JPS5929649A - ペプチド類 - Google Patents
ペプチド類Info
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- JPS5929649A JPS5929649A JP57140092A JP14009282A JPS5929649A JP S5929649 A JPS5929649 A JP S5929649A JP 57140092 A JP57140092 A JP 57140092A JP 14009282 A JP14009282 A JP 14009282A JP S5929649 A JPS5929649 A JP S5929649A
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- peptide
- glu
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はペプチド類に関する。
最近における生理活性ペプチドの研究の進展はめざまし
い。その一つとしてオビオイドペプヒ チドがあり１モル抹ネ活性を有するエンドルフィン、エ
ンケファリン類等に関する多くの研究がなされている。
い。その一つとしてオビオイドペプヒ チドがあり１モル抹ネ活性を有するエンドルフィン、エ
ンケファリン類等に関する多くの研究がなされている。
本発明者らは、このような一連のペプチド類に関する研
究を行ない、その−環として本発明に到達したものであ
る。
究を行ない、その−環として本発明に到達したものであ
る。
すなわち１本発明の要旨は、一般式（１）％式％
（１）
〔式中、Ａは８ｅｒ又はＴｙｒ、ＥはＧａｙ又はＧｌｕ
ＸはＡｌａ又はＶａｌをあられす。
ＸはＡｌａ又はＶａｌをあられす。
アミノ酸残基の立体配置はり、Ｌ又はＤＬである。〕で
示されるペプチド類にある。
示されるペプチド類にある。
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
まず、一般式（１） において、 Ｂａｒ、 Ｇｌｎ。
Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｐｒｏ、 Ａａｎ、 Ａｈａ、 Ｔｙ
ｒ、 Ｌｅｕ。
ｒ、 Ｌｅｕ。
ｐｈθ、 Ｖａｌは、それぞれセリン、グルタミン。
グルタミン酸、アスパラギン酸、プロリン、アスパラギ
ン、アラニン、チロシン、ロイシン。
ン、アラニン、チロシン、ロイシン。
フェニルアラニン、ハリンヲアラワス。
上記一般式（■）で示されるペプチド類には。
Ｎ端のアミノ基がペプチド化学で常用される保護基で保
護されたものも含°止れる。たとえば。
護されたものも含°止れる。たとえば。
ベンジルオキ７カルボニル、℃−ブチルオキシカルボニ
ル、アシル、ｐ−）ルエンスルホニル基等が挙げられる
。
ル、アシル、ｐ−）ルエンスルホニル基等が挙げられる
。
また、Ｃ端のカルボキシル基も、常用されるベンジルエ
ステル、メチルエステル、エチルエステル等として保掻
されたものも含まれる。さらに、アミドを形成していて
もよい（ＬａｏＮｉＲｌ。
ステル、メチルエステル、エチルエステル等として保掻
されたものも含まれる。さらに、アミドを形成していて
もよい（ＬａｏＮｉＲｌ。
Ｒ１，Ｒ１はＨ又はアルキル基をあられす）。
さらに１本発明のペプチド類には１通常用いられる各種
の無機酸、有機酸の酸付加塩、ならびに、金属化合物や
ポリアミド酸等との錯化合物も含まれる。これらの酸と
しては、塩酸、硫酸、酢酸、クエン酸、酒石酸等があげ
られる。
の無機酸、有機酸の酸付加塩、ならびに、金属化合物や
ポリアミド酸等との錯化合物も含まれる。これらの酸と
しては、塩酸、硫酸、酢酸、クエン酸、酒石酸等があげ
られる。
また、上記金属化合物としては、亜鉛、ニッケル、コバ
ルトの化合物、ポリアミノ酸としてはポリ−Ｌ−グルタ
ミン酸等が挙げられる。
ルトの化合物、ポリアミノ酸としてはポリ−Ｌ−グルタ
ミン酸等が挙げられる。
本発明のペプチド類ば、ペプチド化学において常用され
ている方法を適宜選定して製造することができる。すな
わち、液相法、固相法のいずれによっても得ることがで
きる。
ている方法を適宜選定して製造することができる。すな
わち、液相法、固相法のいずれによっても得ることがで
きる。
反応に関与しないアミン基の保礫基としては。
Ｉ）−）ルエンスルホニル基、ベンジルオキシカルボニ
ル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基。
ル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基。
７タロイル基等が挙げられる。
また、反応に関与しないカルボキシル基の保誦基として
は１通常、メチル、エチル等のアルキルエステルが挙げ
られる。さらに、アミン基と反応させるカルボキシル基
は、塩化物、ヒドラジド、アジド、有機酸との混合無水
物又はチオエステル、シアンメチルエステル等に変えて
活性化してお（ことが望ましい。
は１通常、メチル、エチル等のアルキルエステルが挙げ
られる。さらに、アミン基と反応させるカルボキシル基
は、塩化物、ヒドラジド、アジド、有機酸との混合無水
物又はチオエステル、シアンメチルエステル等に変えて
活性化してお（ことが望ましい。
面相法により出発原料のＮ端側に順次所定のペプチド鎖
を延長する方法が好適に採用される。
を延長する方法が好適に採用される。
この方法による場合、各サイクル（特に二番目以降のサ
イクルにおいて）におけるくりかえし工程の反応をＮ−
ヒドロキシコハク酸イミド、／−オキシベンゾトリアゾ
ール等の活性エステ−ご − ル試薬の存在下に行なうのが好ましい。
イクルにおいて）におけるくりかえし工程の反応をＮ−
ヒドロキシコハク酸イミド、／−オキシベンゾトリアゾ
ール等の活性エステ−ご − ル試薬の存在下に行なうのが好ましい。
保護基を有するペプチドの保護基脱離は常法により行な
われる。
われる。
たとえば、トリフルオロ酢酸処理、加水分解、還元等で
ある。
ある。
また、得られるペプチドの精製は、イオン交換樹脂、各
種クロマトグラフィー等により行なうことができる。
種クロマトグラフィー等により行なうことができる。
本発明に係るペプチド類は、下記一般式（ＩＩ）で示さ
れ、鎮痛作用を有するペプチド類製造の中間体として有
用であり、かつ、この一般式（ＩＩ）で示されるペプチ
ドに特異的に作用する抗血清作成に有用であり、さらに
、プルダイノルフィンの検出及び測定に有用である。
れ、鎮痛作用を有するペプチド類製造の中間体として有
用であり、かつ、この一般式（ＩＩ）で示されるペプチ
ドに特異的に作用する抗血清作成に有用であり、さらに
、プルダイノルフィンの検出及び測定に有用である。
Ｈ−Ｔｙｒ−Ｇ４ｙ−Ｇ ｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒ
ｇ−Ａｒｇ−Ｇ １ｎ−Ｐｈａ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖ’
ａ１−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−８ｏｒ＝Ｇ４ｎ−Ｇ １ｕ−Ａ
ｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａ−Ｂ−Ｇｌ
ｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ｘ−Ｙ−・−（ｆｆ）〔
式中、Ａ、Ｂ、Ｘは、一般式（１）におけると同義であ
る。ＹはＯＨ又はＮＲ”Ｒ” （Ｒ’ 、 ｆｌ”はＨ
又−番 − はアルキル基をあられす）をあられす〕抗血清等の作成
に際しては、＋）水溶性カルボジイミド、グルタルアル
デヒド等を作用させて。
ｇ−Ａｒｇ−Ｇ １ｎ−Ｐｈａ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｖ’
ａ１−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−８ｏｒ＝Ｇ４ｎ−Ｇ １ｕ−Ａ
ｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ａ−Ｂ−Ｇｌ
ｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−ｘ−Ｙ−・−（ｆｆ）〔
式中、Ａ、Ｂ、Ｘは、一般式（１）におけると同義であ
る。ＹはＯＨ又はＮＲ”Ｒ” （Ｒ’ 、 ｆｌ”はＨ
又−番 − はアルキル基をあられす）をあられす〕抗血清等の作成
に際しては、＋）水溶性カルボジイミド、グルタルアル
デヒド等を作用させて。
血清たんばく（血清アルブミン）、アミノ酸ポリマーも
しくはコポリマー等の担体にペプチドを結合させる方法
、１１）炭末又はポリビニルピロリドンのような不活性
ポリマー粒子にペプチドを吸着させる方法１等を採用し
、ハプテン抗原を得ることができる。
しくはコポリマー等の担体にペプチドを結合させる方法
、１１）炭末又はポリビニルピロリドンのような不活性
ポリマー粒子にペプチドを吸着させる方法１等を採用し
、ハプテン抗原を得ることができる。
さらに１本発明に係るペプチドは、Ｎ端を保護し、又は
フリーの形のまま、常法によりヨウ素（ｊｆＪ又はＦｌ
）標識化することにより、ラジオイムノアセイ（Ｒ工Ａ
）に好適な標識抗原を提供し得る。
フリーの形のまま、常法によりヨウ素（ｊｆＪ又はＦｌ
）標識化することにより、ラジオイムノアセイ（Ｒ工Ａ
）に好適な標識抗原を提供し得る。
以下、実施例により１本発明をさらに詳細に説明するが
、本発明はその要旨を超えない限りこれらの実施例に限
定されない。
、本発明はその要旨を超えない限りこれらの実施例に限
定されない。
なお、実施例において使用するＢｏｃ−アミノ酸はＬ体
であり、＠ペプチド研究所の製品である。また、″ｌセ
ファデックスＧ−１０”は、７アルマシアファインケミ
カルスの製品である。
であり、＠ペプチド研究所の製品である。また、″ｌセ
ファデックスＧ−１０”は、７アルマシアファインケミ
カルスの製品である。
さらに、 Ｎ、Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド
、クロロメチル化ポリスチレン（ジビニルベンゼン／％
１コＯθ−ダθ０メツシュ、Ｏ４Ｈθ、７／ ｍ ｅｑ
／ｉ樹脂）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミドは、■ペ
プチド研究所の製品である。
、クロロメチル化ポリスチレン（ジビニルベンゼン／％
１コＯθ−ダθ０メツシュ、Ｏ４Ｈθ、７／ ｍ ｅｑ
／ｉ樹脂）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミドは、■ペ
プチド研究所の製品である。
実施例／
Ｈ−８ｅｒ−１１１ｎ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａａ
ｎ−Ａｈａ−Ｔ ｙｒ−８ｅ ｒ−Ｇ４ ｙ−Ｇ １ｕ
−Ｌ ｅ ｕ−Ｐｈ ｅ−Ａ ｓ ｐ−Ａ １ ａ−Ｏ
Ｈの合成樹脂のＢｏＣ−Ａｈａエステル化は１次のよう
に行なわれる。乾燥したＭｅ、Ｓｏ（／ ／ｙｄ ）に
溶解したＢｏｏ −Ａｌａ （３’、９１ ｍｅｑｕｉ
ｖ、）に、クロロメチル化樹脂（、ｚ、ｔｏ ｇ、 ｏ
。７ ／ ｍ８ｑｕｉＶ。
ｎ−Ａｈａ−Ｔ ｙｒ−８ｅ ｒ−Ｇ４ ｙ−Ｇ １ｕ
−Ｌ ｅ ｕ−Ｐｈ ｅ−Ａ ｓ ｐ−Ａ １ ａ−Ｏ
Ｈの合成樹脂のＢｏＣ−Ａｈａエステル化は１次のよう
に行なわれる。乾燥したＭｅ、Ｓｏ（／ ／ｙｄ ）に
溶解したＢｏｏ −Ａｌａ （３’、９１ ｍｅｑｕｉ
ｖ、）に、クロロメチル化樹脂（、ｚ、ｔｏ ｇ、 ｏ
。７ ／ ｍ８ｑｕｉＶ。
Ｏ４） を加え、さらにＫＯ−ｔ −Ｂｕ （３、７
，、？ ｍｅｑｕｉｖ、）を加える。混合物を強く振と
うし、得られるスラリーをｌθ゛０で７時間、保持する
。ついで。
，、？ ｍｅｑｕｉｖ、）を加える。混合物を強く振と
うし、得られるスラリーをｌθ゛０で７時間、保持する
。ついで。
樹脂をＭｅ、Ｓｏ、 Ｂ！ｔ、ＯＨ及び０Ｈ２０ｔ２で
洗浄する。
洗浄する。
ペプチド合成は、同相法の常法により行なわれる。
合成はＢｏａ −Ａｈａ −００Ｈ２−樹脂２ＪＯ１ｌ
をペプチド合成装置（Ｂｅｃｋｍａｎ ９９θＢ型）の
反応器に入れて開始され、順次アミノ酸列を合成される
。保瞳基の脱離は％Ｃ１１，０，４，中の、２ｊφトリ
ンルオロ酢Ｗ ＣＴ Ｂ□Ａ）で３θ分間処理して行な
イ＊ 引ＭキＣＨｔＯＬ＊中の７０％トリエタノールア
ミン（Ｂｔ、Ｎ）で中和される。
をペプチド合成装置（Ｂｅｃｋｍａｎ ９９θＢ型）の
反応器に入れて開始され、順次アミノ酸列を合成される
。保瞳基の脱離は％Ｃ１１，０，４，中の、２ｊφトリ
ンルオロ酢Ｗ ＣＴ Ｂ□Ａ）で３θ分間処理して行な
イ＊ 引ＭキＣＨｔＯＬ＊中の７０％トリエタノールア
ミン（Ｂｔ、Ｎ）で中和される。
各アミノ酸（３゜、２１ｒ ｍ＋ｎｏｌ ）の連続的カ
ッブリｙ ／ ハｏｎ、０４中、コ時間でジシクロへキ
シルカルボジイミド（３゜、２ｊ ｎｚｎｏｌ ）によ
ってなされる。溶媒址は、シンクロヘキシルカルボジイ
ミドが乙、！−である以外は、２０−である。
ッブリｙ ／ ハｏｎ、０４中、コ時間でジシクロへキ
シルカルボジイミド（３゜、２ｊ ｎｚｎｏｌ ）によ
ってなされる。溶媒址は、シンクロヘキシルカルボジイ
ミドが乙、！−である以外は、２０−である。
合成の一サイクルは１次の操作よりなる。
（１） Ｃ）ｉＩＣ４で洗浄（へタ分間、３回）１２Ｊ
、２．ｔ％Ｔ Ｆ Ａ ／ ＯＨｍ Ｏ４で脱保護基（
／、５分間予備洗浄１次いで３０分間凪理） （３） Ｃ鳥ｏｔ、で洗浄（／。１分間、３回）（４）
７０％Ｔｉ１ｔ、Ｎ１０Ｈ，Ｏ７，で中和（／。ｊ分
間、３回） （５） ＯＨ，ＯＬ茸で洗浄（／。！分間、６回）（
（３Ｊ Ｂｏａ−アミノ酸（ｊ 、 −２１ｍ ｅ
ｑ ｕ ｉ ”Ｉ、 、 ＯＨｍ Ｃｊ ４中、ｊ分間
）処理 （７）ろ過なしに、ジシクロへキシルカルボジイミド（
３゜ムｍｅｑｕｉｖ。）中で加え、７２８分間カップリ
ングさせる。
、２．ｔ％Ｔ Ｆ Ａ ／ ＯＨｍ Ｏ４で脱保護基（
／、５分間予備洗浄１次いで３０分間凪理） （３） Ｃ鳥ｏｔ、で洗浄（／。１分間、３回）（４）
７０％Ｔｉ１ｔ、Ｎ１０Ｈ，Ｏ７，で中和（／。ｊ分
間、３回） （５） ＯＨ，ＯＬ茸で洗浄（／。！分間、６回）（
（３Ｊ Ｂｏａ−アミノ酸（ｊ 、 −２１ｍ ｅ
ｑ ｕ ｉ ”Ｉ、 、 ＯＨｍ Ｃｊ ４中、ｊ分間
）処理 （７）ろ過なしに、ジシクロへキシルカルボジイミド（
３゜ムｍｅｑｕｉｖ。）中で加え、７２８分間カップリ
ングさせる。
（８） ”ｔ ＣＡｘ で洗浄（／。！分間１ｇ回）
（９）各々ｊ 、２．４ ｍ８ｑｕｉＶ。のＢｏａ−ア
ミノ酸及びジシクロへキシルカルボジイミドで上記（４
）以降の工程をくりかえす。
（９）各々ｊ 、２．４ ｍ８ｑｕｉＶ。のＢｏａ−ア
ミノ酸及びジシクロへキシルカルボジイミドで上記（４
）以降の工程をくりかえす。
二番目のサイクル以降において、くりかえしの工程にお
り゛る反応は、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（乙。、
！、２ｍｅｑｕｉｖ。）の存在下で行なわれる。
り゛る反応は、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（乙。、
！、２ｍｅｑｕｉｖ。）の存在下で行なわれる。
Ｅｏｃ−アミノ酸は○馬Ｃ４に溶解される。ただし−Ｂ
ｏａ −Ａｒｇ（Ｔ ＯＳ ）は、ジメチルホルムアミ
ド（ＤＭＦ ）に溶解される。ＥＯＯ−Ａａｎ及びＢｏ
ｃ −ＧｌｎはＤＭＩＩ’中でＮ−ヒドロキシコハク酸
イミドエステルとしてカップリングされる。
ｏａ −Ａｒｇ（Ｔ ＯＳ ）は、ジメチルホルムアミ
ド（ＤＭＦ ）に溶解される。ＥＯＯ−Ａａｎ及びＢｏ
ｃ −ＧｌｎはＤＭＩＩ’中でＮ−ヒドロキシコハク酸
イミドエステルとしてカップリングされる。
このために、Ｂｏａ −Ｇｌｎ’ （３，，２／； ｍ
ｍｏｌ ）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（ｌＪ２
ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｎｒｔ）に溶がし、混合物
を反応酸器に入れ、ついでＣ４Ｃｔ２（≦。ナコ）中の
ジシクロへキシルカルボジイミド（３゜２≦ｍｍｏｌ
）を加える。反応浴器は、空気による酸化を最小限にす
るために、合成時に窒紫雰囲気下に保持される。
ｍｏｌ ）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（ｌＪ２
ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２０ｎｒｔ）に溶がし、混合物
を反応酸器に入れ、ついでＣ４Ｃｔ２（≦。ナコ）中の
ジシクロへキシルカルボジイミド（３゜２≦ｍｍｏｌ
）を加える。反応浴器は、空気による酸化を最小限にす
るために、合成時に窒紫雰囲気下に保持される。
各カップリング反応後に洗浄工程を行ない、未反応の遊
離アミノ基の存在をニンヒドリンテストによりモニター
する。
離アミノ基の存在をニンヒドリンテストによりモニター
する。
アミノ酸としては１次のような保護アミノ酸が使用され
る。
る。
Ｂｏａ −Ａｌａ 、 Ｂｏｃ −Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
、 Ｂｏｃ −Ｐｈｅ。
、 Ｂｏｃ −Ｐｈｅ。
Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ｈ，Ｏ、Ｂｏａ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）
、Ｂｏａ −Ｇｌｙ 、 ＢＯ（！ −５ｅｒ（Ｂｚｌ
） 、Ｂｏｏ −Ｔｙｒ（，２，ｄ−Ｏ７゜−ｋｌ ）
、Ｂｏａ −Ａｓｎ 、Ｂｏａ −Ｐｒｏ 、Ｂｏａ
−Ｑ１ｎ０全サイクルを終了し、 ｐ、ｔりｙの保護
ペプチド−樹脂を得る〇 その／／３ （／、！３ ！Ｉ）をアニソール（４’、
＜’ｒｎｔ）の存在下ＫＨＦ（−２０Ｍ１．）でｏ℃ｓ
” 分Ｍ ＊ Ｎ 法により処理する。ＨＦは真空ポ
ンプにより。°０で除去される。生じる黄色の樹脂は、
酢酸エチルで数回洗浄される。ペプチドは／ＭＭｅ（１
０θ−）で抽出し、濃縮、凍結乾燥される。粗ペプチド
（ｊｉ、ｒｒｑ’）を１セフアデツクス（ｔＢ ｅｐｈ
ａｄｅｚ）”（１−／θカラム（，２，ｊ Ｘ ／ ３
６副）にかげ、 ／Ｍ酢酸で溶出する。７ラクシヨン（
各ｌＯ１りは。
、Ｂｏａ −Ｇｌｙ 、 ＢＯ（！ −５ｅｒ（Ｂｚｌ
） 、Ｂｏｏ −Ｔｙｒ（，２，ｄ−Ｏ７゜−ｋｌ ）
、Ｂｏａ −Ａｓｎ 、Ｂｏａ −Ｐｒｏ 、Ｂｏａ
−Ｑ１ｎ０全サイクルを終了し、 ｐ、ｔりｙの保護
ペプチド−樹脂を得る〇 その／／３ （／、！３ ！Ｉ）をアニソール（４’、
＜’ｒｎｔ）の存在下ＫＨＦ（−２０Ｍ１．）でｏ℃ｓ
” 分Ｍ ＊ Ｎ 法により処理する。ＨＦは真空ポ
ンプにより。°０で除去される。生じる黄色の樹脂は、
酢酸エチルで数回洗浄される。ペプチドは／ＭＭｅ（１
０θ−）で抽出し、濃縮、凍結乾燥される。粗ペプチド
（ｊｉ、ｒｒｑ’）を１セフアデツクス（ｔＢ ｅｐｈ
ａｄｅｚ）”（１−／θカラム（，２，ｊ Ｘ ／ ３
６副）にかげ、 ／Ｍ酢酸で溶出する。７ラクシヨン（
各ｌＯ１りは。
、２？θｎｍで分光光度計によってモニターされる。フ
ラクションＩ（チューブ４２４−．２り）、■（チュー
ブ／１６．２７−３７）及び■（チューブ扁ｊＪ”−＠
３）が集められ、減圧下に蒸発され、凍結乾燥される。
ラクションＩ（チューブ４２４−．２り）、■（チュー
ブ／１６．２７−３７）及び■（チューブ扁ｊＪ”−＠
３）が集められ、減圧下に蒸発され、凍結乾燥される。
フラクション１．１１及び■は、それぞれ物質を３０■
、 ３２ ｊ Ｉｙ 、 １．０ ＋ｇ金含有る。目的
物質はフラクション■に含まれる。得られるペプに供さ
れる。
、 ３２ ｊ Ｉｙ 、 １．０ ＋ｇ金含有る。目的
物質はフラクション■に含まれる。得られるペプに供さ
れる。
ＲｆＴ ００２Ｚ 、 Ｒｆ■θ、３ｒ（ＴＩ、Ｏ）溶
媒系Ｒｆ ’ ： ／ −ＢｕｏＨ−ＡｃＯＨ−Ｈ，０
（ダＨｉ；ｔ） Ｒｆ■： ／ −ＢｕＯＨ−ピリジ７− ＡＣＯＲ−Ｈ
２Ｏ（ｓθ：コθ：ｇ：コグ） アミノ酸分析 ペプチド加水分解物（４ＮＦＤｔ、 、２＠時間、／／
θ℃）について、′日立”ｔ３！型アミノ酸分析装置を
用いて行なった。アミノ酸組成は次のとおりである。
媒系Ｒｆ ’ ： ／ −ＢｕｏＨ−ＡｃＯＨ−Ｈ，０
（ダＨｉ；ｔ） Ｒｆ■： ／ −ＢｕＯＨ−ピリジ７− ＡＣＯＲ−Ｈ
２Ｏ（ｓθ：コθ：ｇ：コグ） アミノ酸分析 ペプチド加水分解物（４ＮＦＤｔ、 、２＠時間、／／
θ℃）について、′日立”ｔ３！型アミノ酸分析装置を
用いて行なった。アミノ酸組成は次のとおりである。
Ａｓｐ（Ｊ） ３，０♂、 ８ｅｒ（りへト！。
ａｌｕ（３） ３．／３ 、 Ｇａｙ（１） ／、０！
。
。
Ａｌａ（Ｊ） ２，００ 、 Ｌｅｕ（１） ／、θ
〆。
〆。
Ｔｙｒ（１） ／、θ、！ 、 Ｐｈｅ（１）θ、９
３１ＩＰｒｏ（１） θ、り３ 実施例λ Ｈ−Ｓｅｒ −Ｇｌｎ −Ｇｌｕ −Ａｓｐ −Ｐｒｏ
−Ａｓｎ −Ａｌａ −Ｔｙｒ −Ｔｙｒ −（ｔａ
ｕ −（ｎｕ −Ｌｅｕ −Ｐｈｅ −Ａａｐ −’Ｖ
ａｌ−ＯＨｆ）合成 ４ｔ！脂のＢｏｏ −Ｖａｌエステル化は次のように行
なわれる。乾燥したＭθ、８０（／／ｄ）に溶解したＢ
ｏｏ −Ｖａｌ （Ｙ、 ９ｔ！ ｍ６ｑｕｉ’ｖ、
）に、りＯＡ／メチル化樹脂（２ＪＯ／ｌ 、 ０．７
ｒｍｅｑｕｉＶ、 ｏｇを加え、さらＫ ＫＯ−ｔ −
Ｂｕ （ｊ 、 ７３ ｍｅｑｕｉｖ、 ）を加える。
３１ＩＰｒｏ（１） θ、り３ 実施例λ Ｈ−Ｓｅｒ −Ｇｌｎ −Ｇｌｕ −Ａｓｐ −Ｐｒｏ
−Ａｓｎ −Ａｌａ −Ｔｙｒ −Ｔｙｒ −（ｔａ
ｕ −（ｎｕ −Ｌｅｕ −Ｐｈｅ −Ａａｐ −’Ｖ
ａｌ−ＯＨｆ）合成 ４ｔ！脂のＢｏｏ −Ｖａｌエステル化は次のように行
なわれる。乾燥したＭθ、８０（／／ｄ）に溶解したＢ
ｏｏ −Ｖａｌ （Ｙ、 ９ｔ！ ｍ６ｑｕｉ’ｖ、
）に、りＯＡ／メチル化樹脂（２ＪＯ／ｌ 、 ０．７
ｒｍｅｑｕｉＶ、 ｏｇを加え、さらＫ ＫＯ−ｔ −
Ｂｕ （ｊ 、 ７３ ｍｅｑｕｉｖ、 ）を加える。
混合物を強く振と５し、得られるスラリーをｌ０℃で７
時間、保持する。ついで、樹脂をＭ ８２８０ 、 ］
！ｌ ｔ ＯＨ、及びａＨ２ａｔ、で洗浄する。
時間、保持する。ついで、樹脂をＭ ８２８０ 、 ］
！ｌ ｔ ＯＨ、及びａＨ２ａｔ、で洗浄する。
合成は、 Ｂｏａ −Ｖａｌ −００Ｈ，−樹脂ａ、ｔ
ｏｇをペプチド合成装置（Ｂｅｃｋｍａｎ ９９０ Ｂ
型）の反応容器に入れて開始され、同相法の常法により
順次アミノ酸列を延長される。保護基の脱離は。
ｏｇをペプチド合成装置（Ｂｅｃｋｍａｎ ９９０ Ｂ
型）の反応容器に入れて開始され、同相法の常法により
順次アミノ酸列を延長される。保護基の脱離は。
０ＨｓＯＬｘ中の一２！チドリフルオロ酢酸（ＴＦ’Ａ
）で３０分間処理して行ない、引続きＯＨｚ” ４中の
／θチェタノールアミｙ（Ｉｔ、Ｎ）で中和される。
）で３０分間処理して行ない、引続きＯＨｚ” ４中の
／θチェタノールアミｙ（Ｉｔ、Ｎ）で中和される。
各アミノ酸（θ、０４ｍｍ０１）の連続的カップリング
は○Ｈ＊Ｏ＆中、ａ時間でジシクロへキシルカルボジイ
ミド（ダ。０１ ｍｍｏ’ｌ ）によってなされる。溶
媒量は、ジシクロへキシルカルボジイミドが？、０−で
ある以外は、−２０−である。
は○Ｈ＊Ｏ＆中、ａ時間でジシクロへキシルカルボジイ
ミド（ダ。０１ ｍｍｏ’ｌ ）によってなされる。溶
媒量は、ジシクロへキシルカルボジイミドが？、０−で
ある以外は、−２０−である。
合成の一サイクルは、 Ｂｏａ−アミノ酸及びジシクロ
へキシルカルボジイミドをグ。Ｏｔ ｍｅｑｕｉｖ。
へキシルカルボジイミドをグ。Ｏｔ ｍｅｑｕｉｖ。
用いる以外は実施例／におけると同様である。
二番目のサイクル以降において、くりかえしの工程にお
ける反応は、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ｒ、／、
ｚ ｍｅｑｕｌｖ、 ）の存在下で行なわれる。
ける反応は、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ｒ、／、
ｚ ｍｅｑｕｌｖ、 ）の存在下で行なわれる。
Ｂｏｏ−アミノ酸は、○馬０４中に溶解される。
ただし、 Ｂｏａ −Ａｒｇ （Ｔｏｓ）は、ジメチル
ホルムアミド（ＤＭＰ）に溶解される。
ホルムアミド（ＤＭＰ）に溶解される。
Ｂｏａ −Ａｓｎ及びＢｏｃ −Ｇｉｎは、Ｎ−ヒドロ
キシコハク酸イミドエステルとしてカップリングされる
◎このために、 Ｂｏｃ −Ｇ’ｉｎ （ｇ、０．＜ｍ
ｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（Ｊ’、／
、２ｍｍｎ１）をＤＭＰ （−２ｏｗ）に溶解し、混合
物を反応溶器に入れ、ついでａＨ２ｃ６（ｒ、ｉ２ ｍ
ｌ ）中のジシクロへキシルカルボジイミド（４１，０
６ｍｍｏｌ ）を加える。
キシコハク酸イミドエステルとしてカップリングされる
◎このために、 Ｂｏｃ −Ｇ’ｉｎ （ｇ、０．＜ｍ
ｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（Ｊ’、／
、２ｍｍｎ１）をＤＭＰ （−２ｏｗ）に溶解し、混合
物を反応溶器に入れ、ついでａＨ２ｃ６（ｒ、ｉ２ ｍ
ｌ ）中のジシクロへキシルカルボジイミド（４１，０
６ｍｍｏｌ ）を加える。
反応容器は、空気による酸化を最小限にするため、合成
時に窒素雰囲気下に保持される。
時に窒素雰囲気下に保持される。
各カップリング反応後に洗浄工程を行ない。
未反応の遊離アミノ基の存在をニンヒドリンテストによ
りモニターｉｔ。
りモニターｉｔ。
なお、用いる保護アミノ酸は実施例／におけると同様で
あり、 Ｖ’ａｌとしてｊ＄ Ｂｏｏ −Ｖａ’ｌが用
いられる。
あり、 Ｖ’ａｌとしてｊ＄ Ｂｏｏ −Ｖａ’ｌが用
いられる。
全サイクルを終了し、 ＠、、２θＩの保膜ペプチド樹
脂を得る。
脂を得る。
その／／３（八り０１１）を、実施例／と同様に処理し
、粗ペプチド（３７７η）を得る。
、粗ペプチド（３７７η）を得る。
これを１セフアデツクス”Ｇ −／ ０カラム（２，！
Ｘ ／ ｊ ｄ ｃｍ ）にかけ、３０％ＡＣＯＨで溶
出する。
Ｘ ／ ｊ ｄ ｃｍ ）にかけ、３０％ＡＣＯＨで溶
出する。
実施例／と同様にして７ラクシヨン１（チューブ屋２グ
ー、２．ｔ ） ＊ Ｕ （チューブ／Ｅ−ご−３−）
及び■（チューブ４３３−ｊＪ−）を得″る。物質含有
量はそれぞれ、１７ｍｇ、３／Ｊツ及び２３岬である。
ー、２．ｔ ） ＊ Ｕ （チューブ／Ｅ−ご−３−）
及び■（チューブ４３３−ｊＪ−）を得″る。物質含有
量はそれぞれ、１７ｍｇ、３／Ｊツ及び２３岬である。
目的物質はフラクション■に含まれる。
得られるペプチドは、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＯ
）及び逆相高速液体クロマトグラフィー（逆相ＨＰＬＣ
Ｉ ）に供される。
）及び逆相高速液体クロマトグラフィー（逆相ＨＰＬＣ
Ｉ ）に供される。
Ｒｆ”θ０．２♂１ＩＲｆ■θ、！θ（ＴＬＯ）溶媒系
：実施例／におけると同一 アミノ酸分析 （実施例１におけると同様に行なう） ＡＢｐ（，３） ！、１０． Ｈｅｒ（１）θ、７？。
：実施例／におけると同一 アミノ酸分析 （実施例１におけると同様に行なう） ＡＢｐ（，３） ！、１０． Ｈｅｒ（１）θ、７？。
Ｇｌｕ（Ｆ） ｙ、ｏθ、 Ａｌａ（１） ７．０！。
Ｖａ’１（１） ／、θ＋２． Ｌｓｕ（１） ／、
０７゜Ｔｙｒ（，２） ／、りｙ、 Ｂｈａ（１）
／、ｏｒ。
０７゜Ｔｙｒ（，２） ／、りｙ、 Ｂｈａ（１）
／、ｏｒ。
Ｐｒｏ（１） ０．り７
出願人 三菱化成工業株式会社
代理人 弁理士 長谷用 −
ほか７名
１５−
手続ネ…正書（方式）
１ 事件の表示
昭和５７年特許願第１４００９２号
２ 発明の名称
ペプチド類
３ 補正をする者
事件との関係 出願人
（５９６） 三菱化成工業株式会社
４代理人 〒１００
東京都千代田区丸の内二丁目５番２号
三菱化成工業株式会社内
（ばか１名）
５ 補正命令の日付 昭和５７年１１．・月３’０日（
゛発送日）６ 補正の対象 願書および明細書 ７ 補正の内容 願書および明細書の浄書（内容に変更なし）。
゛発送日）６ 補正の対象 願書および明細書 ７ 補正の内容 願書および明細書の浄書（内容に変更なし）。
以上
３３９−
１６一
Claims (2)
- （１） 一般式（Ｉ） Ｓｅｒ−Ｇｉｎ−Ｇｌｕ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ａ
ｌａ−Ｔｙｒ−Ａ−Ｂ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｐ−Ｘ −−・−・・・・（１）〔式中、Ａはｓｅ
ｒ又はＴｙｒ、ＢはＧ１７又はＧｌｕＸはＡｌａ又はＶ
ａ”ｉをあられす。アミノ酸残基の立体配置はＤｌＬ、
又はＤＬである。〕で示されるペプチド類。 - （２） 一般式（１） において、Ａが８ｏｒ、Ｂが
（ｌｌｙ。 ＸがＡｈａである特許請求の範囲（１）項記載のペプチ
ド類。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57140092A JPS5929649A (ja) | 1982-08-12 | 1982-08-12 | ペプチド類 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57140092A JPS5929649A (ja) | 1982-08-12 | 1982-08-12 | ペプチド類 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5929649A true JPS5929649A (ja) | 1984-02-16 |
| JPH0416480B2 JPH0416480B2 (ja) | 1992-03-24 |
Family
ID=15260762
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57140092A Granted JPS5929649A (ja) | 1982-08-12 | 1982-08-12 | ペプチド類 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5929649A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH051194U (ja) * | 1991-06-18 | 1993-01-08 | 貞義 竹綱 | 電熱線支持体の構成片 |
-
1982
- 1982-08-12 JP JP57140092A patent/JPS5929649A/ja active Granted
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| EUR.J.PHARMACAL=1982 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH051194U (ja) * | 1991-06-18 | 1993-01-08 | 貞義 竹綱 | 電熱線支持体の構成片 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0416480B2 (ja) | 1992-03-24 |
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| JPS59206342A (ja) | ペプチド類 | |
| JPH0446280B2 (ja) |