（１）Ｎ−メチル−Ｌ−ロイシン、　６２　（＋００）ベンジルエステルＮ−（９Ｈ−フルオレン　１５４７６　６４　（＋００）−９−イルプロピオニル） −り一ロイシンＮ−（２−メチルフルオ　１５４７７　３５　（１０）レニル−９−メトキシ力　３７（３０）ルボニル）−Ｌ−ロイシン　７２　（＋００）Ｎ−（２，３−ベンゾ　１５５１０　４１１（１０）フルオレニル−９−メトキシ　７０　（３０）カルボニル）−Ｌ−ロイシン　７０　（１０Ｇ）Ｎ−（フルオレニル−９１５５２１３３（１０）−エトキシカルボニル）　３７（３０）−Ｌ−ｏイ’ｙ　ン７７　（ＩＨＩＮ−［９Ｈ−（フルオレン　１５５２７　５４　（１０）−９−イルメトキシ）　５４（３０１カルボニルコーし一ロイシン、　７４　（１００１ｔ−ブチルエステルＮ−［９Ｈ−（フルオレ　ｌ’５５２８　６＋　（１０）ニル−９−イルメトキシ）　６４（３０）カルボニル］−Ｌ−ロイシン、　７５　（１００）アミドＮ−［９Ｈ−（フルオレ　１５５２９　６７　（１０）ニル−９−イルメトキシ）　６７（３０）カルボニル］−Ｌ−ロイシン、　７８　（１００）メチルアミドＮ−［９Ｈ−（フルオレ　＋５５７３　３９　（１０）　２０　（ＩＱ）ニル− ９−イルメトキシ）　５２（３０１，３１（３０）カルボニル］　−Ｌ　−ｔ　７５（＋００）　３８（１０（１）−ロイシンＮ−［９Ｈ−（１−メチル　＋５６３８　２３　（１０）フルオレニル−９−イル　１２（３０）メトキシ）カルボニル］　６２　（１００）−り一ロイシンＮ〜［９Ｈ−（フルオレ　１５６６７　−８０　（１０）ニル−９−イルメトキシ）’　？２（３０）カルボニル］　−Ｌ　−１８０（ＩＧＧＩノルロイシンＮ−［９Ｈ−（２，７−’　＋５６’６９　４’３（１Ｇ＋ジメチルフルオレニル−２，７（３Ｇ）９−メトキシ）カルボニル］　＋３３（＋００）−り一ロイシンＮ−［９Ｈ−（４，５−１５６７０２７（１Ｇ）ジメチルフルオレニル−１１７（３Ｇ＋９−メトキシ）カルボニルコ　１５０　（１００）−り一ロイシンＮ−（９Ｈ−［３−（２１５６７１４１（１０１−メチルフルオレニル−９コ）　３１（３０）−り一ロイシンーし一ロイシン　６６　Ｆ＋　００）Ｎ−（９Ｈ −Ｃ３−フル　＋５ｉｉ７２　．５４ＦＩｌｌ）オレニルー９）プロピオニ　２＋（３０）ル］）−Ｌ−ロイシン、　６６　（１００＋ナトリウム塩Ｎ−［９Ｈ−（１−メ　ト　１５６７３　０　（１０）キシメチルフルオレニル −３３（３０）９−メトキシ）カルボニルコ　６０（１００）−り一ロイシンＮ−［９Ｈ−（フルオレ　１５ｆｉ７６　Ｑ（１（１）ニル−９−イルメトキシ）　２［１（３０）カルボニル］−Ｌ−ネオ　１６　（＋００）ペンチルグリシンＮ−（９Ｈ−フルオレニル　１５６８５　０　（１０）−９−イルプロピオニル）　＋６（３０）−Ｌ−を−ロイシン　６７（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチ　１５８８５　７０　（１０）ルフルオレニルー９−イル　７７（３０）プロピオニル）　］’　８０（１００）−り一ロイシンＮ−［９Ｈ−（３−フルオ　１５８９４　１１（１０）シン−９−イルプロピオニ　０（３０）ル）］−］Ｌ−ノルロイシン　６８　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（３−フル　＋５８！１５　６１１（ＩＱンオレンー９−イルプロピオ　７１（３０）ニル）］−］Ｌ−ホモ　６７　（１００）フェニルアラニンＮ−［９Ｈ−（３−フルオ　１５８９６　ＩＪ　（１０）シン−９−イルプロピオニ　０（３０）ル）コーし一フェニルアラニン　８４　Ｆｌｏｏ）Ｎ−［９Ｈ −（４−メチル１５９０４１６（１ｏ）フルオレン−９−イルメト　０（３Ｇ）キシ）カルボニル］　４ＨＩＤＯ） −Ｌ−を−ロイシンＮ−［９Ｈ−（１−メチル　＋５９５＋　４］（１［１）フルオレン−９−イルメト　３９（３０）キシ）カルボニルコ　７０　（＋００）−り一ノルロイシンＮ−［９Ｈ−（１−メチル　＋５９５２　２７　（１０）フルオレン−９−イルメト　７５　（３０）キシ）カルボニル］　−Ｌ　６７（１００１−ノルロイシンＳ−ベンジル−β、β−１５９５３６４（ｌ［ｌ）ジメチル−Ｎ−［９Ｈ８７（３Ｇ） −（フルオレン−９−イル　９５（１００）メトキシ）カルボニル司体重２５〜３０ｇのＣＦ−１ネズミを１群当り６匹にて用いた。必要量の試験化合物をジメチルスルホキシドもしくは０．５％メチルセルロースに溶解し、１００μｍの溶液を１００　ｍｇ／　ｋｇのアラキドン酸投与の３０分間前に腹腔内注射した。エタノールにおける１００ｍｇ／ｍｌのこの刺戟剤の溶液を耳の表面に施し、すなわち５μｍを上側表面にかつ５μｍを下側表面に施した。６０分間の後、耳の厚さを耳朶の中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１ａｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを施した比較動物と対比して、耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。

一般に２０％に等しい或いはそれより大きい阻止％は統計的に有意である（ｐ＜０．０５もしくはそれ以下、不対データに対するシチュープントのｔ−試験）。

結果をアラキドン酸によって生ずる耳浮腫の阻止阻止％腹腔内ＮＰＣ（投与量、化合物　Ｎ　ｏ、ｍｇ／ｋｇ　）ピロキシカム　５６（ＩＱ）（比較標準）　７７（３０１８６ｆｌＱＯ）デキサメタソン　１２　（１０１（比較標準）インドメタシン　Ｉ　（１００）（比較標準）４−メチルフルオレニル−１５３２５５２（１０１９−メトキシカルボニル　６３（３０）−り一ロイシン　＋００　（＋００）Ｎ−（’２−メチルフルオレニル　１５４７７　１０　（１Ｇ）−９−メトキシカルボニル１　５８（３０１−り一ロイシン　８２　（１００）Ｎ−（２，３−ベンゾフルオレ　＋５５１０　−２４　（１０）ニル−９−メトキシカルボニル）　６９（３Ｑ）−り一ロイシン　６７（１００）Ｎ−（フルオレニル−９−エト１５５２１　３４（１０）キシカルボニル）−Ｌ −ロイシン　４１（３０）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレン−９１５５２７２１（ＩＱ）−イルメトキシ）カルボニル］　４７（３［１）−り一ロイシン、　６８Ｆ＋１０）ｔ−ブチルエステルＮ−［’９Ｈ−（フルオレニル−１５５２８３１（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　３２（３０ｉ−り一ロイシン、アミド　３５　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５２９＋６（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　３Ｈ３０）−り一ロイシン、メチルアミド　２９　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−＋５５７３　２７　（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　３２（３０）−Ｌ−を−ロイシン　４２　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチルフル　＋５６３８　６５　（＋００）オシニル−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５６６７７（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　５７（３０）−Ｌ−ノルロイシン　６５（１００）Ｎ−［９Ｈ−（２，７−ジメチ　１５６６９　１２　（１０１ルフルオレニル− ９−メトキシ）　２２　（３０１カルボニル］−Ｌ＝ロイシン　６０　（１０１１１）Ｎ−（９Ｈ−［３−（２−メチ　１５６７１　４０　（１０）ルフルオレニル−９１）　−Ｌ−＋９（３Ｇ）ロイシン−Ｌ−ロイシン　５６　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メトキシメ　＋５６７３　２４　（１０）チルフルオレニル −９−メトキシ）　２７（３０１カルボニル］−Ｌ−ロイシン　５８　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−＋５６７６　２０　（１Ｇ）９−イルメトキシ）カルボニル］　４４（３０）−Ｌ−ネオペンチルグリシン　７９（１００）Ｎ −（９Ｈ−フルオレニル−１５６８５４４（１０）９−イルプロピオニル）　６１（３０１−Ｌ−を−ロイシン　６９（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチルフル　１５８８５　５２　（１０）オシニル−９−イルプロピオニ　７１（３０）ル）］　−Ｌ−を一ロイシン　７９（１００１Ｎ− ［９Ｈ−（３−フルオレン−１５８９４２２（１０）９−イルプロピオニル）コ　４０　（３０１−Ｌ−ノルロイシン　６０　ｆｌｏｐ）Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　１５８９５　１４　（１０）−９−イルプロピオニル）コ　２６（３０）−Ｌ−ホモフェニルアラニン　５２　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　＋５８９６　１６　（＋０１−９−イルプロピオニル）］　２４（３０） −Ｌ−フェニルアラニン　７２　（１００１Ｎ−［９Ｈ−（４−メチルフル　１５９０４　１９　（１０）オレン−９−イルメトキシ）　５４（３０１カルボニル］−Ｌ−を−ロイシン　７９　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチルフル　＋５９５１　１１（１０）オレン−９−イルメトキシ）　＋８（３０）カルボニル］−Ｌ−ノルロイシン　５６（ＩＯＱＩＮ−［９Ｈ−（１−メチルフル　＋５９５２　４３　（１Ｇ）オレン−９−イルメトキシ）カル　４７（３０１ボニル］ −Ｌ−ノルロイシン　５Ｇ（＋００）Ｓ−ベンジル−β、β−ジメチル　１５９５３　４６　（１０）−Ｎ−［９Ｈ−（フルオレン−９６６（３０）−イルメトキシ）カルボニル］　６０　（＋００）体重２５〜３０ｇのＣＦ−１ネズミを１群当り６匹で使用した。必要量の試験化合物をジメチルスルホキシドモジくは０．５％メチルセルロースに溶解し、１００μｍの溶液を刺戟側投与の３０分間前に腹腔内注射した。

刺戟剤であるキシレンを耳の表面に施し、すなわち２０μｍを上側表面および２０μｍを下側表面に施した。２時間の後、耳の厚さを耳朶の中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１ｍｍまで測定した。

データは、刺戟剤のみを施した比較動物と対比して、耳厚さの増大に関する試験化合物による阻止として計算した。一般に２０％に等しい或いはそれより大きい阻止％は統計的に有意である（ｐ＜０．０５もしくはそれ以下、９−イルメトキシ）カルボニル］　４７（３０）−り一ロイシン、メチルアミド　５０　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５７３２３（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　１７（３０）−Ｌ−を−ロイシン　５７　（＋００）Ｎ−［９Ｈ −（１−メチルフル　１５６３８　３７　（１０）オシニル−９−イルメトキシ）　６６（３０）カルボニル］−Ｌ−ロイシン　８２　（１００）Ｎ−［９Ｈ− （フルオレニル−１５６６７２２（ｔｏ）９−イルメトキシ）カルボニル］　５７（３０）−Ｌ−ノルロイシン　１１０（ＩＯＱ）Ｎ−［９Ｈ−（２，７−ジメチ　１５６６９　１２　（１Ｇ）ルフルオレニルー９−メトキシ）　２２　（３０１カルボニル］−Ｌ−ロイシン　６０　Ｆｌｏｏ）Ｎ−［９Ｈ−（４，５−ジメチ　１５６７０　７８　（１０）ルフルオレニルー９−メトキシ）　４６（３０）カルボニルコーム−ロイシン　５Ｑ　（１００）Ｎ−（９Ｈ−［３−（２− メチル　＋５６７１　６　（１０）フルオレニル−９］　’ｔ　−Ｌ−ロイ　１０（３０）シンーＬ−ロイシン　１８　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メトキシメチ　１５６７３　２０　（１０）ルフルオレニルー９〜メトキシ）　２６（３０〕カルボニルコーＬ−ロイシンＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−９１５６７６２６（１Ｇ）−イルメトキシ）カルボニル］　１２（３０）−Ｌ−ネオペンチルグリシン　４４（１００）Ｎ−（９Ｈ−フルオレニル−９１５６８５５（１０）−イルプロピオニル）２３（３Ｇ） −Ｌ−ｔ−ロイシン　１８（１００）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチルフル　１５８８５　３９　（１０）オシニル−９−イルプロピオニ　４９（３［１）ル）〕−り一ロイシン　４ｇ（１００１Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　１５８９４　０　（１０）−９−イルプロピオニル）コ　Ｏ（３’０）−Ｌ−ノルロイシン　３４　（１００１Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　１５８９５　０　（１０１−９−イルプロピオニル）　１　０（３０） −Ｌ−ホモフェニルアラニン　５１（ＩＱ’０）ロースに溶解し、１００　ｔｔ　ｌ　（１００ｍｇ／ｋｇ）を刺戟剤の３０分間前に注射した。刺戟剤、すなわちアセトン中の３％オキサシロンを耳の表面に加え、すなわち５μｍを上側表面および５μｍを下側表面に加えた。２４時間の後、耳の厚さを耳朶の中点の横端縁部に緩く位置せしめたマイクロメータにより０．０１ｍｍまで測定した。データは、刺戟剤のみを施した比較動物と対比して耳厚さの増大の阻止上して計算した。一般に２０％より大きい阻止％は統計的に有意である（ｐ＜０．０５もしくはそれ以下、不対データに対するシチュープントのｔ−試験）。結果を表１０に示す。

表１０オキサシロンによって生ずる耳浮腫の阻止阻止％腹腔内ＮＰＣ（投与量、化合物　Ｎｏ、ｍｇ／ｋｇ）インドメタシン　４（１）（比較標準）　３５（３）４−メチルフルオレニル　１５３２５　２２　（１０）−９−メトキシカルボニル　２４（３０）−り一ロイシン　４９（１００）Ｎ−（９８〜フルオレン−９−イ　１５４７６　０　（１０）ルプロビオニル） −Ｌ−ロイシン　５（３Ｄ）４３　（ＩｏＯ）Ｎ−（２−メチルフルオレニル−＋５４７７　３（１０）９−メトキシカルボニル）　１４（３０１−Ｌ〜ロイシン　４３　（＋００）Ｎ−（２，３−ベンゾフルオレ　１５５１［１−７Ｆｌｏ）ニル−９−メトキシカルボニル）　３（３０）−り一ロイシン　ＩＩ］Ｉ（ＩＮ）Ｎ−（フルオレニル−９−エト　１５５２１　３９　（１０１キシカルボニル） −Ｌ−ロイシン　４５（３［１）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレン−９１５５２７３１（１０）−イルメトキシ）カルボニル］　３３（３０）−り一ロイシン、　５４（１１０１ｔ−ブチルエステルＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−＋５５２８　４１（１０）９−イルメトキシ）カルボニルＥ　２５（３０）−り一ロイシン、アミド　４６（＋００）Ｎ−［９Ｈ −（フルオレニル−１５５２９３２（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　４１［３０）−り一ロイシン、メチルアミド　７６（１００）Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５７３２ｇ　（３０）９−イルメトキシ）カルボニル］　４８（１００１−Ｌ−を−ロイシンＮ−［９Ｈ−（１−メチルフル　１５６３８　６７　（３０）オシニル−９−イルメトキシ）　７４（１００）カルボニルコーし一ロイシンＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５６６７１３（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　１５（３０）−Ｌ−ノルロイシン　７１　（１０１）Ｎ−［９Ｈ−（２，７−ジメチ　１５６６９　−４０　（１０）ルフルオレニルー９−メトキシ）　８４（３ａｌカルボニルコーし一ロイシン　８４　（＋００）Ｎ−［９Ｈ− （４，５−ジメチ　１５ｆｉ７Ｇ　−３６（Ｉ［ｌ）ルフルオレニルー９−メトキシ）　４３（３０）カルボニル］−Ｌ−ロイシン　５４０（１００１Ｎ−（９Ｈ−［３−（２−メチ　１５６７１　５　（１０）ルフルオレニル−９］　）　 −Ｌ　−２０（３０）ロイシン−し−ロイシン　６９　（１００）Ｎ−（９Ｈ− ［３−フルオレニル　１５６７２　１１（１０）−９）プロピオニル］　）　− Ｌ　１９（３（１１−ロイシン、ナトリウム塩　３５　（１００１Ｎ−［９Ｈ− （１−メトキシメチ　１５６７３　Ｇ（１０）ルフルオレニルー９−メトキシ）　１２（３０）カルボニル］−Ｌ−ロイシン　＋８　（１００１Ｎ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５６７６０（１０）９−イルメトキシ）カルボニル］　４（３０）−Ｌ−ネオペンチルグリシン　５０　Ｆｌｏｏ）Ｎ−（９Ｈ−フルオレニル −９１５６１１５０（１０）−イルプロピオニル）　３０（３０） −Ｌ−を−ロイシン　３０　ＦｌｏｏｌＮ−［９Ｈ−（１−メチルアミド　１５８８５　１　（１０）レニル−９−イルプロピオニル）　］　８（３０ｉ−り一ロイシン　３６　（１００）Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　１５ｇ９４　２９（１０）−９−イルプロピオニル）　］　＋１（３０）−□ −Ｌ−ノルロイシン　３５　（ＩＮ）Ｎ−［９Ｈ−（３−フルオレン　１５８９５　４（１０）−９−イルプロピオニル）コ　１２（３０）−Ｌ−ホモフェニルアラニン　？＋　（１０Ｇ）Ｎ−［９Ｈ−（４−メチルフル　１５９０４　２１（１０）オレン−９−イルメトキシ）力　５４（３０）ルボニル］−Ｌ−を一ロイシン　７９　（１００１Ｎ−［９Ｈ −（１−メチルフル　＋５９５１　３３　（１０）オレン−９−イルメトキシ）力　２３（３０）ルボニル］　−Ｌ−ノルロイシン　４９（＋００）Ｎ−［９Ｈ −（１−メチルフル　＋５９５２　２１　（１０）オレン−９−イルメトキシ）力　２４（３０）ルボニル］　−Ｌ−ノルロイシン　７２　（ＩＯＱ）Ｎ−［９Ｈ−（１−メチルフル　１５９６１　２９　（１０）オレン−９−イルメトキシ）力　２３ＮＯ）ルボニル］−Ｌ−ホモ　９２　（＋００）フェニルアラニンＮ　−（９Ｈ−［３−（２−メ　ト　１５９６８　２４　（１０）キシフルオレン−９−イル）プ　２４（３０１０ビｆニル］）　−Ｌ　−ｏ　オレン６６（１０（１）Ｎ−（９Ｈ−［３−（１−メチル　１５９７４　０　（Ｉｎ）フルオレン−９−イル）プロピオニ　２３　（３０）ル］）−Ｌ−ホモフェニルアラニン　４８　（１００１Ｎ−（９Ｈ−［３−（４−メチル　＋５９７５　３６　（１０）フルオレン−９−イル）プロピ　１９　（３０）オニル］）−Ｌ−ロイシン　７３　（１００）Ｎ−（９Ｈ−［３−（４−メチル　１５９７６　１０　（１０）フルオレン−９−イル）プロピオ　８（３０）ニルコ）−Ｌ−ノルロイシン　７３　（１００）Ｓ−ベンジル−β、β−ジメチル　０（１Ｇ）−Ｎ−［９Ｈ −（フルオレン−９ −イルメトキシ）カルボニル］逆受動アルチュス反応（Ｉ　Ｉ）体重２００〜２５０ｇの雄ＣＤラットを用いた。試験この溶液（１００ｍｇ／　ｋｇ）を抗原投与の１時間前に腹腔内注射した。これら動物をイソフルランで吸入麻酔し、次いで陰茎静脈を介し１１の塩水における２、５ｍｇのエバンスブルー染料および５０．０ｍｇのヒト血清アルブミモンの溶液１ｍｌを注射した。この処理の直後に、３．６５ｍｇの抗体を含有するよう希釈した０、０３ｍ１の抗ヒトアルブミンを背中の中線に沿って３箇所で皮下注射した。

麻酔を止め、次いで３時間後に動物を殺した。皮膚を除去し、青色染色した領域を切除した。皮膚パッチを、１ｍ１のＩＮ水酸化カリウムを含有する栓付チューブ内に３７℃にて１晩浸漬した。次いで５部の０．６Ｎ燐酸と１３部のアセトンとの混液９Ｉ１１１をチューブに添加した。チューブ内容物を撹拌すると共に遠心分離し、６２０＋＋ｍにて吸光度を測定した。データは、抗原と抗体とのみを施した比較動物に対比して、化合物による青色変化の阻止として計算した。結果を表１１に示す。

表１１逆受動アルチュス反応阻止％腹腔内ＮＰＣ（投与量、化合物　Ｎｏ、ｍｇ／ｋｇ）（比較標準）インドメタシン　５（１）（比較標準）２６　ｆ３）Ｎ−（９−フルオレ−／ｌｚメ）キ１５３２６　１９（１００）ジカルボニル） −Ｎ−メチル −Ｌ−ロイシン、メチルエステル２−　［Ｎ−（９−フルオレニル　１５４２７　１４　（１００）メトキシカルボニル）アミノ］ −４−メチルペンタノールＮ−［（９Ｈ−フルオレン−９１５４３０４８（１００）−イルメトキシ）カルボニルコＮ−（９Ｈ−フルオレン−９−１５４７６５５（＋００）Ｎ−（２−メチルフルオレニル　１５４７７　５３　（＋００１−９−メトキシカルボニル） −Ｌ〜ロイシンＮ−［９Ｈ−（２−メトキシ７　１５４８９　６４　（１００）ルオレンー９− イルメトキシカルボニルコーム−ロイシンＮ−（２，３−ベンゾ：Ｍｌｔし１５５＋０　５０（ＩＮ）ニル−９−メトキシカルボニル）−Ｌ−ロイシンＮ−（フル、ｔレニル−９−エト１５５２１　６３（１００）キシカルボニル） −Ｌ−ロイシンＮ　［９Ｈ−（フルオ［／　ン−９１５５２７４（Ｉ［１（１）−イルメトキシ）カルボニルコＮ　−［９Ｈ−（７ルオレニル−１５５２８０（ＩＯｆｌ）９−イルメトキシ）カルボニルコーＬ−ロイシン、アミドＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５２９０（１００）９−イルメトキシ）カルボニル］ −り一ロイシン、メチルアミドＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５７３５０（１００）９−イルメトキシ）カルボニル］ −Ｌ−を一ロイシンＮ−［９Ｈ−（１−１チル７　ル１５６３８　６８　（ＩＯＧ）オシニル−９− イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンＮ−［９Ｈ−（フル、ｔし＝ルー　１５６６７　６３（１００）９−イルメトキシ）カルボニル］ −り一ノルロイシンＮ　−［９Ｈ−（２，７−シメチ１５５６９　６０（ＩＯＱ）ルフルオレニルー９−メトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンＮ−［９Ｈ−（４，５−ジメチ　１５６７０　８２　Ｆ＋００）ルフルオレニルー９−メトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンＮ−（９Ｈ−［３−（２−メチ　１５６７＋　１３（１００＋ルフルオレニル− ９］　）　−Ｌ− ロイシン−し−ロイシンＮ　−（９Ｈ−Ｅ３−−ｙルオリ：　１５６７２　３４　（１００）ルー９）プロピオニル］） −り一ロイシン、ナトリウム塩Ｎ　−［９Ｈ−［１−メトキシｙｌ　１５６７３　４６（ＩＱＩＩＩチルフルオレニル−９−メトキシ）カルボニル］−Ｌ−ロイシンＮ−［９Ｈ−（フルオレニル−１５５７６８２（１００）９−イルメトキシ）カルボニルコーＬ−ネオペンチルグリシンＮ−（９Ｈ−フルオレニル−９１５６８５４２（１００）−イルプロピオニル） −Ｌ−を一ロイシンＮ−［９Ｈ−（１−メチルフル　１５８８５　４９　（１００）オシニル−９− イルプロピオニル）］−］Ｌ−ロイシン−ベンジル−β、β−ジメチ　１５９５３　６ｇ（１００）ルーＮ−［９Ｈ− （フルオレン −９−イルメトキシ）カルボニルコアシュバント関節炎体重１５０〜２００ｇの雄スプラグ・ドーリ一種ラットをイソフルランで麻酔した。薬物を０，５％メチルセルロースもしくは水にて腹腔内投与した。次いでラットには尾の遠位１／３の箇所に、１ｍｇ／ｍｌのミコバクテリウム拳ツバキュロシス（Ｍ７ｃｏｂａｃｌｅ＋ｉｕｍ　ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉ＋）を含有する０、５ｍｌの塩水または０．５ｍｌの充分音波処理されたフロイント完成アジュバントを注射した。次いでラットをその籠に戻した。アジュバント注射の１日後および２日後に各ラットの体重を測定し、ベヒクルまたは薬剤懸濁物を前記と同様であるが麻酔剤なしに投与した。３日目に各ラットの体重を測定し、次いで麻酔した。

心臓穿刺により血液を０．２ｍｌのＥＤＴＡ中に抜き取った。血液試料を３０秒間にわたり微量遠心分離した。次いでフィブリノーゲンを亜硫酸ナトリウムによりフィブリンまで変換させ、得られたフィブリンをローリ−蛋白分析により分析して初期フィブリノーゲンレベルを推定した。試験化合物による阻止％は、アジュバントのみを注射したラットおよびアジュバントと試験化合物とを注射したラットにおけるフィブリノーゲンレベルから非フロインドアジュバント注射したラットにおけるフィブリノーゲンレベルを差引くと共に、薬剤処理動物における得られたフィブリノーゲン増加を薬剤処理しない動物のそれで割算し、これに１００を掛算して決定した。

阻止％（投与量、ｍｇ／　ｋｇ）Ｎ−［９Ｈ−（２，３−ベンゾフルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］− Ｌ−ロイシン（ＮＰＣ１５５１０）Ｎ−Ｃ（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニルコーＬ−ロイシンアミド（ＮＰＣ１５５２０）この開示を完成する目的で、上記に挙げた全引例を参考のためここに引用する。

以上、明瞭に理解する目的で本発明の詳細な説明したがこの開示を読んだ当業者は本発明の真の範囲を逸脱することなく各種の改変をなしうることを了解するであろ要約書本発明は炎症症状の処置方法、この種の方法に使用するのに適した化合物および組成物に関するものであり、化合物は式（Ｉ）を有し、式においてＸはメチレン、エチレン、エチレンオキシもしくは酸素であり；Ｑは（ａ）であり、ここでＣ′は親油性アミノ酸の残基であり、Ｙは−Ｃ○ ２Ｈ１−ＣＨＯＨ，−ＣＯＮＲＩＲ２もしく　バー　ＣＯＲであり、ＲおよびＲ２は水素、アルキルもしくはアリ−ルであり；ＲおよびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり；ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロであり：或いはその医薬上許容しうる塩である。

国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】１．炎症症状の処置を必要とする動物に対し、この炎症症状を減少もしくは除去するのに充分な量の次式：▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシ、メチレンオキシまたは酸素であり；Ｑは▲数式、化学式、表等があります▼であり、ここでＣ′は親油性アミノ酸の残基であり、Ｙは−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＮＲ１Ｒ２もしくは−ＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ１およびＲ２は水素、アルキルもしくはアリールであり；Ｒ３およびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり；ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロであり、ただしＡ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素でありかつＹが−ＣＯ２Ｈまたはその許容しうる塩であればＸは酸素でなく、さらにＡもしくはＢが独立して水素もしくはハロゲンであり、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素でありかつＹが−ＣＯ２Ｈもしくはその許容しうる塩であればＣ′は芳香族アミノ酸残基でなく、さらにＸが酸素であればＡおよびＢの少なくとも一方は水素、ハロゲンもしくはニトロでない］により示される少なくとも１種の化合物またはその医薬上許容しうる塩を投与することを特徴とする炎症症状の処置方法。２．前記アルキル、アリール、融合フェニル、アルカリール、アラルキル、アルコキシもしくはアルコキシアルキル基の少なくとも１種がＣ１−４アルキルで置換される請求の範囲第１項に記載の方法。３．前記動物が哺乳動物である請求の範囲第１項に記載の方法。４．Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が独立して水素、（Ｃ１−８）アルキルもしくは（Ｃ６−１２）アリールであり；ＡおよびＢが独立して水素、融合フェニル、（Ｃ１−９）アルキル、（Ｃ６−１２）アリール、（Ｃ１−９）アルク（Ｃ６− １２）アリール、（Ｃ６−１２）アル（Ｃ１−９）アルキル、（Ｃ１−９）アルコキシ、（Ｃ１−９）アルコキシ（Ｃ１−９）アルキル、ハロゲンもしくはニトロである請求の範囲第１項に記載の方法。５．Ｘが酸素である請求の範囲第４項に記載の方法。６．Ａ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素である請求の範囲第５項に記載の方法。７．Ｃ′がＬ−ロイシン残基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第５項または第６項に記載の方法。８．Ｃ′がＬ−フェニルアラニン残基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第５項または第６項に記載の方法。９．Ｃ′がＬ−ノルロイシン残基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第６項に記載の方法。１０．Ｃ′がＳ−ベンジル−β，β−ジメチル−Ｄ−シスチン残基であり、Ｙが −ＣＯ２Ｈである請求の範囲第６項に記載の方法。１１．Ｃ′がＬ−ｔ−ロイシン残基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第６項に記載の方法。１２．Ｃ′がＬ−ネオペンチルグリシン残基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第６項に記載の方法。１３、Ｒ３およびＲ４が水素であり、ＡもしくはＢが少なくとも１個のアルキル基であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第５項に記載の方法。１４．Ａがフルオレン環の４−位置に位置するメチル基であり、Ｂが水素であり、Ｃ′がロイシン残基である請求の範囲第１３項に記載の方法。１５．Ａがフルオレン環の４−位置に位置するメチル基であり、Ｂが水素であり、Ｃ′がホモフェニルアラニン残基である請求の範囲第１３項に記載の方法。１６．Ａがフルオレン環の２−位置に位置するメチル基であり、Ｂがフルオレン環の７−位置に位置するメチル基であり、Ｃ′がロイシン残基である請求の範囲第１３項に記載の方法。１７．Ｘがメチレンである請求の範囲第１項に記載の方法。１８．Ｙが−ＣＯ２Ｈである請求の範囲第１７項に記載の方法。１９．Ａ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素である請求の範囲第１８項に記載の方法。２０．式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシ、メチレンオキシまたは酸素であり；Ｑは▲数式、化学式、表等があります▼であり、ここでＣ′は親油性アミノ酸の残基であり、Ｙは−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＮＲ１Ｒ２もしくは−ＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ１およびＲ２は水素、アルキルもしくはアリールであり；Ｒ３およびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり；ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロであり、ただしＡ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素でありかつＹが−ＣＯ２Ｈまたはその許容しうる塩であればＸは酸素でなく、さらにＡもしくはＢが独立して水素もしくはハロゲンであり、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈもしくはその許容しうる塩であればＣ′は芳香族アミノ酸残基でなく、さらにＸが酸素であればＡおよびＢの少なくとも一方は水素、ハロゲンもしくはニトロでない］化合物またはその医薬上許容しうる塩。２１．前記アルキル、アリール、融合フェニル、アルカリール、アラルキル、アルコキシもしくはアルコキシアルキル基の少なくとも１種がＣ１−４アルキルで置換される請求の範囲第２０項に記載の化合物。２２．Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が独立して水素、（Ｃ１−８）アルキルもしくは（Ｃ６−１２）アリールであり；ＡおよびＢが独立して水素、融合フェニル、（Ｃ１−９）アルキル、（Ｃ６−１２）アリール、（Ｃ１−９）アルク（Ｃ６ −１２）アリール、（Ｃ６−１２）アル（Ｃ１−９）アルキル、（Ｃ１−９）アルコキシ、（Ｃ１−９）アルコキシ（Ｃ１−９）アルキル、ハロゲンもしくはニトロである請求の範囲第２０項に記載の化合物。２３．Ｘがメチレンもしくは酸素であり、Ａ、ＢおよびＲ４が水素であり、Ｙが −ＣＯ２Ｈである請求の範囲第２２項に記載の化合物。２４．Ｒ３およびＲ４が水素であり、ＡもしくはＢが（Ｃ１−９）アルキルであり、Ｙが−ＣＯ２Ｈであり、Ｑがロイシン、イソロイシン、ノルロイシンもしくはフェニルアラニンである請求の範囲第２２項に記載の化合物。２５．Ａがフルオレン環の４−位置におけるメチル基であり、Ｂが水素であり、Ｃ′がロイシン残基またはホモフェニルアラニン残基である請求の範囲第２４項に記載の化合物。２６．Ａがフルオレン環の２−位置に位置するメチル基であり、Ｂがフルオレン環の７−位置に位置するメチル基であり、Ｃ′がロイシン残基である請求の範囲第２５項に記載の化合物。２７．Ｘがエチレン、エチレンオキシ、メチレンオキシもしくは酸素であり、Ｙが−ＣＯＮＲ１Ｒ２であり、Ｒ３およびＲ４が水素である請求の範囲第２４項に記載の化合物。２８．Ｒ１が水素であり、Ｒ２が水素、アルキルもしくはアリールである請求の範囲第２７項に記載の化合物。２９．Ｒ２がメチルであり、Ｑがロイシンである請求の範囲第２８項に記載の化合物。３０．Ａ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが−ＣＯＮＨＣＨ３であり、Ｑがロイシンである請求の範囲第２２項に記載の化合物。３１．Ａがフルオレン環の２−位置におけるメチル基であり、Ｂがフルオレン環の７−位置におけるメチル基であり、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが−ＣＯＮＨＣＯ３もしくは−ＣＯ２Ｈまたはその塩であり、Ｑがロイシンである請求の範囲第２２項に記載の化合物。３２．Ａがフルオレン環の４−位置におけるメチル基であり、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈ（もしくはその塩）であり、Ｑがロイシンである請求の範囲第２２項に記載の化合物。３３．化合物Ｎ−［９Ｈ−（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ −ロイシン。３４．化合物Ｎ−［９Ｈ−（フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ −ネオペンチルグリシン。３５．活性成分として請求の範囲第２０〜３４項に記載の化合物から選択される化合物を医薬上許容しうるキャリヤもしくは希釈剤と共に含むことを特徴とする、動物に抗炎症作用を生ぜしめるべく使用するのに適した投与単位形態物における医薬組成物。３６．活性成分として有効量の請求の範囲第２６項に記載の化合物を含むことを特徴とする、動物に抗炎症作用を生ぜしめるべく使用するのに適した投与単位形態物における医薬組成物。３７．炎症症状の処置を必要とする動物に対し、炎症症状を減少または除去するのに充分な量の次式：▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシもしくは酸素であり；Ｑは▲数式、化学式、表等があります▼であり、ここでＣ′は親油性アミノ酸の残基であり、Ｙは−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＮＲ１Ｒ２もしくは−ＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ１およびＲ２は水素、アルキルもしくはアリールであり；Ｒ３およびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり；ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロである］により示される少なくとも１種の化合物またはその医薬上許容しうる塩を投与することを特徴とする炎症症状の処置方法。３８．式Ｉ： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）［式中、Ｘはメチレン、エチレン、エチレンオキシもしくは酸素であり；Ｑは▲数式、化学式、表等があります▼であり、ここでＣ′は親油性アミノ酸の残基であり、Ｙは−ＣＯ２Ｈ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＮＲ１Ｒ２もしくは−ＣＯ２Ｒ１であり、Ｒ１およびＲ２は水素、アルキルもしくはアリールであり；Ｒ３およびＲ４は独立して水素、アルキルもしくはアリールであり；ＡおよびＢは独立して水素、融合フェニル、アルキル、アリール、アルカリール、アラルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、ハロゲンもしくはニトロであり、ただしＡ、Ｂ、Ｒ３およびＲ４が水素でありかつＹが−ＣＯ２Ｈ（またはその塩）であればＸは酸素でなく、さらにＡもしくはＢが独立して水素もしくはハロゲンであり、Ｒ３およびＲ４が水素であり、Ｘが酸素であり、Ｙが−ＣＯ２Ｈ（もしくはその塩）であればＣ′ は芳香族アミノ酸残基でない］の化合物またはその医薬上許容しうる塩。