JPH05227987A - Ｄ−パントラクトンの製造法 - Google Patents
Ｄ−パントラクトンの製造法Info
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- JPH05227987A JPH05227987A JP8260592A JP8260592A JPH05227987A JP H05227987 A JPH05227987 A JP H05227987A JP 8260592 A JP8260592 A JP 8260592A JP 8260592 A JP8260592 A JP 8260592A JP H05227987 A JPH05227987 A JP H05227987A
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- acid
- pantoic acid
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 Ｄ−パントテン酸やパンテチン製造における
中間体として有用なＤ−パントラクトンの製造法の提
供。 【構成】 Ｄ，Ｌ−パントイン酸を原料として用い、フ
サリウム属、シリンドロカルポン属、ジベレラ属、アス
ペルジラス属、ペニシリウム属、リゾプス属、ボルテラ
属、グリオクラディウム属、ユーロティウム属、ネクト
リア属、シゾフィラム属、ミロセシウム属、ノイロスポ
ラ属、アクリモニウム属、ツベルクリナ属、アブシジア
属、スポロスリクス属、バーティシリウム属またはアル
スロダーマ属に属する微生物より選ばれたＤ−パントラ
クトン加水分解能を有する微生物またはその微生物より
得られるＤ−パントラクトン加水分解酵素を用いて、
Ｄ，Ｌ−パントイン酸のＤ−体を選択的にラクトン化せ
しめてＤ−パントラクトンに変換し、そのＤ−パントラ
クトンを単離する。
中間体として有用なＤ−パントラクトンの製造法の提
供。 【構成】 Ｄ，Ｌ−パントイン酸を原料として用い、フ
サリウム属、シリンドロカルポン属、ジベレラ属、アス
ペルジラス属、ペニシリウム属、リゾプス属、ボルテラ
属、グリオクラディウム属、ユーロティウム属、ネクト
リア属、シゾフィラム属、ミロセシウム属、ノイロスポ
ラ属、アクリモニウム属、ツベルクリナ属、アブシジア
属、スポロスリクス属、バーティシリウム属またはアル
スロダーマ属に属する微生物より選ばれたＤ−パントラ
クトン加水分解能を有する微生物またはその微生物より
得られるＤ−パントラクトン加水分解酵素を用いて、
Ｄ，Ｌ−パントイン酸のＤ−体を選択的にラクトン化せ
しめてＤ−パントラクトンに変換し、そのＤ−パントラ
クトンを単離する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は医学上または生理学上重
要なビタミンとして有用なＤ−パントテン酸やパンテチ
ンの製造における中間体として有用なＤ−パントラクト
ンの新規な製造法に関する。
要なビタミンとして有用なＤ−パントテン酸やパンテチ
ンの製造における中間体として有用なＤ−パントラクト
ンの新規な製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来、Ｄ−パントラクトンは化学的に合
成されたＤ，Ｌ−パントラクトンを光学分割することに
より製造されている。しかしながら、この方法は、キニ
ーネ、ブルシン等の高価な分割剤を必要とするものであ
り、Ｄ−パントラクトンの回収も容易でない等の欠点を
有している。
成されたＤ，Ｌ−パントラクトンを光学分割することに
より製造されている。しかしながら、この方法は、キニ
ーネ、ブルシン等の高価な分割剤を必要とするものであ
り、Ｄ−パントラクトンの回収も容易でない等の欠点を
有している。
【０００３】本発明者らは先に、化学的方法の上記欠点
を解消するＤ−パントラクトンの製造法として、Ｄ−パ
ントラクトン加水分解能を有する微生物を用いて、Ｄ，
Ｌ−パントラクトンよりＤ−パントラクトンを光学分割
する方法を提供した。（特開平３−６５１９８号参照）
すなわち、この方法は、特定の微生物を用いることによ
り、Ｄ，Ｌ−パントラクトン中のＤ−パントラクトンを
選択的に不斉加水分解せしめることにより、Ｄ−パント
イン酸を生成せしめ、そのＤ−パントイン酸をＤ−パン
トラクトンに変換するという方法であり、それによっ
て、Ｄ，Ｌ−パントラクトンから効率よくＤ−パントラ
クトンを取得するというものである。
を解消するＤ−パントラクトンの製造法として、Ｄ−パ
ントラクトン加水分解能を有する微生物を用いて、Ｄ，
Ｌ−パントラクトンよりＤ−パントラクトンを光学分割
する方法を提供した。（特開平３−６５１９８号参照）
すなわち、この方法は、特定の微生物を用いることによ
り、Ｄ，Ｌ−パントラクトン中のＤ−パントラクトンを
選択的に不斉加水分解せしめることにより、Ｄ−パント
イン酸を生成せしめ、そのＤ−パントイン酸をＤ−パン
トラクトンに変換するという方法であり、それによっ
て、Ｄ，Ｌ−パントラクトンから効率よくＤ−パントラ
クトンを取得するというものである。
【０００４】本発明者らは、Ｄ，Ｌ−パントラクトンの
不斉加水分解につき、更に鋭意研究をおこなった結果、
上記のＤ−パントラクトン加水分解酵素がＤ−パントイ
ン酸を選択的にラクトン化し、Ｄ−パントラクトンを生
成するという逆反応をも触媒することを見出した。した
がって、このＤ−パントラクトン加水分解酵素を用いる
ことにより、Ｄ，Ｌ−パントイン酸中のＤ−体を選択的
に不斉ラクトン化せしめて、Ｄ−パントラクトンを生成
せしめ、そのＤ−パントラクトンを分離することによっ
て、Ｄ，Ｌ−パントイン酸から効率よくＤ−パントラク
トンを取得し得ることを見出した。本発明は、かかる知
見に基づいてなされたものである。
不斉加水分解につき、更に鋭意研究をおこなった結果、
上記のＤ−パントラクトン加水分解酵素がＤ−パントイ
ン酸を選択的にラクトン化し、Ｄ−パントラクトンを生
成するという逆反応をも触媒することを見出した。した
がって、このＤ−パントラクトン加水分解酵素を用いる
ことにより、Ｄ，Ｌ−パントイン酸中のＤ−体を選択的
に不斉ラクトン化せしめて、Ｄ−パントラクトンを生成
せしめ、そのＤ−パントラクトンを分離することによっ
て、Ｄ，Ｌ−パントイン酸から効率よくＤ−パントラク
トンを取得し得ることを見出した。本発明は、かかる知
見に基づいてなされたものである。
【０００５】
【発明の開示】本発明は、フサリウム属、シリンドロカ
ルポン属、ジベレラ属、アスペルジラス属、ペニシリウ
ム属、リゾプス属、ボルテラ属、グリオクラディウム
属、ユーロティウム属、ネクトリア属、シゾフィラム
属、ミロセシウム属、ノイロスポラ属、アクリモニウム
属、ツベルクリナ属、アブシジア属、スポロスリクス
属、バーティシリウム属またはアルスロダーマ属に属す
る微生物より選ばれたＤ−パントラクトン加水分解能を
有する微生物またはその微生物より得られるＤ−パント
ラクトン加水分解酵素を用いて、Ｄ，Ｌ−パントイン酸
を原料とし、そのＤ−体を選択的にラクトン化せしめる
ことによりＤ−パントラクトンに変換した後、これを単
離することを特徴とするＤ−パントラクトンの製造法を
提供するものである。
ルポン属、ジベレラ属、アスペルジラス属、ペニシリウ
ム属、リゾプス属、ボルテラ属、グリオクラディウム
属、ユーロティウム属、ネクトリア属、シゾフィラム
属、ミロセシウム属、ノイロスポラ属、アクリモニウム
属、ツベルクリナ属、アブシジア属、スポロスリクス
属、バーティシリウム属またはアルスロダーマ属に属す
る微生物より選ばれたＤ−パントラクトン加水分解能を
有する微生物またはその微生物より得られるＤ−パント
ラクトン加水分解酵素を用いて、Ｄ，Ｌ−パントイン酸
を原料とし、そのＤ−体を選択的にラクトン化せしめる
ことによりＤ−パントラクトンに変換した後、これを単
離することを特徴とするＤ−パントラクトンの製造法を
提供するものである。
【０００６】以下に、本発明を詳細に説明する。本発明
方法においては、原料としてＤ，Ｌ−パントイン酸が用
いられるが、このＤ，Ｌ−パントイン酸は、通常、塩の
形で使用される。そのＤ，Ｌ−パントイン酸塩はＤ，Ｌ
−パントラクトンと、カルボン酸と塩を形成する塩基性
物質とから容易に調製することができる。例えば、Ｄ，
Ｌ−パントイン酸ナトリウムの場合、Ｄ，Ｌ−パントラ
クトン水溶液に対し、当量の水酸化ナトリウムを加え、
室温で１時間、反応をおこなわせることにより、調製す
ることができる。この場合の塩としては、ナトリウム塩
に限らず、他の塩、例えば、カリウム塩、カルシウム塩
およびアンモニウム塩等、いずれも使用することができ
る。
方法においては、原料としてＤ，Ｌ−パントイン酸が用
いられるが、このＤ，Ｌ−パントイン酸は、通常、塩の
形で使用される。そのＤ，Ｌ−パントイン酸塩はＤ，Ｌ
−パントラクトンと、カルボン酸と塩を形成する塩基性
物質とから容易に調製することができる。例えば、Ｄ，
Ｌ−パントイン酸ナトリウムの場合、Ｄ，Ｌ−パントラ
クトン水溶液に対し、当量の水酸化ナトリウムを加え、
室温で１時間、反応をおこなわせることにより、調製す
ることができる。この場合の塩としては、ナトリウム塩
に限らず、他の塩、例えば、カリウム塩、カルシウム塩
およびアンモニウム塩等、いずれも使用することができ
る。
【０００７】本発明に係わる微生物はフサリウム属、シ
リンドロカルポン属、ジベレラ属、アスペルジラス属、
ペニシリウム属、リゾプス属、ボルテラ属、グリオクラ
ディウム属、ユーロティウム属、ネクトリア属、シゾフ
ィラム属、ミロセシウム属、ノイロスポラ属、アクリモ
ニウム属、ツベルクリナ属、アブシジア属、スポロスリ
クス属、バーティシリウム属またはアルスロダーマ属に
属し、Ｄ−パントラクトン加水分解能を有するもので、
その例としては、例えば、フサリウム オキシスポルム
（ＩＦＯ ５９４２）、フサリウム セミテクタム（Ｉ
ＦＯ ３０２００）、シリンドロカルポン トンキネン
ス（ＩＦＯ ３０５６１）、シリンドロカルポン スク
レロティゲナム（ＩＦＯ ３１８５５）、ジベレラ フ
ジクロイ（ＩＦＯ ６３４９）、アスペルジラス アワ
モリ（ＩＦＯ ４０３３）、ペニシリウム クリソゲナ
ム（ＩＦＯ ４６２６）、リゾプス オリザエ（ＩＦＯ
４７０６）、ボルテラ ブクシ（ＩＦＯ ６００３）、
グリオクラディウム カテヌラタム（ＩＦＯ ６１２
１）、ユーロティウム シェバリエリ（ＩＦＯ ４３３
４）、ネクトリア エレガンス（ＩＦＯ ７１８７）、
シゾフィラム コムネ（ＩＦＯ ４９２８）、ミロセシ
ウム ロリダム（ＩＦＯ ９５３１）、ノイロスポラ
クラッサ（ＩＦＯ ６０６７）、アクリモニウム フシ
ディオイデス（ＩＦＯ ６８１３）、ツベルクリナ ペ
ルシシナ（ＩＦＯ ６４６４）、アブシジア リヒセイ
ミ（ＩＦＯ ４００９）、スプロスリクス シェンキ
（ＩＦＯ５９８３）、バーティシリウム マルトウセイ
（ＩＦＯ ６６２４）、アルスロダーマ ウンシナトウ
ム（ＩＦＯ ７８６５）をあげることができる。
リンドロカルポン属、ジベレラ属、アスペルジラス属、
ペニシリウム属、リゾプス属、ボルテラ属、グリオクラ
ディウム属、ユーロティウム属、ネクトリア属、シゾフ
ィラム属、ミロセシウム属、ノイロスポラ属、アクリモ
ニウム属、ツベルクリナ属、アブシジア属、スポロスリ
クス属、バーティシリウム属またはアルスロダーマ属に
属し、Ｄ−パントラクトン加水分解能を有するもので、
その例としては、例えば、フサリウム オキシスポルム
（ＩＦＯ ５９４２）、フサリウム セミテクタム（Ｉ
ＦＯ ３０２００）、シリンドロカルポン トンキネン
ス（ＩＦＯ ３０５６１）、シリンドロカルポン スク
レロティゲナム（ＩＦＯ ３１８５５）、ジベレラ フ
ジクロイ（ＩＦＯ ６３４９）、アスペルジラス アワ
モリ（ＩＦＯ ４０３３）、ペニシリウム クリソゲナ
ム（ＩＦＯ ４６２６）、リゾプス オリザエ（ＩＦＯ
４７０６）、ボルテラ ブクシ（ＩＦＯ ６００３）、
グリオクラディウム カテヌラタム（ＩＦＯ ６１２
１）、ユーロティウム シェバリエリ（ＩＦＯ ４３３
４）、ネクトリア エレガンス（ＩＦＯ ７１８７）、
シゾフィラム コムネ（ＩＦＯ ４９２８）、ミロセシ
ウム ロリダム（ＩＦＯ ９５３１）、ノイロスポラ
クラッサ（ＩＦＯ ６０６７）、アクリモニウム フシ
ディオイデス（ＩＦＯ ６８１３）、ツベルクリナ ペ
ルシシナ（ＩＦＯ ６４６４）、アブシジア リヒセイ
ミ（ＩＦＯ ４００９）、スプロスリクス シェンキ
（ＩＦＯ５９８３）、バーティシリウム マルトウセイ
（ＩＦＯ ６６２４）、アルスロダーマ ウンシナトウ
ム（ＩＦＯ ７８６５）をあげることができる。
【０００８】また、これらの微生物の培養および上記の
Ｄ−パントラクトン加水分解酵素の精製は下記の如くし
ておこなうことができる。すなわち、培養にあたり使用
する培地としては炭素源、窒素源、無機物、その他の栄
養素を適宜含有する培地であれば合成培地または天然培
地のいずれでもよい。
Ｄ−パントラクトン加水分解酵素の精製は下記の如くし
ておこなうことができる。すなわち、培養にあたり使用
する培地としては炭素源、窒素源、無機物、その他の栄
養素を適宜含有する培地であれば合成培地または天然培
地のいずれでもよい。
【０００９】炭素源としてはグルコース、シュクロース
等の糖質、エタノール、グリセリン等のアルコール類、
オレイン酸、ステアリン酸等の脂肪酸およびそのエステ
ル類、菜種油、大豆油等の油類、窒素源として、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ナトリウム、ペプトン、カザミノ酸、
コーンスティープリカー、ふすま、酵母エキス等、無機
塩類として、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、炭酸
カルシウム、リン酸一水素カリウム、リン酸二水素カリ
ウム等、他の栄養素として、麦芽エキス、肉エキス等を
含有する培地を用いる。
等の糖質、エタノール、グリセリン等のアルコール類、
オレイン酸、ステアリン酸等の脂肪酸およびそのエステ
ル類、菜種油、大豆油等の油類、窒素源として、硫酸ア
ンモニウム、硝酸ナトリウム、ペプトン、カザミノ酸、
コーンスティープリカー、ふすま、酵母エキス等、無機
塩類として、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、炭酸
カルシウム、リン酸一水素カリウム、リン酸二水素カリ
ウム等、他の栄養素として、麦芽エキス、肉エキス等を
含有する培地を用いる。
【００１０】培養は好気的におこない、通常、培養時間
は１〜７日程度、培地のｐＨは３〜９、培養温度は１０
〜５０℃でおこなう。本発明方法において、使用する微
生物源としては、液体培地に菌株を培養して得られた培
養物、培養液から分離した菌体、あるいは菌体または培
養物を処理して得られる乾燥菌体、もしくは固定化菌体
等のいずれの形態のものも用いることができる。また、
Ｄ−パントラクトン加水分解酵素は、当該微生物の培養
終了後、培養液を濾過または遠心分離して得られる菌体
を機械的破砕により調製した無細胞抽出液から酵素単離
の常法によって採取される。その方法としては、例え
ば、硫安沈殿法、イオン交換クロマトグラフィー法、ア
フィニティークロマトグラフィー法、ゲル濾過法、限外
濾過法等の方法があげられるが、これらを適宜くみあわ
せて用いる。
は１〜７日程度、培地のｐＨは３〜９、培養温度は１０
〜５０℃でおこなう。本発明方法において、使用する微
生物源としては、液体培地に菌株を培養して得られた培
養物、培養液から分離した菌体、あるいは菌体または培
養物を処理して得られる乾燥菌体、もしくは固定化菌体
等のいずれの形態のものも用いることができる。また、
Ｄ−パントラクトン加水分解酵素は、当該微生物の培養
終了後、培養液を濾過または遠心分離して得られる菌体
を機械的破砕により調製した無細胞抽出液から酵素単離
の常法によって採取される。その方法としては、例え
ば、硫安沈殿法、イオン交換クロマトグラフィー法、ア
フィニティークロマトグラフィー法、ゲル濾過法、限外
濾過法等の方法があげられるが、これらを適宜くみあわ
せて用いる。
【００１１】菌体外の培養液中に蓄積する酵素について
は、菌体分離後の培養液を上記の酵素単離の常法を適宜
くみあわせて処理することにより、これを取得すること
ができる。本発明方法において、使用されるＤ−パント
ラクトン加水分解酵素としては、無細胞抽出液をはじ
め、いずれの精製段階のものも使用でき、あるいは、ま
た、種々の方法で調製した固定化酵素も使用することが
できる。
は、菌体分離後の培養液を上記の酵素単離の常法を適宜
くみあわせて処理することにより、これを取得すること
ができる。本発明方法において、使用されるＤ−パント
ラクトン加水分解酵素としては、無細胞抽出液をはじ
め、いずれの精製段階のものも使用でき、あるいは、ま
た、種々の方法で調製した固定化酵素も使用することが
できる。
【００１２】操作は回分式、半回分式、または連続式の
いずれでもおこなうことができる。使用するＤ，Ｌ−パ
ントイン酸の濃度は、通常、１０〜５００ｇ／リットル
である。反応温度は、通常、１０〜５０℃であり、また
至適反応温度は、通常、３０〜５０℃である。反応時間
は、回分式の場合、通常、数時間から１日である。反応
系のｐＨは、通常、３〜６程度であり、また至適ｐＨ
は、通常、４〜５である。反応に使用する溶媒は、水以
外に、水と混和する有機溶媒や水と混和しない有機溶媒
等も使用することができる。
いずれでもおこなうことができる。使用するＤ，Ｌ−パ
ントイン酸の濃度は、通常、１０〜５００ｇ／リットル
である。反応温度は、通常、１０〜５０℃であり、また
至適反応温度は、通常、３０〜５０℃である。反応時間
は、回分式の場合、通常、数時間から１日である。反応
系のｐＨは、通常、３〜６程度であり、また至適ｐＨ
は、通常、４〜５である。反応に使用する溶媒は、水以
外に、水と混和する有機溶媒や水と混和しない有機溶媒
等も使用することができる。
【００１３】反応は、Ｄ，Ｌ−パントイン酸のＤ−体選
択的不斉ラクトン化が進行するにつれ、反応液のｐＨが
高くなり、反応速度が低下する。反応速度を大きくする
ため、反応液のｐＨをＤ−ラクトン加水分解酵素のラク
トン化至適ｐＨに保持することが好ましい。その際、ｐ
Ｈを保持するための酸としては、酢酸、塩酸、硫酸等が
用いられる。反応終了後、不斉ラクトン化をうけて生成
したＤ−パントラクトンを有機溶媒による抽出等の操作
により単離することができる。生成したＤ−パントラク
トンを分離した後、反応液中に残存しているＬ−パント
イン酸は常法によりラセミ化し、再び本発明方法の原料
として使用することができる。
択的不斉ラクトン化が進行するにつれ、反応液のｐＨが
高くなり、反応速度が低下する。反応速度を大きくする
ため、反応液のｐＨをＤ−ラクトン加水分解酵素のラク
トン化至適ｐＨに保持することが好ましい。その際、ｐ
Ｈを保持するための酸としては、酢酸、塩酸、硫酸等が
用いられる。反応終了後、不斉ラクトン化をうけて生成
したＤ−パントラクトンを有機溶媒による抽出等の操作
により単離することができる。生成したＤ−パントラク
トンを分離した後、反応液中に残存しているＬ−パント
イン酸は常法によりラセミ化し、再び本発明方法の原料
として使用することができる。
【００１４】したがって、本発明は、前述のＤ，Ｌ−パ
ントラクトン中のＤ−パントラクトンを選択的に不斉加
水分解する方法に較べ、Ｄ，Ｌ−パントイン酸から目的
物のＤ−パントラクトンを直接ラクトンのまま、光学純
度よく取得できることならびに、Ｄ−パントラクトンを
分離した反応終了液に残存するＬ−パントイン酸をその
ままラセミ化し、原料のＤ，Ｌ−パントイン酸として再
使用することが可能であること等、多くの利点を有す
る。以下に実施例を揚げ、本発明を更に具体的に説明す
るが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。
ントラクトン中のＤ−パントラクトンを選択的に不斉加
水分解する方法に較べ、Ｄ，Ｌ−パントイン酸から目的
物のＤ−パントラクトンを直接ラクトンのまま、光学純
度よく取得できることならびに、Ｄ−パントラクトンを
分離した反応終了液に残存するＬ−パントイン酸をその
ままラセミ化し、原料のＤ，Ｌ−パントイン酸として再
使用することが可能であること等、多くの利点を有す
る。以下に実施例を揚げ、本発明を更に具体的に説明す
るが、本発明はこれら実施例に限定されるものではな
い。
【００１５】
実施例１〜３ 各例ともに、シュクロース３％、硝酸ナトリウム０．３
％、リン酸二水素カリウム０．１％、塩化カリウム０．
０５％、硫酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．
００１％、からなる液体培地（ｐＨ６．０）を坂口フラ
スコに２００ｍｌ入れ、１１５℃で２０分、加熱滅菌し
た。各々の坂口フラスコ内の培地に、表１に記載した各
種の菌株をそれぞれ、接種し、２８℃で５日間、好気的
に振盪培養した。培養後、濾過により得られた湿菌体に
１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）２５ｍｌ、５％Ｄ，Ｌ−
パントイン酸ナトリウム１２．５ｍｌ、１００ｍＭ塩化
カルシウム水溶液０．５ｍｌおよび水１２ｍｌを加え、
３０℃で１４時間、反応をおこなった。反応終了後、菌
体を濾過し、濾液を酢酸エチルで抽出した。得られた酢
酸エチル層を濃縮乾固することにより、Ｄ−パントラク
トンが得られた。得られたＤ−パントラクトンの光学純
度はＧＬＣ（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ，１１２，９−１９（１９８１））にて測定し
た。その結果は表１に示す通りである。
％、リン酸二水素カリウム０．１％、塩化カリウム０．
０５％、硫酸マグネシウム０．０５％、硫酸第一鉄０．
００１％、からなる液体培地（ｐＨ６．０）を坂口フラ
スコに２００ｍｌ入れ、１１５℃で２０分、加熱滅菌し
た。各々の坂口フラスコ内の培地に、表１に記載した各
種の菌株をそれぞれ、接種し、２８℃で５日間、好気的
に振盪培養した。培養後、濾過により得られた湿菌体に
１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）２５ｍｌ、５％Ｄ，Ｌ−
パントイン酸ナトリウム１２．５ｍｌ、１００ｍＭ塩化
カルシウム水溶液０．５ｍｌおよび水１２ｍｌを加え、
３０℃で１４時間、反応をおこなった。反応終了後、菌
体を濾過し、濾液を酢酸エチルで抽出した。得られた酢
酸エチル層を濃縮乾固することにより、Ｄ−パントラク
トンが得られた。得られたＤ−パントラクトンの光学純
度はＧＬＣ（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ，１１２，９−１９（１９８１））にて測定し
た。その結果は表１に示す通りである。
【００１６】
【表１】 註：ＩＦＯ Ｎｏ．は、財団法人醗酵研究所カタログ番
号を示す。
号を示す。
【００１７】実施例４ 実施例１と同様の操作で得られたフサリウム オキシス
ポルム（ＩＦＯ ５９４２）の湿菌体５ｇに２０ｍＭト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）８０ｍｌを加え、ダイ
ノミルで摩砕後、遠心分離により無細胞抽出液を得た。
同緩衝液で透析をおこない、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｃｅ
１カラムに負荷し、塩化カリウムの直線濃度勾配（０→
０．３Ｍ）で溶離した。溶出した酵素活性画分を上記と
同様の透析をおこない、得られた酵素溶液３．８ｍｌに
１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）４ｍｌ、１００ｍＭ塩化
カルシウム水溶液０．２ｍｌおよび５００ｍＭ Ｄ，Ｌ
−パントイン酸ナトリウム１２ｍｌを加え、３０℃で２
時間反応をおこなった。反応終了後、反応液を酢酸エチ
ルで抽出した。得られた酢酸エチル層を濃縮乾固し、Ｄ
−パントラクトン２００ｍｇ（Ｙ：２５．６％、光学純
度：８７％ｅ．ｅ．）を得た。
ポルム（ＩＦＯ ５９４２）の湿菌体５ｇに２０ｍＭト
リス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）８０ｍｌを加え、ダイ
ノミルで摩砕後、遠心分離により無細胞抽出液を得た。
同緩衝液で透析をおこない、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｃｅ
１カラムに負荷し、塩化カリウムの直線濃度勾配（０→
０．３Ｍ）で溶離した。溶出した酵素活性画分を上記と
同様の透析をおこない、得られた酵素溶液３．８ｍｌに
１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ４．５）４ｍｌ、１００ｍＭ塩化
カルシウム水溶液０．２ｍｌおよび５００ｍＭ Ｄ，Ｌ
−パントイン酸ナトリウム１２ｍｌを加え、３０℃で２
時間反応をおこなった。反応終了後、反応液を酢酸エチ
ルで抽出した。得られた酢酸エチル層を濃縮乾固し、Ｄ
−パントラクトン２００ｍｇ（Ｙ：２５．６％、光学純
度：８７％ｅ．ｅ．）を得た。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:665） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:82） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:845） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:65）
Claims (1)
- 【請求項１】 Ｄ，Ｌ−パントイン酸を原料として用
い、フサリウム属、シリンドロカルポン属、ジベレラ
属、アスペルジラス属、ペニシリウム属、リゾプス属、
ボルテラ属、グリオクラディウム属、ユーロティウム
属、ネクトリア属、シゾフィラム属、ミロセシウム属、
ノイロスポラ属、アクリモニウム属、ツベルクリナ属、
アブシジア属、スポロスリクス属、バーティシリウム属
またはアルスロダーマ属に属する微生物より選ばれたＤ
−パントラクトン加水分解能を有する微生物またはその
微生物より得られるＤ−パントラクトン加水分解酵素を
用いて、Ｄ，Ｌ−パントイン酸におけるＤ−体のみを選
択的にラクトン化せしめることによりＤ−パントラクト
ンに変換し、そのＤ−パントラクトンを単離することを
特徴とするＤ−パントラクトンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8260592A JP3126063B2 (ja) | 1992-02-21 | 1992-02-21 | Ｄ−パントラクトンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8260592A JP3126063B2 (ja) | 1992-02-21 | 1992-02-21 | Ｄ−パントラクトンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05227987A true JPH05227987A (ja) | 1993-09-07 |
| JP3126063B2 JP3126063B2 (ja) | 2001-01-22 |
Family
ID=13779115
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8260592A Expired - Fee Related JP3126063B2 (ja) | 1992-02-21 | 1992-02-21 | Ｄ−パントラクトンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3126063B2 (ja) |
-
1992
- 1992-02-21 JP JP8260592A patent/JP3126063B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3126063B2 (ja) | 2001-01-22 |
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