JPH04266892A

JPH04266892A - ホスファチジン酸類の製造方法

Info

Publication number: JPH04266892A
Application number: JP2841891A
Authority: JP
Inventors: Hideki Mori; 秀樹森; Yasuhiro Miura; 三浦　康広; Hideki Yokomichi; 秀季横道
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 1991-02-22
Filing date: 1991-02-22
Publication date: 1992-09-22
Anticipated expiration: 2014-08-25
Also published as: JP2941447B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、高純度ホスファチジン
酸（以下ＰＡと略記する）類及び／又はリゾホスファチ
ジン酸（以下Ｌ−ＰＡと略記する）類の製造方法に関す
るものである。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】リン脂
質は生体膜構成要素の基本物質であり、細胞組織の保護
、情報の伝達、物質移動の制御等、生命活動の基本を司
る機能を有する脂質の一つである。

【０００３】近年、二分子膜形成能を有するリン脂質が
形成するベシクル（又はリポソーム）が各種機能物質を
包接する機能を有するという現象が学問的並びに工業的
に注目され始め、例えば医薬・医療分野においてＤＤＳ
（ドラッグデリバリーシステム）としてその応用が期待
されている。

【０００４】本発明者らは、従来よりかかる高機能脂質
の食品分野への利用について検討を続けてきたが、先般
リン脂質の１種であるＰＡを利用することにより、油ハ
ネの無い離型性に優れた調理油を完成させることに成功
した（特開平１−２７４３１　号）　。

【０００５】更に、ＰＡの産業分野への利用例としては
、例えば製パン工程での生地物性改良（特開昭５８−５
１８５３　号）　、ＰＡとツエイン複合体よりなる乳化
剤の製造（特開昭６２−２０４８３８号）　等食品工業
への利用、医薬品への利用（特開昭５４−１０５２２２
号、同５５−１１５８２号、同５６−１２７３０８号、
同６０−２５５７２８号）　、化粧品への利用（特開昭
５９−２７８０９　号）　、化成品への応用（特開昭５
３−１０８５０３号、同６０−２４３１７１号）　等が
挙げられ、各種産業分野での利用が検討されている。

【０００６】ＰＡの製造法としては、レシチンを油糧種
子の破砕物又は抽出液で処理する方法等があるが、得ら
れたものは夾雑物が混入しているため精製する必要があ
る。現在、ＰＡ、Ｌ−ＰＡ等のリン脂質の精製法にはカ
ラムクロマトグラフィーが一般的に使用されている。特
に、ケイ酸カラムクロマトグラフィーによる精製法は展
開溶媒の極性を変えることにより、各成分を溶出させ、
分取している。ＰＡ、Ｌ−ＰＡの精製には展開溶媒とし
てクロロホルム−メタノール混合溶媒を用い、それの混
合比を変えることにより、極性を変化させ、分画を行っ
ている。しかし、夾雑物の混入が問題となり、又、高純
度の標品を得るには、カラムを数回通すことが必要で、
それに伴う使用溶媒の増加、回収率の低下等の問題が生
ずる。さらに、薄層クロマトグラフィー上で分離したＰ
Ａ、Ｌ−ＰＡを非分解試薬で検出し、その部分をかきと
って抽出する方法がとられているが、この方法では収量
に問題があり、工業上、有効ではないと考えられる。

【０００７】従って、本発明の目的は、純度の高いＰＡ
、Ｌ−ＰＡ類を効率よく製造する方法を提供することに
ある。尚、本発明でいうＰＡ類及び／又はＬ−ＰＡ類とは、Ｐ
Ａ及び／又はＬ−ＰＡの金属塩並びに金属を含まない遊
離のＰＡ及び／又はＬ−ＰＡである。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決すべく鋭意研究の結果、本発明を完成するに到った
。

【０００９】即ち、本発明は、レシチンを油糧種子の破
砕物又は抽出液で処理してホスファチジン酸及び／又は
リゾホスファチジン酸を含むリン脂質混合物を得、この
リン脂質混合物を下記の工程（ａ）　を含む精製工程に
より精製し、更に酸性下、含水水溶性溶剤による洗浄を
行うことを特徴とするホスファチジン酸類及び／又はリ
ゾホスファチジン酸類の製造方法を提供するものである
。

【００１０】（ａ）　ホスファチジン酸及び／又はリゾ
ホスファチジン酸を含むリン脂質混合物を、水又は非極
性溶剤に分散又は溶解し、次いで多価金属塩水溶液と極
性溶剤存在下アルカリ条件で反応させ、ホスファチジン
酸及び／又はリゾホスファチジン酸の多価金属塩を含有
するリン脂質混合物を製造する工程。

【００１１】また、本発明は、上記精製工程が、上記工
程（ａ）　と共に、更に下記の工程（ｂ）を含むことを
特徴とするホスファチジン酸類及び／又はリゾホスファ
チジン酸類の製造方法を提供するものである。（ｂ）　（ａ）　で得たリン脂質混合物を非極性溶剤に
溶解させた後、ホスファチジン酸及び／又はリゾホスフ
ァチジン酸の多価金属塩を沈澱させる物質を添加し、ホ
スファチジン酸及び／又はリゾホスファチジン酸の多価
金属塩を沈殿させる工程。

【００１２】本発明においては、まずレシチンを油糧種
子の破砕物又は抽出液で処理する。油糧種子の破砕物又
は抽出液としては、油糧種子を破砕又は抽出したもの、
あるいはこれらを更に膜等に透過精製した処理物などが
使用できる。この処理は不活性ガス存在下で行うことが
好ましく、処理方法は従来公知の方法を用いることがで
きる。

【００１３】次に、得られたＰＡもしくはＬ−ＰＡを含
有するリン脂質混合物は上記工程（ａ）　を含む精製工
程により精製される。

【００１４】工程（ａ）　においては、まずホスファチ
ジン酸及び／又はリゾホスファチジン酸を含むリン脂質
混合物を水又は非極性溶剤に分散又は溶解する。この際
用いる非極性溶剤としては、炭素数５〜１６の比誘電率
１０以下の液体有機化合物が挙げられ、比誘電率１０以
下の液体有機化合物としては、炭素数５〜１６の炭化水
素、ハロゲン化炭化水素、芳香族炭化水素等の置換基を
有する炭化水素などが挙げられるが、安全性の面から炭
素数５〜１６の炭化水素が良く、特にｎ−ヘキサンが好
ましい。ここで、比誘電率は、日本化学会編化学便覧基
礎編改訂２版（１９７５年）の第１１６６頁〜１１６８
頁並びに第１５８２頁〜１５８３頁に記載の液体有機化
合物並びに液体の比誘電率に基づくものである。次に当
該水又は非極性溶剤に対し０．１　倍容量以上、好まし
くは　０．４〜０．８　倍容量の多価金属塩水溶液と極
性溶剤の混合液を加える。混合液の容積比は多価金属塩
水溶液／極性溶剤が０．１　以上が好ましく、特に０．
５〜２．０が好ましい。また、ここで用いる極性溶剤と
しては、炭素数１〜１０の比誘電率１０を超える液体有
機化合物が挙げられ、比誘電率１０を超える液体有機化
合物としては、炭素数１〜１０の１価アルコール、ケト
ン、多価アルコールが挙げられ、中でも安全性の面から
エタノールが好ましい。更に、多価金属塩水溶液として
用いる多価金属塩としては、Ｍｇ，　Ｃａ，　Ｓｒ，　
Ｂａ等のＩＩＡ　族元素、Ａｌ等のＩＩＩＢ族元素の塩
化物、硫酸塩、炭酸塩、リン酸塩等が挙げられるが、好
ましくは塩化物であり、より好ましくはＣａ塩が挙げら
れ、特に塩化カルシウムが好適である。多価金属塩水溶
液の濃度としては、上記リン脂質混合物のモル数に対し
て１倍モル以上、好ましくは１〜７倍モルが最適である
。以上の組成でｐＨ７．０　以上のアルカリ条件下、好
ましくはｐＨ１０〜１２で０．５　時間以上攪拌処理す
ることによりＰＡ及びＬ−ＰＡの多価金属塩を含むリン
脂質混合物が得られる。

【００１５】本発明における精製工程において、工程（
ｂ）　は上記工程（ａ）　で得られたＰＡ及び／又はＬ
−ＰＡの多価金属塩を選択的に沈澱させる工程である。本工程においては、上記のＰＡ及び／又はＬ−ＰＡの多
価金属塩を含むリン脂質混合物から静置分離、遠心分離
等の公知の技術によりＰＡ及び／又はＬ−ＰＡの多価金
属塩を含むリン脂質混合物を含有する非極性溶剤相を分
離する。水を用いた分散系では脱水、脱溶剤後、非極性
溶剤に溶解する。用いられる非極性溶剤としては、上記
工程（ａ）　で用いたものが使用できる。次にＰＡ及び
／又はＬ−ＰＡの多価金属塩を含むリン脂質混合物を含
有する非極性溶剤に対し、０．１　容量倍以上、好まし
くは０．１　〜２．０　容量倍のＰＡ及び／又はＬ−Ｐ
Ａの多価金属塩を沈澱させる物質を添加してＰＡ及び／
又はＬ−ＰＡの多価金属塩を選択的に沈澱させる。添加
量が０．１　容量倍未満の場合ＰＡ及び／又はＬ−ＰＡ
の多価金属塩の沈澱生成が起こらず、２．０　容量倍を
超えると非極性溶剤中に溶解している不純物が極性溶剤
により抽出され、生成するＰＡ及び／又はＬ−ＰＡの多
価金属塩の純度が低下する。

【００１６】ＰＡ及び／又はＬ−ＰＡの多価金属塩を選
択的に沈澱させる物質としては、脂質類又は炭素数１〜
１０の極性基を有する極性溶剤が挙げられる。脂質類と
しては、モノグリセライド、ジグリセライド、トリグリ
セライドの１種又はそれ以上の混合物が挙げられる。例
えば、炭素数８〜２４の飽和脂肪酸残基、不飽和脂肪酸
残基を含有するモノグリセライド、ジグリセライド、ト
リグリセライドが挙げられるが、好適には上昇融点が２
０℃未満であるものが望ましい。より好適なものとして
は、原料の入手等から食用油脂、とりわけ食用の液状油
脂が安全性の面から好ましい。具体的には大豆油、ナタ
ネ油、ヒマワリ油、コーン油、米油、綿実油等の植物油
脂、魚油等の動物油脂がある。また炭素数１〜１０の極
性基を有する極性溶剤としては、比誘電率１０を超える
液体有機化合物が挙げられ、比誘電率１０を超える液体
有機化合物としては、１価アルコール、ケトン、多価ア
ルコールの１種又はそれ以上の混合物が挙げられ、１価
アルコールとしてはメタノール、エタノール、イソプロ
パノール等が、ケトンとしてはアセトン、メチルエチル
ケトン等が、多価アルコールとしてはエチレングリコー
ル、グリセリン等が挙げられる。特に１価アルコールが
好ましい。

【００１７】ＰＡ、Ｌ−ＰＡの精製純度を上げるために
は上記の工程（ｂ）　を２回以上繰り返すことが望まし
い。すなわ、得られた沈澱物を再びｎ　−ヘキサン等の
非極性溶剤に溶解し、ＰＡ及び／又はＬ−ＰＡの多価金
属塩を選択的に沈澱させる物質を添加することにより精
製を行う。

【００１８】上記の沈澱精製を行った後、更に酸性下、
含水水溶性溶剤による洗浄を行う。この洗浄はｐＨ０．
５　〜５、温度０〜４０℃の条件で、固形分に対して５
重量倍以上の含水水溶性溶剤を用いて行うことが好まし
い。含水水溶性溶剤としては、上記した炭素数１〜１０
の極性基を有する極性溶剤として比誘電率２０を越える
液体有機化合物が挙げられ、比誘電率２０を越える液体
有機化合物としては、１価アルコール、ケトン、多価ア
ルコールの１種又はそれ以上の混合物が挙げられる。１
価アルコールとしては、メタノール、エタノール、イソ
プロパノール等が、ケトンとしては、アセトン、メチル
エチルケトン等が、多価アルコールとしては、エチレン
グリコール、グリセリン等が挙げられ、好適にはエタノ
ールが用いられる。含水水溶性溶剤中の水溶性溶剤に対
する水の量は５〜８０重量％が好ましい。

【００１９】上記のようにして得られたＰＡ及び／又は
Ｌ−ＰＡの多価金属塩は従来公知の塩交換法によりナト
リウム塩等の各種塩化合物にすることができ、また、脱
塩処理により金属を含まない遊離のＰＡ及び／又はＬ−
ＰＡが得られる。

【００２０】

【実施例】以下、本発明を実施例により更に詳細に説明
するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものでは
ない。

【００２１】実施例１油糧種子として中国産大豆（河南２号）を用い、これを
ワーリングブレンダーにて破砕した。５０ｍｌ容量のガ
ラス製カラムに上記破砕物２０ｇを充填し、０．１Ｍ酢
酸ソーダ／酢酸緩衝液１２０　ｍｌ（ｐＨ６．０）を通
液させた。その後、流出してきた液を分画分子量１３０
００　の膜に透過させ、清澄な抽出液を得た。

【００２２】攪拌装置を備えた３００ｍｌ　４口フラス
コに市販脱脂レシチン（ツルーレシチン工業（株）製）
２０ｇをとり、上記の抽出液（ｐＨ６．０）　１２０　
ｍｌを加え、反応系を窒素ガス通気下（１００　ｍｌ／
ｍｉｎ）で３０℃に保ちながら２４時間攪拌を続けた。反応後、７０℃、１時間加熱処理・冷却し、エタノール
６５ｍｌを加えた後にヘキサン１５０　ｍｌで抽出した
。

【００２３】攪拌装置を備えた３００ｍｌ　４口フラス
コに、上記で得たヘキサン抽出液１５０　ｍｌをとり、
エタノール２５ｍｌ、水１５ｍｌ、ヘキサン抽出液固形
分の１／２　倍量の塩化カルシウムを加えた。そして、
常温で攪拌しながら１Ｎ　水酸化ナトリウム溶液を加え
てｐＨを１０．０にした。さらに攪拌を４時間続け熟成
させた後に、遠心分離によってヘキサン溶液を得た。

【００２４】上記ヘキサン溶液１５０　ｍｌにエタノー
ル７５ｍｌを加えて溶剤沈澱させ、遠心分離により上清
を除去した。沈澱部にヘキサンを加えて溶解させ、全体
を７５ｍｌにした。そしてヘキサン溶液を塩酸酸性（ｐ
Ｈ１）下、５０％エタノール水で１５℃、１０分攪拌洗
浄後、分離し、得られたヘキサン相を水酸化ナトリウム
水溶液で中性に戻し、脱溶剤してＰＡを得た。

【００２５】上記溶剤沈澱時の沈澱量を測定し、また得
られたＰＡの加熱着色性を下記方法により評価した。結
果は表１に示した。

【００２６】＜加熱着色性評価方法＞試験管にＰＡ　０
．０２５ｇをとり、そこにジグリセライド１０％を含む
ナタネ油１０ｇを加え、攪拌して溶解させる。それをブ
ロックヒーターで１８０　℃，　７０分加熱した後、色
差分析計（日本電色工業（株）ＳＺ−Σ８０）でヘキサ
ンに対する色差を測定し、そのΔＥ（Ｈ）値を色相の値
とした。

【００２７】比較例１攪拌装置を備えた３００ｍｌ　４口フラスコに、実施例
１のヘキサン抽出液１５０　ｍｌをとり、エタノール２
５ｍｌ、水１５ｍｌを加えた。そして常温で攪拌しなが
ら１Ｎ　水酸化ナトリウム溶液を加えてｐＨを１０．０
にした。さらに攪拌を４時間続け熟成させた後に、遠心
分離によってヘキサン溶液を得た。このヘキサン溶液１
５０　ｍｌにエタノール７５ｍｌを加え、このエタノー
ル添加時の沈澱量を測定した。

【００２８】結果は表１に示した。

【００２９】比較例２攪拌装置を備えた３００ｍｌ　４口フラスコに、実施例
１のヘキサン抽出液１５０　ｍｌをとり、エタノール２
５ｍｌ、水１５ｍｌ、ヘキサン抽出液固形分の１／２　
倍量の塩化カルシウムを加えた。そして常温で攪拌を４
時間続け熟成させた後に、遠心分離によってヘキサン溶
液を得た。このヘキサン溶液１５０　ｍｌにエタノール
７５ｍｌを加え、このエタノール添加時の沈澱量を測定
した。結果は表１に示した。

【００３０】比較例３実施例１のヘキサン抽出液７５ｍｌを塩酸酸性（ｐＨ１
）下、５０％エタノール水で１５℃、１０分攪拌洗浄後
、分離し、得られたヘキサン相を水酸化ナトリウム水溶
液で中性に戻し、脱溶剤してＰＡを得た。このＰＡの加
熱着色性を実施例１と同様の方法で評価した。結果は表
１に示した。

【００３１】

【表１】

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　レシチンを油糧種子の破砕物又は抽出
液で処理してホスファチジン酸及び／又はリゾホスファ
チジン酸を含むリン脂質混合物を得、このリン脂質混合
物を下記の工程（ａ）　を含む精製工程により精製し、
更に酸性下、含水水溶性溶剤による洗浄を行うことを特
徴とするホスファチジン酸類及び／又はリゾホスファチ
ジン酸類の製造方法。（ａ）　ホスファチジン酸及び／又はリゾホスファチジ
ン酸を含むリン脂質混合物を、水又は非極性溶剤に分散
又は溶解し、次いで多価金属塩水溶液と極性溶剤存在下
アルカリ条件で反応させ、ホスファチジン酸及び／又は
リゾホスファチジン酸の多価金属塩を含有するリン脂質
混合物を製造する工程。
【請求項２】　　精製工程が下記の工程（ａ）　及び（
ｂ）　を含む請求項１記載の製造方法。（ａ）　ホスファチジン酸及び／又はリゾホスファチジ
ン酸を含むリン脂質混合物を、水又は非極性溶剤に分散
又は溶解し、次いで多価金属塩水溶液と極性溶剤存在下
アルカリ条件で反応させ、ホスファチジン酸及び／又は
リゾホスファチジン酸の多価金属塩を含有するリン脂質
混合物を製造する工程。（ｂ）　（ａ）　で得たリン脂質混合物を非極性溶剤に
溶解させた後、ホスファチジン酸及び／又はリゾホスフ
ァチジン酸の多価金属塩を沈澱させる物質を添加し、ホ
スファチジン酸及び／又はリゾホスファチジン酸の多価
金属塩を沈殿させる工程。
【請求項３】　　多価金属塩を構成する多価金属がＩＩ
Ａ　族元素又はＩＩＩＢ族元素である請求項１又は２記
載の製造方法。
【請求項４】　　非極性溶剤が炭素数５〜１６の比誘電
率１０以下の液体有機化合物である請求項１又は２記載
の製造方法。
【請求項５】　　比誘電率１０以下の液体有機化合物が
炭化水素又は置換基を有する炭化水素である請求項４記
載の製造方法。
【請求項６】　　極性溶剤が炭素数１〜１０の比誘電率
１０を超える液体有機化合物である請求項１又は２記載
の製造方法。
【請求項７】　　比誘電率１０を超える液体有機化合物
が１価アルコール、多価アルコール又はケトンである請
求項６記載の製造方法。
【請求項８】　　ホスファチジン酸及び／又はリゾホス
ファチジン酸の多価金属塩を沈殿させる物質が、脂質類
又は炭素数１〜１０の極性基を有する極性溶剤である請
求項１又は２記載の製造方法。
【請求項９】　　脂質類が、モノグリセライド、ジグリ
セライド、トリグリセライドの１種又はそれ以上の混合
物である請求項８記載の製造方法。
【請求項１０】　　炭素数１〜１０の極性基を有する極
性溶剤が比誘電率１０を超える液体有機化合物である請
求項８記載の製造方法。
【請求項１１】　　比誘電率１０を超える液体有機化合
物が１価アルコール、ケトン、多価アルコールの１種又
はそれ以上の混合物である請求項１０記載の製造方法。
【請求項１２】　　アルカリ条件がｐＨ７〜１２であり
、ホスファチジン酸もしくはリゾホスファチジン酸の多
価金属塩を沈澱させる物質を添加する前に０．５　時間
以上攪拌熟成させる請求項２記載の製造方法。
【請求項１３】　　油糧種子の破砕物又は抽出液が油糧
種子を破砕又は抽出したもの、あるいはこれらを更に膜
等に透過精製した処理物である請求項１又は２記載の製
造方法。
【請求項１４】　　含水水溶性溶剤による洗浄が、ｐＨ
０．５　〜５、温度０〜４０℃の条件で、固形分に対し
て５重量倍以上の含水水溶性溶剤を用いて行われる請求
項１又は２記載の製造方法。
【請求項１５】　　含水水溶性溶剤が炭素数１〜１０の
極性溶剤であって、比誘電率２０を越える液体有機化合
物である請求項１４記載の製造方法。
【請求項１６】　　比誘電率２０を越える液体有機化合
物が１価アルコール、多価アルコール又はケトンである
請求項１５記載の製造方法。
【請求項１７】　　含水水溶性溶剤がエタノールである
請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の製造方法。
【請求項１８】　　含水水溶性溶剤中の水溶性溶剤に対
する水の量が５〜８０重量％である請求項１４記載の製
造方法。