JPH02504076A - 微生物の検出計数装置および方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 固形支持体により担持された蛍光性粒子の検出と計数用装置と方法 この発明は、固形支持体により担持された蛍光性粒子、または蛍光性にした粒子 の検出用または計数用装置、及び上記装置による上記粒子の検出のための方法に 関する。

液体またはガス状液体、食品または健康食品中の、蛍光性にしうるまたは自然に 蛍光性である生物粒子類（細菌類、酵母類、カビ類、寄生虫類、花粉）または無 生物の粒子類（無機粒子、例えばアスベスト類）の存在を敏速に定性及び定量分 析すること並びにそれらの実施中の醗酵工程をモニターすることは非常に有用で ある。生物粒子の場合に通常用いられている方法は、Ｍ濾過して上記粒子の濃度 を検出可能にした後、適切な培地中の微生物の発生を目視により検出する方法で ある。すなわち、膜を寒天の中に置く二ついで生存可能な粒子を繁殖させ、それ から生じたコロニーは２〜３０日以内に目視できるようになる。

この方法は、実施するには長時間を要し、複数の工程からなり、正確な計数がで きず、かつ存在する粒子の種及びタイプを同定できない欠点を有する。さらに、 この方法は大気中に著しく存在する無生物粒子（アスベスト類）を検出すること ができない。

上記方法による微生物検出に要する期間を顧慮して、微生物叢の急速な測定法を 提供する目的で種々の方法が開発されてきた。これらの方法は、一般に存在する 微生物叢の発生を反射するパラメーターの測定に基づいている（＄１！ｉの消費 、炭酸ガスの遊離、濁りの増加、培地のインピーダンスの変化、ＡＴＰの遊離な ど・・・・・・）。これらの方法は、標準集団に対する値がｙｌ供されるという 主要な欠点を示す。汚染の場合には、この標準値は全く知られていない。これら の方法は、重要なシグナルを得るために汚染菌の増殖をも必要とする：これは、 結果を得るために長期の遅れが生じ、かつ少数の微生物は検出できない。与えら れた液体または媒質、特に液体または半液体媒質中の生物の粒子を直接的、敏速 、鋭敏、容品に、しかも低費用で検出することが可能な上記生物粒子の検出のた めの方法及び装置を提供するという課題がＥこっている。

同様に大気中に存在する汚染物質を直接、かつ急速に検出できる、無生物粒子ま たは無機粒子の検出のための方法及び装置を提供するという課題が起こっている 。

その結果、この発明の目的は、特に固形支持体により担持された生物粒子の培養 を行なう必要がなく、上記支持体上で直接上記粒子を検出し、計数ができること によって、実施する場合の要件を最もよく満たす、生物粒子、無生物粒子または 無機粒子の検出のための装置を提供することである。

この発明の主題は、液体もしくはガス状液体、または製品特に食品もしくは健康 食品中に汚染物として通常存在するか、または含有しうる粒子類を蛍光分析法に より検出及び計数のための装置であって、光源、上記光源から出た光線を焦点に 集める手段及び存在する粒子類により発せられる蛍光を検出するための少なくと も１つの手段たからなり： 生体染料、ポジティブ　バイアビリティ染料（ｐｏｓｉｔｉｖｅｖｉａｂｉｌｉ ｔｙ　５ｔａｉｎ）、及び抗体及び／または核酸プローブに担持された蛍光物質 からなる群から選択され少なくとも１つの適切な染料により蛍光性にされるかま たは天然に蛍光性である粒子類を収集するための適切な支持体、 分析される支持体の表面全体を上記光線により走査するための手段、及び 検出器と走査システムにより伝達された電気的シグナルを記録し、同時に計数す るための少なくとも１つの手段を備えたマイクロプロセッサ− からなることを特徴とする装置である。

この発明の他の特徴によれば、この装置はまた検出された及び／または計数され た各粒子のサイズの大きさの測定及び位置を提示するように構成されている。

与えられた粒子の位置の情報によって、直接試料採取法またはその場での他の方 法によりその同定が可能になる。

上記装置の有利な具体例によれば、走査手段は、振動軸が光線の軸と直角であっ て、上記光線により１本の線状に急速な走査を行なう第１振動鏡と、上記第１鏡 の振動軸と直角な軸の第２鏡とからなる。

この発明の１つの観点によれば、上記第２鏡は、第１鏡の走査運動と同時に、し かもゆっくりした走査運動をするように駆動され、光線が固形支持体に当って生 成された光スポットの変位のインクレメントは、はぼこの光スポットの直径の大 きさの程度であり、上記第２鏡は分析されるべき支持体の全表面を上記光線によ り連続した線状で走査する。

この発明のこの観点の有利な配置によれば、走査手段は、さらに第２鏡により反 射される光路に置かれた第３の二色柱鏡を備え、この鏡が上記光線を分析さるべ き支持体の方に屈折させる。

このような二色柱鏡は、検出さるべき粒子類から発せられる蛍光光線を通過さ仕 、ついで上記蛍光光線を検出器により収集させる。

この発明の他の有利な観点によれば、この装置は、さらに蛍光光線の検出器の上 流に、上記蛍光光線の光路に置かれ、上記光線を各成分に分ける少なくとも１つ の他の二色柱鏡とからなる。

この発明の他の観点によれば、上記第２鏡は、固定された二色柱鏡であり、分析 される支持体の全表面の光線による走査は、上記支持体を担持し、かつ第１蜆の 走査連動と同時に起こる並進運動を行うよう駆動されるプレートによって行なわ れ、及びその工程はほぼ支持体上に生成した光スポットの直径の大きさである。

この発明の１つの具体例によれば、光源はレーザー光線である。

１つの変法として、走査手段は、２つの聴覚−光学システムからなり、そのシス テムの１つは、分析される支持体上の１本の線上を光線により走査し、第２の聴 覚−光学システムは上記支持体の全表面を走査し、上記第２のシステムは、第１ のシステムと同時に起こる。

この装置の他の有利な具体例によれば、この支持体は連続または不連続の濾過性 支持体、特に表面積が１　ｃｍ’程度、好ましくはＩ　ｃｍ”より大きい濾過膜 である。

上ｇ２濾過性支持体はそれ自身蛍光性ではなく、孔の直径は保持される粒子のタ イプにより、約０．２μ熱から０．２ｉｍまで変化する。

この発明の上記装置の他の有利な具体例によれば、固形支持体は、連続または不 連続の非濾過性支持体である。

標識をつけた粒子によって発せられる蛍光シグナルの検出器は、公知の方法で、 少なくとも１つの光学フィルターと、上記光シグナルを変換し、対応する電気シ グナルを、処理・計数を行い、トレースを図示するマイクロプロセッサ−へ送信 するための少なくとも１つの光電子増倍管または光検知器とからなる。

この発明による装置は、標識をつけた生物粒子または無生物粒子類の単数型並び に複数型の検出及び計数用に用いられる二二のような使用においては、粒子類は 種々の同定用染料で標識され、その結果上記粒子類は初期の同定用染料によるの とは異なる波長の蛍光を再び発する。

この発明の主題は、適切な媒質、特に液体もしくはガス状液体中に、または製品 、特に食品または健康食品中に通常存在している、または汚染物質として含有し うる粒子類の検出及び計数のための方法であって、上記製品または液体を、まず 、第１段階で、自然に蛍光を発するかまたは生体染料、ポジティブバイアビリテ ィ染料及び抗体及び／または核酸プローブに担持された蛍光物質からなる群から 選択される少なくとも１つの適切な染料により蛍光性にした上記粒子類の収集に 適切な支持体と接触させ、及び第２段階で、上記粒子を担持する支持体の表面を 光線で走査することにより上記粒子類の検出及び計数を１の精度で行ない、上記 粒子により発せられる蛍光シグナルを記録することを特徴とする。

「ポジティブ　バイアビリティ染料」という表現は、生物粒子類だけを蛍光性に する性質を有する染料であると理解される。

この発明による製法の有利な具体例によれば、第１段階で分析される粒子は、分 析される試料の濾過により表面積がｌ　ｃｍ”程度、好ましくはＩ　ｃ＋＊’よ り大きい連続または不連続の濾過性支持体、特に濾過膜上に堆積される。

この具体例の有利な方法によれば、まず最初に濾過段階のために試料の可溶化が 行われる。

この発明による方法の他の有利な具体例によれば、第１段階で、分析される粒子 は、連続または不連続の非濾過性固形支持体、特に光学顕微鏡に用いられるそれ らのタイプのスライド上に置かれる。

他の有利な具体例によれば、粒子類は、上記固形支持体上に付着の前に蛍光性に される。

この発明による方法のさらに他の有利な具体例によれば、粒予断は、その場で、 すなわち固形支持体上で蛍光性にされる。

この発明は、上記粒子類の標識法として、ポジティブ　バイアビリティ染料によ る微生物の標識に関しては本願と同時に出願の同一出願人の特許出廟に記載の標 識方法が利用される。

この発明による方法の他の有利な具体例によれば、抗体はポリクローナル及び／ またはモノクローナル、単一特異性または多特異性の、抗酵母抗体及び／または 抗細菌抗体及び／または抗カビ抗体及び／または抗寄生虫抗体及び／または抗ウ イルス抗体及び／または抗動物細胞抗体及び／または抗植物細胞抗体、並びにポ リクロ７ナル及び／またはモノクローナル、単−遺伝子性または多遺伝子性の、 抗酵母抗体及び／または抗細菌抗体及び／または抗カビ抗体及び／または抗寄生 虫抗体及び／または抗ウイルス抗体及び／または抗動物細胞抗体及び／または抗 植物細胞抗体、特に抗花粉抗体からなる群から選択される。

この発明は、粒子類、例えば動物細胞類または植物細胞類または微生物類、こと に酵母類、細菌類、カビ類、寄生虫類及びウィルス類並びに無機粒子類、例えば アスベストの検出に特に有利な方法である。

染料による上記粒子類の標識は、次の利点を有する二種々のタイプの粒子類の検 出と同時計数、及び生物粒子、無生物粒子または無機粒子類の区別ができる。

Ｌ記の具体例以外に、この発明は他の要素を含んでいてもよく、このことはこの 発明の方法の詳細な具体例を参照した説明と、この発明の３つの具体例を例示す る添付図面を参照したこの発明の検出装置の詳細な説明とから明らかになるであ ろう。

第１図は、この発明による標＃＆粒子の検出装置、及びその装置の、２つの振動 鏡からなる走査手段の具体例を図式的に示す。

第２図は、この発明による標識粒子の検出装置、及びその装置の、少なくとも１ つの二色鏡と連結している２つの振動鏡からなる走査手段の他の具体例を図式的 に示す。

第３図は、この発明による標識粒子の検出装置、及びその装置の、１つの振動鏡 、１つの二色鏡及び１つの並進板からなる走査手段の他の具体例を図式的に示す 。

第４図は、粒子が蛍光ラテックスビーズである場合の、第１図に記載の具体例の 装置で得られたトレースを示す。

第５図と第６図は、粒子類が適切なポジティブ　バイアビリティ染料により染色 された酵母の場合の、第２図による具体例の装置で得られたトレースを示す。

第７図は、粒子類が適切な染料により染色された細菌である場合の、第２図の具 体例の装置で得られたトレースを示す。

いずれにしろ、これらの図面及び対応する記載部並びに実施例は、この発明の主 題を例示するためにのみ示すものであって、この発明を限定するものではない。

第１．２図及び３図に示された装置は、液体、ガス状液体または製品中に存在し うる標識粒子の検出及び計数するための装置である。

第１図はこの発明による生物粒子、無生物粒子または無機粒子の検出装置、及び その装置の、２つの振動鏡からなる走査手段を示す。

この装置は、光源ＩＯを備え、その光源から出た光１ｉ１１１が、レンズ１２の 手段により焦点に集められ、さらにこの装置は、走査手段を備え、またこの走査 手段は、第１振動鏡２１を備え、その振動軸２２が、光源の軸と直角であり、上 記第１鏡２１の振動は、実施例として例示されて限定されないが、検流計の形体 であるモーター機素２３により確実に行われ：さらに走査手段は、第２鏡３１を 備え、この第２鏡の回転軸３２が上記第１鏡２１の振動軸と直角であり、モータ ー機素３３によりインクレメントによる角運動を行うように駆動され、この運動 は第１鏡２１の走査運動と同時に起こる。

鏡２１．３１の組合せによって、分析される固形支持体５゜の全表面を光線１１ で線から線へ走査することができる。

示された具体例においては、支持体５０は、濾過膜であり、その孔の大きさの機 能として、流体または製品中に存在する粒子類６０を保持し、予め適切な方法で 処理し、上記支持体５゜の上に濾過する。

濾過繰上で検出され、計数された粒子類６０は、動物細胞類、植物細胞類、特に 花粉、微生物類、特に酵母類、細菌類、カビ類、寄生虫類もしくはウィルス類、 または無機粒子類、例えばアスベストであってもよい。

これらの粒子類は、その場で、諸過股上で生体染料及び／またはバイアビリティ 染料及び／または蛍光性にした適切な抗体及び／または蛍光性にした適切な核酸 プローブの手段により有利に標識され、上記標識によって、異なるタイプの粒子 類を分離と同時に計数することができ、パイアビリティも同様に上記標識により 測定され、上記粒子類は標識に用いられた染料及び／または抗体及び／または核 酸プローブの作用として異なった波長の可視蛍光光線を再び放つことになる。

ついで、粒子により発せられた蛍光シグナルは、蛍光検出器４０（特に光電子増 倍管または光電二極管でありでもよい）により検出され、この検出器は光シグナ ルを電気パルスに変換し、このパルスをマイクロプロセッサ−４５により処理し て所望の計数値が提供される。

光学フィルター３９によって、適切な波長の範囲を選択できる。

さらに、マイクロプロセッサ−４５は、検出８４０及び走査システム２１．３１ に上り伝達された電気シグナルの同時記録手段を備え、その結果、この装置は所 望の計数値だけでなく、支持体上の各粒子の位置をも提供し、例えばその試料の 採取も可能である。

レンズ１２が、７０■の焦点距離を存し、レーザーの光源１０からｌ０ｅ−の所 に置かれ、このレーザーは４８８ｉ＋Ｒの波長を有し、この光線のビームは最初 の直径が６５０μ霧の時、支持体５０上に直径約２０μｍの光スボッ）！３が得 られ、好結果が得られた。

鏡２１の振動の周波数は、検流計デフレクタ−（ｇａｌｖａｎｏｍｅｔｅｒｄｅ ｒｌｅｃＬｏｒ）によって得られ、５ヘルツである。

鏡３１により得られるインクレメントは、実質的に光スボッ）１３の直径の大き さである。

表示された具体例においては、支持体５０は直径４７ｚｚの濾過膜であり、−辺 Ｘが３０ｚｘの四角形部分が探査される。

レンズ！２と第１振動鏡２１との間の距離ｄは、１０■であり：２つの振動鏡間 の距離りは＋０１２であり：第２振動鏡３Ｉと粒子６０を担持するフィルター５ ０との距離しは５０ｚｘである。

光電子増倍管４０は、支持体５０から５０１１の所に位置し；光学フィルター３ ９は支持体５０と光電子増倍管４０との間に配置されている。

ここで第２図を説明すると、第２図この発明による生物粒子、無生物粒子または 無機粒子を検出する検出装置を示し、その走査手段は少なくとも１つの二色柱鏡 と連結する２つの振動鏡からなる。

この装置は、光線を発する光源ｌＯを備え、その光線はレンズ１２の手段により 焦点に集められ、またこの装置は走査手段を備え、この手段は次のものから構成 される。すなわち・第１振動ｍ２１：その振動軸２２は光線の軸と直角であり、 その振動はモーター機素２３により行われる：・第２振動鎖３１、その回転軸３ ２は上記第１＃ａ２１の振動軸に直角であり、モーター機素３３によりインクレ メントによる角運動を行うように駆動され、その運動は、第１鏡２１の走査運動 と同時に起こる； ・第３二色性鏡３５：鏡３１により反射された光線を受取り、それを支持体５０ の上に屈折させる。鏡２＋、３１．３５の組合Ｈによりて、分析される固形支持 体５０の全表面を光線１１に上り線から線へ走査することができる。

流体を処理して、粒子類は、第１図を？照して上記に詳述したように標識される 。

粒子類６０により発せられる蛍光シグナルはついで蛍光検出器４０により検出さ れ、その蛍光検出器は特に光シグナルを電気パルスＩこ変換する光電子増倍管ま たは充電二極管であってもよく、示された具体例では二色柱鏡３６に接続し、こ の鏡が蛍光を波長の異なる成分に分け、最も波長の大きい蛍光は、鏡３７により 反射される。光学フィルター３９は適切な波長の範囲を選択することができる。

検出５４０は、弁別器４１に連結していて、データーのディジタル処理は所望の 計数値を提示するマイクロプロセッサ−４５によって行われる。マイクロプロセ ッサ−４５はさらに、検出器４０及び走査ンステム２１，３１．３５により送信 される電気シグナルの同時記録の手段を備え、その結果この装置は所望の計数値 だけでなく支持体上の各粒子の位置を提示し、例えばその試料の採取を可能にす る。

ここで第３図は、この発明による生物粒子、無生物粒子または無機粒子の検出装 置及び振動鏡及び二色鏡からなる走査手段を示す。

この装置は、第１図に示す装置と同じ光源１０からなり、上記光源は、支持体５ ０と平行な軸に位置し：この具体例では、その走査手段は、第１図に記載の同型 の振動鏡２１と、ある波長の光は全部反射するが、蛍光のような長波長の光は通 過させる固定二色鏡とからなる。

分析される支持体５０の全表面の光線１１による走査は、この具体例において、 上記支持体５０を保持するプレー１−５＋により確実に行われ、そのプレートは 鏡２１の走査運動と同時に起こる並進運動を実施するように駆動され、かつその 工程は実質的には光スポット１３の直径の大きさである。

光線１１の焦点への集めは、半円筒形レンズ３６により行なわれ、その焦点距離 は支持体５０上に走査される線の長さと少なくとも等しい。

上記並進運動は、段付モーター５２により行なわれる。

支持体５０は、具体例においては、濾過膜であるが、限定はない。

第１図に記載のように、分析されるべき製品または液体を処理し、濾過し及び標 識される。

すなわち、光線■１は分析されるべき支持体の中に記入された全表面を走査し、 その表面はプレートにより限定される。

標識された粒子類６０は蛍光を再び放ち、この蛍光は、フィルター３９を通過し た後、光電子増倍管の手段で検出し、」二足光電子増倍管は光シグナルを電気パ ルスに変換する一ついで電気シグナルは記録され、存在する粒子類６０の特性を 表わし、計数するために処理される。

第１図による装置では、記録された第４図で示すトレースが得られた。

第４図は、直径２，１３μ−の蛍光性ラテックスビーズから得られたトレースで あり、ここで横軸は、フィルター上の距離（ＩＮ）に対応し、縦軸は粒子類によ り発せられた光の強度に比例する電位差（ボルト）に対応する。

第５図及び第６図は適切なパイアビリティ染料により染色された生存酵母（サツ カロミセス　セレビシア、５ａｃｃｈａｒｏｓｙｃｅｓｅｅｒｅｖｉｓｉａｅ） の検出を示す。

第２図による装置では、第５図及び第６図で示すトレースが記録された。

純粋な培養物から生じる生存酵母を濾過により膜上に堆積させる。急速な洗浄後 、適切なパイアビリティ染料溶液を４５℃で５分間接触させ、ついで洗液を濾過 により除去する：膜を洗浄後、発明により検出器に取付ける。

第５図及び第４図において、細菌類が検出される；第６図では酵母類は、より高 濃度である。

第７図は、適切なパイアビリティ染料により染色された生存酵母（ラクトバシル ス　プレビス、Ｌａｃｔｏｂａｅｉｌｌｕｓ　ｂｒｅｖｉｓ）の検出を示す。

上記から明らかなように、この発明は明白な方法で記載されているこれらの使用 形式及び実施例、具体例のこれらの形式に決して限定されない；一方、この発明 の範囲または限度からずれることなく、当業者が考えるすべての変法をカバーす る。

第１図 匡際調査報告 □１１□−０三〉こ＝＝・玉−：ε９シこ・：北国際調査報告 ＦＲＦＡ９０００９５

Claims (18)

【特許請求の範囲】
1. １．液体、ガス状液体または製品中に、特に食品もしくは健康食品中に通常存在 するまたは汚染物質として含有しうる粒子類の検出及び計数用装置であって、光 源１０と、上記光源から出た光線を焦点に集める手段１２と、存在する粒子類６ ０により発せられる蛍光の検出手段４０の少なくとも１つとからなり：天然に蛍 光性であるか、または生体染料、ポジティブバイアビリティ染料及び抗体及び／ または核酸プローブにより担持された蛍光物質からなる群から選択される少なく とも１つの適切な染料により蛍光性にした粒子類を収集するのに適切な支持体５ ０、 分折されるべき支持体の全表面を上記光源により走査するための手段２１，３１ ，３５、 及び走査システム２１，３１，３５と検出器４０により変換された電気シグナル の記録と同時計数のための少なくとも１つの手段を備える処置をするマイクロプ ロセッサー４５からなることを特徴とする。
2. ２．検出され及び／または計数される各位子の大きさを測定し及びその位置を提 示するよう構成されていることを特徴とする請求項１による装置。
3. ３．走査手段が、その振動軸２２が光線１１と直角であり、上記光線による１本 の線状の急速な走査を行う第１振動鏡２１と、その振動軸３２が上記第１鏡の振 動軸と直角である第２振動鏡３１とからなることを特徴とする請求項１または２ による装置。
4. ４．上記第２鏡３１が、第１鏡の走査連動と同時に起こるゆっくりした走査運動 を実施するよう駆動され、光線１１が固形支持体５０に当って生成した固形支持 体上の光スポット１３の変位のインクレメントは、ほぼこの光スポットの直径の 大きさであり、上記第２鏡が、分析されるべき支持体の全表面の上記光線による 連続した線状の走査を行なうことを特徴とする請求項１〜３のいずれか１つによ る装置。
5. ５．走査手段がさらに、第２鏡３１により反射された光線の光路に置かれ、分折 されるべき支持体５０の方へ上記光線を屈折させる第３の二色鏡３５からなるこ とを特徴とする請求頂１〜４のいずれか１つによる装置。
6. ６．さらに蛍光の検出器４０の上流に、上記螢光光線の光路に位置し、上記光を その成分に分ける別の二色鏡３６の少なくとも１つを備えられていることを特徴 とする請求項１〜５のいずれか１つによる装置。
7. ７．上記第２鏡３５が固定された二色鏡であり、分折されるべき支持体５０の全 表面の光線１１による走査は、上記支持体を担持する並準プレート５１により行 われ、そのプレートは第１鏡２１の走査運動と同時に起こる並進連動を行うよう 駆動され、及びその工程はほぼ光スポット１３の直径の大きさであることを特徴 とする請求項１〜３のいずれか１つによる装置。
8. ８．光線１０がレーザー光線であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１ つによる装置。
9. ９．走査手段が２つの聴覚−光学システムからなり、そのシステムの１つは、分 所される支持体の１木の線を光線により走査し、第２の聴覚−光学システムは上 記支持体の全表面を走査し、上記第２システムが第１システムと同時に起こるこ とを特徴とする請求項１まは２によ装置。
10. １０．支持体５０が連続または不連続の濾適性支持体、特に表面積が１ｃｍ２程 度、好ましくは１ｃｍ２より大きい濾過腹であることを特徴とする請求項１〜９ のいずれか１つによる装置。
11. １１．固形支持体５０が連続または不連続の非濾過性支持体であることを特徴と する請求項１〜９のいずれか１つによる装置。
12. １２．いずれか適切な媒質、特に液体もしくはガス状液体または製品、特に食品 もしくは健康食品中に通常存在するまたは汚染物質として含有しうる粒子類の検 出及び計数のための方法であって、製品または液体が、まず第１工程で天然に蛍 光性であるかまたは生体染料、ポジティブバイアビリティ染料及び抗体及び／ま たは核酸プローブにより担持された蛍光物質からなる群から選択される少なくと も１つの適切な染料により蛍光性にした粒子類の収集のために適切な支持体と接 触させ、及び第２工程で、上記粒子類を担持する支持体の表面を光線により走査 し、上記粒子類により発せられる蛍光シグナルを記録することにより、上記粒子 類の検出及び計数を、前記粒子の特許請求の１の精度で行うことを特徴とする。
13. １３．分折される粒子類が第１工程で分折される試料の濾過により表面積が１ｃ ｍ２より大きい連続または不連続濾過支持体、特に濾過膜上に置かれることを特 徴とする請求項１２による方法。
14. １４．まず第１に試料の可溶化が濾過工程のために行われることを特徴とする請 求項１２または１３による方法。
15. １５．分折される粒子類が第１工程で連続または不連続非濾過性固形支持体、特 に光学顕微鏡に用いられるタイプのスライド上に置かれることを特徴とする請求 項１２による方法。
16. １６．粒子類が上記固形支持体に置かれる前に蛍光性にされることとを特徴とす る請求項１２〜１５のいずれか１つによる方法。
17. １７．粒子類が、その場で、すなわち固形支持体上で蛍光性にされることを特徴 とする請求項１２〜１５のいずれか１つによる方法。
18. １８．抗体がポリクローナル及び／またはモノクローナル、単一特異性または多 特異性の抗酵母抗体及び／または抗細菌抗体及び／または抗カビ抗体及び／また は抗寄生虫抗体及び／または抗ウイルス抗体及び／または抗動物細胞抗体及び／ または抗植物細胞抗体並びにポリクローナル及び／またはモノクローナル、単一 遺伝子性または多遺伝子性の、沈酵抗体母及び／または抗細菌抗体及び／または 抗カビ抗体及び／または抗寄生虫抗体及び／または抗ウイルス抗体及び／または 抗動物細胞抗体及び／または抗植物細胞抗体、特に抗花粉抗体からなる群から選 択されることを特徴とする請求項１２〜１７のいずれか１つによる方法。