JP7174109B2 - 腫瘍溶解性ウイルスベクター及びその使用 - Google Patents

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Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１月２７日に出願された米国特許仮出願第６２／２８７，６１９号の優先権を主張するものであり、その内容全体は、参照により本明細書に援用される。
配列表に関する記述
本出願に関連する配列表は、紙媒体の代わりにテキスト形式で提供され、参照により本明細書に援用される。配列表を含むテキストファイルの名称は、ＯＮＣＲ＿００１＿０１ＷＯ＿ＳＴ２．ｔｘｔである。テキストファイルは、７ＫＢであり、２０１７年１月２６日に作成され、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子提出された。
発明の分野
本開示は、がんの治療及び予防のための組み換えウイルスベクターに関する。ウイルスベクターは、次の側面：腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列をウイルスゲノムに挿入することによるウイルス複製制限、がん促進性ｍｉＲＮＡ機能の破壊、がん微小環境リモデリング、及び／またはプロテアーゼ活性化抗体をウイルス粒子に組み込むことによるがん細胞標的化のうちの１つ以上を利用する。
現在の標的化がん治療薬は、腫瘍タンパク質発現プロファイルの不均質性に起因して、狭い範囲のがんにのみ有効である。更に、多くのがん治療は、既存のウイルスベクター、化学療法、放射線及び手術を含め、正常な非がん性細胞の健康及び生存を維持しながらがん性細胞を選択的に治療するには、特異性に欠け、望ましくないオフターゲット効果を生じることがある。そのため、複数のがんに広く有効であり、がん性細胞を選択的に排除することができるがん治療法が当該技術分野において求められている。
腫瘍溶解性ウイルスは、がん細胞に優先的に感染するウイルスであり、複数のがん治療前臨床試験及び臨床試験に使用されている。腫瘍溶解性ウイルスの使用は、健康な細胞が非特異的にウイルス感染するリスクを伴い、非がん性細胞及び組織の死をもたらす。しかし、正常組織とがん性組織で差次的に発現する経路、タンパク質及び遺伝子を利用するようにウイルスを遺伝子操作することで、これらのウイルスの特異性を高め、オフターゲット感染及び細胞死を制限することができる。
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡまたはｍｉＲ）は、その標的メッセンジャーＲＮＡに向かい、分解または翻訳抑制を行うことによって遺伝子発現を制御する、内因性の小さなノンコーディングＲＮＡである。ｍｉＲＮＡは、正常な細胞プロセスと密接に関係しているため、ｍｉＲＮＡの制御異常は、がんを含む広範な疾患の一因となる。多くのｍｉＲＮＡ遺伝子は、がん関連ゲノム領域または脆弱部位に位置しており、ｍｉＲＮＡががんにおいて中心的役割を果たすという証拠を更に強めている。ｍｉＲＮＡは、正常組織と比較してがん組織で差次的に発現し、腫瘍形成との因果関係を有し得る。この異なる腫瘍種での差次的ｍｉＲＮＡ発現を利用することによって、本明細書に記載されるがん治療は、腫瘍溶解性ウイルスの複製が特定のｍｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡ群の発現に基づいて制御されており、広範囲の安全性及び有効プロファイルを有する。更に、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスはまた、腫瘍全体にわたるウイルス伝播を促進するタンパク質、例えば、細胞外マトリックスを制御する遺伝子及びタンパク質の発現を変更させるタンパク質などを発現し得、これによって、その治療効果が増大し得る。
本発明は、がんの治療及び予防に有用な組み換えウイルスベクターに関する。腫瘍溶解性ウイルスベクターは、次の側面：腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列をウイルスゲノムに挿入することによって、ウイルスベクター複製をがん細胞または腫瘍細胞に制限すること、１つ以上の遺伝子であって、その産物（複数可）ががん促進性ｍｉＲＮＡ及び／またはがん細胞外マトリックスの機能を破壊する、１つ以上の遺伝子をウイルスゲノムに組み込むこと、ならびにプロテアーゼ活性化抗体をウイルス粒子に組み込むことによって、ベクターをがん／腫瘍細胞に対して高度に選択的に標的化することを、個別にまたは組み合わせて含む。
いくつかの実施形態において、本発明は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列のコピーを１つ以上含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。いくつかの実施形態において、ウイルスは、単純ヘルペスウイルス、アデノウイルス、ポリオウイルス、ワクシニアウイルス、麻疹ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、オルトミクソウイルス、パルボウイルス、マラバウイルスまたはコクサッキーウイルスである。いくつかの実施形態において、ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子は、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、表３から選択されるｍｉＲの標的配列である。いくつかの実施形態において、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲに組み込まれる。
いくつかの実施形態において、本発明は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列のコピーを１つ以上含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスであって、ウイルスの複製は、第２の細胞におけるウイルスの複製と比較して、第１の細胞において減少または減衰する、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。いくつかの実施形態において、第１の細胞は、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、第２の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して上昇している。いくつかの実施形態において、第１の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルは、第２の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％高い。いくつかの実施形態において、第２の細胞は、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、第１の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して低下している。いくつかの実施形態において、第２の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルは、第１の細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％低い。いくつかの実施形態において、第２の細胞は、がん性細胞である。
いくつかの実施形態において、本発明は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列のコピーを１つ以上含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスであって、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｍｉＲ－５５９に対するものである、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、膵癌、肺癌及び／または結腸癌の治療に使用される。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１及びｍｉＲ－５５９に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－１４５－５ｐ及びｍｉＲ－５５９に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、任意のがん種に由来する腫瘍の治療に使用される。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、ｍｉＲ－２０５ｐ、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ及びｍｉＲ－１２４に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、シュワン腫の治療に使用される。更なる実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２７、ＵＬ１９及び／またはＵＬ３０遺伝子座に挿入される。
いくつかの実施形態において、本発明は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列のコピーを１つ以上含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスであって、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－３７９－５ｐ、ｍｉＲ－４９３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３７０－３ｐ、ｍｉＲ－４１０－３ｐ、ｍｉＲ－４３１－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４１１－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－７５８－３ｐ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８０、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１ｂ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－４９３、ｍｉＲ－５７６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－９９ａに対する標的配列である、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、膀胱癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１２５１－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－１３８－２－３ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２９－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２６４、ｍｉＲ－３９４３、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－３８３－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２８－２－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－８８５－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－７５９、ｍｉＲ－７１５８－３ｐ、ｍｉＲ－７７０－５ｐ、ｍｉＲ－１３５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８８５－５ｐ、ｌｅｔ－７ｇ－５ｐ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１２－３ｐ、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２２、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３１８９－３ｐ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４８３－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５７７、ｍｉＲ－６６３、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－８７３、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｆ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３４ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３４ｃ－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４５２、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－５８４、ｍｉＲ－６２２、ｍｉＲ－６５６、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１８１ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ｂ及び／またはｍｉＲ－３１８９－３ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、脳癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１０ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－５６８３、ｍｉＲ－３１９５、ｍｉＲ－３１８２、ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－５１４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４８３－３ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８９、ｍｉＲ－２０３ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－４２６６、ｍｉＲ－４３２７、ｍｉＲ－５６９４、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１０ｂ、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５８、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１６ｂ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－３００、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｍｉＲ－３３ｂ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ａ、ｍｉＲ－３７９、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４２５、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０２－５ｐ、ｍｉＲ－５１７ａ、ｍｉＲ－５７４－３ｐ、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－８７３、ｍｉＲ－８７４、ｍｉＲ－９２ａ、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－３ｐ及び／またはｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－５ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、乳癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４９１－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－８８６－５ｐ、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－２９ａ及び／またはｍｉＲ－３７５に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、子宮頸癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－６５５－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３６９－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１５、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５５、ｍｉＲ－４８４、ｍｉＲ－５０２、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－９３、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－３０ａ－５ｐ、ｍｉＲ－６２７、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１２９５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－１３０７、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９６ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２４－３ｐ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２８－３ｐ、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４５、ｍｉＲ－３４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－３６１－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３７８ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４４８７、ｍｉＲ－４８３、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５５１ａ、ｍｉＲ－５７４－５ｐ、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９６－５ｐ、ｍｉＲ－２０２－３ｐ、ｍｉＲ－３０ａ及び／またはｍｉＲ－４５１に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、結腸癌または大腸癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－３０１ａ、ｍｉＲ－３０１ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－５４３及び／またはｍｉＲ－３４ｂに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、子宮内膜癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１５１、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－２２７８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－５６４、ｍｉＲ－２７ａ、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－１３７及び／またはｍｉＲ－１９７に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、血液癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０８－３ｐ、ｍｉＲ－５０９－３ｐ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－１０６ａ＊、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８５、ｍｉＲ－１２９－３ｐ、ｍｉＲ－１２９１、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１８２－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－５０９－５ｐ、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３７７及び／またはｍｉＲ－５０６に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、腎癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２２ａ、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１２８－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９５－５ｐ、ｍｉＲ－１９７、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－３ｐ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１－３ｐ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ－１、ｍｉＲ－２９ｂ－２、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３０２ｂ、ｍｉＲ－３０２ｃ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７７、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４４５８、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－４５０ａ、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４８５－５ｐ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－５２０ａ、ｍｉＲ－５２０ｂ、ｍｉＲ－５２０ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－５８２－５ｐ、ｍｉＲ－５９０－５ｐ、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１２、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３７、ｍｉＲ－６７５、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－８７７、ｍｉＲ－９４０、ｍｉＲ－９４１、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－１３２及び／またはｍｉＲ－３１に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、肝癌を治療するために使用される。更なる実施形態において、肝癌は、肝細胞癌である。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－５ｐ、ｍｉＲ－１２６６－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－５１１－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２９７、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－５１１、ｍｉＲ－９９ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４６９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８２、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４４９ｂ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－５４５、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１４、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－６６０、ｍｉＲ－７５１５、ｍｉＲ－９５００、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２６＊、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１４０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２７ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｄ－５ｐ、ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３６１－３ｐ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４５００、ｍｉＲ－４７８２－３ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５１２－３ｐ、ｍｉＲ－５２０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５２６ｂ、ｍｉＲ－６２５＊及び／またはｍｉＲ－９６に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、肺癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８ｂ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７６ｃ、ｍｉＲ－５７３、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－９及び／またはｍｉＲ－９８に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、黒色腫を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５０、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２２０ａ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３２３－５ｐ、ｍｉＲ－３２９、ｍｉＲ－３３８、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－６３２、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－６６８、ｍｉＲ－８７７及び／またはｍｉＲ－９に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、口腔癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４１１、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３２、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－６５５、ｍｉＲ－９、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－５３２－５ｐ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ及び／またはｍｉＲ－７に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、卵巣癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－２１６ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８０２、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－２１６ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－４５０７、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４７、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０＊、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６１５－５ｐ、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－９６、ｍｉＲ－１３２、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３７、ｍｉＲ－４９４及び／またはｍｉＲ－９８に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、膵癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９６、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ－１、ｍｉＲ－１３３ａ－２、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１８７、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２３ａ、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ－１、ｍｉＲ－３０ｃ－２、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ｂ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４７２３－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６２８－５ｐ、ｍｉＲ－６４２ａ－５ｐ、ｍｉＲ－７６５及び／またはｍｉＲ－９４０に対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、前立腺癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３６５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４８６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－５３２－５ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、網膜芽細胞腫を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１２６４、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－１２９８－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１３８－２－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－５ｐ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１２９－１－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１－３－ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－３９４３、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ及び／またはｍｉＲ－１４５－３ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、膠芽腫を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－２０８ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－５ｐ、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ及び／またはｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、頭頸部癌を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－２０８ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－３ｐ、ｍｉＲ－１２９３、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－４８８－３ｐ、ｍｉＲ－９３５、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－１２２－３ｐ、ｍｉＲ－１２２－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－１４１－３ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ、ｍｉＲ－２０５－５ｐ、ｍｉＲ－２００ｃ－３ｐ及び／またはｍｉＲ－２０３ａ－３ｐに対する標的配列である。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、シュワン腫を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、本発明は、（ａ）ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列、（ｂ）１つ以上のタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドであって、当該タンパク質もしくはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ、遺伝子もしくはＴＩＭＰの発現を減少させるか、その機能を阻害する、ポリヌクレオチド、（ｃ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体、及び／または（ｄ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体をコードするポリヌクレオチドのうちの１つ以上を含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。いくつかの実施形態において、ｍｉＲは、がん促進性ｍｉＲまたは微小環境リモデリングｍｉＲである。いくつかの実施形態において、がん促進性ｍｉＲは、表４に列挙されるｍｉＲから選択される。いくつかの実施形態において、遺伝子は、がん遺伝子である。いくつかの実施形態において、がん遺伝子は、表７に列挙される遺伝子から選択される。いくつかの実施形態において、微小環境リモデリングｍｉＲは、表５に列挙されるｍｉＲから選択される。いくつかの実施形態において、ＴＩＭＰは、ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ４から選択される。いくつかの実施形態において、（ｂ）のオリゴヌクレオチドは、ｓｈＲＮＡまたはデコイオリゴヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、
いくつかの実施形態において、本発明は、（ａ）ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列、（ｂ）１つ以上のタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドであって、当該タンパク質もしくはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ、遺伝子もしくはＴＩＭＰの発現を低下させるか、その機能を阻害する、ポリヌクレオチド、（ｃ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体、及び／または（ｄ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体をコードするポリヌクレオチドのうちの１つ以上を含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスであって、当該タンパク質は、ヌクレアーゼ、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）、抗免疫抑制タンパク質または免疫原性抗原である、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。いくつかの実施形態において、ヌクレアーゼは、クラスター化された規則的な間隔のある短い回文の繰り返し配列（ＣＲＩＳＰＲ）関連エンドヌクレアーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）または転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）から選択される。いくつかの実施形態において、ＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼは、ＳｐＣａｓ９、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ１、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ２、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ３、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ４、ＳａＣａｓ９、ＦｎＣｐｆ、ＦｎＣａｓ９、ｅＳｐＣａｓ９、Ｃ２Ｃ１、Ｃ２Ｃ３、Ｃｐｆ１、Ｃａｓ１、Ｃａｓ１Ｂ、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、Ｃａｓ９、Ｃａｓ１０、Ｃｓｙ１、Ｃｓｙ２、Ｃｓｙ３、Ｃｓｅ１、Ｃｓｅ２、Ｃｓｃ１、Ｃｓｃ２、Ｃｓａ５、Ｃｓｎ２、Ｃｓｍ２、Ｃｓｍ３、Ｃｓｍ４、Ｃｓｍ５、Ｃｓｍ６、Ｃｍｒ１、Ｃｍｒ３、Ｃｍｒ４、Ｃｍｒ５、Ｃｍｒ６、Ｃｓｂ１、Ｃｓｂ２、Ｃｓｂ３、Ｃｓｘ１７、Ｃｓｘ１４、Ｃｓｘ１０、Ｃｓｘ１６、ＣｓａＸ、Ｃｓｘ３、Ｃｓｘ１、Ｃｓｘ１５、Ｃｓｆ１、Ｃｓｆ２、Ｃｓｆ３及びＣｓｆ４から選択される。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、ｔｒａｃｒ－ＲＮＡ（ｔｒＲＮＡ）及びｃｒｉｓｐｒ－ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）をコードする非相同ポリヌクレオチドを更に含み、ｃｒＲＮＡは、ｍｉＲまたはＴＩＭＰをコードするゲノムＤＮＡ配列を標的にし、ｔｒＲＮＡは、ＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼの結合及び活性化を促進する。
いくつかの実施形態において、抗免疫抑制タンパク質は、抗制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）タンパク質または抗骨髄由来免疫抑制細胞（ＭＤＳＣ）タンパク質である。いくつかの実施形態において、抗免疫抑制タンパク質は、ＶＨＨ由来遮断剤またはＶＨＨ由来ＢｉＴＥである。
いくつかの実施形態において、タンパク質は、抗腫瘍免疫応答を誘導する。更なる実施形態において、タンパク質は、ＥｐＣＡＭ、葉酸、ＩＦＮβ、抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ１、Ａ２Ａ、抗ＦＧＦ２、抗ＦＧＦＲ／ＦＧＦＲ２ｂ、抗ＳＥＭＡ４Ｄ、ＣＣＬ５、ＣＤ１３７、ＣＤ２００、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＳＦ－１Ｒ、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１３、エンドセリンＢ型受容体、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２、ＩＬ－２１、ＩＬ－３５、ＩＳＲＥ７、ＬＦＡ－１、ＮＧ２（ＳＰＥＧ４としても知られる）、ＳＭＡＤタンパク質、ＳＴＩＮＧ、ＴＧＦβ及びＶＣＡＭ１から選択される。
いくつかの実施形態において、本発明は、（ａ）ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列、（ｂ）１つ以上のタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドであって、当該タンパク質もしくはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ、遺伝子もしくはＴＩＭＰの発現を減少させるか、その機能を阻害する、ポリヌクレオチド、（ｃ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体、及び／または（ｄ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体をコードするポリヌクレオチドのうちの１つ以上を含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスであって、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体は、ウイルスの糖タンパク質エンベロープに組み込まれる、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。いくつかの実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、システインカテプシン、アスパラギン酸カテプシン、カリクレイン（ｈＫ）、セリンプロテアーゼ、カスパーゼ、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）及びディスインテグリンメタロプロテアーゼ（ＡＤＡＭ）から選択されるプロテアーゼによって活性化される。いくつかの実施形態において、プロテアーゼは、カテプシンＫ、カテプシンＢ、カテプシンＬ、カテプシンＥ、カテプシンＤ、ｈＫ１、ＰＳＡ（ｈＫ３）、ｈＫ１０、ｈＫ１５、ｕＰＡ、ｕＰＡＲ、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－７、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１０、ＭＭＰ－１１、ＭＭＰ－１２、ＭＭＰ－１３、ＭＭＰ－１４、ＭＭＰ－１５、ＭＭＰ－１６、ＭＭＰ－１７、ＭＭＰ－１８、ＭＭＰ－１９、ＭＭＰ－２０、ＭＭＰ－２１、ＭＭＰ－２３Ａ、ＭＭＰ－２３Ｂ、ＭＭＰ－２４、ＭＭＰ－２５、ＭＭＰ－２６、ＭＭＰ－２７、ＭＭＰ－２８または表６に列挙されるプロテアーゼから選択される。
いくつかの実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現されるタンパク質に結合する。いくつかの実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、ＮＫＧ２Ｄ、ｃ－ｍｅｔ、ＨＧＦＲ、ＣＤ８、ヘパラン硫酸、ＶＳＰＧ４（ＮＧ２としても知られる）、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１３３、ＣＸＣＲ４、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＬＣ－３、アネキシンＩＩ、ヒトトランスフェリン受容体またはＥｐＣＡＭに結合する。
いくつかの実施形態において、ｍｉＲ標的配列及び／または１つ以上のポリヌクレオチドは、ウイルスゲノムの遺伝子座に挿入される。いくつかの実施形態において、ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、少なくとも１つのポリヌクレオチドは、内部反復接合領域（二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ、ＩＣＰ４及びＩＣＰ４７プロモーターのそれぞれを１コピー含む）、ＩＣＰ０、ＬＡＴ、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２からなる群から選択される１つ以上のウイルス遺伝子座に挿入されるか、これらの遺伝子座の間に挿入される。
いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスをコードする核酸分子を提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスのウイルスストックを提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物を提供する。
いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物に対して、がん性細胞を、腫瘍溶解性ウイルスが当該がん性細胞に感染し、当該がん性細胞内で複製するのに十分な条件下で曝露することを含み、がん性細胞内における腫瘍溶解性ウイルスの複製が細胞死をもたらす、がん性細胞を殺傷する方法を提供する。いくつかの実施形態において、がん性細胞は、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、非がん性細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して低下している。いくつかの実施形態において、がん性細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルは、非がん性細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％低い。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスの複製は、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現の低いがん性細胞において、増加または維持される。いくつかの実施形態において、ウイルス複製は、非がん性細胞におけるウイルス複製と比較して、がん性細胞において少なくとも５％多い。いくつかの実施形態において、細胞は、ｉｎ ｖｉｖｏである。いくつかの実施形態において、細胞は、腫瘍内である。
いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物を対象に投与することを含む、がんの治療を必要とする対象において、がんを治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、対象は、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、非ヒト霊長類またはヒトである。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物は、静脈内、皮下、腫瘍内、筋肉内、または鼻腔内投与される。いくつかの実施形態において、がんは、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵癌、肝癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、黒色腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択される。いくつかの実施形態において、肺癌は、小細胞肺癌または非小細胞肺癌である。いくつかの実施形態において、肝癌は、肝細胞癌（ＨＣＣ）である。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列のコピーを１つ以上含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２）
前記ウイルスが、単純ヘルペスウイルス、アデノウイルス、ポリオウイルス、ワクシニアウイルス、麻疹ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、オルトミクソウイルス、パルボウイルス、マラバウイルスまたはコクサッキーウイルスである、項目１に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３）
前記ウイルスが、単純ヘルペスウイルスであり、ウイルス複製に必要とされる前記１つ以上のウイルス遺伝子が、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２からなる群から選択される、項目１または２に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、表３から選択されるｍｉＲに対する標的配列である、項目１～３のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５）
前記１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる前記１つ以上のウイルス遺伝子の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲに組み込まれる、項目１～４のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６）
第１の細胞における前記ウイルスの複製が、第２の細胞における前記ウイルスの複製と比較して、減少または減衰する、項目１～５のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７）
前記第１の細胞は、前記１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、前記第２の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して上昇している、項目６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目８）
前記第１の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルが、前記第２の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％高い、項目７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目９）
前記第１の細胞が非がん性細胞である、項目６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１０）
前記第２の細胞は、前記１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、前記第１の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して低下している、項目６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１１）
前記第２の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルが、前記第１の細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％低い、項目１０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１２）
前記第２の細胞ががん性細胞である、項目６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１３）
ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｍｉＲ－５５９に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１４）
膵癌、肺癌及び／または結腸癌を治療するための項目１３に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１５）
ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１及びｍｉＲ－５５９に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１６）
ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－１４５－５ｐ及びｍｉＲ－５５９に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１７）
任意のがん種に由来する腫瘍を治療するための項目１５及び／または１６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１８）
ｍｉＲ－２０５ｐ、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ及びｍｉＲ－１２４に対する腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列を含む、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目１９）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２７、ＵＬ１９及び／またはＵＬ３０遺伝子座に挿入される、項目１～１８のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２０）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－３７９－５ｐ、ｍｉＲ－４９３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３７０－３ｐ、ｍｉＲ－４１０－３ｐ、ｍｉＲ－４３１－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４１１－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－７５８－３ｐ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８０、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１ｂ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－４９３、ｍｉＲ－５７６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－９９ａに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２１）
膀胱癌を治療するための項目２０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２２）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１２５１－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－１３８－２－３ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２９－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２６４、ｍｉＲ－３９４３、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－３８３－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２８－２－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－８８５－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－７５９、ｍｉＲ－７１５８－３ｐ、ｍｉＲ－７７０－５ｐ、ｍｉＲ－１３５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８８５－５ｐ、ｌｅｔ－７ｇ－５ｐ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１２－３ｐ、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２２、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３１８９－３ｐ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４８３－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５７７、ｍｉＲ－６６３、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－８７３、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｆ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３４ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３４ｃ－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４５２、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－５８４、ｍｉＲ－６２２、ｍｉＲ－６５６、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１８１ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ｂ及び／またはｍｉＲ－３１８９－３ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２３）
脳癌を治療するための項目２２に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２４）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１０ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－５６８３、ｍｉＲ－３１９５、ｍｉＲ－３１８２、ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－５１４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４８３－３ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８９、ｍｉＲ－２０３ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－４２６６、ｍｉＲ－４３２７、ｍｉＲ－５６９４、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１０ｂ、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５８、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１６ｂ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－３００、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｍｉＲ－３３ｂ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ａ、ｍｉＲ－３７９、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４２５、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０２－５ｐ、ｍｉＲ－５１７ａ、ｍｉＲ－５７４－３ｐ、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－８７３、ｍｉＲ－８７４、ｍｉＲ－９２ａ、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－３ｐ及び／またはｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－５ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２５）
乳癌を治療するための項目２４に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２６）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４９１－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－８８６－５ｐ、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－２９ａ及び／またはｍｉＲ－３７５に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２７）
子宮頸癌を治療するための項目２６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２８）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－６５５－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３６９－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１５、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５５、ｍｉＲ－４８４、ｍｉＲ－５０２、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－９３、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－３０ａ－５ｐ、ｍｉＲ－６２７、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１２９５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－１３０７、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９６ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２４－３ｐ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２８－３ｐ、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４５、ｍｉＲ－３４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－３６１－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３７８ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４４８７、ｍｉＲ－４８３、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５５１ａ、ｍｉＲ－５７４－５ｐ、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９６－５ｐ、ｍｉＲ－２０２－３ｐ、ｍｉＲ－３０ａ及び／またはｍｉＲ－４５１に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目２９）
結腸癌または大腸癌を治療するための項目２８に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３０）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－３０１ａ、ｍｉＲ－３０１ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－５４３及び／またはｍｉＲ－３４ｂに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３１）
子宮内膜癌を治療するための項目３０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３２）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１５１、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－２２７８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－５６４、ｍｉＲ－２７ａ、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－１３７及び／またはｍｉＲ－１９７に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３３）
血液癌を治療するための項目３２に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３４）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０８－３ｐ、ｍｉＲ－５０９－３ｐ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－１０６ａ＊、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８５、ｍｉＲ－１２９－３ｐ、ｍｉＲ－１２９１、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１８２－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－５０９－５ｐ、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３７７及び／またはｍｉＲ－５０６に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３５）
腎癌を治療するための項目３４に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３６）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２２ａ、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１２８－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９５－５ｐ、ｍｉＲ－１９７、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－３ｐ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１－３ｐ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ－１、ｍｉＲ－２９ｂ－２、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３０２ｂ、ｍｉＲ－３０２ｃ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７７、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４４５８、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－４５０ａ、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４８５－５ｐ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－５２０ａ、ｍｉＲ－５２０ｂ、ｍｉＲ－５２０ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－５８２－５ｐ、ｍｉＲ－５９０－５ｐ、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１２、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３７、ｍｉＲ－６７５、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－８７７、ｍｉＲ－９４０、ｍｉＲ－９４１、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－１３２及び／またはｍｉＲ－３１に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３７）
肝癌を治療するための項目３６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３８）
前記肝癌が肝細胞癌である、項目３７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目３９）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－５ｐ、ｍｉＲ－１２６６－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－５１１－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２９７、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－５１１、ｍｉＲ－９９ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４６９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８２、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４４９ｂ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－５４５、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１４、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－６６０、ｍｉＲ－７５１５、ｍｉＲ－９５００、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２６＊、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１４０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２７ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｄ－５ｐ、ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３６１－３ｐ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４５００、ｍｉＲ－４７８２－３ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５１２－３ｐ、ｍｉＲ－５２０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５２６ｂ、ｍｉＲ－６２５＊及び／またはｍｉＲ－９６に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４０）
肺癌を治療するための項目３９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４１）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８ｂ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７６ｃ、ｍｉＲ－５７３、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－９及び／またはｍｉＲ－９８に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４２）
黒色腫を治療するための項目４１に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４３）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５０、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２２０ａ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３２３－５ｐ、ｍｉＲ－３２９、ｍｉＲ－３３８、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－６３２、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－６６８、ｍｉＲ－８７７及び／またはｍｉＲ－９に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４４）
口腔癌を治療するための項目４３に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４５）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４１１、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３２、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－６５５、ｍｉＲ－９、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－５３２－５ｐ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ及び／またはｍｉＲ－７に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４６）
卵巣癌を治療するための項目４５に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４７）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－２１６ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８０２、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－２１６ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－４５０７、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４７、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０＊、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６１５－５ｐ、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－９６、ｍｉＲ－１３２、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３７、ｍｉＲ－４９４及び／またはｍｉＲ－９８に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４８）
膵癌を治療するための項目４７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目４９）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９６、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ－１、ｍｉＲ－１３３ａ－２、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１８７、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２３ａ、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ－１、ｍｉＲ－３０ｃ－２、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ｂ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４７２３－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６２８－５ｐ、ｍｉＲ－６４２ａ－５ｐ、ｍｉＲ－７６５及び／またはｍｉＲ－９４０に対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５０）
前立腺癌を治療するための項目４９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５１）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３６５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４８６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－５３２－５ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５２）
網膜芽細胞腫を治療するための項目５１に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５３）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１２６４、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－１２９８－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１３８－２－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－５ｐ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１２９－１－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１－３－ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－３９４３、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ及び／またはｍｉＲ－１４５－３ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５４）
膠芽腫を治療するための項目５３に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５５）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－２０８ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１４４－５ｐ、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ及び／またはｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５６）
頭頸部癌を治療するための項目５５に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５７）
前記腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列が、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－２０８ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－３ｐ、ｍｉＲ－１２９３、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－４８８－３ｐ、ｍｉＲ－９３５、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－１２２－３ｐ、ｍｉＲ－１２２－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－１４１－３ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ、ｍｉＲ－２０５－５ｐ、ｍｉＲ－２００ｃ－３ｐ及び／またはｍｉＲ－２０３ａ－３ｐに対する標的配列である、項目１～１２のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５８）
シュワン腫を治療するための項目５７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目５９）
（ａ）ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列、
（ｂ）１つ以上のタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドであって、前記タンパク質もしくはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ、遺伝子もしくはＴＩＭＰの発現を減少させるか、その機能を抑制する、前記ポリヌクレオチド、
（ｃ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体、及び／または
（ｄ）少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体をコードするポリヌクレオチドのうちの１つ以上を含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６０）
（ｂ）の前記ｍｉＲが、がん促進性ｍｉＲまたは微小環境リモデリングｍｉＲである、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６１）
前記がん促進性ｍｉＲが、表４に列挙されるｍｉＲから選択される、項目６０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６２）
（ｂ）の前記遺伝子が、がん遺伝子である、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６３）
前記がん遺伝子が、表７に列挙される遺伝子から選択される、項目６２に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６４）
前記微小環境リモデリングｍｉＲが、表５に列挙されるｍｉＲから選択される、項目６０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６５）
（ｂ）の前記ＴＩＭＰが、ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ４から選択される、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６６）
（ｂ）の前記オリゴヌクレオチドが、ｓｈＲＮＡまたはデコイオリゴヌクレオチドである、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６７）
（ｂ）の前記タンパク質が、ヌクレアーゼ、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）、抗免疫抑制タンパク質または免疫原性抗原である、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６８）
前記ヌクレアーゼが、クラスター化された規則的な間隔のある短い回文の繰り返し配列（ＣＲＩＳＰＲ）関連エンドヌクレアーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）または転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）から選択される、項目６７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目６９）
前記ＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼが、ＳｐＣａｓ９、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ１、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ２、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ３、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ４、ＳａＣａｓ９、ＦｎＣｐｆ、ＦｎＣａｓ９、ｅＳｐＣａｓ９、Ｃ２Ｃ１、Ｃ２Ｃ３、Ｃｐｆ１、Ｃａｓ１、Ｃａｓ１Ｂ、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、Ｃａｓ９、Ｃａｓ１０、Ｃｓｙ１、Ｃｓｙ２、Ｃｓｙ３、Ｃｓｅ１、Ｃｓｅ２、Ｃｓｃ１、Ｃｓｃ２、Ｃｓａ５、Ｃｓｎ２、Ｃｓｍ２、Ｃｓｍ３、Ｃｓｍ４、Ｃｓｍ５、Ｃｓｍ６、Ｃｍｒ１、Ｃｍｒ３、Ｃｍｒ４、Ｃｍｒ５、Ｃｍｒ６、Ｃｓｂ１、Ｃｓｂ２、Ｃｓｂ３、Ｃｓｘ１７、Ｃｓｘ１４、Ｃｓｘ１０、Ｃｓｘ１６、ＣｓａＸ、Ｃｓｘ３、Ｃｓｘ１、Ｃｓｘ１５、Ｃｓｆ１、Ｃｓｆ２、Ｃｓｆ３及びＣｓｆ４から選択される、項目６８に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７０）
ｔｒａｃｒ－ＲＮＡ（ｔｒＲＮＡ）及びｃｒｉｓｐｒ－ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）をコードする非相同ポリヌクレオチドを更に含み、前記ｃｒＲＮＡは、ｍｉＲまたはＴＩＭＰをコードするゲノムＤＮＡ配列を標的にし、前記ｔｒＲＮＡは、ＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼの結合及び活性化を促進する、項目６９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７１）
前記抗免疫抑制タンパク質が、抗制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）タンパク質または抗骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）タンパク質である、項目６７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７２）
前記抗免疫抑制タンパク質が、ＶＨＨ由来遮断剤またはＶＨＨ由来ＢｉＴＥである、項目６７に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７３）
（ｂ）の前記タンパク質が、抗腫瘍免疫応答を誘導する、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７４）
前記タンパク質が、ＥｐＣＡＭ、葉酸、ＩＦＮβ、抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ１、Ａ２Ａ、抗ＦＧＦ２、抗ＦＧＦＲ／ＦＧＦＲ２ｂ、抗ＳＥＭＡ４Ｄ、ＣＣＬ５、ＣＤ１３７、ＣＤ２００、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＳＦ－１Ｒ、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１３、エンドセリンＢ型受容体、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２、ＩＬ－２１、ＩＬ－３５、ＩＳＲＥ７、ＬＦＡ－１、ＮＧ２（ＳＰＥＧ４としても知られる）、ＳＭＡＤタンパク質、ＳＴＩＮＧ、ＴＧＦβ及びＶＣＡＭ１から選択される、項目７３に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７５）
（ｃ）または（ｄ）の前記少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体が、ウイルス糖タンパク質エンベロープに組み込まれる、項目５９に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７６）
前記プロテアーゼ活性化抗体が、システインカテプシン、アスパラギン酸カテプシン、カリクレイン（ｈＫ）、セリンプロテアーゼ、カスパーゼ、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）及びディスインテグリンメタロプロテアーゼ（ＡＤＡＭ）から選択されるプロテアーゼによって活性化される、項目５９または７５に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７７）
前記プロテアーゼが、カテプシンＫ、カテプシンＢ、カテプシンＬ、カテプシンＥ、カテプシンＤ、ｈＫ１、ＰＳＡ（ｈＫ３）、ｈＫ１０、ｈＫ１５、ｕＰＡ、ｕＰＡＲ、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－７、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１０、ＭＭＰ－１１、ＭＭＰ－１２、ＭＭＰ－１３、ＭＭＰ－１４、ＭＭＰ－１５、ＭＭＰ－１６、ＭＭＰ－１７、ＭＭＰ－１８、ＭＭＰ－１９、ＭＭＰ－２０、ＭＭＰ－２１、ＭＭＰ－２３Ａ、ＭＭＰ－２３Ｂ、ＭＭＰ－２４、ＭＭＰ－２５、ＭＭＰ－２６、ＭＭＰ－２７、ＭＭＰ－２８または表６に列挙されるプロテアーゼから選択される、項目７６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７８）
前記プロテアーゼ活性化抗体が、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現されるタンパク質に結合する、項目５９または７５に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目７９）
前記プロテアーゼ活性化抗体が、ＮＫＧ２Ｄ、ｃ－ｍｅｔ、ＨＧＦＲ、ＣＤ８、ヘパラン硫酸、ＶＳＰＧ４（ＮＧ２としても知られる）、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１３３、ＣＸＣＲ４、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＬＣ－３、アネキシンＩＩ、ヒトトランスフェリン受容体またはＥｐＣＡＭに結合する、項目７８に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目８０）
（ａ）の前記ｍｉＲ標的配列、（ｂ）の前記１つ以上のポリヌクレオチド及び／または（ｄ）の前記１つ以上のポリヌクレオチドが、前記ウイルスゲノムの遺伝子座に挿入される、項目５９～７９のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目８１）
前記ウイルスが、単純ヘルペスウイルスであり、前記少なくとも１つのポリヌクレオチドが、内部反復接合領域（二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ、ＩＣＰ４及びＩＣＰ４７プロモーターのそれぞれを１コピー含む）、ＩＣＰ０、ＬＡＴ、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２からなる群から選択される１つ以上のウイルス遺伝子座に挿入されるか、これらの遺伝子座の間に挿入される、項目８０に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目８２）
先行項目のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルスをコードする、核酸分子。
（項目８３）
項目１～８１のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルスを含む、ウイルスストック。
（項目８４）
項目１～８１のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルスと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
（項目８５）
がん性細胞を殺傷する方法であって、項目１～８１のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物に対して、前記がん性細胞を、前記腫瘍溶解性ウイルスが前記がん性細胞に感染し、前記がん性細胞内で複製するのに十分な条件下で曝露することを含み、前記がん性細胞内における前記腫瘍溶解性ウイルスの複製が細胞死をもたらす、前記方法。
（項目８６）
前記がん性細胞は、前記１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が、非がん性細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して低下している、項目８５に記載の方法。
（項目８７）
前記がん性細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルが、前記非がん性細胞における前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％低い、項目８６に記載の腫瘍溶解性ウイルス。
（項目８８）
前記腫瘍溶解性ウイルスの複製が、前記１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる前記腫瘍抑制性ｍｉＲの発現の低いがん性細胞において、増加または維持される、項目８５～８７のいずれかに記載の方法。
（項目８９）
前記ウイルス複製が、前記非がん性細胞における前記ウイルス複製と比較して、前記がん性細胞において少なくとも５％多い、項目８８に記載の方法。
（項目９０）
前記細胞がｉｎ ｖｉｖｏである、項目８５～８９のいずれかに記載の方法。
（項目９１）
前記細胞が腫瘍内にある、項目９０に記載の方法。
（項目９２）
項目１～８１のいずれかに記載の腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物を対象に投与することを含む、がんの治療を必要とする前記対象において、がんを治療する方法。
（項目９３）
前記対象が、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、非ヒト霊長類またはヒトである、項目８５～９２のいずれか一項に記載の方法。
（項目９４）
前記腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物が、静脈内、皮下、腫瘍内、筋肉内、または鼻腔内投与される、項目９２または９３に記載の方法。
（項目９５）
前記がんが、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵癌、肝癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、黒色腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択される、項目９２に記載の方法。
（項目９６）
前記肺癌が、小細胞肺癌または非小細胞肺癌である、項目９５に記載の方法。
（項目９７）
前記肝癌が、肝細胞癌（ＨＣＣ）である、項目９６に記載の方法。
がん性及び非がん性脳組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性膀胱組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性乳房組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性結腸組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 膠芽腫及び非がん性脳組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性頭頸部組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性肺組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 がん性及び非がん性膵臓組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 シュワン腫組織及び非シュワン腫組織における、選択された２５のｍｉＲＮＡに対応するｍｉＲＮＡ発現プロファイルのヒートマップを示す。 非がん性組織（正常）と比較した全腫瘍種（ＣＡ）におけるｍｉＲ－４５１ａ発現の下方制御を示す。 全腫瘍種（ＣＡ）におけるｍｉＲ－１発現の下方制御、非がん性組織（正常）におけるｍｉＲ－１の中程度の発現、及び非がん性頭頸部組織（Ｈ＆Ｎ）におけるｍｉＲ－１の高発現を示す。 全腫瘍種（ＣＡ）におけるｍｉＲ－５５９発現の下方制御、非がん性組織（正常）におけるｍｉＲ－５５９の低発現、及び非がん性肺組織におけるｍｉＲ－５５９の高発現を示す。 全腫瘍種（ＣＡ）におけるｍｉＲ－１４５－５ｐ発現の下方制御、及び非がん性組織（正常）の大部分におけるｍｉＲ－１４５－５ｐの高発現を示す。 結腸、肺及び膵臓の腫瘍種（ＣＡ）におけるｍｉＲ－１４３－３ｐ発現の下方制御、ならびに非がん性組織（正常）の大部分におけるｍｉＲ－１４３－３ｐの高発現を示す。 実施例２に記載される、ｍｉＲＮＡの発現及び減衰のレポーター遺伝子系を示す。図１５Ａは、ｍｉＲＮＡ発現プラスミドの発現を誘導するｐＴｅｔＲ ｔｅｔリプレッサープラスミドの模式図を示す。図１５Ｂは、ｔｅｔ誘導性ｍＣｈｅｒｒｙ及びｍｉＲＮＡ発現カセットを含有するｐＴＦ－００２ ｍｉＲＮＡ発現プラスミドの模式図を示す。図１５Ｃは、不安定化ＧＦＰ（ｄｓＧＦＰ）の読み出しを可能にするｐＴＦ－００４ｍｉＲＮＡ減衰レポーター遺伝子の模式図を示す。 図１５に示され、かつ実施例２に記載されるレポーター系を使用した、ｍｉＲ－１２２の発現及び減衰を示す。 図１５に示され、かつ実施例２に記載されるレポーター系を使用した、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－３４ａ及びＬｅｔ７ａ媒介性ＧＦＰ減衰を例示する。円で囲んだウェルは、ＧＦＰ発現レベルの低下を示す。 図１５に示され、かつ実施例２に記載されるレポーター系を使用した、ｍＣｈｅｒｒｙ発現によって示されるｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－３４ａ及びＬｅｔ７ａの発現を例示する。 図１５に示され、かつ実施例２に記載されるレポーター系を使用した、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１媒介性ＧＦＰ減衰を例示する。円で囲んだウェルは、ＧＦＰ発現レベルの低下を示す。 図１５に示され、かつ実施例２に記載されるレポーター系を使用した、ｍＣｈｅｒｒｙ発現によって示されるｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１の発現を例示する。 ｍｉＲ－１２２及びｍｉＲ－１８４のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－３４ａ及びｍｉＲ－１８４のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 Ｌｅｔ７ａ及びｍｉＲ－１８４のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１２４及びｍｉＲ－１８４のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１４５及びｍｉＲ－１８４のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１２５及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１２６及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１２７及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－１３３及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ｍｉＲ－２２３及びｍｉＲ－４５１のＧＦＰ蛍光減衰の定量を示す。 ＩＣＰ２７及びＩＣＰ４遺伝子に挿入された、様々なｍｉＲＮＡに対する標的配列を含む、ｍｉＲ減衰型ＨＳＶ構築物を示す。 非がん性（有糸分裂後肺）細胞及びがん性（Ａ２５３）細胞におけるｍｉＲ－１２５によるＨＳＶ減衰を例示する。 非がん性（ＰＭ肺）細胞及びがん性（Ａ２５３）肺細胞におけるｍｉＲ－１２５によるＨＳＶ減衰のｑＰＣＲに基づく定量を示す。 ＨＣＣ１３９５細胞とＡ２５３細胞におけるｍｉＲ－１４５によるＨＳＶ減衰の蛍光に基づく定量を例示する。 ＨＣＣ１３９５細胞とＡ２５３細胞におけるｍｉＲ－１４５によるＨＳＶ減衰のｑＰＣＲに基づく定量を示す。 正常肺細胞におけるｍｉＲ－１９９ａ－５ｐとｍｉＲ－１４３－３ｐによるＨＳＶ減衰の蛍光に基づく定量を例示する。 正常肺細胞におけるｍｉＲ－１９９ａ－５ｐとｍｉＲ－１４３－３ｐによるＨＳＶ減衰のｑＰＣＲに基づく定量を示す。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を例示する。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＵＬ１９－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＵＬ１９－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＵＬ１９－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんまたは良性過剰増殖性疾患の治療のためのＵＬ１９－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんの治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ゲノム編集ＨＳＶベクターの模式図を示す。 がんの治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ゲノム編集微小環境リモデリングＨＳＶベクターの模式図を示す。 膵癌、肺癌及び結腸癌の治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 複数のがん種の治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。 シュワン腫の治療のためのＩＣＰ４－ＴｍｉＲＮＡ・ＩＣＰ２７－ＴｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶベクターの模式図を示す。
いくつかの態様において、本発明は、ウイルスベクター複製を腫瘍細胞に効果的に制限するために、ｍｉＲＮＡの差次的発現プロファイルを利用する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるウイルスベクターはまた、腫瘍増殖、転移の減少、及び／またはウイルス伝播の増強を可能にする腫瘍微小環境リモデリングのために、特定のｍｉＲＮＡの発現を破壊する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるウイルスベクターは、腫瘍細胞への標的化を容易にするために、ウイルスベクター上の表面分子を使用することを包含する。これらの側面を個別にまたは組み合わせて適用して、広範ながん種を１つのウイルスベクターで治療することが潜在的に可能なウイルスベクターを開発することができる。したがって、本発明は、更に、疾患及び障害（例えば、がん）の治療及び予防に使用するための組み換え腫瘍溶解性ウイルスベクターを包含する。いくつかの実施形態において、本発明は、広範ながんの治療に適した安全かつ有効的な組み換えウイルスベクターを可能にするために、内因性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）を利用する。
本明細書で使用される節の見出しは、単に構成目的のものであり、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。特許、特許出願、記事、書籍及び論文を含むが、これらに限定されない、本明細書で引用される全ての文書または文書の一部は、その全体があらゆる目的のために参照により本明細書に明確に援用される。援用される文書または文書の一部のうちの１つ以上が、本出願における用語の定義と矛盾する用語の定義をしている場合、本出願に示される定義が優先される。しかし、本明細書で引用される任意の参考文献、記事、出版物、特許、特許公報及び特許出願の言及は、世界の任意の国で、それらが有効な先行技術を構成し、または共通の一般知識の一部を形成するという承認または何らかの示唆の形態ではなく、そのように解釈されるべきではない。
本発明の記載において、任意の濃度範囲、パーセンテージ範囲、比率範囲または整数範囲は、特に指定のしない限り、列挙される範囲内の任意の整数の値を含み、必要に応じて、その分数（整数の１／１０及び１／１００など）を含むものと理解される。本明細書で使用される「ａ」及び「ａｎ」という用語は、特に指定のない限り、列挙される構成成分のうちの「１つ以上」を指すことを理解されたい。選択肢（例えば、「または」）の使用は、選択肢の一方、両方またはその任意の組み合わせのいずれかを意味することを理解されたい。本明細書で使用される、用語「ｉｎｃｌｕｄｅ（含む）」及び「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む）」は、同義的に使用される。本明細書で使用されるとき、「複数」は、１つ以上の構成成分（例えば、１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列）を指し得る。
腫瘍溶解性ウイルス
いくつかの実施形態において、本発明は、１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列の１つ以上のコピーが、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを提供する。本明細書で使用されるとき、「腫瘍溶解性ウイルス」という用語は、がん細胞に感染するように改変されているか、天然に優先的にがん細胞に感染する、ウイルスを指す。腫瘍溶解性ウイルスの例は、当該技術分野において知られており、限定するものではないが、単純ヘルペスウイルス、アデノウイルス、ポリオウイルス、ワクシニアウイルス、麻疹ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、オルトミクソウイルス、パルボウイルス、マラバウイルスまたはコクサッキーウイルスが挙げられる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルスベクター中に組み込まれる。「ベクター」という用語は、別の核酸分子を輸送または運搬することができる核酸分子を指すために本明細書で使用される。輸送される核酸は、通常、ベクター核酸分子に連結される（例えば、挿入される）。ベクターは、細胞内で自律複製を誘導する配列を有し得るか、宿主細胞ＤＮＡへの組み込みを可能にするのに十分な配列を有し得る。ウイルスベクターは、時に、「組み換えウイルス」または「ウイルス」と称されることがある。「腫瘍溶解性ウイルス」及び「腫瘍溶解性ベクター」という用語は、本明細書において区別なく用いられる。特定の実施形態において、組み換えウイルスベクターは、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１５／０６６０４２号（その全体を参照により援用する）に記載されている、腫瘍選択的にベクター複製ができる単純ヘルペスウイルスである。
「マイクロＲＮＡ」、「ｍｉＲＮＡ」及び「ｍｉＲ」という用語は、本明細書において区別なく用いられ、その標的メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）に向かい、分解または翻訳抑制を行うことによって遺伝子発現を制御する、内因性の小さなノンコーディングＲＮＡを指す。ｍｉＲは、複数のがん種を含む広範な病態において、差次的に発現される。いくつかの態様において、所与のがん種またはがん組織のがん細胞は、非がん性対照細胞と比較して、ｍｉＲの差次的発現を示す。本明細書で使用されるとき、「ｏｎｃｏｍｉＲ」という用語は、発がん、悪性転換または転移に（正または負のいずれかで）関係するｍｉＲを指す。いくつかの態様において、特定のｏｎｃｏｍｉＲの発現レベルは、特定のがんの発生または維持に関係している。このようなｍｉＲは、本明細書において、「がん促進性ｍｉＲ」と称される。
いくつかの実施形態において、がん促進性ｍｉＲの発現は、非がん性対照と比較して、がん性細胞または組織において上昇する。例えば、がん性細胞におけるがん促進性ｍｉＲの発現は、非がん性細胞または組織におけるがん促進性ｍｉＲの発現と比較して、少なくとも５％上昇し得る。いくつかの実施形態において、がん促進性ｍｉＲの発現は、非がん性細胞または組織におけるがん促進性ｍｉＲの発現と比較して、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、１０００％またはそれ以上、上昇する。いくつかの態様において、がん性細胞または組織は、非がん性対照細胞または対照組織で発現されないがん促進性ｍｉＲを発現し得る。いくつかの実施形態において、がん促進性ｍｉＲの発現は、異なるがん種に由来するがん性細胞と比較して、がん性細胞または組織において上昇する。例えば、あるがん性細胞におけるがん促進性ｍｉＲの発現は、異なるがん種に由来するがん性細胞と比較して少なくとも５％上昇し得る。いくつかの実施形態において、がん促進性ｍｉＲの発現は、異なるがん種に由来するがん性細胞と比較して、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、１０００％またはそれ以上、上昇する。がん組織でしばしば過剰発現されるがん促進性ｍｉＲＮＡの例には、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－１５５及びｍｉＲ－１７－９２が挙げられるが、これらに限定されない。がん促進性ｍｉＲの更なる例は、表４に列挙される。
いくつかの実施形態において、特定のｏｎｃｏｍｉＲの発現は、発がん及び／または転移の予防及び／または遅延に関係する。このようなｏｎｃｏｍｉＲは、その発現ががんの発生を予防または抑制することから、本明細書において、「腫瘍抑制ｍｉＲ」または「腫瘍抑制性ｍｉＲ」と称される。いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲの発現低下は、がんを引き起こすことがある。したがって、いくつかの態様において、腫瘍抑制性ｍｉＲは、健康な細胞で発現され、がん性細胞では発現されない。いくつかの態様において、特定の腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、がん性細胞と比較して、健康な細胞において上昇する。例えば、健康な（例えば、非がん性）細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、がん性細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して、少なくとも５％上昇し得る。いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、がん性細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と比較して、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、１０００％またはそれ以上、上昇する。いくつかの実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、体内の異なる組織種または位置に由来する正常細胞と比較して、正常細胞または正常組織において上昇する。例えば、ある正常細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、体内の異なる組織種または位置に由来する正常細胞と比較して、少なくとも５％上昇し得る。いくつかの実施形態において、ある正常細胞における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、体内の異なる組織種または位置に由来する正常細胞と比較して、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％、３００％、４００％、５００％、１０００％またはそれ以上、上昇する。腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡの例には、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－３４及びｌｅｔ－７ファミリーのｍｉＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。腫瘍抑制性ｍｉＲの更なる例は、表３及び表８に列挙される。
がんの病原は、不均質かつ多遺伝子性のプロセスである。したがって、特定の経路の活性化及び特定の遺伝子の発現は、ある状況においては、がん発生をもたらすことがあり、異なる状況において活性化または発現したときには、異なる結果または反対の結果を生じることがある。したがって、特定の遺伝子またはｍｉＲを、「がん遺伝子」もしくは「がん促進性ｍｉＲ」または「腫瘍抑制遺伝子」もしくは「腫瘍抑制性ｍｉＲ」と特徴付けることは、二者択一の区別ではなく、状況に依存することが多い。例えば、ｍｉＲ－１５２ｂは、大部分の血液悪性腫瘍では、がん促進性ｍｉＲとして機能するが、多くの固形腫瘍では、腫瘍抑制性ｍｉＲとして機能する。更に、特定のｍｉＲは、がん性細胞及び非がん性細胞の両方で高度に発現される場合がある。例えば、ｍｉＲ－１５５は、正常細胞で高度に発現され、マクロファージ極性化において重要な役割を果たすが、がん細胞においても高度に発現される。したがって、本明細書に記載されるｍｉＲ減衰型ゲノム編集・微小環境リモデリング腫瘍溶解性ウイルスの開発は、ある細胞集団または組織における特定のｍｉＲまたはｍｉＲ群の別の細胞集団または組織と比較した差次的発現を基礎とする。当業者であれば、腫瘍抑制性ｍｉＲという用語が、一般に、がん性細胞または組織と比較して非がん性細胞または組織で高度に発現されるｍｉＲを指すこと、また、がん促進性ｍｉＲという用語が、一般に、非がん性細胞または組織と比較してがん性細胞または組織で高度に発現されるｍｉＲを指すことを理解するであろう。当業者であれば、更に、あるがん種において腫瘍抑制性ｍｉＲと特徴付けられたｍｉＲが、別のがん種において腫瘍抑制性ｍｉＲとして機能する場合もあれば、機能しない場合もあること、また、あるがん種においてがん促進性ｍｉＲとして特徴付けられたｍｉＲが、別のがん種においてがん促進性ｍｉＲとして機能する場合もあれば、機能しない場合もあることを理解するであろう。
表１は、選択された１２のｏｎｃｏｍｉＲ（９つの腫瘍抑制遺伝子及び３つのがん促進性ｍｉＲＮＡ）と多数のがんとの関係を示す。３，４１０のｏｎｃｏｍｉＲとがんとの関係の一覧を表２に示す。ｍｉＲＮＡは、細胞増殖及びアポトーシスの制御に関与するタンパク質の多くの転写物を制御する。制御されるタンパク質には、従来のがん原タンパク質ならびにＲａｓ、Ｍｙｃ、Ｂｃｌ２、ＰＴＥＮ及びｐ５３などの腫瘍抑制因子が含まれる。したがって、ｍｉＲＮＡの異常発現は、多くの場合、がんの発生に関与しており、がん促進性ｍｉＲＮＡを阻害するか、減少した腫瘍抑制ｍｉＲＮＡを置き換えるかのいずれかによって、治療的に修正することができる。更に、がん性細胞と非がん性細胞における特定のｏｎｃｏｍｉＲの差次的発現は、がん治療薬をがん細胞に特異的に標的にする手段として利用することができる。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスベクターは、次の特性：腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列をウイルスゲノムに挿入することによって、ウイルスベクター複製をがん細胞もしくは腫瘍細胞に制限すること、１つ以上のポリヌクレオチドであって、その産物（複数可）ががん促進性ｍｉＲＮＡ及び／もしくはがん細胞外マトリックスの機能を破壊する、１つ以上のポリヌクレオチドをウイルスゲノムに組み込むこと、ならびに／またはベクターをがん細胞及び／もしくは腫瘍細胞に対して高度に選択的に標的化するために、プロテアーゼ活性化抗体をウイルス粒子に組み込むことを、個別にまたは組み合わせて含み得る。
本発明の一態様は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列（例えば、表３または表８に列挙されるｍｉＲＮＡから選択されるｍｉＲＮＡ）のコピーを複数含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルス（またはウイルスベクター）を含む。ある特定の実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、または少なくとも１０のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列を含み得る。正常（非がん性）細胞において発現される腫瘍抑制ｍｉＲＮＡは、このような標的配列に結合し、ｍｉＲＮＡ標的配列を含有するウイルス遺伝子の発現を抑制することができ、これにより、健康な非がん性細胞におけるウイルス複製が制限される。このような組み換え腫瘍溶解性ウイルス及び／またはベクターは、本明細書において、腫瘍抑制性ｍｉＲを発現しない細胞またはその発現が低下している細胞と比較して、組み込まれた腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲを発現する細胞において、ウイルス複製が減少または減衰することから、「ｍｉＲ減衰型」または「複製制限型」と称される。ウイルス複製は、ウイルス複製に必要とされる主要遺伝子に腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡを組み込むことによって、腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡを発現する正常な二倍体細胞において条件的に抑制することができ、腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡを発現しない細胞において、通常とおり進行され得る。このような実施形態において、健康な非がん性細胞は、正常細胞から、組み換えウイルスベクターによる感染の溶解作用から保護される。
ある特定の実施形態において、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列は、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の１つ以上の遺伝子の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）及び／または３’ＵＴＲに組み込まれる。腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡは、正常な二倍体細胞において、腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列を含む、操作された３’または５’ノンコーディング配列に結合することができるが、これらの腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡは、形質転換細胞または悪性細胞において欠如している。したがって、ウイルス複製は、腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡを欠く細胞またはその発現が低下している細胞で進行し得る。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列は、複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子に組み込まれる。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、複製に必要とされる１つのウイルス遺伝子に組み込まれた、同一の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の複数コピーを含み得る。例えば、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のコピーが、複製に必要とされるウイルス遺伝子に組み込まれ得る。特定の実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の２～６つのコピーが、複製に必要とされるウイルス遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれる。更なる実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の４つのコピーが、複製に必要とされるウイルス遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれる。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、複製に必要とされる複数のウイルス遺伝子に組み込まれた、同じ腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の複数コピーを含み得る。例えば、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のコピーが、ウイルス複製に必要とされる１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の遺伝子に組み込まれ得る。特定の実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の２～６つのコピーが、複製に必要とされる２つ以上のウイルス遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれる。更なる実施形態において、腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の少なくとも４つのコピーが、複製に必要とされる２つ以上のウイルス遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれる。
いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、複製に必要とされる１つのウイルス遺伝子に組み込まれた、２つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲに対する標的配列を含み得る。例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の異なる腫瘍抑制性ｍｉＲに対する標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１つの遺伝子に組み込まれ得る。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、複製に必要とされる複数のウイルス遺伝子に組み込まれた、２つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲに対する標的配列を含み得る。例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の異なる腫瘍抑制性ｍｉＲに対する標的配列が、ウイルス複製に必要とされる１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の遺伝子に組み込まれ得る。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、少なくとも２つの異なる腫瘍抑制性ｍｉＲ（例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０の異なる腫瘍抑制性ｍｉＲ）に対する複数の標的配列（例えば、１つの標的配列の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０のコピー）を含み得る。このような実施形態において、第１の腫瘍抑制性ｍｉＲに対する複数の標的配列は、複製に必要とされる第１の遺伝子に組み込まれ得、第２の腫瘍抑制性ｍｉＲに対する複数の標的配列は、複製に必要とされる第２の遺伝子に組み込まれ得、第３の腫瘍抑制性ｍｉＲに対する複数の標的配列は、複製に必要とされる第３の遺伝子に組み込まれ得るなどである。特定の実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスベクターは、複製に必要とされる第１の遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれた、第１の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の少なくとも２つ～少なくとも８つのコピーと、複製に必要とされる第２の遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれた、第２の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の少なくとも２つ～少なくとも８つのコピーと、複製に必要とされる第３の遺伝子の３’または５’ＵＴＲに組み込まれた、第３の腫瘍抑制性ｍｉＲ標的配列の少なくとも２つ～少なくとも８つのコピーとを含む。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるｍｉＲ減衰型腫瘍溶解性ウイルスは、組み込まれたｍｉＲ標的配列のうちの１つ以上に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲを発現する細胞において、ウイルス複製が減少する。「ウイルス複製」は、所与の時間内に特定の細胞または細胞集団で生じるウイルス複製サイクルの総数を指す。いくつかの実施形態において、ウイルス複製は、所与の時間にわたる総ウイルス力価を評価することによって、または存在するウイルスゲノムのコピー数を評価することによって（例えば、配列決定によって）、直接測定することができる。いくつかの実施形態において、ウイルスベクターは、蛍光レポーター遺伝子などの検出可能な標識を追加で含み得る。このような実施形態において、ウイルス複製は、レポーター遺伝子の蛍光強度またはレポーター遺伝子を発現する細胞の数を測定することによって、評価することができる。いくつかの実施形態において、ウイルス複製は、所与の時間にわたって生細胞の数を評価することによって、間接的に測定することができる。例えば、ウイルス複製のレベルは、経時的な生細胞の数と逆相関すると想定される。
本明細書で使用される「ウイルス複製の減少」は、ウイルス複製のレベルが、第２の細胞または第２の細胞集団と比較して、第１の細胞または第１の細胞集団で低いことを指す。いくつかの実施形態において、第１の細胞または第１の細胞集団におけるウイルス複製のレベルは、第２の細胞または細胞集団におけるウイルス複製のレベルと比較して、少なくとも５％低下する。いくつかの実施形態において、第１の細胞または第１の細胞集団におけるウイルス複製のレベルは、第２の細胞または細胞集団におけるウイルス複製のレベルと比較して、少なくとも５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上低下する。いくつかの実施形態において、第１の細胞または第１の細胞集団におけるウイルス複製は、第２の細胞または細胞集団におけるウイルス複製と比較して、完全に阻害される。
いくつかの実施形態において、第１の細胞または第１の細胞集団におけるウイルス複製の減少は、複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子に組み込まれた１つ以上のｍｉＲ標的配列に結合することができる腫瘍抑制性ｍｉＲの発現と相関する。したがって、いくつかの実施形態において、組み込まれたｍｉＲ標的配列に対応する腫瘍抑制性ｍｉＲの発現は、複製遺伝子の発現を阻害または減少させ、これにより、ウイルス複製を阻害または減少させる。いくつかの実施形態において、第２の細胞または第２の細胞集団は、腫瘍抑制性ｍｉＲを発現しないか、その発現レベルが低下している。いくつかの実施形態において、組み込まれたｍｉＲ標的配列に対応する腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が欠如または低下していることにより（例えば、がん細胞内）、ウイルス複製の進行が可能となる。いくつかの実施形態において、第２の細胞または細胞集団における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルは、第１の細胞または集団における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルよりも少なくとも５％低い。いくつかの実施形態において、第２の細胞または細胞集団における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルは、第１の細胞または集団における腫瘍抑制性ｍｉＲの発現レベルと比較して、少なくとも５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％またはそれ以上、低下する。いくつかの実施形態において、第２の細胞は、腫瘍抑制性ｍｉＲを発現しない。特定の実施形態において、第１の細胞は、非がん性細胞であり、第２の細胞は、がん性細胞である。
いくつかの態様において、腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピー（例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つまたはそれ以上のコピー）は、ウイルスゲノムの遺伝子座にタンデムで挿入される。このような実施形態において、標的配列の複数コピーは、リンカー配列またはスペーサー配列によって分離されてもよい。いくつかの実施形態において、リンカー配列及び／またはスペーサー配列は、４つ以上のヌクレオチドを含む。例えば、スペーサー配列またはリンカー配列は、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５個以上のヌクレオチドを含み得る。いくつかの実施形態において、リンカー配列またはスペーサー配列は、約５～約２０個のヌクレオチドを含む。更なる実施形態において、リンカー配列またはスペーサー配列は、約８～約１６個のヌクレオチドを含む。本発明を決して限定するものではないが、例示的な実施形態として、腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座にタンデムで挿入された次のサブユニット：（ａ）第１の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡに対する標的配列－リンカー配列もしくはスペーサー配列－第１の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡに対する標的配列、または（ｂ）第１の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡに対する標的配列－リンカー配列もしくはスペーサー配列－第２の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡに対する標的配列の１つ以上を少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つまたは少なくとも１０含み得る。いくつかの実施形態において、ｍｉＲＮＡ標的配列は、ｍｉＲＮＡの逆相補鎖である。
いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）であり、ウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子は、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及び／またはＵＳ１２である。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）であり、１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列は、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＵＬ１９及びＩＣＰ２７遺伝子のうちの１つ以上に組み込まれる。ある特定の実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスベクターは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上の遺伝子（例えば、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１またはＵＳ１２）の５’または３’ＵＴＲに組み込まれた１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列（例えば、表３に列挙される腫瘍抑制性ｍｉＲのいずれか）を含む、ＨＳＶである（例えば、図３９～４９）。
いくつかの実施形態において、複製制限型ウイルスベクター（例えば、ｍｉＲ減衰型ウイルスベクター）は、少なくとも１つのｌｅｔ－７標的配列を含み、肺癌を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－１５ａ及び／または少なくとも１つのｍｉＲ－１６Ａの標的配列を含み、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－１２５ｂ、少なくとも１つのｍｉＲ－１４５、少なくとも１つのｍｉＲ－２１及び／または少なくとも１つのｍｉＲ－１５５の標的配列を含み、乳癌を治療するために使用される。他の実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－１４３及び／または少なくとも１つのｍｉＲ－１４５の標的配列を含み、大腸癌を治療するために使用される。ある特定の実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－１８１ａ、少なくとも１つのｍｉＲ－１８１ｂ及び／または少なくとも１つのｍｉＲ－１８１ｃの標的配列を含み、膠芽腫を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－１９９ａ＊、少なくとも１つのｍｉＲ－１９５、少なくとも１つのｍｉＲ－１９９ａ、少なくとも１つのｍｉＲ－２００ａ及び／または少なくとも１つのｍｉＲ－１２５ａの標的配列を含み、肝癌（例えば、肝細胞癌）を治療するために使用される。
特定の実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－４５１ａ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－１４３－３ｐ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－５５９標的配列及び少なくとも１つのｍｉＲ－１２４標的配列を含み、膵臓、肺及び／または結腸癌の治療に使用される。このような実施形態において、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－５５９及びｍｉＲ－１２４に対する標的配列は、ウイルス複製に必要とされる２つ以上の遺伝子（例えば、ＩＣＰ４及びＩＣＰ２７）に組み込まれる。更なる特定の実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－４５１ａ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－１４５－５ｐ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－５５９標的配列、及び少なくとも１つのｍｉＲ－１２４標的配列を含み、本明細書に記載される任意のがん種の治療に使用される。このような実施形態において、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－５５９及びｍｉＲ－１２４に対する標的配列は、ウイルス複製に必要とされる２つ以上の遺伝子（例えば、ＩＣＰ４及びＩＣＰ２７）に組み込まれる。更なる特定の実施形態において、複製制限型ウイルスベクターは、少なくとも１つのｍｉＲ－２０５ｐ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－１４１－５ｐ標的配列、少なくとも１つのｍｉＲ－３１－５ｐ標的配列、及び少なくとも１つのｍｉＲ－１２４標的配列を含み、シュワン腫の治療に使用される。このような実施形態において、ｍｉＲ－２０５ｐ、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ及びｍｉＲ－１２４に対する標的配列は、ウイルス複製に必要とされる２つ以上の遺伝子（例えば、ＩＣＰ４及びＩＣＰ２７）に組み込まれる。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－３７９－５ｐ、ｍｉＲ－４９３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３７０－３ｐ、ｍｉＲ－４１０－３ｐ、ｍｉＲ－４３１－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－３ｐ、ｍｉＲ－４４８５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４１１－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－７５８－３ｐ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８０、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－４９３、ｍｉＲ－５７６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－９９ａに対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、膀胱癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１２５１－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２１９ａ－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－１３８－２－３ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２９－１－３ｐ、ｍｉＲ－１２６４、ｍｉＲ－３９４３、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－３８３－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－１２８－２－５ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－８８５－３ｐ、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－７５９、ｍｉＲ－７１５８－３ｐ、ｍｉＲ－７７０－５ｐ、ｍｉＲ－１３５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８８５－５ｐ、ｌｅｔ－７ｇ－５ｐ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１２－３ｐ、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２２、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３１８９－３ｐ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４８３－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５７７、ｍｉＲ－６６３、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－８７３、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｆ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４－５ｐ、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３４ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３４ｃ－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４５２、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－５８４、ｍｉＲ－６２２、ｍｉＲ－６５６、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１８１ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ｂ及び／またはｍｉＲ－３１８９－３ｐに対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、脳癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。ある特定の実施形態において、脳癌は、星細胞腫、膠芽腫または神経膠腫である。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－５６８３、ｍｉＲ－３１９５、ｍｉＲ－３１８２、ｍｉＲ－１２７１－５ｐ、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－５１４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－４８３－３ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－１４４－３ｐ、ｍｉＲ－１０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８９、ｍｉＲ－２０３ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－４２６６、ｍｉＲ－４３２７、ｍｉＲ－５６９４、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１０ｂ、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５８、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１６ｂ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－３００、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３９－５ｐ、ｍｉＲ－３３ｂ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ａ、ｍｉＲ－３７９、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－３８３、ｍｉＲ－４２５、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５０ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０２－５ｐ、ｍｉＲ－５１７ａ、ｍｉＲ－５７４－３ｐ、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－８７３、ｍｉＲ－８７４、ｍｉＲ－９２ａ、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－３ｐ及び／またはｍｍｕ－ｍｉＲ－２９０－５ｐに対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、乳癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４９１－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－８８６－５ｐ、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－２９ａ及び／またはｍｉＲ－３７５に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、子宮頸癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１３３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－５ｐ、ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－６５５－３ｐ、ｍｉＲ－３７６ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－３６９－５ｐ、ｍｉＲ－４９０－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－４８７ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－２２３－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１３３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１５、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３２０、ｍｉＲ－３２０ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５５、ｍｉＲ－４８４、ｍｉＲ－５０２、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－９３、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－３０ａ－５ｐ、ｍｉＲ－６２７、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１２９５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－１３０７、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３２、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８ａ、ｍｉＲ－１９１、ｍｉＲ－１９３ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９６ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－５ｐ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２４－３ｐ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２８－３ｐ、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３２８、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４５、ｍｉＲ－３４ａ－５ｐ、ｍｉＲ－３６１－５ｐ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－３７８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３７８ａ－５ｐ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４４８７、ｍｉＲ－４８３、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５５１ａ、ｍｉＲ－５７４－５ｐ、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３８、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－９６－５ｐ、ｍｉＲ－２０２－３ｐ、ｍｉＲ－３０ａ及び／またはｍｉＲ－４５１に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、結腸癌または大腸癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－３０１ａ、ｍｉＲ－３０１ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－５４３及び／またはｍｉＲ－３４ｂに対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、子宮内膜癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－１－３ｐ、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－１０ａ、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１５１、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－２２７８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３２６、ｍｉＲ－５６４、ｍｉＲ－２７ａ、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－７２０、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－３４２、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－１３７及び／またはｍｉＲ－１９７に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、血液癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。いくつかの実施形態において、血液癌は、白血病、リンパ腫または骨髄腫である。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１８２６、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０８－３ｐ、ｍｉＲ－５０９－３ｐ、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－１０６ａ＊、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２８５、ｍｉＲ－１２９－３ｐ、ｍｉＲ－１２９１、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１８２－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２８－５ｐ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７８、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－５０９－５ｐ、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３７７及び／またはｍｉＲ－５０６に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、腎癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２２ａ、ｍｉＲ－１２３６、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１２８－３ｐ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ａ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３４、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１３９、ｍｉＲ－１３９－５ｐ、ｍｉＲ－１４０－５ｐ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－１８１ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９５－５ｐ、ｍｉＲ－１９７、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０２、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４－３ｐ、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１、ｍｉＲ－２１－３ｐ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２１９－５ｐ、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－２９ｂ－１、ｍｉＲ－２９ｂ－２、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３０２ｂ、ｍｉＲ－３０２ｃ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－３７２、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７７、ｍｉＲ－４２２ａ、ｍｉＲ－４２４、ｍｉＲ－４２４－５ｐ、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４４５８、ｍｉＲ－４４８、ｍｉＲ－４５０ａ、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－４８５－５ｐ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－５２０ａ、ｍｉＲ－５２０ｂ、ｍｉＲ－５２０ｃ－３ｐ、ｍｉＲ－５８２－５ｐ、ｍｉＲ－５９０－５ｐ、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１２、ｍｉＲ－６２５、ｍｉＲ－６３７、ｍｉＲ－６７５、ｍｉＲ－７、ｍｉＲ－８７７、ｍｉＲ－９４０、ｍｉＲ－９４１、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ａ、ｍｉＲ－１３２及び／またはｍｉＲ－３１に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、肝癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。いくつかの実施形態において、肝癌は、肝細胞癌である。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－３ｐ、ｍｉＲ－１２６－５ｐ、ｍｉＲ－１２６６－３ｐ、ｍｉＲ－６１３０、ｍｉＲ－６０８０、ｍｉＲ－５１１－５ｐ、ｍｉＲ－１４３－５ｐ、ｍｉＲ－２２３－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１４２－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１４－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２９７、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３８１、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４５１、ｍｉＲ－５１１、ｍｉＲ－９９ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４２－５ｐ、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１４６９、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１５ｂ、ｍｉＲ－１６－１、ｍｉＲ－１６－２、ｍｉＲ－１８２、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９４、ｍｉＲ－１９５、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２、ｍｉＲ－２２３、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３６５、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４４９ｂ、ｍｉＲ－４８６－５ｐ、ｍｉＲ－５４５、ｍｉＲ－６１０、ｍｉＲ－６１４、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－６６０、ｍｉＲ－７５１５、ｍｉＲ－９５００、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－９９ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０６ａ、ｍｉＲ－１０７、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１２５ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２６＊、ｍｉＲ－１２９、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１４０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１４９、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７－５ｐ、ｍｉＲ－１８１ａ－１、ｍｉＲ－１８１ａ－２、ｍｉＲ－１８１ｂ、ｍｉＲ－１８１ｂ－１、ｍｉＲ－１８１ｂ－２、ｍｉＲ－１８１ｃ、ｍｉＲ－１８１ｄ、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８６、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２７ａ、ｍｉＲ－２７ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｄ－５ｐ、ｍｉＲ－３０ｅ－５ｐ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３３８－３ｐ、ｍｉＲ－３４０、ｍｉＲ－３４２－３ｐ、ｍｉＲ－３６１－３ｐ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４５００、ｍｉＲ－４７８２－３ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５１２－３ｐ、ｍｉＲ－５２０ａ－３ｐ、ｍｉＲ－５２６ｂ、ｍｉＲ－６２５＊及び／またはｍｉＲ－９６に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、肺癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｂ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２８０、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４６ｂ、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１７、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－１８５、ｍｉＲ－１８ｂ、ｍｉＲ－１９３ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２０ａ、ｍｉＲ－２１１、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３ａ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７６ａ、ｍｉＲ－３７６ｃ、ｍｉＲ－５７３、ｍｉＲ－７－５ｐ、ｍｉＲ－９及び／またはｍｉＲ－９８に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、黒色腫を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｄ、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５０、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１２７１、ｍｉＲ－１３６、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４７、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１８１ａ、ｍｉＲ－２０６、ｍｉＲ－２２０ａ、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ａ、ｍｉＲ－３２、ｍｉＲ－３２３－５ｐ、ｍｉＲ－３２９、ｍｉＲ－３３８、ｍｉＲ－３７０、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３３、ｍｉＲ－４９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－５０３、ｍｉＲ－５０６、ｍｉＲ－６３２、ｍｉＲ－６４６、ｍｉＲ－６６８、ｍｉＲ－８７７及び／またはｍｉＲ－９に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、口腔癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２５ｂ、ｍｉＲ－１２９－５ｐ、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１３７、ｍｉＲ－１３８、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５３、ｍｉＲ－１５５、ｍｉＲ－１９９ａ、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－４０９－３ｐ、ｍｉＲ－４１１、ｍｉＲ－４２９、ｍｉＲ－４３２、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４９４、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－４９８、ｍｉＲ－５１９ｄ、ｍｉＲ－６５５、ｍｉＲ－９、ｍｉＲ－９８、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－５３２－５ｐ、ｍｉＲ－１２４ａ、ｍｉＲ－１９２、ｍｉＲ－１９３ａ及び／またはｍｉＲ－７に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、卵巣癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－２１６ａ－５ｐ、ｍｉＲ－８０２、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－１４５－３ｐ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－２１４－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４３２－５ｐ、ｍｉＲ－２１６ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－３ｐ、ｍｉＲ－２１６ｂ－５ｐ、ｍｉＲ－１３６－５ｐ、ｍｉＲ－１４５－５ｐ、ｍｉＲ－１２７－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１２９－２－３ｐ、ｍｉＲ－４５０７、ｍｉＲ－１－３ｐ、ｍｉＲ－１４８ａ－３ｐ、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１１８１、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２４７、ｍｉＲ－１３３ａ、ｍｉＲ－１４１、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１４８ａ、ｍｉＲ－１４８ｂ、ｍｉＲ－１５０＊、ｍｉＲ－１５０－５ｐ、ｍｉＲ－１５２、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１９８、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２１４、ｍｉＲ－２１６ａ、ｍｉＲ－２９ｃ、ｍｉＲ－３３５、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７３、ｍｉＲ－３７５、ｍｉＲ－４１０、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６１５－５ｐ、ｍｉＲ－６３０、ｍｉＲ－９６、ｍｉＲ－１３２、ｌｅｔ－７ａ、ｌｅｔ－７ａ－１、ｌｅｔ－７ａ－２、ｌｅｔ－７ａ－３、ｌｅｔ－７ｂ、ｌｅｔ－７ｃ、ｌｅｔ－７ｄ、ｌｅｔ－７ｅ、ｌｅｔ－７ｆ－１、ｌｅｔ－７ｆ－２、ｌｅｔ－７ｇ、ｌｅｔ－７ｉ、ｍｉＲ－１２６、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４４、ｍｉＲ－１５０、ｍｉＲ－１６、ｍｉＲ－２００ａ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２００ｃ、ｍｉＲ－２１７、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－３３７、ｍｉＲ－４９４及び／またはｍｉＲ－９８に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、膵癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｌｅｔ－７ａ－３ｐ、ｌｅｔ－７ｃ、ｍｉＲ－１００、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１０５、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１２８、ｍｉＲ－１２９６、ｍｉＲ－１３０ｂ、ｍｉＲ－１３３ａ－１、ｍｉＲ－１３３ａ－２、ｍｉＲ－１３３ｂ、ｍｉＲ－１３５ａ、ｍｉＲ－１４３、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１４６ａ、ｍｉＲ－１５４、ｍｉＲ－１５ａ、ｍｉＲ－１８７、ｍｉＲ－１８８－５ｐ、ｍｉＲ－１９９ｂ、ｍｉＲ－２００ｂ、ｍｉＲ－２０３、ｍｉＲ－２０５、ｍｉＲ－２１２、ｍｉＲ－２１８、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２４、ｍｉＲ－２３ａ、ｍｉＲ－２３ｂ、ｍｉＲ－２５、ｍｉＲ－２６ａ、ｍｉＲ－２６ｂ、ｍｉＲ－２９ｂ、ｍｉＲ－３０２ａ、ｍｉＲ－３０ａ、ｍｉＲ－３０ｂ、ｍｉＲ－３０ｃ－１、ｍｉＲ－３０ｃ－２、ｍｉＲ－３０ｄ、ｍｉＲ－３０ｅ、ｍｉＲ－３１、ｍｉＲ－３３０、ｍｉＲ－３３１－３ｐ、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３４ｂ、ｍｉＲ－３４ｃ、ｍｉＲ－３７４ｂ、ｍｉＲ－４４９ａ、ｍｉＲ－４７２３－５ｐ、ｍｉＲ－４９７、ｍｉＲ－６２８－５ｐ、ｍｉＲ－６４２ａ－５ｐ、ｍｉＲ－７６５及び／またはｍｉＲ－９４０に対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、前立腺癌を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の５’ＵＴＲまたは３’ＵＴＲに挿入された、ｍｉＲ－１０１、ｍｉＲ－１８３、ｍｉＲ－２０４、ｍｉＲ－３４ａ、ｍｉＲ－３６５ｂ－３ｐ、ｍｉＲ－４８６－３ｐ及び／またはｍｉＲ－５３２－５ｐに対する１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピーを含む。この腫瘍溶解性ウイルスは、網膜芽細胞腫を治療するための方法及び組成物に使用され得る。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子は、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２からなる群から選択される。
いくつかの場合において、本発明の組み換えウイルスベクターは、単純ヘルペスウイル
ス（ＨＳＶ）であり、ＩＣＰ４７遺伝子に対するプロモーターの他に、二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ及びＩＣＰ４のそれぞれを１コピー含む、内部反復（接合）領域の欠失を更に含む。
ある特定の実施形態において、本発明の組み換えウイルスベクターは、直接感染及び／または水平伝播のいずれかによる細胞内侵入が増強されたＨＳＶである。一態様において、本発明のＨＳＶベクターは、ＨＳＶ感染の典型的なメディエーター以外の細胞タンパク質（例えば、ネクチン－１、ＨＶＥＭまたはヘパラン硫酸／コンドロイチン硫酸プロテオグリカン以外の細胞タンパク質）との相互作用を介して、細胞に直接感染することができる。ある特定の実施形態において、本発明の組み換えウイルスベクターは、ＨＳＶであり、通常以外の受容体を介したベクター侵入を容易にする、ｇＢまたはｇＨ遺伝子変異を更に含む。別の態様において、本発明は、典型的にＨＳＶの水平伝播に抵抗性であるｇＤ受容体を欠く細胞などの細胞において水平伝播を示す、変異ｇＨ糖タンパク質を更に含む、ＨＳＶベクターを提供する。いくつかの実施形態において、本発明のＨＳＶベクターは、米国特許出願公開第２０１３／００９６１８６号（その全体を参照により本明細書に援用する）に記載されている変異ｇＢまたはｇＨタンパク質のうちの１つ以上を含む。ある特定の態様において、ＨＳＶベクター中の変異侵入タンパク質は、ウイルス侵入に関与する、ｇＢ、ｇＨなどの糖タンパク質であり、変異ＨＳＶベクターは、両タンパク質の変異体を含み得る。しかしながら、変異侵入タンパク質は、ＨＳＶベクターの細胞への侵入に作用する任意のタンパク質であってよい。ある特定の実施形態において、変異侵入タンパク質は、ｇＤ以外であるが、ＨＳＶベクターは、リガンドまたは他の所望の変異を含有するような変異ｇＤを追加で含み得る。本発明のＨＳＶベクターにおいて使用されるｇＢまたはｇＨ糖タンパク質の非限定的な変異は、次の残基：ｇＢ：Ｄ２８５、ｇＢ：Ａ５４９、ｇＢ：Ｓ６６８、ｇＨ：Ｎ７５３及びｇＨ：Ａ７７８のうちの１つ以上に存在する。いくつかの実施形態において、本発明のＨＳＶベクターは、ｇＢ：Ｄ２８５とｇＢ：Ａ５４９の両方、ｇＨ：Ｎ７５３とｇＨ：Ａ７７８の両方、ならびに／またはｇＢ：Ｓ６６８、ｇＨ：Ｎ７５３及びｇＨ：Ａ７７８のそれぞれに変異を含む。ある特定の実施形態において、ＨＳＶベクターは、２つ以上（例えば、３つ以上、４つ以上）のこのような変異を含有し、ＨＳＶベクターは、これら５つの全ての残基に変異を含み得る。一実施形態において、ＨＳＶベクターは、ｇＢ：２８５、ｇＢ；５４９、ｇＨ：７５３及びｇＨ：７７８に変異を有する。変異は、本明細書において、ＨＳＶ－１株ＫＯＳの誘導株Ｋ２６ＧＦＰのｇＤ、ｇＢ及びｇＨ遺伝子のコドン（アミノ酸）ナンバリングを基準に示す。以下の表に示されるように、Ｋ２６ＧＦＰのｇＢ及びｇＨの配列は、ＧｅｎＢａｎｋ（＃ＡＦ３１１７４０（参照により本明細書に援用する））に開示されているｇＢ及びｇＨ（ＧｅｎＢａｎｋ＃Ｘ０３８９６（参照により本明細書に援用する））の配列とは異なる。
Figure 0007174109000001
ただし、Ｋ２６ＧＦＰは、ＧｅｎＢａｎｋ Ｘ０３８９６のヌクレオチド２，０７９～２，１０２に対応する遺伝子領域に更なる差異を含有し得る。したがって、ＫＯＳ誘導株Ｋ２６ＧＦＰまたはＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＦ３１１７４０のいずれかの配列を、本明細書で考察されるｇＢ変異の参照配列として使用できることが理解されるだろう。また、ＫＯＳ誘導株Ｋ２６ＧＦＰまたはＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｘ０３８９６のいずれかの配列を、本明細書で考察されるｇＨ変異の参照配列として使用できることが理解されるだろう。しかしながら、本発明のＨＳＶベクターは、任意のＨＳＶ株のｇＢ及びｇＨにおける相同の変異を含み得る。
いくつかの態様において、ＨＳＶベクターに含めるための侵入タンパク質の変異は、置換変異であるが、変異は、置換変異体に限定されない。ある特定の実施形態において、ＨＳＶベクターに使用される変異ｇＢまたはｇＨ糖タンパク質は、ｇＢ：Ｄ２８５Ｎ、ｇＢ：Ａ５４９Ｔ、ｇＢ：Ｓ６６８Ｎ、ｇＨ：Ｎ７５３Ｋ、ｇＨ：Ａ７７８Ｖからなる置換変異からなる群から選択される。ある特定の態様において、ＨＳＶベクターは、これらの置換（２つ以上のこのような置換（例えば、３つ以上、４つ以上または全て）など）の組み合わせを含み、ｇＢ：Ｄ２８５Ｎ／ｇＢ：Ａ５４９Ｔ二重変異体、ｇＨ：Ｎ７５３Ｋ／ｇＨ：Ａ７７８Ｖ二重変異体、及びｇＢ：Ｓ６６８Ｎ／ｇＨ：Ｎ７５３Ｋ／ｇＨ：Ａ７７８Ｖ三重変異体が実施形態の例である。一実施形態において、ＨＳＶベクターは、ｇＢ：Ｄ２８５Ｎ／ｇＢ：Ａ５４９Ｔ／ｇＨ：Ｎ７５３Ｋ／ｇＨ：Ａ７７８Ｖを含む。
ある特定の態様において、ＨＳＶベクターは、変異ｇＢ及び／または変異ｇＨ糖タンパク質を含み、糖タンパク質中の変異は、少なくとも２つの残基における置換変異であり、ベクターがＨＳＶ－１ Ｋ２６ＧＦＰであるとき、少なくとも２つの残基は、ｇＢ：Ｄ２８５、ｇＢ：Ａ５４９、ｇＢ：Ｓ６６８、ｇＨ：Ｎ７５３及びｇＨ：Ａ７７８からなる群から選択されるか、ベクターが相同ＨＳＶであるとき、少なくとも２つの残基は、ｇＢ：Ｄ２８５、ｇＢ：Ａ５４９、ｇＢ：Ｓ６６８、ｇＨ：Ｎ７５３及びｇＨ：Ａ７７８に対応するアミノ酸から選択され、ｇＢ：Ｄ２８５残基は、ＶＹＰＹＸＥＦＶＬ（配列番号１）中のＸに対応し、ｇＢ：Ａ５４９残基は、ＫＬＮＰＮＸＩＡＳ（配列番号２）中のＸに対応し、ｇＢ：Ｓ６６８残基は、ＩＴＴＶＸＴＦＩＤ（配列番号３）中のＸに対応し、ｇＨ：Ｎ７５３残基は、ＶＤＴＤＸＴＱＱＱ（配列番号４）中のＸに対応し、ｇＨ：Ａ７７８残基は、ＶＰＳＴＸＬＬＬＦ（配列番号５）中のＸに対応し、ＨＳＶベクターは、ＨＳＶ－１またはＨＳＶ－２ベクターである。
一態様において、本発明は、ｍｉＲＮＡ、遺伝子またはメタロプロテアーゼ組織阻害剤（ＴＩＭＰ）の発現を低下させるか、その機能を阻害する、タンパク質またはオリゴヌクレオチド（例えば、ｓｈＲＮＡ、デコイオリゴヌクレオチドまたはａｎｔａｇｏｍｉｒ）をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスを包含する。このような組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、本明細書において、「ゲノム編集」または「微小環境リモデリング」ウイルスまたはベクターと称される。コードされるタンパク質またはオリゴヌクレオチドは、タンパク質（例えば、ＴＩＭＰ）を分解の標的にすること（例えば、ユビキチン化及びプロテアソーム分解によって、またはリソソーム分解標的化）、同種受容体との相互作用を遮断すること（例えば、ブロッキング抗体もしくはその抗原結合断片またはペプチド阻害剤）、メッセンジャーＲＮＡ転写物を分解すること（例えば、低分子干渉ＲＮＡまたは低分子ヘアピンＲＮＡ）、及び／または特定のｍｉＲ、遺伝子もしくはタンパク質をコードするゲノムＤＮＡ配列を改変すること（例えば、エンドヌクレアーゼによって）を含む任意数の方法で、ｍｉＲＮＡ、遺伝子またはＴＩＭＰの発現を低下させるか、その機能を阻害することができる。
特定の実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、発がんまたは転移に関与するｍｉＲまたは遺伝子（例えば、がん促進性ｍｉＲまたはがん遺伝子）の発現を低下させる。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、がん促進性ｍｉＲＮＡ（例えば、表４に列挙されるｍｉＲＮＡのうちの１つ以上）であるｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させるタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、がん促進性ｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させるタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、複数のがん促進性ｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させる複数のタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－１７－９２の発現を低下させ、肺癌（例えば、小細胞肺癌）を治療するために使用される。他の実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－２２１及び／またはｍｉＲ－２１の発現を低下させ、膠芽腫を治療するために使用される。ある特定の実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－１５５及び／またはｍｉＲ－１７－９２の発現を低下させ、リンパ腫（例えば、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫または慢性リンパ球性白血病）を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－２２１、ｍｉＲ－２２２及び／またはｍｉＲ－１４６の発現を低下させ、甲状腺癌を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－３７２及び／またはｍｉＲ－３７３の発現を低下させ、精巣癌（例えば、精巣胚細胞腫瘍）を治療するために使用される。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ－１８及び／またはｍｉＲ－２２４の発現を低下させ、肝癌（例えば、肝細胞癌）を治療するために使用される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組み換えウイルスベクターは、腫瘍細胞外マトリックス（ＥＣＭ）を分解するために使用され得、これにより、いくつかの態様において、ウイルス伝播が増強される。マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）は、亜鉛依存性プロテアーゼであり、その活性に基づいて、コラゲナーゼ、ゼラチナーゼ、ストロムライシン及びマトリライシンに分類される。これらのプロテアーゼは、通常、酵素前駆体（チモーゲン）として分泌され、プロペプチドのプロドメインのタンパク質分解除去によって活性化される。がんにおいてＭＭＰが果たす主要な役割は、ＥＣＭの分解であり、これにより、腫瘍浸潤及び転移が促進される。ＭＭＰはまた、腫瘍進行、上皮間葉転換（ＥＭＴ）及び血管新生にも関与する。ＭＭＰは、ｍｉＲＮＡだけでなく、４つのプロテアーゼ阻害剤ファミリー（ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ４）を含むＴＩＭＰによって制御される。本発明の組み換えウイルスベクターを用いて、ＭＭＰファミリーを負に制御するｍｉＲＮＡまたはＴＩＭＰを破壊することによって、広範な腫瘍微小環境を弱めることができる。ｍｉＲＮＡ／ＭＭＰ相互作用の例は、表５に示される。これらの相互作用の多くは、複数のＭＭＰが単一のｍｉＲＮＡによって制御されることを示しており、例えば、ｌｅｔ－７は、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９及びＭＭＰ－１４を制御し、ｍｉＲ－１４３は、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９及びＭＭＰ－１３を制御し、ｍｉＲ－２１８は、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－７及びＭＭＰ－９を制御する。更に、大多数のＭＭＰは、単一のＴＩＭＰマスタースイッチによって制御され得、例えば、ＴＩＭＰ１は、既知のＭＭＰのほぼ全てを阻害することが知られており、また広範な細胞種で細胞増殖を促進し、ＴＩＭＰ２は、ＭＭＰ－１４及びＭＭＰ－２と相互作用する。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、微小環境リモデリングｍｉＲＮＡ（例えば、表５に列挙されるｍｉＲＮＡのうちの１つ以上）であるｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させるタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、１つの微小環境リモデリングｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させる。いくつかの実施形態において、タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０以上の微小環境リモデリングｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させる。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、複数の微小環境リモデリングｍｉＲＮＡの発現または機能を低下させる複数のタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、複数のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される戦略は、ＭＭＰを負に制御するｍｉＲＮＡまたはＴＩＭＰの発現または機能をノックダウンまたは破壊する本発明の組み換えウイルスベクターによって活用され得る。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ＴＩＭＰ１、ＴＩＭＰ２、ＴＩＭＰ３及びＴＩＭＰ４から選択されるＴＩＭＰの発現を低下させる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、遺伝子の発現または機能を減少させるタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする、少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む。いくつかの態様において、遺伝子は、がん遺伝子（例えば、表７に列挙される遺伝子から選択される遺伝子）である。いくつかの態様において、遺伝子は、がん促進性ｍｉＲ（例えば、表４に列挙されるｍｉＲＮＡ）、微小環境リモデリングｍｉＲ（例えば、表５に列挙されるｍｉＲＮＡ）、またはＥＣＭ分解の負の制御因子（例えば、ＴＩＭＰ）をコードする。遺伝子の発現及び／または機能の低下は、転写レベル（例えば、ゲノムＤＮＡ配列の変異、欠失またはサイレンシング）または翻訳レベル（例えば、ｍＲＮＡ分解を介した遺伝子産物の産生の阻害）で達成され得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、遺伝子配列の変異、欠失または転写抑制を可能にすることによって遺伝子の発現または機能を低下させるヌクレアーゼをコードする、１つ以上のポリヌクレオチドを含む。具体的な実施形態において、ヌクレアーゼは、クラスター化された規則的な間隔のある短い回文の繰り返し配列（ＣＲＩＳＰＲ）関連エンドヌクレアーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）または転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）から選択される。非限定的な例において、ＣＲＩＳＰＲ関連エンドヌクレアーゼは、ＳｐＣａｓ９、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ１、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ２、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ３、ＳｐＣａｓ９－ＨＦ４、ＳａＣａｓ９、ＦｎＣｐｆ、ＦｎＣａｓ９、ｅＳｐＣａｓ９、Ｃ２Ｃ１、Ｃ２Ｃ３、Ｃｐｆ１、Ｃａｓ１、Ｃａｓ１Ｂ、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、Ｃａｓ９（Ｃｓｎ１及びＣｓｘ１２としても知られる）、Ｃａｓ１０、Ｃｓｙ１、Ｃｓｙ２、Ｃｓｙ３、Ｃｓｅ１、Ｃｓｅ２、Ｃｓｃ１、Ｃｓｃ２、Ｃｓａ５、Ｃｓｎ２、Ｃｓｍ２、Ｃｓｍ３、Ｃｓｍ４、Ｃｓｍ５、Ｃｓｍ６、Ｃｍｒ１、Ｃｍｒ３、Ｃｍｒ４、Ｃｍｒ５、Ｃｍｒ６、Ｃｓｂ１、Ｃｓｂ２、Ｃｓｂ３、Ｃｓｘ１７、Ｃｓｘ１４、Ｃｓｘ１０、Ｃｓｘ１６、ＣｓａＸ、Ｃｓｘ３、Ｃｓｘ１、Ｃｓｘ１５、Ｃｓｆ１、Ｃｓｆ２、Ｃｓｆ３及びＣｓｆ４から選択される。
本発明の組み換えウイルスベクターは、細菌系に基づいた遺伝子操作ヌクレアーゼ系であり、哺乳動物ゲノムを操作するために使用することができる、ＣＲＩＳＰＲ（クラスター化された規則的な間隔のある短い回文の繰り返し配列）／Ｃａｓ（ＣＲＩＳＰＲ関連）ヌクレアーゼ系を利用してもよい。一般に、この系は、Ｃａｓヌクレアーゼと、ガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）とを含む。ｇＲＮＡは、標的ゲノムＤＮＡ配列に特異的なｃｒｉｓｐｒ－ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）と、Ｃａｓ結合を促進するｔｒａｃｒＲＮＡ（ｔｒＲＮＡ）との２つの部分からなる。ｃｒＲＮＡ及びｔｒＲＮＡは、別個のＲＮＡオリゴヌクレオチドとして存在してもよいし、同じＲＮＡオリゴヌクレオチド中に存在してもよい（単一ガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）と呼ばれる）。本明細書で使用されるとき、「ガイドＲＮＡ」または「ｇＲＮＡ」という用語は、個々のｔｒＲＮＡと、個々のｃｒＲＮＡとの組み合わせまたはｓｇＲＮＡのいずれかを指す。例えば、Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３７：８１６－８２１；Ｃｏｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：８１９－８２３；Ｍａｌｉ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：８２３－８２６；Ｑｉ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｃｅｌｌ １５２：１１７３－１１８３；Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．（２０１３），ｅＬｉｆｅ ２：ｅ００４７１；Ｄａｖｉｄ Ｓｅｇａｌ（２０１３）ｅＬｉｆｅ ２：ｅ００５６３；Ｒａｎ ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ８（１１）：２２８１－２３０８；Ｚｅｔｓｃｈｅ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃｅｌｌ １６３（３）：７５９－７７１；ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２００７／０２５０９７号、同第ＷＯ２００８／０２１２０７号、同第ＷＯ２０１０／０１１９６１号、同第ＷＯ２０１０／０５４１０８号、同第ＷＯ２０１０／０５４１５４号、同第ＷＯ２０１２／０５４７２６号、同第ＷＯ２０１２／１４９４７０号、同第ＷＯ２０１２／１６４５６５号、同第ＷＯ２０１３／０９８２４４号、同第ＷＯ２０１３／１２６７９４号、同第ＷＯ２０１３／１４１６８０号及び同第ＷＯ２０１３／１４２５７８号；米国特許出願公開第２０１０－００９３６１７号、同第２０１３－００１１８２８号、同第２０１０－０２５７６３８号、同第２０１０－００７６０５７号、同第２０１１－０２１７７３９号、同第２０１１－０３００５３８号、同第２０１３－０２８８２５１号及び同第２０１２－０２７７１２０号；ならびに米国特許第８，５４６，５５３号（そのそれぞれの全体を参照により本明細書に援用する）を参照されたい。
複数のクラス１のＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系（Ｉ型及びＩＩＩ型系を含む）が特定され、細部にわたって機能的に特徴付けられ、エフェクター複合体の複雑な構造及び力学が明らかになっている（Ｂｒｏｕｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００８、Ｍａｒｒａｆｆｉｎｉ ａｎｄ Ｓｏｎｔｈｅｉｍｅｒ，２００８、Ｈａｌｅ ｅｔ ａｌ．，２００９、Ｓｉｎｋｕｎａｓ ｅｔ ａｌ．，２０１３、Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４、Ｍｕｌｅｐａｔｉ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。加えて、Ｃａｓ９ファミリーの相同ＲＮＡ誘導エンドヌクレアーゼをエフェクターとして利用する、いくつかのクラス２のＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系も特定され、実験的に特徴付けられている（Ｂａｒｒａｎｇｏｕ ｅｔ ａｌ．，２００７、Ｇａｒｎｅａｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０、Ｄｅｌｔｃｈｅｖａ ｅｔ ａｌ．，２０１１、Ｓａｐｒａｎａｕｓｋａｓ ｅｔ ａｌ．，２０１１、Ｊｉｎｅｋ ｅｔ ａｌ．，２０１２、Ｇａｓｉｕｎａｓ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。最近では、一般に第２のクラス２のＶ型と言われるＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系がいくつかの細菌ゲノムで特定されている。一般にＶ型と言われるＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ系は、Ｃｐｆ１（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ及びＦｒａｎｃｉｓｅｌｌａ １由来ＣＲＩＳＰＲ）と呼ばれる、約１，３００の大きなアミノ酸タンパク質を含有する。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスは、ｍｉＲＮＡまたはＴＩＭＰを標的にするｔｒＲＮＡ及びｃｒＲＮＡをコードする、少なくとも１つのポリヌクレオチドを更に含む。いくつかの場合において、ｔｒＲＮＡ及びｃｒＲＮＡをコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドは、ウイルスゲノム上の遺伝子座に挿入される。いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチドは、合成インスレーターまたは天然ウイルス（例えば、ＨＳＶ）インスレーターを含む境界配列である。ある特定の実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、ＲＮＡ結合部位をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドは、内部反復接合領域（二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ、ＩＣＰ４及びＩＣＰ４７プロモーターのそれぞれを１コピー含む）、ＩＣＰ０、ＬＡＴ、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２を含む、１つ以上の遺伝子座に、または１つ以上の遺伝子座の間に挿入される。一実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）であり、ＲＮＡ結合部位をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドは、ＵＬ３とＵＬ４のオープンリーディングフレームの間の遺伝子座に挿入される（例えば、図４５及び図４６）。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）、抗免疫抑制タンパク質または免疫原性抗原であるタンパク質をコードする、少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む。本明細書で使用されるとき、「抗免疫抑制タンパク質」は、免疫抑制経路を阻害するタンパク質である。本発明は、抗制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）タンパク質または抗骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）タンパク質である抗免疫抑制タンパク質を発現する、腫瘍溶解性ウイルスを包含する。いくつかの実施形態において、抗免疫抑制タンパク質は、ＶＨＨ由来遮断剤またはＶＨＨ由来ＢｉＴＥである。本明細書で使用されるとき、「免疫原性抗原」は、炎症性または免疫原性の免疫応答を高めるタンパク質を指す。特定の実施形態において、抗免疫抑制及び免疫原性抗原は、抗腫瘍免疫応答を誘導する。このようなタンパク質の例には、免疫チェックポイント受容体（例えば、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ３、ＰＤ１、ＰＤＬ１及びその他）に結合し阻害する抗体もしくはその抗原結合断片、炎症促進性サイトカイン（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＴＮＦα、ＩＬ－１２、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＧＭ－ＣＳＦ及びその他）、または活性化受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＩＩａ、ＦｃγＩＩＩａ、共刺激受容体及びその他）に結合し活性化するタンパク質が挙げられる。特定の実施形態において、タンパク質は、ＥｐＣＡＭ、葉酸、ＩＦＮβ、抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ１、Ａ２Ａ、抗ＦＧＦ２、抗ＦＧＦＲ／ＦＧＦＲ２ｂ、抗ＳＥＭＡ４Ｄ、ＣＣＬ５、ＣＤ１３７、ＣＤ２００、ＣＤ３８、ＣＤ４４、ＣＳＦ－１Ｒ、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１３、エンドセリンＢ型受容体、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２、ＩＬ－２１、ＩＬ－３５、ＩＳＲＥ７、ＬＦＡ－１、ＮＧ２（ＳＰＥＧ４としても知られる）、ＳＭＡＤ、ＳＴＩＮＧ、ＴＧＦβ及びＶＣＡＭ１から選択される。
ある特定の実施形態において、ｍｉＲＮＡ、遺伝子またはＴＩＭＰの発現を低下させるために標的化されたタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードするポリヌクレオチドは、組み換え腫瘍溶解性ウイルスのウイルスゲノムの遺伝子座に挿入される。いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチドは、合成インスレーターまたは天然ウイルス（例えば、ＨＳＶ）インスレーターを含む境界配列である。ある特定の実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、ＲＮＡ結合部位をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドは、内部反復接合領域（二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ、ＩＣＰ４及びＩＣＰ４７プロモーターのそれぞれを１コピー含む）、ＩＣＰ０、ＬＡＴ、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２を含む、１つ以上の遺伝子座に、または１つ以上の遺伝子座の間に挿入される。一実施形態において、ウイルスは、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）であり、少なくとも１つのポリヌクレオチドがＵＬ３とＵＬ４のオープンリーディングフレームの間の遺伝子座に挿入される（例えば、図４５及び図４６）。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体を含む。プロテアーゼ活性化抗体（Ｍｅｔｚら（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ，２５（１０）：５７１－８０，２０１２）が記載するものなど）は、保護キャップのプロテアーゼ切断を受けた後、活性化され、標的にのみ結合する。いくつかの場合において、腫瘍微小環境は、健康な周辺組織とは大きく異なる一連のプロテアーゼを有する。例えば、プロテアーゼカテプシンＢは、乳癌、子宮頸癌、結腸癌、大腸癌、胃癌、頭頸部癌、肝癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌及び甲状腺癌を含む、多数のがんで過剰発現される。ヒト分解産物の総体は、ヒト細胞によって合成されるプロテアーゼの完全な一覧からなり、最も多いものから最も少ないものへの順序でメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、セリンプロテアーゼ、システインプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼ及びアスパラギン酸プロテアーゼの５つの大きなクラスに分類される、少なくとも５６９のプロテアーゼから構成される（Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ，７（１０）：８００－８，２００７）。特に、ＭＭＰによって特異的に切断されるプロテアーゼ抗体は、ＭＭＰが細胞外及び細胞周辺領域に存在することから、本明細書に記載される組み換えウイルスベクターを腫瘍微小環境に標的化する優れた手段として役立ち得る。表６は、がんで過剰発現されるプロテアーゼをまとめたものであり、これらのプロテアーゼを利用することで、プロテアーゼ活性化抗体を用いてシュードタイプ化される組み換えウイルスベクターの特異的結合が可能となる。
ある特定の実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、ウイルス糖タンパク質エンベロープ中に組み込まれる。プロテアーゼ活性化抗体は、治療指数を上げ、かつオフターゲット感染を少なくするために、本発明の組み換えウイルスベクター（例えば、ＨＳＶベクター）の糖タンパク質エンベロープ中に組み込むことができる。ＨＳＶベクターの場合、いくつかの実施形態において、糖タンパク質は、ｇＣまたはｇＤであり得る。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、プロテアーゼ活性化抗体をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む。ある特定の実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、システインカテプシン、アスパラギン酸カテプシン、カリクレイン（ｈＫ）、セリンプロテアーゼ、カスパーゼ、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）及びディスインテグリン及びメタロプロテアーゼ（ＡＤＡＭ）から選択されるプロテアーゼによって活性化される。いくつかの実施形態において、プロテアーゼは、カテプシンＫ、カテプシンＢ、カテプシンＬ、カテプシンＥ、カテプシンＤ、ｈＫ１、ＰＳＡ（ｈＫ３）、ｈＫ１０、ｈＫ１５、ｕＰＡ、ｕＰＡＲ、ＭＭＰ－１、ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－３、ＭＭＰ－７、ＭＭＰ－８、ＭＭＰ－９、ＭＭＰ－１０、ＭＭＰ－１１、ＭＭＰ－１２、ＭＭＰ－１３、ＭＭＰ－１４、ＭＭＰ－１５、ＭＭＰ－１６、ＭＭＰ－１７、ＭＭＰ－１８、ＭＭＰ－１９、ＭＭＰ－２０、ＭＭＰ－２１、ＭＭＰ－２３Ａ、ＭＭＰ－２３Ｂ、ＭＭＰ－２４、ＭＭＰ－２５、ＭＭＰ－２６、ＭＭＰ－２７、ＭＭＰ－２８または表６に列挙されるプロテアーゼから選択される。
いくつかの実施形態において、プロテアーゼ活性化抗体は、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現されるタンパク質に結合する。ある特定の態様において、プロテアーゼ活性化抗体は、ＮＫＧ２Ｄ、ｃ－ｍｅｔ、ＨＧＦＲ、ＣＤ８、ヘパラン硫酸、ＶＳＰＧ４（ＮＧ２としても知られる）、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１３３、ＣＸＣＲ４、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＬＣ－３、アネキシンＩＩ、ヒトトランスフェリン受容体またはＥｐＣＡＭに結合する。ある特定の場合において、異なる腫瘍組織型への標的化を確実に行うために、単一のウイルスベクター粒子中に複数のプロテアーゼ活性化抗体を組み込むことができる。例えば、少なくとも１、２、３、４、６、７、８、９、１０またはそれ以上のプロテアーゼ活性化抗体は、ウイルス糖タンパク質エンベロープ中に組み込まれ得る。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のプロテアーゼ活性化抗体をコードする、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現される第１のタンパク質に結合する第１のプロテアーゼ活性化抗体と、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現される第２のタンパク質に結合する第２のプロテアーゼ活性化抗体とを含む。更なる実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、非がん細胞または非がん微小環境よりもがん細胞またはがん微小環境で高度に発現される複数のタンパク質に結合する複数のプロテアーゼ活性化抗体を含む。腫瘍溶解性ウイルスは、例えば、プロテアーゼ活性化抗体を含み、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体である。いくつかの実施形態において、腫瘍溶解性ウイルスは、完全長免疫グロブリン、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ'、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆｖ、ダイアボディ、トリアボディ、ミニボディ、単一ドメイン抗体または多重特異性抗体である抗体を含む。
いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、ウイルス複製に必要とされる１つ以上のウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性マイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）標的配列、１つ以上のタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする１つ以上のポリヌクレオチドであって、当該タンパク質またはオリゴヌクレオチドは、ｍｉＲ、遺伝子もしくはＴＩＭＰの発現を低下させるか、その機能を阻害する、オリゴヌクレオチド、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体、及び／または少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体をコードするポリヌクレオチドのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、非がん性細胞におけるウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピー、及び／またはがん促進性ｍｉＲＮＡもしくはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第１のポリヌクレオチド、及び／または微小環境リモデリングｍｉＲＮＡもしくはＴＩＭＰの発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第２のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、非がん性細胞におけるウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピー、及び／またはがん促進性ｍｉＲＮＡもしくはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードするポリヌクレオチド、及び／または少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体を含む。更なる実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、非がん性細胞におけるウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピー、及び／または微小環境リモデリングｍｉＲＮＡもしくはＴＩＭＰの発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードするポリヌクレオチド、及び／または少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体を含む。一実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、非がん性細胞におけるウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子の遺伝子座に挿入された１つ以上の腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡ標的配列の複数コピー、及び／またはがん促進性ｍｉＲＮＡもしくはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第１のポリヌクレオチド、及び／または微小環境リモデリングｍｉＲＮＡもしくはＴＩＭＰの発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第２のポリヌクレオチド、及び／または少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体を含む。いくつかの具体的な実施形態において、本段落に記載される腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルスであり、非がん性細胞においてウイルス複製に必要とされるウイルス遺伝子は、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、γ－３４．５、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ９、ＵＳ１０、ＵＳ１１及びＵＳ１２である。
ある特定の態様において、本発明は、がん促進性ｍｉＲＮＡまたはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする第１のポリヌクレオチドと、微小環境リモデリングｍｉＲＮＡまたはＴＩＭＰの低下発現を目的にしたタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードする第２のポリヌクレオチドとを含む、組み換え腫瘍溶解性ウイルスに関する。他の実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、がん促進性ｍｉＲＮＡまたはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードするポリヌクレオチドと、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体とを含む。いくつかの実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、微小環境リモデリングｍｉＲＮＡまたはＴＩＭＰの発現低下を目的にしたタンパク質またはオリゴヌクレオチドをコードするポリヌクレオチドと、少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体とを含む。一実施形態において、組み換え腫瘍溶解性ウイルスは、がん促進性ｍｉＲＮＡもしくはがん遺伝子の発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第１のポリヌクレオチド、及び／または微小環境リモデリングｍｉＲＮＡもしくはＴＩＭＰの発現低下を目的にしたタンパク質もしくはオリゴヌクレオチドをコードする第２のポリヌクレオチド、及び／または少なくとも１つのプロテアーゼ活性化抗体を含む。
ある特定の実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスは、ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルス（例えば、ＨＳＶ－１またはＨＳＶ－２））、アデノウイルス、ポリオウイルス、ワクシニアウイルス、麻疹ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、オルトミクソウイルス、パルボウイルス、マラバウイルスまたはコクサッキーウイルスである。ＨＳＶ系ベクター及びその構築物のための方法は、例えば、米国特許第７，０７８，０２９号、同第６，２６１，５５２号、同第５，９９８，１７４号、同第５，８７９，９３４号、同第５，８４９，５７２号、同第５，８４９，５７１号、同第５，８３７，５３２号、同第５，８０４，４１３号及び同第５，６５８，７２４号、ならびに国際特許出願第ＷＯ９１／０２７８８号、同第ＷＯ９６／０４３９４号、同第ＷＯ９８／１５６３７号及び同第ＷＯ９９／０６５８３号に記載されており、それらの全体を参照により本明細書に援用する。ＨＳＶの配列は、公開されており（ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＣ＿００１８０６；ＭｃＧｏｅｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ，６９（ＰＴ ７），１５３１－１５７４（１９８８）も参照）、本発明のＨＳＶ系ベクターの設計を容易にし得る。
本発明はまた、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスをコードする核酸分子も包含する。
組成物及び使用方法
本発明のある特定の態様は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスを含む、ストック及び組成物に関する。いくつかの態様において、本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスを含む、ウイルスストックに関する。いくつかの実施形態において、ウイルスストックは、均質なストックである。ウイルスストックの調製及び分析は、当該技術分野においてよく知られている。例えば、ウイルスストックは、ウイルスベクターを形質導入した細胞を含有するローラーボトル中で製造することができる。次いで、ウイルスストックをニコデンツ連続的密度勾配で精製し、等分し、必要時まで保存することができる。ウイルスストックは、主に、ウイルス遺伝子型ならびにウイルスストックの調製に使用するプロトコル及び細胞株に応じて、力価が大きく変動する。
特定の実施形態において、本明細書で企図されるウイルスストック（例えば、ＨＳＶ系ベクターウイルスストック）の力価は、少なくとも約１０５プラーク形成単位（ｐｆｕ）、例えば、少なくとも約１０６ｐｆｕ、または更により好ましくは少なくとも約１０７ｐｆｕである。ある特定の実施形態において、力価は、少なくとも約１０８ｐｆｕ、または少なくとも約１０９ｐｆｕであり得、少なくとも約１０１０ｐｆｕまたは少なくとも約１０１１ｐｆｕの高力価ストックが最も好ましい。
本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスまたは核酸分子と、薬学的に許容される担体とを含む、組成物を更に企図する。「薬学的に許容される」という文言は、対象（例えば、ヒト）に投与されたとき、アレルギー反応または同様の有害反応を起こさない分子実体及び組成物を指す。本明細書で使用される「組成物」という用語は、対象及び／または細胞に投与または送達することができる、本明細書に記載される１つ以上の腫瘍溶解性ウイルスまたは核酸分子の製剤を指す。典型的に、製剤は、その誘導体及び／またはプロドラッグ、溶媒和物、立体異性体、ラセミ体もしくは互変異性体を、任意の生理学的に許容される担体、希釈剤及び／または賦形剤とともに含む、生理学的に許容される全ての組成物を含む。「治療組成物」または「医薬組成物」（本明細書において区別なく用いられる）は、特定の疾患または障害の治療のために患者及び／または対象及び／または細胞に投与または送達することができる、１つ以上の剤の組成物である。
本明細書で開示される組成物は、中性形態または塩形態に製剤化され得る。「薬学的に許容される塩」には、酸付加塩と塩基付加塩の両方が含まれる。薬学的に許容される塩には、酸付加塩（タンパク質の遊離アミノ基と形成されるもの）、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸と形成されるもの、及び限定するものではないが、酢酸、２，２－ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、ショウノウ酸、カンファー－１０－スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２－オキソ－グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４－アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐトルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などの有機酸と形成されるものが含まれる。遊離カルボキシル基と形成される塩は、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などの無機塩基から誘導することもできる。有機塩基から誘導される塩には、一級、二級及び三級アミン、天然置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、ならびに塩基性イオン交換樹脂、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、デアノール、２－ジメチルアミノエタノール、２－ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、ポリアミン樹脂の塩などが含まれるが、これらに限定されない。特に好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン及びカフェインである。溶液は、配合されたら、剤形と適合した様式により、治療上有効な量で、投与される。製剤は、注射液、薬物放出カプセル剤などの様々な剤形で容易に投与される。
本明細書で使用されるとき、「担体」は、あらゆる全ての溶媒、分散媒、ビヒクル、コーティング剤、希釈剤、抗菌剤及び抗真菌剤、等張化剤及び吸収遅延剤、緩衝剤、担体液、懸濁液、コロイドなどを含む。このような媒体及び剤を薬学的活性物質に使用することは、当該技術分野においてよく知られている。任意の従来の媒体または剤は、有効成分と適合性がない場合を除き、治療組成物で使用されることが企図される。補助的な有効成分もまた、組成物中に組み込むことができる。
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される担体」には、限定するものではないが、生理学的に適合性のある、あらゆる補助剤、担体、賦形剤、滑剤、甘味剤、希釈剤、保存剤、色素／着色剤、風味向上剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、安定剤、等張化剤、溶媒、界面活性剤、分散媒、コーティング剤、抗菌剤及び抗真菌剤、等張化剤及び吸収遅延剤など、ヒト及び／または飼育動物への使用が許容されるものとして米国食品医薬品局から承認を受けている、薬学的に許容される細胞培養培地及び／または乳化剤が含まれる。例示的な薬学的に許容される担体には、ラクトース、グルコース及びスクロースなどの糖、トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプンなどのデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロースなどのセルロース及びその誘導体、トラガカント、モルト、ゼラチン、タルク、カカオバター、ワックス、動物性及び植物性脂肪、パラフィン、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、酸化亜鉛、ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及びダイズ油などの油、プロピレングリコールなどのグリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコールなどのポリオール、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルなどのエステル、寒天、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムなどの緩衝剤、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝液、ならびに医薬製剤に採用される他の適合物質が挙げられるが、これらに限定されない。任意の従来の媒体及び／または剤は、本開示の剤と適合性がない場合を除き、治療組成物で使用されることが企図される。補助的な有効成分もまた、組成物中に組み込むことができる。
湿潤剤、乳化剤、ならびに滑沢剤、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウムなど、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、及び芳香剤、防腐剤、ならびに酸化防止剤もまた、組成物中に存在し得る。
薬学的に許容される酸化防止剤の例としては、（１）水溶性酸化防止剤、例えば、アス
コルビン酸、塩酸システイン、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなど（２）油溶性酸化防止剤、例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、α－トコフェロールなど、及び（３）金属キレート剤、例えば、クエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などが挙げられる。
一実施形態において、担体を含む組成物は、非経口投与、例えば、血管内（静脈内または動脈内）、腹腔内または筋肉内投与に適している。薬学的に許容される担体には、注入可能な滅菌溶液または滅菌分散液を即時調製するための滅菌水溶液または滅菌分散液及び滅菌粉末が含まれる。薬学的活性物質のためのこのような媒体及び薬剤を使用することは、当該技術分野において周知である。任意の従来の媒体または剤は、ウイルスベクターまたは核酸分子と適合性がない場合を除き、本発明の医薬組成物で使用されることが企図される。
本発明の組成物は、単独または１つ以上の他の治療モダリティーとの組み合わせのいずれかで細胞または動物に投与するために、薬学的に許容される溶液または生理学的に許容される溶液中に配合された、本明細書に記載される１つ以上のポリペプチド、ポリヌクレオチド、ポリヌクレオチドを含むベクター、感染細胞などを含み得る。所望であれば、本発明の組成物は、例えば、サイトカイン、成長因子、ホルモン、小分子または様々な薬学的活性剤などの他の剤と組み合わせて投与することができることも理解される。組成物中に更に含めることができる他の構成成分には、その追加の剤が、意図された治療を果たす組成物の機能に悪影響を与えない限り、実質的に制限はない。
本発明の医薬組成物において、薬学的に許容される賦形剤及び担体液の配合は、当業者によく知られており、同様に、本明細書に記載される特定の組成物を様々な治療レジメンで使用するのに適した投薬及び治療レジメンの策定も当業者によく知られている。溶液は、配合されたら、剤形と適合した様式により、症状の改善または治癒をもたらす治療上有効な量で、投与される。製剤は、摂取可能な溶液、薬物放出カプセル剤などの様々な剤形で容易に投与される。用量については、治療がなされる対象の状態に応じて、いくらかの変動が生じ得る。いずれにせよ、投与を担当する者が個々の対象に適切な用量を決定することができる。更に、ヒトへの投与の場合、調製物は、ＦＤＡ生物学的製剤評価研究センターが要求する、無菌性、一般的安全性及び純度の基準を満たすものである。投与経路は、通常、治療される疾患の位置及び性質によって変わり、例えば、皮内、経皮吸収、真皮下、非経口、経鼻、静脈内、筋肉内、鼻腔内、皮下、経皮、気管内、腹腔内、腫瘍内、灌流、洗浄、直接注射及び経口による投与が含まれ得る。
ある特定の状況では、例えば、米国特許第５，５４３，１５８号；米国特許第５，６４１，５１５号及び米国特許第５，３９９，３６３号（それぞれの全体を参照により本明細書に明示的に援用する）に記載されているように、本明細書で開示される組成物、組み換えウイルスベクター及び核酸分子を非経口、静脈内、筋肉内または更に腹腔内により送達するのが望ましいであろう。遊離塩基または薬理学的に許容される塩である活性化合物の溶液は、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と適切に混合された水中で調製することができる。分散液はまた、グリセロール、液状ポリエチレングリコール及びこれらの混合物中、及び油中で調製することができる。これらの調製物は、通常の保存条件及び使用条件下で、微生物の発育を阻止するための保存剤を含有する。
注射用途に好適な医薬形態には、注入可能な滅菌溶液または滅菌分散液を即時調製するための滅菌水溶液または滅菌分散液及び滅菌粉末が含まれる（米国特許第５，４６６，４６８号；その全体を参照により本明細書に明示的に援用する）。全ての場合において、当該形態は、無菌でなければならず、容易に注射できる程度の流動性を有する必要がある。これは、製造及び保管の条件下で安定でなければならず、細菌及び真菌等の微生物の混入作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール及び液状ポリエチレングリコールなど）、その好適な混合物及び／または植物油を含有する、溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング剤の使用によって、分散液の場合には必要とされる粒径の維持によって、また界面活性剤の使用によって、維持され得る。微生物作用の阻止は、種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによって促進することができる。多くの場合、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。注射可能な組成物の吸収の延長は、吸収を遅延させる作用物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンの組成物中の使用によってもたらされ得る。タンパク質を有効成分として含有する水性組成物の調製は、当該技術分野においてよく理解されている。典型的に、このような組成物は、液体溶液または懸濁液のいずれかの注射剤として調製され、また、注射前に液体中に溶解または懸濁するのに好適な固体形態も調製することができる。調製物は、乳化することもできる。
水溶液での非経口投与の場合、例えば、溶液を必要に応じて好適に緩衝化する必要があり、最初に十分な生理食塩水またはグルコースで液体希釈剤を等張にする必要がある。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下及び腹腔内の投与に特に好適である。これに関して、採用することができる無菌水性媒体は、本開示に照らして、当業者に知られている。例えば、１用量を１ｍｌのＮａＣｌ等張液中に溶解し、１０００ｍｌの皮下注射液に加えるか、予定注射部位に注射することができる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００参照）。用量については、治療がなされる対象の状態に応じて、いくらかの変動が必然的に生じ得る。いずれにせよ、投与を担当する者が個々の対象に適切な用量を決定する。更に、ヒトへの投与の場合、調製物は、ＦＤＡ生物学的製剤評価オフィスが要求する、無菌性、発熱性、一般的安全性及び純度の基準を満たす必要がある。
無菌注射用溶液は、上述の様々な他の成分とともに、活性化合物を必要な量で適切な溶媒中に組み込み、必要に応じて、その後濾過滅菌することにより調製することができる。一般に、分散液は、滅菌された様々な有効成分を、基本的な分散媒と、上記の成分のうち必要とされる他の成分とを含有する無菌ビヒクル中に組み込むことにより調製することができる。無菌注射用溶液の調製のための無菌粉末の場合、その調製の好ましい方法は、予め無菌濾過した溶液から有効成分と任意の所望の追加成分とを合わせた粉末が得られる、真空乾燥及び凍結乾燥技術である。
ある特定の実施形態において、組成物は、鼻腔内スプレー、吸入及び／または他のエアゾール送達ビヒクルによって送達され得る。経鼻エアゾールスプレーを介してポリヌクレオチド及びペプチド組成物を肺に直接送達するための方法は、例えば、米国特許第５，７５６，３５３号及び米国特許第５，８０４，２１２号（それぞれの全体を参照により本明細書に明示的に援用する）に記載されている。同様に、鼻腔内用微小粒子樹脂（Ｔａｋｅｎａｇａ ｅｔ ａｌ．，１９９８）及びリゾホスファチジル－グリセロール化合物（米国特許第５，７２５，８７１号；その全体を参照により本明細書に明示的に援用する）を使用した薬物の送達も薬学分野においてよく知られている。同様に、ポリテトラフルオロエチレン支持マトリックス形態での経粘膜による薬物送達は、米国特許第５，７８０，０４５号（その全体を参照により本明細書に明示的に援用する）に記載されている。
ある特定の実施形態において、送達は、本発明の組成物を好適な宿主細胞に導入するために、リポソーム、ナノカプセル、微粒子、ミクロスフェア、脂質粒子、小胞などを、任意選択によりＣＰＰポリペプチドと混合して使用することによって行うことができる。特に、本発明の組成物は、脂質粒子、リポソーム、小胞、ナノスフェア、ナノ粒子などのいずれかに封入された状態での送達用に製剤化され得る。そのような送達ビヒクルの製剤化及び使用は、既知の従来技術を使用して実施することができる。本発明の製剤及び組成物は、単独または１つ以上の他の治療モダリティーとの組み合わせのいずれかで細胞または動物に投与するために、薬学的に許容される溶液または生理学的に許容される溶液（例えば、培養培地）中に配合された、本明細書に記載される１つ以上のポリペプチド、ポリヌクレオチド及び小分子を含み得る。所望であれば、本発明の組成物は、例えば、細胞、他のタンパク質もしくはポリペプチドまたは様々な薬学的活性剤などの他の剤と組み合わせて投与することができることも理解される。
特定の一実施形態において、本発明による製剤または組成物は、本明細書で企図される任意数のポリヌクレオチドまたはウイルスベクターの組み合わせと接触させた細胞を含む。
ある特定の態様において、本発明は、ウイルスベクター系を送達するのに好適な製剤または組成物を提供する。
ｅｘ ｖｉｖｏ送達のための例示的な製剤は、当該技術分野において知られている様々なトランスフェクション剤（リン酸カルシウムなど）、エレクトロポレーション、熱ショック及び各種リポソーム製剤（すなわち、脂質媒介トランスフェクション）の使用も含み得る。リポソームは、水性流体の一部を閉じ込めた脂質二重層である。ＤＮＡは、カチオン性リポソームの外表面と自然に会合し（その電荷によって）、これらのリポソームは、細胞膜と相互作用する。
本発明の特定の実施形態は、薬学分野でよく知られているもの、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００に記載されているものなどの他の製剤を含み得る。
ある特定の態様において、本発明は、１つ以上の薬学的に許容される担体（添加剤）及び／または希釈剤（例えば、薬学的に許容される細胞培養培地）とともに配合された、本明細書に記載される治療上有効な量の１つ以上のウイルスベクターまたはポリヌクレオチドを含む、薬学的に許容される組成物を提供する。本明細書で使用されるとき、「治療上有効な量」は、所望の生理学的成果及び／または生物学的成果を達成するのに必要とされる、本明細書に記載される組成物または組み換えウイルスの量を指す。ウイルス、ウイルスストックまたは組成物の「治療上有効な量」は、個体の病態、年齢、性別及び体重、ならびに個体において所望の応答を誘導する幹細胞及び前駆細胞の能力などの因子に応じて変動し得る。治療上有効な量はまた、治療上有益な効果が、ウイルスまたは形質導入した治療細胞の任意の毒性または有害作用を上回るものでもある。「治療上有効な量」という用語は、対象（例えば、患者）を「治療する」のに有効な量を含む。治療上有効な量は、プラーク形成単位（ｐｆｕ）の総数（例えば、少なくとも１ｅ１～少なくとも１ｅ２０、特に約１ｅ４～約１ｅ１５、より詳細には約１ｅ６～約１ｅ１２ｐｆｕ）、またはウイルスゲノムの数（例えば、少なくとも１ｅ１～少なくとも１ｅ２０、特に約１ｅ４～約１ｅ１５、より詳細には約１ｅ６～約１ｅ１２ウイルスゲノム）によって定量することができる。当業者であれば、治療上有効な量が、投与されるウイルスの種類、製剤の性質、投与経路、治療される疾患の性質及び／もしくは重症度ならびに／または対象の全般的な健康状態及び満足状態に基づいて変動することを理解するであろう。
本発明のいくつかの態様は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルスまたはその組成物に対して、がん性細胞を、腫瘍溶解性ウイルスが当該がん性細胞に感染し、当該がん性細胞内で複製するのに十分な条件下で曝露することを含み、がん性細胞内における腫瘍溶解性ウイルスの複製が細胞死をもたらす、がん性細胞を殺傷する方法を包含する。ある特定の実施形態において、がん性細胞は、非がん性細胞と比較して、腫瘍抑制性ｍｉＲの発現が低下している。いくつかの実施形態において、本方法によって殺傷されるがん性細胞は、ｉｎ ｖｉｖｏである。ある特定の実施形態において、本方法によって殺傷されるがん性細胞は、腫瘍内にある。
本発明は、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルス、ウイルスストックまたは組成物の予防上有効な量または治療上有効な量を対象に投与することを含む、がんの治療を必要とする対象において、がんを治療する方法に関する。「対象」は、本明細書で使用されるとき、本明細書で開示される組み換えウイルスベクター、組成物及び方法で治療することができる疾患、障害または状態の症状を示す、任意の動物を含む。好適な対象（例えば、患者）には、実験動物（マウス、ラット、ウサギまたはモルモットなど）、家畜（ウマまたはウシなど）及び飼育動物またはペット（ネコまたはイヌなど）が含まれる。非ヒト霊長類及び好ましくはヒト患者が含まれる。
「投与」は、本明細書において、腫瘍溶解性ウイルス、ウイルスストックもしくはその組成物を対象に導入すること、または腫瘍溶解性ウイルス、ウイルスストックもしくはその組成物を細胞及び／もしくは組織と接触させることを指す。投与は、注射、灌注、吸入、摂取、電気浸透、血液透析、イオントフォレシス及び当該技術分野において知られている他の方法によって実施することができる。投与経路は、通常、治療される疾患の位置及び性質によって変わり、例えば、耳介、頬側、結膜、皮膚、歯、子宮頸管内、副鼻腔内、気管内、腸内、硬膜外、間質内、関節内、動脈内、腹内、耳介内、胆管内、気管支内、嚢内、海綿内、脳内、槽内、角膜内、歯冠内、冠動脈内、頭蓋内、皮内、脊髄内、腺管内、十二指腸内、十二指腸内、硬膜内、心外膜内、表皮内、食道内、胃内、歯肉内、肝内、回腸内、病巣内、舌内、管腔内、リンパ腺内、乳腺内、骨髄内、髄膜内、筋肉内、鼻腔内、節内、眼内、網内、卵巣内、腹腔内、心膜内、胸膜内、前立腺内、肺内、第一胃内、洞内、脊髄内、滑液嚢内、腱内、精巣内、気管内、髄腔内、胸郭内、小管内、腫瘍内、鼓室内、子宮内、腹腔内、脈管内、脳室内、膀胱内、前庭内、静脈内、硝子体内、喉頭部、経鼻、経鼻胃、経口、眼、口咽頭、非経口、経皮、関節周囲、硬膜外、神経周囲、歯周、呼吸器、尿細管後、直腸、脊髄、クモ膜下、結膜下、皮下、真皮下、歯肉下、舌下、粘膜下、網膜下、局所、経皮吸収、経心内膜、経粘膜、経胎盤、経気管、経鼓膜、尿管、尿道及び／または膣灌流、洗浄、直接注射ならびに経口による投与が挙げられる。
本明細書で使用される「治療すること」及び「治療」という用語は、対象の疾患もしくは状態、または疾患もしくは状態の症状が改善するように、本明細書に記載される組み換えウイルスまたはその組成物の治療上有効な量を対象に投与することを指す。改善は、疾患もしくは状態、または疾患もしくは状態の症状の任意の改善または治療である。改善は、観察可能または測定可能な改善であってもよいし、対象の全般的な満足感の改善であってもよい。したがって、当業者は、治療により疾患状態が改善し得るが、疾患の完全な治癒ではないことがあることを認識している。「予防上有効な量」は、所望の予防結果を達成するのに有効なウイルス、ウイルスストックまたは組成物の量を指す。本明細書で使用されるとき、「予防」は、疾患症状の完全な予防、疾患症状の発生遅延、または後続して発症する疾患症状の重症度の緩和を意味し得る。典型的であって、必ずしもそうではないが、予防上有効な量は、疾患の早期段階前または早期段階において対象に使用される予防用量であるので、治療上有効な量よりも少ない。
本明細書における「がん」は、無秩序な細胞成長を典型的に特徴とする、哺乳類の生理学的状態を指すか、当該状態を記述するものである。がんの例には、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫（脂肪肉腫、骨原性肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、平滑筋肉腫、脊索腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、横紋筋肉腫、線維肉腫、粘液肉腫、軟骨肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍、中皮腫、滑膜腫、シュワン腫、髄膜腫、腺癌、黒色腫及び白血病またはリンパ系悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。このようながんのより具体的な例には、扁平上皮細胞癌（例えば、扁平細胞上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌及び肺扁平上皮癌、小細胞肺癌を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ／ｓｔｏｍａｃｈ）、膵癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、ヘパトーマ、乳癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺、腎癌（ｋｉｄｎｅｙ／ｒｅｎａｌ）、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、胆道腫瘍、ユーイング腫瘍、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、ヘパトーマ、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、精巣腫瘍、肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、骨髄異形成疾患、重鎖病、神経内分泌腫瘍、シュワン腫及び他の癌腫ならびに頭頸部癌が挙げられる。
ある特定の実施形態において、本明細書に記載される腫瘍溶解性ウイルス（例えば、ＨＳＶ）、ウイルスストックまたは組成物は、肺癌（例えば、小細胞肺癌または非小細胞肺癌）、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵癌、肝癌（例えば、肝細胞癌（ＨＣＣ））、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、黒色腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択されるがんを治療するために使用される。
ある特定の態様において、本発明は、本明細書で開示される図面または実施形態のいずれか１つに示される腫瘍溶解性ウイルスベクターに関する。
以下の実施例は、本発明の各種実施形態を例示するためのものであり、いかなる形でも本発明を限定することを意味しない。本実施例は、本明細書に記載の方法も含め、例示的なものであり、本発明の範囲を限定する意図はない。特許請求の範囲によって定義される本発明の趣旨内に包含される、本記載の実施形態に対する改変、変形及び他の変更が具体的に企図される。
実施例１－正常細胞及び悪性細胞のｍｉＲ配列分析
ｍｉＲの差次的発現は、多くのがんの特徴である（Ｌｕ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔｕｒｅ，２００５）。８つの異なるがん細胞株で概ね高度に差次的に発現されるｍｉＲを決定するために実験を実施した。差次的発現は、非がん性対照組織との比較によって決定した。合計で１０８のサンプルについて配列決定を行った。サンプルの詳細を以下の表に示す。
Figure 0007174109000002
選択された細胞種でのＨＳＶ減衰に適した妥当なｍｉＲＮＡ標的配列の特定を容易にするために、がん系及び非がん対照組織のｍｉＲＮＡ配列プロファイリングを実施した。膀胱、結腸、乳房、膵臓、肺、頭頸部、シュワン腫、膠芽腫、脳、肝臓及び骨髄を含む、がん細胞及び非がん細胞について、ダイサー処理されたＲＮＡのシーケンシングライブラリーを調製した。これらのｍｉＲＮＡシーケンシングライブラリーを全ＲＮＡに対して正規化し、シーケンシングリード最大３ｅ８リード／ラン用ＨｉＳｅｑ Ｖ４化学試薬により、ＨｉＳｅｑ ２５００超ハイスループットシーケンシングシステム（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）を使用して、配列決定した。Ｂａｓｅｓｐａｃｅ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）のｍｉＲＮＡ解析ツールを使用して、シーケンシングのランから得たＦＡＳＴＱファイルを解析した。正常の平均値、がんの平均値を算出し、正常とがんの比を上から下に並べ替えることによって、順位付けを行った。ゼロ及びゼロに変換した負の値を含む自然対数値を用いてヒートマップを作成した（スケール：黒色が高発現、白色が低発現）。サンプル全体にわたる正規化データは、所与のサンプルにおける正規化したｍｉＲＮＡ読み取り数として表した。正規化は、比較する他のサンプルを基準とした所与のサンプルの総読み取り数に関する。
図１は、２５のｍｉＲＮＡの非がん性脳組織及びがん性脳組織におけるｍｉＲＮＡ発現プロファイルヒートマップを例示する。非がん性及びがん性の膀胱（図２）、乳房（図３）、結腸（図４）、脳（図５）、頭頸部（図６）、肺（図７）、膵臓（図８）、及びシュワン腫（図９）組織について、各例において２５のｍｉＲＮＡに対応する、ｍｉＲＮＡ発現プロファイルヒートマップの更なる例を示す。図１０は、ｍｉＲ－４５１ａレベルが、非がん性組織と比較して、全ての腫瘍種で下方制御されることを示し、汎腫瘍抑制ｍｉＲＮＡであることを表している。図１１は、ｍｉＲ－１が、試験した全ての腫瘍種で下方制御され、非がん性組織で中程度のレベルで存在し、頭頸部組織では高レベルで存在することを示している。図１２は、ｍｉＲ－５５９が、試験した全ての腫瘍種で下方制御され、非がん性組織で概ね低レベルで存在し、非がん性肺組織では高レベルで存在することを示している。図１３は、ｍｉＲ－１４５－５ｐが、試験した全ての腫瘍種で下方制御され、試験した非がん性組織種の大部分で概ね高レベルで存在することを示している。図１４は、ｍｉＲ－１４３－３ｐが結腸、肺及び膵臓の腫瘍で下方制御され、全ての正常組織種及びいくつかの乳房腫瘍株で高レベルで存在することを示している。ｍｉＲＮＡデータ解析により、新規かつ予想外のｍｉＲＮＡ発現プロファイルを表す、少なくとも１１のｍｉＲＮＡが明らかになった。これらは、これまでの文献で特定されていないものである。
特定されたこれらのｍｉＲＮＡの多くは、汎腫瘍特異性または多腫瘍特異性である。例えば、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１４５－３ｐ及びｍｉＲ１４３－３ｐの発現は、対照組織と比較して、試験した全てのがん細胞株にわたって、概ね下方制御された。これは、特にｍｉＲ－４５１ａに顕著であり、全ての正常組織種で高発現され、全てのがん種で実質的に下方制御されていることから、汎特異的腫瘍抑制性ｍｉＲＮＡであることを表している。ｍｉＲ－５５９の発現は、正常肺組織を除く正常組織種で低く、正常組織におけるｍｉＲ－１及びｍｉｒ－１４５－３ｐの発現は、様々であった。差の大きさ及び絶対発現レベルのばらつきにもかかわらず、がん細胞株の各ｍｉＲの平均発現は、対応する正常組織のレベルと比較して、実質的に低かった。これらのｍｉＲＮＡは、様々ながん種を広く治療することができる汎腫瘍ＨＳＶビリオンの作製候補である。
ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１、ｍｉＲ－１４５－３ｐ及びｍｉＲ１４３－３ｐの平均発現は、正常対照と比較して、がん細胞株でより低いが、この発現低下は、全てのがん細胞株にわたって完全に一様ではなかった。例えば、試験した正常膀胱サンプルの２／３は、ｍｉＲ－１４５－３ｐの発現上昇を示したが、残りのサンプルにおける発現は、がん細胞株で観察された平均と実質的に同様であった。同様の結果が乳癌細胞株でも観察された。全ての乳癌サンプルの平均読み取り数は１０６であったが、１２のサンプルのうち５つが１０００を超える正規化読み取り数であり、そのうちの２つは、４０，０００を超える数値であった。
これらのデータは、広範な腫瘍種を治療の対象とすることができる単一のｍｉＲ減衰型腫瘍溶解性ウイルスを作製できる可能性を示している。例えば、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－５５９、ｍｉＲ－１及びｍｉＲ－１４５－３ｐに対する標的配列を含む構築物を、試験した全ての腫瘍種（例えば、膀胱、結腸、乳房、膵臓、肺、頭頸部、シュワン腫及び膠芽腫）の治療に使用することができる。種々のがん種におけるｍｉＲ発現レベルのばらつきは、ｍｉＲ発現によって、または更なるバイオマーカーの使用によって、患者を層化する必要性が存在し得ることを示している。
実施例２－ｍｉＲＮＡによる遺伝子減衰を迅速にアッセイするためのレポーター系の構築及びその使用
実質的に任意のｍｉＲＮＡ標的配列と同種ｍｉＲＮＡを使用したｍｉＲＮＡによる遺伝子減衰を評価するために、レポーター系を開発した。この系において（図１５に示す）、ｍｉＲＮＡ（すなわち、ｈｓａ－ｍｉＲ－１２２）によって認識される標的配列は、不安定化緑色蛍光タンパク質（ｄｓＧＦＰ）の３’ＵＴＲに挿入した。更に、ｍＣｈｅｒｒｙをｍｉＲＮＡ発現の対照として使用し、同種ｍｉＲＮＡをテトラサイクリン（ｔｅｔ）誘導性プロモーターを介して発現させた。ｍＣｈｅｒｒｙも発現するｔｅｔ抑制性ベクターｐｃＤＮＡ５ Ｆｒｔ／Ｔｏに全ての発現ベクターをクローニングした（ｐＴＦ００２）。発現用ｍｉＲＮＡは全て、ヒトゲノムＤＮＡから遺伝子合成によって作製し、ｐＴＦ００２にクローニングした。減衰レポーター遺伝子ベクターを作製するために、ｄｓＧＦＰをｃＤＮＡ３．１＋にクローニングし、ベクターｐＴＦ００４を作製した。減衰ベクターは、８～１６ヌクレオチドで分離された、目的のｍｉＲＮＡ配列の逆相補鎖の４つのタンデムリピートを含有する。標準的な分子生物学技術を使用して、合成生成したオリゴヌクレオチドをｐＴＦ００４のｄｓＧＦＰ遺伝子の３'ＵＴＲに挿入することによって、プラスミドを構築した。１日目に、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００を製造元のプロトコル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に従って使用し、ｍｉＲＮＡ減衰及びレポーター遺伝子発現プラスミド（各０．１５μｇ、合計０．３μｇのＣＭＶプロモーター含有プラスミド）をＨＥＫ２９３ＴｅｔＲ細胞にトランスフェクトした。２日目に、テトラサイクリン５ｎｇ／ｍｌで細胞を処理し、最大７２時間インキュベートした。インキュベーション後、ＧＦＰ及びｍＣｈｅｒｒｙ蛍光シグナルをＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）ｉ３ｘ Ｍｉｎｉｍａｘマルチモードマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して毎日検出し、Ｓｏｆｔｍａｘ ＰｒｏまたはＭｅｔａｍｏｒｐｈイメージングソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して解析した。露光５～６ｍｓ、ＧＦＰ（５４１ｎｍのチャンネル）露光１０ｍｓ、及びｍＣｈｅｒｒｙ（７１３ｎｍのチャンネル）２００～１５００ｍｓで位相画像を取得した。
図１６は、ｔｅｔを介してｍｉＲ－１２２発現を誘導したときの、２４時間におけるｍｉＲ－１２２媒介性ＧＦＰ発現減衰を例示する。対照構築物ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－３４ａ及びＬｅｔ７ａは、ＧＦＰレベルを減衰せず、ｔｅｔの不在下でもＧＦＰ減衰は観察されなかった。図１７は、各ｍｉＲ標的配列を個々に、またｍｉＲ－１２２／Ｌｅｔ７ａ、ｍｉＲ－１２２／Ｌｅｔ７ａ／ｍｉＲ－３４ａ、またはｍｉＲ－１２２／Ｌｅｔ７ａ／ｍｉＲ－１８４のカセット組み合わせで使用した、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－３４ａ及びＬｅｔ７ａの発現とＧＦＰ減衰を示す。ＧＦＰの低下は、適切なｍｉＲと同種の標的配列が一緒に存在するときにのみ観察される（円で囲んだウェル）。図１８は、非減衰対照であり、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１８４、ｍｉＲ－３４ａ及びＬｅｔ７ａの発現とｍＣｈｅｒｒｙの発現を示す。
図１９は、各標的配列を個々に使用した、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１の発現とＧＦＰ減衰を示す（円で囲んだウェル）。図２０は、上記例の非減衰対照であり、各標的配列を個々に使用した、ｍｉＲ－１２２、ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－１４５、ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１の発現とｍＣｈｅｒｒｙの発現を示す。図２１は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２２またはｍｉＲ－１８４標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２２及びｍｉＲ－１８４がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２２は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－３４ａまたはｍｉＲ－１８４標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－３４ａ及びｍｉＲ－１８４がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２３は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のＬｅｔ－７ａまたはｍｉＲ－１８４標的配列が存在するとき、Ｌｅｔ－７ａ及びｍｉＲ－１８４がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２４は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２４またはｍｉＲ－１８４標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２４及びｍｉＲ－１８４がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２５は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２４またはｍｉＲ－１８４標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２４及びｍｉＲ－１８４がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２６は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１９９またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１９９及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２７は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２５またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２５及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２８は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２６またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２６及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図２９は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１２７またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１２７及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図３０は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－１３３またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－１３３及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。図３１は、トランスフェクションから７２時間後に、同種のｍｉＲ－２２３またはｍｉＲ－４５１標的配列が存在するとき、ｍｉＲ－２２３及びｍｉＲ－４５１がＧＦＰ蛍光を減衰させることを示している。
このように、これらのデータは、ｍｉＲ発現が、同種のｍｉＲ標的配列を発現する遺伝子の特異的減衰をもたらすことができることを示している。
実施例３－ｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶの作製
ｍｉＲＮＡ標的配列と同種ｍｉＲＮＡのペアに対するレポーター遺伝子による検証の後、ｍｉＲＮＡ減衰カセットを含有するＨＳＶ系ウイルスを作製した。細菌人工染色体（ＢＡＣ）上のＨＳＶ－１ ＫＯＳ株の完全長ゲノムクローンであるＫＯＳ－３７ ＢＡＣに一連の改変を記載されているように行った（Ｍａｚｚａｃｕｒａｔｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ．，２０１５）。その産物であるＫＧＢＡＣは、ＩＣＰ４７遺伝子のプロモーターの他に、二倍体遺伝子ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴ及びＩＣＰ４のそれぞれを１コピー含有する内部反復（接合）領域を欠失したものである。この欠失により、欠失させた４遺伝子の残りのコピーに対する操作が容易になり、ウイルスの腫瘍溶解活性を向上させる導入遺伝子の導入を可能にするスペースが豊富に得られ、神経毒性因子ＩＣＰ３４．５の発現を低下させることによって腫瘍特異性が高まる。ＩＣＰ４７発現の排除は、ウイルス特異的Ｔ細胞による、感染したがん細胞の免疫認識に有益である。ＫＧＢＡＣはまた、２Ａペプチド配列を介して糖タンパク質Ｃ（ｇＣ）ＯＲＦに融合したＧＦＰオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）も含有し、後期（複製後）のウイルス遺伝子発現をモニタリングできるようにした。最後に、ＫＧＢＡＣは、通常以外の受容体を介したＨＳＶ侵入の増強を示した、ｇＢ遺伝子の変異ペアを含有する。図３２に示されるように、ｍｉＲＮＡ標的配列カセットを２Ａ５Ｂ－ＭＭＰ９のＩＣＰ４及び／またはＩＣＰ２７遺伝子の３'ＵＴＲに組み換えて、ＯＮＣＲ－００３、ＯＮＣＲ－０１０、ＯＮＣＲ－０１１、ＯＮＣＲ－０１２、ＯＮＣＲ－０１３、ＯＮＣＲ－０１４、ＯＮＣＲ－０１５、ＯＮＣＲ－０１６、ＯＮＣＲ－０１７、ＯＮＣＲ－０１８、ＯＮＣＲ－０１９、ＯＮＣＲ－０２０、ＯＮＣＲ－０２１及びＯＮＣＲ－０２２を作製した。Ｖｅｒｏ－Ｃｒｅ細胞のトランスフェクションによって、全てのＢＡＣ構築物をウイルス粒子に変換し、同時にｌｏｘＰ部位の間に位置するＢＡＣ配列を除去した。プラーク精製後、ウイルスストックを調製し、Ｖｅｒｏ細胞で力価を決定した。
実施例４－ｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶを使用したウイルス感染力アッセイ
正常細胞及びがん性細胞におけるウイルスの感染力及び複製についてアッセイするために、ｍｉＲＮＡ減衰型ＨＳＶ粒子を以下のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイで試験した。１日目に、各感染細胞種について、ＨＳＶ粒子を導入して０．０１の多重感染度（ＭＯＩ）を達成した。２～５日目に、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）ｉ３ｘ Ｍｉｎｉｍａｘマルチモードマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用してＧＦＰを検出することによってウイルス感染力をアッセイし、Ｓｏｆｔｍａｘ ＰｒｏまたはＭｅｔａｍｏｒｐｈイメージングソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して解析した。あらゆる潜在的な非特異的自家蛍光シグナルを評価するために、露光５～６ｍｓ、ＧＦＰ（５４１ｎｍのチャンネル）露光１０ｍｓ、及びｍＣｈｅｒｒｙ（７１３ｎｍのチャンネル）２００～１５００ｍｓを使用して位相画像を取得した。
ＯＮＣＲ－０１１複製は、図３３（ＧＦＰ陽性細胞定量による読み出し）及び図３４（定量ＰＣＲによる読み出し）に示されるように、有糸分裂後の肺組織で大幅に減衰され、これは、ＩＣＰ２７遺伝子中にｍｉＲ－１２５カセットが存在することと、これらの細胞におけるｍｉＲ－１２５ａのレベルが高い（３０００個超）ことに起因する。ＯＮＣＲ－０１１及び対照ウイルスのＯＮＣＲ－００３は、ＩＣＰ４遺伝子中にｍｉＲ－１２４標的配列を含有するが、ｍｉＲ－１２４は低レベル（１００個未満）で存在することから、ウイルス複製の減衰は不十分であった。ＯＮＣＲ－０１１及びＯＮＣＲ－００３の両方は、頭頸部がん細胞（Ａ２５３）で支障なく複製された。これは、これらの細胞がｍｉＲ－１２５ａ及びｍｉＲ－１２４の両方を低レベル（１００個未満）で含むためである。ＯＮＣＲ－０１３複製は、図３５（ＧＦＰ陽性細胞定量による読み出し）及び図３６（定量ＰＣＲによる読み出し）に示されるように、ＨＣＣ１３９５細胞で大幅に減衰したが、Ａ２５３細胞では減衰しなかった。ＯＮＣＲ－０１４複製は、図３７（ＧＦＰ陽性細胞定量による読み出し）及び図３８（定量ＰＣＲによる読み出し）に示されるように、非がん性肺組織で大幅に減衰した。
実施例５－膵癌、肺癌または結腸癌に罹患している患者の治療
本明細書に開示される組成物及び方法を使用して、膵癌、肺癌または結腸癌に罹患している患者を治療する。図３９～４４に示されるように、１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列をＵＬ１９、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２７（または他のウイルス遺伝子）に組み込むことによって減衰化したＨＳＶ系ウイルスストックを作製することができる。いくつかの場合において、図４５～４６に示されるように、ｍｉＲＮＡ標的配列に加えて、腫瘍破壊及び／または微小環境リモデリングのためのゲノム編集能力をウイルスに操作する。具体例において、ＩＣＰ４及びＩＣＰ２７に組み込まれたｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ及びｍｉＲ－５５９の減衰カセットを含有するＨＳＶ系ストックを、実施例３に記載の方法に従って作製する。ｍｉＲＮＡ標的配列カセットは、図４７に示されるように、ＩＣＰ４（ｍｉＲ－１２４）及びＩＣＰ２７（ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４３－３ｐ、ｍｉＲ－５５９）遺伝子の３'ＵＴＲに導入される。Ｖｅｒｏ－Ｃｒｅ細胞のトランスフェクションによって、ＢＡＣ構築物をウイルス粒子に変換し、同時にｌｏｘＰ部位の間に位置するＢＡＣ配列を除去する。プラーク精製後、ウイルスストックを更に精製し、緩衝液交換を行い、Ｖｅｒｏ細胞で力価を決定する。膵癌、肺癌または結腸癌に罹患している患者にｉｎ ｖｉｖｏ投与する場合、ＨＳＶ粒子を薬学的に許容される安定化剤とともにリン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で調製する。治療日に、薬学的に許容される担体（体積１．０ｍＬ）中の１０９個のベクターゲノムを腫瘍内注射によって投与する。標準治療手順を使用して、患者の具体的な予後に基づき、適切な時間間隔で腫瘍退縮について患者をモニタリングする。
実施例６－脳癌、膀胱癌、乳癌または頭頸部癌に罹患している患者の治療
本明細書に開示される組成物及び方法を使用して、脳癌、膀胱癌、乳癌または頭頸部癌に罹患している患者を治療する。ｍｉＲ－１２４、ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ－１４５－３ｐ及びｍｉＲ－５５９の減衰カセットを含有するＨＳＶ系ウイルスストックを実施例３に記載の方法に従って作製する。ｍｉＲＮＡ標的配列カセットは、図４８に示されるように、ＩＣＰ４（ｍｉＲ－１２４）及びＩＣＰ２７（ｍｉＲ－４５１ａ、ｍｉＲ-１４５－３ｐ、ｍｉＲ－５５９）遺伝子の３'ＵＴＲに導入される。Ｖｅｒｏ－Ｃｒｅ細胞のトランスフェクションによって、ＢＡＣ構築物をウイルス粒子に変換し、同時にｌｏｘＰ部位の間に位置するＢＡＣ配列を除去する。プラーク精製後、ウイルスストックを更に精製し、緩衝液交換を行い、Ｖｅｒｏ細胞で力価を決定する。脳癌、膀胱癌、乳癌または頭頸部癌に罹患している患者にｉｎ ｖｉｖｏ投与する場合、ＨＳＶ粒子を薬学的に許容される安定化剤とともにリン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で調製する。治療日に、薬学的に許容される担体（体積１．０ｍＬ）中の１０９個のベクターゲノムを腫瘍内注射によって投与する。標準治療手順を使用して、患者の具体的な予後に基づき、適切な時間間隔で腫瘍退縮について患者をモニタリングする。
実施例７－シュワン腫に罹患している患者の治療
本明細書に開示される組成物及び方法を使用して、シュワン腫に罹患している患者を治療する。ｍｉＲ－１２４－３ｐ、ｍｉＲ－２０５－５ｐ、ｍｉＲ－１４１－５ｐ及びｍｉＲ－３１－５ｐの減衰カセットを含有するＨＳＶ系ウイルスストックを実施例３に記載の方法に従って作製する。ｍｉＲＮＡ標的配列カセットは、図４９に示されるように、ＩＣＰ４（ｍｉＲ－１２４）及びＩＣＰ２７（ｍｉＲ－２０５－５ｐ、ｍｉＲ－１４１－５ｐ、ｍｉＲ－３１－５ｐ）遺伝子の３'ＵＴＲに組み換えられた。Ｖｅｒｏ－Ｃｒｅ細胞のトランスフェクションによって、ＢＡＣ構築物をウイルス粒子に変換し、同時にｌｏｘＰ部位の間に位置するＢＡＣ配列を除去する。プラーク精製後、ウイルスストックを更に精製し、緩衝液交換を行い、Ｖｅｒｏ細胞で力価を決定した。シュワン腫に罹患している患者にｉｎ ｖｉｖｏ投与する場合、ＨＳＶ粒子を薬学的に許容される安定化剤とともにリン酸緩衝液（ＰＢＳ）中で調製する。治療日に、薬学的に許容される担体（体積１．０ｍＬ）中の１０９個のベクターゲノムを腫瘍内注射によって投与する。標準治療手順を使用して、患者の具体的な予後に基づき、適切な時間間隔で腫瘍退縮について患者をモニタリングする。
本発明の好ましい実施形態を本明細書に示し、記載しているが、当該実施形態は、例としてのみ提供されることは、当業者には明らかであろう。当業者であれば、本発明を逸脱することなく、多数の変形形態、変更及び置換を実施することができる。本明細書に記載される本発明の実施形態に対する種々の代替手段が、本発明の実施において採用され得ることを理解されたい。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義し、特許請求の範囲内の方法及び構造ならびにそれらの等価物を包含することが意図される。
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Claims (19)

  1. 少なくとも２つの異なるｍｉＲ標的配列を含む組換え単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）であって、前記組換えＨＳＶのゲノムのＩＣＰ４遺伝子座が少なくとも１つのｍｉＲ－１２４標的配列を含み、前記組換えＨＳＶゲノムのＩＣＰ２７遺伝子座が少なくとも１つのｍｉＲ標的配列を含む、組換えＨＳＶ。
  2. 前記少なくとも１つのｍｉＲ－１２４標的配列が、前記ＩＣＰ４遺伝子座の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲに組み込まれる、請求項１に記載の組換えＨＳＶ。
  3. ２つ以上のｍｉＲ－１２４標的配列が前記組換えＨＳＶゲノムの前記ＩＣＰ４遺伝子座に挿入される、
    請求項１または請求項２に記載の組換えＨＳＶ。
  4. 前記組換えＨＳＶの複製が、第２の細胞における前記組換えＨＳＶの複製と比較して、第１の細胞において減少または減衰し、前記第１の細胞が正常細胞であり、前記第２の細胞ががん性細胞である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶ。
  5. 前記第２の細胞におけるｍｉＲ－１２４の内因性発現が、前記第１の細胞におけるｍｉＲ－１２４の内因性発現と比較して減少する、請求項４に記載の組換えＨＳＶ。
  6. 前記第１の細胞における前記組換えＨＳＶの複製が、前記第２の細胞における前記組換えＨＳＶの複製と比較して、少なくとも５０％減少する、請求項５に記載の組換えＨＳＶ。
  7. 前記がん性細胞のがんが、大腸癌、膵癌、乳癌、肝癌、口腔癌、卵巣癌、前立腺癌、脳癌
    、子宮頸癌および肺癌からなる群から選択される、請求項４～６のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶ。
  8. （ｉ）少なくとも１つの追加のｍｉＲ標的配列が前記ＩＣＰ４遺伝子座に組み込まれ、前記追加のｍｉＲ標的配列が、前記ｍｉＲ－１２４標的配列以外の配列である；または
    （ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ－１２２標的配列が前記ＩＣＰ２７遺伝子座に組み込まれる、
    請求項１～７のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶ。
  9. サイトカインおよび抗免疫抑制タンパク質から選択されるタンパク質をコードする非相同ポリヌクレオチド配列をさらに含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶ。
  10. 前記サイトカインがＩＬ－１２であり、前記抗免疫抑制タンパク質が、抗ＰＤ１タンパク質および抗ＣＴＬＡ４タンパク質から選択される、請求項９に記載の組換えＨＳＶ。
  11. 前記非相同ポリヌクレオチド配列が、ＵＬ３とＵＬ４オープンリーディングフレームの間の前記組換えＨＳＶゲノムに挿入される、請求項９または請求項１０に記載の組換えＨＳＶ。
  12. 内部接合領域に、ＩＣＰ０、ＩＣＰ３４．５、ＬＡＴおよびＩＣＰ４遺伝子のそれぞれの１コピーの欠失をさらに含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶ。
  13. 請求項１～１２のいずれか一項に記載の組換えＨＳＶをコードする核酸分子。
  14. 請求項１～１２のいずれかに記載の組換えＨＳＶを含むウイルスストック。
  15. 請求項１～１２のいずれかに記載の組換えＨＳＶと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
  16. 医薬として使用するための、請求項１～１２のいずれかに記載の組換えＨＳＶを含む組成物または請求項１５に記載の組成物。
  17. がんの治療または予防における使用のための、請求項１～１２のいずれかに記載の組換えＨＳＶを含む組成物または請求項１５に記載の組成物。
  18. がんの治療または予防における使用のための、請求項８に記載の組換えＨＳＶを含む組成物であって、
    （ｉ）前記治療または予防が、がん性細胞を、前記組換えＨＳＶが前記がん性細胞に感染し、当該がん性細胞内で複製するのに十分な条件に曝露することを含み、前記がん性細胞内での前記組換えＨＳＶの複製が細胞死をもたらすか；あるいは
    （ｉｉ）対象がマウスまたはヒトであるか；あるいは
    （ｉｉｉ）前記組成物が、静脈内、皮下、腫瘍内、または筋肉内投与されるか；あるいは（ｉｖ）前記がんが、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵癌、肝癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、膠芽腫、黒色腫、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）および辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択される、
    組成物。
  19. 請求項１７に記載の使用のための組成物であって、
    （ｉ）前記治療または予防が、がん性細胞を、前記組換えＨＳＶが前記がん性細胞に感染し、当該がん性細胞内で複製するのに十分な条件に曝露することを含み、前記がん性細胞内での前記組換えＨＳＶの複製が細胞死をもたらすか；あるいは
    （ｉｉ）対象がマウスまたはヒトであるか；あるいは
    （ｉｉｉ）前記組成物が、静脈内、皮下、腫瘍内、または筋肉内投与されるか；あるいは（ｉｖ）前記組成物が、大腸癌、膵癌、乳癌、肝癌、口腔癌、卵巣癌、前立腺癌、脳癌、子宮頸癌および肺癌から選択される、
    組成物。
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Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108884448B (zh) 2016-01-27 2022-12-30 昂克诺斯公司 溶瘤病毒载体及其用途
AU2017290828A1 (en) 2016-06-30 2019-01-24 Virogin Biotech Canada Ltd Pseudotyped oncolytic viral delivery of therapeutic polypeptides
US10682425B2 (en) * 2016-12-14 2020-06-16 The Regents Of The University Of California Engineered B lymphocytes and compositions having micro-RNA and methods for making and using them
EP3594329A4 (en) * 2017-04-19 2021-02-24 The University Of Tokyo GENETICALLY MODIFIED COXSACKIE VIRUS, AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION
CN110546263B (zh) * 2017-04-28 2024-03-05 东丽株式会社 用于检测卵巢肿瘤的试剂盒、装置和方法
EP3658165A4 (en) * 2017-07-26 2021-09-01 Oncorus, Inc. ONCOLYTIC VIRUS VECTORS AND USES THEREOF
GB201714430D0 (en) * 2017-09-07 2017-10-25 Micol Romain Compositions and processes for targeted delivery and expression and modulation of therapeutic components in tissue
CN111065732A (zh) 2017-09-11 2020-04-24 Imba-莫利库尔生物技术研究所 肿瘤类器官模型
TWI666321B (zh) * 2017-10-23 2019-07-21 大陸商深圳市亦諾微醫藥科技有限公司 用於癌症治療的溶瘤性單純皰疹病毒（ｏＨＳＶ）專性載體及其建構體的建構
CN107723367A (zh) * 2017-10-27 2018-02-23 青岛大学 miRNA‑885‑3p的应用和应用其的产品
CN107674918A (zh) * 2017-11-10 2018-02-09 上海交通大学医学院 has‑mir‑195‑5p作为生物标志物在制备肺癌诊断试剂盒中的应用
WO2019133847A1 (en) 2017-12-29 2019-07-04 Oncorus, Inc. Oncolytic viral delivery of therapeutic polypeptides
EP3755344A1 (en) 2018-02-19 2020-12-30 Combined Therapeutics, Inc. Compositions and methods for organ-protective expression and modulation of coding ribonucleic acids
CA3096938A1 (en) 2018-04-10 2019-10-17 Ottawa Hospital Research Institute Microrna-based compositions and methods used in disease treatment
MA52542A (fr) * 2018-04-13 2021-02-24 Bluebird Bio Inc Thérapie cellulaire adoptive
CN108707625B (zh) * 2018-07-03 2021-09-21 云笛生物科技有限公司 mir-124和HER2-shRNA双基因表达盒病毒载体、构建方法、病毒、应用
CN109091492A (zh) * 2018-08-02 2018-12-28 广州安镝声生物医药科技有限公司 lncRNA H19的靶miRNA miR-106b-5p及其应用
CN109091491A (zh) * 2018-08-02 2018-12-28 广州安镝声生物医药科技有限公司 lncRNA H19的靶miRNA miR19a-3p及其应用
CN111117973A (zh) * 2018-10-30 2020-05-08 中国科学院武汉病毒研究所 一种受microRNA调控的重组溶瘤肠道病毒71型及应用
WO2020102285A1 (en) * 2018-11-13 2020-05-22 Oncorus, Inc. Encapsulated polynucleotides and methods of use
TWI690597B (zh) * 2018-11-14 2020-04-11 國立中央大學 泌尿上皮癌的檢測套組及檢測方法
KR20210098483A (ko) * 2018-11-29 2021-08-10 바이로진 바이오테크 캐나다 리미티드 신경독성이 감소된 hsv 벡터
KR20200069259A (ko) * 2018-12-06 2020-06-16 국립암센터 nc886을 포함하는 암살상 바이러스 활성 증진 또는 생산 증진용 조성물
CN113453699A (zh) * 2019-01-04 2021-09-28 昂克诺斯公司 包封的rna多核苷酸及使用方法
CN109762903B (zh) * 2019-01-31 2022-02-01 山东大学齐鲁医院 miR-1246和/或TERF2IP在诊治胶质瘤中的应用
CN110283794B (zh) * 2019-05-30 2021-04-23 伍泽堂 重组溶瘤病毒以及制备方法、应用和药物
CN112011570B (zh) * 2019-05-31 2023-04-18 北京合生基因科技有限公司 特异杀伤肿瘤细胞的溶瘤病毒系统及其应用
JP2022541197A (ja) * 2019-07-16 2022-09-22 ユニヴェルシテ・コート・ダジュール 腫瘍溶解性ウイルスに対する対象の感受性又は抵抗性を評価する方法、組換えウイルス、その調製、及び使用
CA3150053A1 (en) * 2019-08-05 2021-02-11 Virogin Biotech Canada Ltd Genetically modified enterovirus vectors
CN110468132B (zh) * 2019-08-15 2022-11-25 西南大学 一种sgRNA及转基因表达载体、表达品系、筛选方法
CN110433171B (zh) * 2019-08-20 2022-08-19 中山大学附属第六医院 miRNA-1293在制备抗结直肠肿瘤药物中的应用
US20220380735A1 (en) 2019-10-10 2022-12-01 Oncorus, Inc. Dual viruses and dual oncolytic viruses and methods of treatment
KR102320430B1 (ko) * 2020-01-29 2021-11-03 서울대학교병원 수모세포종에 대한 miR-135b, miR-135a 및 이들의 표적 유전자 AMOTL2의 용도
CA3179339A1 (en) * 2020-04-14 2021-10-21 Eidgenossische Technische Hochschule Zurich Cell classifier circuits and methods of use thereof
CN113583977A (zh) * 2020-04-30 2021-11-02 杭州康万达医药科技有限公司 可受微小rna调控的分离的重组溶瘤痘病毒及其应用
CN115066261A (zh) * 2020-06-05 2022-09-16 上海宝济药业有限公司 一种酶和病毒的药物组合及其应用
BR112023001563A2 (pt) 2020-07-31 2023-10-10 Combined Therapeutics Inc Composições e métodos para vacinação melhorada
WO2022100898A1 (en) * 2020-11-13 2022-05-19 Technische Universität Berlin Mir-375- and mir-1-regulated coxsackievirus b3 has no pancreas and heart toxicity but strong antitumor efficiency in colorectal carcinomas
CN116744951A (zh) * 2020-12-25 2023-09-12 苏州系统医学研究所 一种包含溶瘤病毒的组合物及其在肿瘤治疗中的应用
WO2023034867A1 (en) * 2021-08-31 2023-03-09 Oncorus, Inc. Engineered oncolytic herpesviruses
CN113637761A (zh) * 2021-10-15 2021-11-12 北京百奥思科生物医学技术有限公司 用于黑色素瘤诊断和治疗的miRNA标志物及其相关产品
WO2023142040A1 (en) * 2022-01-29 2023-08-03 Virogin Biotech Canada Ltd. Transcriptional and translational dual regulated oncolytic herpes simplex virus vectors
CN115381849A (zh) * 2022-06-27 2022-11-25 浙江大学 抗口腔肿瘤药物活性成分及其用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015066042A1 (en) 2013-10-28 2015-05-07 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Oncolytic hsv vector

Family Cites Families (90)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5244792A (en) 1984-04-06 1993-09-14 Chiron Corporation Expression of recombinant glyoprotein B from herpes simplex virus
JPH0668B2 (ja) 1985-08-30 1994-01-05 財団法人化学及血清療法研究所 単純ヘルペスウイルス遺伝子が組込まれた組換えプラスミド
GB8918616D0 (en) 1989-08-15 1989-09-27 Univ Glasgow Herpes simplex virus type 1 mutant
US5725871A (en) 1989-08-18 1998-03-10 Danbiosyst Uk Limited Drug delivery compositions comprising lysophosphoglycerolipid
US5707644A (en) 1989-11-04 1998-01-13 Danbiosyst Uk Limited Small particle compositions for intranasal drug delivery
US5466468A (en) 1990-04-03 1995-11-14 Ciba-Geigy Corporation Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids
US5849571A (en) 1990-10-10 1998-12-15 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Latency active herpes virus promoters and their use
US5849572A (en) 1990-10-10 1998-12-15 Regents Of The University Of Michigan HSV-1 vector containing a lat promoter
US5399363A (en) 1991-01-25 1995-03-21 Eastman Kodak Company Surface modified anticancer nanoparticles
US5756353A (en) 1991-12-17 1998-05-26 The Regents Of The University Of California Expression of cloned genes in the lung by aerosol-and liposome-based delivery
WO1993023011A1 (en) 1992-05-18 1993-11-25 Minnesota Mining And Manufacturing Company Transmucosal drug delivery device
US5879934A (en) 1992-07-31 1999-03-09 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Herpes simplex virus strains for gene transfer
US5804413A (en) 1992-07-31 1998-09-08 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Herpes simplex virus strains for gene transfer
US5658724A (en) 1992-07-31 1997-08-19 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Herpes simplex virus strains deficient for the essential immediate early genes ICP4 and ICP27 and methods for their production, growth and use
US5543158A (en) 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
GB9415319D0 (en) 1994-07-29 1994-09-21 Medical Res Council HSV viral vector
GB9415369D0 (en) 1994-07-29 1994-09-21 Lynxvale Ltd Mutant virus
IE80468B1 (en) 1995-04-04 1998-07-29 Elan Corp Plc Controlled release biodegradable nanoparticles containing insulin
US6261552B1 (en) 1997-05-22 2001-07-17 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Herpes simplex virus vectors
GB9700411D0 (en) 1997-01-10 1997-02-26 Univ London Eukaryotic gene expression cassette and uses thereof
US6071742A (en) 1997-03-05 2000-06-06 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Coxsackie virus as a vector for delivery of anti-inflammatory cytokines
US5998174A (en) 1997-05-12 1999-12-07 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Multigene vectors
WO1999006583A1 (en) 1997-07-31 1999-02-11 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Targeted hsv vectors
ES2251120T3 (es) 1997-12-17 2006-04-16 Immunex Corporation Glicoproteinas de superficie celular asociadas a los linfomas b humanos-ulbp, adn y polipeptidos.
EP1002864A1 (en) 1998-11-10 2000-05-24 Universita' degli studi di Bologna HIgR and related V domain for the manufacture of a medicament for preventing or treating HSV-1, HSV-2 and BHV infections
US6897057B1 (en) 1999-08-31 2005-05-24 The General Hospital Corporation Cell-specific and/or tumor-specific promoter retargeting of herpes γ 34.5 gene expression
GB9930418D0 (en) 1999-12-22 2000-02-16 Neurovex Ltd Replication incompetent herpes virus vectors
WO2002076216A1 (en) 2001-03-27 2002-10-03 Medigene, Inc. Viral vectors and their use in therapeutic methods
WO2002088327A1 (en) 2001-04-06 2002-11-07 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Methods for viral oncoapoptosis in cancer therapy
CA2462790A1 (en) 2001-10-04 2003-04-10 Immunex Corporation Ul16 binding protein 4
KR100900249B1 (ko) 2001-12-07 2009-05-29 포항공과대학교 산학협력단 ＳＩＶｍａｃ239의 면역원성 플라스미드 및 이들을 함유한ＡＩＤＳ ＤＮＡ 백신
US8927251B2 (en) 2002-10-07 2015-01-06 The University Of Chicago Targeting of herpes simplex virus to specific receptors
GB0406389D0 (en) 2004-03-22 2004-04-21 Istituto Superiore Di Sanito Recombinant herpes simplex virus and uses therefor
US7473418B2 (en) 2004-03-25 2009-01-06 Cell Genesys, Inc. Pan cancer oncolytic vectors and methods of use thereof
EP1793851B1 (en) 2004-08-20 2016-10-05 Viralytics Limited Methods and compositions for treatment of hematologic cancers
WO2006050211A2 (en) 2004-10-28 2006-05-11 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Peripherally delivered glutamic acid decarboxylase gene therapy for spinal cord injury pain
CN101132798B (zh) 2005-01-17 2011-04-27 溶瘤病毒有限公司 核酸分子在制备用于治疗黑色素瘤的药物中的应用及其组合物
KR20130114758A (ko) 2005-05-27 2013-10-17 오스페달레 산 라파엘 에스.알.엘. Ｍｉ-ｒｎａ를 포함하는 유전자 벡터
DK2336362T3 (en) 2005-08-26 2019-01-21 Dupont Nutrition Biosci Aps USE OF CRISPR-ASSOCIATED GENES (CAS)
US8980246B2 (en) 2005-09-07 2015-03-17 Sillajen Biotherapeutics, Inc. Oncolytic vaccinia virus cancer therapy
US20080008686A1 (en) 2006-07-10 2008-01-10 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Tetracycline repressor regulated oncolytic viruses
PL2049663T3 (pl) 2006-08-11 2015-08-31 Dow Agrosciences Llc Homologiczna rekombinacja za pośrednictwem nukleazy z palcami cynkowymi
US20100111873A1 (en) 2007-02-20 2010-05-06 Russell Stephen J Treating cancer with viral nucleic acid
CA2687301C (en) 2007-05-09 2016-08-23 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Synthetic herpes simplex viruses type-1 for treatment of cancers
US20080289058A1 (en) 2007-05-14 2008-11-20 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Targeted delivery of glycine receptors to excitable cells
WO2009111892A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Ottawa Health Research Institute Microrna mediated oncolytic targeting
US8703120B2 (en) 2008-05-29 2014-04-22 The General Hospital Corporation Use of oncolytic herpes viruses for killing cancer stem cells
ES2667622T3 (es) 2008-05-29 2018-05-11 Alma Mater Studiorum - Università di Bologna Virus del herpes simple (VHS) con tropismo modificado, utilizaciones y procedimiento de preparación del mismo
GB0810912D0 (en) 2008-06-13 2008-07-23 Inst Animal Health Ltd Vector
US8546553B2 (en) 2008-07-25 2013-10-01 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Prokaryotic RNAi-like system and methods of use
US20100076057A1 (en) 2008-09-23 2010-03-25 Northwestern University TARGET DNA INTERFERENCE WITH crRNA
WO2010054108A2 (en) 2008-11-06 2010-05-14 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Cas6 polypeptides and methods of use
MX337838B (es) 2008-11-07 2016-03-22 Dupont Nutrition Biosci Aps Secuencias de repetidos palindromicos cortos regularmente intercalados agrupados de bifidobacterias.
CA2755245A1 (en) 2009-03-13 2010-09-16 Egen, Inc. Compositions and methods for the delivery of biologically active rnas
US20100297072A1 (en) 2009-05-19 2010-11-25 Depinho Ronald A Combinations of Immunostimulatory Agents, Oncolytic Virus, and Additional Anticancer Therapy
WO2011125469A1 (ja) 2010-04-09 2011-10-13 国立大学法人東京大学 マイクロrna制御組換えワクシニアウイルス及びその使用
WO2011130749A2 (en) 2010-04-16 2011-10-20 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Identification of mutations in herpes simplex virus envelope glycoproteins that enable or enhance vector retargeting to novel non-hsv receptors
WO2012006181A2 (en) 2010-06-29 2012-01-12 Mount Sinai School Of Medicine Compositions and methods for inhibiting oncogenic micrornas and treatment of cancer
EP2630156B1 (en) 2010-10-20 2018-08-22 DuPont Nutrition Biosciences ApS Lactococcus crispr-cas sequences
CA2834375C (en) 2011-04-27 2020-07-14 Amyris, Inc. Methods for genomic modification
WO2012164565A1 (en) 2011-06-01 2012-12-06 Yeda Research And Development Co. Ltd. Compositions and methods for downregulating prokaryotic genes
PL3351261T3 (pl) 2011-10-11 2021-12-06 Universität Zürich Lek złożony zawierający IL-12 i środek do blokowania cząsteczek hamujących komórki T w terapii nowotworów
US11951157B2 (en) 2011-10-11 2024-04-09 Universitat Zurich Methods of treating malignant tumour with IL-12 and anti-PD-1 antibody
EP2591796A1 (en) 2011-11-10 2013-05-15 Universität Zürich Combination medicament comprising IL-12 and an anti-CTLA-4 ligand for tumor therapy
US20130156808A1 (en) 2011-11-22 2013-06-20 Stipan Jonjic Vaccine comprising beta-herpesvirus
GB201122458D0 (en) 2011-12-30 2012-02-08 Univ Wageningen Modified cascade ribonucleoproteins and uses thereof
US20140363469A1 (en) * 2012-01-19 2014-12-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Viral attenuation and vaccine production
EP3272356A1 (en) 2012-02-24 2018-01-24 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods for the treatment of hemoglobinopathies
US9637739B2 (en) 2012-03-20 2017-05-02 Vilnius University RNA-directed DNA cleavage by the Cas9-crRNA complex
WO2013141680A1 (en) 2012-03-20 2013-09-26 Vilnius University RNA-DIRECTED DNA CLEAVAGE BY THE Cas9-crRNA COMPLEX
JP6605957B2 (ja) 2013-01-04 2019-11-13 シトムクス セラピューティクス，インコーポレイティド 生体系におけるプロテアーゼ活性を検出するための組成物及び方法
EP3011034B1 (en) 2013-06-17 2019-08-07 The Broad Institute, Inc. Delivery, use and therapeutic applications of the crispr-cas systems and compositions for targeting disorders and diseases using viral components
US10174341B2 (en) 2013-07-17 2019-01-08 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Non-toxic HSV vectors for efficient gene delivery applications and complementing cells for their production
SG11201607130RA (en) 2014-02-27 2016-09-29 Viralytics Ltd Combination method for treatment of cancer
PL3169341T3 (pl) 2014-07-16 2019-12-31 Transgene Sa Wirus onkolityczny do ekspresji modulatorów punktu kontroli immunologicznej
WO2016141320A2 (en) 2015-03-05 2016-09-09 Northwestern University Non-neuroinvasive viruses and uses thereof
US10083137B2 (en) 2015-04-02 2018-09-25 Atmel Corporation Peripheral interface circuit for serial memory
EP3365062A4 (en) 2015-10-19 2019-07-17 Cold Genesys, Inc. METHODS OF TREATING SOLID OR LYMPHATIC TUMORS BY POLYTHERAPY
SG11201805835WA (en) 2016-01-08 2018-08-30 Replimune Ltd Modified oncolytic virus
CN108884448B (zh) 2016-01-27 2022-12-30 昂克诺斯公司 溶瘤病毒载体及其用途
EP3426271A4 (en) 2016-03-10 2019-10-16 Cold Genesys, Inc. METHODS OF TREATING SOLID OR LYMPHATIC TUMORS BY POLYTHERAPY
AU2016403583B2 (en) 2016-04-22 2020-05-28 Immvira Co., Limited Construction of oncolytic herpes simplex viruses (oHSV) obligate vector and constructs for cancer therapy
JP7200104B2 (ja) 2016-08-01 2023-01-06 ヴァイロジン バイオテック カナダ リミテッド 免疫系刺激分子を発現する腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルスベクター
CA3033613A1 (en) 2016-08-09 2018-02-15 Almohanad ALKAYYAL Oncolytic rhabdovirus expressing il12
WO2018049261A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Icellhealth Consulting Llc Oncolytic virus expressing immune checkpoint modulators
WO2018085461A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 Dnatrix, Inc. Combination therapy for treatment of brain cancers
US11298420B2 (en) 2016-12-21 2022-04-12 Memgen, Llc Armed oncolytic viruses
EP3565578A1 (en) 2016-12-21 2019-11-13 Memgen LLC Armed replication-competent oncolytic adenoviruses
GB201700350D0 (en) 2017-01-09 2017-02-22 Replimune Ltd Altered virus
EP3658165A4 (en) 2017-07-26 2021-09-01 Oncorus, Inc. ONCOLYTIC VIRUS VECTORS AND USES THEREOF

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015066042A1 (en) 2013-10-28 2015-05-07 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Oncolytic hsv vector

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Virology Journal，2013年，vol.10, article:241

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