EA012138B1 - Применение конъюгатов липидов при лечении заболеваний - Google Patents

Применение конъюгатов липидов при лечении заболеваний Download PDF

Info

Publication number
EA012138B1
EA012138B1 EA200701077A EA200701077A EA012138B1 EA 012138 B1 EA012138 B1 EA 012138B1 EA 200701077 A EA200701077 A EA 200701077A EA 200701077 A EA200701077 A EA 200701077A EA 012138 B1 EA012138 B1 EA 012138B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
another embodiment
lipid
absent
physiologically acceptable
oligomer
Prior art date
Application number
EA200701077A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200701077A1 (ru
Inventor
Сауль Йедгар
Original Assignee
Йиссум Рисерч Дивелопмент Компани Оф Дзе Хебрю Юниверсити Оф Иерусалим
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US10/989,607 external-priority patent/US7772196B2/en
Priority claimed from US10/989,606 external-priority patent/US7811999B2/en
Priority claimed from PCT/US2005/006591 external-priority patent/WO2005084307A2/en
Application filed by Йиссум Рисерч Дивелопмент Компани Оф Дзе Хебрю Юниверсити Оф Иерусалим filed Critical Йиссум Рисерч Дивелопмент Компани Оф Дзе Хебрю Юниверсити Оф Иерусалим
Publication of EA200701077A1 publication Critical patent/EA200701077A1/ru
Publication of EA012138B1 publication Critical patent/EA012138B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/737—Sulfated polysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/543—Lipids, e.g. triglycerides; Polyamines, e.g. spermine or spermidine
    • A61K47/544—Phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

Данное изобретение представляет применение соединения, содержащего липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемыми мономером, димером, олигомером или полимером, и/или его фармацевтически приемлемой соли, или его фармацевтического продукта для получения композиции для лечения пациента, страдающего астмой, аллергическим ринитом или хроническим обструктивным заболеванием легких. Это изобретение также представляет применение соединения, содержащего липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемыми мономером, димером, олигомером или полимером, и/или его фармацевтически приемлемой соли, или его фармацевтического продукта для получения композиции для профилактики астмы, аллергического ринита или хронического обструктивного заболевания легких у пациента.

Description

Данное изобретение предоставляет применение соединения, содержащего липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемыми мономером, димером, олигомером или полимером и/или его фармацевтически приемлемой соли или его фармацевтического продукта для получения композиции для лечения пациента, страдающего астмой, аллергическим ринитом или хроническим обструктивным заболеванием легких. Это изобретение также предоставляет применение соединения, содержащего липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемыми мономером, димером, олигомером или полимером и/или его фармацевтически приемлемой соли или его фармацевтического продукта для получения композиции для профилактики астмы, аллергического ринита или хронического обструктивного заболевания легких у пациента.
Предшествующий уровень техники
Конъюгаты липидов, имеющие фармакологическую активность ингибирования фермента фосфолипазы А2 (РЬА2, ЕС3.1.1.4), известны в предшествующем уровне техники. Фосфолипаза А2 катализирует распад фосфолипидов по §η-2 положению с образованием жирной кислоты и лизофосфолипида. Активность этого фермента коррелирует с различными клеточными функциями, в частности с продукцией липидных медиаторов, таких как эйкозаноиды (простагландины, тромбоксаны и лейкотриены), фактор активации тромбоцитов и лизофосфолипиды. Со времени их открытия, конъюгаты липидов подвергаются интенсивным лабораторным исследованиям для того, чтобы достичь более широкого применения в защите клеток и организмов от повреждающих агентов и патогенных процессов.
Сущность изобретения
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения астмы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики астмы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000,
- 1 012138 для получения композиции для лечения аллергического ринита.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики аллергического ринита.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения хронического обструктивного заболевания легких.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики хронического обструктивного заболевания легких.
В одном варианте осуществления X в общей формуле (А) является полисахаридом. В одном варианте осуществления полисахарид представляет собой карбоксиметилцеллюлозу, в то время как в другом варианте осуществления, полисахарид является гликозаминогликаном. В одном варианте осуществления гликозаминогликан является гиалуроновой кислотой, в то время как в другом варианте осуществления, гликозаминогликан является гепарином. В одном варианте осуществления Ь в общей формуле (А) является фосфатидилэтаноламином, который в одном варианте осуществления представляет собой дипальмитоилфосфатидилэтаноламин.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1.1: Ингибирование эндотелин-1 (ЕТ)-индуцированного спазма колец трахеи крыс конъюгатами липидов. А: Спазм трахеи крысы Эндстелином-1. В: Эффект НуРЕ на ЕТ-индуцированный спазм трахеи крысы.
Фиг. 1.2: Эффект НуРЕ и гиалуроновой кислоты (НА) на ЕТ-1-индуцированный спазм трахеи крысы.
Фиг. 1.3: Эффект НуРЕ и гиалуроновой кислоты (НА) на Ацетилхолин (АсСй)-индуцированный спазм изолированных колец трахеи крысы.
- 2 012138
Фиг. 1.4: Эффект НуРЕ, вводимого подкожно, на раннюю астматическую реакцию (ЕАВ), вызванную ингаляцией альбумина.
Фиг. 1.5: Эффект НуРЕ на &РЬЛ2 экспрессию в легких крыс с ОУА-индуцированной астмой.
Фиг. 1.6: Эффект НуРЕ на уровень цистеиниллейкотриенов (ЬТС4, ЬТЭ4 и ЬТЕ4) в ВЛЬ страдающих ОУА-индуцированной астмой крыс.
Фиг. 1.7: Эффект НуРЕ ингаляции на раннюю и позднюю астматическую реакцию (ЕАВ и ЬАВ, соответственно) у ОУА-сенсибилизированных, страдающих астмой крыс.
Фиг. 1.8: Эффект НуРЕ ингаляции на уровень цистеиниллейкотриенов (ЪТС4, ЬТО4 и ЬТЕ4) у ВАЬ ОУА-сенсибилизированных, страдающих астмой крыс.
Фиг. 1.9: Эффект НуРЕ ингаляции на продукцию N0 макрофагами, собранными из ВАЬ ОУАсенсибилизированных, страдающих астмой крыс.
Фиг. 1.10: Эффект НуРЕ ингаляции на структурные изменения дыхательных путей (ремоделирование дыхательных путей) ОУА-сенсибилизированных, страдающих астмой крыс.
Фиг. 1.11: Эффект НуРЕ на ремоделирование дыхательных путей страдающей астмой крысы; гистологическая морфометрия.
Фиг. 1.12: Эффект НуРЕ ингаляции на Т№а продукцию макрофагами, собранными из ВАЬ ОУАсенсибилизированных, страдающих астмой крыс.
Фиг. 1.13: Смягчение ОУА-индуцированного бронхоспазма посредством НуРЕ ингаляции до стимуляции.
Фиг. 1.14: Смягчение ОУА-индуцированного бронхоспазма посредством НуРЕ ингаляции после стимуляции.
Фиг. 2.1: СМРЕ защищает ВСМ клетки от разрушения мембраны, вызванного комбинированным действием пероксида водорода (продуцированного глюкозоксидазой=СО) и экзогенной фосфолипазой А2 (РЬЛ2).
Фиг. 2.2: СМРЕ защищает ВСМ клетки от разрушения гликозаминогликанов пероксидом водорода (продуцированного СО).
Фиг. 2.3: НуРЕ защищает ЬЭЬ от медь-индуцированного окисления.
Фиг. 3.1: Эффект различных конъюгатов липидов на ЬР8-индуцированную 1Ь-8 продукцию.
Фиг. 3.2: Эффект НуРЕ на ЬР8-индуцированную продукцию хемокинов.
Фиг. 3.3: Эффект НуРЕ на ЬТА-индуцированную 1Ь-8 продукцию.
Фиг. 3.4: Эффект НуРЕ на ЬР8-индуцированную экспрессию 1САМ-1 и Е-селектина.
Фиг. 3.5: Эффект НуРЕ на ЬР8-индуцированную активацию ΝΕ-кВ в ЬМУЕС.
Подробное описание изобретения
Изобретение предоставляет конъюгаты липидов, которые проявляют широкий ряд комбинаций цитопротекторной фармакологической активности. Эти соединения могут облегчать обструкцию дыхательных путей при астме, защищать слизистую ткань при желудочно-кишечных заболеваниях, подавлять иммунные ответы, облегчать кожную реакцию гиперчувствительности, ингибировать клеточную пролиферацию, ассоциированную с повреждением сосудов и иммунным ответом, ингибировать клеточную миграцию, ассоциированную с заболеваниями сосудов и центральной нервной системы, ослаблять окислительное повреждение тканевых белков и клеточных мембран, препятствовать распространению вирусов, снижать ферментативную активность, разрушающую ткани, и снижать внутриклеточные уровни хемокинов и цитокинов. Таким образом, эти соединения применимы при лечении разнообразных болезненных состояний, включающих астму, ринит, аллергический ринит, хроническое обструктивное заболевание легких, обструктивное респираторное заболевание, колит, болезнь Крона, инсульт центральной нервной системы, рассеянный склероз, контактный дерматит, псориаз, сердечно-сосудистые заболевания, инвазивные медицинские процедуры, агрессивные клеточные пролиферативные нарушения, антиоксидантную терапию, гемолитические синдромы, сепсис, острый респираторный дистресс-синдром, синдромы реакции на тканевые трансплантаты, аутоиммунные заболевания, вирусные инфекции и гиперчувстзительный конъюнктивит.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
Ь—Ζ—Υ--Χ
- -Ιη (А) где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и
- 3 012138 η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения астмы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
ь—Ζ—Υ--Χ —’п (А) где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики астмы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения аллергического ринита.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики аллергического ринита.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения хронического обструктивного заболевания легких.
- 4 012138
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики хронического обструктивного заболевания легких.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение соединения, представленного структурой общей формулы (А):
где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η является числом от 1 до 1000, для получения композиции для профилактики обструктивного респираторного заболевания.
В одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является астма. В еще одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является ринит. В еще одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является аллергический ринит. В еще одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является хроническое обструктивное легочное заболевание. В другом варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является синусит.
В одном варианте осуществления X в общей формуле (А) является полисахаридом. В одном варианте осуществления полисахарид представляет собой карбоксиметилцеллюлозу, в то время как в другом варианте осуществления полисахарид является гликозаминогликаном. В одном варианте осуществления гликозаминогликан является гиалуроновой кислотой, в то время как в другом варианте осуществления гликозаминогликан является гепарином. В одном варианте осуществления Ь в общей формуле (А) является фосфатидилэтаноламином, который в одном варианте осуществления представляет собой дипальмитоилфосфатидилэтаноламин.
В одном варианте осуществления лечение или профилактика относятся к задержке возникновения симптомов, уменьшению выраженности симптомов, уменьшению тяжести острого эпизода, уменьшению числа симптомов, уменьшению эпизодов связанных с заболеванием симптомов, уменьшению
- 5 012138 скрытых симптомов, смягчению симптомов, уменьшению вторичных повреждений, уменьшению вторичных инфекций, продлению жизни пациентов, предупреждению рецидивов заболевания, снижению числа или частоты рецидивов, возрастанию интервалов между рецидивами, возрастанию длительности прогрессирования, ускорению ремиссии, вызыванию ремиссии, увеличению ремиссии, ускорению выздоровления или возрастанию эффективности или снижению резистентности к альтернативному лечению.
В одном варианте осуществления симптомы первичны, в то время как в другом варианте осуществления, симптомы вторичны. В одном варианте осуществления первичный означает симптом, возникший в результате заражения патогеном, в то время как в другом варианте осуществления вторичный означает симптом, являющийся производным или зависимым от первичного случая.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием, включающий стадию введения пациенту соединения, содержащего липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером и/или его фармацевтически приемлемой соли или его фармацевтического продукта, в количестве эффективном для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием. В еще одном варианте осуществления изобретения изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием, включающий стадию введения пациенту любого одного из соединений, соответствующих изобретению, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием. В другом варианте осуществления изобретения обструктивным респираторным заболеванием является астма.
В одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является что-либо из салицилата, салициловой кислоты, аспирина, моносахарида, лактобионовой кислоты, мальтозы, аминокислоты, глицина, карбоновой кислоты, уксусной кислоты, масляной кислоты, дикарбоновой кислоты, глутаровой кислоты, янтарной кислоты, жирной кислоты, додекановой кислоты, дидодекановой кислоты, желчной кислоты, холевой кислоты, холестерилгеммисукцината; или где физиологически приемлемый димер или олигомер является дипептидом, дисахаридом, трисахаридом, олигопептидом или диили трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитинсульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; или где физиологически приемлемый полимер представляет собой гликозаминогликан, полижелин (гемаццель), альгинат, гидроксиэтилкрахмал (гетастартч), полиэтиленгликоль, поликарбоксилированный полиэтиленгликоль, хондроитинсульфат, кератин, кератинсульфат, гепарансульфат, дерматин, дерматансульфат, карбоксиметилцеллюлозу, гепарин, декстран или гиалуроновую кислоту. В еще одном варианте осуществления, физиологически приемлемый полимер представляет собой хондроитинсульфат. В еще одном варианте осуществления, хондроитинсульфат является хондроитин-6-сульфатом, хондроитин-4сульфатом или их производным. В еще одном варианте осуществления физиологически приемлемым полимером является гиалуроновая кислота.
В одном варианте осуществления изобретения липидный или фосфолипидный фрагмент представляет собой фосфатидную кислоту, ацилглицерин, моноацилглицерин, диацилглицерин, триацилглицерин, сфингозин, сфингомиелин, хондроитин-4-сульфат, хондроитин-6-сульфат, церамид, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерии, фосфатидилхолин, фосфатидилинозитол или фосфатидилглицерин или их эфир или алкилфосфолипидные производные, и физиологически приемлемый мономерный или полимерный фрагмент представляет собой что-либо из аспирина, лактобионовой кислоты, мальтозы, глутаровой кислоты, полиэтиленгликоля, карбоксиметилцеллюлозы, гепарина, декстрана, гемацеля, гетастарча или гиалуроновой кислоты. В еще одном варианте осуществления фосфалипидный фрагмент является фосфатидилэтаноламином.
В одном варианте осуществления обструктивное респираторное заболевание представляет собой нарушение проходимости просвета бронхов в легкие, проявляющееся нарушением дыхания, увеличением частоты дыхания (тахипное) или рентгенологическими признаками обструкции дыхательных путей. Обструктивное респираторное заболевание включает астму, острые легочные инфекции, острый респираторный дистресс-синдром, хроническое обструктивное легочное заболевание, ринит и аллергический ринит. В одном варианте осуществления патофизиологическим характерным признакам обструкции потока воздуха соответствует спазм гладкой мускулатуры и накопление инфильтратов в и вокруг оболочек дыхательных путей.
В одном варианте осуществления астма является болезненным процессом, где бронхи могут быть сужены, что проявляется затруднением дыхания. В одном варианте осуществления симптомы включают в себя хрипы, затрудненное дыхание (в частности выдох), вздутие грудной клетки или комбинацию их. В одном варианте осуществления факторы, которые могут обострять астму, включают быстрое изменение температуры или влажности, аллергены, инфекции верхних дыхательных путей, физические упражнения, стресс, курение (сигареты) или их комбинацию.
В одном варианте осуществления ринит включает в себя воспаление слизистой оболочки носа. В одном варианте осуществления аллергический ринит представляет собой воспалительный ответ в носо
- 6 012138 вых ходах на аллергический стимул. В одном варианте осуществления симптомы включают в себя забитость носа, чихание, назорею, зуд в носу или их комбинацию.
В одном варианте осуществления хроническое обструктивное заболевание легких является прогрессирующим патологическим процессом, по большей части возникающим в результате курения. В одном варианте осуществления хроническое обструктивное заболевание легких включает в себя затруднение дыхания, хрипы, кашель, который может быть хроническим кашлем или их комбинацию. В одном варианте осуществления хроническое обструктивное заболевание легких может привести к осложнениям, которые в одном варианте осуществления могут включать бронхиты, пневманию, рак легкого или их комбинацию.
Колит является хроническим заболеванием желудочно-кишечного тракта, проявляющийся дискомфортом в животе, диареей и рентгенологической и гистологической диагностикой, характерные признаки повреждения слизистой оболочки включают эпителиальные эрозии. Болезнь Крона представляет собой сходные расстройства, поражающие в типичных случаях тонкий кишечник, но которые могут вовлекать и другие области желудочно-кишечного тракта.
Рассеянный склероз является болезнью белого вещества, проявляющийся двигательной слабостью или чувствительными нарушениями или ими обоими, обычно диагностируется посредством анализа спинномозговой жидкости или магнитно-резонансной томографией. Зрительные нарушения, включающие слепоту, также характерны. В областях болезненной активности гемато-энцефалический барьер поврежден.
Кожная реакция гиперчувствительности, по-другому известная как контактный дерматит, проявляется наружными признаками раздражения тканей, такими как местное покраснение, отек и зуд. Фактически, некоторые вещества могут вызывать данное состояние, и оно является одним из большинства жалоб, диагностируемых дерматологами.
Псориаз также является одним из большинства дерматологических заболеваний, встречающегося у 1-2 на тысячу людей. В большинстве случаев поражаются локти, колени, ягодичные складки и кожа головы. В активных псориатических повреждениях (бляшках), частота клеточных делений усилена. Длительное использование местных глюкокортикоидов часто сопровождается потерей их эффективности.
Сердечно-сосудистые заболевания проявляются сужением просветов кровеносных сосудов и, как результат, ишемическими синдромами в органах-мишенях, снабжающихся ими, таких как сердце, почки и мозг. Ишемия, или уменьшение доставки крови, результат сужения кровеносных сосудов. Признаки и симптомы сердечно-сосудистых заболеваний включают в себя, среди прочего, стенокардию, слабость, нарушение дыхания, транзиторные ишемические атаки, удар (инсульт) и почечную недостаточность. Диагностика основана на клинических признаках в сочетании со вспомогательными диагностическими тестами, такими как анализы крови, электрокардиограмма, эхокардиография и ангиография. Атеросклероз является общим элементом в сердечно-сосудистых заболеваниях, в котором сужение кровеносных сосудов обусловлено рубцовоподобными бляшками, сформировавшимися в результате реактивности, миграции и пролиферации клеток и в результате местного отложения жира, холестерина и липопротеинов. В частности, важно в этом отношении накопление липопротеинов низкой плотности (БОБ), которое может быть усилено окислительным повреждением. Считается, что бляшки являются участком как для острых, так и хронических стенозных поражений, где возрастает риск тканевой ишемии.
Стенотические или суживающие повреждения кровеносных сосудов появляются не только при атеросклерозе, но и при других системных сердечно-сосудистых нарушениях. Среди них артериальная гипертензия, васкулиты, включая васкулиты, ассоциированные с трансплантацией органов, и коагуляционные нарушения. Многие из этих нарушений, в частности гипертензия, атеросклероз и васкулиты проявляются совместно у некоторых пациентов.
Реперфузионное повреждение и/или повреждение вследствие ишемии/реперфузии относится к тканевым повреждениям и инициирует некроз вследствие возобновления кровоснабжения предварительно ишемизированной ткани. Этот феномен признается как важный компонент ишемического и постишемического видов повреждения, в частности мозга и сердечной ткани. Один патофизиологический механизм, который преобладает в реперфузии, представляет собой повреждающий эффект реактивных разновидностей кислорода, по-другому известный, как окислительное повреждение или свободно-радикальное повреждение. Оксид азота и его радикалы также участвуют в патофизиологии. Выработка этих вредных химических разновидностей относится к местному накоплению, адгезии и перемещению лейкоцитов к месту повреждения.
Инвазивные медицинские вмешательства, такие как катетеризация артерий или вен или открытые хирургические вмешательства часто ассоциированы с тканевой ишемией, обусловленной повреждением кровеносных сосудов, также как реперфузионным повреждением, они могут возникать в ходе инвазивных процедур. Таким образом, предохранение действенности кровеносньх сосудов и профилактика реперфузионного повреждения являются объектом интенсивного исследования в медицинской науке. Такие процедуры, выполняемые с диагностической и лечебной целями и вспомогательные лекарства в общем описаны для профилактики осложнений повреждения кровеносных сосудов и рестенозов. Образование таких повреждений вовлекает множество участников, включающих коагуляцию элементов крови,
- 7 012138 клеток крови, и структурные элементы и клетки стенки кровеносного сосуда. Например, артериальный рестеноз, появляющийся после удачной баллонной ангиопластики, часто обусловлен сужением внутреннего диаметра артерии разрастанием (пролиферацией) гладкомышечных клеток в области раздражения вследствие баллонной ангиопластики. Это новое стенотической повреждение может содержать разные типы клеток, включая лейкоциты, накапливающиеся в месте повреждения вследствие процессов миграции и местной пролиферации. Два события (клеточная миграция и пролиферация) почти несомненно обуславливают координированное взаимодействие различных цитокинов, вероятно высвобождаемых раннее накопленными макрофагами в месте источника тканевого повреждения. Таким образом, лейкоциты содействуют стенотическому повреждению, образующемуся вследствие процессов миграции, местной пролиферации, проникновения через эндотелиальные барьеры, аккумуляции богатых холестерином липопротеидов, превращения в пенные клетки и секреции цитокинов. Эта пролиферация клеток и сужение просвета кровеносного сосуда как бы то ни было ограничивает или лимитирует коронарные артерии или мозговую циркуляцию. Могут также появляться постоперативные рестенозы, например, в периферической сосудистой системе.
В контексте настоящего изобретения, термин сердечно-сосудистые заболевания означает сужение просвета кровеносных сосудов, возникающее вследствие атеросклероза, васкулита, инвазивных вмешательств, в частности катетеризации артерии или вены, и ишемических синдромов, ассоциированных с ними.
Трансплантация тканей, трансплантатов и органов часто осложняется появлением синдрома типа хозяин против трансплантата и трансплантат против хозяина, которые могут проявляться остро или хронически у реципиента трансплантата. Источник трансплантата может быть аллогенным (из сходного вида) или ксеногенным (из другого вида). Относятся ли эти осложнения к вызванным гиперактивностью иммунной системы или другим механизмом, васкулиты остаются часто встречаемым осложнением процедур трансплантации тканей. Более того, сосудистые повреждения, относящиеся к реперфузионным повреждениям, считаются главным фактором в постоперативном несрабатывании тканей и трансплантированных органов.
Аутоиммунные заболевания являются состояниями, при которых изменение клинического статуса пациента относится к извращенному клеточному и/или гуморальному иммунному ответу. В большинстве, аутоиммунные заболевания в США представлены ювенильным диабетом, тириоидитом Хашимото и Грейва, ревматоидным артритом, болезнью Крона и язвенным колитом, хроническим активным гепатитом, виталиго, гломерулонефритом, увеитом, рассеянным склерозом, склеродермией, гемолитической анемией, идиопатической тромбоцитопенической пурпурой, миастенией гравис, системной красной волчанкой и пузырьчаткой.
Гиперпролиферативные клеточные нарушения, такие как рак, при которых клетки возникают первично в органах на месте или распространением из других источников (метастазируют), является одной из основных причин смертности в США. Злокачественные новообразования часто высоко резистентны ко всем формам лечения, включающего мощные антипролиферативные препараты и облучение. Все больше и больше медицинское общество становится осведомленным о критической роли, которую играет связь васкуляризации с первичной и метастазирующей формами заболевания. Подобно другим клеточным скоплениям, раковые клетки зависимы от достаточного кровоснабжения и в действительности, известно, что раковые клетки подстегивают процесс йс ηονο васкуляризации через высвобождение факторов роста, которые влияют на эндотелиальные клетки и гладкомышечные клетки, формируя новые кровеносные сосуды, таким образом обеспечивая раковый рост.
Метастазирование, распространение раковых клеток в эктопические места, является часто сосудозависимым процессом, так как часто относится к гематогенному распространению.
Физиологический барьер, представленный стенкой кровеносного сосуда, включает такие элементы, как эндотелиальные клетки и вещество базальной мембраны, в норме высоко селективен для прохождения клеток. Однако метастазируемые клетки уничтожают этот барьер, используя ряд механизмов, некоторые из которых представлены в научной литературе. Например, такие анормальные клетки продуцируют гидролитические ферменты, которые разрушают межклеточное вещество и связывающие компоненты сосудистого барьера, такие как коллаген, гепариназу и гиалуронидазу. Таким образом, критическим фактором в процессе метастазирования является способность раковых клеток проникать через или пенетрировать стенку кровеносного сосуда, таким образом вторгаясь в новую ткань после перемещения с циркулирующей кровью. Раковые клетки высвобождают химические посредники, известные как цитокины и хемокины, которые облегчают процесс метастазирования, с помощью многих аспектов, включающих ангиогенез.
Клеточное высвобождение цитокинов и хемокинов несет важную регуляторную функцию в поддержании здоровья; однако когда возникает гиперактивный ответ на стресс или заболевание, эти соединения могут вырабатываться в избытке и повреждать ткани, таким образом давая толчок болезненному состоянию с последующим ухудшением. Цитокиновая гиперпродукция вовлекается в большое число заболеваний, таких как сепсис, повреждение дыхательных путей и легких, почечную недостаточность, реакцию на трансплантат, кожные повреждения, кишечные повреждения, раковое развитие и метастази
- 8 012138 рование, нарушения центральной нервной системы, вагинальные бактериальные инфекции и т. п. Два примера, в которых это происходит, представлены системной инфекцией, в частности, при росте в крови бактерий (септицемия) и при легочном состоянии, известном, как острый (или зрелый) респираторный дистресс синдром (ΑΚΌ8). При ΑΚΌ8 легкие заполняются жидкостью, препятствуя газообмену и вызывая легочную недостаточность. Несмотря на появление агрегации тромбоцитов, главными агентами, вызывающими паталогический ответ, являются моноцитарные фагоциты и лейкоциты, которые прилипают к эндотелиальной выстилке и вызывают респираторное повреждение при оксидантном повреждении и высвобождают хемокины, такие как Ого α, ΕΝΑ-78, СХ3Х и МСР-1 в добавление к лейкотриенам, тромбоксанам и простагландинам. Моноцитарные фагоциты, главным образом макрофаги в альвеолах и в сосудистом русле, также высвобождают оксиданты, медиаторы и серию разрушающих ферментов, которые непосредственно повреждают эндотелиальные клетки и вызывают высвобождение лейкоцитами их лизосомальных ферментов. Смертность превышает 50%. Наиболее общими причинами ΑΚΌ8 являются инфекция, аспирация, курение и вдыхание токсических веществ, также как системные процессы, начавшиеся вне легких, включая бактериальную септицимию. Септический синдром и шок запускаются взаимодействием ряда микробных продуктов в крови, в частности, грамм-отрицательными эндотоксинами, с медиаторной системой хозяина. Насчитывается примерно более 500000 случаев в год, ведущую роль в которых играет повышение превалирования антибиотикоустойчивых организмов. Ряд медиаторов хозяина вовлекается в патогенез сепсиса и септического шока (упоминаемом в общем здесь как сепсис), включая факторы, освобождаемые из стимулированных клеток, в частности, цитокины, фактор-α некроза опухоли (ΤΝΡ), Ого α, ΕΝΑ-78, СХ3Х и МСР-1, ΝΡκΒ транскрипции фактор, лизосомальные ферменты и оксиданты из лейкоцитов и продукты метаболизма арахидоновой кислоты, среди других.
Лизис эритроцитов или гемолиз может быть наследственным или приобретенным заболеванием, вызывающим прогрессирующую анемию, дефицит железа или желтуху. Среди приобретенных синдромов представлены мембранные аномалии, вызванные непосредственными токсическими эффектами укуса змей или инфекционных агентов, включающих вирусное, бактериальное и паразитическое происхождение, в частности малярией; подвергание окисляющим веществам через проглатывание и заболевание; или как результат механической травмы, патологических кровеносных сосудов. Эти последние состояния, известные как микроангиопатический гемолиз, предположительно являются сходными по механизму с гемолизом вследствие прохождения крови через протезирующие импланты, такие как протезы клапанов сердца. Наследственная хрупкость мембран эритроцитов часто появляется вследствие интраклеточных ферментных или структурных дефектов, таких как дефицит глюкозо-6-фосфатазы, серповидноклеточная анемия и талассемия. Лизис эритроцитов является одним из ограничивающих факторов для времени хранения продуктов крови, в частности, при фотодинамических вироцидальных видах лечения с образованием свободных радикалов, таких как γ-облучение.
Синдром приобретенного иммунодефицита считается быстрорастущей глобальной эпидемией и передающимся через продукты крови. Передача и развитие этого заболевания зависимо от инфекционной активности вируса иммунодефицита пациента. Лечебные мероприятия ограничиваются в первую очередь введением ингибиторов транскриптаз, лекарств высокой стоимости и плохо переносимых пациентами.
Окислительное повреждение относится к эффекту пероксидации и продукции свободных радикалов в тканях организма. До некоторой степени продукция пероксидов является нормальным, физиологическим процессом, связанным, например, с ролью иммунного распознавания. Однако при стрессе и болезненном состоянии или в ходе естественного течения времени, таком как физиологическое старение, накопление этих неустойчивых химических групп в структурах тканей, включающих мембранные компоненты и белки крови, приводит к необратимому повреждению. Вещества, обладающие антиоксидантным действием, могут защищать против оксидантного повреждения. Такая защита была предметом многих научных публикаций.
Заболевания, вызванные внутриклеточными бактериальными паразитами, являются одной из преобладающих форм болезней, передающихся половым путем и часто неподдающихся традиционной антибактериальной терапии. Вагинальная инфекция сЫатуФа 5рсс1С5 является ярким примером.
В одном варианте осуществления, настоящее изобретение предлагает способы лечения заболеваний, основанные на введении липидов, ковалентно связанных через их полярные головные группы с физиологически приемлемыми химическими группами, которые могут иметь высокую или низкую молекулярную массу.
В одном варианте осуществления изобретения, липидные соединения (конъюгаты липидов) настоящего изобретения описываются общей формулой:
- 9 012138 [фосфатидилэтаноламин-Υ] η-Χ [фосфатидилсерин-Υ]η-Χ [фосфатидилхолин-Υ]η-Χ [фосфатидилинозитол-Υ]η-Χ [фосфатидилглицерин-Υ]η-Χ [фосфатидная кислота-Υ]η-Χ [лизофосфолипид-Υ]η-Χ [диацил-глицерин-Υ] η-Χ [моноацил-глицерин-Υ]η-Χ [сфингомиелин-Υ]η-Χ [сфингозин-Υ]η-Χ [церамид-Υ]η-Χ где
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и η число липидных молекул, связанных с X, является числом от 1 до 1000.
В одном варианте осуществления изобретения η является числом от 1 до 1000. В другом варианте осуществления изобретения, η является числом от 1 до 500. В другом варианте осуществления изобретения, η является числом от 1 до 100. В другом варианте осуществления изобретения η является числом от 100 до 300. В другом варианте осуществления изобретения η является числом от 300 до 500. В другом варианте осуществления изобретения η является числом от 500 до 800.
В одном варианте осуществления изобретения липидные соединения этого изобретения, известные здесь как конъюгаты липидов (липид-конъюгаты), открытые к настоящему времени, обладают многочисленными и мощными фармакологическими эффектами в дополнение к способности ингибировать экстрацеллюлярную форму фермента фосфолипазы А2. Набор соединений, содержащих фосфатидилэтаноламин, ковалентно связанный с физиологически приемлемым мономером или полимером, обозначен здесь как РЕ-конъюгаты. Родственные производные, среди которых фосфатидилсерин, фосфатидилхолин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота или фосфатидилглицерин используются вместо фосфатидилэтаноламина как липидный фрагмент, обеспечивают эквивалентный терапевтический результат, основанный на биологических экспериментах, описанных ниже для конъюгатов липидов, и структурных сходствах, присущих этим соединениям. Другие производные конъюгатов липидов, относящиеся к этому изобретению, являются конъюгатами липидов, в которых по крайней мере одна из жирокислотных групп липидных фрагментов в положениях С1 или С2 глицериновой основы замещена длинноцепочечными алкильными группами, связанными или простой эфирной, или алкильной связью, а не сложноэфирной связью.
Как показывает структурная формула представленных здесь конъюгатов липидов, эти соединения могут содержать от одной до одной тысячи липидных фрагментов, связанных с одной физиологически приемлемой полимерной молекулой.
Введение конъюгатов липидов в разнообразные животные и клеточные модели заболеваний вызывает значительные и неожиданные цитопротекторные эффекты, которые используются при лечении заболеваний. Они способны стабилизировать клеточные мембраны; подавлять клеточную пролиферацию; подавлять продукцию свободных радикалов; подавлять продукцию оксида азота; уменьшать клеточную миграцию через биологические барьеры; оказывать влияние на уровень хемокинов, включая МСР-1, ΕΝΑ-78, Ого α и СХ3Х; проявления генной транскрипции и модификации экспрессии МНС антигенов; укреплять непосредственно клеточные мембраны и изменять водную структуру клеточной поверхности; ингибировать поглощение окисленных липопротеинов; предупреждать спазм гладкой мускулатуры дыхательных путей; подавлять высвобождение нейротрансмиттеров; уменьшать экспрессию фактора-α некроза опухоли (ΤΝΡ-α); модифицировать экспрессию факторов транскрипции, таких как ΝΡκΒ; подавлять экстрацеллюлярные разрушающие ферменты, включая коллагеназу, гепариназу, гиалуронидазу в дополнение к РЬА2; и подавлять вирусное инфицирование лейкоцитов. Таким образом, конъюгаты липидов обеспечивают длительные цитопротекторные эффекты на организм, страдающий заболеваниями, где один или более патофизиологических механизмов клеточного повреждения вызывают оксидантный удар, вызывающий возрастание мембранной хрупкости; гиперпролиферацию клеток, вызывающую рост образования стенотических бляшек в сосудистой ткани, ангиогенез и начало или малигнизацию раковых заболеваний, или псориаза; измененную клеточную миграцию, вызывающую рост повреждения мозга или метастазирование опухолевых клеток; чрезмерную выработку хемокинов и цитокинов, ассоциированных с инсультами центральной нервной системы (С№), сепсисом, ΑΚΌ8 или иммунологическими
- 10 012138 заболеваниями; повреждение клеточной мембраны, вызывающее рост инсультов ΟΝ8, СУ8 заболевания или гемолиз; пероксидацию белков крови и клеточных мембран, вызывающую атеросклероз или реперфузиснное повреждение; чрезмерную продукцию оксида азота, вызывающую рост инсультов ΟΝ8, реперфузионное повреждение и септический шок; взаимодействие с главными гистотропными антигенами (МНС) связано с аутоиммунными заболеваниями и аллоиммунными синдромами, такими как отторжение трансплантата.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения полезные фармакологические свойства липидов или конъюгатов липидов могут быть приемлемы для клинического применения и описываются здесь как способы лечения заболеваний. Биологическое основание этих способов может быть легко продемонстрировано посредством стандартных клеточных и животных моделей заболеваний, как описано ниже.
В то время как фармакологическая активность конъюгатов липидов, описанных здесь, может быть обусловлена природой липидного фрагмента, многочисленные и разнообразные комбинации фармакологических характеристик, наблюдаемых для конъюгатов липидов, показывают способность структур соединений, по существу, действовать как несколько различных лекарств в одной химической группе. Таким образом, например, внутренние повреждения слизистых оболочек, которые появляются при колите или болезни Крона, могут быть ослаблены посредством какого-либо одного или всеми фармакологическими активностями, такими как иммунное подавление, противовоспалительное действие, антиокислитльное действие, подавление продукции оксида азота или стабилизация мембран. Защита кровеносных сосудов от внутрипросветного повреждения, которое может появляться при атеросклерозе, может вызываться действием антипролиферативного, антихемокинового, антиоксидантного или антимиграционного эффектов. Лечение астмы, аллергических ринитов, хронических обструктивных заболеваний легких или обструктивных респираторных заболеваний может включать в себя какое-либо из многих воздействий конъюгатов липидов, приводящее к подавлению продукции оксида азота, антихемокинового, антипролиферативного или мембраностабилизирующего эффектов.
Пролиферация ткани сосудов является элементом как атерогенеза склеротических бляшек, так и признаком первичного или метастазирующего роста раковых повреждений. Стабилизация биологических мембран может предупреждать гемолиз, также как повреждение слизистой оболочки кишечника. Уменьшение уровней хемокинов может ослаблять ΆΚΌ8, также как препятствовать атерогенезу. Антиоксидантная защитная активность может защищать от реперфузионного повреждения и ишемии/реперфузии, также как от инсульта ЦНС, атеросклероза и гемолиза. Эти и другие преимущества настоящего изобретения будут очевидны специалисту в данной области из последующего описания.
Использование одного химического объекта с сильной антиоксидантной, мембраностабилизирующей, антипролиферативной, антихемокиновой, антимиграционной и противовоспалительной активностью приводит к повышению цитопротекции, сходной с таковой при использовании нескольких различных веществ, каждое из которых обладает такой активностью. Использование одного средства, обладающего многочисленными действиями, в сравнении с комбинацией или множеством различных средств приводит к единовременной доставке активной молекулы, таким образом упрощая лекарственный метаболизм, уменьшая токсичность и упрощая доставку. Соединения, представленные в настоящем изобретении, также проявляют свойства, присутствующие только в комбинированной молекуле, но не в индивидуальных компонентах.
В одном варианте осуществления соединения изобретения могут быть использованы для острого лечения временных состояний или могут быть вводимы хронически, особенно в случае прогрессирующих, возвратных или дегенеративных заболеваний. В одном варианте осуществления настоящего изобретения, концентрации соединений будут зависеть от различных факторов, включающих природу состояния, подвергаемого лечебному воздействию, состояние пациента, способ введения и индивидуальную толерантность композиций.
В другом варианте изобретения изобретение предоставляет конъюгаты липидов низкой молекулярной массы, ранее не открытые и не известные, обладающие фармакологической активностью, общей формулы:
- 11 012138 [фосфатидилэтаноламин-Υ] η-Χ [фосфатидилсерин-Υ]η-Χ [фосфатидилхолин-Υ]η-Χ [фосфатидилинозитол-Υΐη-Χ [фосфатидилглицерин-Υ]η-Χ [фосфатидная кислота-Υ]η-Χ [лизофосфолипид-Υ]η-Χ [диацилглицерин-Ύ]η-Χ [моноацилглицерин-Υ]η-Χ [сфингомиелин-Υ]η-Χ [сфингозин-Υ]η-Χ [церамид-Υ]η-Χ где
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; и
X является салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, моносахаридом, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, карбоновой кислотой, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, дипептидом, дисахаридом, трисахаридом, олигосахаридом, олигопептидом или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана, или гиалуроновой кислотой, гликозаминогликаном, полижелином (гемаццель), альгинатом, гидроксиэтикрахмалом (гетастарч), полиэтиленгликолем, поликарбоксилатом полиэтиленгликоля, хондроитин-6-сульфатом, хондроитин-4-сульфатом, кератином, кератинсульфатом, гепарансульфатом, дерматином, дерматансульфатом, карбоксиметилцеллюлозой, гепарином, декстраном или гиалуроновой кислотой; и п, количество липидных молекул, соответствующее X, является числом от 1 до 1000.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения п является числом от 1 до 1000. В другом варианте осуществления изобретения п является числом от 1 до 500. В еще одном варианте осуществления п является числом от 1 до 100. В еще одном варианте осуществления п является числом от 100 до 300. В еще одном варианте осуществления п является числом от 300 до 500. В еще одном варианте осуществления п является числом от 500 до 800.
В еще одном варианте осуществления изобретения эти производные конъюгатов липидов обладают широким спектром фармацевтической активности и как фармацевтические средства, вводимые при лечении заболеваний, считаются аналогичными конъюгатам липидов, содержащим полимеры высокой молекулярной массы. Другие производные конъюгатов липидов, относящиеся к настоящему изобретению, являются глицерин-липидными фрагментами, в которых по крайней мере одна из двух длинноцепочечных алкильных групп в положениях С1 и С2 глицериновой основы связана простой эфирной связью или алкильной связью, а не сложноэфирной связью.
Настоящее изобретение далее иллюстрируется в следующих примерах терапевтических соединений конъюгатов липидов, их химическим получением, их активностью против заболеваний и способами применения в качестве фармакологических композиций при лечении заболеваний.
Соединения
В способах, соответствующих вариантам осуществления изобретения, конъюгаты липидов, вводимые пациенту, содержат по крайней мере один липидный фрагмент, ковалентно связанный через атом полярной головной группы с мономерным или полимерным фрагментом (упоминаемый здесь, как конъюгированный фрагмент) низкой или высокой молекулярной массы. По желанию, необязательная связующая группа может быть использована для связывания липид-конъюгированного фрагмента с мономерной или полимерной частью. Конъюгированный фрагмент может быть карбоновой кислотой низкой молекулярной массы, дикарбоновой кислотой, жирной кислотой, дикарбоновой жирной кислотой, ацетилсалициловой кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом или моно- или дисахаридом, аминокислотой или дипептидом, олигопептидом, смесью гликопротеидов, или ди- или трисахаридными мономерными единицами гликозаминогликанов, такими как повторяющиеся единицы гепарина, гепарансульфата, гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфата, дерматана, кератансульфата или пептидов высокой молекулярной массы или олигопептида, полисахарида, полигликана, белка, гликозаминогликанов или смеси гликопротеидов. В композиционном аспекте, фосфолипиды-конъюгаты высокой молекулярной массы и связанные с ними аналоги являются предметом патента США 5064817, а также цитируемых здесь публикаций.
В одном варианте осуществления изобретения, когда фрагментом конъюгированного носителя является полимер, отношение ковалентно связанных липидных фрагментов может составлять от одного до
- 12 012138 одной тысячи липидных остатков на молекулу полимера, в зависимости от природы полимера и используемых условий реакции. Например, относительные количества исходных веществ или продолжительность времени реакции могут быть модифицированы для того, чтобы получить липид-конъюгированные продукты с высоким или низким соотношением липидных остатков с полимером, по желанию.
Термин фрагмент обозначает химическое вещество, по другому соответствующее химическому соединению, которое имеет валентность, соответствующую ковалентной связи.
Примерами полимеров, которые могут быть использованы, как конъюгированные фрагменты для получения конъюгатов липидов для применения в способах этого изобретения, могут являться физиологически приемлемые полимеры, включающие в себя вододиспергируемые или -растворимые полимеры различной молекулярной массы и разнообразных химических видов, главным образом природные или синтетические полимеры, такие как гликозаминогликаны, гиалуроновая кислота, гепарин, гепаринсульфат, хондроитинсульфат, хондроитин-6-сульфат, хондроитин-4-сульфат, кератинсульфат, дерматинсульфат, плазменные экспандеры, включающие в себя полижелин (Наетассе1, разрушенный желатиновый полипептид, сшитый через мочевинные мостики, производимый Вейпид), гидроксиэтилкрахмал (Не1ак1агсй, НЕ8) и экстраны, пищевые и лекарственные добавки, растворимые производные целлюлозы (например, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза), полиаминокислоты, углеводородные полимеры (например, полиэтилен), полистиролы, сложные полиэфиры, полиамиды, оксиды полиэтилена (например, полиэтиленгликоли, поликарбоксиэтиленгликоль), поливинилпирролидоны, полисахариды, альгинаты, ассимилируемые камеди (например, ксантановая камедь), пептиды, инъецируемые белки крови (например, сывороточный альбумин), циклодекстрин и их производные.
Примерами мономеров, димеров и олигомеров, которые могут использоваться как конъюгированные фрагменты для получения конъюгатов липидов, использованных в способах этого изобретения, могут являться моно- или дисахариды, карбоновая кислота, дикарбоновая кислота, жирная кислота, дикарбоновая жирная кислота, ацетилсалициловая кислота, холевая кислота, холестерилгеммисукцинат и ди- и трисахаридные мономерные единицы гликозаминогликанов, включающих в себя гепарин, гепарансульфат, гиалуроновую кислоту, хондроитин, хондроитин-6-сульфат, хондроитин-4-сульфат, дерматин, дерматансульфат, кератин, кератансульфат или декстран.
В некоторых случаях согласно вариантам осуществления настоящего изобретения мономеры или полимеры, выбираемые для получения конъюгатов липидов, могут сами обладать избирательной биологической активностью. Например, гепарин и гиалуроновая кислота являются веществами с изученным физиологическим действием. В настоящем изобретении, однако, конъюгаты липидов, образованные из этих веществ, как из исходных материалов, проявляют новые и более широкие фармацевтические активности, чем те, которые могли бы быть предсказаны от введения либо гепарина или гиалуроновой кислоты, которые не имеют связанных посредством ковалентной связи фосфолипидов. Может быть показано стандартными сравнительными экспериментами, такими как описанные ниже, что фосфатидилэтаноламин (РЕ), связанный с карбоксиметилцеллюлозой (упоминаемой как СМРЕ, СМС-Реог СМЕ), с гиалуроновой кислотой (называемой как ΗΥΡΕ, НуРЕ, Нуа1-РЕ), гепарином (обозначаемым НЕРРЕ, НерРЕ, НеРРЕ, НераРЕ), с хондроитинсульфатом А (обозначаемым как С8АРЕ, СкаРЕ, СкАРЕ), с полижелином (гемаццель) (обозначаемым НетРЕ, НЕМРЕ) или с гидроксиэтилкрахмалом (обозначаемым как НекРЕ, НЕ8РЕ) превосходит в терминах величины активности и диапазона полезной фармакологической активности свободные конъюгаты (полимеры, упомянутые выше, и т.п.). В действительности, эти последние вещества, в общем, не считаются пригодными в способах лечения большинства болезней, описываемых здесь, и для частных случаев, где их применение предписано медицински, таких как ишемические сосудистые заболевания, их концентрация для применения в качестве лекарства на несколько порядков выше. Таким образом, комбинация фосфолипида, такого как фосфатидилэтаноламин или родственные фосфолипиды, которые различаются в отношении полярной головной группы, такие как фосфатидилсерин (Р8), фосфатидилхолин (РС), фосфатидилинозитол (Р1) и фосфатидилглицерин (РС), приводит к созданию соединения с новыми фармакологическими свойствами по сравнению с самими исходными веществами.
Биологически активные конъюгаты липидов, описанные здесь, могут иметь широкий диапазон молекулярной массы, например, выше 50000 (вплоть до нескольких сотен тысяч), когда желательно удержать конъюгаты липидов в сосудистой системе, и ниже 50000, когда желательно экстраваскулярную систему сделать мишенью. Единственным ограничением по молекулярной массе и химической структуре конъюгированного фрагмента является то, что он не приводит к конъюгату липида, лишенному желательной биологической активности, или не приводит к химической или физиологической нестабильности в такой степени, что конъюгаты липидов оказываются не употребимыми, как лекарства в описываемом здесь способе применения.
В одном варианте осуществления, соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (А):
- 13 012138
(А) где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000, где любая связь между Ь, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (I):
где
В1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К.2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыценной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; и
X является либо физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или физиологически приемлемым полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000, где, если Υ отсутствует, фосфатидилэтаноламин непосредственно связан с X через амидную связь и, если Υ представляет собой спейсер, спейсер непосредственно связан с X через амидную или сложноэфирную связь и с фосфатидилэтаноламином через амидную связь.
Предпочтительные соединения для применения в способах изобретения включают в себя одно из следующих в качестве конъюгированного фрагмента X: ацетат, бутират, глутарат, сукцинат, додеканоат, дидодеканоат, мальтозу, лактобионовую кислоту, декстран, альгинат, аспирин, холат, холестерилгеммисукцинат, карбоксиметилцеллюлозу, гепарин, гиалуроновую кислоту, полижелин (гемаццель), полиэтиленгликоль и поликарбоксилированный полиэтиленгликоль. Полимеры, используемые как исходные вещества для получения РЕ-конъюгатов, могут различаться по молекулярной массе от 1 до 2000 кДа.
Примеры фосфатидилэтаноламиновых (РЕ) фрагментов являются аналогами фосфолипида, в котором цепь длиной в две жирнокислотные группы связана с глицериновой основой фосфолипида, длиной 2-30 атомов углерода, и в котором эти цепочки жирных кислот содержат насыщенные и/или ненасыщенные атомы углерода. Вместо жирнокислотных цепочек алкильные цепочки, присоединенные непосредственно или через простую эфирную связь к глицериновому скелету фосфолипида, включаются в настоящее изобретение как аналоги РЕ. В соответствии с настоящим изобретением наиболее предпочтительным РЕ фрагментом является дипальмитоилфосфатидилэтаноламин.
Фосфатидилэтаноламин и его аналоги могут быть из различных источников, включая природные, синтетические и полусинтетические производные и их изомеры.
Фосфолипиды, которые могут быть применены вместо РЕ фрагмента, представляют собой Ν-метилРЕ производные и их аналоги, связанные ковалентной связью посредством аминогруппы Ν-метил-РЕ; Ν,Ν-диметил-РЕ производные и их аналоги, связанные ковалентной связью посредством аминогруппы Ν,Ν-диметил-РЕ, фосфатидилсерин (Р8) и его аналоги, такие как пальмитоилстеароил-Р8, природный Р8 из различных источников, полусинтетические Р8, синтетический, природный и искусственный Р8 и их изомеры. Другие фосфолипиды, пригодные как конъюгированные фрагменты в этом изобретении, являются фосфатидилхолином (РС), фосфатидилинозитолом (Р1), фосфатидной кислотой и фосфатидилглицерином (РС), также как производные их, включая другие фосфолипиды, лизофосфолипиды, фосфатидную кислоту, сфингомиелин, лизосфингомиелин, церамид и сфингозин.
Для РЕ-конъюгатов и Р8-конъюгатов, фосфолипид связывают с конъюгированными мономерными
- 14 012138 или полимерными фрагментами через атом азота фосфолипидной головной полярной группы, непосредственно или через спейсерную группу. Для РС, ΡΙ и РС фосфолипид связывают с конъюгированными мономерными или полимерными фрагментами через атом азота или один из атомов кислорода головной полярной группы непосредственно или через спейсерную группу.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (II):
0 V
1Ц— с^-о—с-н
I Л
Кт—с—о—с-н о ό н-с-о-Д н ό
Υ--Χ (Π) где
Κι является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; и
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где, если Υ отсутствует, фосфатидилсерин непосредственно связан с X через амидную связь, и, если Υ представляет спейсер, спейсерная группа непосредственно связана с X через амидную или сложноэфирную связь и с фосфатидилсерином связана через амидную связь.
В еще одном варианте осуществления изобретения соединение в соответствии с изобретением является |фосфатидилсерин-У|п-Х. где Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов, X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном и η является числом от 1 до 1000, где фосфатидилсерин может быть связан с Υ или X, если Υ отсутствует, через СОО-фрагмент фосфатидилсерина.
В другом варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (III):
(Ш) где
Κ1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо является инозитолом, холином или глицерином;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; и
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфатидилом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (IV):
- 15 012138
αν) где
Κι является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-3 0 атомов; и
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В другом варианте осуществления соединение в турой общей формулы (V):
соответствии с изобретением представлено струко II РI О’ (V) где
К1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов; и
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (VI):
О Н-С-0-Ρ-Ο-Ζ-Υ- Χ (УТ) где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
- 16 012138
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В другом варианте осуществления соединение в турой общей формулы (VII):
соответствии с изобретением представлено струк(VII) где
В1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К.2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В одном варианте осуществления изобретения конъюгаты фосфатидилхолина (РС), фосфатидилинозитола (Р1), фосфатидной кислоты (РА), где Ζ отсутствует, и фосфатидилглицерина (РС) определяются в данном изобретении как соединения общей формулы (III).
В одном варианте осуществления настоящего изобретения Υ отсутствует. Неограничивающие примеры подходящих дивалентных групп, образующих необязательную связывающую группу (спейсер) Υ, в соответствии с вариантами осуществления изобретения, представляют собой прямую или разветвленную цепочку алкилена, например, из 2 или более, предпочтительно 4-30 атомов углерода, -СО-алкилен-СО, -НН-алкилен-НН-, -СО-алкилен-НН-, -НН-алкилен-МНСО-алкилен-НН-, аминокислоту, циклоалкилен, где алкилен в каждом примере является прямой или разветвленной цепочкой и содержит 2 или более, предпочтительно 2-30 атомов углерода в цепочке, -(-О-СН(СН3) СН2-)Х, где х является целым числом от 1 и более.
Соответственно вариантам осуществления изобретения, в добавление к традиционной фосфолипидной структуре, сходными производными для использования в этом изобретении являются фосфолипиды, модифицированные в положениях С1 или С2 так, чтобы содержать простую эфирную или алкильную связь вместо сложноэфирной связи. В одном варианте осуществления изобретения, алкильные фосфолипидные производные и фосфолипидные производные на основе простого эфира представлены как иллюстративные примеры.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (VIII):
Н-с-Ο-Ρ-Ο-Ζ-Υ’-Χ (УШ)
- 17 012138 где
Κι является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В другом варианте осуществления соединение в турой общей формулы (IX):
соответствии с изобретением представлено струкН- С- О- Р- О- Ζ— Υ· - X (IX) где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (1X3):
(Ка) где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (1X0):
- 18 012138
(КЬ) где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (X):
где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей дллну в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфорилцерамидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XI):
Н
I к.1— с-он
Н-С-ΝΗ-Υ •X о
но-с-н (XI) где
Κι является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ отсутствует;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
- 19 012138 где, если Υ отсутствует, то сфингозил является непосредственно связанным с X через амидную связь, и, если Υ представляет спейсер, спейсерная группа непосредственно связана с X и с сфингозилом через амидную связь, и с X через амидную или сложноэфирную связь.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XII):
—'п (ХП) где
К1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ь является церамидом;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между церамидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XIII):
О н
II I
Я1— с-о-с-н &2-С-О-С-Н
II I ,
О Н-С-0-Ζ-Υ-Χ
I н
- “п (ХШ) где
К; является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между диглицирилом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XIV):
где
К; является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасы
- 20 012138 щенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между глицеролипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В другом варианте осуществления изобретения соединение, соответствующее изобретению, представлено структурой общей формулы (XV):
где
К1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ отсутствует или представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между глицеролипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XVI):
где
К1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления изобретения соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XVII):
- 21 012138
(XVII) где
Κι является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной свя зью.
В еще одном варианте осуществления изобретения соединение, соответствующее изобретению, представлено структурой общей формулы (XVIII):
где
Κι является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В другом варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XIX):
Н
I
в.1— С-Н
I й2— С-Н
Н-С-0-Ζ-Υ-Χ
I с н -Ц (XIX) где
Κ1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и
- 22 012138 η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XX):
Н I й.]—О-С-Н
К.2—С-Н !
Н-С-0-Ζ-Υ-Χ
I
Ь н -’ч (XX) где
Κι является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, У и X является либо амидной, либо сложноэфирной свя зью.
В еще одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (XXI):
где
Κ1 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 является либо водородом, либо линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ отсутствует или представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной связью.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения гликозаминогликан может быть, среди прочего, гиалуроновой кислотой, гепарином, гепарансульфатом, хондроитинсульфатом, кератином, кератансульфатом, дерматансульфатом или их производными.
В еще одном варианте осуществления гликозаминогликан является ди- и трисахаридным звеном мономеров гликозаминогликонов. В другом варианте осуществления хондроитинсульфат может быть, среди прочего, хондроитин-6-сульфатом, хондроитин-4-сульфатом или их производным.
В одном варианте осуществления изобретения кольца сахара гликозаминсгликана являются интактными. В другом варианте осуществления настоящего изобретения интактное относится к закрытому. В другом варианте изобретения интактное относится к природному. В другом варианте изобретения интактное относится к неразрушенному.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения структура липида или фосфолипида в каком-либо соединении, соответствующем изобретению, является интактной. В другом варианте осуществления изобретения природная структура липида или фосфолипида в каком-либо соединении, соответствующем изобретению, является сохраненной.
- 23 012138
В одном варианте осуществления изобретения соединения, соответствующие изобретению, являются биодеградируемыми.
В одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (А):
ь—Ζ—Υ--Χ (А) где
Ь является фосфатидилом;
Ζ является этаноламином, где Ь и Ζ являются химически связанными, что приводит к получению фосфатидилэтаноламина; Υ отсутствует;
X является гиалуроновой кислотой; и η является числом от 1 до 1000; где какая-либо связь между фосфатидилэтаноламином и гиалуроновой кислотой является амидной.
В одном варианте осуществления соединение в соответствии с изобретением представлено структурой общей формулы (А):
(А) где
Ь является фосфатидилом;
Ζ является этаноламином, где Ь и Ζ являются химически связанными, что приводит к получению фосфатидилэтаноламина;
Υ отсутствует;
X является хондроитинсульфатом; и η является числом от 1 до 1000;
где какая-либо связь между фосфатидилэтаноламином и хондроитинсульфатом является амидной.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего астмой, включающий стадию введения пациенту какого-либо из соединений, соответствующих изобретению, или комбинации их, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего астмой. В другом варианте осуществления соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), (1У), (У), (У1), (У11), (УШ), (IX), (Ка), (КЬ), (X), (XI), (XII), (XIII), (ХЖ, (ХУ), (ХУ), (ХУП), (ХУШ), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или любой их комбинацией. В еще одном варианте осуществления, изобретение предоставляет способ профилактики астмы у пациента.
В еще одном варианте осуществления, изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего ринитом, включающий стадию введения пациенту какого-либо из соединений, соответствующих изобретению, или комбинации их, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего ринитом. В еще одном варианте осуществления, соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), ЦУ), (У), (Щ), (УП), (УШ), (IX), (Ка), (КЬ), (X), (XI), (XII), (XIII), (ХЖ, (ХУ), (ХУ!), (ХУЛ), (ХУШ), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или любой их комбинацией. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики ринита у пациента.
В еще одном варианте осуществления, изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего аллергическим ринитом, включающий стадию введения пациенту какого-либо из соединений, соответствующих изобретению, или комбинации их, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего аллергическим ринитом. В еще одном варианте осуществления соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), (Ж (У), (УТ), (УП), (УШ), (IX), (Ка), (КЬ), (X), (XI), (XII), (XIII), (ХЖ, (ХУ), (ХУЦ (ХУП), (ХУШ), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или любой их комбинацией. В еще одном варианте осуществления изобретение обеспечивает способ профилактики аллергического ринита у пациента.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, стра
- 24 012138 дающего хроническими обструктивным заболеванием легких, включающий стадию введения пациенту какого-либо из соединений, соответствующих изобретению, или комбинации их, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего хроническим обструктивным заболеванием легких. В еще одном варианте осуществления соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Ша), (ΣΧΒ), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XVI), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или любой их комбинацией. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики у пациента хронического обструктивного заболевания легких.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием, включающий стадию введения пациенту какоголибо из соединений, соответствующих изобретению, или комбинации их, в количестве, эффективном для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием. В еще одном варианте осуществления, соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Ша), (КЬ), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XVI), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или любой их комбинацией. В еще одном варианте осуществления изобретения, обструктивным респираторным заболеванием является астма. В еще одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является ринит. В еще одном варианте осуществления, обструктивным респираторным заболеванием является аллергический ринит. В еще одном варианте осуществления обструктивным респираторным заболеванием является хроническое обструктивное заболевание легких. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики астмы, ринита, аллергического ринита, хронического обструктивного заболевания легких, обструктивного респираторного заболевания или их комбинаций у пациента.
Иллюстративными примерами предпочтительных конъюгатов липидов для использования в способах, соответствующих вариантам осуществления этого изобретения, являются те, в которых липидные/фосфолипидные фрагменты связаны непосредственно или опосредованно через связывающие фрагменты, перечисленные ниже.
- 25 012138
Фосфолипид Спейсер Полимер (м.м.) Сокращение
РЕ Дикарбоновая кислота + диамин Полижелин (гемаццель) (4-40 кДа) НеМРЕ; НетРЕ
РЕ нет Карбоксиметилцеллюлоза (20-500 кДа) СМРЕ; СМС-РЕ
РЕ нет Гиалуроновая кислота (2-2000 кДа) ΗΥΡΕ (НуРЕ)
РЕ Дипальмитоивая кислота Гиалуроновая кислота (2-2000 кДа) ΗΥΡΕ- дипальмитоил
РЕ нет Полиэтиленгликоль
РЕ Υ Г идроксиэтилкрахмал НЕЗРЕ; НезРЕ
РЕ Дикарбоновая кислота + диамин Декстран (1-2000 кДа) £>ехРЕ
РЕ нет Декстран (1-2000 кДа) ϋβχΡΕ
РЕ нет Альбумин
РЕ нет Альгинат (2-2000 кДа)
РЕ нет Полиаминокислота
РЕ нет Лактобионовая кислота
РЕ нет Ацети лсалиц и лат
РЕ нет Холестерилгеммисукцинат
РЕ нет Мальтоза
РЕ Υ нет Холевая кислота
РЕ нет Поликарбоксилированный пол иэтилен гли коль
РЕ нет Гепарин (0,5-1 ЮкДа) НЕРРЕ; НЕРЕ; НерРЕ
Димиристоил- РЕ Υ различные ϋΜΡΕ
Димиристоил- РЕ Υ Гиалуроновая кислота НуРМРЕ
РЗ Υ Полижелив (гемаццель)
РЗ Υ Гепарин
РЗ Υ Гиалуроновая кислота
РС Υ Полижелин (гемаццель)
РС Υ Гепарин
РС Υ Г иалуроновая кислота
ΡΙ Υ Полижелин (гемаццель)
ΡΙ Υ Гепарин
ΡΙ Υ Гиалуроновая кислота
РС Υ Полижелин (гемаццель)
РС Υ Г епарин
РЕ Υ Хондроитинсульфат С8РЕ
РЕ Υ Полижелин (гемаццель)
РС Υ Гиалуроновая кислота
В одном варианте осуществления изобретения вводимыми соединениями являются НуРЕ, С8ЛРЕ, СМРЕ, НетРЕ, НезРЕ, ЭсхРЕ. Лз-РЕ и фармацевтически приемлемые их соли в комбинации с физиологически приемлемыми носителями или растворителями. Эти полимеры, если они выбраны как конъюгированные фрагменты, могут различаться по молекулярной массе от 200 до 2000000 Да. Представители различной молекулярной массы проявляют желаемое биологическое действие, как показано в разделе ниже.
- 26 012138
В дополнение к соединениям примеров, дальнейшее иллюстрирование соединений этого изобретения представлено в разделе ниже.
Новые соединения
Конъюгаты липидов низкой молекулярной массы, в которых конъюгированная часть является мономером, таким как салицилат, желчная кислота или холестерилгеммисукцинат, или ди- или трисахаридной мономерной единицей полигликозаминогликана, такого как гепарин, гепарансульфат, хондроитин-6сульфат, хондроитин-4-сульфат, гиалуроновая кислота, кератин, кератансульфат, дерматин или дерматансульфат, не были описаны ранее. В соответствии с вариантами осуществления изобретения, эти новые соединения проявляют сходный профиль биологической активности, как демонстрируется ниже для других конъюгатов липидов, и имеют общую формулу:
[фосоатидилэтаноламин-У]п-Х [фосфатидилсерин-У]п-Х [фосфатидилхолин-Υ]п-Х [фосфатидилинозитол-У]п-Х [фосфатидилглицерин-Υ]п-Х [фосфатидная кислота-Υ]п-Х [лизо-фосфолипид-Υ]п-Х [диадил-глицерин-У]п-Х [моноацил-глицерин-Υ]п-Х [сфингомиелин-У]п-Х [сфингозин-Υ] п-Х [церамид-Υ]п-Х где
Υ либо отсутствует или представляет спейсерную группу, длиной в интервале 2-30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- и дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η представляет число от 1 до 1000.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения низкомолекулярные фосфатидилэтаноламин (РЕ)-конъюгаты определены выше как соединения формулы (I), где:
В1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- и дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, молочной кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η представляет число от 1 до 1000.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения низкомолекулярные фосфатидилсерин (Р8)-конъюгаты определены выше, как соединение формулы (II), где:
В! является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
- 27 012138
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- и дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η представляет число от 1 до 1000.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения фосфатидилхолин (РС), фосфатидилинозитол (Р1) и фосфатидилглицерин (РС) конъюгаты определены здесь выше как соединения формулы (III), где
В! является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
В2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
Ζ отсутствует либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- и дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η число от 1 до 1000.
Примеры подходящих дивалентных групп, образующих необязательно связывающую группу Υ, представляют собой прямую или разветвленную цепь алкилена, например, из 2 или более, предпочтительно 4-18 атомов углерода, -СО-алкилен-СО, 4Н-алкилен4Н-, -СО-алкилен-ΝΗ-, циклоалкилен, где алкилен в каждом примере является прямой или разветвленной цепью и содержит 2 или более, предпочтительно 2-18 атомов углерода в цепи, - (-О-СН(СН3)СН2-)Х, где х является целым числом от 1 и более.
В еще одном варианте осуществления в дополнение к традиционным фосфолипидным структурам, сходными производными для использования в этом изобретении являются фосфолипиды, модифицированные по С1 или С2 положениям таким образом, чтобы содержать эфирную или алкильную связь вместо сложноэфирной связи. Эти производные приведены в качестве примеров здесь выше общими формулами (VIII) и (IX), где
В1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
В2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- и дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η число от 1 до 1000.
В еще одном варианте осуществления изобретения сходные производные низкой молекулярной массы для использования в этом изобретении приведены в качестве примеров общей формулы (X), (XI) и (XII), где
В1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
В2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью,
- 28 012138 имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
Ζ отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- или дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератинсульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η число от 1 до 1000.
В другом варианте осуществления сходные производные низкой молекулярной массы для использования в этом изобретении приведены в качестве примеров общей формулы (XIII), где:
К1 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
К2 является линейной, насыщенной, мононенасыщенной или полиненасыщенной алкильной цепью, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов углерода;
Ζ отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ отсутствует или является спейсерной группой, имеющей длину в интервале от 2 до 30 атомов;
X является моно- или дисахаридом, карбоксилированным дисахаридом, моно- или дикарбоновой кислотами, салицилатом, салициловой кислотой, аспирином, лактобионовой кислотой, мальтозой, аминокислотой, глицином, уксусной кислотой, масляной кислотой, дикарбоновой кислотой, глутаровой кислотой, янтарной кислотой, жирной кислотой, додекановой кислотой, дидодекановой кислотой, желчной кислотой, холевой кислотой, холестерилгеммисукцинатом, ди- или трипептидом, олигопептидом, трисахаридом, или ди- или трисахаридной мономерной единицей гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; и η является числом молекул липидных фрагментов, связанных с молекулой группы X, где η число от 1 до 1000.
В еще одном варианте осуществления родственные производные низкомолекулярной массы, соответствующие изобретению, могут быть приведены в качестве примеров общей формулы (А), (I)-(XXI), где в одном варианте осуществления настоящего изобретения X является ковалентно связанным с липидом. В еще одном варианте осуществления изобретения X является ковалентно связанным с липидом через амидную связь. В еще одном варианте осуществления X является ковалентно связанным с липидом через сложноэфирную связь. В еще одном варианте осуществления липид является фосфатидилэтаноламином. В еще одном варианте осуществления САС может быть, среди прочего, хондроитинсульфатом. В еще одном варианте осуществления изобретения конъюгаты являются биодеградируемыми.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет соединение гликозаминогликанов (САС), ковалентно связанное с липидом, с получением соединения, обладающего предпочтительными терапевтическими свойствами.
В еще одном варианте осуществления САС соединение является ковалентно связанным с липидом через амидную связь. В еще одном варианте осуществления, САС соединение является ковалентно связанным с липидом через сложноэфирную связь. В еще одном варианте осуществления липид может быть, среди прочего, фосфатидилэтаноламином. В еще одном варианте осуществления изобретения САС может быть, среди прочего, хондроитинсульфатом. В еще одном варианте осуществления изобретения, конъюгаты являются биодеградируемыми.
САС клеточной поверхности играет ключевую роль в защите клеток от различных повреждающих средств и процессов, таких как реактивные типы кислорода и свободные радикалы, эндотоксины, цитокины, инвазии промотирующих ферментов и средств, которые вызывают и/или облегчают разрушение межклеточного матрикса и базальной мембраны, клеточную приницаемость, экстравазацию лейкоцитов и инфильтрацию, хемотаксис и т.д. Кроме того, САС клеточной поверхности защищают клетки от бактериальной, вирусной инфекции и инфекции паразитами и других обнажающих воздействий на клетку и последующего проникновения микроорганизмов. Обогащение клеточной поверхности САС таким образом поможет в защите клетки от повреждающего процесса. Таким образом, в одном варианте осуществления изобретения РЬА2 ингибиторы были конъюгированы с САС или САС-подобными молекулами. В еще одном варианте осуществления, эти конъюгаты липидов обеспечивали разнонаправленную защиту от различных повреждающих воздействий и эффективно ослабляли заболевания, где требовалась клеточная защита от повреждения биохимическими медиаторами.
В другом варианте осуществления САС-подобные молекулы могут быть, среди прочего, отрицательно заряженными молекулами. В еще одном варианте осуществления, САС-подобные молекулы мо
- 29 012138 гут быть, среди прочего, салицилатными производными. В другом варианте осуществления САСподобные молекулы могут быть, среди прочего, дикарбоновой кислотой.
Получение соединений
Получение некоторых высокомолекулярных конъюгатов липидов является предметом патентной заявки США, серийный номер 5064817, которая включена в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте. Эти синтетические способы повторяются ниже и считаются такими же приемлемыми, как получение низкомолекулярных, т.е. конъюгатов липидов, содержащих мономеры и димеры, как конъюгирующие фрагменты, с модификациями в процедуре, которые совершенно очевидны для квалифицированного специалиста.
Когда исходное соединение, выбранное фрагментом для конъюгирования, имеет заместитель, который является реакционноспособным или может быть реакционноспособным в отношении заместителя в исходном липидном соединении, конъюгированный фрагмент носителя может быть соединен непосредственно с липидной молекулой (молекулами) с получением конъюгата липида. Когда этого нет, бифункциональное связывающее исходное вещество может быть использовано для связи двух молекул опосредовано.
Конъюгаты липидов получают посредством связывания полярного конъюгата, т. е. мономера или полимера, непосредственно или опосредованно с РЬ фрагментом, в соответствии с общими схемами реакций, указанными в патенте США 5064817.
Например, в качестве спейсеров для ацилированного РЕ, используемого в качестве предшественника для РЕ конъюгата, могут быть использованы дикарбоновые кислоты различной длины. Эти кислоты могут быть связаны с природным, полусинтетическим или синтетическим РЕ.
Например, РЕ может быть связан с аминодекстраном опосредованно, как указано в патенте США 5064817.
Полимеры с группами карбоновых кислот, такие как полиаминокислоты, карбоксиметилцеллюлоза или полимеры, с которыми могут быть связаны жирные кислоты, могут быть соединены непосредственно с РЕ согласно схеме, указанной в патенте США 5064817.
Понятно, что эти примеры взяты только в качестве иллюстрации и не могут быть истолкованы, как ограничивающие изобретение, как и многие модификации в реагентах и способах могут быть возможны для специалиста в данной области. Основываясь на широком спектре фармакологических свойств, проявляемых конъюгатами липидов, похоже, что соединения, охватываемые формулами [-XXI в дополнение к явно описанным выше, имеют те же самые ценные биологические активности, которые показывают полезность в способах лечения заболеваний, описанных ниже.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (А):
Ε_-Ζ·—Υ-Χ
- -’п (А) где
Ь является липидом или фосфолипидом;
Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между Ε, Ζ, Υ и X является или амидной или сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии:
связывание Ь с Ζ;
связывание Ζ с Υ;
связывание Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, то Ь непосредственно связывают с Υ, если Υ отсутствует, то Ζ непосредственно связывают с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, то Ь непосредственно связывают с X, таким образом, получая соединение, представленное структурой общей формулы (А).
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (I):
- 30 012138
где
Κι представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ или отсутствует, или представляет спейсерную группу, имеющую длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или физиологически приемлемым полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где, если Υ отсутствует, фосфатидилэтаноламин напрямую связан с X через амидную связь, и если Υ является спейсерной группой, спейсерная группа непосредственно связана с X через амидную или сложноэфирную связь, и связана с фосфатидилэтаноламином через амидную связь, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфатидилэтаноламина с Υ; и связывания Υ с X;
если Υ отсутствует, фосфатидилэтаноламин непосредственно связывают с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (I).
В одном варианте осуществления изобретения фосфатидилэтаноламин является химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы:
где Κι и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (II):
Гон
К. ϊ-ο— С—Н
I
К2— с—О-С-Н О Н СОО
Н-С-О-1?—О-С—С—Ν—Υ--Χ 1 1 1 | I
Н О’ н н н
Ν— Υ—X (П) где
Κ1 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или физиологически приемлемым полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где, если Υ отсутствует, фосфатидилсерин непосредственно связан с X через амидную связь, и, если Υ является спейсерной группой, спейсерная группа непосредственно связана с X через амидную или сложноэфирную связь и связана с фосфатидилсерином через амидную связь, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфатидилсерина с Υ и
- 31 012138 связывания Υ с X;
если Υ отсутствует, фосфатидилсерин непосредственно связывают с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (II).
В одном варианте осуществления изобретения фосфатидилсерин является химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О Н к,—оА-Н 1 1
На—с—о—с-н о н соо6 нА—оА—оА~А—Νн ά- А А А где Κι и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (III)
η (Ш) где
Κι представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфатидилом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфатидила с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
если Ζ отсутствует, фосфатидил связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, если Υ и Ζ отсутствуют, фосфатидил связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (III).
В одном варианте осуществления изобретения фосфатидил может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О Н
Κι— й—ϋ-ά-н я2—С—ο-ό-н о Й н-с-о-й-оА А где Κ1 и Κ2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (IV)
(IV)
- 32 012138 где
К1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии: связывание фосфолипида с Ζ;
связывание Ζ с Υ;
связывание Υ с X;
если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (IV).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н
К!—6-Н
Ю-С-О-С-Н о н4-оЛ-он όгде К1 и К2 определены здесь.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (V)
в (V) где
К1 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода.
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X представляет физиологически приемлемый мономер, димер, олигомер или полимер, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (V).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
- 33 012138
Ο Η ^-Β-ο-έ-н ι η2—С-Н ο
Η-έ-ο-^-ο ά 6где Ρ| и Β2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (VI) н
I —о-с-н к2-с-о-с-н о и ι п
О Н-С-Ο-Ρ-Ο-Ζ-Υ-X
I н
I О’ (VI) где
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (VI).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н я,—о-с-н * I н2—с -α-с-н о ΰ н-с-о-АоI I где В1 и В2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (VII)
(VII) где
В1 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
- 34 012138
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (VII).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О Н щ-ϊ-ο-έ-Η ]
Кд—о-с-н □
Н-С-О-1-ОI I где К и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (VIII)
Гн'
I
В-1—С-Н
I
К2—С-Но
III
Н-С-Ο-Ρ-Ο-Ζ-Υ II
ΗΟ-
(УШ) где
К представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серии, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (VIII).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н
Н1 —6-н
Кг—с-н о
Н-С-О-&-Ок сг где К и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (IX)
- 35 012138
где
Κ1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и п является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (IX).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
где П| и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (IX;·!)
где
Κι представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и п является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
- 36 012138 связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (Ка).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
где Κ1 и Κ2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (КЬ)
где
Κ1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
У либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между фосфолипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфолипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, фосфолипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфолипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (КЬ).
В одном варианте осуществления изобретения фосфолипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
где Κ1 и Κ2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (X)
- 37 012138 где
Κ1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000; где любая связь между фосфорилом церамида, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания фосфорила церамида с Ζ; связывания Ζ с Υ; связывания Υ с X; где, если Ζ отсутствует, фосфорил церамида связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, фосфорил церамида связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (X).
В одном варианте осуществления изобретения фосфорил церамида может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
где Κ1 и Κ2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XI) (XI) где
Κ1 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где, если Υ отсутствует, сфигнозил непосредственно связан с X через амидную связь, и, если Υ является спейсерной группой, спейсерная группа непосредственно связана с X и сфингозилом через амидную связь и с X через амидную или сложноэфирную связь, включающий, среди прочего, стадии связывания сфингозила с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Υ отсутствует, сфингозил связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XI).
В одном варианте осуществления изобретения сфингозил может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н
I й1--С- ОН н-с-ынНО-С-Н
I н
где Κ1 определен выше.
- 38 012138
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XII)
Н
О Κί—с-он II I
К.2—с-ин-с-н
Н-С-О-2-Υ-Χ (ХП) где
К.1 представляет неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ь является церамидом;
Ζ либо отсутствует, либо представляет этаноламин, серин, инозитол, холин или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между церамидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания церамида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, церамид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, церамид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XII).
В одном варианте осуществления изобретения церамид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Ξ
I
О Κί-С-ОН 11 1 „ Ка-С-ЫН-С-Н н—с—о—
I н
где К1 и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XIII) ’ ОН
II I
Κι— С-О-С- Н * I к2—с-о-с-н
II I
О Н-С-0-Ζ-Υ-Χ
I н
- -4ц (ХШ) где
К1 представляет неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
К2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между диглицерилом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной,
- 39 012138 включающий, среди прочего, стадии связывания диглицерила с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, диглицерил связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, диглицерил связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XIII).
В одном варианте осуществления изобретения диглицерил может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О Н
И 1
Κι-С-О-С-Н
Н3—С-О-6-Н 11 1 О Н-С-ОI н
где Κ1 и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XIV)
Н й-1—О-С-Н ц-С-О-С-Н
II I
О Н-С-Ο-Ζ-Υ'-Χ I н (XIV) где
Κ1 представляет либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между глицеролипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания глицеролипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, глицеролипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, глицеролипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XIV).
В одном варианте осуществления изобретения глицеролипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н
Й!—О-С-Н
Кг—С-О-С-Н
II I О Н-С-Он где Κ1 и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XV)
- 40 012138
(XV) где
В) представляет неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между глицеролипидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания глицеролипида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, глицеролипид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, глицеролипид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (ХУ).
В одном варианте осуществления изобретения глицеролипид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О Н
Кг-В-0-έ-Η
К.2— О—С—н н-с-оI н
где В1 и В2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (ХУТ)
η (XVI) где
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания липида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ,
- 41 012138 если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XVI).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н
Я1—(4—н Кг-с-а-4-н □ Н-С-ОI н
I где Κι и К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XVII)
О Н <1 I
Β.Ι—с-о-с-н
Кг—С-Н
Н-С— Ο-Ζ-Υ4-Χ
I н
(XVII) где
Κι представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Κ2 представляет собой неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет собой холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и п является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания липида с Ζ; связывания Ζ с Υ; связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XVII).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
О н
К1—ιϋ-ο-с-н
К2—с-н Н-^-О1 н где Κ3 и Κ2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XVIII)
Н
К,—О-С-Н к2-о— с-н
I
Н-С-0-Ζ-Υ-Χ где (ΧνΐΠ)
- 42 012138
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет собой холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания липида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XVIII).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
Н !
Κχ—о-с-и (
В2-О—С-Н н-с-οι н
где В1 и В2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XIX)
Н
В]— С-Н к2— с-н ι: з
I >- н
Н-С-0-Ζ-Υ-Χ (ХК) где
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет собой холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии:
связывание липида с Ζ;
связывание Ζ с Υ;
связывание Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XIX).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы
- 43 012138
Η
Κι—С—Η
Κ2—С—Η
Н-С-ОI
Η где В1 и В2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XX)
(XX) где
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет собой холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывания липида с Ζ;
связывания Ζ с Υ;
связывания Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XX).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы н
I
Κι—о-с-н н2—С-Н н-С-ΟΙ н
где В1 и В2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ получения соединения, представленного структурой общей формулы (XXI) н I К,--С-Н
I
К2-О—С-Н
Η-Ο0-Ζ-Υ--Χ (XXI) где
В1 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
В2 представляет собой либо водород, либо неразветвленную, насыщенную, мононенасыщенную или полиненасыщенную алкильную цепь, имеющую длину в интервале 2-30 атомов углерода;
Ζ либо отсутствует, либо представляет собой холин, фосфат, инозитол или глицерин;
Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, где X является гликозаминогликаном; и
- 44 012138 η является числом от 1 до 1000;
где любая связь между липидом, Ζ, Υ и X является либо амидной, либо сложноэфирной, включающий, среди прочего, стадии связывание липида с Ζ;
связывание Ζ с Υ;
связывание Υ с X;
где, если Ζ отсутствует, липид связывают непосредственно с Υ, если Υ отсутствует, Ζ связывают непосредственно с X, и если Υ и Ζ отсутствуют, липид связывают непосредственно с X, таким образом получая соединение, представленное структурой общей формулы (XXI).
В одном варианте осуществления изобретения липид может быть химическим фрагментом, представленным структурой общей формулы:
Н I Нг—С-Н
К·?—О·--С— я н-с-оI н
где Κι И К2 определены выше.
В еще одном варианте осуществления связывание соответственно изобретению может быть выполнено удалением молекулы воды, таким образом образуя амидную или сложноэфирную связь. В еще одном варианте осуществления, связывание может быть выполнено в присутствии детергента. В еще одном варианте осуществления, связывание может быть индуцировано ультразвуковым облучением.
В еще одном варианте осуществления любой способ связывания, соответствующий изобретению, может быть выполнен удалением молекулы воды, таким образом образуя амидную или сложноэфирную связь. В еще одном варианте осуществления, связывание может быть выполнено в присутствии детергента. В еще одном варианте осуществления, связывание может быть индуцировано ультразвуковым облучением.
В еще одном варианте осуществления изобретения, соединение настоящего изобретения может быть получено способом связывания, осуществляемым удалением молекулы воды, таким образом образуя амидную или сложноэфирную связь. В еще одном варианте осуществления, соединение настоящего изобретения может быть получено способом связывания в присутствии детергента. В еще одном варианте осуществления, соединение настоящего изобретения может быть получено путем способа связывания, индуцируемого ультразвуковым облучением.
В одном варианте осуществления связывание фосфатидилэтаноламина и хондроитинсульфата выполняется в присутствии детергента. В другом варианте осуществления изобретения детергентом может быть, среди прочего, ΌΌΑΒ. Конечно, может быть использован любой другой подходящий детергент.
В одном варианте осуществления изобретения связывание фосфатидилэтаноламина и гиалуроновой кислоты индуцируется действием ультразвука.
Способы лечения заболеваний, основанные на РЬ конъюгатах
В одном варианте осуществления изобретения конъюгаты липидов, описанные здесь, могут быть использованы для лечения заболевания, посредством проявления по крайней мере одной из их многих фармакологических активностей, включающих смягчение или профилактику тканевого повреждения, возникающего в ходе патологического болезненного состояния, посредством стабилизации клеточных мембран; ограничение повреждения клеток, вызванного окислением, и компонентов крови; ограничение клеточной пролиферации, клеточной экстравазации и (опухоль) изменения характера клеточной миграции; подавление иммунного ответа; или смягчение физиологических реакций на стресс, проявляющийся в повышении уровней хемокинов. Лечебные свойства этих соединений ясно продемонстрированы в применении животных моделей отдельного заболевания, при котором желательно использовать лекарства. Пациенты, которым липид- или РЬ конъюгаты могут быть введены, имеют опыт симптомов заболевания или риск возникновения заболевания или опыт рецидивов или обострений заболевания. Эффективность этих соединений в клеточной и животной моделях заболеваний описана ниже в примерах.
Комбинация липидов, таких как, но не ограниченных фосфатидилэтаноламином и фосфатидилсерином, с дополнительными мономерными или полимерными фрагментами, являются таким образом практическим направлением производства новых лекарств для медицинских целей, при условии, что полученная химическая композиция проявляет желаемый ряд фармакологических свойств. В случаях, описанных здесь, различные биологические действия и эффективность в отношении заболеваний, проявляемые соединениями, намного превосходят свойства, предполагаемые использованием самих исходных веществ, вводимых отдельно или в комбинации. Однако, вероятно, будет доказано, что РЬ конъюгированные соединения, сами по себе или в комбинации, являются ценными лекарственными средствами при адаптации к способам лечения заболеваний, иных, чем состояния, конкретно описанные здесь.
- 45 012138
В одном варианте осуществления изобретение обеспечивает способ лечения пациента, страдающего заболеванием, сходным с астмой, ринитом, аллергическим ринитом, хроническим обструктивным заболеванием легких, обструктивным респираторным заболеванием, хламидийной инфекцией, нарушением клеточной пролиферации гладких мышц, метастатическим раком, колитом, болезнью Крона или другими формами повреждения слизистой оболочки кишечника, сердечно-сосудистыми заболеваниями, атеросклерозом, инсультом ткани центральной нервной системы, рассеянным склерозом, контактным дерматитом, псориазом, клеточными пролиферативными нарушениями, сепсисом, острым респираторным дистресс-синдромом, аутоиммунными заболеваниями, гемолизом, ВИЧ инфекцией или конъюнктивитом.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего астмой, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики астмы у пациента, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего аллергическим ринитом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики аллергического ринита у пациента, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего хроническим обструктивным заболеванием легких, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ профилактики хронического обструктивного заболевания легких у пациента, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ предупреждения обструктивного респираторного заболевания, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, нуждающегося в проведении антиоксидантной терапии, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом осуществляя лечение пациента, нуждающегося в антиоксидантной терапии.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, нуждающегося в проведении анти-ΤΝΕ терапии, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, нуждающегося в проведении анти-ΤΝΕ терапии.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего от нарушения клеточной пролиферации гладких мышц, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего нарушением, связанным с клеточной пролиферацией гладких мышц.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента после проведения катетеризации сосудов, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, после проведенной катетеризации сосудов.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, стра
- 46 012138 дающего метастазирующим раком, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего метастазирующим раком.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего колитом, болезнью Крона и другими формами повреждения слизистой оболочки кишечника, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего повреждением слизистой оболочки кишечника, включая колит или болезнь Крона.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего сердечно-сосудистым заболеванием, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего сердечно-сосудистым заболеванием.
Настоящее изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего атеросклерозом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего атеросклерозом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего инсультом ткани центральной нервной системы, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего инсультом ткани центральной нервной системы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего рассеянным склерозом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего рассеянным склерозом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего контактным дерматитом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего контактным дерматитом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего псориазом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего псориазом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего клеточным пролиферативным нарушением, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего клеточным пролиферативным нарушением.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего сепсисом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего сепсисом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего ΆΚΌ8, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего ΆΚΌ8.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего аутоиммунным заболеванием, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего аутоиммунным заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего от гемолиза, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего от ге
- 47 012138 молиза.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, перенесшего трансплантацию тканей или отторжение аллотрансплантата, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, перенесшего трансплантацию тканей или отторжение аллотрансплантата.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего ВИЧ инфекцией, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего ВИЧ инфекцией.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего конъюнктивитом, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего конъюнктивитом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ экстракорпорального сохранения тканей, включающий, среди прочего, стадию добавления к тканевым препаратам или органам эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, увеличивая жизнеспособность тканевых препаратов или органов вне пациента-донора.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего инфекцией, вызванной СЫатуФа, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего инфекцией, вызванной СЫатуФа.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего астмой.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для профилактики астмы у пациента.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего аллергическим ринитом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для профилактики аллергического ринита у пациента.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего хроническим обструктивным заболеванием легких.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для профилактики хронического обструктивього заболевания легких у пациента.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для профилактики обструктивного респираторного заболевания у пациента.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, нуждающегося в антиоксидантной терапии.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фос
- 48 012138 фолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, нуждающегося в анти-ΤΝΕ -терапии.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего нарушением, связанным с пролиферацией клеток гладких мышц.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, перенесшего сосудистую катетеризацию.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего метастазирующим раком.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего повреждением слизистой оболочки кишечника, включая, среди прочего, колит или болезнь Крона.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего сердечно-сосудистым заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего атеросклерозом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего инсультом центральной нервной системы.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего рассеянным склерозом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего контактным дерматитом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего псориазом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего клеточным пролиферативным нарушением.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего сепсисом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего ΆΚΌ8.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего аутоиммунным заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего от
- 49 012138 гемолиза.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, перенесшего трансплантацию тканей или отторжение аллотрансплантата.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего ВИЧ инфекцией.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего конъюнктивитом.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для увеличения жизнеспособности тканевых препаратов или органов вне пациента-донора.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего инфекцией, вызванной СЫатуШа.
В одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования экспрессии, продукции и активности ферментов фосфолипазы. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования продукции и/или действия липидных медиаторов. В другом варианте осуществления изобретения, лечение требует смягчения повреждения гликозаминогликанов (ОАО) и протеогликанов. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования продукции и действия оксидантов, оксидных радикалов и оксида азота. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует антиоксидантной терапии. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования экспрессии, продукции и действия цитокинов, хемокинов, адгезивных молекул или интерлейкинов. В еще одном варианте осуществления изобретения, лечение требует защиты липопротеинов от повреждающих агентов. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования пролиферации клеток. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования ангиогенеза и васкуляризации органов. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует ингибирования промотирующих инвазию ферментов. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования клеточной инвазии. В еще одном варианте осуществления изобретения инвазивными клетками являются лейкоциты. В еще одном варианте осуществления изобретения инвазивными клетками являются раковые клетки. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования активации лейкоцитов, адгезии или экстравазации. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует смягчения ишемии или реперфузионного повреждения. В еще одном варианте осуществления изобретения, лечение требует ингибирования активации лимфоцитов. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует защиты гемато-энцефалического барьера. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контроля продукции нейротрансмиттеров и их действия. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует контролирования спазма кровеносных сосудов и дыхательных путей. В еще одном варианте осуществления изобретения лечение требует экстракорпорального сохранения тканей.
В одном варианте осуществления изобретения липидный медиатор является глицеролипидом. В еще одном варианте осуществления, липидный медиатор является фосфолипидом. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является сфинголипидом. В еще одном варианте осуществления, липидный медиатор является сфингозином. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является церамидом. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является жирной кислотой. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является арахидоновой кислотой. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является эйкозаноидом, производным арахидоновой кислоты. В еще одном варианте осуществления липидный медиатор является фактором активации тромбоцитов (РАЕ). В еще одном варианте осуществления, липидный медиатор является лизофосфолипидом.
В одном варианте осуществления изобретения повреждающим агентом является фосфолипаза. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом являются реактивные разновидности кислорода (ΚΘ8). В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом являются свободные радикалы. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является лизофосфолипид. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является жирная кислота или ее производное. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является перекись водорода. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является фосфолипид. В еще одном варианте осущест
- 50 012138 вления повреждающим агентом является оксидант. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является катионный белок. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является стрептолизин. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является протеаза. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является гемолизин. В еще одном варианте осуществления повреждающим агентом является сиалидаза.
В одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является коллагеназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является матрикс-металопротеиназа (ММР). В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является гепариназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является гепараназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является гиалуронидаза. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является желатиназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является хондроитиназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является дерматаназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является кератаназа. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является протеаза. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является лиаза. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является гидролаза. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является разрушающий гликозаминогликан фермент. В еще одном варианте осуществления изобретения промотирующим инвазию ферментом является разрушающий протеогликан фермент.
В одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является салицилат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является салициловая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является аспирин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является моносахарид. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является лактобионовая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является глюкуроновая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является мальтоза. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является аминокислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является глицин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является карбоновая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является уксусная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является масляная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является дикарбоновая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является глутаровая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является янтарная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является жирная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является додекановая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является дидодекановая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является желчная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является холевая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером является холестерилгеммисукцинат.
В одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является дипептид. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является дисахарид В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является трисахарид. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является олигосахарид. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является олигопептид. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является ди- или трисахаридная единица гликозаминогликана. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является гиалуроновая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является гепарин. В еще одном варианте осуществления изобретения, физиологически приемлемым димером или олигомером является гепарансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является кератин. В еще одном варианте осуществления изобретения, физиологически приемлемым димером или олигомером является кератансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является хондроитин. В еще одном варианте осуществления изобре
- 51 012138 тения физиологически приемлемым димером или олигомером является хондроитинсульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является хондроитин-4-сульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является хондроитин-6-сульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является дерматин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является дерматансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является декстран. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является полижелин (Гемаццель). В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является альгинат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является гидроксиэтилкрахмал (Гетастартч). В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является этиленгликоль. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым димером или олигомером является карбоксилированный этиленгликоль.
В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является гликозаминогликан. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является гиалуроновая кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является гепарин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является гепарансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является хондроитин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является хондроитин-4сульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является хондроитин-6-сульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является кератин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является кератансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является дерматин. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является дерматансульфат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является карбоксиметилцеллюлоза. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является цекстран. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является полижелин (Гемаццель). В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является альгинат. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является гидроксиэтилкрахмал (Гетастартч) . В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является полиэтиленгликоль. В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером является поликарбоксилированный полиэтиленгликоль.
В одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидная кислота. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является ацилглицерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является моноацилглицерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является диацилглицерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является триацилглицерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является сфингозин. В одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является сфингомиелин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является церамид. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидилэтаноламин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидилсерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидилхолин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидилинозитол. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфатидилглицерин. В еще одном варианте осуществления изобретения липидным или фосфолипидным фрагментом является фосфолипидное производное простого эфира или алкилфосфолипидное производное.
В одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего заболеванием, где лечение заболевания требует контролирования активности фосфолипазы А2; контролирования продукции и/или действия липидных медиаторов, таких как эйкозаноиды, фактор активативации тромбоцитов (РАЕ) и лизофосфолипиды; смягчения повреждения клеточной поверхности гликозаминогликанов (САС) и протеогликанов; контролирования продукции кислородных радикалов и оксида азота; защиты клеток, тканей и липопротеинов плазмы от повреждающих веществ, таких как реактивные разновидности кислорода (К.О8) и фосфолипазы; -антиоксидантной терапии; антиэндотоксиновой тера
- 52 012138 пии; контролирования цитокиновой, хемокиновой и интерлейкиновой продукции; контролирования пролиферации клеток, включая гладкомышечные клетки, эндотелиальные клетки и кожные фибробласты; контролирования ангиогенеза и васкуляризации органов; ингибирования промотирующих инвазию ферментов, таких как коллагеназа, гепариназа, гепараназа и гиалуронидаза; контролирования клеточной инвазии; контролирования лейкоцитарной активации, адгезии и экстравазации; смягчения ишемического/реперфузионного повреждения; ингибирования лимфоцитарной активации; контролирования спазма кровеносных сосудов и дыхательных путей; защиты гемато-энцефалического барьера; контролирования нейротрансмиттерной (допамин) продукции и действия (ацетилхолин); экстракорпоральной тканевой консервации или любых их комбинаций.
В одном варианте осуществления изобретения термин контролирование означает ингибирование продукции и действия выше упомянутых факторов для того, чтобы поддерживать их активность на нормальном основном уровне и подавлять их активацию при патологических состояниях.
В одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемый мономер выбирают из салицилата, салициловой кислоты, аспирина, моносахарида, лактобионовой кислоты, мальтозы, аминокислоты, глицина, карбоновой кислоты, уксусной кислоты, масляной кислоты, дикарбоновой кислоты, глутаровой кислоты, янтарной кислоты, жирной кислоты, додекановой кислоты, дидодекановой кислоты, желчной кислоты, холевой кислоты, холестерилгеммисукцината; или где физиологически приемлемым димером или олигомером является дипептид, дисахарид, трисахарид, олигопептид или ди- или трисахаридная мономерная единица гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитин-6-сульфата, хондроитин-4-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана или гиалуроновой кислоты; или где физиологически приемлемым полимером является гликозаминогликан, полижелин (гемаццель), альгинат, гидроксиэтилкрахмал (гетастартч), полиэтиленгликоль, поликарбоксилат полиэтиленгликоль, хондроитин-6-сульфат, хондроитин-4-сульфат, кератин, кератансульфат, гепарансульфат, дерматин, дерматансульфат, карбоксиметилцеллюлоза, гепарин, декстран или гиалуроновая кислота.
В одном варианте осуществления изобретения липидный фрагмент является любым из фосфатидной кислоты, ацилглицерина, моноацилглицерина, диацилглицерина, триацилглицерина, сфингозина, сфингомиелина, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, церамида, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилсерина, фосфатидилхолина, фосфатидилинозитола или фосфатидилглицерина, или простого эфирного или алкильного производного их, и физиологически приемлемым мономерным или полимерным фрагментом является любое из аспирина, лактобионовой кислоты, мальтозы, глутаровой кислоты, полиэтиленгликоля, корбоксиметилцеллюлозы, гепарина, декстрана, гемацелля, гетастартча или гиалуроновой кислоты.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение предоставляет применение липидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего астмой, аллергическим ринитом, хроническим обструктивным заболеванием легких, обструктивным респираторным заболеванием, колитом, болезнью Крона, инсультом центральной нервной системы, рассеянным склерозом, контактным дерматитом, псориазом, сердечно-сосудистым заболеванием, включая профилактику при инвазивных процедурах, инвазивные клеточные пролиферативные нарушения, антиоксидантную терапию, гемолитические синдромы, сепсис, острый респираторный дистресс синдром, синдромы отторжения тканевых трансплантатов, аутоиммунное заболевание, вирусную инфекцию и гиперчувствительный конъюнктивит.
В еще одном варианте настоящее изобретение предоставляет применение фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению для лечения пациента, страдающего астмой, аллергическим ринитом, хроническим обструктивным заболеванием легких, обструктивным респираторным заболеванием, колитом, болезнью Крона, инсультом центральной нервной системы, рассеянным склерозом, контактным дерматитом, псориазом, сердечно-сосудистым заболеванием, включая профилактику при инвазивных процедурах, инвазивные клеточные пролиферативные расстройства, антиоксидантную терапию, гемолитические синдромы, сепсис, острый респираторный дистресс синдром, синдромы отторжения тканевых трансплантатов, аутоиммунное заболевание, вирусную инфекцию и гиперчувствительный конъюнктивит, где композиция получена для введения местно, перорально, назально, в аэрозоле, внутривенным, внутриглазным, внутриартериальным, подкожным путями или в суппозиториях.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, страдающего кишечным заболеванием, включающий, среди прочего, стадию введения пациенту эффективного количества липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, таким образом, осуществляя лечение пациента, страдающего кишечным заболеванием.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет применение липидного или фосфолипидного фрагмента, связанного с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером, при получении фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего кишечным расстройством.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет способ лечения пациента, стра- 53 012138 дающего заболеванием, связанным с продукцией и/или действием липидных медиаторов, и/или нарушением функций гликозаминогликанов (ОАО).
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего кишечным заболеванием, содержащую, среди прочего, липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В одном варианте осуществления кишечное заболевание может быть, среди прочего, заболеванием, связанным с продукцией и/или действием липидных медиаторов и/или нарушением функций гликозаминогликанов (ОАО).
В одном варианте осуществления изобретения кишечное заболевание может быть, среди прочего, болезнью Крона, язвенным колитом, иммунновоспалительным кишечным повреждением, лекарственной энтеропатией, индуцированным ишемией кишечным повреждением или любой комбинацией их.
В одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым мономером может быть, среди прочего, салицилат, салициловая кислота, аспирин, моносахарид, лактобионовая кислота, глюкуроновая кислота, мальтоза, аминокислота, глицин, карбоновая кислота, уксусная кислота, масляная кислота, дикарбоновая кислота, глутаровая кислота, янтарная кислота, жирная кислота, додекановая кислота, дидодекановая кислота, желчная кислота, холевая кислота, холестерилгеммисукцинат, или где физиологически приемлемым димером или олигомером может быть, среди прочего, дипептид, дисахарид, трисахарид, олигосахарид, олигопептид или ди- или трисахаридная мономерная единица гликозаминогликанов, гиалуроновой кислоты, гепарина, гепарансульфата, кератина, кератансульфата, хондроитина, хондроитинсульфата, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, дерматина, дерматансульфата, декстрана, полижелина, альгината, гидроксиэтилкрахмала, этиленгликоля или карбоксилированного этиленгликоля, или где физиологически приемлемый полимер может быть, среди прочего, гликозаминогликаном, гиалуроновой кислотой, гепарином, гепарансульфатом, хондроитином, хондроитинсульфатом, кератином, кератансульфатом, дерматином, дерматансульфатом, карбоксиметилцеллюлозой, декстраном, полижелином, альгинатом, гидроксиэтилкрахмалом, полиэтиленгликолем или поликарбоксилированным полиэтиленгликолем.
В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером может быть, среди прочего, гиалуроновая кислота.
В еще одном варианте осуществления изобретения физиологически приемлемым полимером может быть, среди прочего, хондроитинсульфат.
В еще одном варианте осуществления изобретения липидный или фосфолипидный фрагмент может быть, среди прочего, фосфатидной кислотой, ацилглицерином, моноацилглицерином, диацилглицерином, триацилглицерином, сфингозином, сфингомиелином, церамидом, фосфатидилэтаноламином, фосфатидилсерином, фосфатидилхолином, фосфатидилинозитолом, фосфатидилглицерином или простым эфирным или алкильным фосфолипидным производным их.
В еще одном варианте осуществления фосфолипидным фрагментом может быть, среди прочего, фосфатидилэтаноламин.
Дозирование и пути введения
Способы этого изобретения могут быть приспособлены к применению терапевтических композиций, содержащих конъюгаты липидов в смесях с общепринятыми эксципиентами, т.е. фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим носителем, подходящим для парентерального, энтерального (т.е. перорального) или местного применения, которые не ухудшают действия активных соединений. Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают, но не ограничены указанным, воду, солевые растворы, спирты, аравийскую камедь, растительное масло, бензиловые спирты, полиэтиленгликоли, желатин, углеводы, такие как лактоза, амилоза или крахмал, стеарат магния, тальк, кремниевую кислоту, вязкий парафин, белый парафин, глицерин, альгинат, гиалуроновую кислоту, коллаген, душистое масло, жирную кислоту, моноглицериды и диглицериды, жирнокислотные сложные эфиры пентаэритрита, гидроксиметицеллюлозу, поливинилпирролидон, и т.д. Фармацевтические препараты могут быть стерилизиваны и, по желанию, смешаны со вспомогательными веществами, т. е. лубрикантами, консервантами, стабилизаторами, увлажняющими веществами, эмульгаторами, солями, влияющими на осмотическое давление, буферами, красителями, отдушками и/или ароматизаторами и т.п., которые не ухудшают действия активных веществ. Они также могут быть объединены по желанию с другими активными веществами, например, с витаминами.
В одном варианте осуществления, изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего сепсисом, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего астмой, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
- 54 012138
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики астмы у пациента, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего аллергическим ринитом, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики аллергического ринита у пациента, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего хроническим обструктивным заболеванием легких, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики хронического обструктивного заболевания легких у пациента, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего обструктивным респираторным заболеванием, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики обструктивного респираторного заболевания у пациента, содержащую липидный или фосфолипидный фрагмент, связанный с физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления изобретение прдставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего астмой, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики астмы у пациента, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего аллергичеким ринитом, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики аллергического ринита у пациента, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего хроническим обструктивным заболеванием легких, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики хронического обструктивного заболевания легких у пациента, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для лечения пациента, страдающего обструктивным ремпираторным заболеванием, содержащую какоелибо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент. В еще одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию для профилактики обструктивного респираторного заболевания у пациента, содержащую какое-либо из соединений, соответствующих изобретению, или какую-либо комбинацию их; и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В еще одном варианте осуществления соединения, соответствующие изобретению, включают, среди прочего, соединения, представленные структурами общих формул: (А), (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII), (VIII), (IX), (Ша), (КЬ), (X), (XI), (XII), (XIII), (XIV), (XV), (XVI), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXI), (XXII) или какой-либо комбинацией их.
Несмотря на то что примеры, представленные здесь, описывают применение РЬ конъюгатов при подкожном, интраперитонеальном или местном введении, успех описанного предоставляет хорошие основания предполагать, что другие пути введения или комбинации с другими фармацевтическими препаратами, могут быть, по крайней мере, успешными. Путь введения (например, местный, парентеральный,
- 55 012138 энтеральный, внутривенный, вагинальный, ингаляционный, интраназальный (спрей), суппозитории или пероральный) и режим дозирования определяются квалифицированными клиницистами, основываясь на факторах, таких как точная природа состояния, которое лечат, тяжесть состояния, возраст и общее физическое состояние пациента и т. д.
В общем, дозы, использующиеся для вышеописанных целей, будут различными, но эффективными для проявления желаемого лечебного эффекта. Как использовано здесь, термин фармацевтически эффективное количество означает количество соединения формул А и I-XXI, которое вызовет желаемое смягчение симптомов или признаков заболевания у пациента. Дозы, использующиеся для каких-либо вышеуказанных целей, в общем будут от 1 до примерно 1000 мг на кг массы тела (мг/кг), вводимые от одного до четырех раз в день или непрерывной IV инфузией. Когда композиции дозированы для местного применения, они, в общем, будут в концентрационном интервале от 0,1 до примерно 10% вес./об., вводимые 1-4 раза в день.
Как использовано выше, термин фармацевтически приемлемый носитель означает какую-либо композицию, которая безопасна и обеспечивает соответствующую доставку желаемым путем введения эффективного количества по крайней мере одного соединения настоящего изобретения. По существу, все вышеописанные композиции настоящего изобретения, таким образом, означены как фармацевтически приемлемые носители. Этот термин означает также применение забуференных композиций, где рН является поддерживаемым на конкретном желаемом уровне, в интервале от рН 4,0 до рН 9,0, в соответствии со стабильностью соединений и путем введения.
Для парентерального применения, в частности, являются пригодными инъецируемые стерильные растворы, предпочтительно масляный или водный растворы, так же как и суспензии, эмульсии или импланты, включая суппозитории. Ампулы являются общепринятыми единичными дозированными формами.
Для применения ингаляционно, в частности для лечения обструкции дыхательных путей или закупорки, растворы или суспензии соединений смешиваются и аэрозолируются или небулизируются в присутствии подходящего пригодного носителя.
Для местного применения, в частности для лечения кожных болезней, таких как контактный дерматит или псориаз, смесь соединений с общепринятыми кремами или пластыри с замедленным высвобождением являются приемлемыми.
Для энтерального введения, в частности, пригодны таблетки, драже, растворы, капли, суппозитории или капсулы. Сироп, эликсир или т.п. могут быть использованы, где применяется подслащенный растворитель. Как выявлено, суппозитории или клизма могут быть рекомендованным путем введения.
Композиции замедленного или направленного высвобождения могут быть составлены, например липосомы или композиции, где активное соединение защищено дифференциально разрушаемым покрытием, например, микроинкапсулированием, множественными оболочками и т. д. Также возможна лиофилизация новых соединений и применение полученных лиофилизатов, например, для получения продуктов для инъекций.
Таким образом, настоящее изобретение предоставляет применение конъюгатов липидов в различных дозированных формах, пригодных для аэрозольного, ректального, вагинального, конъюнктивального, внутривенного, внутриартериального и сублингвального путей введения.
Нужно принимать во внимание, что действительные предпочтительные количества активного соединения в конкретном случае будут изменяться согласно конкретному применяемому соединению, в частности, согласно составленной композиции, способу применения и конкретному месту и организму, который подвергается лечению. Дозирование для назначения пациенту может быть определено с использованием общепринятых соображений, например, посредством обычного сравнения различных активностей соединений и известного агента, т.е. посредством предусмотренного, общепринятого фармакологического протокола.
Без дальнейшего изучения, считается, что специалист в данной области сможет, используя предшествующее описание, применить настоящее изобретение в полной мере. Следующие предпочтительные конкретные варианты осуществления являются, таким образом, истолкованными как просто иллюстративные и не ограничивающие остальное раскрытие никоим образом.
Примеры
Основные сокращения, использованные в примерах, перечислены ниже:
НА = гиалуроновая кислота
НУРЕ = дипальмитоилфосфатидилэтаноламин (РЕ), конъюгированный с НА (также обозначаемый как НуРЕ, Нуа1РЕ)
С8Л = хондроитинсульфат А
С8ЛРЕ = РЕ, конъюгированный с С8Л (также обозначаемый как СкРЕ, СкаРЕ)
СМС = карбоксиметилцеллюлоза
СМРЕ = РЕ, конъюгированный с СМС
НЕРРЕ = РЕ, конъюгированный с гепарином (также обозначаемый как НерРЕ, НеРРЕ)
ЭЕУРЕ = РЕ, конъюгированный с декстраном
- 56 012138
АкРЕ = РЕ, конъюгированный с аспирином
НетРЕ = РЕ, конъюгированный с полижелином (гемаццель)
НуЭМРЕ = димиристоил РЕ, связанный с НА
Примеры демонстрируют полезность конъюгатов липидов при профилактике и лечении заболеваний, как представлено в патентной заявке РСТ/и805/06591, поданной 02.03.2005, заявке И8 серийный номер 10/989606, поданной 17.11.2004, и заявке И8 серийный номер 10/989607, поданной 17.11.2004, которые включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.
Пример 11. Обструктивное респираторное заболевание
Конъюгаты липидов эффективны при лечении обструктивного респираторного заболевания. Это демонстрируется на астме в экспериментах 1-8, описанных ниже. При астме препятствие потоку воздуха является обусловленным обструкцией дыхательных путей, которое является результатом констрикции и обструкции просвета сосудов легких. Одна широкораспространенная экспериментальная система для исследования констрикции дыхательных путей служит для индуцирования сокращения гладкомышечных препаратов, изолированных от дыхательных путей, в отсутствие и в присутствии лекарственного средства. Другим широкораспространенным исследованием антиастматического действия лекарственного средства является использование живых животных, у которых есть астма. Это заболевание представлено у животных, которые были сенсибилизированы антигеном и которые могут наблюдаться при возникновении и купировании астматического дыхания с использованием плетизмографии.
В экспериментах 1.1-1.3 мышечный препарат (трахеальные кольца) был выделен из крыс и в экспериментах 1.4-1.5 из морских свинок. Мышечное сокращение измеряется прикреплением мышцы к датчику напряжения, который работает сходно с пружиной. Индукция сокращения появляется, когда астматогенное вещество, такое как эндотелии-1 (ЕТ), ацетилхолин (АеСН) вводится.
Эксперимент 1.1. Изолированные трахеальные кольца крысы (в линейном порядке) были погружены в буфер Кребса-Ханселета (рН=7,4) и соединены с датчиком напряжения. ЕТ-1 был добавлен в конечной концентрации, как указано, и сокращение кольца трахеи было определено изменением в приложенной силе к датчику напряжения (фиг. 1.1А). Потом самая высокая концентрация ЕТ была использована в исследовании конъюгатов липидов для ингибирования сокращения гладких мышц. В этом эксперименте (фиг. 1.1В), трахеальные кольца крысы были инкубированы с конъюгатом липида НуРЕ при указанной концентрации в течение 1 ч. ЕТ-1 был затем добавлен в конечной концентрации 1 мкМ, и сокращение кольца было определено как в эксперименте 1.1А. Каждые данные представляют среднее ±8.Ό. четырех отдельных экспериментов (4 крысы).
Эксперимент 1.2. Трахеальные кольца крысы были инкубированы с 3 мкМ НУРЕ или только гиалуроновой кислотой (НА) 1 ч. ЕТ-1 затем был добавлен в конечной концентрации 1 мкМ (незакрашенные столбцы) или 10 мкМ (закрашенные столбцы), и сокращение кольца было определено как в эксперименте 1.1 (фиг. 1.2).
Эксперимент 1.3. Сходен с экспериментом 1.2, но сокращение трахеального кольца было индуцировано 10 мкМ Ацетилхолина (АсС’11). как показано на фиг. 1.3.
Эксперимент 1.4. Трахеальные кольца морской свинки (в линейном порядке), погруженные в раствор Рингера, были соединены с прибором, измеряющим длину цепочки колец. СМРЕ или НЕРРЕ были добавлены в ванну за 1 ч до стимуляции сокращения или с помощью Сго1а1и8 а(гох (тип II) фермента или эндотелином-1, как показано (табл. 1.1).
Таблица 1.1. Ингибирование сокращения трахеальных колец с помощью СМРЕ и НЕРРЕ
Стимулятор Липид-конъюгат % ингибирования
Фосфолипаза (0,5 мк/мл) (сгоЕаФиз асгох тип II) СМРЕ (10 мкМ) 100±0,3
Гистамин (20 мкМ) СМРЕ (10 мкМ) 69+0,1
Гистамин (20 мкМ) НЕРРЕ (15 мкМ) 56±0,05
Эндотелин-1 (100 нМ) СМРЕ (10 мкМ) 92±1,1
Эксперимент 1.5. Трахеальные кольца морской свинки были инкубированы с или без СМРЕ в течение 30 мин перед стимуляцией. Среда была собрана через 30 мин и РСЕ2 и ТХВ2 были определены радиоиммунным анализом (табл. 1.2). (п.б.=ниже порога определения.)
- 57 012138
Таблица 1.2. Ингибирование продукции РСЕ2 и ТХВ2 трахеальной ткани с помощью СМРЕ
Стимулятор СМРЕ рсе2 (нг/мл) тхв2 (нг/мл)
Гистамин (40 мкМ) - 5,1 5,6
Гистамин (40 мкМ) 10 мкМ η.ά. 1, 75
Эксперимент 1.6-1.8 демонстрирует способность конъюгатов липидов проявлять свои фармакологические эффекты на живых животных. Следующие процедуры были выполнены в этих экспериментах.
Самцов крыс ШЬгеб Вго\уп №г\уау (возрастом 4 недели), полученных от Наг1ан. США, использовали в этом исследовании. Все протоколы одобрены Комитетом по безопасности животных Университета НеЬгеу.
Индукция астмы
Астма была индуцирована у крыс сенсибилизацией альбумином (ΟνΑ, 81дта-Вейоуо1, Израиль) в соответствии с предварительно описанным протоколом (33): в день О крысы получили одну подкожную инъекцию 1 мг ΟνΑ+гидроксида алюминия (200 мг/мл в 0,9% Ναί'Ί) (81дта-Вейоуо1, Израиль) и интраперитонеальную инъекцию 1 мл, содержащего 6х109 убитых нагреванием бактерий ВоШе1е11а Рег1и8818 (Райеиг Мапеих, Франция). Повторная бронхиальная аллергизация выполнялась с 14 дня через день в течение 1 месяца ингаляциями ΟνΑ (1 мг/мл в 0,9% физиологическом растворе) в течение 5 мин каждый раз в 20 л боксе, соединенном с ультразвуковым распылителем (Ь8 230 8ук1ет νί1Κικιι\Ό 8иг Ьо1, Франция).
Лечение
Крысы были разделены на 4 терапевтические группы:
1. Несенсибилизированные и не получающие лечение, использованные как просто контроль;
2. Сенсибилизация + аллергизация с ΟνΑ и без лечения, использованная как положительный контроль;
3. Сенсибилизация + аллергизация с ΟνΑ и лечение конъюгатами липидов (НуРЕ), либо подкожной инъекцией (8С), либо ингаляцией, после каждой аллергизации (НуРЕ);
4. (в части экпериментов) - Сенсибилизация + аллергизация с ΟνΑ и лечение 8С инъекцией дексаметазона 300 мкг перед каждой аллергизацией (ΟνΑ/Эх). ΟνΑ/ΟνΑ группа получила 1 мл солевого раствора перед каждой аллергизацией.
Были применены два способа лечения НуРЕ: 1. Крысы получили 8С инъекцию 1 мл солевого раствора, содержащего 15 мг НуРЕ (с получением около 1 мг/мл жидкости тела=20 мкМ) 2. Крысы, свободно помещенные в 20 литровый бокс, соединенный с ультразвуковым ингалятором, вдыхали НуРЕ в виде следующего: 5 мл 1 мг/мл НуРЕ было аэрозолировано в 20 л бокс, таким образом разводя НуРЕ до 0,25 мкг/мл аэрозоля. Частота дыханий крысы была 120 дыханий/мин, с дыхательным объемом около 1 мл, таким образом вентиляция достигала 120 мл/мин. Если бы весь ингалированный НуРЕ был поглощен за 5 мин (ингалировано 600 мл), максимальный абсорбированный НуРЕ составлял 120 мкг.
В способе 1 все группы (5 крыс в каждой) лечились и аллергизировались, как описано выше на 14, 16, 18 и 20 день и легочная функция (РемН) была определена на 20 день до и спустя 5 мин после аллергизации (ΕΑΒ).
В способе 2 каждая группа (10 крыс в каждой) лечилась и аллергизировалась с 14 дня, через день, до 45 дня. Легочная функция (РемН) была определена на 20 день до и спустя 5 мин и 8 ч после аллергизации, что соответствует ранней и поздней астматической реакции (ΕΑΒ и ΕΑΒ, соответственно).
Оценка бронхоспазма
Крысы были свободно помещены в камерный плетизмограф (Вихсо Е1ек1гошск Шс., Тгоу, №у Уогк, υδΑ), соединенный с пневмотахометром (ЕМКА ТесЬм^^ек, Туре 0000) одним концом и с 10 мл флаконом другим концом. Пневмотахометр был соединен с предусилителем (модель МАХ2270, Вихсо Е1екйошск). Аналоговые сигналы с усилителя были преобразованы в цифровой сигнал посредством ΑΌ карты (ЬРМ-16, №1юг1а1 ШкОитеШк, ΛυδΙιη, Техак, υδΑ). Оценка бронхоспазма была выражена как увеличенная пауза (Рег111). Реηк=(РΕΕ/РIΕ)*((Те-Т^)/Т^), где РЕЕ=пиковый экспираторный поток, РГЕ=пиковый инспираторный поток, Те=экспираторное время, Тг=время расслабления= время снижения давления до 36% от общего давления в боксе во время выдоха.
Бронхо-альвеолярный лаваж (ВАЬ)
На 45 день крысы были умерщвлены посредством кровотечения через брюшную аорту под анестезией внутрибрюшной инъекцией натрия пентобарбитала (100 мг/кг). Крысы были трахеотомированы и канюлизированы через трахею. Бронхо-альвеолярный лаваж (ΒΑΕ) был собран посредством повторяющихся промываний легких 5 мл физиологического раствора общим объемом 50 мл.
Оценка патологии дыхательных путей
После сбора ΒΑΕ, легкие были удалены и наполнены 4% буферизированным формальдегидом под давлением 20 см-НЮ. Были получены долевые срезы легких и залиты парафином. Гистологические сре
- 58 012138 зы толщиной 3 мкм были вырезаны и окрашены гематоксилином и эозином для оценки интерстициального и перибронхиального воспаления и утолщения гладкомышечной оболочки дыхательных путей. Другие срезы были залиты трихромом для оценки субэпителиального фиброза (базальная мембрана) и РА8 для оценки эпителиальной клеточной метаплазии слизистой.
Гистологическая морфометрия структурных изменений дыхательных путей была выполнена с использованием компьютерной программы 'ТшадеГ' (МН ВеШекба И8Л) в 3 выбранных наугад срезах из каждой мыши. Квантификация перибронхиальных клеточных инфильтратов в ткани дыхательных путей была успешно выполнена посредством подсчета количества этих клеток в 50 мкм области под эпителием дыхательных путей в окрашенных гематоксилином и эозином срезах. Клетки были выражены как число на миллиметр толщины базальной мембраны дыхательных путей, которое было оценено посредством отслежевания базальной мембраны в откалиброванных цифровых изображениях (43). Морфометрический анализ Л8М и масс базальной мембраны для выявления их утолщения был выполнен, как описано ранее (44). Кратко, измерения дыхательных путей были сделаны посредством отслеживания интересующих цифровых изображений. Изображения структур дыхательных путей были в последующем оценены. Все дыхательные пути были оценены следующими морфометрическими параметрами: толщина эпителия базальной мембраны дыхательных путей (ЬЬт) и область Л8М на срезах, окрашенных эозином, гематоксилином и по голубой окраске базальной мембраны срезов, окрашенных трихромом. Л8М клетки или утолщение базальной мембраны были нормализованы в квадраты ЬЬш (в нкм2) для коррекции различий в размерах дыхательных путей. Только большие (>2000 мкм ЬЬш) и средние размеры дыхательных путей (1000-2000 мкм ЬЬш) были отобраны, так как было показано, что наиболее значительные патологические изменения происходят в этих дыхательных путях.
Экспрессия белка 8РЬА2 в легочной ткани: Белки были определены в гомогенизированной легочной ткани (100 мкг белка) с использованием стандартного ХУеЧегп Ь1о1. Специфические поликлональные антитела против анти-8РЬА2 (8ап1а Сгик) разведены 1:500 (об./об.) в ΊΒ8Τ буфере + 0,1% В8Л. Иммунная реакция была определена посредством увеличенной хемолюминесценции (ЕСЬ).
Цистеинил лейкотриен (СухЬТ)
Уровень СукЬТ был оценен в ВЛЬ с использованием набора для прямого ферментного иммунноанализа (НА) согласно инструкциям производителя (Лшегайат Рйагшас1а В1о(ес1г и.К). Специфичность набора составляла 100% для ЬТС4, 100% для ΕΤΌ4, 70% для ЬТЕ4. Результирующий интервал был от 0 до 48 пг.
Клеточная культура - клетки, выделенные из ВЛЬ, были суспендированы в среде ЭМЕМ дополнительной 10% фетальной телячьей сывороткой (ГС8) и добавлены в 96-луночный планшет в количестве 106 клеток/лунка. Клетки были инкубированы в течение 2 ч при 37°С, затем неадгезированные клетки были удалены посредством промывания РВ8. Адгезированные клетки были ресуспендированы в ЭМЕМ, дополненной 10% РС8 в количестве 106 клеток/лунка и инкубированы в течение 48 ч. Культуральная среда была затем собрана и проанализирована для определения биохимических маркеров.
Продукция оксида азота - N0 продукция ВАЬ культурой макрофагов была определена посредством оценки их уровня в культуральной среде, используя фотометрический метод Спекк е) а1. (45).
Продукция ΤΝΓα: Продукция ΤΝΡα ВАЬ культурой макрофагов была определена в культуральной среде, используя наборы для радиоиммунноанализа (К1А) (Атегкйат-Рйагатаа, ИК).
Статистический анализ
Все данные выражены как среднее ± 8ЕМ. Односторонний анализ АN0VА был использован для сравнения терапевтических групп. Парный образ сравнения был выполнен посредством теста ΤикеуКгатег Η8Ό (р=0,05). Где необходимо, данные были логарифмированы до анализа до стабильного отклонения. Во всех анализах Р<0,05 считалась статистически достоверной.
Статистика
Статистический анализ был выполнен с использованием программного обеспечения (СВ-8ΤАΤ, Оупа1шс М|сго5у51ет 811уег 8рппд МЭ, И8А). Анализ отклонения (АN0VА) был использован для анализа различия результатов в терапевтических группах. Тест Τикеу был использован для сравнения между терапевтическими группами. Величина р<0,05 считалась как достоверное различие.
Эксперимент 1.6 демонстрирует, что 8С-введение конъюгантов липидов значительно смягчает ΟVА-индуцированный бронхоспазм (фиг. 1.4, бронхоспазм был вызван у ΟVА-сенсибилизированных крыс посредством ингаляции 0VА и выражался в Репй, оцененном перед и через 5 мин после аллергизации. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. Статистическая достоверность: а - Р<0,01; Ь,с - Р<0,05), уменьшает экспрессию секреции фосфолипазы (фиг. 1.5, рис. изображает ХУеЧегп Ь1о1 и соответствующее измерение плотности &РЬА2 в легочном гомогенизате крыс с ΟVА-индуцированной астмой, обработанных как показано. На панели В, для каждого фермента значения плотности были нормализованы до отвечающего контроля) и предотвращает продукцию бронхоспастических липидных медиаторов цистеинил лейкотриенов (фиг. 1.6, бронхо-альвеолярный лаваж (ВАЬ) был собран у убитых подопытных животных, и уровни СукЕТ были определены посредством Е[А. как описано в способах. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. Стати
- 59 012138 стическая достоверность: а,Ь - Р<0,01. Нет достоверного различия между НуРЕ леченных и нативных крыс).
Эксперимент 1.7 (аэрозольное введение НуРЕ) демонстрирует, что лечение астматических крыс посредством ингаляции конъюгатов липидов защищает крыс от сенсибилизации ΟνΑ, так как лечение значительно уменьшает ΟνΑ-индуцированный бронхоспазм как при ранней и поздней астматической реакции (фиг. 1.7, бронхоспазм, выраженный как процент изменения РспН, был индуцирован у ΟνΑсенсибилизированных крыс посредством ингаляции ΟνΑ и измерен до аллергизации и через 5 мин и 8 ч после аллергизации. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. Два эксперимента были выполнены для ЕЛИ. 5 крыс было включено в каждую группу в первом эксперименте. Такой же эксперимент был повторен с 10 крысами в каждой группе, которые далее были использованы для определения ΕΑΚ. Комбинированный статистический анализ для ΕΑΚ дал р<0,01 между астматическими и НуРЕ-леченными крысами; нет достоверного различия между НуРЕ-леченными и нативными или Όχ-леченными группами. Для ΕΑΚ, р<0,01 между астматическими и НуРЕ-леченными; нет достоверного различия между НуРЕ-леченными и нативными или Όχ-леченными группами), ингибирует продукцию СукЬТ, сильного бронхоспастического липидного медиатора (фиг. 1.8, бронхо-альвеолярный лаваж (ΒΑΌ) был собран у убитых крыс и уровень СукЬТ был определен посредством ЕМ. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. Р<0,01 между астматическими и НуРЕ-леченными крысами; нет достоверного различия между НуРЕ-леченными и нативными группами), и оксида азота (ΝΟ), характерного констриктора гладкомышечных клеток (фиг. 1.9, макрофаги, собранные с ΒΑΌ различных групп, были культивированы без дальнейшей обработки НуРЕ или Όχ, и ΝΟ продукция была определена, как описано в способах. Каждое значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. Уровень ΝΟ снижался при сравнении астматических и нативных крыс, как посредством НуРЕ, р<0,001 и р<0,001, соответственно, так и посредством Όχ р<0,001 и р<0,001, соответственно). Такая терапия также предупреждала астма-ассоциированное воспаление, что проявлялось посредством предупреждения воспалительной клеточной инфильтрации и ремоделирования дыхательных путей (фиг. 1.10, крысы были подвергнуты ингаляции ΟνΑ через день на протяжении 30 дней. Для проведения лечения НуРЕ, крысы ингалировались аэрозолем НуРЕ в течение 5 мин до каждой аллергизации. Крысы были умерщвлены на 45 день. А - окрашивание гематоксилиноэозином для определения воспалительной клеточной инфильтрации и изменения в толщине гладкомышечных клеток (Α8Μ). В - окрашивание соединительной ткани (коллагена) каменным трихромом для определения изменения толщины базальной мембраны. С - окрашивание основанием Шиффа периодной кислоты (ΡΑ8) для определения метаплазии слизистой эпителиальных клеток дыхательных путей. 1, 2, 3 и 4 изображают ткани нативных, астматических, НуРЕ-леченных и Όχ-леченных крыс, соответственно, и фиг. 1.11) и продукцию ΤΝΡ-альфа легочными макрофагами (фиг. 1.12, макрофаги, собранные с ΒΑΌ различных групп были культивированы, как описано в способах. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 10 крыс. р<0,01 между астматическими и НуРЕ-леченными крысами. Нет достоверного различия между НуРЕлеченными, нативными и Όχ-леченными крысами).
Эксперимент 1.8, в котором НуРЕ давали в виде аэрозоля только перед аллергизацией крысам, которые были сенсибилизированы посредством ΟνΑ (НуРЕ не давали во время сенсибилизации как в эксперименте 1.7), демонстрирует, что ингаляция конъюгатов липидов является эффективной в профилактике аллергениндуцированного бронхоспазма у уже страдающих астмой субъектов, когда ингаляции проводятся до аллергизации (ΟνΑ) (фиг. 1.13, ΟνΑ-сенсибилизированные астматические крысы ингалируются диспергированным НуРЕ (1 мг/мл) в течение 5 мин или диспергированным физиологическим раствором. 30 мин спустя они были стимулированы ингаляцией ΟνΑ (1 мг/мл) в течение 5 мин. РспН был оценен перед лечением (контроль) и 5 мин спустя после каждой ингаляции. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 5 крыс. *,**, р<0,05), и обратное развитие бронхоспазма (индуцирование бронходилятации), когда ингаляция проводилась после аллергизации. фиг. 1.14: ΟνΑсенсибилизация астматических крыс вызывалась посредством ингаляции ΟνΑ (1 мг/мл) в течение 5 мин. 30 мин спустя они были лечены посредством ингаляции диспергированным НуРЕ (1 мг/мл) или диспергированным физиологическим раствором в течение 5 мин. РспН был оценен перед (контроль) и после аллергизации и лечения. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ для 5 крыс. *, р<0,05.
Эти эксперименты демонстрируют, что конъюгаты липидов могут быть использованы для лечения обструктивного респираторного заболевания, уменьшения сужения дыхательных путей посредством множества механизмов, включая ингибирование спазма и уменьшение обструктивной инфильтрации дыхательных путей.
Пример 2. Антиоксидантная терапия
Конъюгаты липидов являются эффективными в профилактике окислительного повреждения. Это демонстрируется в экспериментах 2.1-2.3. Вредное действие пероксидных свободных радикалов на живую ткань известно как окислительное повреждение. Когда клеточная мембрана является мишенью для такого повреждающего процесса, результатом являются мембранная дисфункция и нестабильность.
- 60 012138
Окислительное повреждение белков крови, в частности, липопротеинов крови, приводит к их повышенному накоплению в клетках сосудов, таким образом вызывая атерогенез. Фактически, окислительное клеточное повреждение является главным составляющим механизмом процесса созревания или старения.
Окислительное повреждение белков или клеточных мембран в общем исследуется посредством воздействия ткани пероксидом водорода, продуцируемого ферментом глюкозооксидазой (СО) в отсутствие или присутствии дополнительных дестабилизирующих мембрану веществ, таких как РЬА2, или посредством воздействия двухвалентных катионов, таких как медь.
Эксперименты 2.1-2.3 демонстрируют способность конъюгатов липидов предохранять клетки от окислительного повреждения, как считается посредством удерживания клетками арахидоновой кислоты и внутриклеточных веществ низкого молекулярного веса.
Эксперимент 2.1.:
Конфлюентные ВСМ (эпителиальные клетки детеныша зеленой мартышки) были помечены 3Нарахидоновой кислотой. Клетки были обработаны СМРЕ в течение 30 мин перед обработкой СО и РЬА2 (0,5 ед./мл) (фиг. 2.1).
Эксперимент 2.2.
ВСМ клетки были помечены 35ЗО4 в течение ночи. Клетки были промыты ΌΜΕΜ (содержащей 10 мг/мл ВЗА) 4 раза с РВЗ. Клетки были затем инкубированы в ΌΜΕΜ с добавлением СО (продуцента Н2О2) в течение 90, и культуральная среда была собрана и подсчитана 35З радиоактивность. Для обработки СМРЕ клетки были инкубированы с СМРЕ, с указанной концентрацией в течение 30 мин перед введением СО. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ΕΜ для 5 повторов. *р<0,005, **р<0,001 (фиг. 2.2).
Эксперимент 2.3.
Для демонстрирования способности конъюгатов липидов ингибировать окисление липопротеинов крови. ΕΌΌ (0,1 мкМ) был инкубирован в отсутствие и в присутствии различных концентраций ΗΥΓΕ или НА при 37°С. Во время ноль 5 мкМ СиС12 было добавлено к дисперсиям, и смеси непрерывно контролировалась на содержание продуктов окисления при 245 нм (фиг. 2.3). Поглощение при 245 (единицы оптической плотности, ОО) дано как функция от времени (8с1шЦхег с1 а1., Егее КаЛса1 Βίο1 Μβά 24; 12941303, 1998).
Эти эксперименты демонстрируют, что введение конъюгатов липидов является эффективным в профилактике тканевого повреждения, вызванного окислительным стрессом (ассоциированным с продукцией свободных радикалов и перексида водорода) посредством множества механизмов, включая ингибирование окисления липопротеинов, также как их поглощение, ингибирование высвобождения арахидоновой кислоты и сохранение целостности клеточных мембран (ингибирование САС разрушения), включая мембраны эритроцитов.
Пример 3. Легочное повреждение/острый респираторный дистресс-синдром (АКО8)
При остром респираторном дистресс синдроме (АКО8), который обычно вызывается бактериальными эндотоксинами (ЬР8, ЬТА), высокая продукция повреждающих медиаторов, в частности нейтрофил-привлекающих хемокинов и цитокинов, производится эндотелиальными клетками легочных микрососудов ΑΜνΕί.'). Для демонстрации способности конъюгатов липидов контролировать выработку этих повреждающих веществ, ΌΜνΈ^ были подвергнуты воздействию ЬР8 (эндотоксин грам-положительных бактерий) и ЬТА (эндотоксин грам-отрицательных бактерий) в отсутствие и в присутствии конъюгатов липидов, и исследована последующая выработка цитокинов и адгезивных молекул.
В свою очередь, эндотелиальные клетки легочных микрососудов человека (ΕΜνΈ^) были закуплены у С’еПЗуЧетх Кетадеп, Сегтапу, на 4 пассаже. Клетки были равномерно засеяны при плотности 5000 клеток-™2 в колбах Т25 и поддерживались согласно спецификации производителя в ΕСΜ-ΜV. Оценка ^ΜVΕС была выполнена на основании положительного окрашивания для поглощения ацетилированного ЬОЬ, фактора νΐΠ-связанного с антигеном и экспрессии РЕСАМ (ΟΌ31), также как негативного окрашивания для альфа-актина гладких мышц. В каждом эксперименте жизнеспособность ЬР8- и ЬТА-стимулированных или НуРЕ-леченных ^ΜVΕС была исследована посредством окрашивания трипановым синим. Выработка и экспрессия мРНК цитокинов и адгезивных молекул была определена как описано в заявке США, серийный номер 10/989606, поданной 17 ноября 2004, которая включена в данное описание посредством ссылки.
Выработка хемокинов ΕNΑ-78, Сго-α и ГЕ-8, секретируемых в культуральную среду стимулированных ΕΜνΕΟ была оценена посредством БЫЗА в соответствии с инструкциями производителя.
Для выделения РНК и проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР) посредством КТ-РСК, конфлюентные ^ΜVΕС были стимулированы средой в качестве контроля или ЬР8 (1 мкг/мл) или ЬТА (10 мкг/мл) в присутствии или в отсутствие НуРЕ (10 мкМ). Общая РНК была выделена с использованием тризол-реагента в соответствии с инструкциями производителя. Каждый препарат РНК был подвергнут расщеплению ДНКазой для удаления возможных примесей геномной ДНК. 1 мкг общей РНК был подвергнут обратной транскрипции с использованием Зирегеспр! ΤΜ II Ргеатр1Шса(юп ЗуЧет в соответст
- 61 012138 вии с инструкциями производителя. Амплификация 0,5 мкл кДНК была осуществлена в общем объеме 2 5 мкл, содержащем 19,6 пмол каждого праймера хемокинов, 5 мМ άΝΤΡ, 2,5 ед. Тад полимеразы, 10 мМ Тп8 НС1, 7,5 мМ КС1, 1,5 мМ МдС12. ПЦР реакции были инициированы при 94°С в течение 3 мин, с последующими 30 циклами амплификации, каждый состоящий из: 94°С в течение 1 мин, 58°С в течение 1 мин, 72°С в течение 2 мин. В конце циклов амплификации продукты были инкубированы в течение 10 мин при 72°С. Контрольные образцы были созданы либо с исключением кДНК синтеза, либо без добавления кДНК. Продукты ПЦР были разделены на 1% агаре. Реальное время ПЦР: 500 нг общей РНК каждого образца было добавлено для обратной транкрипции в кДНК для анализа ПЦР в реальном масштабе времени с использованием набора 181 8!тапй οΌΝΑ 8уп!йе818 Кй согласно инструкциям производителя (Косйе). кДНК была разведена в 20 мкл ОЕРС-обработанной воды. Цепи ДНК генерировали посредством ПЦР амплификации генных продуктов, очисткой и количественного анализа посредством спектрофотсметрии. Продукты ПЦР, выполняемой в реальном времени, такой как образцы кДНК и цепи ДНК, образуются в общем объеме 25 мкл в присутствии 2 мкл реакционной смеси Бщй1 сус1ег-Еаб!8!аг1 ΌΝΑ Маз!ег 8УБК СгеепБ 0,5 мкМ ген-специфических праймеров и 4 мМ МдС12. Стандартные кривые получали для всех хемокинов. Продуктивность ПЦР анализировали по наклону стандартных кривых, и находится между 90 и 100%. Концентрацию кДНК хемокина подсчитывали посредством линейного регрессионного анализа для всех стандартных кривых и корректировали для единого уровня САРЭН. По меньшей мере пять репродуктивных экспериментов были выполнены.
Адгезивные молекулы К.АМ-1 и р-селектин определяются посредством флюоресцентноактивированных клеточных сортировщиков (ЕАС8); конфлюентные Ρ-ΜνΕΟ стимулировали средой в качестве контроля, или ЬР8 (1 мкг/мл) или ЬТА (10 мкг/мл) в присутствии или отсутствие НуРЕ (10 мкМ). Впоследствии клетки собирали посредством Т/Е, многократно промывали, и моноклональные антитела, направленные против эндотелиальных адгезивных молекул ЮАМ-1 и Р-селектина, добавляли в разведении 1:20 в течение 30 мин при 4°С. Кроме того, нестимулированные или стимулированные клетки собирали, как описано, и преинкубировали в течение 20 мин с НуРЕ (10 мкМ) и моноклональными антителами против ТЬК4. Клетки промывали и инкубировали с антимышиными Р(аЬ')2, МТС конъюгированными вторичными антителами. После промывания клетки исследовали посредством ЕАС8сканирования.
Экспрессию ΝΡκΒ определяли анализом электрофоретического мобильного сдвига (ЕМ8А); конфлюентные ^ΜVΕС преинкубировали в течение ночи в основной среде, содержащей 0,01% В8А. Затем их стимулировали или нет в течение различных временных периодов с помощью ЕР8, ГС-1 или Т№-а в присутствии или в отсутствие НуРЕ и получали соответствующие ядерные экстракты. Олигонуклеотиды, содержащие консенсусную последовательность ΝΡκΒ (5'-АСТ ТСА ССС САС ТТТ ССС АСС С-3'), ДНК метили до специфической активности >5х107 имп/мин/мкг. ΝΡκΒ-связывание осуществляли в 10 мМ НЕРЕ8, (рН=7,5), 0,5 мМ ЕЭТА, 70 мМ КС1, 2 мМ ΌΓΓ, 2% глицерин, 0,025% №-40, 4% Исо11, 0,1 М РМ8Е, 1 мг/мл В8А и 0,1 мкг/мл поли άί/йс в общем объеме 20 мкл. Ядерные экстракты (10 мкг) инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре в присутствии 1 нг меченого олигонуклеотида. ДНК-белковые комплексы разделяли на 5% неденатурированных полиакриламидных гелях электрофорезом в низкоионизированном буфере и визуализировали посредством ауторадиографии. Специфические полосы сдвигов демонстрируются посредством добавления холодных консенсусных последовательностей ΝΡκΒ или С использованием антител против р65 для суперсдвига.
Эксперимент 3.1 демонстрирует, что конъюгаты липидов являются эффективными в подавлении эндотоксин-индуцированной продукции и экспрессии РНК хемокинов ^-8, ΕNΑ-78 и Сго-α и экспрессии их мРНК, как показано на фиг. 3.1, 3.2 и 3.3.
Эксперимент 3.2 демонстрирует, что конъюгаты липидов являются эффективными в подавлении экспрессии адгезивных молекул ЮАМ-1 и Е-селектина (фиг. 3.4).
Эксперимент 3.3 демонстрирует, что конъюгаты липидов являются эффективными в подавлении экспрессии ΝΡκΒ, фактора транскрипции, которая повышается при эндотоксин-индуцированном состоянии повреждения (фиг. 3.5).
Полученные результаты дополнительно демонстрируют терапевтическую пригодность конъюгатов липидов в лечении АКЭ8 и легочного повреждения, также как и других заболеваний, имеющих общие механизмы, таких как перитонит, почечная недостаточность, трансплантация органов и т.п.
Пример 4. Исследование токсичности
Эксперимент 4.
Исследованы следующие соединения: НуРЕ, СМРЕ, С8АРЕ и НерРЕ. Соединения были введены в виде Р инъекций в однократной дозе 1000, 500 или 200 мг/кг массы тела. Токсичность оценивали через неделю посредством определения смертности, массы тела, гематокрита, оценки крови (эритроцитов и лейкоцитов) и визуального исследования внутренних органов после вскрытия. Данные сравнивали с контрольными, не обработанными мышами. Каждая доза применялась для группы из 3 мышей. Никаких значимых изменений в вышеуказанных критериях, индуцированных обработкой этими соединениями, не наблюдалось, кроме НерРЕ, который вызывал кровотечения.
- 62 012138
Нетоксичность липидных конъюгатов демонстрируется в табл. 4.1 и табл. 4.2, представляющих результаты, полученные для НуРЕ в исследованиях острой (4.1) и (4.2) отсроченной токсичности.
Таблица 4.1. Острая токсичность
Доза НуРЕ (мг/кг массы тела) Масса тела (г) КВС х 106 иве X 103 Гематокрит
0,0 (контроль) 21,9±0,2 22,6+0,3 10,7±0,4 9,3±0,3 45,0±0,5
250 22,1±0,4 23,1+0,6 11,4+0,1 7,7+0,2 43,3+0,7
500 21,4+0,3 22,3±0,4 11,5±0,3 8,1±1,3 44,7+2,3
1000 21,7+0,2 22,110,2 10,910,4 7,410,6 40,3±0,7
КВС = эритроциты. АВС = лейкоциты. Каждое представленное значение представляет собой среднее ± 8ЕМ.
Для изучения отсроченной токсичности НуРЕ, группа из б мышей получала дозу 100 мг НуРЕ/кг массы тела, вводимую 1Р инъекцией 3 раза в неделю в течение 30 недель (в общем 180 мг на мышь, весом 20 г). Токсичность оценивали как для табл. 4.1. Отсутствует смертность и нет значимых изменений, индуцированных этой обработкой по сравнению со здоровыми необработанными мышами (см. табл. 4.1), как показано в табл. 4.2.
Таблица 4.2. Результаты через 30 недель
Масса тела (г) КВСхЮ6 ИВСхЮ3 Гематокрит %
Контрольные (необработанные крысы) 39,5±3,1 10,9±0,8 9,3+0,6 45,0±0,8
НуРЕобработанные крысы 39,0+2,7 11,7±0,7 8,1+15 43,4±4,9
Пример 5. Методики синтеза
Методики, приведенные ниже, являются примерами синтеза различных конкретных вариантов конъюгатов липидов и могут быть модифицированы в соответствии с желаемыми составами (например, изменение молярного соотношения между липидом/фосфолипидом и САС или размера САС).
I. НуРЕ = фосфатидилэтаноламин (РЕ)-связанная гиалуроновая кислота.
A. Усеченная гиалуроновая кислота (НА)
Растворяют 20 г НА в 12 л воды, добавляют 200 мг Ее8О4-7Н2О, растворенные в 20 мл воды, добавляют 400 мл Н2О2 (30%), перемешивают в течение 1,5 ч. Фильтруют через 30 кДа ΕίΙΐΓοη. Лиофилизируют. Выход: 16 г усеченной НА.
B. Конъюгация с РЕ (на 1 г)
Получение:
1. 10 г НА растворяют в 500 мл МЕ8 буфера, 0,1 М, рН=6,5.
2. 1,0 г РЕ растворяют в 500 мл трет-ВиОН с 100 мл Н2О.
Смешивают два раствора, добавляют 1 г НОВТ и 10 г ЕЭС. Обрабатывают ультразвуком в ультразвуковой ванне в течение 3 ч. Удаляют избыток свободного РЕ (и ЕЭС и НОВТ) посредством экстракции в органическую фазу (посредством добавления хлороформа и метанола с получением соотношения С/М/Н2О:1/1/1). Отделяют водную фазу посредством разделительной воронки. Повторяют эту стадию дважды. Для окончательной очистки от реагентов, фильтруют через мембрану Είΐίτοη (30 кДа) и лиофилизируют.
Выход: приблизительно 8 г.
II. С8АРЕ = РЕ-связанный хондроитинсульфат А (С8А)
Получение:
1. 10 г С8А растворяют в 1,2 л МЕ8 буфера, 0,1 М, рН=6,5.
2. 1 г РЕ растворяют в 120 мл хлороформ/метанол: 1/1. Добавляют 15 мл детергента (ИИАВ).
Смешивают 1 с 2, при перемешивании добавляют 1 г НОВТ и 10 г ЕЭС. продолжая тщательно перемешивать, по меньшей мере, в течение суток. Удаляют избыток свободного РЕ (и ЕЭС и НОВТ) посредством экстракции в органическую фазу (добавлением хлороформа и метанола с получением соотно
- 63 012138 шения хлороформ/Ме0Н/Е1:0Н/Н20:1/1/0,75/1). Отделяют водную фазу посредством разделительной воронки. Повторяют эту стадию дважды. Фильтруют через мембрану Είΐίτοη (30 кДа) и лиофилизируют. Для удаления следов ΌΌΆΒ, растворяют 1 г сухого продукта в 100 мл воды и 100 мл МеОН и очищают посредством ионного обмена, используя смолу ГК120. Диализируют (для удаления МеОН) и лиофилизируют.
Выход: приблизительно 8 г.
Неожиданные результаты показывают, что обработка ультразвуком, применяемая в синтезе НуРЕ, является лучшей заменой детергенту при смешивании водной и липидной фаз. Использование методов обработки ультразвуком упрощает синтез и улучшает очистку продукта.
Специалистам в данной области ясно, что настоящее изобретение не ограничивается тем, что конкретно показано и описано выше в данном описании, и то, что существуют многочисленные модификации, все из которых попадают в объем настоящего изобретения. В большей степени, объем изобретения определен формулой изобретения, приведенной ниже.

Claims (8)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение, представленное структурой общей формулы (А) ь—Ζ—-Υ-Χ
    - —*п (А) где Ь является липидом или фосфолипидом;
    Ζ либо отсутствует, либо является этаноламином, серином, инозитолом, холином или глицерином; Υ либо отсутствует, либо является спейсерной группой, имеющей длину в интервале 2-30 атомов;
    X является физиологически приемлемым мономером, димером, олигомером или полимером и η является числом от 1 до 1000, для лечения или профилактики аллергического ринита или хронического обструктивного заболевания легких.
  2. 2. Соединение по п.1, где X является полисахаридом.
  3. 3. Соединение по п.2, где указанный полисахарид является карбоксиметилцеллюлозой.
  4. 4. Соединение по п.2, где указанный полисахарид является гликозаминогликаном.
  5. 5. Соединение по п.4, где указанный гликозаминогликан является гиалуроновой кислотой.
  6. 6. Соединение по п.4, где указанный гликозаминогликан является гепарином.
  7. 7. Соединение по п.1, где Ь является фосфатидилэтаноламином.
  8. 8. Соединение по п.7, где указанный фосфатидилэтаноламин является дипальмитоилфосфатидилэтаноламином.
EA200701077A 2004-11-17 2005-11-17 Применение конъюгатов липидов при лечении заболеваний EA012138B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US10/989,607 US7772196B2 (en) 2000-01-10 2004-11-17 Use of lipid conjugates in the treatment of diseases
US10/989,606 US7811999B2 (en) 2000-01-10 2004-11-17 Use of lipid conjugates in the treatment of diseases
PCT/US2005/006591 WO2005084307A2 (en) 2004-03-02 2005-03-02 Use of lipid conjugates in the treatment of disease
PCT/IL2005/001225 WO2006054304A2 (en) 2004-11-17 2005-11-17 Use of lipid conjugates in the treatment of disease

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200701077A1 EA200701077A1 (ru) 2008-04-28
EA012138B1 true EA012138B1 (ru) 2009-08-28

Family

ID=39619055

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200701077A EA012138B1 (ru) 2004-11-17 2005-11-17 Применение конъюгатов липидов при лечении заболеваний

Country Status (10)

Country Link
EP (1) EP1819345A4 (ru)
JP (2) JP2008520650A (ru)
CN (1) CN101175499B (ru)
AU (1) AU2005305456B2 (ru)
BR (1) BRPI0516810A (ru)
CA (1) CA2587883A1 (ru)
EA (1) EA012138B1 (ru)
IL (3) IL183227A0 (ru)
MX (1) MX2007005975A (ru)
WO (1) WO2006054304A2 (ru)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090325876A1 (en) * 2004-09-29 2009-12-31 Saul Yedgar Use of lipid conjugates in the treatment of diseases associated with vasculature
WO2010132402A1 (en) * 2009-05-11 2010-11-18 Morria Biopharmaceuticals, Inc Lipid-polymer conjugates, their preparation and uses thereof
WO2008100912A1 (en) * 2007-02-12 2008-08-21 The General Hospital Corporation Methods for attenuating allergen-induced airway hyperreactivity using cd1d dependent antagonists
CA3153463A1 (en) 2012-10-29 2014-05-08 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for treating mucosal tissue disorders
EP3020417A4 (en) * 2013-07-10 2017-01-18 Seikagaku Corporation Pharmaceutical composition for respiratory administration
CA3029005A1 (en) * 2016-06-27 2018-01-04 Ohio State Innovation Foundation Liponucleotide-based therapy for ards
MX2019005751A (es) 2016-11-17 2019-11-12 Renovion Inc Tratamiento de enfermedades e infecciones de las vias respiratorias con composiciones de acido ascorbico.
MX2020005087A (es) 2017-11-17 2020-08-13 Renovion Inc Composiciones de acido ascorbico estables y metodos de uso de las mismas.
MX2024008001A (es) 2022-01-04 2024-07-12 Renovion Inc Solucion acuosa que comprende una sal de glutation.

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5064817A (en) * 1987-10-23 1991-11-12 Yissum Research Development Company Of Hebrew University Of Jerusalem Phospholipase a2 inhibiting compositions and their use
US5470578A (en) * 1992-07-30 1995-11-28 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Antirheumatic composition
US6022866A (en) * 1991-07-03 2000-02-08 Hyal Pharmaceutical Corporation Use of hyaluronic acid and forms to prevent arterial restenosis
US6071532A (en) * 1996-10-15 2000-06-06 Emory University Synthesis of glycophospholipid and peptide-phospholipid conjugates and uses thereof
US6162787A (en) * 1999-04-02 2000-12-19 Immudyne, Inc. Methods for treating arthritis using collagen type II, glucosamine chondroitin sulfate, and compositions
US6180596B1 (en) * 1995-05-18 2001-01-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Methods of inhibiting phospholipase A2 and phospholipase A2 stimulator activities

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0232013A (ja) * 1988-07-20 1990-02-01 Denki Kagaku Kogyo Kk 点鼻剤
ES2044781B1 (es) * 1992-04-14 1994-10-01 Menarini Lab Procedimiento para la preparacion de nuevas amidas con accion inhibidora de la fosfolipasa a2
KR100381449B1 (ko) * 1994-10-14 2003-07-18 더 리포좀 컴퍼니, 인코퍼레이티드 에테르지질리포좀과이들의제약학적용도
JPH11147901A (ja) * 1997-11-19 1999-06-02 Maruho Co Ltd カリクレイン−キニン系阻害剤
US7101859B2 (en) * 2000-01-10 2006-09-05 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Use of lipid conjugates in the treatment of diseases
US7141552B2 (en) * 2000-01-10 2006-11-28 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Use of lipid conjugates in the treatment of diseases
IL150628A0 (en) * 2000-01-10 2003-02-12 Yissum Res Dev Co Use of lipid conjugates in the treatment of disease

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5064817A (en) * 1987-10-23 1991-11-12 Yissum Research Development Company Of Hebrew University Of Jerusalem Phospholipase a2 inhibiting compositions and their use
US6022866A (en) * 1991-07-03 2000-02-08 Hyal Pharmaceutical Corporation Use of hyaluronic acid and forms to prevent arterial restenosis
US5470578A (en) * 1992-07-30 1995-11-28 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha Antirheumatic composition
US6180596B1 (en) * 1995-05-18 2001-01-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Methods of inhibiting phospholipase A2 and phospholipase A2 stimulator activities
US6071532A (en) * 1996-10-15 2000-06-06 Emory University Synthesis of glycophospholipid and peptide-phospholipid conjugates and uses thereof
US6162787A (en) * 1999-04-02 2000-12-19 Immudyne, Inc. Methods for treating arthritis using collagen type II, glucosamine chondroitin sulfate, and compositions

Also Published As

Publication number Publication date
AU2005305456A1 (en) 2006-05-26
CN101175499B (zh) 2010-12-22
JP2008520650A (ja) 2008-06-19
CN101175499A (zh) 2008-05-07
IL212215A0 (en) 2011-06-30
EA200701077A1 (ru) 2008-04-28
AU2005305456B2 (en) 2011-05-19
WO2006054304A2 (en) 2006-05-26
WO2006054304A3 (en) 2007-01-25
CA2587883A1 (en) 2006-05-26
EP1819345A4 (en) 2012-04-18
MX2007005975A (es) 2007-10-08
IL183227A0 (en) 2007-08-19
IL212214A0 (en) 2011-06-30
BRPI0516810A (pt) 2008-09-23
JP2012001559A (ja) 2012-01-05
EP1819345A2 (en) 2007-08-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4782966B2 (ja) 疾患の治療における脂質コンジュゲートの使用
EA012138B1 (ru) Применение конъюгатов липидов при лечении заболеваний
JP2008509229A (ja) 疾病の治療における脂質複合体の使用
US8076312B2 (en) Use of lipid conjugates in the treatment of disease
CN104546891A (zh) 脂质结合物在囊性纤维化病中的用途及其应用
AU2013202151B2 (en) Lipid conjugates in the treatment of chronic rhinosinusitis
US8906882B2 (en) Lipid conjugates in the treatment of allergic rhinitis
JP2012526819A (ja) 脂質−ポリマー複合体、その調製、及びその使用
AU2011213739B2 (en) Use of lipid conjugates in the treatment of disease
US20140005115A1 (en) Lipid conjugates in the treatment of bronchitis
CN101282733A (zh) 脂质结合物在囊性纤维化病中的用途及其应用
WO2014136116A1 (en) Lipid conjugates in the treatment of bronchitis
IL150628A (en) Use of lipid conjugates for the preparation of medicaments for use in the treatment of disease

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU