JPH0346785B2 - - Google Patents

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JPH0346785B2
JPH0346785B2 JP57106389A JP10638982A JPH0346785B2 JP H0346785 B2 JPH0346785 B2 JP H0346785B2 JP 57106389 A JP57106389 A JP 57106389A JP 10638982 A JP10638982 A JP 10638982A JP H0346785 B2 JPH0346785 B2 JP H0346785B2
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    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/521Single-layer analytical elements
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
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Description

【発明の詳細な説明】
本発明はう蝕予防またはう蝕治療に際し当人又
は患者のう蝕活動性を簡易に判別しうる用具に関
する。 従来から歯科の臨床または口腔衛生の立場から
う蝕の罹患性または進行状態を判別する手段とし
て口腔内の唾液または歯垢中の微生物特に細菌例
えばストレプトコツカスミユタンス(以下、S.
mutansと略記する)やラクトバチルス(乳酸菌)
などの菌数や活動性を検査する方法が種々報告さ
れている。出願人は一般細菌を対象として取得し
た特許第539011号(特公昭43−19817号公報)に
おいて細菌が特定の薬剤を変色させることを利用
した迅速判別法を開示したが該特許発明を要約す
れば薬剤として(イ)レサズリン、(ロ)ネオテトラゾリ
ウム塩化物又は(ハ)トリフエニルテトラゾリウム塩
化物の一定量を培養液(微生物増殖の栄養源)に
添加し、該液に試験紙を浸し、乾燥したものを試
験用小紙片とし、これに供試用細菌浮遊液の一定
容量を該試験片に滴下した後に37℃で一定時間培
養し該試験片の色調変化により該細菌浮遊液中の
細菌の活動性を判別する方法を特徴としたもので
ある。 一方う蝕活動性の判別法について種々報告され
ている近時の下野勉他〔小児歯科学雑誌、18(3)
606〜611、1980〕の論旨を要約すれば次の通りで
ある。即ち口腔内より採取した歯垢を生理食塩水
に懸濁したものの一定容量(0.1ml)を検体とす
る。別に調製したシヨ糖10%、プロムチモールブ
ルー(B.T.B)0.006%、窒化三ナトリウム
(Na3N)0.05%、PH7.2とした液を製し、これに
先の検体を接種してこれを37℃に30分間放置す
る。該液の色調は黄緑色、淡黄緑色、黄色に変化
するのでこれを陰性、疑陽性、陽性と読みかえ
る。並行的に行つた従来の培養による試験の変化
と比較した場合に小児う蝕罹患状態と高度な正の
相関性が認められたとしている。更に中村正一他
〔口腔衛生学会雑誌、30(4)昭和55年12月〕は幼
稚園児を対象として口腔内診査を行つた際の判別
法およびその結果を次の通り述べている。即ち呈
色指示数はレサズリン、メチルレツド、アリザリ
ンレツド、ラクモルト、ブロムクレゾールグリー
ン、ブロムフエノールブルー等であつてこれらを
含む指示薬0.003%、シヨ糖10%、Na3N0.05%か
らなる培養液に歯垢の生理食塩水浮遊液の一定容
量を接種したものを37℃で30分間培養してその培
養液の色調変化によりう蝕活動性の判別を行つた
結果、幼稚園児のう蝕罹患歯率と高い正の相関関
係が認められたとしている。なお上記薬液に用い
られているこれら指示薬のうちでレサズリンの色
調変化が最も鮮明であることが記載されている。
上記のようにう蝕活動性の判別法として用いるレ
サズリンが有効な指示薬であることは種々の報告
において認められている。これらはいずれも簡易
法とされる方法であるけれども湿式法であつてレ
サズリン又はPH指示薬を含む少量の発色液に唾液
又は歯垢を加え37℃に加温して30分後の変色を検
するものである。実際臨床には普及していない。
従つて最も一般的な従来技術のう蝕活動試験の方
法は唾液0.1〜0.2ml又は、歯垢を採取しこれを3
ml位の培地に混和し、37℃のふ卵器中で24〜72時
間培養することからなる湿式法である。この方法
は全国的に普及している。 本発明者等はレサズリンを用いたう蝕活動性の
判別法を更に簡易化し、しかも短時間に判別可能
な方法について検討した結果湿式法によらない乾
式法及びこの方法に用いる用具を完成させるに至
つた。すなわち本発明に唾液または歯垢中のう蝕
に関与する菌のう蝕活動性を呈色試薬組成物含有
の乾燥状の試験片例えば試験紙により簡単に短時
間に湿式法によることなく判別する用具の提供が
目的である。本発明の用具の一具体例においては
シヨ糖とレサズリンとを含んだ薬液を製し、これ
に浸し乾燥した円形または方形の小紙片を台紙上
に配置し、該小紙片をサンドイツチ状に挾む形で
別に粘着剤を内側に塗布した円形又は方形の被覆
用フイルムで重畳し、或は小紙片を粘着剤と接触
させないようにする場合には粘着剤を内側周辺部
のみに塗布した円形又は方形の被覆用フイルムで
重畳で、更にこれらとは別に支持用フイルム(小
紙片と被覆用フイルムとを試験時に支持するフイ
ルム)を同じ台紙上に並べて配置し、支持用フイ
ルムも被覆用フイルムも剥離可能に台紙に粘着し
貼り付いて形成されたことを特徴とする。 本発明の判別用具の一具体例を示す図面の第1
図において記号1は薬液を浸み込ませ乾燥した径
5〜10mmの円形又は一辺4mm以上の方形の小紙片
であり、該小紙片の材質は一般に使用する紙好
ましくは厚味約0.8mm以下の紙である。これを
周辺部内側2Aに粘着剤を有する被覆用フイルム
2で覆い、これらと並べて支持用フイルム3を台
紙4上に剥離可能に粘着させて配置する。但し被
覆用フイルムの内側全面に粘着剤を施しておけば
小紙片の片側は常に被覆用フイルムの内側に固定
されたままとなるので試験時に取扱上便利である
ことが多い。このように形成すると使用前の小紙
片1は完全に外気と遮断され空気も流通せず、そ
の上無菌的に保持されるのである。支持用フイル
ム3はサイズとして径5〜10cmの円形又はこの程
度の面積の方形或は矩形でありフイルム2は、径
3〜5cmの円形又はその程度の面積の方形が考え
られる。台紙の大さはフイルム2とフイルム3と
が並置され得るに十分な大さである。なお、これ
らフイルムは透明有機樹脂又は透明プラスチツク
製である。 次に小紙片1に使用する薬液はシヨ糖10重量%
及びレサズリン、トリフエニルテトラゾリウム、
ネオテトラゾリウム、2,6−ジクロルフエノー
ルインドフエノール又はメチルオレンジ或はこれ
らの塩類の0.05〜0.003重量%、好適にはレサズ
リン0.003重量%を有する試薬組成物水溶液から
なつている。この場合のレサズリンは呈色指示薬
であり、前記の通り例えばS.mutansのう蝕活動
性は本指示薬の色調変化により間接的であるが容
易に判別できる。これを詳しく説明れば、唾液又
は歯垢の中にはう蝕の主因をなすといわれるS.
mutams及び乳酸菌等が多く、特にS.mutansの酵
素は培養液中においてシヨ糖を縮合させてグルカ
ン(デキストラン)を作る。糖は又酵素的に乳糖
に迄分解される。この活発な酵素反応、酸化還元
電位の変化、液性の低下等に基いてレサズリンは
色調が変化するものと考えられる。例えば色調が
紫色、青紅色、紅色と検液により変化する。後記
の実施例に示されるようにこの色調変化とう蝕活
動性とは相関する。従つてこれによりう蝕活動性
を判定できるのである。指示薬としてトリフエニ
ルテトラゾリウムの塩化物を使用し上記同様に製
した場合に色調は紅色より無色に変化する。この
色の変化はう蝕活動性の陰性から陽性への変化に
対応する。又指示薬としてメチルオレンジを使用
した場合には色調は黄緑色から赤黄色に変化す
る。この場合のう蝕活動性は陰性から陽性への変
化に対応する。これらの指示薬の中ではレサズリ
ンの色調変化が最も鮮明であつて段階的に変色
し、肉眼的に判別し易いことから指示薬としてレ
サズリンを主として使用することが望ましい。 次にフイルム2に塗布される粘着剤は合成ゴム
等を主体としたものであるが支持用フイルム3や
台紙4より常温で容易に脱着でき、かつ再び小紙
片ごとこれを加温器材即ち例えば金属、木材、プ
ラスチツク等の培養のための加温器材に付着させ
得るものであれば十分である。すなわち唾液や歯
垢を浸ませた小紙片は空気補給を可及的に遮断し
唾液中の水分の蒸発を防止したまま10〜15分間37
℃に培養しなければならず、本発明の用具は簡便
な小器具であるから加温器材の代用物としての人
体皮膚の表面にフイルムごと貼りつけて加温して
もよい。従つてフイルムの接着剤としては人体の
皮膚を害しないものを選択することが望ましい。
なお支持用フイルム3を加温器材又は人体皮膚面
に貼りつけることをせず、加温器内に収納する態
様で使用する場合には支持用フイルム3は接着剤
を有せずともよい。 本発明の判別用具を使用するためには唾液をス
ポイトなどで僅少量通常は一滴採取し、別に用具
の台紙からフイルム2を半ば剥がしながら、中の
小紙片1にスポイトの唾液を落しこれが十分均一
に浸み広がつた後にフイルム2で小紙片1を覆つ
たままの状態で支持用フイルム3上に粘着貼布せ
しめる。フイルム2がその内面周辺に粘着剤を有
する場合を第2図に示す。小紙片1と被覆用フイ
ルム2とを支持したままの状態の該支持用フイル
ム3を台紙4から剥がしこれを加温器表面又はそ
の代用物としての人体の適当な露出部に貼布して
15分後に小紙片1の色調変化を観察する。この色
調変化即ち青色、紫紅色、紅色への変色に応じて
う蝕活動性は陰性、弱陽性、陽性と判別する。37
℃内外の培養温度の維持のため加温器代用として
ヒトの体温を利用できることに本用具の使用特徴
がある。 被覆用フイルム2の内面全部に粘着剤を有する
場合にはこれを半ば剥がしたときに中の小紙片1
はその表面がフイルム2に接着されているのでそ
の裏面を露出することとなり、従つてこの裏面に
対して唾液を添加することとなる。唾液浸潤後に
フイルム2と共に小紙片1を台紙4から剥がし、
これらを支持用フイルム3上に接着させる。この
状態を第3図に示す。支持用フイルム3と共に台
紙4から剥がしてこれらを加温器表面又はその代
用物としての人体露出部表面に貼り付ける。貼り
付けずに加温器内へ収納する場合には台紙4から
支持用フイルム3を剥がすことなく台紙4と共に
加温器内へ収納してもよい。 以上の事から本発明の判別用具はう蝕罹患者は
もとより、特に幼児のう蝕予防又は治療対策とし
てこれを用いう蝕活動性を簡易にしかも短時間に
判別でき、更に製造も容易であるためコストも低
く供給することができる。 次に実施例を示す。 実施例 レサズリン0.025重量%とシヨ糖10重量%との
水溶液に直径8mmの紙片を浸漬し乾燥すること
により判別用の小紙片1(デイスク)を製造し
た。これを内面全部に粘着剤を有する直径4cmの
透明プラスチツク被覆用フイルム2で覆い、4.5
cm×4.5cmの方形透明プラスチツク製支持用フイ
ルム3(裏面に粘着剤を有する)と並置して5cm
×10cmの矩形台紙4に貼り付、これを透明プラス
チツク製の包装用のサツシエ又は小型ポリ袋に入
れてヒートシールしたものを1個の一回使用分の
製品とした。 試験例 唾液検体は被検各人の唾液をミニカツプに採取
しこれからプラスチツクスポイトで一滴(およそ
0.05ml)を取り、本用具のフイルム2をはいで露
出させ又は取出した青色のデイスク(小紙片)1
に十分浸透させてからこれを支持用フイルム3へ
貼り付ける。これらを台紙4から剥がし、これを
被検者の腕部に貼付して15分後にデイスク1の色
調変化を検した。これを従前の検査法としての
STメデイア使用の場合及びMSBB使用の場合と
比較した結果を第1表に示す。
【表】 本例の結果よれば成人のう蝕罹患率と本用具の
色調変化に基く判定とは正の相関性を明確に示し
ている。 このことから本用具はその使用が簡単でしかも
短時間に湿式法によらず乾式で、容易にう蝕活動
性を判別するために有効であることが分る。
【図面の簡単な説明】
第1図は発明の判別用具の平面図、第2及び第
3図は同用具の使用時の側面図を示したものであ
る。 記号1……本発明による試験用乾燥状小紙片、
2……被覆用フイルム、2A……フイルム2の粘
着剤を有する内側周辺部、3……支持用フイル
ム、4……台紙。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1 唾液中のう蝕発生原因微生物の多少を判別す
    るための試薬組成物を溶解した薬液に浸してから
    乾燥した適宜の形状の小紙片;この小紙片を載せ
    るための台紙;台紙上の小紙片を覆い固定するた
    めの被覆用フイルムであつてその内側全体に粘着
    剤を塗布されるか又はこの小紙片上に粘着剤が付
    着しないように内側周辺部のみに粘着剤を塗布さ
    れていて台紙から剥離可能に小紙片に重畳された
    該被覆用フイルム;及び被覆用フイルムで被覆さ
    れた該小紙片と並べて同じ台紙に剥離可能に貼り
    付けられた支持用フイルムから形成されたことを
    特徴とするう蝕簡易判別用具。 2 薬液がレサズリン、トリフエニルテトラゾリ
    ウム、ネオテトラゾリウム、2,6−ジクロルフ
    エノールインドフエノール又はメチルオレンジ或
    はこれらの塩類の0.05〜0.003重量%とシヨ糖10
    重量%とよりなることを特徴とする特許請求の範
    囲第1項に記載の用具。 3 フイルムが何れも透明の有機樹脂又は透明プ
    ラスチツク物質よりなることを特徴とする特許請
    求の範囲第1項に記載の用具。 4 適宜の形状が円形、方形又は矩形であること
    を特徴とする特許請求の範囲第1項に記載の用
    具。
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