JPH0494690A - 光学活性（ｓ）‐（＋）‐３‐ハロ‐１，２―プロパンジオールの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、光学活性（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，２
−プロパンジオールの製造法に関する。（Ｓ）　−（＋
）−３−ハロ−１，２−プロパンジオールは、光学活性
な種々の医薬品や生理活性物質の合成原料として有用で
ある。

（従来の技術） 光学活性（Ｓ）−（＋）−３〜ハロー１，２−プロパン
ジオルの製造に関しては、メチル−６−クロロ−６−ゾ
オキシーα−Ｄ−グルコピラノシドから合成する方法（
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　１５
．５３３（１９７Ｂ）参照〕、Ｒ−１，２−０−イソプ
ロピリデングリセロールから合成する方法（Ｃｈｅｍ、
Ｂｉｏｌ、　Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　１７．１１７（
１９７７）参照〕が知られているが、何れの方法も高価
な光学活性体を原料としていたり、あるいは製造工程が
複雑であったりして工業的に有利な製造法とはなり難い
。

また、生物学的手法としてはラセミ体の（１１，５）３
−ハロ−１２−プロパンジオールに微生物を作用させて
（Ｒ）−（−）−３−ハロ−１．２−プロパンジオール
を選択的に代謝させ、（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１．
２−プロパンジオールを残存させる方法（特開昭６２−
１２２５９６号公報参照）が知られている。

（発明の概要） このような状況下、本発明者らは、光学活性（Ｓ）　−
（＋）−３−ハロ−１．２−プロパンジオールを工業的
に存利に製造する方法について鋭意検討した結果、本発
明者らが土壌中より分離した微生物由来の酵素の作用に
より、安価なラセミ体化合物エビハロヒドリンから（Ｓ
）　−（＋）−３−ハロ−１．２−プロパンジオールを
得ることができることを見い出し、本発明を完成するに
至った。

すなわち、本発明は、酵素の作用によりエビハロヒドリ
ンから光学活性（Ｓ）　−（＋）〜３−ハロ−１，２−
プロパンジオールを生成せしめることを特徴とする光学
活性（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，２−プロパンジオ
ールの製造法、である。

（発明の詳細な説明） 本発明で使用する酵素は、エビハロヒドリンから（Ｓ）
　−（＋）−３−ハロ−１．２−プロパンジオールを生
成し得る酵素であり、具体的には、例えば、本発明者に
より新たに分離、見い出されたアグロバクテリウム（Ａ
ｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属する微生物、０８０
７９株の産生ずる酵素を挙げることができる。本微生物
は微工研菌寄第１１６５１号（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｎ＋　ｓｐ、　ＤＩ０７９）として、工業技術院　微
生物工業技術研究所（微工研）に寄託されており、その
菌学的性質は以下に示す通りである。

貼■１床 形　　　　態　　　　　　　　　　　　　　　　　桿　
　菌ダラム染色性 芽　　　　胞 運動性　　　　　　　　　　　　７ 鞭　　　　毛　　　　　　　　　　　　　　　　　周　
　毛オキシダーゼ　　　　　　　　　＋ カタラーゼ　　　　　　　　　　＋ ＯＦ　　　　　　　　　　　　　０ ３−ケトラクトースの生成　　　士 尿素分解　　　　　　　　　　　十 リジン脱炭酸 フェニルアラニン脱アミノ ゼラチン液化 インドール産生 エスタリン加水分解　　　　　　十 硝酸塩還元 ０ＮＰＣ＋ ３５°Ｃでの生育 ＋ ２８°Ｃでの生育 ＋ アルカリの産生 リドマスミルク 酸の産生 エタノール ｎｅｓｏ−エリスリトール キシロース グルコース マルトース マンニトール メレチトース キノン系 ＋ ＋ 以上の菌学的性質をバージニーズ・マニュアル・オブ・
システマチック・バタテリオロジＶｏ１．２　　（１９
８６）　　（Ｂｅｒｇｙ’ｓ　　Ｍａｎｕａｌ　　ｏｆ
　　ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　
Ｖｏｌ、２　（１９８６）　）に従って検索すると０８
０７９株はアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒ
ｔｕｍ）属に属する細菌と同定された。

上記微生物を培養するための培地組成としては通常これ
らの微生物が生育し得るものならば何でも使用できる。

例えば、炭素源としてグルコース、フラクトース、シュ
ークロース、マルトース等の糖類、酢酸、クエン酸等の
を機酸、エタノール、グリセロール等のアルコール類等
、窒素源としてペプトン、肉エキス、酵母エキス、タン
パク質加水分解物、アミノ酸等の天然窒素源の他に各種
無機、有機酸アンモニウム塩等が使用できる。また、こ
の他必要に応して、無機塩、微量金属塩、ビタミン等が
適宜使用される。この際、憂い酵素活性を誘導させるた
めに、エピクロロヒドリン、１．３シクロロー２−７”
ロバノール、３−クロロ−１，２−プロパンジオール等
を培地に添加することも有効である。

上記微生物の培養は常法によればよ（、例えばｐＨ４〜
１０、温度２０〜４５°Ｃの範囲にて好気的に１０〜９
６時間培養する。

本発明で使用するエビハロヒドリンは、エビクロロヒド
リン、エビクロロヒドリンなどである。

エビハロヒドリンに酵素を作用させて（Ｓ）　−（＋）
３−ハロ−１，２−プロパンジオールを得る方法として
は、該酵素が微生物由来のものである場合、上記のよう
に培養して得た微生物の培養液あるいは遠心分離などに
より得た菌体の懸濁液に基質を添加する方法、菌体処理
物（例えば菌体破砕物、菌体抽出物など）あるいは常法
により固定化した菌体または菌体処理物などの懸濁液に
基質を添加する方法、微生物の培養時に基質を培養液に
添加して培養と同時に反応を行う方法などがある。

反応液中の基質濃度は、特に限定するものではないが、
０．１〜１０（−ハ）χが好ましく、基質は反応液に一
括して加えるか、あるいは分割添加することができる。

反応温度は、５〜５０°Ｃ１反応ｐＨは４〜１０の範囲
で行うことが好ましい。反応時間は、基質濃度、菌体濃
度そのほかの反応条件等によって変わるが、通常１〜１
２０時間で終了するように条件を設定することが好まし
い。

かくして反応液中に生成、蓄積した（Ｓ）　−（＋）−
３−ハロ−１．２−プロパンジオールは、公知の方法を
用いて採取および精製することができる。例えば、反応
液から遠心分離などの方法によって菌体を除いた後、酢
酸エチルなどの溶媒で抽出を行い、減圧下に溶媒を除去
することによって（Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１．２−
プロパンジオールのシロップを得ることができる。また
、このシロップを減圧下に藤留することによりさらに精
製することもできる。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本
発明はこの例のみに限定されるものではない。

実施例１ グルコース１％、ペプトン０．５％、肉エキス０．３％
、酵母エキス０．３％からなる培地をｐＨ７，０に調整
して、５００　ｄ容三角フラスコに１００戯ずつ分注し
、１２０°Ｃで１５分間殺菌後０．１ｍのエビクロロヒ
ドリンを添加した。

上記培地にアグロバクテリウムＳＧ１．　ＤＲＯ７Ｑｉ
ｉ株を接種し、３０″Ｃにて４８時間振とう培養を行っ
た。

この培養液５０ｄを遠心分離して菌体を集め、５０〆の
トリス−Ｈ，ＳＯ，緩衝液（ｐ）ｌ　８．０）５０＃Ｉ
Ｉ！Ｔ：　２回洗浄後、１．０（ＭＶ）％のエビクロロ
ヒドリン溶液（目　トリス−）ＩＣＩ緩衝液、ｐＨ８，
０）５０　ｍに菌体を懸濁し２０″Ｃで７時間反応を行
った。

反応後、反応液から菌体を遠心分離によって除去シ、上
清中の生成３−クロロ−１，２−プロパンジオールをガ
スクロマトグラフィーにて定量した結果、基質からの収
率は６４％であった。この上清中から５０−の酢酸エチ
ルで３回抽出を行い、抽出液を無水硫酸ナトリウムで脱
水し、減圧下で溶媒を除去してシロップを得た。

このシロップ中の３−クロロ−１，２−プロパンジオー
ルを常法にてトシル化した後、ダイセル製のカラム（キ
ラルセルＯＣ）を用いて高速液体クロマトグラフィーに
よる光学異性体の分析を行い（Ｓ）体の存在を確認した
。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、酵素の作用によりエピハロヒドリンから光学活性（
   Ｓ）−（＋）−３−ハロ−１，２−プロパンジオールを
   生成せしめることを特徴とする光学活性（Ｓ）−（＋）
   −３−ハロ−１，２−プロパンジオールの製造法。 ２、使用する酵素が微生物由来のものである請求項１記
   載の製造法。 ３、微生物がアグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅ
   ｒ−ｉｕｍ）属である請求項２記載の製造法。