JP7290906B2 - 歯根膜再生剤及びその製造方法 - Google Patents
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Description
本発明の歯周組織再生剤は、植物抽出エキス、グルタミン酸(L-グルタミン酸塩酸塩)等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、D-マンニトール、濃グリセリン、ベンジルアルコール等の1つ以上の水酸基を有するアルコール類(糖アルコール、芳香族アルコール、多価アルコール)、クエン酸ナトリウム等のpH調整剤、及びカルバゾクロム等の止血剤からなる群より選択される少なくとも1種を有効成分として含む。本発明の歯周組織再生剤は、これらのいずれかを歯周組織再生のための有効成分として含むことで、歯根膜を再生させ、歯周病等により崩壊した歯周組織を再生及び/又は修復することができる。また、本発明の歯周組織再生剤は、歯根膜、歯茎等の歯周組織を再生・修復することによって、歯周病等で崩壊した歯周組織を蘇らせる、修繕する、補修する、復活させる、蘇生させる、復元させる、生まれ変わらせる、健康な状態に向けて回復させる、又は治癒させる等の効果を奏することができる。本発明の歯周組織再生剤は、上記有効成分以外に、本発明の効果を損なわない範囲で、他の任意成分を含んでいてもよい。以下、それぞれの成分について説明する。なお、本発明の歯周組織再生剤は、歯周組織、即ち、歯根膜、歯槽骨、歯肉(歯茎)、セメント質、細胞外マトリックスのいずれかを再生及び/又は修復するという効果を有するものである。本発明の歯周組織再生剤は、歯茎、歯根膜の再生作用に特に優れ、その他の歯周組織については再生作用を有するか、又は歯茎、歯根膜の再生に引き続き起こる二次的な再生作用を有するものである。即ち、歯茎、歯根膜細胞の再生に引き続き起こる細胞外マトリックスの形成等も広く歯周組織再生作用に含まれる。また、本発明の歯周組織再生剤は、特に歯根膜再生剤、歯根膜修復剤、歯根膜・歯茎等の歯周組織を再生・修復するための歯周病の治療及び/又は改善剤としても用いることができる。
本発明の歯周組織再生剤が含む植物由来成分としては、例えば、ウイキョウ油(製造元:山本香料、司生堂製薬、小川香料など)、ハッカ油(製造元:長岡香料、高砂香料、小城製薬、東洋薄荷工業、もしくは日局のもの)、ペパーミントエッセンス(製造元:高砂香料、池田物産など)、カンゾウエキス(抽出方法を限定するものではないが、好ましくはエタノール抽出)、アロエエキス(抽出方法を限定するものではないが、好ましくはエタノール抽出)、ユリエキス(抽出方法を限定するものではないが、好ましくはブチレングリコール抽出)等の植物抽出エキス;イソ吉草酸イソアミル(製造元:井上香料)、チモール(製造元:大阪化成)、ヘスペリジン(製造元:アルプス薬品工業)、グリチルリチン酸二カリウム(製造元:アルプス薬品工業、丸善製薬など)、セバシン酸ジエチル(製造元:日光ケミカルズ、日本精化など)、ハチミツ(製造元:一丸ファルコス、小城製薬、塩野香料、小堺製薬、丸石製薬、日研化成、純正化学など)、メチルセルロース(製造元:信越化学工業)等、グルタミン酸(L-グルタミン酸塩酸塩)(製造元:協和発酵、味の素、日理科学、旭化成ケミカルズなど)等の植物含有成分が挙げられる。ここで、本明細書において植物由来成分とは、植物から抽出されるエキス、植物から分離・精製される成分、又はこれらを原料として生成される成分のことをいう。
本発明の歯周組織再生剤が含む動物性成分としては、例えば、真珠タンパク質エキス、コラーゲン、ラクトフェリン、DHA(ドコサヘキサエン酸)等が挙げられる。ここで、本明細書において動物性成分とは、魚介類等の動物から抽出されるエキス、動物組織やミルク等の動物由来の物質から分離・精製される成分、又はこれらを原料として生成される成分のことをいう。
本発明の歯周組織再生剤が含むアルコール類としては、例えば、糖アルコール、芳香族アルコール、多価アルコール等が挙げられ、歯周組織再生能に優れる観点から、これらのうち、D-マンニトール、濃グリセリン、ベンジルアルコールが好ましい。
本発明の歯周組織再生剤が含むpH調整剤としては、例えば、各種有機酸又はその塩等として、クエン酸、グルコン酸、コハク酸、クエン酸ナトリウム、グルコン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム等が挙げられ、歯周組織再生能に優れる観点から、これらのうち、クエン酸、クエン酸ナトリウムが好ましく、クエン酸ナトリウムがより好ましい。
本発明の歯周組織再生剤が含む有効成分としてのその他の成分としては、歯周組織再生能に優れる観点から、例えば止血剤が挙げられ、このうちカルバゾクロム(和光純薬工業)が好ましい。
本発明の歯周組織再生剤を含有する口腔用組成物も本発明の範囲である。本発明の口腔用組成物の形態としては、口中に適用できるものであれば特に制限されず、練り歯磨剤や粉歯磨剤等の歯磨組成物、洗口剤や液状歯磨剤等の液体口腔用組成物等として用いることができる。
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を含有する歯周組織再生キットも含む。歯周組織再生キットは、歯周病によって崩壊した歯周組織を効率的に再生・修復させるために、本発明の歯周組織再生剤を効果的に作用させるべく、複数の基材を予め組合せたものである。この基材としては特に限定されないが、例えば口腔洗浄剤、抗菌剤、薬剤塗布用基材等が挙げられる。また、歯ブラシ、マッサージ用の指サック等のデバイスと組み合わせることができる。
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を含有する細胞培養用培地も含む。本発明の細胞培養用培地は、歯周組織を構成する細胞の増殖をより促進させることができる。そのため、歯根膜を構成する歯根膜線維芽細胞等をこの培地中で培養して細胞シートとし、歯周病で崩壊した歯根膜の代替として移植することも可能である。本発明の細胞培養用培地は、歯周組織再生剤に加えて、通常の細胞培養用の培地成分と同様の成分を含むことができる。
本発明は、本発明の歯周組織再生剤を用いる歯周組織再生方法も含む。本発明の歯周組織再生方法は、本発明の歯周組織再生剤を用いることで、歯周病等により崩壊した歯根膜等の歯周組織を効率的に再生及び/又は修復することができる。
本発明の歯周組織増殖・活性化剤は、植物抽出エキス等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、D-マンニトール、クエン酸ナトリウム、L-グルタミン酸塩酸塩、ベンジルアルコール、カルバゾクロム、濃グリセリン等のその他の成分のいずれかを有効成分として含む。本発明の歯周組織増殖・活性化剤は、これらのいずれかを有効成分として含むことで、歯根膜等の歯周組織を構成する細胞を増殖・活性化させ、歯周病等により損傷を受けた歯周組織を回復させることができる。本発明の歯周組織増殖・活性化剤が含む各成分については、本発明の歯周組織再生剤における説明を適用できる。
本発明の歯周組織アンチエージング剤は、植物抽出エキス等の植物由来成分、真珠タンパク質エキス等の動物性成分、D-マンニトール、クエン酸ナトリウム、L-グルタミン酸塩酸塩、ベンジルアルコール、カルバゾクロム、濃グリセリン等のその他の成分のいずれかを有効成分として含む。本発明の歯周組織アンチエージング剤は、これらのいずれかを有効成分として含むことで、歯根膜等の歯周組織を構成する細胞を増殖・活性化させ、老化等により衰えた歯周組織を復活させたり、年齢と共に気になる歯茎下がりを改善して、歯茎のハリやふっくら感を改善したり、それにより歯に食べ物が詰まり易くなる症状を改善したりして、老化を防止したりすることができる。本発明の歯周組織アンチエージング剤が含む各成分については、本発明の歯周組織再生剤における説明を適用できる。
下記の表1に記載の処方に従い、常法にて、実施例1~23及び比較例1~7の歯周組織再生剤を調製した。各歯周組織再生剤について下記試験を行い、評価した。
(1)歯根膜線維芽細胞増殖評価
歯根膜線維芽細胞(Human Periodontal Ligament Fibroblast:以下HPDLFと略す、ScienCell Research Laboratories製)を10%FBS含有DMEM(Life Technologies製 Product#11995-065)に懸濁し、96ウェルプレート(Corning製 CellBIND(登録商標) Product#3300)に5×103cells/ウェルとなるように播種した。37℃ 5%CO2で一晩培養し、翌日上清を除き、上記調製した歯周組織再生剤に交換した。37℃ 5%CO2で48~72時間培養後、上清を除き、FBSを含まないDMEM(同上)で1度洗浄し、Cell Counting Kit-8(Dojindo製 Product#CK04)試薬を10%含有するDMEM(同上)に交換した。37℃で1時間~3時間培養後、450nmの吸光度を測定した。その結果を図1~5に示す。
また、図2、図3、図4、図5より、アロエエキス、真珠タンパクエキス、ユリエキス、ハッカ油にも歯根膜線維芽細胞増殖作用があることが分かった。
歯周組織の修復・再生は、歯根膜細胞の増殖から始まり、細胞外マトリックスが形成されていくと考えられるため、上記の素材は歯根膜・歯周組織の修復・再生を促すと考えられる。
歯根膜線維芽細胞(Human Periodontal Ligament Fib
roblast:以下HPDLFと略す、ScienCell Research La
boratories製)を10%FBS含有DMEM(Life Technolog
ies製 Product#11995-065)に懸濁したものを、35mmディッシュに0.9×106個となるように播種し、37℃、5%CO2条件下で24時間培養を行った。ピペットチップ(BM Bio BMT-200RS)を用いてディッシュ中央に創傷ライン(創傷部分)を作製し、次いで、同時にコントロール(0.2%FBS含有DMEMにDMSOを1%となるように加えたもの)又は0.2%FBS含有DMEMにユリエキスを1%加えたものに交換した。その直後及びそれから3時間ごとに、37℃、5%CO2条件下で、タイムラプス(三洋電機株式会社製、MULTI CELL-IMAGING INCUBATOR MCOK-5M)により、創傷ラインへの細胞の浸潤の撮影を行った。21時間後に撮影した写真を、以下の図6に示す。また、21時間後の創傷部分への細胞浸潤率(%)をコントロールと比較したグラフを図7に示す。
A
マクロゴール400 残量
マクロゴール4000 25g
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60 1g
トコフェロール酢酸エステル 2g
B
セチルピリジニウム塩化物水和物 0.05g
アラントイン 0.3g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.4g
カルバゾクロム 0.02g
C
ハッカ油 1g
メントール 1g
ヒノキチオール 0.1g
チモール 0.1g
合計 100g
先ず、80℃で上記A成分を混合・溶解する。その溶解後、上記B成分を添加し、撹拌混合し十分に分散させ、冷却する。50℃まで冷却してから上記C成分を添加し、撹拌混合して冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
A
ワセリン 残量
パラフィン 10g
サラシミツロウ 10g
セタノール 10g
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60 1g
トコフェロール酢酸エステル 2g
B
濃グリセリン 1g
パンテノール 0.3g
C
セチルピリジニウム塩化物水和物 0.1g
アラントイン 0.3g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.4g
メチルセルロース 0.8g
D
ハッカ油 1g
ヒノキチオール 0.1g
合計 100g
先ず、80℃で上記A成分を混合・溶解する。別途、上記B成分を混合しておく。溶解後のA成分に、B成分の混合物及び上記C成分を添加し、撹拌混合して十分に分散させ、冷却する。その後50℃まで冷却してから上記D成分を添加し、撹拌混合し冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
A
流動パラフィン 残量
ポリエチレン末 6g
パルミチン酸デキストリン 1g
マイクロクリスタリンワックス 7g
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60 1g
B
セチルピリジニウム塩化物水和物 0.05g
アラントイン 0.3g
グリチルリチン酸ジカリウム 0.4g
カルボキシビニルポリマー 2g
ヒプロメロース 1g
軽質無水ケイ酸 2g
C
ウイキョウ油 1g
ヒノキチオール 0.1g
合計 100g
先ず、100℃で上記A成分を混合・溶解する。その溶解後に上記B成分を添加し、撹拌混合して十分に分散させ、冷却する。その後50℃まで冷却してから上記C成分を添加し、撹拌混合して冷却することにより、本発明の口腔用軟膏剤を調製できる。
A
精製水 残量
グリチルリチン酸二カリウム 0.05g
L-グルタミン酸塩酸塩 0.5g
カルボキシメチルセルロース 1g
濃グリセリン 5g
香料 0.25g
ソルビトール液 30g
B
イソプロピルメチルフェノール 0.1g
酢酸トコフェロール 0.1g
プロピレングリコール 10g
ハッカ油 0.5g
C
シリカ 8g
ラウレス硫酸酸ナトリウム 2g
合計 100g
先ず、上記A成分を撹拌・溶解後、60℃で加熱溶解した上記B成分を投入する。その後、上記C成分を投入し撹拌することにより、本発明の歯磨組成物を調製できる。
A
精製水 残量
グリチルリチン酸二カリウム 0.05g
酢酸トコフェロール 0.05g
濃グリセリン 10g
クエン酸 0.1g
クエン酸ナトリウム 0.25g
フェノキシエタノール 0.3g
香料 0.1g
ハチミツ 0.01g
B
イソプロピルメチルフェノール 0.05g
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60 2.5g
チモール 0.01g
l-メントール 0.5g
合計 100g
上記A成分を溶解後、60℃で加熱溶解した上記B成分を上記A成分に添加し撹拌することにより、本発明の洗口剤を調製できる。
A
精製水 残量
塩化セチルピリジニウム 0.05g
ε-アミノカプロン酸 0.05g
ポリエチレングリコール 10g
D-マンニトール 0.5g
クエン酸 0.1g
クエン酸ナトリウム 0.25g
メチルパラベン 0.2g
香料 0.1g
ペパーミントエッセンス 0.05g
アロエエキス 0.1g
カンゾウエキス 0.01g
合計 100g
上記各成分の全量を撹拌溶解することにより、本発明の洗口剤を調製できる。
A
精製水 残量
グリチルリチン酸二カリウム 0.03g
ソルビトール 10g
濃グリセリン 10g
エタノール 5g
クエン酸 0.05g
クエン酸ナトリウム 0.2g
香料 0.4g
真珠タンパク質エキス 0.05g
ユリエキス 0.05g
加水分解コラーゲン 0.01g
B
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60 2g
イソプロピルメチルフェノール 0.005g
酢酸トコフェロール 0.01g
ハッカ油 0.1g
l-メントール 0.2g
C
ポリエチレングリコール400 10g
キサンタンガム 1g
ヒアルロン酸ナトリウム 0.05g
合計 100g
上記A成分を溶解後、50℃で加熱溶解した上記B成分を添加して撹拌溶解させる。その後、上記C成分を撹拌分散したものを添加して撹拌することにより、本発明の歯茎マッサージジェルを調製できる。
Claims (5)
- ユリエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、セバシン酸ジエチル、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、D-マンニトール、及びメチルセルロースからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、歯根膜線維芽細胞増殖剤。
- 歯根膜の修復のために用いられる、請求項1記載の歯根膜線維芽細胞増殖剤。
- 歯周病の治療のために用いられる、請求項1又は2記載の歯根膜線維芽細胞増殖剤。
- 歯周病の症状が、歯根膜の崩壊、歯のぐらつきからなる群より選択される少なくとも一種である、請求項3記載の歯根膜線維芽細胞増殖剤。
- ユリエキス、イソ吉草酸イソアミル、ウイキョウ油、セバシン酸ジエチル、ヘスペリジン、ペパーミントエッセンス、D-マンニトール、及びメチルセルロースからなる群より選択される少なくとも一種の有効成分、並びに薬理学的又は生理学的に許容される一種又は二種以上の担体を混合することを特徴とする、歯根膜線維芽細胞増殖剤の製造方法。
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