JPH01317391A - D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 - Google Patents
D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法Info
- Publication number
- JPH01317391A JPH01317391A JP4020389A JP4020389A JPH01317391A JP H01317391 A JPH01317391 A JP H01317391A JP 4020389 A JP4020389 A JP 4020389A JP 4020389 A JP4020389 A JP 4020389A JP H01317391 A JPH01317391 A JP H01317391A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glycine
- reaction
- acid
- aldehyde
- beta
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 14
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 66
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 39
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 7
- -1 glycine metal complex Chemical class 0.000 claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 20
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 claims description 5
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 abstract description 5
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 abstract description 5
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 abstract description 5
- 108010049097 threonine acetaldehyde-lyase Proteins 0.000 abstract description 5
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 abstract description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 2
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 48
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 29
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 23
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- HJPJOAYWRKTHED-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;nickel Chemical compound [Ni].NCC(O)=O HJPJOAYWRKTHED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 9
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 8
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- VVGAMIXUXUNBTP-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;cobalt Chemical class [Co].NCC(O)=O VVGAMIXUXUNBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 5
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N D-threonine Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-STHAYSLISA-N 0.000 description 4
- 229930182822 D-threonine Natural products 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 4
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 4
- DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N phenylacetaldehyde Chemical compound O=CCC1=CC=CC=C1 DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 3
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-HRFVKAFMSA-N L-allothreonine Chemical compound C[C@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-HRFVKAFMSA-N 0.000 description 2
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589634 Xanthomonas Species 0.000 description 2
- 241000589652 Xanthomonas oryzae Species 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N hexanal Chemical compound CCCCCC=O JARKCYVAAOWBJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 description 2
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940100595 phenylacetaldehyde Drugs 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- VHVGNTVUSQUXPS-HTQZYQBOSA-N (2r,3r)-2-amino-3-hydroxy-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 VHVGNTVUSQUXPS-HTQZYQBOSA-N 0.000 description 1
- CXIYBDIJKQJUMN-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-anilino-3-hydroxypropanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC1=CC=CC=C1 CXIYBDIJKQJUMN-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- YIWGJFPJRAEKMK-UHFFFAOYSA-N 1-(2H-benzotriazol-5-yl)-3-methyl-8-[2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carbonyl]-1,3,8-triazaspiro[4.5]decane-2,4-dione Chemical compound CN1C(=O)N(c2ccc3n[nH]nc3c2)C2(CCN(CC2)C(=O)c2cnc(NCc3cccc(OC(F)(F)F)c3)nc2)C1=O YIWGJFPJRAEKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- ZQEXIXXJFSQPNA-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-5-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=CNC=N1 ZQEXIXXJFSQPNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PBOBLKQSJBKASY-UHFFFAOYSA-N 2-(cyclohexen-1-yl)acetaldehyde Chemical compound O=CCC1=CCCCC1 PBOBLKQSJBKASY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDVRPKUWYQVVDX-UHFFFAOYSA-N 2-(trifluoromethyl)benzaldehyde Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC=C1C=O ZDVRPKUWYQVVDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSKPIOLLBIHNAC-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-acetaldehyde Chemical compound ClCC=O QSKPIOLLBIHNAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJMDTERTPNYIGZ-UHFFFAOYSA-N 2-cyclohexylacetaldehyde Chemical compound O=CCC1CCCCC1 JJMDTERTPNYIGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAHZBRPNDIVNNR-UHFFFAOYSA-N 2-ethoxyacetaldehyde Chemical compound CCOCC=O IAHZBRPNDIVNNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMWCSNCNHSEXIF-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-1h-imidazole-4-carbaldehyde Chemical compound CC=1N=CNC=1C=O KMWCSNCNHSEXIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001136782 Alca Species 0.000 description 1
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 229910021503 Cobalt(II) hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-PWNYCUMCSA-N D-Allothreonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-PWNYCUMCSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 description 1
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 description 1
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000609816 Pantholops hodgsonii Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZDHJZADYBVFCP-HOTGVXAUSA-N [(2s)-2-amino-3-phenylpropanoyl] (2s)-2-amino-3-phenylpropanoate Chemical compound C([C@H](N)C(=O)OC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 ZZDHJZADYBVFCP-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003934 aromatic aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052793 cadmium Inorganic materials 0.000 description 1
- BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N cadmium atom Chemical compound [Cd] BDOSMKKIYDKNTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910021446 cobalt carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004700 cobalt complex Chemical class 0.000 description 1
- ZOTKGJBKKKVBJZ-UHFFFAOYSA-L cobalt(2+);carbonate Chemical compound [Co+2].[O-]C([O-])=O ZOTKGJBKKKVBJZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ASKVAEGIVYSGNY-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Co+2] ASKVAEGIVYSGNY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 238000007324 demetalation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- CNUDBTRUORMMPA-UHFFFAOYSA-N formylthiophene Chemical compound O=CC1=CC=CS1 CNUDBTRUORMMPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 231100000067 mild irritant Toxicity 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910000008 nickel(II) carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- ZULUUIKRFGGGTL-UHFFFAOYSA-L nickel(ii) carbonate Chemical compound [Ni+2].[O-]C([O-])=O ZULUUIKRFGGGTL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BFDHFSHZJLFAMC-UHFFFAOYSA-L nickel(ii) hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ni+2] BFDHFSHZJLFAMC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N pentanal Chemical compound CCCCC=O HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 230000036647 reaction Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003579 shift reagent Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 150000003588 threonines Chemical class 0.000 description 1
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、D−β−ヒドロキシアミノ酸を取得する方法
に関する。D−β−ヒドロキシアミノ酸は抗生物質、酵
素阻害剤等の各種の医薬、農薬類、その他各種の生理活
性物質の合成原料として有用である。
に関する。D−β−ヒドロキシアミノ酸は抗生物質、酵
素阻害剤等の各種の医薬、農薬類、その他各種の生理活
性物質の合成原料として有用である。
〔従来の技術及び発明が解決しょうとする課題〕D−β
−ヒトaキシアミノ酸は有機合成法やL〜ルアミノのラ
セミ化で作ったDL−アミノ酸を光学分割して製造され
ている。その場合、D−アミノ酸は長い工程を、経て製
造される為に、その手間が大変であり、また収率も低く
なっていた。
−ヒトaキシアミノ酸は有機合成法やL〜ルアミノのラ
セミ化で作ったDL−アミノ酸を光学分割して製造され
ている。その場合、D−アミノ酸は長い工程を、経て製
造される為に、その手間が大変であり、また収率も低く
なっていた。
安価で大量に生産されているグリシンとアルデヒド化合
物とk、”−スレオニンアルドラーゼCD−スレオニン
をグリシンとアセトアルデヒドに分解する酵素で、逆反
応を触媒する活性も有する)の存在下で反応させること
により、対応するD−β−ヒドロキシアミノ酸を製造す
る方法が知られている(特開昭58−116690号公
@)。
物とk、”−スレオニンアルドラーゼCD−スレオニン
をグリシンとアセトアルデヒドに分解する酵素で、逆反
応を触媒する活性も有する)の存在下で反応させること
により、対応するD−β−ヒドロキシアミノ酸を製造す
る方法が知られている(特開昭58−116690号公
@)。
しかし、この方法ではアルデヒド化合物がグリシンやD
−β−ヒドロキシアミノ酸(以後、これらをアミノ酸と
略記する)と非酵素的に副尺12を起こすので反応収率
が低く、また、未反応のグリシンが装置に残存する等の
課題かあった。
−β−ヒドロキシアミノ酸(以後、これらをアミノ酸と
略記する)と非酵素的に副尺12を起こすので反応収率
が低く、また、未反応のグリシンが装置に残存する等の
課題かあった。
本発明の第1の発明は、グリシン金属錯体とアルデヒド
化合物とを、D−スレオニンアルドラーゼの存在下、反
応させて、D−β−ヒドロキシアミノ酸金属錯体に変換
して後、D−β−ヒドロキシアミノ酸を取得する方法で
ちる。
化合物とを、D−スレオニンアルドラーゼの存在下、反
応させて、D−β−ヒドロキシアミノ酸金属錯体に変換
して後、D−β−ヒドロキシアミノ酸を取得する方法で
ちる。
第2の発明は、ニッケル及び/又はコバルトラグリシン
金属錯体の金属として用いるものである。
金属錯体の金属として用いるものである。
D−β−ヒドロキシアミノ酸金属錯体からは、公知の方
法にエリ脱金属して容易にD−β−ヒドロキシアミノ酸
を取得出来る。
法にエリ脱金属して容易にD−β−ヒドロキシアミノ酸
を取得出来る。
グリシン金属錯体を基質として用いる本発明の方法に工
れば次の利点がある第一に、ニッケル及び/又ホコバル
トが上記アミノ酸と安定な錯体を形成するので、上記ア
ミノ酸とアルデヒド化合物との副反応が抑制され、高収
率でD−β−ヒドロキシアミノ酸を得ることができる。
れば次の利点がある第一に、ニッケル及び/又ホコバル
トが上記アミノ酸と安定な錯体を形成するので、上記ア
ミノ酸とアルデヒド化合物との副反応が抑制され、高収
率でD−β−ヒドロキシアミノ酸を得ることができる。
第二に上記グリシン金属錯体を基質に用いて反応すると
遊離のグリシンを用いた場合に比べて高い基質転化率を
得ることが出来る。
遊離のグリシンを用いた場合に比べて高い基質転化率を
得ることが出来る。
第三に、高濃度のグリシンニッケル錯体やグリシンコバ
ルト錯体が、菌体内に含まれる望ましくない反応の触媒
として作用する酵素、例えば、L−アロスレオニンアル
−ラーゼ(L−アロスレオニンをグリシンとアセトアル
デヒドに分解する酵素で、逆反応を触・渫する活性も有
する)や、L−スレオニンアルトラ−f(L−スレオニ
ンをグリシンとアセトアルデヒドに分解する酵素で、逆
反応の触媒として作用する活性も有する)を強力に阻害
・不活性化するので、[有体や粗研製の酵素を用いるこ
とが出来る。
ルト錯体が、菌体内に含まれる望ましくない反応の触媒
として作用する酵素、例えば、L−アロスレオニンアル
−ラーゼ(L−アロスレオニンをグリシンとアセトアル
デヒドに分解する酵素で、逆反応を触・渫する活性も有
する)や、L−スレオニンアルトラ−f(L−スレオニ
ンをグリシンとアセトアルデヒドに分解する酵素で、逆
反応の触媒として作用する活性も有する)を強力に阻害
・不活性化するので、[有体や粗研製の酵素を用いるこ
とが出来る。
不ポ明のごとく、高濃度の金(′4錯体を基質とする酵
素反応は知られておらず、従って、本発明の方法は新規
な酵素反応方法である。
素反応は知られておらず、従って、本発明の方法は新規
な酵素反応方法である。
本発明で用いるグリシン金属錯体としては、グリシンニ
ッケル錯体又はグリシンコバルト錯体がD−スレオニン
アルドラーゼとの反応性やり一β−ヒドロキ7アミノ酸
の収率の点で好掘である。
ッケル錯体又はグリシンコバルト錯体がD−スレオニン
アルドラーゼとの反応性やり一β−ヒドロキ7アミノ酸
の収率の点で好掘である。
他の余病錯体としてぼカドミウム、鉄、マンガン、マグ
ネシウム等の金属錯体を使用でさる。更にこれらの錯体
を任意に併用できるが、この中でニッケル錯体とコバル
ト錯体の併用がよい。本発明に好適に用いるグリシンニ
ッケル錯体、又はグリシンコバルト錯体の一般式は [:M(NH2CH2CO2)rn]・nH20(&中
、M[今頃であり、Mがニラ。ケルの場合m=2、n=
[]〜2、Mがコバルトの場合m=3、n=Q〜2であ
る) で示さnる化合物である。また、二9f4頌以上の金属
Th會むクリシン金属錯体、例えばニッケルとコ本発明
で用いるグリシン金属錯体は、例えば、金属埋水溶液に
グリシンとアルカリを加えて加熱するなどの通常の方法
で合成することが出来る。
ネシウム等の金属錯体を使用でさる。更にこれらの錯体
を任意に併用できるが、この中でニッケル錯体とコバル
ト錯体の併用がよい。本発明に好適に用いるグリシンニ
ッケル錯体、又はグリシンコバルト錯体の一般式は [:M(NH2CH2CO2)rn]・nH20(&中
、M[今頃であり、Mがニラ。ケルの場合m=2、n=
[]〜2、Mがコバルトの場合m=3、n=Q〜2であ
る) で示さnる化合物である。また、二9f4頌以上の金属
Th會むクリシン金属錯体、例えばニッケルとコ本発明
で用いるグリシン金属錯体は、例えば、金属埋水溶液に
グリシンとアルカリを加えて加熱するなどの通常の方法
で合成することが出来る。
本条明に用いるアルデヒド化合、吻は、脂肪族アルデヒ
ド、脂環式アルデヒド、芳香族アルデヒv1複累環式ア
ルデヒド化合物停であり、例えば、脂肪族アルデヒド化
合物として、アセトアルデヒド、1−グロパナール、1
−ブタナール、2−メチル7”aパナール、1−ペンタ
ナール、1−ヘキサナール、1−ヘキサナール、クロロ
アセトアルデヒド、フェニルアセトアルデヒド、ニドa
アセトアルデヒー、β−クロロアセトアルデヒド、エト
キシアセトアルデヒド等、 qhi式アルデヒド化合物として、シクa−りンチルア
ルデヒ「、ンクO/(ンテニルアルデヒド、シクロへキ
ンルアルデヒゾ、シクロへキセニルアルデヒに、シクロ
へキシルアセトアルデヒー、シクロヘキセニルアセトア
ルデヒV等、 芳香族アルデヒド化合物として、ペンでアルデヒド、7
0口ベンズアルデヒド、クロロペンでアルデヒド、ブロ
モペンでアルデヒド、ニドaベンズアルデヒド、りaa
ニドaペンでアルデヒド、ヒトミキシニトロベンゾアル
デヒド、メトキシペンでアルデヒド、2aロメトキシベ
ンでアルデヒド、トルアルデヒド、トリフロロトルアル
デヒド、フェニルアセトアルデヒド等、 複素環式アルデヒド化合物として、2−チオフェンアル
デヒド、ブaモー2−チオフェンアルデヒド、4−フォ
ルミルイミダゾール、4−メチル−5−フォルミルイミ
ダゾール等を用いることが出来る。
ド、脂環式アルデヒド、芳香族アルデヒv1複累環式ア
ルデヒド化合物停であり、例えば、脂肪族アルデヒド化
合物として、アセトアルデヒド、1−グロパナール、1
−ブタナール、2−メチル7”aパナール、1−ペンタ
ナール、1−ヘキサナール、1−ヘキサナール、クロロ
アセトアルデヒド、フェニルアセトアルデヒド、ニドa
アセトアルデヒー、β−クロロアセトアルデヒド、エト
キシアセトアルデヒド等、 qhi式アルデヒド化合物として、シクa−りンチルア
ルデヒ「、ンクO/(ンテニルアルデヒド、シクロへキ
ンルアルデヒゾ、シクロへキセニルアルデヒに、シクロ
へキシルアセトアルデヒー、シクロヘキセニルアセトア
ルデヒV等、 芳香族アルデヒド化合物として、ペンでアルデヒド、7
0口ベンズアルデヒド、クロロペンでアルデヒド、ブロ
モペンでアルデヒド、ニドaベンズアルデヒド、りaa
ニドaペンでアルデヒド、ヒトミキシニトロベンゾアル
デヒド、メトキシペンでアルデヒド、2aロメトキシベ
ンでアルデヒド、トルアルデヒド、トリフロロトルアル
デヒド、フェニルアセトアルデヒド等、 複素環式アルデヒド化合物として、2−チオフェンアル
デヒド、ブaモー2−チオフェンアルデヒド、4−フォ
ルミルイミダゾール、4−メチル−5−フォルミルイミ
ダゾール等を用いることが出来る。
本発明で用いるD−スレオニンアルrラーセハD−スレ
万ニンに作用してグリシンとアセトアルデヒドとに分解
する酵素であり、例、えば、アルカリr不スHハエ力リ
ス(Alcaligenes faecalis)(工
F○12669)シュードモナス(Pseuclomo
nas)DK−2(微工研閑寄620口号)、アリスロ
バクター(Arthrobacter ) D K −
19(微工研閑寄6201号)、及びキサントモナス・
オリデエ(Xanthomonas oryzae )
(IAM 1657 )等がこのD−スレオニンアル
ドラーゼを生産する能力を有する。
万ニンに作用してグリシンとアセトアルデヒドとに分解
する酵素であり、例、えば、アルカリr不スHハエ力リ
ス(Alcaligenes faecalis)(工
F○12669)シュードモナス(Pseuclomo
nas)DK−2(微工研閑寄620口号)、アリスロ
バクター(Arthrobacter ) D K −
19(微工研閑寄6201号)、及びキサントモナス・
オリデエ(Xanthomonas oryzae )
(IAM 1657 )等がこのD−スレオニンアル
ドラーゼを生産する能力を有する。
上記微生物は常法に従って培養することが出来る。培養
に用いられる培地j・ゴ、微生物の生育に必彎な炭素源
、窒素源、無機物A等を含む通常の培地である。史に、
ビタミン、アミノ酸などの有機做電栄養素を添加すると
望ましい結果が得られる場合が多い。
に用いられる培地j・ゴ、微生物の生育に必彎な炭素源
、窒素源、無機物A等を含む通常の培地である。史に、
ビタミン、アミノ酸などの有機做電栄養素を添加すると
望ましい結果が得られる場合が多い。
培養は好気的条件下でpH4〜10、@度20〜60゛
Cの適当な範囲に制御しつ1〜10日間培養を行う。
Cの適当な範囲に制御しつ1〜10日間培養を行う。
反応にあ九つでは、微生物の培養液、培養液から分離し
た培養菌体、乾燥菌体、菌体破砕液等のほか、硫酸アン
モニウムや有機溶媒等で分割した粗精製酵素、車!#さ
れた酵素、史には、菌体、菌体処理物、ちるいに酵素自
体の固定化物、その他側れも使用出来る。
た培養菌体、乾燥菌体、菌体破砕液等のほか、硫酸アン
モニウムや有機溶媒等で分割した粗精製酵素、車!#さ
れた酵素、史には、菌体、菌体処理物、ちるいに酵素自
体の固定化物、その他側れも使用出来る。
グリシン金属錯体とアルデヒド化合物を対応するD−β
−ヒドロキシアミノ酸金属錯体に変換する方法は、水性
媒体中にて上記グリシン金属錯体とアルデヒド化合物を
、上記微生物の培#液、菌体、菌体α埋物、酵素、ある
いは、これらを通漱の方法で固定化したものと接触させ
れば工い。かかる反応時の水性媒体としては、例えば、
水、緩衝液、及び含水有機溶媒等が団用できる。
−ヒドロキシアミノ酸金属錯体に変換する方法は、水性
媒体中にて上記グリシン金属錯体とアルデヒド化合物を
、上記微生物の培#液、菌体、菌体α埋物、酵素、ある
いは、これらを通漱の方法で固定化したものと接触させ
れば工い。かかる反応時の水性媒体としては、例えば、
水、緩衝液、及び含水有機溶媒等が団用できる。
反る敵のアルデヒド化合物の@度は酵素を著しく阻害・
失活させない程度であればよいが、0.05〜2.0モ
ル/lが好ましい。
失活させない程度であればよいが、0.05〜2.0モ
ル/lが好ましい。
上記グリシン余積錯体は、アルデヒド化合物と等モル程
度で工いが、グリシンの反応収率を高めるためにぼ、ア
ルデヒド化合物エリ中なくするのが工い。かかるグリシ
ン金属錯体、及びアルデヒド化合物の添加は反応の任意
の段隋で可能であり、−括、連続、分割のいずれの手段
で、も実施出来る。
度で工いが、グリシンの反応収率を高めるためにぼ、ア
ルデヒド化合物エリ中なくするのが工い。かかるグリシ
ン金属錯体、及びアルデヒド化合物の添加は反応の任意
の段隋で可能であり、−括、連続、分割のいずれの手段
で、も実施出来る。
反応1m1u10〜70°Cが、c イカ、10〜40
°Cがエリ好適である。反応時のP)(は5〜10、好
ましくは、5.5〜7.0に維持するのがよい。補酵素
として、ピリドキサール−57−リ/酸を反応系に添加
すると酵素活性を高めて反応を促進させることが出来る
。
°Cがエリ好適である。反応時のP)(は5〜10、好
ましくは、5.5〜7.0に維持するのがよい。補酵素
として、ピリドキサール−57−リ/酸を反応系に添加
すると酵素活性を高めて反応を促進させることが出来る
。
また、反応系にマグネシウムイオンやマンがンイオンを
添加することにエリ酵素活性、及び活性の安定性を高め
て反応を促進させることが出来る。
添加することにエリ酵素活性、及び活性の安定性を高め
て反応を促進させることが出来る。
反応はバッチ方式がよく、連続方式で行ってもよい。か
くして、反りは0.5〜50時間程時間路了する。
くして、反りは0.5〜50時間程時間路了する。
このLうにして得られたD−β−ヒPロキシアミノ酸を
反応液から採取するには、例えば、上記アミノ酸金属錯
体fc溶解して後、限外濾過等で除タンパクし、イオン
交換樹脂等で分離・回収する方法や、反応液を濃縮して
上記アミノ酸金属錯体を析出させた後、溶解し、脱金属
する方法など、通常の方法を用いることが出来る。
反応液から採取するには、例えば、上記アミノ酸金属錯
体fc溶解して後、限外濾過等で除タンパクし、イオン
交換樹脂等で分離・回収する方法や、反応液を濃縮して
上記アミノ酸金属錯体を析出させた後、溶解し、脱金属
する方法など、通常の方法を用いることが出来る。
例えば、反応混合物を強力チオン交換樹脂に吸着させた
後に、アルカリ金属塩の水溶液で溶出すれば、能率良〈
高収率で、上記三成分を同時に分離・回収できる。
後に、アルカリ金属塩の水溶液で溶出すれば、能率良〈
高収率で、上記三成分を同時に分離・回収できる。
上記操作で反応液から分離したD−β−ヒトaキシアミ
ノ酸は゛イオン交換樹脂処理、活性炭処理、晶析等の方
法で精製し、この反応液を濃縮するなどして単離・精製
することが出来る。
ノ酸は゛イオン交換樹脂処理、活性炭処理、晶析等の方
法で精製し、この反応液を濃縮するなどして単離・精製
することが出来る。
矢に、実施例によQ本発明の方法を更に詳しく説明する
。例中%は重債憾を示す。また、記号Thr XA11
oはそれぞれスレオニン、アロスレオニンを表わす。
。例中%は重債憾を示す。また、記号Thr XA11
oはそれぞれスレオニン、アロスレオニンを表わす。
酵素製造例
ポリベグトン0.5%、酵母エキス0.5%、KH2P
0゜0.1%からなるPJ(7,5の培地t−A製し、
5を容の培養槽にその6tを投入して120°Cで15
分間加熱殺菌した。この培地にアリスロバクター(Ar
throbacter ) D K −19(微工蛮菌
寄第6201号)を接種し、pH7,5に保ちながら3
0℃で20時間通気および攪拌をしつつ培養した。
0゜0.1%からなるPJ(7,5の培地t−A製し、
5を容の培養槽にその6tを投入して120°Cで15
分間加熱殺菌した。この培地にアリスロバクター(Ar
throbacter ) D K −19(微工蛮菌
寄第6201号)を接種し、pH7,5に保ちながら3
0℃で20時間通気および攪拌をしつつ培養した。
培養終了後、培f液から菌体を遠心分離し、生理食塩水
で洗浄後、この湿菌体を[]、11mMピリドキサール
−5′−リン酸おLび1.Q mM MnCl2を含む
pH7,5のQ、j M トリス−塩酸緩衝液100m
1中に懸濁した。この菌体懸濁液を20 KHz z
5分間の超音波処理を4回行ない菌体を破砕し、懸濁
物質を遠心分離で除去して粗製酵素液を調製した。
で洗浄後、この湿菌体を[]、11mMピリドキサール
−5′−リン酸おLび1.Q mM MnCl2を含む
pH7,5のQ、j M トリス−塩酸緩衝液100m
1中に懸濁した。この菌体懸濁液を20 KHz z
5分間の超音波処理を4回行ない菌体を破砕し、懸濁
物質を遠心分離で除去して粗製酵素液を調製した。
次に、粗酵素液を攪拌しながら、冷アセトンを添加し、
アセトンa度45〜65%区間の析出物を分取し、上記
緩衝液10Mに溶解してアセトン分画酵素液を調製した
。
アセトンa度45〜65%区間の析出物を分取し、上記
緩衝液10Mに溶解してアセトン分画酵素液を調製した
。
熱処理菌体製造例
酵素製造例1と同様の方法で培養して得たアリスミバク
ター(Arthrobacter ) D K −i
9 (微工研萌寄6201号)の培#a’>、otから
遠心分離で菌体を集菌・水洗し、この湿菌体を0.01
mMピリドキサール−57−リン酸、及び1 、0 m
M MnCl2を含む水溶液i o o vttに@濁
し、pH6,0に合わせた。次に、この菌体懸濁液を5
5°Cで120分間加熱処理を行い、遠心分離で集菌・
水洗後、10m1の上記水溶液にS濁して、熱処理菌体
製造例を調製した。
ター(Arthrobacter ) D K −i
9 (微工研萌寄6201号)の培#a’>、otから
遠心分離で菌体を集菌・水洗し、この湿菌体を0.01
mMピリドキサール−57−リン酸、及び1 、0 m
M MnCl2を含む水溶液i o o vttに@濁
し、pH6,0に合わせた。次に、この菌体懸濁液を5
5°Cで120分間加熱処理を行い、遠心分離で集菌・
水洗後、10m1の上記水溶液にS濁して、熱処理菌体
製造例を調製した。
実施例1
酵素製造例で得た粗酵X1101Mにグリシンニッケル
錯体CN1(NH2CH2CO2)2〕・2H20、ク
リシンコlマルト錯体〔co(NH2CH2CO2)3
1・2H20または、グリシン水溶液に、水酸化コバル
トと水酸化ニッケルを加え、加熱・濃縮して得たグリシ
ン・コバルト・ニッケル錯体〔co−N1・(NH2C
H2CO2)5〕・4H20を0.15.!?及び、ア
セトアルデヒ)’ [1,2gThttro、5M )
IJ スー塩e緩i液(pH7−5) ’c10mJ
m合し、密閉容器内で30’C,10時間反応させた。
錯体CN1(NH2CH2CO2)2〕・2H20、ク
リシンコlマルト錯体〔co(NH2CH2CO2)3
1・2H20または、グリシン水溶液に、水酸化コバル
トと水酸化ニッケルを加え、加熱・濃縮して得たグリシ
ン・コバルト・ニッケル錯体〔co−N1・(NH2C
H2CO2)5〕・4H20を0.15.!?及び、ア
セトアルデヒ)’ [1,2gThttro、5M )
IJ スー塩e緩i液(pH7−5) ’c10mJ
m合し、密閉容器内で30’C,10時間反応させた。
反応終了後、0.6N塩酸を20M加えた後、遠心分離
で不溶物f:l#、去し、約10陪に希釈した反応Hk
Dowex A −1(Na型、100〜200メツ
シユ、り゛ウケミカル社)で脱金属して、1(PLO(
日立アミノ酸分析システム)でグリシン、及びスレオニ
ン毘性体混合物を定量した。各々のスレオニ/異性体は
、N−カルボキシL。−フェニルアラニン無水物CNC
A )と反らさせてソアステレオマ−に?&換後、HP
LC’ (力5 A : ODS 6.OX 250朋
、 弓¥!h相: 虐I M KH2PO4−に2H
P04 (p’ 5.O)/cI+3cu −96/
4、流速:1.Od1分、検出:210nrn)で分
析した。また、比較としてグリシン0.1gを基質に用
いて上記の方法と同様にして反応を行った。
で不溶物f:l#、去し、約10陪に希釈した反応Hk
Dowex A −1(Na型、100〜200メツ
シユ、り゛ウケミカル社)で脱金属して、1(PLO(
日立アミノ酸分析システム)でグリシン、及びスレオニ
ン毘性体混合物を定量した。各々のスレオニ/異性体は
、N−カルボキシL。−フェニルアラニン無水物CNC
A )と反らさせてソアステレオマ−に?&換後、HP
LC’ (力5 A : ODS 6.OX 250朋
、 弓¥!h相: 虐I M KH2PO4−に2H
P04 (p’ 5.O)/cI+3cu −96/
4、流速:1.Od1分、検出:210nrn)で分
析した。また、比較としてグリシン0.1gを基質に用
いて上記の方法と同様にして反応を行った。
これらの分析結果を第1表に示す。
第 1 表
実施例2
酵素製造例で得たアリスミバクター(Arthrot:
acter)Dx−19(i工研菌寄62o1号> )
酵ri1[]QmAにグリシンニッケ/l/ 3.0
gr 、 MnC420,1mモル及びアセトアルデヒ
ド[]、5mA1,60分毎に10回添加(合計5.O
R/りして、攪拌下、6゜′Cで反応を行なった。反応
中は密閉状態?保ち、0.2 N−NaOHで反応pH
を665に保った。
acter)Dx−19(i工研菌寄62o1号> )
酵ri1[]QmAにグリシンニッケ/l/ 3.0
gr 、 MnC420,1mモル及びアセトアルデヒ
ド[]、5mA1,60分毎に10回添加(合計5.O
R/りして、攪拌下、6゜′Cで反応を行なった。反応
中は密閉状態?保ち、0.2 N−NaOHで反応pH
を665に保った。
反応開始20時間後、濃塩酸で反応液のPH全2.0に
低下させ、遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子量
5万の限外ろ過膜で懸濁物質と高分子量物質を除去した
。次に、この反応液を減圧願発して未反応のアセトアル
デヒドを除去し、10rnどの活性炭カラム(ツルミコ
ールGt、−30)KA液液後H+型にしたDowex
50 Wx 8 (50から100メツシユ、ダウケ
ミカル社製)を充填した10口酩のカラムに通液し、脱
イオン水で洗浄後、0.2Mのアンモニア水で吸着物f
f’を溶出させ、β−ヒトミキシ−α−アミノ酪酸を含
む両分を採取し、濃縮後、メタノールを加えて結晶を析
出させ、0.8gの結晶を得た。この結晶についてNM
R,IR。
低下させ、遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子量
5万の限外ろ過膜で懸濁物質と高分子量物質を除去した
。次に、この反応液を減圧願発して未反応のアセトアル
デヒドを除去し、10rnどの活性炭カラム(ツルミコ
ールGt、−30)KA液液後H+型にしたDowex
50 Wx 8 (50から100メツシユ、ダウケ
ミカル社製)を充填した10口酩のカラムに通液し、脱
イオン水で洗浄後、0.2Mのアンモニア水で吸着物f
f’を溶出させ、β−ヒトミキシ−α−アミノ酪酸を含
む両分を採取し、濃縮後、メタノールを加えて結晶を析
出させ、0.8gの結晶を得た。この結晶についてNM
R,IR。
元素分析を行ないβ−ヒげロキシーα−アミノ酪酸であ
ることを確認した。更に、実施例1と同様の方法でスレ
オニン異性体分析を行なったところ全てD一体であり、
D−スレオニンとD−アミスレオニンの比が2.5であ
った。
ることを確認した。更に、実施例1と同様の方法でスレ
オニン異性体分析を行なったところ全てD一体であり、
D−スレオニンとD−アミスレオニンの比が2.5であ
った。
実施例6
グリシン金属錯体としてグリシンニッケルを用いて、各
種アルデヒド化合物について実施例1と同様々方法で反
応を行なった。
種アルデヒド化合物について実施例1と同様々方法で反
応を行なった。
反応終了後、薄層りσマドグラフィーで生成β−ヒドロ
キシアミノ酸を分離・定量した。薄層りaマドグラフィ
ーは、1−プロパノールと25幅アンモニア水の比が2
:1の混合液を展開溶媒とじてシリカゾル薄層上でクロ
マトグラフィーを行い、二/ヒドリンで発色させ、デン
シトメーター(C3−910、島津製作所)で定量した
。これらの分析結果’t’第6表に示す。
キシアミノ酸を分離・定量した。薄層りaマドグラフィ
ーは、1−プロパノールと25幅アンモニア水の比が2
:1の混合液を展開溶媒とじてシリカゾル薄層上でクロ
マトグラフィーを行い、二/ヒドリンで発色させ、デン
シトメーター(C3−910、島津製作所)で定量した
。これらの分析結果’t’第6表に示す。
生成β−ヒドロキシアミノ酸の同定は、反応液を限外ろ
過し、イオン交換樹脂カラム精製後、上記した条件の薄
層りaマドグラフィーで展開し、生成物を抽出、真空乾
燥してC13−NMR、及びHl−NMRで分析するこ
とにエリ行なった。
過し、イオン交換樹脂カラム精製後、上記した条件の薄
層りaマドグラフィーで展開し、生成物を抽出、真空乾
燥してC13−NMR、及びHl−NMRで分析するこ
とにエリ行なった。
また、生成β−ヒドロキシアミノ酸の光学純度はN−カ
ルボキシし一フェニルアラニン無水物(NCA )と反
応させ、ジアステレオマーに変換した後、ODSカラム
を用いる液体クロマトグラフィーによる分析、光学分割
カラム(キラルパツク、ダイセル社製)を用いる液体ク
ロマトグラフィーによる分析、及びシフト試薬を用いた
NMR分析にエフ測定した。上記の方法で生成β−ヒド
ロキシアミノ酸を分析し九ところ全てD一体であった。
ルボキシし一フェニルアラニン無水物(NCA )と反
応させ、ジアステレオマーに変換した後、ODSカラム
を用いる液体クロマトグラフィーによる分析、光学分割
カラム(キラルパツク、ダイセル社製)を用いる液体ク
ロマトグラフィーによる分析、及びシフト試薬を用いた
NMR分析にエフ測定した。上記の方法で生成β−ヒド
ロキシアミノ酸を分析し九ところ全てD一体であった。
第3表 D−β−ヒドロキシアミノ酸
の生成量(mモル)
実施例4
酵素製造例で得友アリスロ/々クター(Arthrot
ncter)px−19(做工研菌寄6201号)の酵
素液100m1VCり’) シン=ツ’yル6.cJ
&、MnCl20.1mモル及び0−フロロベンでアル
デヒド0.5mlを50分毎に10回恭加(合計5.0
rnl)して、攪はん下で60℃で反応を行なった。反
応中は密閉状態を保ち、0.2 N−NaOHで反応−
を6.5に保った。
ncter)px−19(做工研菌寄6201号)の酵
素液100m1VCり’) シン=ツ’yル6.cJ
&、MnCl20.1mモル及び0−フロロベンでアル
デヒド0.5mlを50分毎に10回恭加(合計5.0
rnl)して、攪はん下で60℃で反応を行なった。反
応中は密閉状態を保ち、0.2 N−NaOHで反応−
を6.5に保った。
反応開始20時間後、濃塩酸で反応液のPHを2.0に
低下させ、遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子−
な5万の限外ろ過模で懸濁物質と高分子槍物質?除去し
た。矢に、この反応成金5Qmlの活性炭カラム(ツル
ミコールot、−30)に通液して生成物を吸着させ、
脱イオン水で十分に洗浄した後、酢酸20%、フェノー
ル5.0係の混合水溶液で吸着物質を溶出させ、0−フ
ロロフェニルセリンの溶出部分全採取した。
低下させ、遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子−
な5万の限外ろ過模で懸濁物質と高分子槍物質?除去し
た。矢に、この反応成金5Qmlの活性炭カラム(ツル
ミコールot、−30)に通液して生成物を吸着させ、
脱イオン水で十分に洗浄した後、酢酸20%、フェノー
ル5.0係の混合水溶液で吸着物質を溶出させ、0−フ
ロロフェニルセリンの溶出部分全採取した。
次に、このO−フロロフェニルセリンの溶出部分を脱イ
オン水で1.O4に希釈し、H+型にしたDowex
5 Q Wx 8 (50から100メツシユ、ダウケ
ミカル社製)を充填した100Mのカラムに通液し、脱
イオン水で洗浄後、0.5Mのアンモニア水で吸着物質
を溶出させ、0−フロロフェニルセリンの鑓出部分を採
取した。
オン水で1.O4に希釈し、H+型にしたDowex
5 Q Wx 8 (50から100メツシユ、ダウケ
ミカル社製)を充填した100Mのカラムに通液し、脱
イオン水で洗浄後、0.5Mのアンモニア水で吸着物質
を溶出させ、0−フロロフェニルセリンの鑓出部分を採
取した。
仄に、1−グロパノールと25%アンモニア水の比が2
:1の混合液を展開溶媒としてシリカケ9ル薄層上でク
ロマトグラフィーを行い、生成物を抽出後、エタノール
で結晶化して0.1 gの結晶を得た。この結晶1d
I R、NMR,及び元素分析から 。
:1の混合液を展開溶媒としてシリカケ9ル薄層上でク
ロマトグラフィーを行い、生成物を抽出後、エタノール
で結晶化して0.1 gの結晶を得た。この結晶1d
I R、NMR,及び元素分析から 。
ところ全てD一体であり、D−スレオニンとD−アロス
レオニンの比は2.5であった。
レオニンの比は2.5であった。
実施例5
シュードモナス(Pseudomonas ) D K
−2(機工研菌寄第6200号)を用い、酵素製造例
と同様に培養し、培養液から調製したアセトン分画酵素
液を用いて、実施例1と同様にして反応し、反応液に含
まれるアミノ酸を分離・定量した。
−2(機工研菌寄第6200号)を用い、酵素製造例
と同様に培養し、培養液から調製したアセトン分画酵素
液を用いて、実施例1と同様にして反応し、反応液に含
まれるアミノ酸を分離・定量した。
これらの分析結果を第4表に示す。
第 4 表
実施例6
アルカリすネスハエ力リス(Alcaligenesf
aecalis IFO12669) ’jr:用い、
酵素製造例と同様に培養し、培養液から調製したアセト
ン分画酵素gを用いて、実施例1と同様にして反応させ
、反応液に含まれるアミノ酸を分離・定量した。
aecalis IFO12669) ’jr:用い、
酵素製造例と同様に培養し、培養液から調製したアセト
ン分画酵素gを用いて、実施例1と同様にして反応させ
、反応液に含まれるアミノ酸を分離・定量した。
これらの分析結果を第5表に示す。
第 5 表
実施例7
シュードモナス(Pseudomonas ) D K
−2(機工f[!寄6200号)、アルカリゲネス・
・・エカリス(Alca、ligenes faeca
lis ) (IFO12669)、及びキサントモナ
ス・オリデエ(Xanthomonasoryzae
) (IAM 1657 ) It:用い、酵素製造例
と同様に培養し、培養液から調製したアセトン分画酵素
液を用い、グリシンニッケルとペンでアルデヒドを基質
とし、実施例1と同様の方法で酵素反応を行い、生成物
を分離・定量した。これらの分析結果を第6表に示す。
−2(機工f[!寄6200号)、アルカリゲネス・
・・エカリス(Alca、ligenes faeca
lis ) (IFO12669)、及びキサントモナ
ス・オリデエ(Xanthomonasoryzae
) (IAM 1657 ) It:用い、酵素製造例
と同様に培養し、培養液から調製したアセトン分画酵素
液を用い、グリシンニッケルとペンでアルデヒドを基質
とし、実施例1と同様の方法で酵素反応を行い、生成物
を分離・定量した。これらの分析結果を第6表に示す。
生成フェニルセリンは全てD一体であった。
第6表 D−フェニルセリンの生成量(mモル)実施
例8(菌体反応の例) 酵素裂造例と同様の方法で培養して得たアリスロバクタ
−(Arthrobacter ) D K −19(
機工研菌寄6201号)の培養液6.0tから遠心分離
で菌体を集菌・水洗し、Q、Q 1mM&リドキサール
ー57−リン酸、及びi 、Q mM MnC62を含
む水溶液1001Mに1!!!濁し、−を6.0に調製
した。次に、この菌体懸濁液を55°Cで120分間加
熱処理を行ない、遠心分離で水洗・集菌後、10−の上
記水溶液に@濁した。この菌体懸濁液を用いて実施例1
と同様にして反応、分析を行なった結果を第7表に示す
。
例8(菌体反応の例) 酵素裂造例と同様の方法で培養して得たアリスロバクタ
−(Arthrobacter ) D K −19(
機工研菌寄6201号)の培養液6.0tから遠心分離
で菌体を集菌・水洗し、Q、Q 1mM&リドキサール
ー57−リン酸、及びi 、Q mM MnC62を含
む水溶液1001Mに1!!!濁し、−を6.0に調製
した。次に、この菌体懸濁液を55°Cで120分間加
熱処理を行ない、遠心分離で水洗・集菌後、10−の上
記水溶液に@濁した。この菌体懸濁液を用いて実施例1
と同様にして反応、分析を行なった結果を第7表に示す
。
第7表
実施例9(熱処理菌体の例、グリシンニッケル)熱処理
菌体製造例で得た菌体懸濁液100 mlにグリシンニ
ッケル錯体[N1(NH2CH2CO2)2]・2H2
0を3、OF及び、アセトアルデヒド0.51ffi3
0分毎に10回添加しく合計5m1)、攪はんしiがら
30’Oで20時間反応を行なった。反応中は密閉状d
t−保ち、[1,2N−NaOHで反応液のPI−1に
6.0に維持し比。反厄液に含まれるアミノ酸全定曾し
几ところ、D−β−ヒトミキシアミノ酪酸1.24.9
゜グリシン0.97.9であった。
菌体製造例で得た菌体懸濁液100 mlにグリシンニ
ッケル錯体[N1(NH2CH2CO2)2]・2H2
0を3、OF及び、アセトアルデヒド0.51ffi3
0分毎に10回添加しく合計5m1)、攪はんしiがら
30’Oで20時間反応を行なった。反応中は密閉状d
t−保ち、[1,2N−NaOHで反応液のPI−1に
6.0に維持し比。反厄液に含まれるアミノ酸全定曾し
几ところ、D−β−ヒトミキシアミノ酪酸1.24.9
゜グリシン0.97.9であった。
反応終了後、濃塩酸で反応液の−を2.0に低下させ、
遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子量5万の限外
ろ過嘆で懸濁物質と高分子楡物質を除去した。次に、こ
の反応液を減圧蒸発して未反応のアセトアルデヒドを除
去し、10Mの活性炭カラム(ツルミコールC)L−5
0)に通液し、精製反応gを調製した。矢に、この反応
′glを200rntに希釈し、H+型にしたDnwa
x 50 Wx 8 (50から100メツシエ、ダウ
ケミカル社製)を充填した65Mのカラムに通液し、脱
イオン水600Mで洗浄後、0.2Mの塩化ナトリウム
水溶液で吸着物質を溶出させ友。溶出液縫が501から
250Mの画分にD−β−ヒドロキシアミノ酪酸が溶出
し、250から500 vtlの画分にD−β−ヒドロ
キシアミノ酪酸とグリシンの混合物が、次の600成か
ら600Mの溶出画分にグリシンが溶出し之。
遠心分離で不溶物を除去した後、分画分子量5万の限外
ろ過嘆で懸濁物質と高分子楡物質を除去した。次に、こ
の反応液を減圧蒸発して未反応のアセトアルデヒドを除
去し、10Mの活性炭カラム(ツルミコールC)L−5
0)に通液し、精製反応gを調製した。矢に、この反応
′glを200rntに希釈し、H+型にしたDnwa
x 50 Wx 8 (50から100メツシエ、ダウ
ケミカル社製)を充填した65Mのカラムに通液し、脱
イオン水600Mで洗浄後、0.2Mの塩化ナトリウム
水溶液で吸着物質を溶出させ友。溶出液縫が501から
250Mの画分にD−β−ヒドロキシアミノ酪酸が溶出
し、250から500 vtlの画分にD−β−ヒドロ
キシアミノ酪酸とグリシンの混合物が、次の600成か
ら600Mの溶出画分にグリシンが溶出し之。
グリシンが溶出した後、1.7t、<の塩化ナトリウム
水溶液をカラムに通液したところ、600から8401
1Llの画分にニッケルが溶出した。
水溶液をカラムに通液したところ、600から8401
1Llの画分にニッケルが溶出した。
D−β−ヒドロキシアミノ酪酸の溶出画分を蒸発乾固し
、エタノールから再結晶させD−β−ヒドロキシアミノ
酪酸の結晶を0.95 、?全得た。
、エタノールから再結晶させD−β−ヒドロキシアミノ
酪酸の結晶を0.95 、?全得た。
D−β−ヒドロキシアミノ酪酸トゲリシンの混合物溶出
画分も同様にして結晶化し、D−β−ヒても同様にして
結晶化してグリシンの結晶0.71gを得友。
画分も同様にして結晶化し、D−β−ヒても同様にして
結晶化してグリシンの結晶0.71gを得友。
溶出し之ニッケルは炭酸ナトリウムと反C8せて炭酸ニ
ッケルに変換し、酵素反応に使用した量のほぼ全f’に
回収した。
ッケルに変換し、酵素反応に使用した量のほぼ全f’に
回収した。
実頬例10(熱処理菌体の例、グリシンコバルト)グリ
シンコバルト錯体CCO(NH2CH2CO2)312
H203,0,9全基質として、実施例1と同様に酵素
反応を行い、D−β−ヒドロキンアミノ酪酸1.36
g。
シンコバルト錯体CCO(NH2CH2CO2)312
H203,0,9全基質として、実施例1と同様に酵素
反応を行い、D−β−ヒドロキンアミノ酪酸1.36
g。
グリノン0.88 gを含む酵素反応液を得た。
この反り液を実施例9と同様にしてD−β−ヒドロキシ
アミノ酪酸、グリシン、及びコバルト全溶出・分離した
。
アミノ酪酸、グリシン、及びコバルト全溶出・分離した
。
次に、D−β−ヒドロキンアミノ酪酸の溶出画分41発
乾固し、エタノールから再結晶させD−β−ヒドロキン
アミノ酪酸の結晶′f!:0.94.9得た。
乾固し、エタノールから再結晶させD−β−ヒドロキン
アミノ酪酸の結晶′f!:0.94.9得た。
D−β−ヒげaキシアミノ@酸とグリシンの混合物溶出
画分も同様にして結晶化し、D−β−ヒドロキシアミノ
酪酸0.24 gとグIJ 、7ン0.17.!i’の
混合物を得之。又、グリシンの溶出画分についても同様
にして結晶化してグリシンの結晶0.66gを得た。
画分も同様にして結晶化し、D−β−ヒドロキシアミノ
酪酸0.24 gとグIJ 、7ン0.17.!i’の
混合物を得之。又、グリシンの溶出画分についても同様
にして結晶化してグリシンの結晶0.66gを得た。
溶出したコバルトは炭酸ナトリウムと反Ggせて炭酸コ
バルトに変換し、酵素反応に使用した量のほぼ全fj全
回収した。
バルトに変換し、酵素反応に使用した量のほぼ全fj全
回収した。
本発明の方法に:れば犬着に生産されているグリシンと
アルデヒド化合物からに対応するD−β−ヒドロキシア
ミノ酸を製造しつるので、工業的なり一β−ヒトaキシ
アミノ酸の製造法として極めて優れた方法である。
アルデヒド化合物からに対応するD−β−ヒドロキシア
ミノ酸を製造しつるので、工業的なり一β−ヒトaキシ
アミノ酸の製造法として極めて優れた方法である。
特許出願人 電気化学工業株式会社
手続補正書
平成1年3月25日
特許庁長官 吉 1)文 毅 殿
平成1年特許願第40203号
2、発明の名称
D−β−ヒドロキシアミノ酸を取得する方法3、補正を
する者 事件との関係 特許出願人 住所 ■100 東京都千代田区有楽町1丁目4番1号
明細書の発明の詳細な説明の欄 5、補正の内容 1)第6頁第1行の「β−クロロアセトアルデヒド、」
を削除する。
する者 事件との関係 特許出願人 住所 ■100 東京都千代田区有楽町1丁目4番1号
明細書の発明の詳細な説明の欄 5、補正の内容 1)第6頁第1行の「β−クロロアセトアルデヒド、」
を削除する。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1)グリシン金属錯体とアルデヒド化合物とを、D−ス
レオニンアルドラーゼの存在下、反応させて、D−β−
ヒドロキシアミノ酸金属錯体に変換して後、D−β−ヒ
ドロキシアミノ酸を取得する方法。 2)グリシン金属錯体の金属が、ニッケル及び/又は、
コバルトである請求項1)記載のD−β−ヒドロキシア
ミノ酸を取得する方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP4020389A JP2721536B2 (ja) | 1988-03-11 | 1989-02-22 | D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63-57818 | 1988-03-11 | ||
JP5781888 | 1988-03-11 | ||
JP4020389A JP2721536B2 (ja) | 1988-03-11 | 1989-02-22 | D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH01317391A true JPH01317391A (ja) | 1989-12-22 |
JP2721536B2 JP2721536B2 (ja) | 1998-03-04 |
Family
ID=26379646
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP4020389A Expired - Fee Related JP2721536B2 (ja) | 1988-03-11 | 1989-02-22 | D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2721536B2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5266468A (en) * | 1990-06-04 | 1993-11-30 | University Of Notre Dame Du Lac | Process for preparing β-hydroxy-α amino acids |
CN114176084A (zh) * | 2021-12-06 | 2022-03-15 | 南京天秾生物技术有限公司 | 2-氨基-3-羟基-3-甲基丁酸和/或2-氨基-3-(4-羟基苯基)丁酸的应用 |
WO2023155840A1 (zh) * | 2022-02-18 | 2023-08-24 | 南京天秾生物技术有限公司 | 2-氨基-3-苯基丁酸或其衍生物作为植物生长调节剂的应用 |
-
1989
- 1989-02-22 JP JP4020389A patent/JP2721536B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5266468A (en) * | 1990-06-04 | 1993-11-30 | University Of Notre Dame Du Lac | Process for preparing β-hydroxy-α amino acids |
CN114176084A (zh) * | 2021-12-06 | 2022-03-15 | 南京天秾生物技术有限公司 | 2-氨基-3-羟基-3-甲基丁酸和/或2-氨基-3-(4-羟基苯基)丁酸的应用 |
WO2023155840A1 (zh) * | 2022-02-18 | 2023-08-24 | 南京天秾生物技术有限公司 | 2-氨基-3-苯基丁酸或其衍生物作为植物生长调节剂的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2721536B2 (ja) | 1998-03-04 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JPS58190394A (ja) | D−グルコ−ソンの製造方法 | |
JPH01317391A (ja) | D―β―ヒドロキシアミノ酸を取得する方法 | |
JPH1175885A (ja) | 2−ヒドロキシ−4−メチルチオブタン酸カルシウム塩の製造方法 | |
JP3116102B2 (ja) | L−3,4−ジヒドロキシフェニルアラニンの製造方法 | |
JP2001521760A (ja) | L−カルニチンの製造法 | |
IE60591B1 (en) | Immobilised enzyme prepatation and its use | |
JPS5923794B2 (ja) | ジヒドロキシアセトンの製造法 | |
JP2883712B2 (ja) | 光学活性1,3―ブタンジオールの製法 | |
DK144277B (da) | Femgangsmaade til fremstilling af 6-aminopenicillansyre | |
JP3030916B2 (ja) | βーグルコオリゴ糖の製造方法 | |
JP2786500B2 (ja) | 光学活性1,3―ブタンジオールの製法 | |
JP2655893B2 (ja) | 光学活性なβ−ハロ乳酸又はグリシジル酸の合成法 | |
JPH0231684A (ja) | 光学活性1,3―ブタンジオールの製造方法 | |
JP2631867B2 (ja) | (r)−2−ヒドロキシ−4−フェニル−3−ブテン酸の製造方法 | |
JP2828720B2 (ja) | 光学活性1,3―ブタンジオールの製造方法 | |
JPH02207793A (ja) | D―β―ヒドロキシアミノ酸の製造法 | |
JPS6125359B2 (ja) | ||
JPH0154999B2 (ja) | ||
JPH04341195A (ja) | 光学活性マンデル酸の製法 | |
JPS6120274B2 (ja) | ||
JP2519980B2 (ja) | (s)−2−ヒドロキシ−4−フェニル−3−ブテン酸の製造方法 | |
JPH0538291A (ja) | シユウ酸の製造方法 | |
JPH0272890A (ja) | ガラクトオリゴ糖の製造方法 | |
BE742059A (en) | Penicillin acylase | |
JPS58146291A (ja) | S−アデノシルメチオニンの製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |