JP4865991B2 - 共凝集抑制剤 - Google Patents
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当該パラチニットは、シュークロースを原料とし、シュークロースを糖転移酵素によりパラチノースとした後に、水素添加反応させることによって得ることができるが、本発明においては、「粉末パラチニットPNP」(三井製糖)等の市販品を用いることもできる。
従って、上記共凝集抑制作用を有するマンニトール及びパラチニットを用いれば、口腔内病原細菌の歯面への付着・定着を防止でき、口臭、齲蝕及び歯周病等の歯周病関連疾患に対して予防・改善効果が期待できる。特に、マンニトールは、フソバクテリウム ヌクレアタムと口腔内病原細菌及び初期定着細菌の共凝集を共に抑制することから、特に好ましい。
(1)使用菌株
初期定着細菌(Streptococcus gordonii ATCC10558(Sg))と齲蝕原因菌(Streptococcussobrinus B13(SsB13))と口腔内細菌(Fusobacterium nucleatumATCC10953(Fn))を用いた。
初期定着細菌及び齲蝕原因菌は、ブレインハートインフュージョンブロス(ベクトンディッキンソン社製)、Fusobacterium nucleatum(Fn)はGAMブイヨン(日水製薬株式会社)で37℃、10%CO2,10%H2,80%N2の条件下で対数増殖期から定常期まで培養し、5000rpm、5分遠心分離を行い集菌した。その後、CAバッファー(1mM Tris, 0.1mM CaCl2, 0.1mM MgCl2, 150mM NaCl, 0.02% NaN3, pH8.0)で3回遠心洗浄後(5000rpm,5分)、OD600nmで2.0に調製した。
96穴マイクロプレートにマンニトール(和光純薬工業)及びパラチニット(和光純薬工業)を最終濃度10%になるよう 60μL添加後、Fusobacteriumnucleatum(Fn)を 30μL分注攪拌し、初期定着細菌 若しくは齲蝕原因菌を30μL添加した。その後、マイクロプレートリーダー(モレキュラーデバイス社製) を用い1分間隔で30分間吸光度(OD600nm)を測定し、吸光度の変化率Vmax(mOD/min)を計算し、素材の代わりにCAバッファーを添加したもののVmaxをコントロール(100%)とし、相対共凝集率を算出することにより共凝集反応を測定した。
図1に示すとおり、マンニトールでは 16%、パラチニットでは71%となり、マンニトールとパラチニットに齲蝕原因菌とFusobacterium nucleatum(Fn)の共凝集抑制効果がみられた。
Claims (7)
- マンニトール又はパラチニットを有効成分とするフソバクテリウム ヌクレアタム属細菌と他の口腔内細菌との共凝集抑制剤。
- 他の口腔内細菌が齲蝕関連細菌である請求項1記載の共凝集抑制剤。
- 齲蝕関連細菌がストレプトコッカス属細菌である請求項2記載の共凝集抑制剤。
- 齲蝕関連細菌がストレプトコッカス ソブリヌスである請求項2記載の共凝集抑制剤。
- マンニトールを有効成分とし、他の口腔内細菌が初期定着細菌である請求項1記載の共凝集抑制剤。
- 初期定着細菌がストレプトコッカス属細菌である請求項5記載の共凝集抑制剤。
- 初期定着細菌がストレプトコッカス ゴルドニーである請求項5記載の共凝集抑制剤。
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