JPH05178881A - 新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８物質およびその製造法 - Google Patents
新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８物質およびその製造法Info
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- JPH05178881A JPH05178881A JP34052991A JP34052991A JPH05178881A JP H05178881 A JPH05178881 A JP H05178881A JP 34052991 A JP34052991 A JP 34052991A JP 34052991 A JP34052991 A JP 34052991A JP H05178881 A JPH05178881 A JP H05178881A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】放線菌の培養法により新規抗生物質SF2748物質
を提供する。 【構成】アミコラトプシス・エスピー・SF2748株を通常
の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養し、
得られた培養物中から溶剤抽出法、シリカゲル・カラム
クロマト法等を用いて目的物を単離した。新規抗生物質
SF2748物質の分子式は、Ｃ44Ｈ80Ｎ2Ｏ14である。
を提供する。 【構成】アミコラトプシス・エスピー・SF2748株を通常
の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地で培養し、
得られた培養物中から溶剤抽出法、シリカゲル・カラム
クロマト法等を用いて目的物を単離した。新規抗生物質
SF2748物質の分子式は、Ｃ44Ｈ80Ｎ2Ｏ14である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、新規抗生物質SF2748物
質またはSF2748物質の塩、ならびにその製造法に関す
る。
質またはSF2748物質の塩、ならびにその製造法に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】本発明による抗生物質SF2748物質と理化
学的性状が類似する化合物として、メガロマイシンＡ，
Ｂ，Ｃ1，Ｃ2（megalomicin A, B, C1, C2）［Weinstei
n ら、J. Antibiotics 22: 253〜258, 1969、Thangら、
J. Am. Chem. Soc. 100: 663〜666, 1978］、XK-41-B2
［Eganら、J. Antibiotics 27: 493〜501, 1974］等が
あるが、SF2748物質はこれらの既知化合物とは分子式が
異なり明確に区別される。
学的性状が類似する化合物として、メガロマイシンＡ，
Ｂ，Ｃ1，Ｃ2（megalomicin A, B, C1, C2）［Weinstei
n ら、J. Antibiotics 22: 253〜258, 1969、Thangら、
J. Am. Chem. Soc. 100: 663〜666, 1978］、XK-41-B2
［Eganら、J. Antibiotics 27: 493〜501, 1974］等が
あるが、SF2748物質はこれらの既知化合物とは分子式が
異なり明確に区別される。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】従来、微生物が生産す
る種々の抗生物質が知られているが、臨床において有用
なマクロライド抗生物質はそれ程多く見出されていない
ため、新規なマクロライド抗生物質の出現が常に要望さ
れている。特にエリスロマイシン型の14員環マクロライ
ド抗生物質の開発に於いては、胃酸に対する安定性の改
善が重要となっている。本発明者らは、アミコラトプシ
ス属に属する１菌株の培養物中から酸に比較的安定な14
員環マクロライド抗生物質SF2748物質を単離し、本発明
を完成させた。さらに本発明の目的は、新規マクロライ
ド抗生物質SF2748物質またはSF2748物質の塩ならびにそ
の製造法を提供することにある。
る種々の抗生物質が知られているが、臨床において有用
なマクロライド抗生物質はそれ程多く見出されていない
ため、新規なマクロライド抗生物質の出現が常に要望さ
れている。特にエリスロマイシン型の14員環マクロライ
ド抗生物質の開発に於いては、胃酸に対する安定性の改
善が重要となっている。本発明者らは、アミコラトプシ
ス属に属する１菌株の培養物中から酸に比較的安定な14
員環マクロライド抗生物質SF2748物質を単離し、本発明
を完成させた。さらに本発明の目的は、新規マクロライ
ド抗生物質SF2748物質またはSF2748物質の塩ならびにそ
の製造法を提供することにある。
【０００４】
【課題を解決するための手段】第１の本発明の要旨とす
るところは、新規抗生物質SF2748物質およびその塩にあ
る。本発明によるSF2748物質の理化学的および生物学的
性状は次の通りである。
るところは、新規抗生物質SF2748物質およびその塩にあ
る。本発明によるSF2748物質の理化学的および生物学的
性状は次の通りである。
【０００５】１．SF2748物質の理化学的性状 （１） 色および形状：白色粉末 （２） 分子式 ：Ｃ44Ｈ80Ｎ2Ｏ14 （３） マススペクトル (EI-MS) ： 860 (M+) （４） 比旋光度 ：D[α]23 = -94°(c 1.0, CH3CH2O
H) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm (1cmE1% ) [MeOH]： 210 (18), 260 (3.1) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3500, 2970, 2940, 2870, 2830, 2780,
1720, 1640,1460, 1380, 1340, 1270, 1255, 1180, 114
5, 1120,1075, 1055, 1005, 950, 900, 870, 845, 825,
785,760
H) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm (1cmE1% ) [MeOH]： 210 (18), 260 (3.1) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3500, 2970, 2940, 2870, 2830, 2780,
1720, 1640,1460, 1380, 1340, 1270, 1255, 1180, 114
5, 1120,1075, 1055, 1005, 950, 900, 870, 845, 825,
785,760
【０００６】（７） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz,
CDCl3) δ(ppm)： 2.97 (dq, 2-H), 4.77 (dd, 3-H), 2.14 (b
r dq, 4-H),3.89 (d, 5-H), 1.70 (br d, 7-H), 2.02
(dd, 7-H),2.52 (br dq, 8-H), 3.00 (br q, 10-H), 3.
65 (br d,11-H), 1.64 (br dq, 12-H), 5.48 (br dd, 1
3-H),1.47 (ddq, 14-H), 1.72 (m, 14-H), 0.87 (t, 15
-H),1.24 (d, 16-H), 1.14 (d, 17-H), 1.61 (s, 18-
H),1.13 (d, 19-H), 0.98 (d, 20-H), 0.87 (d, 21-H),
4.32 (d, 1'-H), 3.21 (dd, 2'-H), 2.44 (ddd, 3'-H),
2.27 (s, 3'-N(CH3)2), 1.23 (m, 4'-Hax), 1.68 (m,4'
-Heq), 3.54 (ddq, 5'-H), 1.25 (d, 6'-H), 5.16(br
d, 1"-H), 1.79 (dd, 2"-Hax), 2.21 (br d, 2"-Heq),
2.96 (d, 4"-H), 3.96 (dq, 5"-H), 1.33 (d,6"-H), 1.
25 (s, 7"-H), 4.90 (dd, 1"'-H), 1.76 (ddd, 2"'-Ha
x), 1.57 (ddd, 2"'-Heq), 2.34 (m, 3"'-H),2.34 (s,
3"'-N(CH3)2), 3.57 (br dd, 4"'-H), 4.32(dq, 5"'-
H), 1.17 (d, 6"'-H)
CDCl3) δ(ppm)： 2.97 (dq, 2-H), 4.77 (dd, 3-H), 2.14 (b
r dq, 4-H),3.89 (d, 5-H), 1.70 (br d, 7-H), 2.02
(dd, 7-H),2.52 (br dq, 8-H), 3.00 (br q, 10-H), 3.
65 (br d,11-H), 1.64 (br dq, 12-H), 5.48 (br dd, 1
3-H),1.47 (ddq, 14-H), 1.72 (m, 14-H), 0.87 (t, 15
-H),1.24 (d, 16-H), 1.14 (d, 17-H), 1.61 (s, 18-
H),1.13 (d, 19-H), 0.98 (d, 20-H), 0.87 (d, 21-H),
4.32 (d, 1'-H), 3.21 (dd, 2'-H), 2.44 (ddd, 3'-H),
2.27 (s, 3'-N(CH3)2), 1.23 (m, 4'-Hax), 1.68 (m,4'
-Heq), 3.54 (ddq, 5'-H), 1.25 (d, 6'-H), 5.16(br
d, 1"-H), 1.79 (dd, 2"-Hax), 2.21 (br d, 2"-Heq),
2.96 (d, 4"-H), 3.96 (dq, 5"-H), 1.33 (d,6"-H), 1.
25 (s, 7"-H), 4.90 (dd, 1"'-H), 1.76 (ddd, 2"'-Ha
x), 1.57 (ddd, 2"'-Heq), 2.34 (m, 3"'-H),2.34 (s,
3"'-N(CH3)2), 3.57 (br dd, 4"'-H), 4.32(dq, 5"'-
H), 1.17 (d, 6"'-H)
【０００７】（８） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz,
CDCl3) δ(ppm)： 175.7 (s, C-1), 44.7 (d, C-2), 83.3 (d,
C-3), 37.6(d, C-4), 85.2 (d, C-5), 80.5 (s, C-6),
38.4 (t, C-7), 45.8 (d, C-8), 220.6 (s, C-9), 37.
5 (d, C-10), 69.0 (d, C-11), 40.4 (d, C-12), 74.9
(d, C-13),25.9 (t, C-14), 10.4 (q, C-15), 16.3 (q,
C-16),9.5 (q, C-17), 18.5 (q, C-18), 18.9 (q, C-1
9), 9.9(q, C-20), 9.0 (q, C-21), 104.5 (d, C-1'),
71.1 (d, C-2'), 65.5 (d, C-3'), 28.5 (t, C-4'), 6
9.3 (d,C-5'), 21.5 (q, C-6'), 40.2 (q, 3'-N(C
H3)2), 98.5(d, C-1"), 41.0 (t, C-2"), 69.7 (s, C-
3"), 76.6 (d, C-4"), 65.2 (d, C-5"), 18.3 (q, C-
6"), 25.7 (q,C-7"), 90.2 (d, C-1"'), 28.0 (t, C-
2"'), 59.4 (d,C-3"'), 67.2 (d, C-4"'), 73.3 (d, C-
5"'), 15.0 (q,C-6"'), 42.5 (q, 3"'-N(CH3)2) （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性水およびア
ルカリ性水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質 SF2748物質の塩としては、薬学的に許容される無機酸あ
るいは有機酸との塩がある。前記の物理化学的性状か
ら、SF2748物質の構造を下記のように推定した。
CDCl3) δ(ppm)： 175.7 (s, C-1), 44.7 (d, C-2), 83.3 (d,
C-3), 37.6(d, C-4), 85.2 (d, C-5), 80.5 (s, C-6),
38.4 (t, C-7), 45.8 (d, C-8), 220.6 (s, C-9), 37.
5 (d, C-10), 69.0 (d, C-11), 40.4 (d, C-12), 74.9
(d, C-13),25.9 (t, C-14), 10.4 (q, C-15), 16.3 (q,
C-16),9.5 (q, C-17), 18.5 (q, C-18), 18.9 (q, C-1
9), 9.9(q, C-20), 9.0 (q, C-21), 104.5 (d, C-1'),
71.1 (d, C-2'), 65.5 (d, C-3'), 28.5 (t, C-4'), 6
9.3 (d,C-5'), 21.5 (q, C-6'), 40.2 (q, 3'-N(C
H3)2), 98.5(d, C-1"), 41.0 (t, C-2"), 69.7 (s, C-
3"), 76.6 (d, C-4"), 65.2 (d, C-5"), 18.3 (q, C-
6"), 25.7 (q,C-7"), 90.2 (d, C-1"'), 28.0 (t, C-
2"'), 59.4 (d,C-3"'), 67.2 (d, C-4"'), 73.3 (d, C-
5"'), 15.0 (q,C-6"'), 42.5 (q, 3"'-N(CH3)2) （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性水およびア
ルカリ性水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質 SF2748物質の塩としては、薬学的に許容される無機酸あ
るいは有機酸との塩がある。前記の物理化学的性状か
ら、SF2748物質の構造を下記のように推定した。
【０００８】
【化１】
【０００９】２．SF2748物質の生物活性 本発明によるSF2748物質の各種細菌に対する最小発育阻
止濃度を表１に示した。
止濃度を表１に示した。
【００１０】
【表１】 表１ 最小発育阻止濃度 (μg/ml) 被検菌 SF2748物質 Staphylococcus aureus 209P JC-1 6.25 Staphylococcus aureus M133 >100 Staphylococcus aureus M126 >100 Staphylococcus aureus MS15009/PMS99* >100 Staphylococcus aureus MS15026* >100 Staphylococcus aureus MS15009/PMS98* >100 Staphylococcus aureus MS15027* >100 Staphylococcus epidermidis ATCC 14990 12.5 Micrococcus luteus ATCC 9341 0.78 Enterococcus faecalis W-73 12.5 Escherichia coli NIHJ JC-2 >100 Klebsiella pneumoniae PCI 602 >100 Streptococcus pneumoniae IP692 0.78 Streptococcus pneumoniae Type Ｉ 0.78 Streptococcus pyogenes Cook 1.56 Branhamella catarrhalis W-0500 25 Branhamella catarrhalis W-0506 25 Haemophilus influenzae 9334 25 * エリスロマイシン耐性菌
【００１１】第２の本発明の要旨とするところは、放線
菌に属する抗生物質SF2748物質生産菌を培養し、その培
養物からSF2748物質を採取するSF2748物質の製造法にあ
る。本発明に使用される抗生物質SF2748物質生産菌の一
例としては、横浜市の土壌から分離されたSF2748株があ
る。
菌に属する抗生物質SF2748物質生産菌を培養し、その培
養物からSF2748物質を採取するSF2748物質の製造法にあ
る。本発明に使用される抗生物質SF2748物質生産菌の一
例としては、横浜市の土壌から分離されたSF2748株があ
る。
【００１２】１）SF2748株の菌学的性状 Ｉ．形態 基生菌糸は長く伸長し、よく分岐し、通常の条件下では
分断しない。気菌糸は栄養寒天、シュクロース・硝酸塩
寒天、グルコース・アスパラギン寒天等で豊富に着生し
胞子形成も良好である。気菌糸の分岐は比較的少なく、
車軸分岐は見られない。気菌糸先端の胞子連鎖は直線状
である。電子顕微鏡による観察では、胞子は円筒型で、
0.4〜0.7 x 1.0〜1.7μmの大きさを有し、表面は平滑状
で通常20個以上連鎖する。胞子のう、運動性胞子、菌核
などは観察されていない。
分断しない。気菌糸は栄養寒天、シュクロース・硝酸塩
寒天、グルコース・アスパラギン寒天等で豊富に着生し
胞子形成も良好である。気菌糸の分岐は比較的少なく、
車軸分岐は見られない。気菌糸先端の胞子連鎖は直線状
である。電子顕微鏡による観察では、胞子は円筒型で、
0.4〜0.7 x 1.0〜1.7μmの大きさを有し、表面は平滑状
で通常20個以上連鎖する。胞子のう、運動性胞子、菌核
などは観察されていない。
【００１３】II．各種培地上の生育状態 SF2748株の各種培地上の生育状態は表２に示す通りであ
る。色の記載について（ ）内に示す標準は、コンテイ
ナー・コーポレーション・オブ・アメリカ（Container
Corporation of America）社製の「カラー・ハーモニー
・マニュアル（Color Harmony Manual）」に記載のもの
を用いた。観察は28℃で14〜21日培養後に行った。
る。色の記載について（ ）内に示す標準は、コンテイ
ナー・コーポレーション・オブ・アメリカ（Container
Corporation of America）社製の「カラー・ハーモニー
・マニュアル（Color Harmony Manual）」に記載のもの
を用いた。観察は28℃で14〜21日培養後に行った。
【００１４】
【表２】 表２ 培 地 発育（色は裏面） 気 菌 糸 可溶性色素 シュクロース・ 良好 豊富 なし 硝酸塩寒天 白色(a) グルコース・ 良好 豊富 なし アスパラギン寒天 白色(a) グリセロール・ 良好、茶褐色(3pg) 中程度 なし アスパラギン寒天 白色(a) スターチ寒天 普通 中程度 白色(a) なし オートミール寒天 微弱 中程度 白色(a) なし イースト・ 普通、薄茶色(3nc) 中程度 なし 麦芽寒天 白色(a) チロシン寒天 微弱 貧弱 なし 栄養寒天 普通 豊富 白色(a) なし リンゴ酸・ 良好 貧弱 なし カルシウム寒天 ベネット寒天 微弱 貧弱 なし
【００１５】III．生理的性質 （１）生育温度範囲： イースト・スターチ寒天におい
て15〜42℃の温度範囲で生育し、20〜30℃付近で良好に
生育する。 （２）ゼラチンの液化 ： 陰性 （３）スターチの加水分解 ： 陽性 （４）硝酸塩の還元 ： 陰性 （５）脱脂乳のペプトン化 ： 陰性 脱脂乳の凝固 ： 陽性 （６）耐塩性 ： 5％NaCl含有培地では生育する
が、7％以上では殆ど生育しない。 （７）メラニン様色素の生成： 陰性（ペプトン・イー
スト・鉄寒天培地）
て15〜42℃の温度範囲で生育し、20〜30℃付近で良好に
生育する。 （２）ゼラチンの液化 ： 陰性 （３）スターチの加水分解 ： 陽性 （４）硝酸塩の還元 ： 陰性 （５）脱脂乳のペプトン化 ： 陰性 脱脂乳の凝固 ： 陽性 （６）耐塩性 ： 5％NaCl含有培地では生育する
が、7％以上では殆ど生育しない。 （７）メラニン様色素の生成： 陰性（ペプトン・イー
スト・鉄寒天培地）
【００１６】IV．炭素源の利用性（ＩＳＰ−９培地使
用） （１）利用する ：D−グルコース、D−フラクトー
ス、グリセロール、D−キシロース、マンニトール、
シュクロース L-アラビノース、L-ラムノース （２）利用ない ：myo-イノシトール、ラフィノース
用） （１）利用する ：D−グルコース、D−フラクトー
ス、グリセロール、D−キシロース、マンニトール、
シュクロース L-アラビノース、L-ラムノース （２）利用ない ：myo-イノシトール、ラフィノース
【００１７】Ｖ．菌体分析 ベッカー（Becker）らの方法（Appl. Microbiol. 13: 2
36, 1965）により分析した結果、全菌体加水分解物中の
ジアミノピメリン酸はメソ型であり、糖成分としてアラ
ビノース及びガラクトースが検出された。全細胞からリ
ン脂質としてホスファチジルエタノールアミンを含むＰ
II型であり、主たるメナキノンはＭＫ−９（Ｈ4）であ
った。ミコール酸は検出されなかった。
36, 1965）により分析した結果、全菌体加水分解物中の
ジアミノピメリン酸はメソ型であり、糖成分としてアラ
ビノース及びガラクトースが検出された。全細胞からリ
ン脂質としてホスファチジルエタノールアミンを含むＰ
II型であり、主たるメナキノンはＭＫ−９（Ｈ4）であ
った。ミコール酸は検出されなかった。
【００１８】以上の菌学的性状より、SF2748株は放線菌
の中でアミコラトプシス属に属し、気菌糸色調は”ホワ
イト・シリーズ”、気菌糸先端は直線状で、胞子表面は
平滑状、裏面色調は、茶褐色系で、可溶性色素を生産し
ない菌株と要約される。本発明者らは SF2748株をアミ
コラトプシス・エスピー・SF2748（Amycolatopsis sp.S
F2748）と命名した。なお、本菌株は工業技術院微生物
工業技術研究所に、微工研菌寄第１２６６７号（FERM P
-１２６６７）として受託されている。SF2748株は、他
の放線菌に見られるようにその性状が変化し易い。例え
ば、SF2748株に由来する突然変異株（自然発生または誘
発性）、形質接合体または遺伝子組換え体であっても、
SF2748物質を生産するものは全て本発明に使用できる。
の中でアミコラトプシス属に属し、気菌糸色調は”ホワ
イト・シリーズ”、気菌糸先端は直線状で、胞子表面は
平滑状、裏面色調は、茶褐色系で、可溶性色素を生産し
ない菌株と要約される。本発明者らは SF2748株をアミ
コラトプシス・エスピー・SF2748（Amycolatopsis sp.S
F2748）と命名した。なお、本菌株は工業技術院微生物
工業技術研究所に、微工研菌寄第１２６６７号（FERM P
-１２６６７）として受託されている。SF2748株は、他
の放線菌に見られるようにその性状が変化し易い。例え
ば、SF2748株に由来する突然変異株（自然発生または誘
発性）、形質接合体または遺伝子組換え体であっても、
SF2748物質を生産するものは全て本発明に使用できる。
【００１９】２）SF2748物質生産菌の培養法 放線菌に属するSF2748物質生産菌を通常の微生物が利用
しうる栄養物を含有する培地で培養する。栄養源として
は、従来放線菌の培養に利用されている公知のものが使
用できる。例えば、炭素源としては、グルコース、水
飴、デキストリン、澱粉、糖蜜、動・植物油等を使用し
うる。また、窒素源としては、大豆粉、小麦胚芽、コー
ン・スティープ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、
尿素等を使用しうる。その他必要に応じ、ナトリウム、
カリウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩
素、燐酸、硫酸およびその他のイオンを生成することが
できる無機塩類を添加することは有効である。また、菌
の発育を助け、SF2748物質の生産を促進するような有機
および無機物を適当に添加することができる。
しうる栄養物を含有する培地で培養する。栄養源として
は、従来放線菌の培養に利用されている公知のものが使
用できる。例えば、炭素源としては、グルコース、水
飴、デキストリン、澱粉、糖蜜、動・植物油等を使用し
うる。また、窒素源としては、大豆粉、小麦胚芽、コー
ン・スティープ・リカー、綿実粕、肉エキス、ペプト
ン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、
尿素等を使用しうる。その他必要に応じ、ナトリウム、
カリウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩
素、燐酸、硫酸およびその他のイオンを生成することが
できる無機塩類を添加することは有効である。また、菌
の発育を助け、SF2748物質の生産を促進するような有機
および無機物を適当に添加することができる。
【００２０】培養法としては、好気的条件での培養法、
特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
25〜30℃であるが、多くの場合 28℃付近で培養する。
SF2748物質の生産は培地や培養条件により異なるが、振
盪培養、タンク培養のいずれにおいても通常2〜7日間で
その蓄積が最高に達する。培養中のSF2748物質の蓄積量
が最高になった時に培養を停止し、培養液から目的物質
を単離精製する。
特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
25〜30℃であるが、多くの場合 28℃付近で培養する。
SF2748物質の生産は培地や培養条件により異なるが、振
盪培養、タンク培養のいずれにおいても通常2〜7日間で
その蓄積が最高に達する。培養中のSF2748物質の蓄積量
が最高になった時に培養を停止し、培養液から目的物質
を単離精製する。
【００２１】３）SF2748物質の精製法 本発明によって得られるSF2748物質の培養物からの採取
に当たっては、その性状を利用した通常の分離手段、例
えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着または分配
カラムクロマト法、ゲルろ過法、透析法、沈澱法等を単
独でまたは適宜組み合わせて抽出精製することができ
る。例えば、培養液中に蓄積されたSF2748物質は、アル
カリ性条件下で水と混ざらない有機溶剤、例えば、ブタ
ノール、酢酸エチル等で抽出すると有機溶剤層に抽出さ
れる。またSF2748物質は、培養菌体中からはアセトン−
水、メタノール−水または酢酸エチル等で抽出される。
SF2748物質を更に精製するには、シリカゲル（ワコーゲ
ル C-200、和光純薬工業社製等）、アルミナ等の吸着剤
やセファデックス LH-20（ファルマシア社製）、トヨパ
ール HW-40（株式会社東ソー社製）等を用いるクロマト
グラフィーを行うとよい。
に当たっては、その性状を利用した通常の分離手段、例
えば、溶剤抽出法、イオン交換樹脂法、吸着または分配
カラムクロマト法、ゲルろ過法、透析法、沈澱法等を単
独でまたは適宜組み合わせて抽出精製することができ
る。例えば、培養液中に蓄積されたSF2748物質は、アル
カリ性条件下で水と混ざらない有機溶剤、例えば、ブタ
ノール、酢酸エチル等で抽出すると有機溶剤層に抽出さ
れる。またSF2748物質は、培養菌体中からはアセトン−
水、メタノール−水または酢酸エチル等で抽出される。
SF2748物質を更に精製するには、シリカゲル（ワコーゲ
ル C-200、和光純薬工業社製等）、アルミナ等の吸着剤
やセファデックス LH-20（ファルマシア社製）、トヨパ
ール HW-40（株式会社東ソー社製）等を用いるクロマト
グラフィーを行うとよい。
【００２２】このようにして培養物中に生産されたSF27
48物質は遊離の形、すなわちSF2748物質それ自体として
分離することができる。またSF2748物質を含有する溶液
またはその濃縮液を酸、例えば塩酸、硫酸、硝酸等の無
機酸あるいは酢酸、コハク酸、クエン酸等の有機酸によ
り、各工程の操作中例えば抽出、分離または精製の各工
程の操作中に処理した場合、SF2748物質は対応するその
塩類の形に変化し分離される。また別にこのようにして
製造されたSF2748物質の塩類は、常法により遊離の形に
変化させることができる。更に遊離の形で得られたSF27
48物質を前記の酸により常法で対応するその塩類に変化
させてもよい。従ってSF2748物質と同様に前記のような
その塩類も、この発明の範囲内に包含されるものとす
る。
48物質は遊離の形、すなわちSF2748物質それ自体として
分離することができる。またSF2748物質を含有する溶液
またはその濃縮液を酸、例えば塩酸、硫酸、硝酸等の無
機酸あるいは酢酸、コハク酸、クエン酸等の有機酸によ
り、各工程の操作中例えば抽出、分離または精製の各工
程の操作中に処理した場合、SF2748物質は対応するその
塩類の形に変化し分離される。また別にこのようにして
製造されたSF2748物質の塩類は、常法により遊離の形に
変化させることができる。更に遊離の形で得られたSF27
48物質を前記の酸により常法で対応するその塩類に変化
させてもよい。従ってSF2748物質と同様に前記のような
その塩類も、この発明の範囲内に包含されるものとす
る。
【００２３】以下に本発明の実施例を示すが、SF2748物
質の性状が本発明によって明らかにされたので、それら
の性状に基づきSF2748物質の製造法を種々考案すること
ができる。従って本発明は実施例に限定されるものでは
なく、実施例の修飾手段は勿論、本発明によって明らか
にされたSF2748物質の性状に基づいて公知の手段を施し
てSF2748物質を生産、濃縮、抽出、精製する方法をすべ
て包括する。
質の性状が本発明によって明らかにされたので、それら
の性状に基づきSF2748物質の製造法を種々考案すること
ができる。従って本発明は実施例に限定されるものでは
なく、実施例の修飾手段は勿論、本発明によって明らか
にされたSF2748物質の性状に基づいて公知の手段を施し
てSF2748物質を生産、濃縮、抽出、精製する方法をすべ
て包括する。
【００２４】
【実施例】種培地として、スターチ 2.0％、グルコース
1.0％、小麦胚芽 0.6％、ポリペプトン 0.5％、酵母エ
キス 0.3％、大豆粕 0.2％、炭酸カルシウム 0.2％の組
成からなる培地を用いた。また生産培地として、スター
チ 3.0％、大豆粕 3.5％、小麦胚芽 1.5％、大豆油 0.2
％、リン酸二カリウム 0.2％、炭酸カルシウム 0.5％の
組成からなる培地を用いた。なお、殺菌前 pHはすべて
pH 8.0に調整して使用した。
1.0％、小麦胚芽 0.6％、ポリペプトン 0.5％、酵母エ
キス 0.3％、大豆粕 0.2％、炭酸カルシウム 0.2％の組
成からなる培地を用いた。また生産培地として、スター
チ 3.0％、大豆粕 3.5％、小麦胚芽 1.5％、大豆油 0.2
％、リン酸二カリウム 0.2％、炭酸カルシウム 0.5％の
組成からなる培地を用いた。なお、殺菌前 pHはすべて
pH 8.0に調整して使用した。
【００２５】前記の種培地（20 ml）を分注した100 ml
容三角フラスコを120℃で15分間殺菌し、これにAmycola
topsis sp. SF2748株（FERM P-*****）の斜面寒天培養
の 2〜3白金耳を接種し、28℃で120時間振盪培養して種
培養とした。次いで、前記の生産培地（80 ml）を分注
した500 ml容三角フラスコ（20本）を120℃で15分間殺
菌し、これに前記種培養（各1.6 ml）を接種して、28℃
で 120時間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として
珪藻土を加えて濾過し、濾液（1.72 L）を得た。
容三角フラスコを120℃で15分間殺菌し、これにAmycola
topsis sp. SF2748株（FERM P-*****）の斜面寒天培養
の 2〜3白金耳を接種し、28℃で120時間振盪培養して種
培養とした。次いで、前記の生産培地（80 ml）を分注
した500 ml容三角フラスコ（20本）を120℃で15分間殺
菌し、これに前記種培養（各1.6 ml）を接種して、28℃
で 120時間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として
珪藻土を加えて濾過し、濾液（1.72 L）を得た。
【００２６】この濾液を水酸化ナトリウムで pH 9に調
整し、酢酸エチル（1.0 L x 2）で活性成分を抽出し
て、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質（214 mg）
が得られた。この油状物質をシリカゲルカラム（22 g）
の上部に載せ、クロロホルム−メタノール（2:1)を展開
溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出液を 5 gず
つ分画した。SF2748物質を含む画分（フラクション番号
20〜28）を濃縮乾固すると、粗粉末（32.0 mg）が得ら
れた。 次いで、この粗粉末を分取用ＴＬＣ（メルク社
製 Art No.5744、展開系：クロロホルム−メタノール,
2:1）で精製すると、SF2748物質（12.5 mg）が白色粉末
として得られた。
整し、酢酸エチル（1.0 L x 2）で活性成分を抽出し
て、酢酸エチル層を濃縮乾固すると油状物質（214 mg）
が得られた。この油状物質をシリカゲルカラム（22 g）
の上部に載せ、クロロホルム−メタノール（2:1)を展開
溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出液を 5 gず
つ分画した。SF2748物質を含む画分（フラクション番号
20〜28）を濃縮乾固すると、粗粉末（32.0 mg）が得ら
れた。 次いで、この粗粉末を分取用ＴＬＣ（メルク社
製 Art No.5744、展開系：クロロホルム−メタノール,
2:1）で精製すると、SF2748物質（12.5 mg）が白色粉末
として得られた。
【００２７】
【発明の効果】本発明のSF2748物質は酸に比較的安定
で、表１に示したように抗バクテリア活性を有してい
る。この性質に基づき、本発明のSF2748物質を抗菌剤あ
るいはそれへの変換素材として用いることができる。
で、表１に示したように抗バクテリア活性を有してい
る。この性質に基づき、本発明のSF2748物質を抗菌剤あ
るいはそれへの変換素材として用いることができる。
【００２８】
【図１】SF2748物質のメタノール中（1 mg/ml）での紫
外部吸収スペクトル
外部吸収スペクトル
【図２】SF2748物質の臭化カリウム錠での赤外部吸収ス
ペクトル
ペクトル
【図３】SF2748物質の重クロロホルム溶液中での400 MH
z 1H NMRスペクトル
z 1H NMRスペクトル
【図４】SF2748物質の重クロロホルム溶液中での100 MH
z 13C NMRスペクトル
z 13C NMRスペクトル
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成４年１月２１日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正内容】
【００２５】前記の種培地（20 ml）を分注した100 ml
容三角フラスコを120℃で15分間殺菌し、これにAmycola
topsis sp. SF2748株（FERM P-12667）の斜面寒天培養
の 2〜3白金耳を接種し、28℃で120時間振盪培養して種
培養とした。次いで、前記の生産培地（80 ml）を分注
した500 ml容三角フラスコ（20本）を120℃で15分間殺
菌し、これに前記種培養（各1.6 ml）を接種して、28℃
で 120時間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として
珪藻土を加えて濾過し、濾液（1.72 L）を得た。
容三角フラスコを120℃で15分間殺菌し、これにAmycola
topsis sp. SF2748株（FERM P-12667）の斜面寒天培養
の 2〜3白金耳を接種し、28℃で120時間振盪培養して種
培養とした。次いで、前記の生産培地（80 ml）を分注
した500 ml容三角フラスコ（20本）を120℃で15分間殺
菌し、これに前記種培養（各1.6 ml）を接種して、28℃
で 120時間振盪培養した。培養終了後、濾過助剤として
珪藻土を加えて濾過し、濾液（1.72 L）を得た。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 原 修 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社薬品総合研究所内 (72)発明者 今井 敏 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社薬品総合研究所内 (72)発明者 小山 正夫 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社薬品総合研究所内 (72)発明者 長岡 行蔵 神奈川県横浜市港北区師岡町760番地 明 治製菓株式会社薬品総合研究所内
Claims (2)
- 【請求項１】遊離塩基として下記の特性を有するSF2748
物質又はその薬学的に許容される無機酸あるいは有機酸
の塩。 （１） 色および形状：白色粉末 （２） 分子式 ：Ｃ44Ｈ80Ｎ2Ｏ14 （３） マススペクトル (EI-MS) ： 860 (M+) （４） 比旋光度 ：D[α]23 = -94°(c 1.0, CH3CH2O
H) （５） 紫外部吸収スペクトル λmax nm (1cmE1% ) [MeOH]： 210 (18), 260 (3.1) （６） 赤外部吸収スペクトル (KBr cm-1)： 3500, 2970, 2940, 2870, 2830, 2780,
1720, 1640,1460, 1380, 1340, 1270, 1255, 1180, 114
5, 1120,1075, 1055, 1005, 950, 900, 870, 845, 825,
785,760 （７） 1Ｈ ＮＭＲスペクトル (400 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 2.97 (dq, 2-H), 4.77 (dd, 3-H), 2.14 (b
r dq, 4-H),3.89 (d, 5-H), 1.70 (br d, 7-H), 2.02
(dd, 7-H),2.52 (br dq, 8-H), 3.00 (br q, 10-H), 3.
65 (br d,11-H), 1.64 (br dq, 12-H), 5.48 (br dd, 1
3-H),1.47 (ddq, 14-H), 1.72 (m, 14-H), 0.87 (t, 15
-H),1.24 (d, 16-H), 1.14 (d, 17-H), 1.61 (s, 18-
H),1.13 (d, 19-H), 0.98 (d, 20-H), 0.87 (d, 21-H),
4.32 (d, 1'-H), 3.21 (dd, 2'-H), 2.44 (ddd, 3'-H),
2.27 (s, 3'-N(CH3)2), 1.23 (m, 4'-Hax), 1.68 (m,4'
-Heq), 3.54 (ddq, 5'-H), 1.25 (d, 6'-H), 5.16(br
d, 1"-H), 1.79 (dd, 2"-Hax), 2.21 (br d, 2"-Heq),
2.96 (d, 4"-H), 3.96 (dq, 5"-H), 1.33 (d,6"-H), 1.
25 (s, 7"-H), 4.90 (dd, 1"'-H), 1.76 (ddd, 2"'-Ha
x), 1.57 (ddd, 2"'-Heq), 2.34 (m, 3"'-H),2.34 (s,
3"'-N(CH3)2), 3.57 (br dd, 4"'-H), 4.32(dq, 5"'-
H), 1.17 (d, 6"'-H) （８） 13Ｃ ＮＭＲスペクトル (100 MHz, CDCl3) δ(ppm)： 175.7 (s, C-1), 44.7 (d, C-2), 83.3 (d,
C-3), 37.6(d, C-4), 85.2 (d, C-5), 80.5 (s, C-6),
38.4 (t, C-7), 45.8 (d, C-8), 220.6 (s, C-9), 37.
5 (d, C-10), 69.0 (d, C-11), 40.4 (d, C-12), 74.9
(d, C-13),25.9 (t, C-14), 10.4 (q, C-15), 16.3 (q,
C-16),9.5 (q, C-17), 18.5 (q, C-18), 18.9 (q, C-1
9), 9.9(q, C-20), 9.0 (q, C-21), 104.5 (d, C-1'),
71.1 (d, C-2'), 65.5 (d, C-3'), 28.5 (t, C-4'), 6
9.3 (d,C-5'), 21.5 (q, C-6'), 40.2 (q, 3'-N(C
H3)2), 98.5(d, C-1"), 41.0 (t, C-2"), 69.7 (s, C-
3"), 76.6 (d, C-4"), 65.2 (d, C-5"), 18.3 (q, C-
6"), 25.7 (q,C-7"), 90.2 (d, C-1"'), 28.0 (t, C-
2"'), 59.4 (d,C-3"'), 67.2 (d, C-4"'), 73.3 (d, C-
5"'), 15.0 (q,C-6"'), 42.5 (q, 3"'-N(CH3)2) （９） 溶解性 ： クロロホルム、アセトン、酢酸
エチル、メタノール、酸性水に可溶で、中性水およびア
ルカリ性水に不溶である。 （10） 塩基性、酸性、中性の区別： 塩基性物質 - 【請求項２】アミコラトプシス属（Amycolatopsis）に
属する、請求項１記載の抗生物質SF2748物質生産菌を培
養し、その培養物から抗生物質SF2748物質を採取するこ
とを特徴とする抗生物質SF2748物質の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34052991A JP3063804B2 (ja) | 1991-12-24 | 1991-12-24 | 新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８物質およびその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34052991A JP3063804B2 (ja) | 1991-12-24 | 1991-12-24 | 新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８物質およびその製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05178881A true JPH05178881A (ja) | 1993-07-20 |
| JP3063804B2 JP3063804B2 (ja) | 2000-07-12 |
Family
ID=18337859
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34052991A Expired - Fee Related JP3063804B2 (ja) | 1991-12-24 | 1991-12-24 | 新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８物質およびその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3063804B2 (ja) |
-
1991
- 1991-12-24 JP JP34052991A patent/JP3063804B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3063804B2 (ja) | 2000-07-12 |
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