【発明の詳細な説明】
プロドラッグの製造に関する改良
本発明はプロドラッグ（ｐｒｏ−ｄｒｕｇ）に関し、及び特に酵素活性化可能な
プロドラッグの製造のための新規中間体に関する。
数年来癌の化学療法に潜在的な有用性を有する多くの細胞毒性化合物が見出され
ている。ナイトロジェンマスタードはこうした細胞毒性化合物の一つの重要な部
類を形成している。一般的な、及び特にナイトロジェンマスタードに属する細胞
毒化合物の臨床的使用は、腫瘍細胞及び正常細胞の間の細胞毒的効果の選択性に
乏しいので、制限されている。
この問題を克服する一つのアプローチは細胞毒薬剤の誘導体であり、元の薬剤に
比較して細胞毒的性質が著しく弱められている、しばしば比較的簡単な誘導体で
ある、いわゆるプロドラッグの開発を含んでいる。
薬効作用を意図する部位の領域においてのみプロドラッグが細胞毒薬剤に転化さ
れる治療規制下で、かようなプロドラッグを患者に投与するための多数の提案が
なされた。
一つの特に有望なアプローチは、意図した作用部位で酵素の影響下で元のナイト
ロジェンマスタードに転化できるプロドラッグを形成する、アミノ酸又はオリゴ
ペプチドとの反応生成物へのナイトロジエンマスタードの転化を含んでいる。こ
のアプローチはプロドラッグと関連して抗体、／酵素結合体（ｃｏｎｊｕｇａｔ
ｅ）の利用により実行に移すことができる。
抗体／酵素結合体は抗原に関連した腫瘍への抗体及びプロドラッグを細胞毒に転
化する酵素から形成される結合体である。実際の臨床においては、最初に抗体／
酵素結合体が患者に投与され、治療すべき腫瘍の区域に集中される。次いで患名
にプロドラッグが投与されるので、プロドラッグの細胞毒への転化は集中した酵
素の影響下に治療すべき腫瘍の区域に限定される。こうした方式はＷＯ３８１０
７３７８として公開された本発明者等の同時出願された国際出願ＰＣＴ／ＧＢ８
８１００１８１に記載されている。
上記の国際出願で使用できる特殊なプロドラッグは安息香酸ナイトロジエンマス
タードを基剤としたものである。細胞毒性の安息香酸ナイトロジェンマスタード
は上記の国際出願に記載された方法に従ってアルファーアミノ酸との反応により
アミドに転化されるが、好適なアルファーアミノ酸はグルタミン酸である。この
場合にはグルタミン酸は安息香酸ナイトロジエンマスタードのカルボキシル基と
グルタミン酸のアルファーアミノ基との間に形成したアミド基によりナイトロジ
ェンマスタードに結合する。
他のプロドラッグもカルボキシル基が治療すべき腫瘍の区域に集中している酵素
の影響下で、生体内で除去できるオリゴペプチド又は他の保護基との誘導体に転
化されている、安息香酸ナイトロジエンマスタードを基剤として製造することが
できる。
上記の出願に記載されている形式のプロドラッグ及び同じ原理を具体化する他の
プロドラッグはグルタミン酸又は類似の残基、例えばアスパラギン酸中に存在す
るカルボキシル基が遊離のカルボン酸形であるプロドラッグとして投与される。
これらのプロドラッグはグルタミン酸又は類似の反応剤中に存在するカルボキシ
ル基を、通常エチルエステルの形で保護する合成方法により製造される。エトキ
シカルボニル化合物の形でプロドラッグが製造されると、カルボキシル保護基は
除去され、遊離のカルボン酸基が開放される。上記の国際出願に記載された合成
方法では、保護エチルエステル基が水酸化ナトリウム水溶液を用いる慣用のアル
カリ性加水分解により除去され、次いで得られるナトリウム塩が塩酸を用いて遊
離のジカルボン酸に転化される。このアルカリ性加水分解法はエチルエステルを
遊離のカルボン酸に転化する場合完全に満足すべきものであるが、エチルエステ
ルをカルボン酸に転化するために使用される反応条件は又ナイトロジエンマスタ
ードの分子の一部に分解を起こし、そのためプロドラッグの収率に損失を与える
という悪影響を有する点で、実施上重大な欠点を有している。
本発明者等はプロドラッグの合成の際に、グルタミン酸又は類似の反応剤、例え
ばアスパラギン酸中の遊離のカルボキシル基を保護するために第三ブチルエステ
ルを利用す遥ことに基づいた改良された合成方法を新規に見出した。本発明によ
れば、所望のプロドラッグの合成は第三ブチルエステル基を含む反応剤を利用す
れば好都合に進行し、第三ブチルエステルは、例えば非水媒体中で酸で処理する
ことにより遊離のカルボン酸に転化できることが見出された。トリフルオロ酢酸
及び蟻酸は、カルボキシル保護基を除去するために使用可能で、分子中のナイト
ロジェンマスタード部分への悪影響を与えない反応剤の例である。
従って本発明は式ＸＸ：
Ｍ−Ａｒ−ＣＯＮＨ−Ｒ（ＸＸ）
上式中、
Ａｒは芳香族理系を表し、Ｒ−ＮＨは第三ブチルエステルの形で少なくとも一つ
のカルボン酸基を含むα−アミノ酸ＲＮＨ！又はオリゴペプチドＲ−ＮＨ，の残
基であり、及びＭは下記式のナイトロジエンマスタード基を表す、
ＹＣＨ，ＣＨ。
上式中、
Ｙ及びＬは一分子中で同−又は異なっていてもよい脱離性基、例えばハロゲン（
例えば塩素）、メシルオキシ、トリフルオロメシルオキシ又は４−トシルオキシ
基である、のナイトロジェンマスタード化合物を提供する。
芳香族基Ａｒは好適には基Ｍ及び−ＣＯＮＨ−Ｒにより置換されているフェニル
環である。かような環において、基Ｍは好適には基−ＣＯＮＨ−Ｒに対し４−位
に存在する。
アミノ酸又はオリゴペプチドＲ−ＮＨ，は本発明の化合物の基Ｒ−Ｎ■］が酵素
の影響下に生体内で除去できるように選択される。他のα−アミノカルボン酸も
使用できるが、グルタミン酸及びアスパラギン酸は適当なアミノ酸である。アミ
ノ酸はＤ又はＬ配置であることができる。
本発明の化合物の製造は上記のようなアミノ酸又はオリゴペプチドＲ−ＮＨ１の
使用を必要とする。ｔ−ブチル化アミノ酸又はオリゴペプチドは慣用の手段によ
り製造できる。例えば、グルタミン酸はｔ−ブチルアセテートと反応することが
できる。
ｔ−ブチル保護基を有するアミノ酸又はオリゴペプチド、Ｒ−Ｎ Ｈ！又はそれ
らの酸付加塩、例えばＲ−ＮＨ，”Ｃヒは、次いで式２式％
上式中、
Ａｒは上に定義した通りであり、Ｘはヒドロキシ、ハロゲン、例えば塩素、又は
ペプチド化学の分野で周知の技術によって残基−ｃ。
がアミド結合を形成することを可能とするような他の基であり、及びＺはナイト
ロジエンマスタード基Ｍに転化される基である、の化合物と反応できる。基Ｚは
アミンに転化できる基が好都合である。
得られるアミンは例えば−ＮＨ８又はヒドルキシルアミンであることができる。
好適な合成方法はｔ−ブチル化アミノ酸又はオリゴペプチド、又はそれらの酸付
加塩、例えばジ−ｔ−ブチルグルタメート塩酸塩と式０２Ｎ−Ａｒ−ＣＯＮＨ−
Ｒの化合物との反応を含む。得られる中間体ＸＸ■■：
０！Ｎ Ａｒ−Ｃ０ＮＨＲ（ＸＸＩ Ｉ）を次いでナイトロジェンマスタード基
Ｍに転化することができる。
この転化は本発明者等の前記の国際特許出願中に記載されているように慣用の方
法で実施できる。例えば、最初に水素化により、例えばＰｄ／Ｃ触媒の存在にお
いて水素によりニトロ基をアミノ基に転化し、中間体ＸＸＩＮＩ
Ｈ，Ｎ−Ａｒ−Ｃ０ＮＨ−Ｒ（ＸＸＩ Ｉ Ｉ）を得ることができる。
次いでアミン基は適当な置換により所望のナイトロジェンマスタードに転化でき
る。例えば、アミン基は溶剤、例えば酢酸中で中間体ＸＸＩＩＩとエチレンオキ
シドとの反応により転化してＸＸＩＩＩのビス（２−ヒドロキシエチル）アミン
誘導体を生じ、次いで更に有機溶剤、例えばピリジン中で式
％式％
上式中、Ａはメチル、トリフルオロメチル又はトリルであり、及びＢはハロゲン
（例えば塩素）である、
の化合物と反応させて、本発明による化合物を得ることができる。
例えば中間体ＸＸＩＩの転化による本発明のナイトロジェンマスタード化合物の
製造に続いて、該化合物は慣用の方法、例えばクロマトグラフィー及び／又は結
晶化により精製することができる。
本発明による第三ブチルエステル化合物の合成に続いて、本発明者等の前記の国
際特許出願中に記載された方式で使用するためのプロドラッグが得られる。
本発明の更に別な具体化によれば、本発明のナイトロジエンマスタード化合物は
下記式：
％式％
上式中、Ｍ及びＡｒは上に定義した通りであり、Ｒ’−ＮＨはα−アミノ酸Ｒ’
−ＮＨ，又はオリゴペプチドＲ’−ＮＨ，の残基である、
のナイトロジェンマスタードブロドラッグを得るために使用することができる。
これは式ＸＸの化合物の加水分解によりｔ−ブチル保護基を除去することにより
達成できる。適当な酸は事実上無水形のトリフルオロ酢酸及び蟻酸を含む。
第三ブチルエステルの除去は、事実上無水溶液中で第三ブチルエステルをトリフ
ルオロ酢酸と一緒に室温、例えば１５−２５℃に保持することにより極めて簡単
に行うことができる。少なくとも加水分解されるべき第三ブチルエステル基と当
量である量のトリフルオロ酢酸を使用することが望ましく、トリフルオロ酢酸の
正確な比率及び加水分解温度は特に重要ではないが、低温の使用及びトリフルオ
ロ酢酸の比率を小さくすることは、第三ブチルエステル基の全体的加水分解が生
起するのに必要な期間を長引かすのに役立つだけである。
本発明に従って、無水条件下でトリフルオロ酢酸を用いて行われる第三ブチルエ
ステル基の加水分解は、これらの反応条件下でのナイトロジェンマスタードの分
解を事実上完全に回避しながら、殆ど定量的に（〉８０％）進行することが見出
された。
蟻酸はトリフルオロ酢酸の代替物として使用することができる。しかしより苛酷
な反応条件が必要である。温度は室温以下、好適には１０℃に保持されなければ
ならない；エステルの濃度は低く、好適には５ｍｇ／ｍｌでなければなない；反
応時間は好適には４８時間まで延長しなければならない。この反応時間後、蟻酸
は凍結乾燥により除去できる。これらの条件下で保護基の脱離は定量的な収率で
完結まで進行し、得られるプロドラッグは更に製剤化することなく使用できる。
下記の実施例は本発明を説明するために示されたものである。下記の反応図式は
対応するジー第三ブチルエステルの加水分解による三種の安息香酸ナイトロジェ
ンマスタードグルタメートブロドラッグの製造を例示している：
続〈
実施例１
実験の部
メルク（Ｉｌｅｒｃｋ）のシリカ（種類７７３４．９３８５及び１５１１１）が
重力力ラム（ｇｒａｖｆｔｙ ｃｏｌｕｍｎ）に使用された。ＴＬＣは予備被覆
されたシリカ６０Ｆｓｉ４（メルク、種類５７５３）上で行われた。ＴＬＣの斑
点はエプスタイン（Ｅｐｓｔｅｉｎ）噴霧Ｉで発色させた。融点はコフラーＱｏ
ｆｌｅｒ）ブｏ−７り［ライチャート・サーモヴアール（Ｒｅｉｃｈｅｒｔ Ｔ
ｈｅｒｅｇｖａｒ） ］融点測定装置で測定され補正は行わなかった。電子衝撃
スペクトルはＶＧ７０７０Ｈスペクトロメーター及びＶＧ２２３５データ処理設
備を用い、直接挿入法、７０ｅＶのイオン化電圧及び１００μＡのトラップ電流
、及び１８０°−２００℃のイオン源温度を使用して測定された。ＦＡＢ質量ス
ペクトルはキセノンガスを用いて測定された。報告されたスペクトル値は特に断
らない限り電子衝撃法によるものである。
ＮＭＲスペクトルは内部標準としてＭｅ、Ｓｉを用い、ブルーカー（Ｂｒｋｅｒ
）ＡＣ２５０（２５０ＭＨｚ）を用いてＭｅ、５Ｏ−ｄ、中で測定された。元素
分析はＣＨＮアナリシス（＾ｎａｌｙｓｉｓ）社、ウィグストン（Ｗｉｇｓｔｏ
ｎ）街、レスター（Ｌｅｉｃｅｓｔｅｒ） 、イングランド、により測定された
。
ジ−ｔ−ブチル４−アミノベンゾイル−グルタミン酸（ＩＶ）。
ジ−ｔ−ブチル４−ニトロベンゾイル−グルタミン酸は文献の方法！の変更方法
により製造された。ＥｔｓＮ （１９ｍＬ、１３７ミリモル）に溶解したジ−ｔ
−ブチルし一グルタメート塩酸塩（２０ｇ、６８ミリモル）の溶液にＣＨｔＣｌ
ｔ （１６０ｍＬ）に溶解した塩化４−ニトロベンゾイル（Ｉ Ｉ）（１３ｇ、
７０ミリモル）の溶液を滴下して加えた。
抽出処理すると固体（１１Ｉ）が得られ、それを水素化すると所望のアミン（Ｉ
Ｖ）が得られた。これをＥｔＯＨ−シクロヘキサン（４５：５５）から結晶化し
た；収率−８５％。
ジ−ｔ−ブチル４−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］ベンゾイルーＬ−
グルタメート（Ｖ）、ＨＯＡｃ （１２０ｍＬ）に溶解したアミ：／ （ＩＶ）
（２１，９７ｇ、５８ミ’Ｊ％ル）をエチレンオキシド（１２ｍＬ、２４０ミリ
モル）と共に室温で４８時間撹拌した。溶剤を真空中で４５℃で除去し、残渣を
ＣＨ，ＣＩ、とＨ，Ｏの間に分配した。有機相を分離し、Ｈ８Ｏで洗浄し、乾燥
（ＮａｚＳＯ４） し、蒸発乾固した。
粗製の油状物をシリカゲル（メルク、種類９３８５）上でクロマトグラフにかけ
、ＥｔＯＡｃ ＣＨＩＣＩ！ （１： １）で溶離した。生成物（２１，１７ｇ
、７８％）は６４°−６５℃で溶融した。ＮＭＲ（Ｍｅｔｓｏ−ｄ、） δ１．
３６ （ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル）、１．３９ （ｓ、９Ｈ。
４．８０ ｃｔ、２Ｈ，、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２ＨＯ） 、６．６９ （ＡＢＱ、
２Ｈ，ｊ＝８．９Ｈｚ、芳香族Ｈ−３，５） 、７．７０ （ＡＢｑ、２Ｈ，芳
香族Ｈ−２，６）、８．１５ （ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．６Ｈｚ、ＮＨ）：質量スペ
クトルｍ／ｚ４６６ （Ｍ”、１６％） 、４３５ （Ｍ−ＨＯＣＨｌ、６５％
） 、２０８ （Ｍ−ＮＨＣＨ（Ｃｏ、ｔ−ブチル） ＣＨｔ ＣＨ２ＣＯ！
ｔ−ブチル１００％）。分析値（ＣｕＨｓａＮｓＯｙ ・０．２５ＨｚＯ）ＣＳ
Ｈ。
Ｎ（表１参照）。
ジ−ｔ−ブチル４−［ビス（２−メシルオキシエチル）アミノコベンゾイル−し
一グルタメー１−（Ｖｌ）。
ジ−ｔ−ブチル４−［（２−クロロエチル）（２−メシルオキシエチル）アミノ
コベンゾイル−し一グルタメート（Ｖｌｌ）。
ジ−ｔ−ブチル４−［ビス（２−クロロエチル）アミノコベンゾイル−し一グル
タメート（Ｖｌｌｌ）。
ピリジン（９，５ｍＬ）に溶解した（Ｖ）（２，００ｇ、４．２９ミリモル）の
溶液を塩化メタンスルホニル（１，３ｍＬ、１７．２ミリモル）と共に２℃で２
０分間撹拌し、次いで５０℃で１０分間撹拌した。反応混合物をＣＨ＊Ｃ１ｔ及
びＨ！０の間に分配した。有機相を分離し、Ｈ，０で洗浄し、乾燥（ＮａｔＳＯ
＊）Ｌ、そして蒸発乾固した。濃縮物は各々がエプスタイン試薬で陽性の結果（
青い着色）を与える三種の生成物を含んでいた。混合物をシリカゲル（メルク、
種類１５１１１）上でクロマトグラフにかけ、ＥｔＯＡＣ−ＣＨ＊Ｃ１ｔ （１
： ９）で溶離した。最も遅い溶離分はビス（２−メシルオキシエチル）誘導体
ｆｆＩ） （０゜６ｇ、２２％）であった：融点１１４−１１６℃；ＮＭＲ（Ｍ
ｅｔＳＯ−δ６）δ１．３９ （ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル） 、１．４０ （ｓ、
９ＨＳｔ１６ （ｓ１６Ｈ，２ＣＨｓＳＯｓ） 、３．８１ （ｔ、４ＨＳＪ＝
５．５Ｈｚ。
２ＣＨｓＳＯｓＣＨｔＣ旦ｓ） 、４．３４ （ｍ、 ５Ｈ，２ＣＨ３ＳＯ３Ｃ
旦ｌＣＨ３及びＣＨ） 、６．８４ （ＡＢｑ、２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、芳香族
Ｈ−３，５） 、７．７２ （ＡＢｑ、２Ｈ，芳香族Ｈ−２，６Ｌ ８．２６
（ｄ。
ＩＨ，Ｊ−７，７Ｈｚ、ＮＨ）；質量スペクトル（ＦＡＢ）ｍ／ｚ６２３ （［
Ｍ＋Ｈ″″］、１９％）３６４ （Ｍ−ＮＨＣＨ（ＣＯｚｔ−ブチル）ＣＨＩＣ
ＨＩＣＯｔｔ−ブチル１００％）。分析値（Ｃ＊ｓ）Ｉ＜ｚＮｔｏ＋＋ｓ＊）Ｃ
，Ｈ，Ｎ （表１参照）。
二番目に溶離したものは（２−クロロエチル）（２−メシルオキシエチル）誘導
体（ＶＩＩ）（０，２５ｇ、８％）であった：融点７１−７３℃； ＮＭＲ（Ｍ
ｅ ！ Ｓ Ｏｄ ５）６１．３９ （ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル）、１．４０
（ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル） 、２．００ （ｍ、２Ｈ，ＣＨ，ＣＨＩＣＯ８ｔ−
ブチル） 、３．１５ （ｓ、３Ｈ，ＣＨｓＳＯｓ） 、３．７７ （Ｓ、４Ｈ
，ＣＩ ＣＭＩＣＨり 、３．８２ ｃｔ、２Ｈ，Ｊ＝５．５ＨｚＳＣＨｓＳＯ
ｊＣＨＩＣ旦ｓ） 、４．３３ （ｍ、３Ｈ，ＣＨｇ５Ｏ３Ｃ旦、ＣＨ，及びＣ
Ｈ）、６．８２ （ＡＢＱ、２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、芳香族Ｈ−３，５）、７．
７７ （ＡＢＱ、２Ｈ，芳香族Ｈ−２，６）、８．２４ （ｄ、ｌｌ−１，Ｊ＝
７．６Ｈｚ、ＮＨ）；質量スペクトルｍ／ｚ５６２（Ｍ”、１００％）４５３
（Ｍ−ＣＨＩＳＯＩＣＨ！、９％）３０４ （Ｍ−ＮＨＣＨ（ＣＯ，ｔ−ブチル
） ＣＨ！ ＣＨ！ ＣＯｚ ｊ−ブチル、１７％）。分析値（Ｃ！ＩＨ！ＩＮ
！ＯＩＣｌ５）Ｃ，Ｈ，Ｎ、Ｃ１，Ｓ （表１参照）。
最も早い溶離物であるビス（２−クロロエチル）誘導体（Ｖｌｌｌ）は非常に収
率が低い（０，０１ｇ、０．４％）ので異なる手法による製造が行われた。（Ｖ
）（２，５３ｇ、５．４３ミリモル）の溶液を２℃でピリジン（１，７ｍＬ、２
２．５ミリモル）中で塩化メタンスルホニル（１゜７ｍＬ、２２．５ミリモル）
と共に２０分間、次いで８０℃で８０分間処理した。混合物を従前のように分配
し、乾燥し、及び濃縮してエプスタイン噴霧で陽性の結果（青い着色）を与える
二つの生成物を得た。混合物をシリカゲル（メルク、７７３４）上でクロマトグ
ラフにかけ、従前のような溶剤で溶離した。溶離の遅い（２−クロロエチル）（
２−メシルオキシエチル）誘導体（ＶＩＩ）は極めて少ない収率（０，０１ｇ、
０．３％）で存在した。溶離の速い成分はビス（２−クロロエチル）誘導体ｆｖ
ＩＩＩ）（２゜ｌ１ｇ、７７％）であった：融点１４２−１４３℃； ＮＭＲ（
Ｍ ｅ ｔ Ｓ Ｏｄ ｓ）δ１．３９ （ｓ、９Ｈ，ｔ−ブチル）、１．４０
（ｓ、９Ｈ１ｔ−ブチル） 、１．９９ （ｍ、２ Ｈ、ＣＨ＊ ＣＨＩ Ｃ０
Ｕｔ−ブチル） 、３．７８ （ｔ、８Ｈ，Ｊ＝５．０Ｈｚ、２ＣＩＣＨｔＣＩ
−１ｓ） 、４．２４ （ｍ、ＩＨ，ＣＨ） 、６．７０ （ＡＢｑ、２Ｈ，Ｊ
＝９゜９Ｈｚ、芳香族Ｈ−３，５） 、７．７７ （ＡＢｑ、２Ｈ，芳ＩＦ族Ｈ
−２，６） 、８．２６ （ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．６ＨｚＳＮＨ）：質量スペクト
ルｍ／ｚ５０２（Ｍ”、４％）、４５３ （Ｍ−ＣＩＣＨ，，４％）、２４４（
Ｍ−ＮＨＣＨ（Ｃｏｓｔ−ブチル）ＣＨｚＣＨ＊Ｃ０ｔ１−ブチル、１００％）
。分析値（Ｃ＊４ＨｓｓＮ＊０ｓＣＩりＣ５Ｈ１ＮＸＣ１（表１参照）。
二重の製造−一般的方法。化合物（Ｖｌ）（０，２１３ｇ）、（ＶＩＩ）（０，
１２７ｇ）又は（ｖｚｌ）（０，４０２ｇ）をＴＦＡ （１−２％ｗ／ｖ）中に
懸濁し、室温で３０分間撹拌した。３０−３５℃で減圧下で酸を除去した。残留
する油状物を酢酸エチル（１ｍＬ）で希釈し、同じ温度で蒸発した。この希釈／
蒸発段階を更に１９回繰り返した。化合物（ＩＸ）（０，１９ｇ、８３％）、４
−［ビス（２−メシルオキシエチル）アミノ］ベンゾイルーＬ−グルタミン酸が
（Ｖｌ）から純粋な生成物として得られた：ＮＭＲ（ＭｅｔＳＯ−ｄｓ）δ１．
９９ （ｒｎ、 ２９Ｈｚ、芳香族Ｈ−３，５） 、７．７５ （ＡＢｑ、２Ｈ
１芳香族Ｈ−２，６）、８．２９（ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．７Ｈｚ、、ＮＨ）、元素
分析中で注目されたＥｔＯＡｃの存在はＮＭＲにより確証された；、質量スペク
トル（ＦＡＢ）ｍ／ｚ５１１ （［Ｍ＋Ｈ”ｌ 、２０％）、３６４ （Ｍ−Ｎ
ＨＣＨ（Ｃｏ！Ｈ）ＣＨ，ＣＨＩＣＯＩ）Ｉ、１００％）。分析値（ＣＩＩＨ！
＠Ｎ＊０１ＩＳｔ・１．ＩＴＦＡ・０．４５ＥｔＯＡｃ）ＣＳＨ，ＮＳＳ、Ｆ
（表１参照）。この化合物はエプスタイン噴霧試薬で陽性（青い着色）に反応し
た。
化合物（Ｘ）（０，０９，８２％）、４−［（２−クロロエチル）（２−メシル
オキシエチル）アミノコベンゾイル−し一グルタミン酸は（ＶＩＩ）から同様に
して得られた＋ＮＭＲ（Ｍｅ！５ｏ−ｄ、）δ１，９９（ｍ、 ２Ｈ，Ｃ旦ｔｃ
Ｈ＠Ｃ０ｔＨ’） 、２．３３ （ｔ、 ２Ｈ，Ｊ ＝７．３Ｈｚ、ＣＨ，Ｃ旦
ＩＣＯ！Ｈ） 、３．１６ （Ｓ、３Ｈ１ＣＨ３ＳＯり 、３゜７７（ｓ、４Ｈ
，ＣＩＣＨｘＣＨｚ） 、３．８３ （ｔ、２Ｈ，、Ｊ＝５．７Ｈｚ。
ＣＨｓＳＯｓＣＨ＊ＣＨ＊） 、４．３３ （ｍ、 ３Ｈ，ＣＨｓＳＯｔＣ旦Ｉ
ＣＨＩ及びＣＨ） 、６．８２ （ＡＢｑ、２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ、芳香族Ｈ−
３，５） 、７．７７ （ＡＢｑ、２Ｈ，芳香族Ｈ−２，６）、８．２９（ｄ、
ＩＨ，Ｊ＝７．７Ｈｚ、ＮＨ）：質量スペクトル（ＦＡＢ）ｍ／ｚ４５１（［Ｍ
＋Ｈ”］ 、５５％、４０１．（Ｍ−ＣＩＣＨ！、４％）、３４１（Ｍ−ＣＨｓ
ＳＯｓＣＨ＊１．１．７％）。分析値（自ｔＨ＊５ＮｘＯｓｃｌＳ ・０．２５
ＴＦＡ）Ｃ，Ｈ，Ｎ、Ｃ１、Ｆ、 Ｓ （表１参照）。この化合物はエプスタイ
ン噴霧試薬で陽性（青い着色）に反応した。
化合物ｃＸＤ （０，３３ｇ、９４％Ｌ４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ
コベンゾイル−し一グルタミン酸も（ＶＩＩＩ）から同様Ｈ） 、３．７８ （
ｔ、２Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ、２ＣＩ ＣＨＩＣＨり、４゜３４（モル、ＩＨ，Ｃ
Ｈ） 、６．８０ （ＡＢｑ、２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ。
芳香族Ｈ−３，５） 、７．７７ （ＡＢＱ、２Ｈ，芳香族Ｈ−２，６）、８．
２９ （ｄ、ＩＨＳＪ＝７．８ＨｚＳＮＨ）；質量スペクトルｍ／ ｚ ３７２
（Ｍ−Ｈ！０１１２％’） 、２４４ （Ｍ−ＮＨＣＨ（ＣＯｚＨ）ＣＨｓＣ
Ｈ，ＣＯ工Ｈ１４５％）。分析値（Ｃ＋ｓＨｔ。Ｎ２０ｓＣ］！・０．４ＴＦＡ
）Ｃ，Ｈ，Ｎ、Ｃｌ５Ｆ （表１参照）。この化合物はエプスタイン噴霧試薬で
陽性（青い着色）に反応した。
実施例２
実施例１で生成したジ−ｔ−ブチルエステルＶＩＩ （３，００ｇ、５゜３３ミ
リモル）を蟻酸（９８％、６００ｍ１）中において１０℃で４８時間撹拌する。
次いでバイヤル増巾に移し、凍結乾燥機により凍結乾燥する前に、液体窒素中で
冷凍する。酸が総て除去された時に、凍結乾燥機上でまだ真空下にある間にバイ
ヤル壜に蓋をする。保護基の脱離は定量的であり、最終生成物として白色粉末状
のジカルボキシレートＸ（２゜４０ｇ１１００％）が得られる。
（ｓ、３Ｈ，ＣＨ３ＳＯ４） 、３．７７ （ｓ、４Ｈ，ＣＩＣＨｚＣＨｚ）、
３．８３ （ｔ１２Ｈ，Ｊ＝５．４Ｈｚ、 ＣＨｓＳＯｓＣＨｘＣ旦ｔ）、４．
３３ （ｍ、３Ｈ，ＣＨ３５Ｏ３Ｃ旦、ＣＨ，及びＣＨ） 、６．８２ （ＡＢ
ｑ。
２Ｈ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、芳香族Ｈ−３，５） 、７．７７ （ＡＢｑ、２Ｈ１芳
香族Ｉ（−２，６） 、８．２７ （ｄ、ＩＨ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、ＮＨ）；質量
スペクトルＦＡＢｍ／ｚ４５１ （［Ｍ十Ｈ’］ 、１７に）、４０１（Ｍ Ｃ
Ｉ Ｇ Ｈｚ、７％） 、３０４ （Ｍ−ＮＨＣＨ（Ｃｏ！Ｈ）ＣＨＩＣＨＩＣ
Ｏ！Ｈ，１００％）。
分析値（ＣｕＨｔｓＮ＊０ａＣＩＳ・０．２Ｈ＊Ｏ）肚裏菫 実測値
Ｃ４４，９２４４，８９
Ｈ５，１９５，４１
Ｎ ６．１７ ５．７８
Ｃ１７゜７９ ７．８３
Ｓ７．０５６．９７
【文献】
（１）エプスタイン（Ｅｐｓｔｅｉｎ） 、Ｊ、 ； ｏ−ゼンクール（Ｒｏｓ
ｅｒ＋ｔｈａ１．）、Ｒ，１，； ｘ−７ス（Ｅｓｓ） 、ＲＪ、、 ＾ｎａ１
． Ｃｈｅｗ、、１９５５．２７．１４３５゜（２）ハインズ（取ｎｅｓ） 、
Ｊ、Ｂ、 ；ヤング（Ｙａｎｇ） 、Ｙ、 Ｃ，Ｓ、 ； マツキュー（Ｍｃ−
Ｃｕｅ） 、Ｇ、Ｈ，ベンジャミン（Ｂｅｎｊａｍｉｎ） 、Ｍ、Ｂ、、Ｆｏｌ
ｙｌａｎｄ ＡｎｔｉｆｏｌｙＸ Ｐｏｌｙ−ｇｕｔａｍａｔｅｓ” 、ゴール
ドマン（Ｇｏｌｄｍａｎ）、１、Ｄ、、カブナー（Ｃａｂｎｅｒ） 、Ｂ、Ａ、
；ベルチノ（Ｂｅｒｔｉｎｏ） 、Ｊ、Ｒ。
編集。ブレナム・プレス（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ） 、＝ニーヨーク、１９
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