JPH0270703A - ホスホリパーゼａ↓２阻害組成物およびその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本光皿夏腎景 本発明は、細胞膜において酵素ホスホリパーゼＡｘ（Ｐ
ＬＡｚ）の阻害剤である新規物質、その製造法およびそ
れを含む医薬組成物に関する。

ホスホリピド（リン脂質）を非極性部位において加水分
解し、脂肪酸とりゾホスホリビドを生成するホスホリパ
ーゼＡ２　（Ｐ　Ｌ　Ａ、、　Ｅ　Ｃ３，１，１，４）
は、殆どすべての細胞タイプおよび細胞分画に存在する
。Ｖａｎ　ｄｅｎ　Ｂｏｓｃｈ、　Ｈ，（１９８２）”
”Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ’　（Ｈａｗｔｈｏｒｎ
ｅ、　Ｎ、Ｊ、　＆　Ａｎｓｅｌｅ、　Ｇ、Ｄ、、　Ｅ
ｄｉｔｏｒｓ）＋　ＰＰ、　３１３−３５７　（Ｅｌｓ
ｅｖｉｅｒ　Ｐｕｂ、、Ａｍ５ｔｅｒ　ｄａｍ。

Ｎ、Ｙ、）参照。この酵素の活性は種々の細胞機能、特
に細胞外放出およびエイコサイド生産（プロスタグラン
ジン、トロンボキサンおよびロイコトリエン）のような
分泌プロセスに関連している。−ａｉｔｅ　Ｍ、　（１
９８７）、“Ｐｈｏｓｐｈａｌｉｐａｓｅｓ’＋Ｐ１ｅ
ｎｕｍ　Ｐｒｅｓｓ＋Ｎ、Ｙ、参照。従ってＰＬＡ２阻
害剤は、アレルギー（ヒスタミンの分泌）、炎症（リソ
ソーム酵素および過酸化物の分泌）または血栓症（トロ
ンボキサンの分泌）のような過度の細胞分泌に関連する
病気の治療のために提案された。これらのプロセスに関
与する酵素は細胞表面膜（プラズマ膜）中に所在し、そ
して細胞分泌の正常化のためにはこの膜酵素活性の正常
化が必要であることが認められている。Ｂｌａｃｋｗｅ
ｌｌ、　Ｇ、Ｊ、　＆　Ｆｌｏｗｅｒ、　Ｒ，Ｊ、（１
９８３）、　Ｂｒ、　Ｍｅｄ、　Ｂｕｌｌ、　３９．２
６０−２６４参照。

多数のＰＬＡ、阻害剤が過分泌関連病理状態の治療のた
めに検討された。それらの中には哺乳類組織中に見られ
、そしてグルココルチロイドによって誘発されると考え
られている（異論なしに証明されてはいないが）リポコ
ルチン様タンパクがある。しかしながらステロイドの長
期間投与は多くの副作用があり、一般に望ましくない。

リポコルチン様タンパクは外来的に提供することができ
、そして細胞膜ＰＬＡ２活性および細胞分泌に影響する
かも知れない。しかしながら、これら物質はカルシウム
結合性タンパクであるため、それらは多数の他の細胞機
能を望ましくなく妨害する。Ｃｒｏｍｐｔｏｎ　ｅｔ　
ａｌ、　（１９８８Ｌ　Ｃｅ１ｌ、　５５＋　１−３を
見よ。

ホスファチジルセリンのＮ　　ｉｎ導体（Ｍａｒｔｉｎ
ａＬａｇｕｎｏｆｔ　（１９８２）　Ｂｉｏｃｈｅｍｉ
ｓｔｒｙ　２Ｌ　１２５４−１２６０を見よ）を含む他
の阻害剤は、外来的に投与することができる低分子量の
合成もしくは天然生産物である。しかしながら、それら
も細胞によって内部移行され、活動している脂質代謝を
妨害し、それ故細胞毒である。細胞膜表面において該酵
素に影響するが、細胞中へ浸透しないＰＬＡ２の細胞外
阻害剤がそれ故非常に望ましいであろう。本発明のＰＬ
Ａ、阻害剤はこれらの要件を満たす。

われわれがＮｕｒｉｔ　Ｒｅ１ｓｆｅｌｄと共に著者で
あるＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、　（１９８６）　２００　（
１）、　ＰＰ、　１６５−８に発表した論文において、
われわれはホスファチジルセリン（ｐｓ）のアミノ基を
ドデカンニ酸でアシル化し、そして生成する遊離カルボ
キシル基を高分子量（７０，０００）デキストラン−ヒ
ドラジドへ結合することによる細胞非透過性ＰＬＡｚ阻
害剤の合成を報告した。この阻害剤は脂質膜へ取込まれ
、そして蛇毒および細胞膜ＰＬＡｚによる膜ホスホリピ
ドの加水分解を阻止することができる。

この特定のＰＬＡ、阻害剤は、細胞非透過性であるが、
デキストラン−ヒドラジドが生理学的見地から望ましく
ないので放棄され、そしてわれわれはその後ＰＬＡ、阻
害部分の他の担体（ポリマー）部分への結合は著しく良
い性質を持った細胞非透過性ＰＬＡｚ阻害剤を生成する
ことを発見した。これらの物質は細胞生存性を害するこ
となく天然の細胞中の細胞分泌、エイコサノイド産性お
よび膜ＰＬＡ２活性を阻害することができる。

本光肌Ω且要 本発明は、酵素ホスホリパーゼＡ２（ＰＬＡｚ）の阻害
物質であり、かつその分子構造は細胞透過性ＰＬＡ、阻
害剤部分の細胞内移行を阻害するのに有効な生理学的に
許容し得る担体部分へ直接もしくは間接に共有結合した
細胞透過性ＰＬＡ、阻害剤部分（ただし、デキストラン
−ヒドラジドへ。

二価のドデカンジオイル基を介して間接に結合したホス
ファチジルセリンを除く。）を含むことを特徴とする化
合物に関する。

本発明はまた、単位投与量あたり前記化合物のＰＬＡ２
阻害量を含有する薬剤学的に許容し得る担体との混合物
の形の医薬組成物に関する。

のｉ　な誓゛１ 本発明のＰＬＡ２阻害荊阻害上の分子構造内にその多数
が先行技術において既知の細胞透過性ＰＬＡＸ部分を含
んでいる。「部分」なる用語は、ここでは共有結合によ
って満足された原子価を有する化合物に他の点では相当
する化学的実在物もしくは基を意味する。典型的にはＰ
ＬＡ、阻害剤部分は、該部分が本発明のＰＬＡ２阻害剤
の担体部分へ共有している結合点を除いてもとのＰＬＡ
。

阻害作用を有する化合物と化学構造が同じであり、例え
ばちとの化合物の水素原子１個の代りに１個の共有結合
手を有する点が異なっている。

ＰＬＡ、ｌｌ］ｌ害物質は以下のタイプに分類できる。

■、ホスファチジル−エタノールアミン（ＰＥ）、およ
びジステアロイルＰＥ（これは最良の結果を与えた）の
ようなその類縁体。

種々のソースからの天然ＰＥ、半合成ＰＥ、合成天然お
よび人造（新規、非天然）ＰＥ、およびそれらの異性体
。これら化合物はどれも共有結合によってエタノールア
ミンのアミノ基を介して結合している。

■、共有結合によってＮ−メチルＰＥのアミノ基を介し
て結合しているＮ−メチルＰＥ誘導体およびそれらの類
縁体。

■、共有結合によってＮ、Ｎ−ジメチルＰＥのアミノ基
を介して結合しているＮ、　Ｎ−ジメチルＰＥ誘導体お
よびそれらのＭ縁体。

■、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、およびバルミトイ
ル−ステアロイルＰＳ（これは最良の結果を与えた）の
ようなその類縁体。

種々のソースからの天然ＰＳ、半合成ＰＳ、合成天然お
よび人造ＰＳ、およびそれらの異性体。

これらの化合物のどれも共有結合によってＰＳアミノ基
を介して結合している。

■、一般式　　　　　　　０ ％式％ エーテル、エステルおよびチオエステル誘導体。

Ｉ 式中、Ｘは一〇−２−Ｓ−−０−Ｃ− はアルキル、アルキル−ＣＯＯＨ，アルキルアミンであ
り、Ｒ２はアルキル、アルキル−ＣＯＯＨ。

アルキルアミンであり、Ｒ３はアルキル、ホスフェート
、ホスフォリルコリン、ホスフォリルコリン、ホスフォ
リルグリセロール、ホスフォリルイノシトールであり、
Ｒ基の１個（または２個以上）を介して担体へ結合して
いる。最良の結果は以下の化合物により得られた。

ォリルコリン、ホスフォリルエタノールアミン、ホスフ
ォリルグリセロール、ホスフォリルイノシトール、ホス
フェート等であり、Ｒ２はアルキル、アルキル−ＣＯＯ
Ｈ，アルキルアミンであり、Ｘ−ＮＨ−Ｃ−、−ＮＨ−
である。

■、最良の結果は以下の化合物で得られた。

Ｖｌ、　　Ｒ基の一つを介して担体へ結合している一般
式％式％ のエチレングリコール誘導体。

式中、Ｒ１はアルキル、−Ｃ−アルキル、ホスフ■９合
成および天然マノアライドおよびその誘導体、例えばマ
ノアログ。

■、天然および合成アラキドン酸およびその誘導体。

Ｘ、　　Ｐ−メトキシフェネチルアミン、その類縁体お
よび誘導体。

Ｘｌ、スフィンゴシン、それらの類縁体および誘導体。

Ｘｌｌ、アミノピペラジンおよびその誘導体。

Ｘ■、フヱナシルプロマイド。

本発明の化合物のＰＬＡ２阻害剤部分として採用し得る
細胞透過性ＰＬＡ、阻害剤の例は、アミノホスホリピド
類（例えばホスファチジル−エタノールアミン、ホスフ
ァチジルセリン）、メパクリン、局所麻酔剤例えばクロ
ルプロマジン、プロ力イン、インドメサシン、インドメ
サシンの硫酸化類縁体、ブロモフェナシルブロマイド、
Ｐ−メトキシフェネチルアミン、イミプラミン、プロプ
ラノロール、フェノチアジン類、キナクリン、ジブカイ
ン、テトラカイン、リドカイン、■−アミノー４−オク
チルピペラジン、１．７−ビス（Ｐ−アミノフェノキシ
）へブタン、トリペレナミン、アマンタジンおよびフェ
ンテルミン、マノアライド、マノアログ、スフィンゴシ
ン、および前記化合物のＰＬＡ２阻害活性を有する誘導
体である。

担体部分の主な役目は、本発明の化合物のＰＬＡｚ阻害
剤部分を形成するＰＬＡ２阻害剤のサイズ（分子体積）
を細胞不透過性とするのに十分とするように増加させる
ことである。出発担体分子が出発ＰＬＡ、阻害剤化合物
上の置換基と反応性であるか反応性とすることができる
置換基を持っている時は、担体分子はＰＬＡ、阻害剤分
子へ直接結合することができる。そうでなければ、二官
能性の出発物質を二つの分子を間接的に結合するために
使用することができる。

本発明のＰＬＡ、阻害剤部分の細胞透過能力をなくすた
めに使用することができる担体分子の例は、ヘマクセル
（ベーリング社製造の尿素ブリッジで架橋した分解した
ゼラチンポリペプチド）、ヒドロキシエチルデンプン（
ＨＥＳ）、ポリアミノ酸、炭化水素ポリマー（例えばポ
リエチレンおよびポリスチレン）、ポリエステル、ポリ
アミド、ポリエチレンオキシド例えばポリエチレングリ
コール、ポリビニルピロリドン、ポリサッカライド、水
溶性セルロース誘導体例えばメチルセルロース、および
ＣＭＣ，アルギン酸塩、同化し得るガム類（例えばキサ
ンタンガム、ストラフクン）、ペプチド、注射可能な血
液タンパク例えば血清アルブミン、サイクロデキスリン
、およびそれらの誘導体を含む水分散性または水溶性の
種々の分子量および種々の化学的タイプの主として血漿
増量剤および食品および医薬添加物を含む、生理学的に
許容し得るポリマーである。

担体は広範囲の分子量、例えばＰＬＡｚ阻害剤を脈管系
にとどめようと望む時は５０，０００以上（数１０万ま
で）、および脈管外系への標的化を望む時は５０．００
０以下の分子量を持つことができる。担体部分の分子量
および化学構造に対する唯一の制限は、それはＰＬＡＺ
阻害剤部分のＰＬＡ２阻害活性を破壊せず、そしてＰＬ
Ａ２阻害剤の細胞摂取を促進しないことである。

場合により必要な橋かけ基を形成する適当な二価基の例
は、例えば２以上、好ましくは４〜１８個の炭素数の直
鎖もしくは分枝アルキレン、−ＣＯ−アルキレン−ＣＯ
−−ＮＨ−アルキレン−ＮＨ−−Ｃｏ−アルキレン−Ｎ
Ｈ−、シクロアルキレン（これらの場合アルキレンは鎖
中の炭素数が２以上、好ましくは２〜１８の直鎖もしく
は分枝鎖である）、＋０ＣＨ２ＣＨ２＋ＴＯ−１および
＋ＯＣＨ（ＣＨ，）ＣＨ２廿Ｘ０（Ｘは１以上の整数）
である。

本発明の化合物の例は、以上に掲げるＰＬＡ２阻害剤部
分が直接、または以下に掲げる橋かけ部分を介して間接
に、以下に掲げる担体部分へ結合したものである。

実施例の化合物に加え、本発明のその他の例示的化合物
を以下に挙げる。

ＣＭＣ−ＰＳ　、ＣＭＳ−ＰＥ　。

ヘマクセル（ＭＷ３５０００）　−Ｐ　Ｓ　ｉヘアクセ
ルーＰＥ；アルギン酸ＰＳ、アルギン酸ＰＥ； マノアライド−へマクセル； マノアログーデキストラン（ＭＷ４０，０００）　；Ｐ
−７’ロモフエナシルブロマイドーヘマクセル；グリセ
ロールエーテル−へマクセル（ＭＷ３５．０００）　　
；メトキシフェネチルアミン−ＣＭＣ。

メトキシフェネチルアミン−ＨＥＳ　。

アラキドン酸−ヘマクセル： アラキドン酸−ＰＥＧ； ＰＥ＝ホスファチジル−エタノールアミンＰＳ＝ホスフ
ァチジルセリン ＣＭＣ＝カルボキシルメチルセルロース（ＭＷ２５．０
００）ＨＥＳ＝ヒドロキシエチルデンプン（ＭＷ４０，
０００）ＰＥＧ＝ポリエチレングリコール（ＭＷ４００
０）本発明の細胞不透過性ＰＬＡ、阻害剤は、担体、例
えばポリマーを以下の一般的反応スキームに従って細胞
透過性ＰＬＡ、阻害剤へ直接もしくは間接に結合するこ
とによって製造することができる。

ａ）阻害剤＋スペーサー→阻害剤／スペーサー＋ポリマ
ー→阻害剤／スペーサー／担体 ｂ）阻害剤＋担体→阻害剤／担体 Ｃ）担体＋スペーサー→担体／スペーサー＋ポリマー→
担体／スペーサー／阻害剤 ｄ）阻害剤＋反応性基→阻害剤／反応性基＋スペーサー
→阻害剤／反応性基／スペーサー＋ポリマー→阻害剤／
反応性基／スペーサー／ポリマーｅ）担体＋反応性基→
担体／反応性基＋スペーサー→担体／反応性基／スペー
サー十阻害剤→担体／反応性基／スペーサー／阻害剤 ｒ）阻害剤＋反応性基→阻害剤／反応性基担体＋反応性
基→担体／反応性基 阻害剤／反応性基＋担体／反応性基＋スペーサー→阻害
剤／反応性基／スペーサー／反応性基／担体 ＰＬＡ、阻害剤の前駆物質として使用したアシル化ホス
ファチジル−エタノールアミンをもって、ジカルボン酸
の種々の長さをスペーサーとして使用することができる
。これらの酸は天然、半合成、または合成ＰＥへ結合す
ることができる。例えば、ＰＥは以下のようにアミノデ
キストランへ間接に結合することができる。

（以下余白） １１ａ Ｃ）１２０− Ｃ）ＩｇＯ− Ｈ２Ｏ− ポリアミノ酸、 ＣＭＣまたは脂肪酸が結合した ポリマーのようなカルボキシル基を有するポリマーは以
下のスキームに従ってＰＥへ直接結合することができる
。

ｂ ＮＢＤリソＰＳはアミノポリマーへ以下のスキームに従
って結合することができる。

１１ｚｃ−０−Ｃ（ＣＨｚ）−ＣＨ３ ＣＨ３ 〇− Ｈｚ ｃ ＨｚＣ−０−Ｃ−（ＣＨ２）− ＨＣ−ＯＨ ＣＨ３ ＨＯＯＣ（ＣＨｚ）ｌＳ　Ｃ０ＯＨ 下記一般式のグリセロールエーテル、アミン、アミド、
チオエーテル、エステル、チオエステル誘導体はＲ基を
介して担体部分へ以下のスキームに従って結合すること
ができる。

Ｈ，Ｃ−０−Ｃ−Ｒ。

ＨＣ−Ｘ−１ｈ 電 Ｈ，Ｃ−０−Ｒ。

−ＮＨ−，であり、Ｒ，はアルキルであり、Ｒ１はアル
キルであり、Ｒ３はアルキル、−Ｃ−アルキル、ホスフ
ォリルコリン、ホスフォリルセリン、ホスホオリルエタ
ノールアミン、ホスフォリルコリセロール。

ホスフォリルイノシトール等である。

（以下余白） ■ｄ 下記一般式のエチレングリコールは、本発明のエチレン
グリコールモノエーテルホスファチジル化合物の製造実
施例である以下の反応スキームに従って担体へ結合する
ことができる。

Ｃ）Ｉ！−０−Ｒ。

ＣＨ，−Ｘ−Ｒ。

式中、Ｒはアルキル、−Ｃ−アルキル、ホスフォリルコ
リン、ホスフォリルコリン、ホスフォリルエタノールア
ミン、ホスフォリルコリセロールまたはホスフォリルイ
ノシトール等であり、Ｘは−０−１ｅ ＣＩｌ□−ＯＲ １ｅ ｐ−メトキシフェネチルアミンの誘導体は以下のように
担体分子、例えばデキストラミンへ本発明に従って結合
することができる。

■【 Ｖｅ のＰＬＡ２　　　　の ＰＬＡｔは動物の毒液例えば蛇および他の有毒爬虫類の
毒液中に、および例えばハチの昆虫刺傷により注入され
たトキシン中に存在する。蛇の咬傷および昆虫刺傷によ
って誘発された溶血および神経毒性は細胞表面ホスホリ
ピドに対するこの酵素の作用によって仲介される。それ
数本発明のＰＬＡ。

阻害剤は毒液毒性の処置に有用である。

本発明の細胞表面ＰＬＡＺ阻害剤はまた、例えば医薬組
成物の形で内因性または外因性過度ＰＬＡ　２活性に関
連した病気の治療に有用である。

本発明の新規な細胞外阻害剤は、担体へ直接または適当
なスペーサを介して間接に結合したＰＬＡ　２阻害剤よ
りなり、担体は一般にしかし必ずしもそうでないがポリ
マーのような高分子量物質である。

本発明の物質は細胞外ＰＬＡ、阻害剤として作用し、そ
のため細胞内へ浸透するＰ　Ｌ　Ａ　ｚ阻害剤の細胞毒
性を示さない。

本発明の好ましい阻害剤は、担体へ直接または二価橋か
け部分を介して間接に結合したホスファチジル−エタノ
ールアミン（ＰＥ）およびホスファチジルセリ（ＰＳ）
である。

本発明の新規物質は、以後記載する広範囲のＰＬＡ　を
関連症状の治療に有用である。

細胞表面膜中のＰＬ、Ａｚ活性は一般に細胞分泌と関連
している。そのような細胞分泌物質の例は、神経伝達物
質、ヒスタミン、プロスタグランジン、トリグリセライ
ド、過酸化物、リソソーム酵素、および分泌生産物一般
である。特別に関心なる物質はエイコサノイド（プロス
タグランジン、トロンボキサンおよびロイコトリエン）
であり、これらはＰＬＡｔの作用によってホスホリピド
から放出されるアラキドン酸の代謝生産物である。この
ため細胞表面膜中のＰ　Ｌ　Ａ　ｚの正常化は、アレル
ギー反応、炎症、アテローム性動脈硬化症、血栓症、心
筋梗塞、高血圧において発生するようなこれらの物質の
過剰分泌に関連する病原性症状、中でも神経障害の治療
、およびそれらに関連する病疾の緩和を提供する。

本発明の化合物は、そのＰＬＡｔ阻害剤部分の有用な薬
理学的性質を有するが、しかし細胞浸透に関連する副作
用がないことが発見された。

これら化合物は、アレルギーおよび過剰分泌関連病一般
の治療において抗炎症剤として特に有用である。それら
は処置される特定の状態に措示された他の薬物と混合し
て使用することができる。

本発明の化合物は一般に、家畜、家庭内ベット、ヒト、
ウシ、ネコ、イヌ、ニワトリ等を含む哺乳類を含む、し
かしそれらに限定されない動物へ投与される。本発明の
薬理学的に活性な化合物は、製剤学の慣用方法に従って
ｐｔ、Ａｚ関連異常状態にかかっている患者へ投与する
のに適した製剤を製造するために処理することができる
。

本発明の化合物は、慣用の賦形剤、すなわち非経口、経
腸（例えば経口）または局所投与に適した、活性化合物
と有害に反応しない薬剤学的に許容し得る有機または無
機担体との混合物に使用することができる。適当な薬剤
学的に許容し得る担体は、水、食塩水、アルコール、ア
ラビヤゴム、Ｍｈ油、ベンジルアルコール、ゼラチン、
炭水化物例えば乳糖、アミロースまたはデンプン、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、パラフィン、
香油、脂肪酸モノグリセライドおよびジグリセライド、
ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ヒドロキシメチ
ルセルロース、ポリビニルピロリドン等を含むがこれら
に限らない。薬剤組成物は滅菌することができ、そして
もし望むならば補助剤、例えば滑沢剤、保存剤、安定剤
、湿潤剤、乳化剤、浸透圧剤、緩衝剤、着色剤、香料お
よび／または矯味剤等と混合することができる。それら
はまた、もし望むならば他の活性剤例えばビタミンと合
剤することができる。

非経口用途に特に適した製剤は、注射用の好ましくは油
性または水性無菌溶液と、懸濁液、エマルジョン、原剤
を含む埋込剤である。アンプルが便利な単位投与形であ
る。

経腸用途に特に適した製剤は、錠剤、丸剤、液剤、ドロ
ップ、原剤、またはカプセルである。シロップ、エリキ
サ−等も甘味担体を使用して使用することができる。

徐放性製剤すなわちリポソームまたは活性化合物が時差
的に崩壊し得る被覆によって保護されている製剤は、例
えばマイクロカプセル化、多層被覆等によって製剤する
ことができる。新規化合物は凍結乾燥し、得られた生成
物を例えば注射剤の調剤のために使用することも可能で
ある。

一般に本発明の化合物は、薬剤学的に許容し得る担体中
単位投与量あたりｌないし１．０００ｍｇを含む単位投
与形に分配することができる。

本発明による化合物の投与量は、例えば関節炎を治療す
るため皮下投与するため、既知薬剤デキサメタシンに類
領して患者に投与する時、一般に０．１−１００．好ま
しくは１〜２０■／ｋｇ／日である。特定のケースにお
ける活性化合物の実際の好ましい量は、使用する特定の
化合物、製剤の形、投与方法、および治療すべき部位お
よび生物に応じて変化することがわかるであろう、与え
られた宿主のための投与量は慣用の考慮を使用して、例
えば当該化合物と既知化合物の活性差の慣例的な比較に
より、例えば適当な慣用の薬理学的プロトコールによっ
て決定することができる。

これ以上考究することなく、当業者は以上の説明を使用
して本発明を最大限利用することができるものと信じら
れる。従って以下の好ましい具体例は単に例示と考える
べきであり、開示の残部に対する限定と解してはならな
い。

以前および以後の実施例において、すべての温度は未補
正の摂氏で与えられ、そして特記しない限り、すべての
部およびパーセントは重量による。

以前および以後引用した特許および特許出願の全文をこ
こに参照として取入れる。

実施例Ｉ　　　ＰＶＡ−ＰＥ （ａ）ホスフォチジルエタノールアミン（ＰＥ）　　ド
デカンニ酸誘導体の製造： ドデカンニ酸３００ｕモルを乾燥ジクロルメタン２ｄ中
に溶かしたＰＥ２５μモルへ加え、次にジシクロへキシ
ルカルボジイミド（ＤＣＣ）１００ｍｇ、）リエチルア
ミン０．２　ａｌｌ！および無水メタノール０．５　ｄ
を加えた。混合物を′・４０°Ｃで２４時間インキュベ
ートした。薄層クロマトによる生成物の分析（クロロホ
ルム：メタノール：アセトン：酢酸：水＝３　：　１　
：　４　：０．５）は、原点近くのＰＥと同定されたス
ポットと、そしてＲｆ＝０．８５にＡｃ−ＰＥのリン酸
塩スプレーに感受性の二つのスポットを示した。この系
はシリカゲルカラム上でＡｃ−ＰＥの精製のために使用
された。

（ハ）ドデカンジオイル−ＰＥへＰＶＡの結合：ＥＤＣ
Ｃ２００■をＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ０，５ｄ中のＡｃ−Ｐｓｉ
ＯμモルおよびＰＶＡヒドラジド５０■へ加え、次にＥ
ＤＣＣ２０ｈｇを加え、４５℃において７時間かきまぜ
た。ＰＶＡ結合物は沈澱し、そしてＤＭＳＯおよびＥＤ
ＣＣを除去するためエタノールでくり返し洗った。沈澱
を蒸留水４ｄに溶かし、水に対して透析し、凍結乾燥し
た。

実施例２　　できすらみん−ＰＥ デキストラミンの製造： デキストラン−４０，ＭＷ４０．０００の１０ｇを水４
０ＩＩｉ中に溶かし、マグネチックスクーラーによる２
時間の撹拌の間過ヨウ素酸ナトリウム０．６ｇで酸化し
た。その後酸化デキストランをダウエックスｌＸ８−１
ｏｏ　（塩化物形）１００ｍのカラムを通して蒸留水で
溶離する。酸化デキストランの溶液をジアミノヘキサン
５ｇと１時間混合し、生成したシッフ塩基を水素化ホウ
素ナトリウム５０ミリモルで還元した。５時間かきまぜ
後、結合物をエタノールで沈澱し、蒸留水に再溶解し、
水に対して透析し、凍結乾燥した。

デキストラミンドデカノイルＰＥの製造：実施例１で製
造したＡＣ−ＰＥＩ　ＯμモルをＤＭＳＯＩ　ＯＯｄお
よびＤＣＣ２００ｍｇ中でデキストラミン５０■と反応
させた。混合物を４５°Ｃで７時間かきまぜ、結合物を
エタノールで沈澱し、エタノールで洗い、蒸留水に再溶
解し、水に対して透析し、そして凍結乾燥した。

実施例３　　　ＣＭＣ−アシルＰＥ ＰＥｌ０μＭをＤ　Ｍ　Ｓ　Ｏ２ｍｆｌに溶かし、ＤＣ
Ｃ５００■の存在下コハク酸５０μＭと５０℃で２時間
反応させた。生成したカルボキシアシルＰＥをシリカゲ
ルカラム上で精製し、ＤＣＣ５００■の存在下クロロホ
ルム：メタノール＝１：１の５ｄでジアミノヘキサン５
００■と反応させた。得られたＰＥのアミノ誘導体は、
１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）−カルボ
キシジイミド（ＥＤＣＣ）２００ａ＋ｇの存在下水１０
Ｉｄ中のＣＭＣ１ｇとＡＣ−ＰＥと反応させることによ
り、ＣＭＣ（シグマＣ−８７５８）へ直接結合した。

−夜かきまぜた後、反応混合物を水に対して透析し、凍
結乾燥した。

実施例４ デキストラン７０のｌＯｇを水４０Ｉ１１に溶かし、実
施例２に記載のように酸化し、そして精製して製造した
精製したカルボキシデキストランを水中でアミノヘキサ
ン酸２ｇと２時間反応させ、ＮａＢＨ。

ｌＯＯミリモルを２時間にわたって徐々に加え、３時間
かきまぜた。次にエタノール２Ｉ１１を加え、溶液を１
時間かきまぜた。反応生成物を反応混合物からエタノー
ルで沈澱し、エタノールで洗い、水に溶かし、水に対し
て透析し、凍結乾燥した。

凍結乾燥したカルボキシデキストランをＤＭＳＯに溶か
し、２−中のその５０Ｉ！ＩｇおよびＰＥｌ０■を加え
、次にＤＣＣＩ　ＯＯ■を加えた。５０℃において５時
間インキュベートした後、デキストラン−ＰＥをエタノ
ールで沈澱し、エタノールで洗い、水に溶かし、透析し
、凍結乾燥した。

実施例５ ＣＭＣ−ＰＥ： ＣＭＣ（低粘度シグマＣＣ−８７５８）Ｉを水５０ｍ１
に溶かし、ホスファチジル−エタノールアミン（ＰＥ）
２００ｍｇと１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプ
ロピル）カルボジイミド５００■を加えた。溶液を一夜
かきまぜ、水に対して完全に透析し、凍結乾燥した。

実施例６ ポリ−Ｄ−グルタミン酸−ＰＥ： ボリーＤ−グルタミン酸（ＭＷ５０．０００〜１００，
０００、シグマ）５０■を１−エチル−３−（３−ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド１００■の存在下
、５０ｍＭリン酸緩衝波緩衝液　５．２中のＰＥ５■と
反応させた。４５℃で５時間後、溶液を蒸留水に対して
よく透析し、凍結乾燥した。

実施例７ ポリアクリル酸−ＰＥ： 出発ポリマーとしてポリアクリル酸（ＭＷ９０．０００
または５．０００）　５０■を用いたほかは、実施例５
のように反応を実施した。

実施例８ ドデカンニ酸を介してデキストラミンへ結合したＮＢＤ
−ＰＳ　： リソＰＳ２０■を２：１メタノール：水５ｄ中のＮＢＤ
ｅ　ｌ　４０■と反応させた。トリエチルアミンをｐ　
Ｈ８，５になるまで加えて反応させ、ｐＨを８．５に保
って５時間かきまぜた。混合物をロータリーエバポレー
ター中２０°Ｃで蒸発乾固し、シリカゲルカラムへ加え
、塩化メチレン、次に塩化メチレン：メタノール（９：
１．８＝２および７：３）、次に塩化メチル：メタノー
ル：水（７５：２５：４，６５：３５：５および最後に
５０：５０：８）で次々に溶離すると、ＮＢＤ−リソＰ
Ｓがオレンジ色のバンドとして溶離された。溶液を蒸発
乾固し、得られたＮＢＤ−リソＰＳ（１０■）をジメチ
ルアミノピリジン５■の存在下、ＤＭＳＯ１ｄ中のドデ
カンニ酸のジ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド２０■と
反応させた。生成するオレンジ色の化合物をシリカゲル
プレート上のＴＬＣにより精製し、実施例２に記載のよ
うに製造したアミノデキストランとＤＭＳＯ中ＤＣＣの
添加により反応させ、５０℃で３時間インキュベートし
た。

実施例９ ポリエチレンイミン−ＰＳ： ポリエチレンイミン（ＭＷ２０，０００）　５０■をＤ
ＭＳＯ中１０μＭのＰＳおよびＤＣＣｌｏｏｆｆｌｇと
４５°Ｃで５時間反応させた。その後溶液を水に対して
良く透析し、凍結乾燥した。

実施例１０ ヒドロキシエチルデンプン−ＰＥ： ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ、　　シグマＨ−６
３８２）５０ｇを０．２Ｎ　ＮａＯＨ１００ｒａｌに溶
かし、エピクロルヒドリン２Ｉ１１を加えた。混合物を
４０’Ｃで２時間かきまぜ、０．ＩＮ　ＮａＯＨ２００
ｄ中の１．６−ジアミツヘキサン３ｇの溶液へ加えた。

混合物を５０°Ｃで２４時間かきまぜ、エタノール３容
で沈澱し、水に再溶解し、水に対して透析し、凍結乾燥
した。得られたアミノ−ＨＥＳを実施例２のようにＡＣ
−ＰＥと反応させた。

実施例１１ １−ドデカンジオエート−２−ヘキサデカノイルアミド
グリセリル−ホスホリルコリンへ結合したヘマクセル： 乾燥ＴＨＦ２５Ｏｄ中のＤＬ−セリンメチルエステル（
Ｉｇ）（１モル）を、マグネチックスクーラー、還流コ
ンデンサーおよび滴下ロートを備えた３　０００ｄ丸底
フラスコ中の乾燥ＴＨＦＩＯ００ｄ中のＬｉＡｌＨ４０
，５モルの溶液へＮ２気流下滴下した。２時間攪拌後、
酢酸エチル１００　ｍｌを滴下ロートからゆっくり加え
、次にメタノール１００ｍ１．水２００．ｄ、　　ＩＮ
　ｌｌＣｌ　　２００ｄを次々に加えた。ＴＨＦ相を分
液ロート中で分離し、水相を塩化メチレンで２回抽出し
た。ＴＨＦ相と塩化メチレン相を合し、Ｍｇ５Ｏ，で乾
燥し、蒸発乾固した。

アミノジアルコール（Ｉ［ｇ）０．５モルを塩化メチレ
ン５００戚に溶かし、パルミチン酸１．０モル、トリエ
チルアミン２．０モルおよびＤＣＣ４モルの存在下アシ
ル化した。２時間還流後、溶液を口過し、蒸発乾固した
。アミドをシリカゲルカラム上で塩化メチレン：メタノ
ール混液で溶出して精製した。

生成したジアルコールアミド（ＩＩ［ｇ）（０，１モル
）をトリエチルアミン０．１２モルを含む無水ベンゼン
５００戚中に０〜５°Ｃで溶かした。２−クロル−２−
オキソ−１，３，２−オキサホスファラン０．０７５モ
ルを無水ベンゼン１００　ｒｎｌに溶かし、ゆっくり加
えた。混合物を室温でＮ２気流下１２時間かきまぜ、口
過し、蒸発乾固した。

このようにして生成したリン酸トリエステル（ＩＶｇ）
を圧力びんへ移し、無水アセトニトリル１００Ｉｄへ溶
かし、゛トリエチルアミン０．２モルを加えた。びんを
シールし、７０°Ｃで２４時間維持し、冷却し、反応生
成物を口過して集めた。

このように製造したホスホリルコリンアミドアルコール
（Ｖｇ）０．０５モルを、ドデカンニ酸０゜１モル、ジ
メチルアミノピリジン０．１モル、ＤＣＣｏ、５モルを
用いて乾燥塩化メチレン２０Ｏｄ中でアシル化した。混
合物を５時間還流し、Ｉ　Ｍ　Ｎａ２ＣＯ，。

１００ｍｊ！と２時間かきまぜた。次に相分離し、水相
を塩化メチレン：メタノール＝４＝１で抽出した。合併
した有機相を水洗し、Ｍｇ５Ｏａで乾燥し、蒸発乾固し
た。

得られた油をシリカゲルカラム上で精製し、得られた化
合物Ｖ１ｇを水１０−に溶かし、ＥＤＣＣ２０ｇを加え
ることによりヘマクセル１０ｇとかきまぜながら５時間
反応させた。結合したフマクセル誘導体を水に対して良
く透析し、凍結乾燥した。

実施例１２ エチレングリコールホスホリルエタノールアミンのアル
ギン酸誘導体： 粉末ＫＯＨ２，５ｇをキシレン１０Ｉｎｆに懸濁し、乾
燥グリセロール５ミリモルを加えた。混合物をディーン
ースターク装置と、還流コンデンサー、滴下ロート、マ
グネチックスクーラーを備えた２５０ｍ１丸底フラスコ
中で還流した。還流２時間後、キシレン２０ｍ１へ溶か
したテトラデシルメタンスルホネート（５ミリモル）を
滴下した。５時間還流を続け、キシレン５０ｍ１を留去
した。混合物を放置冷却し、水を加え、反応生成物を塩
化メチレンで抽出し、Ｍｇ５Ｏａで乾燥し、蒸発乾固し
、シリカゲルカラムで精製した。

エチレングリコールモノエーテルヲ実施例１１のように
ホスホリル化した。生成したリン酸トリエステルをトリ
メチルアミンでなくアンモニアで実施例１１のように開
環した。

生成したホスホリルエタノールアミン誘導体を、誘導体
化ＰＥＩミリモルを水１００−に懸濁し、そしてアルギ
ン酸５ｇと反応させることによってアルギン酸へ結合し
た。３０分間かきまぜた後、ＥＤＣＣ２ｇを加えた。混
合物を１２時間かきまぜ、水に対してよく透析し、凍結
乾燥した。

実施例１３ デキストラン−ｐ−メトキシフェネチルアミン：ｐ−メ
トキシフェネチルアミン０．０５モルをジオキサン４０
ＩＩ１１中の６−ブロモヘキサン酸０．０５モルと混合
した。１０％ＮａＯＨ５Ｉｎ１をよくかきまぜながら滴
下ロートから１５分間にわたって滴下した。混合物をさ
らに２時間かきまぜ、ＨＣＩ酸性とし、塩化メチレンで
抽出した。有機相と水洗し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発
乾固した。生成物Ｎ−（４−メトキシフェネチル）アミ
ノへサン酸（Ｉ　ｈ）をアセトニトリルから結晶化した
。

化合物１ｈをメタノール３０ｄで希釈したホルマリン溶
液３０ｄを加えることによってメチル化した。混合物を
３０分間かきまぜ、次にＮａＢＩＩａ　２００■を加え
、さらにかきまぜながら２０分毎にＮａＢＨ＊　２００
■を加えた０反応混合物を一夜かきまぜ、水５０１ｄお
よび塩化メチレン６０ｍ１を加える。有機層を分離し、
水３０−で２回洗い、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固し
た。生成物Ｎ−メチル−Ｎ−（４−メトキシフェネチル
）アミノヘキサン酸（Ｉｌｈ）０．１モルをＤ　ＣＣ０
，５モルおよび塩化メチレン５０ＩＩＴｉ中のＮ−ヒド
ロキシスクシンイミド０．１１モルと室温において５時
間かきまぜることによって反応させ、Ｎ−ヒドロキシス
クシンイミドでエステル化した。溶液を口遇し、蒸発乾
固した。生成物■ｈのＮ−ヒドロキシスクシンイミド（
Ｉ［Ｉｈ）をアセトニトリルから結晶化した。

Ｉ［［ｈ２０■、水１０Ｉｎｌに溶かしたアミノデキス
トラン０．５ｇ、およびＥＤＣＣｌｏｏｍｇを混合する
ことにより、ｍｈを実施例１２において調製したアミノ
デキストラン（ＭＷ＝４０００）へ結合した。混合物を
一夜かきまぜ、エタノールで沈澱した。このようにして
製造したデキストラン結合ｐ−メトキシフェネチルアミ
ンを水に溶かし、水に対して透析し、凍結乾燥した。

散性ヱニ叉 天然細胞の表面膜中のホスフォリパーゼＡ２の活性を種
々の細胞タイプにおいて測定した。それらは内皮性およ
び乳腺細胞、肝細胞、血小板および乏技神経細胞を含ん
でいた。この活性は細胞外阻害剤の濃度が増加するにつ
れて阻害された。例えば培養したラット肝細胞の表面膜
中のＰＬＡ。

活性はＰＳへ結合した細胞タンパク１００μＭ／■にお
いて実際上ブロックされた。これと平行して、これら細
胞から分泌（例えばプロスタサイクリン、トロンボキサ
ン、ヒスタミン、リソソーム酵素、トリグリセライド）
、および血小板凝集はＰＬＡ！活性と相関して阻害され
た。

リポソームホスホリピドの加水分解、それに蛇および密
バチ毒液によるヒト赤血球の溶血もＰＬＡ　！阻害剤に
よって阻止された。

ウサギ中の血栓形成の生体内阻止は、血漿巾約２００μ
Ｍの最終ＰＦ’ｌ１度へ、デキストラン、ＣＭＣまたは
へマクセルへ結合したＰＨの静脈内投与によって得られ
た。活性物質の適用に注射、経口（被覆または未被覆）
、経肛門またはエアロゾルによった。投与量は一般に５
〜５０■／ｋｇ体重である。

以下の実施例は、本発明の細胞非透過性化合物のＰＬＡ
ｔ阻害剤活性を例証する。デキストランヒドラジド−Ｐ
Ｓ　（Ｄｅ　ｘ−ＡＣ−ＰＳ）について得られた結果は
、本発明の化合物の有効性を示すため比較として与えで
ある。

実施例１４ 方広 テスト化合物を、（１−”Ｃ）オレエートで標識したホ
スホリピド５ナノモルを含有する２、５×１０１１オー
トクレーブ滅菌Ｅ、　ｃｏｌｉおよびＣａＣ１゜０、５
ミリモル／２の存在下、粗製ホスフォリパーゼＡ２　（
ヒト多形、核白血球から抽出）とインキュベート（３７
°Ｃ９６０分、ｐＨ７，０）する。修飾ドール試薬で抽
出することによって反応を停止する。遊離オレイン酸を
使い捨てシリカゲルカラム（キーゼルゲルＧ１００）上
で分離し、放射能を測定する。ブランク値（酵素なしの
アッセイ混合物）を引いた後パーセント阻害率を計算す
る。

ヒ　ＰＭＮ　　’のＰＬＡ　　の ＰＬＴタイプ　　　　　　　　ｒｃ５゜ｍｌａ）ＣＭＳ
　　　　　　　　　　　　　４０ｂ）ＨＭＳ　　　　　
　　　　　　　　　５７ｃ　　　Ｄｅｘ−Ａｃ−ＰＳ　
　　　　０２０ＣＭＳ＝カルボキシメチルセルロース−
ホスファチジルセリン ＨＭＳ＝ヘマクセルーホスファチジンセリン実施例５ 方法： 生理食塩水１００μβ中ＰＬＡｔ２００単位（ブタすい
臓からの精製ＰＬＡ、約０．３■、ベーリンガーマンハ
イム）の雄または雌ラット（ＬＥＷ／ＴＩＦ、体重的２
００　ｇ、−群５匹）左後肢への足下注射により、局所
化した浮腫を誘発し、その強さを３時間および５時間後
に血管内血量計で測定した。テスト化合物は０．７５％
メチルセルロース中に懸濁し、ＰＬＡｚ注射１時間前に
腹腔的投与（５１ｄ／ｋｇ）　した。浮腫阻止効果は担
体処理対照と比較したパーセント阻止率で表した。

ａ）ＣＭＳ　　　ｌＸ２０ ｂ）〃１０１ ００ｃ）ＨｌＸ２０ ｄ）　　　〃　　　　　１００ ｅ）Ｈｌｏｏｅ ）Ｈ〃 ＨＭＥ＝ヘマクセル アミン 実施例１６ 、ｐ、　　　　１５　　　　　　　２９、ｐ、　　　　
５１　　　　　　　５４、ｐ、　　　　３６　　　　　
　　６２、ｐ、　　　　６３　　　　　　　８０、ｐ、
　　　　　ｏ　　　　　　　　　。

、ｐ、　　　　２７　　　　　　　２５、、　　　５３
　　　　　　　　４５ ホスフアチジルエタノール 方法 ＮＭＲＩマウスの腹膜細胞をＤｕｌｂｅｃｃｏｓ　Ｍ　
Ｅ　Ｍによる洗浄によって得た。細胞を洗い、９６ウエ
ルプレート中へＥＣ３添加Ｄｕｌｂｅｃｃｏｓ　Ｍ　Ｅ
　Ｍ中２ＸＩＯ’／ウェルでプレートした。２時間（ま
たは−夜）３７°Ｃでインキュベートした後、付着マク
ロファージを３回洗った。培地をラクトアルブミン加水
分解物添加Ｄｕｌｂｅｃｃｏｓ　Ｍ　Ｅ　Ｍで取り換え
た。テスト化合物は水に懸濁した。１時間後、マクロフ
ァージを１０−’Ｍフォルボールーミリステートーアセ
テートで刺激した。さらに２時間後、上清中のＰＧＥ、
およびＬＴＣ，をラジオイムノアッセイで測定した０、
結果はＰＧＥ、およびＬＴＣ１生産のＩＣ，。で表した
。（ＩＣ５゜＝ｐｃｒＥｇまたはＬＴＣ，生産を５０％
阻害するＰＬＩ濃度）椿果 ＰＣＢ　　よびＬＴＣに　　るＰＬＩ−ＩＣＰ　Ｌ　Ｉ
　　　　　ＰＧＩＩ！生産に対する　［、ＴＣ４生産に
対するタイプ　　　　ＩＣＯ（／　ｄ）　　ＩＣ５ｏ（
／ｌｉ）ａ）ＣＭＳ　　　　　　１００　　　　　　　
７ｂ）　　〃　　　　　　１００　　　　　　１９Ｃ） ｄ）ＨＭＳ ｅ） ｆ　）　Ｄｅｘ−Ａｃ−ＰＲ ＞１００ 〉１００ 〉１００ 実施例１ 細胞非透過性ＰＬＡ、阻害剤によるセロトニン分泌の阻
害： 培養したＲＢＬをトリチウム化したセロトニン（１０テ
ＤＰＭ／ａｄｌ／１０’細胞）と２時間インキュベート
し、洗った。セロトニン分泌を所望時間イオノフォルＡ
２３１８７（０，３μＭ）の添加により、ＨＭＳ　（１
，５ｍｇ／ｄ）の存在下または不存在下活性化した。活
性化期間中培地内に蓄積した放射性セロトニンを測定し
た。ＨＭＳの不存在下では、約１．３および１．９ＤＰ
ＭＸ１０−’が１５および３０分でそれぞれ分泌された
が、ＨＭＳの存在下ではこれら時間にそれぞれ約０．３
　Ｄ　Ｐ　Ｍ　ｘｌｏ−’が分泌されただけであった。

Ｂ、ＨＭＳによるＰＬＡ　　　　の 培養したＲＢＬ細胞をＹｅｄｇａｒ　ｅｔ　ａｔ、　（
１９８６）ＦＢＢＳ　Ｌｅｔｔｅｒｓ、　２００：１６
５−１６８に記載のＰＬＡｚの蛍光基質（Ｃ，−ＮＢＤ
−ＰＣ）とインキュベートした。インキュベート１時間
後、培養物を脂質抽出にかけ、そして前に記載したよう
にＣｂＮＢＤ−ＰＣ加水分解物を測定した。

Ｔ（ＭＳ濃度（ｍｇ／Ｆｎ１）　　　加水分解Ｃ，−Ｎ
ＢＤ−ＰＣｎｍｏｌ／　　　　　タンパク／ な　しく対照）　　　　　　　　１．４２±０．１９０
、５　　　　　　　　　　　　　０．３７±０．０４１
．５　　　　　　　　　　　　　０．１１±０．０７方
法： 血小板リッチ血１（ｐＲｐ）を遠心によってヒトドナー
から得た。３７°Ｃにおける血小板凝集およびＴＸＢ、
分泌を以下の表に示した凝集剤（誘発剤）の添加によっ
て誘発した。血小板凝集はダブルビーム凝集計中で懸濁
液光学密度の測定によって測定した。結果は阻害剤の不
存在下誘発剤の添加によって得られた対照凝集の％とし
て表される。細胞外培地へのＴＸＢ、分泌はラジオイム
アッセイによって測定した。テストＰＬＩを適用すると
き、ＰＰＰは凝集の誘発前阻害剤と３７°Ｃで１０分間
インキュベートした。

分ｌ舘基Ｗ寡 実施例１９ 方法： 培養した副腎毛管内皮細胞をＣＭＳまたはＩＭＥの存在
下または不存在下、フラジキニンによってプロスタサイ
クリン（６−ケドーＰＧＦＩ　α）を生産するように刺
激した。培地へ分泌されたプロスタサイクリンをラジオ
イムアッセイによって測定した。

内皮細胞によるプロスタサイクリン生産に対する細胞非
透過性ＰＬＡ、阻害剤の効果 ＡＬＳ−アルギン酸ホスファチジルセリンＣＭＥ＝ＣＭ
Ｃホスファチジルセリン ＡＬＥ＝アルギン酸ホスファチジル−エタノールアミン ＨＭＥ＝ヘマクセルホスファチジルセリンＨＭＥ＝ヘマ
クセルホスファチジル−エタノールアミン ＣＭＳ　　（１ｍｇ／＋＋１）＋ ブラジキニン（ＩｔＩＭ） ７８．７±　　６．８　　　　　６１ 実施例２０ 細胞非透過性ＰＬＡ、阻害剤の抗炎症活性：２化合物（
ＣＭＣおよびＨＭＳ）の炎症をアジュバント関節炎モデ
ルにおいてテストした。右後膜ヘフロインドアジュバン
トの注射によって腫張を誘発した。全身炎症は２週間以
内に対向肢へもひろがる。化合物を３ないし１４日に７
０■／ｋｇの投与量で皮下投与した。１４日までに肢直
径（キャリパ−で測定）はＩ（ＭＳおよびＣＭＳを投与
した関節炎動物において著しく減少した。ＨＭＳで処理
した関節炎ラットの注射しなかったおよび注射した肢は
それぞれ肢腫張率４３％（Ｐ≦０．０１　）および１９
％（Ｐ≦０．０１）を示した。ＣＭＳは注射しなかった
肢の腫張を５１％（Ｐ≦Ｏ，ＯＯ５）へ、注射した肢の
腫張を３０％（Ｐ≦０．００１）へ減少した。２週間の
投与期間中毒性の徴候はなかった。薬物処理しなかった
群は関節炎対照群に比較して体重減少がみられた。

以上の実施例は、本発明の一般的または特定的に記載し
た反応剤および／または作業条件をもって以上の実施例
に用いたそれらを置換することにより、同様な成功度を
もって繰り返すことができる。

以上の説明から、当業者は本発明の本質的な特徴を確か
めることができ、そしてその精神および範囲を逸脱する
ことなく、種々の用途および条件に適応させるため本発
明の種々の変更および修飾をなすことができる。

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）酵素ホスホリパーゼＡ＿２（ＰＬＡ＿２）の阻害
   物質であり、かつその分子構造は細胞透過性ＰＬＡ＿２
   阻害剤部分の細胞内移行を阻害するのに有効な生理学的
   に許容し得る担体部分へ直接もしくは間接に共有結合し
   た細胞透過性ＰＬＡ＿２阻害剤部分（ただし、デキスト
   ラン−ヒドラジドへ二価ドテカンジオイル基を介して間
   接に結合したホスファチジルセリンを除く。）を含むこ
   とを特徴とする化合物。
2. （２）ＰＬＡ＿２阻害剤部分はホスファチジル−エタノ
   ールアミンまたはホスファチジル−セリンである第１項
   の化合物。
3. （３）ＰＬＡ＿２阻害剤部分はアシル化ホスファチジル
   −エタノールアミンまたはアシル化ホスファチジル−セ
   リンである第１項の化合物。
4. （４）担体部分はポリマーである第１項の化合物。
5. （５）ポリマーは尿素ブリッジによって架橋した分解し
   たゼラチンポリペプチドである第４項の化合物。
6. （６）ポリマーはカルボキシメチルセルロースである第
   ４項の化合物。
7. （７）ポリマーはアルギン酸、ヒドロキシエチルデンプ
   ン、ポリエチレングリコールまたはデキストランである
   第４項の化合物。
8. （８）ＰＬＡ＿２阻害剤部分は二価ブリッジ部分によっ
   て担体部分から隔てられている第１項の組成物。
9. （９）単位投与量あたり請求項１の化合物のＰＬＡ＿２
   阻害量を含有する薬剤学的に許容し得る担体との混合物
   の形の医薬組成物。