JPH0494689A - 光学活性（ｓ）‐（＋）‐３‐ハロ‐１，２―プロパンジオールの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、光学活性（Ｓ）　−（＋）−３−ハロ−１．
２−プロパンジオールの製造法に関する。　（Ｓ）−（
＋）−３−ハロ１．２−プロパンジオールは、光学活性
な種々の医薬品や生理活性物質の合成原料として有用で
ある。

（従来の技術と問題点） 光学活性（Ｓ）　−（＋）−３−ハロ−１．２−プロパ
ンジオルの製造に関しては、メチル−６−クロロ−６−
ゾオキシーα−Ｄ−グルコピラノシドから製造する方法
（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　１
５．５３３（１９７８）参照］、（Ｒ）−１，２−０−
イソプロピリデングリセロールから製造する方法（Ｃｈ
ｅＩＩｌ、　Ｂｉｏｌ、　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　
１７．１１７（１９７７）参照〕などが知られているが
、何れの方法も高価な光学活性体を原料として用いてい
たり、あるいは製造工程が複雑であったりして工業的な
製造法とはなり難い。

また、生物学的手法としてはラセミ体の（Ｒ，５）３−
ハロ−１．２−プロパンジオールに微生物を作用させて
（Ｒ）−（−）−３−ハロ−１．２−プロパンジオール
を選択的に代謝させ、（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，
２−プロパンジオールを残存させる方法（特開昭６２−
１２２５９６号公報参照）が知られているが、ラセミ体
が原料となるために取得できる（Ｓ）　−（＋）−３−
ハロ−１．２−プロパンジオールの対原料収率は５０％
以下となり、経済的に有利な製造法とはなり難い。

（発明の概要） そこで本発明者らは、光学活性（Ｓ）−（÷）−３−ハ
ロ１．２−プロパンジオールを工業的に有利に製造する
方法について鋭意検討した結果、本発明者らが土壌中よ
り分離した微生物由来の酵素の作用により、安価なプロ
キラル化合物１，３−ジハロ−２−プロパノールから光
学活性（Ｓ）　−（＋）−３−ハロ−１，２−プロパン
ジオールを得ることができることを見い出し本発明を完
成するに至った。

すなわち、本発明は、酵素の作用により１．３−ジハロ
−２−プロパノールから光学活性（Ｓ）　−（＋）−３
−ハロ−１．２−プロパンジオールを生成せしめること
を特徴とする光学活性（Ｓ）　−（＋）−３−ハロ−１
．２−プロパンジオールの製造法、である。

（発明の詳細な説明） 本発明で使用する酵素は、１．３−ジハロ−２−プロパ
ノールから（Ｓ）　−（＋）−３−ハロ−１，２−プロ
パンジオルを生成し得る酵素あるいは酵素群である。具
体的には、例えば、本発明者により新たに分離、見い出
されたアグロバクテリウム属に属する微生物、０８０７
９株の産生ずる酵素を挙げることができる。本微生物は
微工研菌寄第１１６５１号（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ　ｓｐ、　ＤＨＯ７９）として、工業技術院　微生物
工業技術研究所（微工研）に寄託されており、その菌学
的性質は以下に示す通りである。

ＤＨＯユ１魅− 形　　　　　態　　　　　　　　　　　　　　　　桿　
　菌ダラム染色性 芽　　　　　胞 運　　動　　性　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　十鞄　　　　　毛　　　　　　　　　　　　　　　　
　周　　毛オキシダーゼ　　　　　　　　　　十 カタラーゼ　　　　　　　　　　　＋ ＯＦ　　　　　　　　　　　　　　０ ３−ケトラクトースの生成　　　　十 尿素分解　　　　　　　　　　　　＋ リジン脱炭酸 フェニルアラニン脱アミノ ゼラチン液化 インドール産生 エスタリン加水分解 硝酸塩還元 ○ＮＰＣ ＋ 十 ３５゛Ｃでの生育 ＋ ２８°Ｃでの生育 アルカリの産生 ０．０００５χ酵母エキス加 シモンズのクエン酸塩 十 リドマスミルク 酸の産生 エタノール ｍｅｓｏ−エリスリトール キシロース グルコース マルトース マンニトール メレチトース キノン系 ＋ ＋ ロー１０ 以上の菌学的性質をバージニーズ・マニュアル・オフ・
ンステマチノク・ハクテリオロジＶｏ１．２　（１９８
６）［（Ｂｅｒｇｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓ
ｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　Ｖｏｌ、２
］に従って検索すると、０８０７９株はアゲＯバクテリ
ウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する細菌と
同定された。

上記微生物を培養するための培地組成としては通常これ
らの微生物が生育し得るものならば何でも使用できる。

例えば、炭素源としてグルコース、フラクトース、ンユ
ークロース、マルトース等のＩＪｉ類、酢酸、クエン酸
等の有機酸、エタノール、グリセロール等のアルコール
類等、窒素源としてペプトン、肉エキス、酵母エキス、
タンパク質加水分解物、アミノ酸等の天然窒素源の他に
各種無機、有機酸アンモニウム塩等が使用できる。また
、このほか必要に応して、無機塩、微量金属塩、ビタミ
ン等が適宜使用される。この際、高い酵素活性を誘導さ
せるために、エピクロロヒドリン、１３−ジクロロ−２
−プロパノール、３−クロロ−１，２−プロパンジオー
ル等を培地に添加することも有効である。

上記微生物の培養は常法によればよく、例えばｐＦｌ　
４〜１０、温度２０〜４５°Ｃの範囲にて好気的に１０
〜９６時間培養する。

本発明で使用する１、３−ジハロ−２−プロパノールは
１．３−ジクロロ−２−プロパノール、１，３〜ジブロ
モ２−プロパノールなどである。

１．３−ジハロ−２−プロパノールに酵素を作用させて
（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１．２−プロパンジオール
を得る方法としては、該酵素が微生物由来のものである
場合、上記のように培養して得た微生物の培養液あるい
は遠心分離などにより得た菌体の懸濁液に基質を添加す
る方法、菌体処理物（例えば菌体破砕物、菌体抽出物な
ど）あるいは常法により固定化した菌体または、菌体処
理物などの懸濁液に基質を添加する方法、微生物の培養
時に基質を培養液に添加して培養と同時に反応を行う方
法などがある。

反応液中の基質濃度は、特に限定するものではないが、
０．１〜１０（Ｗ／Ｖ）％が好ましく、基質は反応液に
一括して加えるか、あるいは分割添加することができる
。反応温度は５〜５０°Ｃ１反応ｐＨは４〜１０の範囲
で行うことが好ましい。反応時間は、基質濃度、菌体濃
度そのほかの反応条件等によって変わるが、通常１〜１
２０時間で終了するように条件を設定することが好まし
い。

かくして反応液中に生成、蓄積した（Ｓ）　−（＋）−
３ハロー１，２−プロパンジオールは、公知の方法を用
いて採取および精製することができる。例えば、反応液
から遠心分離などの方法によって菌体を除いた後、酢酸
エチルなどの溶媒で抽出を行い、減圧下に溶媒を除去す
ることによって（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１２−プロ
パンジオールのシロップを得ることができる。また、こ
のシロップを減圧下に蒸留することによりさらに精製す
ることもできる。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本
発明はこの例のみに限定されるものではない。

実施例１ グルコース１％、ペプトン０．５％、肉エキス０．３％
、酵母エキス０．３％からなる培地をｐＨ７，０に調整
して、５００ｉ１容三角フラスコに１００−ずつ分注し
、１２０°Ｃで１５分間殺菌後０．１ａ＋Ｎのエピクロ
ロヒドリンを添加した。

上記培地にアグロバクテリウムｓｐ、　Ｄ）１０７９菌
株を接種し、３０°Ｃにて４８時間振とう培養を行った
。

この培養液５０−を遠心分離して菌体を集め、５０ｍＭ
のトリス−Ｈ，ＳＯ，緩衝液（ｐＨ８，０）５０ｉＮで
２回洗浄後、１　、０　（Ｗ／ν）％の１，３−ジクロ
ロ−２−プロパノール溶液（ＩＭ　　）リスーＭＣＩ緩
衝液、ｐＨ８，０）　５０ｄに菌体を懸濁し、２０°Ｃ
で４８時間撹はんして反応を行った。

反応後、反応液から菌体を遠心分離によって除去し、上
清中の生成３−クロロ−１，２−プロパンジオールをガ
スクロマトグラフィーにて定量した結果、基質からの収
率は１００％であった。この上清中から５０−の酢酸エ
チルで３回抽出を行い、抽出液を無水硫酸すｌ−ＩＪウ
ムで脱水し、減圧下で溶媒を除去してシロップを得た。

このシロップ中の３−クロロ−］、］２−プロパンジオ
ーを常法にてトシル化した後、ダイセル製のカラム（キ
ラルセルＯＣ）を用いて高速液体クロマトグラフィーに
よる光学異性体の分析を行い（Ｓ）体の存在を確認した
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、酵素の作用により１，３−ジハロ−２−プロパノー
   ルから光学活性（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，２−プ
   ロパンジオールを生成せしめることを特徴とする光学活
   性（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，２−プロパンジオー
   ルの製造法。 ２、使用する酵素が微生物由来のものである請求項１記
   載の製造法。 ３、微生物がアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅ
   ｒ−ｉｕｍ）属である請求項２記載の製造法。