JPH01173871A - 合成ポリペプチドからなる癌診断剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はちるアミノ酸配列と包含する抗原的に活性な合
成ポリにプチダおよび前記ポリはプチダの製造法に関す
る。

スエーデン特許出願第７３−０８９１７−９号および米
国特許第３．９６０．８２７芳容明細書には、癌関連ポ
リはプチダ抗原（ＣＡＰＡ　）　、その単離技術および
癌診断および抗体の製造におけるその使用が記載されて
いる。ＣＡＰＡは現在では、　　ＴＰＡの名称で市販さ
れており、これは「組織ボリハプチド抗原」の意味であ
る。前記スニーデン特許出、該明細書および米国特許明
細書から明らかなように、天然抗原の単離は複雑な操作
であり、これは実際的に有用な生成物を与えるにしても
、高い製造コストを伴ないそして更に必要な出発原料例
えば腫瘍組織その他の入手に困難さを伴なう。この背景
に対して、合成的に製造される抗原は、厳密に規定され
た組成の生成物をそれによって得ることができる故に非
常に魅力的であろう。こうした生成物はまたより好まし
い価格で製造されうる。

本発明の主たる目的は前記特許明細書記載のポリハプチ
ド抗原により産生される抗体と単一特異的に反応する抗
原的に活性な合成ボ１７６プチドを提供することである
。

本発明によれば、アミノ酸配列すなわちＨ−Ａｓｐ−Ａ
ｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｌｅ
ｕ−Ａｌａ−工１ｅ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ａａｎ
−Ａｌａ　−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ
−ＯＨを含む抗原的に活性な合成ポリペプチドが提供さ
れる。

本発明の好ましい態様によれば、活性成分または免役決
定群として次のアミノ酸配列（１）すなわち Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−（ｎｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ
−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−工１ｅ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−
Ａｈａ−Ａｓｎ−Ａｌａ　−Ａｒｇ−Ｌｅｕ　−Ｓ　ｅ
ｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ　−Ｇｌｕ　−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌ
ｅｕ−Ｇ’ｌｎ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａ
ｓｐ−ＯＨを含有する抗原的に活性な合成ポリハプチド
が提供される。

本発明のその他の好ましい態様によればそのポリはヲチ
ドは次のアミノ酸配列（ＩｌｌすなわちＨ−Ａｌａ−８
ｓｒ−Ｌｅｕ−Ｇ’１ｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−工１ｅ−Ａ
ｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌ
ｙ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−工１ｅ−Ａｒｇ−Ａｓｐ
−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−
Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−ＯＨを含肩する。

以後本明細書中では、アミノ酸に対して次の略号が使用
される。

アラニン　　　Ａｌａ　　　　アスノぐラギ゛ンｅ　　
Ａｓｐアルギニン　Ａｒｇ　　　グルタミン　Ｇｌｎア
スパラギン　Ａｓｎ　　　　グルタミン酸　Ｇｌｕグリ
シン　　Ｇｌｙ　　バリン　　　Ｖａｌイソロイシン　
エ１ｅ　　スレオニン　Ｔｈｒセリン　　　　　Ｓｅｒ
　　フェニルアラニン　Ｐｈｅロイシン　　Ｌｅｕ　　
リジン　　　ＬｙＳチロシン　　Ｔｙｒ 本発明はまた抗原的に活性なポリはプチドの製造法にも
関する。而してその方法においては、Ｎ−保護アミノ酸
をエステル化によって樹脂に結合させ、Ｎ−保護基を除
去し、そして第２のＮ−保護アミノ酸を樹脂結合アミノ
酸のアミノ基にカップリングさせ、そのＮ−保護基を除
去し、そして第５のＮ−保護アミノ酸を使用してこのカ
ップリング段階をくりかえす。この方法における保護基
は通常の基でありそしてこれは以下に一層完全に記載さ
れている。所望のアミノ酸配列が得られるまでこの方法
をくりかえしそして次いでポリはゾチドを樹脂から切断
させる。樹脂結合アミノ酸へＯＮ−保護アミノ酸の結合
を行わせるごとに、その後ですべての副生成物および未
反応可溶性物質全洗去することが好ましい。

この合成に使用される樹脂はスチレンが共重合体の主部
分を構成するような例えば約９８重量％のスチレンおよ
び約２重量％のジビニルベンゼンのようなスチレンジビ
ニルベンゼン共重合体より構成されうる。

第１のアミノ酸にカップリングさせるための反応性基を
与えるために、ベンゼン環は適当には部分的にクロロメ
チル化されている。このクロロメチル化樹脂ｉＮ−保後
アミノ酸のトリエチルアミン塩で処理した場合、ベンジ
ルエステルタイプの結合が生成される。そのような結合
はこの合成段階では安定であるが、しかしこれは酢酸ま
たはトリフルオロ酢酸中のＨＢｒにより切断されうる。

Ｎ−保護基は同時に除去されそしてポリぼプチドは樹脂
から分離される。

アミノ酸のＮ−末端部分の保護のためには、適当には第
３級ブチルオキシカルボニル基ヲ使用しうる。その理由
はそれが酢酸中のＨＣｌにより便利に切断されるからで
ある。この目的のためにはカルボベンゾキシ基を使用す
ることもまた可能である。しかしながらこの場合には保
護基の除去のためには酢酸中のＴｌＢｒを使用しなくて
はならない。保護基としては、０−ニトロフェニルスル
フェニル基も使用しうる。その他の保護基もまた使用で
き、そしてこれらは当業者には明白であろう。

この合成において最もひんばんに使用されるカップリン
グ剤はジシクロへキシルカルボジイミドである。溶媒と
してメチレンクロリドが使用されそして約５０％過剰の
第３級ブチルオキシカルボニルアミノ酸およびジシクロ
へキシルカルボジイミドが使用される場合には、数分以
内に定量的反応が得られる。溶媒としてジメチルホルム
アミドさえも使用しうる。合成法に関する更に詳細はｒ
　Ｐｒ０ｔａｉｎ　５ｅｑｕｅｎｃｅ　Ｄｅｔｅｒｍｌ
ｎａｔｌｏｎＪ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ４ｅｒｌａｇ　１９
７０年版）の特に第６０８〜３１０頁に見出すことがで
きる。その池のカップリング剤もまた適当であり、そし
てこれらは当業者には明白であろう。

ここに次の実施例により本発明を更に説明するがこれら
は本発明を限定するものではない。

例　　１ メリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅ工ｄ）氏による面相
法（前掲文献参照）によって次の生成物を製造する。

Ｂｏａ　−１ｆｆｌ−ＣＢ−ＣＱＮＨ−ＣＨ−−−−−
−−−−−ＣＨ−Ｃｏ−ＮＨ−ＣＡ−Ｃｏ−Ｎｌｌ−Ｃ
）ｔ−Ｃｏｏ−ＣＨ２舎Ｒ式中、Ｒは愕脂を表わし、　
］３ｏｃは第３級ブチルオキシカルボニル基であり、 Ｒ１＝Ｒ１９ミ３０＝ｃａ２−ｃｏｏ−ｃＨ２−◎、Ｒ
４＝Ｒ８ミ９＝Ｒ＋　６＝１８＝Ｒ２２＝Ｒ２９＝ＣＨ
３ｓＲ６：Ｒ２”Ｒ２７１ Ｒ，ｏ＝Ｒ，２＝Ｒ２４＝Ｒ２５＝−ｃＨ２−ＣＨ２−
Ｃｏｏ−ＣＨ２＠、Ｒｊ　５＝＝ｃａ２−ｏ−ｃａ２＠
　　、Ｒ２５＝Ｈである。

第３級ブチルオキシカルボニル基と樹脂部分との間のア
ミノ酸配列はアミノ酸に関する前記の略号を使用して次
のように表わすことができる。

−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−
Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ　−１１ｅ−Ａｒｇ−Ａｓｐ−
Ａｌａ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−８ｅｒ−Ｇ
ｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ｇｌ
ｎ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ　（１）
０．４ミリモルのＢＯＣ−アスパラギン酸β−ベンジル
エステル をベックマンにプチド合成装．ｔのキュベツトに移し、
そしてメチレンクロリド（　ｃａ２ｃｚ２）中で膨（関
させた。メチレンクロリド中で過剰のトリフルオロ酢酸
で処理することによって保護基であるＢｏａ基を除去し
た。メチレンクロリドで洗浄した後、トリメチルアミン
で樹脂を中和し、そして再びメチレンクロリドで洗った
。Ｎ−Ｂｏｃ−クルタミン酸ヘンシルエステル（カンプ
リング段階１）およびシクロへキシルカルボジイミドを
ＣＨ２Ｃ２２に溶解させて添加しそしてこの混合物を３
０分間攪拌した。街脂を洗いそしてこのカップリング段
階金くりかえした。これは前記の段階１におけるＲ２の
導入を停止させる。

合成の第２段階はＮ−末端アミノ酸からＮ−ＢＯｃを除
去しそして他のＮ　−Ｂｏｃ−アミノ酸を使用してカン
プリング段階をくりかえすことにより開始される。前記
アミノ酸配列の構成のためには、次の各段階で次の試薬
が使用される。

第２段階　Ｎ　−ＢＯＣ−グルタミン−キサントヒドリ
ル誘導体 第５段階　α、Ｎ　−ＢＯｃ　−ｅ　（０−クロロ−カ
ルボベンゾキシ）リジン 第４段階　Ｎ　−Ｂｏａ−アラニン 第５段階　Ｎ　−ＢＯＣ−Ｇ　−トシルアルギニン第６
段階　第２段階と同じ 第７段階　Ｎ　−ＢＯＣ−ロイシン 第８段ｉｌｆ　　第４段階と同じ 第９段階　第４段階と同じ 第１０段１階　Ｎ　−Ｂｏａ−グルタミン酸γ−ベンジ
ルエステル 第１１段階　第７段階と同じ 第１２段階　第１０段階と同じ 第１３段階Ｎ　−Ｂｏｃ−セリン−ベンジルエーテル第
１４段階　第７段階と同じ 第１５段階　第５段階と同じ 第１６段階　Ｄ二〇　第４段階と同じ 巣１７段階　Ｎ　−Ｂｏａ−アス・ξラギンーキサント
ヒドリル誘導体 第１８段階　第４段階と同じ 第１９段階　Ｎ　−Ｂｏｃ−アスパラギン酸β−ベンジ
ルエステル 第２０段階　第５段階と同じ 渠２１段階　Ｎ　−Ｂｏｃ−インロイシン第２２段階　
第４段階と同じ 第２３段階　第７段階と同じ 第２４段階　果１０段階と同じ 第２５段階　Ｎ　−Ｂｏｃ−グリシン 第２６段階　第５段階と同じ 第２７段階　第２段階と同じ 第２８段階　第１０段階と同じ 第２９段階　第４段階と同じ 第３０段階　第１９段階と同じ 保穫樹脂結合はプチドから保護基を除去し、０℃で３０
分無水弗化水素酸を使用して樹脂を切断させ、そして１
０重量多の酢酸水性溶液を使用して樹脂からはヲチドを
抽出する。蒸発後、その残渣を０．１　Ｍ　　ＮＨ４Ｈ
Ｉ：０３中でセファデックスＧ２５フアイン上でゲル濾
過することによって精製する。ベゾチドの凍結乾燥後、
セファデックスＧ２５およびセファデックスＧ５０を使
用したゲル濾過により測定した場合に約′５５００の分
子量と共に満足すべきアミノ酸分析結果が得られる。理
論的分子量値は５３２０．８０である。

天然癌抗原で標識したタンニン処理羊赤血球と天然癌抗
原（ＣＡＰＡまたはＴＰＡ　）を使用して産生させた抗
体との間の血球凝集反応の阻害能力に関して、前記によ
り製造されたポリペプチドを検査した。この技術に関し
ては、前記スエーデン特許出、頚第７３−０８９１７−
９号および米国特許第３．９６０．８２７芳容明肥書を
参照することができる。この４　＋Ｊペプチドの比活性
は約０．２皐位／′ｍｑ（Ｕ／ｑ）であることが見出さ
れた。比活性に対する前記単位は、最小数すなわち最低
量の抗体（最大抗体希釈）により完全て凝集が生ぜしめ
られるように１０９個の羊赤血な細胞を標識するに必要
な活性ポリはプチド量のＸとして定義される。

前記の基本構造を有するポリペプチドの活性に対してど
の官能分が臨界的であるかを調べる目的で、ある糧の実
験を実施した。すなわちｐＨ１３においてシクロヘキサ
ンジオンでアルギニンを閉塞（ブロック）すると、はと
んど完全な活性の長失を生じた。しかしこのポリハプチ
ドを同一期間の間ｐＨ１３の塩基性環境においただけの
場合には、はんのわずかな活性しか失われない。このこ
とは本発明のポリはヲチド中でのアルギニンの存在が抗
原活性に決定的に重要なものであるという事実を示して
いる。

その構造の特性から、このポリはプチドが酸性的性質を
有していることが明白であり、従って中性溶液中ではそ
のアルギニン部分では正の荷電を保持しつつ負に荷電し
ていることが明白である。

この４　＋）ペプチドの抗原性に対する化学的基盤は、
即ち前記に記載されている。小さな決定基の故にその活
性は・・ブテン的性質のものであるということのできる
、合成的に製造された生成物により得られた顕著な比活
性は、免疫および試験すなわち癌分野での診断への応用
に関して開拓的進歩を構成するものである。

明らかにそして免疫学においての知識によれば、抗原活
性は・・ラテン的決定基の構造のみならずポリにブチど
のサイズの函数でもちる。しかしながら前記サイズばは
ブチどの特異性には影響せず、活性程度にのみ影響する
。すなわちより犬なる分子はより小なる分子よりも一層
活性となる傾向がある。従って、ポリにプチドを適当な
免疫学的に活性な担体例えば蛋白質例えばアルブミン例
えば卵白上に配置した場合には、改善された活性が得ら
れる。しかしながら基本的構造形態にある（すなわち少
くとも２０個のアミノ酸単位を有する）ポリペプチドは
すでにポリペプチドを相当する抗体と反応させうるに充
分なだけの抗原活性を示す。更に、このポリにプチドは
抗体産生に使用することができる。

しかしこれにはこのポリはプチドを担体またはいわゆる
「シュレツ・ξ−（５ｃｈｌｅｐｐｅｒ　）抗原」とし
て作用する適当な蛋白質例えば豚血清にカップリングさ
せることを必要とする。

前記例１においては、合成ポリペプチドの抗原活性は次
のようにして決定される。

ポリぼプチド１の定量的測定のためには、はブチドア■
を、１，４−のバッファー級血清すなわち２％不活性人
血清を含有しそして燐酸バッファーで約Ｚ５のｐＨに緩
衝された生理食塩水に溶解させる。段階的な一連の金沢
を行って漸減量のポリにプチド濃度を肩する一連の試料
溶液を調製しそして前記試料の各々にＴＰＡに特異的な
抗体を含有する前以って定めた量の抗血清を加える。得
られた試料の各々に、培養後、粒土担体に付着させた前
以って定めた量のポリはプチドを加え、そして有効抗体
量に相当する程度の血球凝集反応を行わせる。平行して
、既知の漸減量のＴＰＡを含有する相当する一連の対照
試料を準備する。次いで対照試料の二球凝集沈着物の直
径を対照試料のそれと視覚的に比較して活性を推定する
。

例　　２ 例１と同一の方法で次のポリにプチドを製造し、そして
これが例１のポリハプチドと犬杓等しい免役学的活性で
あることが見出された。

Ｒ２８Ｒ２６−”２５””Ｒ４−Ｒ５Ｒ２Ｒ１Ｂｏｃ　
−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯＮＨ−ＣＨ−−−−−−−−−−−
ＣＥ！−Ｃｏ−ＮＨ−ＣＨ−Ｃｏ−Ｎ’Ｈ−ＣＨ−Ｃｏ
ｏ−ＣＨ２（ＸＲ式中、Ｒは＃脂を意味し、Ｂｏｃは第
５級ブチルオキシカルボニル基でアリ、 Ｒ２＝−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃｏｏ−ＯＨ２＠、Ｒ３＝Ｃ
Ｈ２−Ｏ−ＯＨ２＠、 Ｒ４＝Ｒ，、 Ｒ６＝ＣＨ５、 Ｒ８＝Ｒ６、 Ｒ３＝ＣＨ２−ｃｏｏ−ｃｕ２＠、 Ｒ１０”Ｒ５％ １２：Ｒ６％ Ｒ＋５：Ｒ＋　　％ Ｒ２４＝Ｒ６％ Ｊ５＝＝ｌ（５ Ｊ８＝Ｒ２１ Ｒ１９：Ｒ６１ Ｒ２０：Ｒ９％ Ｒ２１＝Ｒ６５ Ｒ２２＝Ｒ＋１　　＋ Ｒ２３”Ｒ２４＝Ｒ６、 Ｒ２５＝Ｒ２隻 Ｒ２６””　＋　　ｓ Ｒ２７＝Ｒ５５ Ｒ２Ｂ”Ｒ６ でちる。

第３級ブチルオキシカルボニル基と樹脂部分との間のア
ミノ酸配列はアミノ酸に関する前記の略号ｔＶ用して次
のように現わすことができる。

−Ａｌａ−６ｅｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−
工１ｅ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙ−Ｇ１．ｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−工ＩＪ−Ａ
ｒｇ−ＡＢｐ−Ａｙｌａ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｌ
ｅｕ−８ｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｑｌ）０、４　ミ＋）
モルのＢＯｃ−ロイシン全ベックマンにプチド合成装置
のキュベツトに移し、そしてメチレンクロリド（ｃａ２
ｃｚ２　）中で膨潤させた。

メチレンクロリド中で過剰のトリフルオロ酢酸で処理す
ることによって保護基たるＢＯｃ基を除去した。メチレ
ンクロリドで洗浄した後、トリメチルアミンで１尉廂を
中和しそして再びメチレンクロリドで洗った。Ｎ　−Ｂ
ｏａ−グルタミン設ペンシルエステル（カップリング段
階１．）およびシクロヘキシルカルボジイミドを０Ｈ２
１１１：ｔ２に溶解させて添加し、そしてこの混合物を
３０分間攪拌した。ｍｓ＝を洗い、そしてこのカップリ
ング段階をくりかえした。これは前記の段階１における
Ｒ２の導入を停止させる。

合成の第２段階はＮ−末端アミノばからＮ−Ｂｏａ　ｆ
：除去し、そして他のＮ　−ＢＯＣ−アミノ酸全使用し
てこのカップリング段階をくりかえすことにより開始さ
ｎる。前記アミノ酸配列の薄酸のためには次の段階で次
の試薬が便用される。

第２段階　Ｎ　−ＢＯＣ−グルタミン酸ｒ−ベンジルエ
ステル 第３段階Ｎ　−ＢＯＣ−セリン−ベンジルエーテル 第４段ｉＩ　　Ｎ　−Ｂｏｃ　−ｏイシン第５段階　Ｎ
　−Ｂｏｃ　−Ｇ　−トシルアルギニン第６段階　Ｎ　
−Ｂｏａ−アラニン 第７段階　Ｎ　−ＢＯＣ−アスパラギン−キサントヒド
リル誘導体 第８段階　Ｄ二〇第６段階と同じ 第９段階　Ｎ　−Ｂｏｃ−アスパラギン識β−ベンジル
エステル 第１０段階　Ｄ二〇第５段階と同じ 第１１段階　Ｎ　−Ｂｏｃ−インロイシン第１２段階　
Ｄ二〇第６段階と同じ 第１４段階　Ｄ二〇第４段階と同じ 第１４段階　Ｄ二〇稟２段階と同じ 第１５段階　Ｎ　−ＢＯＣ−グリシン 第１６段階　Ｄ二〇　第５段階と同じ 渠１７段階　Ｎ　−ＢＯｃ−グルタミンキサントヒドリ
ル誘導体 第１８段階　Ｄ二〇第２段階と同じ 第１９段階　Ｄ二〇　第６段；着と同じ第２０段階　Ｄ
：０第９段階と同じ 第２１段階　Ｄ二〇第６段階と同じ 第２２段階　Ｄ二〇第１１段階と同じ 第２３段階　Ｄ二〇　第６段階と同じ 第２４段階　Ｄ：ｏ　第６段階と同じ 第２５段階　Ｄ二〇　第２段階と同じ 第２６段階　Ｄ：ｏ　第４段階と同じ 第２７段階　Ｄ二〇　第３段階と同じ 第２８段階　Ｄ二〇　第６段階と同じ 得られた保護された樹脂結合はプチドを次いで例１の方
法により処理しそして分析する。

セファデックスＧ２５およびセファデックスＧ５０を使
用したゲ゛ル濾過により測定された分子量は約３０００
であり、一方理論分子量は２９３６．３８である。

前記ｆｌＪ　１および例２のポリハプチドに関して実施
されたアミノ酸分析の結果は次の表に要約されている。

アミノ酸分析はＭｏｏｒｅ　ａｎｄ　５ｔｅｉｎのアミ
ノ酸分析法による常法に従って実施された。そこに与え
られる数字は各アミノ酸のモルチすなわちはプチド中の
１００個のアミノ酸当りのそれぞれのアミノ酸の数を意
味している。表に与えられている数字は理論値に満足に
合致する。

Ａｓｐ　　Ｓｅｒ　　（ｎｕ　　Ｇａｙ　Ａｌａ　　　
Ｉｌｅ　　Ｌｅｕ　　Ｌｙｓ　　Ａｒｇ例１　６．９９
４．１１２０．９４２．５３２６．６１３．２８１６．
８７５．３９１３．２７例２１０．４５７．０３１７．
０９２．７５３０．４３６．７４１５．４８　−　１０
．０２本発明は決して前記具体例に限定されるものでは
ない。すなわち、ポリペプチド中造においては、樹脂は
、ベンゼン環を含有し且つ更にエステル化によりＮ−保
護アミノ酸を結合させる能力を有する少くとも一つの基
を含有する任意の物質でありうる。そのエステル結合は
比較的容易に加水分解されなくてはならず、そして勿論
これはポリペプチド中のＲプチビ結合よりも一層容易に
切断されなくてはならない。しかしながらそのエステル
結合は合成下の反応条件に耐え得るに充分なだけ安定で
なくてはならない。

グルタミンおよびア子パラギン単位の結合の場合には、
前記カップリング剤のジシクロへキシルカルボジイミド
の代りに、カップリングをいわニル活性エステル例えば
シアノメチル、チオフェニルまタハニトロフェニルエス
テルＨｅ用−Ｌ、、て実施することができる。合成の溶
媒としては、いわゆる中性溶媒特にいくらか親水性また
は「中極性」である溶媒が適当である。

Ｎ−アミノ酸の保護のために有用な基に関しては、１個
または２個のメチル基がフェニルにより置換された第３
級ブチルオキシカルボニル基を有利に使用しうろことが
認め゛られている。

これに関しては、合成により得られる生成物は、Ｎ−保
護基を与えられそしてエステル化により樹脂に結合され
るということ、そして有利には分解されることなく長期
間保存できるものであることを述べることができる。ポ
リぼヲチドの使用に関連して、保護基および商脂部分が
次いで除去されうる。

本発明の生成物に与えられているアミノ酸配列において
は、末端基（保護基および樹脂部分の除去後）は常にそ
れぞれのアミノ基およびカルボ゛キンル基である。アミ
ン基は鎖の左端に見出され、一方カルポ゛キンル基はア
ミノ酸配列の反対の端に見出される。

特許出願人　　アーペー・ボニエルフエレターゲ゛ン外
１名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）免疫的に活性の担体に共有結合的に結合せしめられ
   た、次記すなわち 【遺伝子配列があります】 （式中、Ｒ＿１はＨまたはＨ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ
   −Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−を表わし
   そしてＲ＿２はＯＨまたはＧｌｕ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌ
   ｅｕ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ａｓ
   ｐ−ＯＨを表わす） のアミノ酸配列で表わされることを特徴とする、抗原的
   に活性な合成ポリペプチドからなる抗原薬剤。 ２）担体が蛋白質である、前記第１項記載の薬剤。 ３）蛋白質がアルブミンである、前記第２項記載の薬剤
   。 ４）薬物学的に許容しうる担体または希釈剤と組合わさ
   れた状態でポリペプチドを包含する、前記第１〜３項の
   いずれかに記載の抗原薬剤。