JPH0378870B2

JPH0378870B2 -

Info

Publication number: JPH0378870B2
Application number: JP59006745A
Authority: JP
Inventors: Haruo Sato
Original assignee: SATO YAKUGAKU KENKYUSHO KK
Current assignee: SATO YAKUGAKU KENKYUSHO KK
Priority date: 1984-01-18
Filing date: 1984-01-18
Publication date: 1991-12-17
Also published as: JPS60152487A; US4634557A; EP0149995B1; DE3576341D1; EP0149995A2; EP0149995A3

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規なデユウテロポルフイリン誘導
体、更に詳細には次の一般式（）、〔式中、R₁及びR₂は一方が

【式】（Ｒは低級アルキル基）で、他方が−CH＝CH₂を示
すか、R₁及びR₂が共に

【式】（Ｒは前記と同じ）を示す〕で表わされるデユウテロポルフイリン誘導体及び
その塩に関する。近年レーザーの医療への応用が活発に行われて
おり、特に癌の治療及び診断においてその進歩は
顕著である。その中でも、Doughertyらはヘマト
ポルフイリン誘導体（HPD）とアルゴン色素レ
ーザーとの組合せで癌の早期発見と治療に大きな
成果をあげている。すなわち、レーザーの生体組
織内への進達度及び直行性を利用し、ヘマトポル
フイリン誘導体のような腫瘍親和性のある光増感
物質を予め投与して腫瘍に蓄積させておき、レー
ザー照射によつて腫瘍の有無を診断すると共に、
その部位を低エネルギーのアルゴン色素レーザー
を用いて選択的に破壊するものである。このように光増感物質を投与して癌の治療を行
うことは、古くから紫外線又は放射線治療におい
て行われてきたが、近年レーザーの出現により、
腫瘍親和性のあるレーザー光増感物質の開発が脚
光を浴びてきた。 D.Kesselらは種々のポルフイリン化合物につ
いて、腫瘍親和性とレーザー光増感作用を検討
し、ヘマトポルフイリンを提供した。しかし、ヘ
マトポルフイリンは、Dolphin著、“The
Porphyrins”、Vol1.アカデミツクプレス発行、
1978年、第297〜298頁、に示されているように、
純粋なものを得るのが困難であり、前述の
Doughertyらの研究において使用されている
HPDも数種のヘマトポルフイリン様物質の混合
物である。このことは基礎研究を行う上で、また
臨床に応用する場合の大きな障害となつていた。また、最近、HPDの各成分の分離、構造決定
及びその成の癌細胞に対する集積性についての多
くの研究が報告されている〔David Kessel、
Thmas J.Dougherty：“Porphyrin
Photosensitization”、165頁（1983年）〕。当該文
献では、ヘマトポルフイリン（HP）を酢酸中硫
酸と処理してHPDを製造している。そして、そ
の生成物の大部分はアセチル体であるが、その主
なものはHPの１つのハイドロキシエチル基があ
脱水反応によりビニル基となつた３(8)−ハイドロ
キシエチル−８(3)−ビニルデユウテロポルフイリ
ン（HVD又はVHD）であり、これらは細胞レベ
ルでのレーザー照射による癌細胞破壊効果におい
て、HPより優れていることを報告している。しかし、この方法では、脱水反応が３位と８位
の何れのハイドロキシエチル基に起つたのか、す
なわちその生成物がHVDあるいはVHDの何れな
のか確認できないと共に、原料のHP自体が純粋
なものとして得られないため、これが癌のレーザ
ー照射治療に用いる光増感剤として開発するため
の大きな障害となつていた。そこで、本発明者は、斯かる欠点を克服せんと
鋭意研究を行つた結果、肝臓機能治療剤として大
量に製造されていて入手容易なプロトポルフイリ
ンの塩又はアルキルエステルをアルコリシスすれ
ば（）式で表わされる単一化合物を得ることが
できること、並びにこの新規化合物が優れた光増
感作用を有することを見出し、本発明を完成し
た。従つて、本発明は、光増感剤として有用な
（）式で表わされるデユウテロポルフイリン誘
導体を提供するものである。本発明のデユウテロポルフイリン誘導体は、プ
ロトポルフイリンの塩又はアルキルエステルをア
ルコール中酸と処理してアルコリシスし、次いで
エステルの場合は脱エステル化することによつて
製造される。酸としては塩化水素等が使用され、反応は数時
間煮沸することによつて行われる。このようにす
るとき、反応生成物は、３位のビニル基がアルコ
リシスされ３−アルコキシエチル−８−ビニル−
デユウテロポルフイリン、８位のビニル基がアル
コリシスされた３−ビニル−８−アルコキシエチ
ル−デユウテロポルフイリン及び両者のビニル基
がアルコリシスされた３−アルコキシエチル−８
−アルコキシエチル−デユウテロポルフイリンの
混合物として得られるが、これらは、その性質の
差を利用して容易に分離することができる。例え
ばプロトポルフイリンジメチルエステルをメタノ
ール中塩化水素でメタノリシスして得られる反応
生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフイーに
対し、ジクロルエタンで溶出すれば、まず原料の
プロトポルフイリンジメチルエステルが溶出し、
続いて３−メトキシエチル−８−ビニル−デユウ
テロポルフイリン（MVD）ジメチルエステル、
３−ビニル−８−メトキシエチル−デユウテロポ
ルフイリン（VMD）ジメチルエステル、次いで
３−メトキシエチル−８−メトキシエチル−デユ
ウテロポルフイリン（MMD）ジメチルエステル
が流出するので、これらを単離することができ
る。これらのジメチルエステルを加水分解すれば
（）式のデユウテロポルフイリン誘導体が得ら
れる。次に実施例を挙げて説明する。実施例１ () プロトポルフイリンジメチルエステル１ｇ
をメタノール500mlに懸濁し、これに塩化水素
ガスを導入して飽和させ、３時間煮沸した。こ
れを10％炭酸アンモニウム水溶液１に注加
し、ジクロルエタン200mlで抽出し、抽出液を
水洗後、硫酸ナトリウムで乾燥した。この抽出
液を、予めジクロルエタンで洗浄したシリカゲ
ルカラムに注加して吸着させ、ジクロルエタン
で溶出を行つた。最初に原料のプロトポルフイ
リンジメチルエステルが溶出された。 () 第２に溶出されるフラクシヨン（TLCで単
一スポツトであることを確認）を集め、溶媒を
留去し、残留物をトルエンより再結晶して、
MVDジメチルエステル0.13ｇ（収率13％）を
得た。元素分析値C₃₇H₄₂N₄O₅ 計算値(%)：Ｃ：71.36、Ｈ：6.80、Ｎ：9.00 実測値(%)：Ｃ：71.31、Ｈ：6.93、Ｎ：9.02 Mass：Calcd622Found623（Ｍ＋１） NMR（400MHz、in CDCl₂）ppm 10.54（1H、ｓ、５−CH） 10.08（1H、ｓ、10−CH） 10.06（1H、ｓ、20−CH） 9.92（1H、ｓ、15−CH） 8.27、8.24、8.23、8.20（1H、ｄ、8¹−CH） 6.36、6.31（1H、ｄ、8²−CH₂） 6.16、6.15（1H、ｄ、8²−CH₂） 6.13、6.12、6.06、6.04（1H、ｑ、3¹−CH） 4.34、4.32、4.30、4.28（4H、ｑ、13¹、17¹−
CH₂−） 3.72（3H、ｓ、７−CH₃） 3.69（3H、ｓ、２−CH₃） 3.63（6H、ｓ、13³、17³エステル−OCH₃） 3.60（3H、ｓ、3¹−OCH₃） 3.57（3H、ｓ、12−OCH₃） 3.52（3H、ｓ、18−OCH₃） 3.23、3.22、3.21、3.20（4H、ｑ、13²、17²−
CH₂−） 2.27、2.25（3H、ｄ、3²−CH₃） −3.76（2H、ｓ、Ｎ−Ｈ） () 第３に溶出されるフラクシヨン（TLCで単
一スポツトであることを確認）を集め、溶媒を
留去し、残留物をメタノールより再結晶して、
VMDジメチルエステル0.10ｇ（収率10％）を
得た。元素分析値C₃₇H₄₂N₄O₅ 計算値(%)：Ｃ：71.36、Ｈ：6.80、Ｎ：9.00 実測値(%)：Ｃ：71.35、Ｈ：6.95、Ｎ：8.67 Mass：Calcd622Found622 NMR（400MHz、in CDCl₃）ppm 10.48（1H、ｓ、５−CH） 10.08（1H、ｓ、10−CH） 9.95（1H、ｓ、20−CH） 9.88（1H、ｓ、15−CH） 8.23、8.20、8.19、8.16（1H、ｄ、3¹−CH） 6.32、6.32、6.28、6.27（1H、ｄ、3²−CH₂
−） 6.14、6.13、6.11、6.11（1H、ｄ、3²−CH₂
−） 6.07、6.06、6.04、6.03（1H、ｑ、8¹−CH−） 4.39、4.37、4.35（2H、ｔ、13¹−CH₂−） 4.32、4.30、4.28（2H、ｔ、17¹−CH₂−） 3.69（3H、ｓ、７−CH₃） 3.66（3H、ｓ、２−CH₃） 3.63（6H、ｓ、13²、17³エステル−OCH₃） 3.61（3H、ｓ、8¹−OCH₃） 3.55（3H、ｅ、12−OCH₃） 3.48（3H、ｅ、18−OCH₃） 3.28、3.26、3.24、3.22、3.20（4H、ｔ、13²、
17²−CH₂−） 2.27、2.25（3H、ｄ、8²−CH₃） −3.78（2H、ｓ、Ｎ−Ｈ） () 第４に溶出されるフラクシヨン（TLCで単
一スポツトであることを確認）を集め、溶媒を
留去し、MMDジメチルエステル0.08ｇ（収率
８％）を得た。 Mass：Calcd654、Found655（Ｍ＋１） NMR（400MHz、in CDCl₃）ppm 10.55（1H、ｓ、５−CH） 10.51（1H、ｓ、10−CH） 10.10（1H、ｓ、20−CH） 10.05（1H、ｓ、15−CH） 6.07、6.05、6.04、6.02（2H、ｑ、3¹−、8¹−
CH） 4.42、4.40、4.39、4.39（4H、ｑ、13¹−17¹−
CH₂） 3.71（3H、ｓ、７−CH₃） 3.70（3H、ｓ、２−CH₃） 3.66（6H、ｓ、13³−、17³−エステル−
OCH₃） 3.63（6H、ｓ、3¹−8¹−OCH₃） 3.62（3H、ｓ、12−OCH₃） 3.61（3H、ｓ、18−OCH₃） 3.31、3.30、3.29、3.28、3.27、3.26（4H、ｔ、
13²、17²−CH₂−） 2.27、2.25（6H、ｄ、3¹−8¹−CH₃） −3.69（2H、、ｓ、Ｎ−Ｈ） () （）で得た抽出液を高速液体クロマトグ
ラフイー〔カラム：μ−bond pack Ｃ−18（日
本ウオーターズ）、溶出液：メタノール、検
出：400nｍ吸光度〕に付した結果は第１図の
とおりである。更に分離した各成分の高速液体
クロマトグラフイーによる同定の結果、MMD
ジメチルエステル（溶出時間2.3分）24.9％、
MVDジメチルエステルとVMDジメチルエス
テル（3.4分）50.7％、原料（5.6分）24.3％で
あつた。実施例２実施例１（）〜（）で得たMVDジメチル
エステル、VMDジメチルエステル又はMMDジ
メチルエステルの各１ｇをピリジン50mlに溶か
し、荷性ソーダ20mgのメタノール溶液を加え、90
℃で２時間撹拌した。反応後析出した結晶を取
し、乾燥し、MVDジナトリウム、VMDジナト
リウム又はMMDジナトリウムをそれぞれ0.1ｇ
を得た。実施例３ DAB誘導ラツト腹水肝癌（AH−7974）由来
の株化培養細胞（JTC−16）をDM−170培地に
て37℃で培養し、対数増殖期中期にMVDジナト
リウム、VMDジナトリウム又はMMDジナトリ
ウムをそれぞれ5μｇ／ml加え、24時間インキユ
ベートした後、５ｍＷ／cm²のエネルギーで波長
630nｍのアルゴンレーザーを照射した。その結
果は第１表のとおりである。

【表】第１表に示すとおり、無添加細胞は３分間のレ
ーザー照射で変化は認められなかつたが、MVD
ジナトリウムはHPDより短い時間で反応し、
VMDジナトリウムはHPDと同程度、MMDジナ
トリウムはHPと同程度であつた。

【図面の簡単な説明】

第１図は、プロトポルフイリンジメチルエステ
ルをアルコリシスして得られる生成物のジクロル
エタン抽出液の高速液体クロマトグラムである。

Claims

【特許請求の範囲】１次の一般式、〔式中、R₁及びR₂は一方が【式】（Ｒは低級アルキル基）で、他方が−CH＝CH₂を示
すか、R₁及びR₂が共に【式】（Ｒは前記と同じ）を示す〕で表わされるデユウテロポルフイリン誘導体及び
その塩。２３−アルコキシエチル−８−ビニル−デユウ
テロポルフイリンである特許請求の範囲第１項記
載のデユウテロポルフイリン誘導体及びその塩。３３−ビニル−８−アルコキシエチル−デユウ
テロポルフイリンである特許請求の範囲第１項記
載のデユウテロポルフイリン誘導体及びその塩。４３−アルコキシエチル−８−アルコキシエチ
ル−デユウテロポルフイリンである特許請求の範
囲第１項記載のデユウテロポルフイリン誘導体及
びその塩。