JP3001663B2 - 光学活性（ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、３−クロロプロピオフ
ェノンに、不斉還元する能力を有する微生物又はその処
理物を作用させ、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フ
ェニル−１−プロパノールを得る製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術と発明が解決しようとする課題】光学活性
（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノール
は異種の２つの官能基を有するため、光学活性を必要と
する医薬、農薬などの合成原料として極めて有用な化合
物である。例えば、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−
フェニル−１−プロパノールは、トモキセチン、フルオ
キセチン、ノルフルオキセチンなどの、セロトニン摂取
阻害剤の光学活性体の合成に用いられている［ジャーナ
ル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Journal of M
edicinal Chemistry），第３１巻，第１４１２頁（１９
８８年）、ジャーナル・オブ・オルガニック・ケミスト
リー（Journal of Organic Chemistry），第５３巻，第
２９１６頁（１９８８年）、および特開平２−１９３９
５１号公報］。

【０００３】前記光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フ
ェニル−１−プロパノールの製造方法として、米国特許
第４８６８３４４号明細書、テトラヘドロン・レターズ
（Tetrahedron Letters)、第３０巻、第５２０７頁（１
９８９年）には、３−クロロプロピオフェノンを化学的
に不斉還元する方法が開示されている。また、特開昭６
０−１６１９２７号公報には、光学活性アミノ酸誘導体
およびアルコールの存在下で、ケトンを金属水素化物と
反応させ、化学的に不斉還元する方法が開示されてい
る。しかし、これらの方法では、触媒の合成が困難であ
ったり、多量の光学活性アミノ酸誘導体を必要とするの
で、工業的に効率よく光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１
−フェニル−１−プロパノールを得ることが困難であ
る。

【０００４】また、３−クロロ−１−フェニル−１−プ
ロパノールのラセミ体を酵素により光学分割する方法な
ども知られている。しかし、この方法で得られる３−ク
ロロ−１−フェニル−１−プロパノールの光学純度は低
い。

【０００５】従って、本発明の目的は、３−クロロプロ
ピオフェノンから、光学純度の高い光学活性（Ｓ）−３
−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを簡便な方
法で選択的に効率よく製造できる方法を提供することに
ある。

【０００６】

【発明の構成】本発明者らは、微生物による３−クロロ
プロピオフェノンの不斉還元法に着目し、前記目的を達
成するため、鋭意検討した結果、３−クロロプロピオフ
ェノンに特定の微生物を作用させることにより、選択的
に効率よく不斉還元でき、光学純度の高い光学活性
（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノール
が生成することを見いだし、本発明を完成した。

【０００７】すなわち、本発明は、３−クロロプロピオ
フェノンに、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニ
ル−１−プロパノールに不斉還元する能力を有する微生
物又はその処理物を作用させ、生成した光学活性（Ｓ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを回収
する方法であって、前記微生物が、オーレオバシジウム
（Aureobasidium)属、トルラ（Torula) 属およびコクリ
オボラス（Cochliobolus) 属に属する微生物群から選ば
れた微生物である光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フ
ェニル−１−プロパノールの製造方法を提供する。

【０００８】本発明に使用する微生物は、オーレオバシ
ジウム属、トルラ属、コクリオボラス属に属する微生物
又はムコール・シルシネロイデス・エフ・シルシネロイ
デス（Mucor circinelloides f. circinelloides）であ
って、３−クロロプロピオフェノンを不斉還元し、光学
活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノ
ールを生成する能力を有する微生物であればいずれも使
用可能である。

【０００９】このような微生物の具体例としては、例え
ば、オーレオバシジウム・プルランス（Aureobasidium
pullulans) ＩＦＯ ６３５３、トルラ・ジンセルメイ
（Torula jeanselmei) ＩＦＯ ６８５７、ムコール・
シルシネロイデス・エフ・シルシネロイデス（Mucor ci
rcinelloides f. circinelloides） ＡＴＣＣ ８０９
７、コクリオボラス・ミヤベアヌス（Cochliobolus miy
abeanus) ＩＦＯ ６６３１などが挙げられる。これら
の微生物は少なくとも一種使用される。

【００１０】これらの微生物は、前記能力を有する限
り、野生株、変異株、又は細胞融合もしくは遺伝子操作
法などの遺伝子的手法により誘導される組み換え株な
ど、いずれの株でも好適に用いることができる。

【００１１】なお、ＩＦＯ番号の付された微生物は、
（財）醗酵研究所（ＩＦＯ）発行のList of Cultures、
第８版、第１巻（１９８８年）に記載されており、該Ｉ
ＦＯから入手することができる。

【００１２】本発明で使用する微生物は、培地で培養し
て反応に供してもよい。培地は、微生物が増殖し得るも
のであれば特に制限されない。培地の炭素源としては、
上記微生物が利用可能であればいずれも使用でき、具体
的には、例えば、グルコース、フルクトース、シュクロ
ース、デキストリン、デンプンなどの糖類；ソルビトー
ル、エタノール、グリセロールなどのアルコール類；フ
マル酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸などの有機酸類
及びその塩類；パラフィンなどの炭化水素類；これらの
混合物などが使用できる。窒素源としては、例えば、塩
化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウ
ムなどの無機酸のアンモニウム塩；フマル酸アンモニウ
ム、クエン酸アンモニウムなどの有機酸のアンモニウム
塩；肉エキス、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、コ
ーンスティープリカー、カゼイン加水分解物、尿素など
の無機又は有機含窒素化合物；これらの混合物が使用で
きる。培地には、無機塩、微量金属塩、ビタミン類など
の通常の培養に用いられる栄養源を適宜添加してもよ
い。また、必要に応じて、培地には、微生物の増殖を促
進する因子、培地のｐＨ保持に有効な緩衝物質、本発明
の目的化合物の生成能力を高める因子、例えば３−クロ
ロプロピオフェノンなどを添加してもよい。

【００１３】微生物の培養は、生育に適した条件下、例
えば、培地のｐＨ２．０〜９．５、好ましくは３〜８、
温度２０〜４５℃、好ましくは２５〜３７℃で行なうこ
とができる。微生物の培養は、嫌気的又は好気的条件下
で行なうことができる。培養時間は、例えば、５〜１２
０時間、好ましくは１２〜７２時間程度である。

【００１４】光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニ
ル−１−プロパノールは、３−クロロプロピオフェノン
を微生物又はその処理物で処理し不斉還元することによ
り生成する。

【００１５】不斉還元方法としては、例えば、(1) 微生
物の培養時に培地中に３−クロロプロピオフェノンを添
加して反応させる方法、(2) 培養液に上記３−クロロプ
ロピオフェノンを添加して反応させる方法、(3) 培養液
から遠心分離などにより分離した菌体を、そのまま使用
したり、又は洗浄した後、緩衝液、水などに再懸濁し
て、３−クロロプロピオフェノンを処理する方法などが
挙げられる。反応の際、エネルギー源として、グルコー
ス、シュクロースなどの炭素源を添加すると、反応が円
滑に進行し、目的化合物の生成効率が高まる場合があ
る。

【００１６】また、菌体は生菌体のままで使用してもよ
く、菌体処理物、例えば、菌体破砕物、アセトン処理、
凍結乾燥などの処理を施した処理物を使用してもよい。
これらの菌体又は菌体処理物は、例えば、ポリアクリル
アミドゲル法、含硫多糖ゲル法（カラギーナンゲル法な
ど）、アルギン酸ゲル法、寒天ゲル法などの慣用の方法
で固定化して用いることもできる。さらに、菌体処理物
から取得した酵素も使用できる。前記酵素は、慣用の方
法を適宜組み合わせて精製することにより得ることがで
きる。

【００１７】３−クロロプロピオフェノンは、そのまま
使用してもよく、溶媒による溶液、懸濁又は分散液とし
て使用してもよい。前記溶媒としては、水、反応に悪影
響を及ぼさない有機溶媒が使用できる。懸濁又は分散液
では、界面活性剤などを必要に応じて使用できる。３−
クロロプロピオフェノンは、反応当初から反応系に存在
させてもよく、反応系に分割して添加してもよい。

【００１８】菌体量は、目的化合物の生成量及び光学純
度が低下しない範囲で適宜選択できる。基質である３−
クロロプロピオフェノンの使用濃度は、特に制限されな
いが、例えば、０．１〜１０重量％、好ましくは１〜１
０重量％程度である。

【００１９】不斉還元反応条件は、目的化合物の生成を
損わない範囲で選択できる。反応系のｐＨは、例えば、
ｐＨ２〜１０、好ましくはｐＨ３〜８程度、反応温度
は、例えば、１０〜６０℃、好ましくは２０〜４０℃、
さらに好ましくは２０〜３５℃程度である。前記反応
は、撹拌下又は静置下、１〜１２０時間程度行うことが
できる。

【００２０】反応により生成した光学活性（Ｓ）−３−
クロロ−１−フェニル−１−プロパノールは、慣用の分
離精製手段により回収できる。例えば、反応液から直接
又は菌体を分離した後、膜分離、有機溶媒による抽出、
カラムクロマトグラフィー、減圧濃縮、蒸溜などの通常
の精製方法に供することにより、光学活性（Ｓ）−３−
クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを容易に得る
ことができる。なお、光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１
−フェニル−１−プロパノールの光学純度は、例えば、
光学異性体分離カラムを用いた高速液体クロマトグラフ
ィー（ＨＰＬＣ）により測定できる。

【００２１】

【発明の効果】本発明の製造方法によれば、微生物の作
用により、簡便に光学純度の高い光学活性（Ｓ）−３−
クロロ−１−フェニル−１−プロパノールを選択的に効
率よく生成させることができ、工業的に極めて有利であ
る。

【００２２】

【実施例】以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細
に説明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定され
るものではない。

【００２３】なお、実施例において、反応液中の（Ｓ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールの定量
は、ガスクロマトグラフィー（カラム：ＦＡＬ−Ｍ、１
０％、２ｍ、温度１８０℃）により行い、光学純度の測
定は、光学分割カラムを用いた高速液体クロマトグラフ
ィー（カラム：ダイセル化学工業製、商品名キラルセル
ＯＤ、溶媒：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝９５／
５、温度：４０℃、波長：２５４ｎｍ、流速：０．５ｍ
ｌ／分）により行った。上記の測定条件において、３−
クロロ−１−フェニル−１−プロパノールのＳ体の保持
時間は１９．０分、Ｒ体の保持時間は２１．５分であ
る。

【００２４】実施例１〜４ ＹＭ培地（酵母エキス１％、麦芽エキス１％、ペプトン
１％、グルコース５％、ｐＨ６．０）５ｍｌを直径２１
ｍｍの試験管に入れ、滅菌した後、下記の菌株を植菌
し、３０℃で２４時間往復振盪培養した。

【００２５】 実施例１：オーレオバシジウム・プルランス ＩＦＯ
６３５３ 実施例２：トルラ・ジンセルメイ ＩＦＯ ６８５７ 実施例３：ムコール・シルシネロイデス・エフ・シルシ
ネロイデスＡＴＣＣ ８０９７ 実施例４：コクリオボラス・ミヤベアヌス ＩＦＯ ６
６３１ 次いで、３−クロロプロピオフェノン２５μｇを添加
し、３０℃で７２時間往復振盪し、反応させた。反応終
了後、反応液を酢酸エチル２ｍｌで抽出し、酢酸エチル
層を分析し、生成した（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニ
ル−１−プロパノールの光学純度と反応率を測定した。
結果を表に示す。

【００２６】

【表１】 表より、３−クロロプロピオフェノンに特定の微生物を
作用させることにより、光学純度の高い光学活性（Ｓ）
−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノールが効率
よく生成する。

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ３−クロロプロピオフェノンに、光学活
   性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノー
   ルに不斉還元する能力を有する微生物又はその処理物を
   作用させ、生成した光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−
   フェニル−１−プロパノールを回収する方法であって、
   前記微生物が、オーレオバシジウム（Aureobasidium)
   属、トルラ（Torula) 属およびコクリオボラス（Cochli
   obolus)属に属する微生物群から選ばれた微生物である
   光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロ
   パノールの製造方法。
2. 【請求項２】 ３−クロロプロピオフェノンに、光学活
   性（Ｓ）−３−クロロ−１−フェニル−１−プロパノー
   ルに不斉還元する能力を有する微生物又はその処理物を
   作用させ、生成した光学活性（Ｓ）−３−クロロ−１−
   フェニル−１−プロパノールを回収する方法であって、
   前記微生物が、オーレオバシジウム・プルランス（Aure
   obasidium pullulans)、トルラ・ジンセルメイ（Torula
   jeanselmei)、ムコール・シルシネロイデス・エフ・シ
   ルシネロイデス（Mucor circinelloides f. circinello
   ides）またはコクリオボラス・ミヤベアヌス（Cochliob
   olus miyabeanus)である光学活性（Ｓ）−３−クロロ−
   １−フェニル−１−プロパノールの製造方法。