JP6784809B2 - 気体透過性細胞培養作業のための閉鎖系装置および方法 - Google Patents
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Description
本出願は、2013年6月24日に出願された「気体透過性細胞培養作業のための閉鎖系装置および方法」という名称の米国仮出願第61/838,730号(その全体を参照により本出願に組み込む)の利点を請求する。更に、同時係属米国特許出願第10/961,814号(以下、「814」)、米国特許出願第11/952,848号(以下、「848」)、米国特許出願第12/963,597号(以下、「597」)、米国特許出願第13/475,700号(以下、「700」)および米国特許出願第13/493768号(以下、「768」)は、その全体を参照により本出願に組み込む。
T細胞療法、養子免疫療法および養子細胞療法は、in vitroで免疫系の細胞を増殖させ、次いで増殖細胞を患者内に投与して病気と闘うことを含み、様々な病気を治療するために効果のある方法を指す。これらの療法形態が幅広く社会に行き渡るには、細胞集団の増殖と当該細胞の回収作業が、費用対効果が高く、実用的で、細胞損失を引き起こしにくく、汚染リスクが最小か全くないものとする必要がある。
細胞および残量の培地を細胞回収容器内へ移す前に、気体が初期容量の培地の一部を廃液容器内へ移すことを可能にする特定の実施例を開示する。
Claims (18)
- 細胞培養装置から培地を除去し、細胞を濃縮するための装置であって、
気体透過性の細胞培養装置に接続されたフィルタに接続でき、フィルタを経由して気体を気体透過性の細胞培養装置内に送出することができ、細胞培養装置の内容物を加圧する働きをする気体送出部と、
気体透過性の細胞培養装置に接続された培地除去導管内を移動する流体が液体から気体へと変化したときを検出でき、培地除去導管を通る流体の流れを停止できる流体流動制御部へ信号を送ることができる流体検出部とを備え、
気体透過性の細胞培養装置が、気体透過性の底部の培養面と、気体透過性の底部から離れて配置される培地除去開口部を含む培地除去導管とを含み、培地除去開口部を気体透過性の底部から距離の異なる位置に移動させることができることを特徴とする装置。 - 請求項1に記載の装置を使用する方法であって、
培地1ミリリットルあたりの細胞濃度を増大させるために、気体透過性の細胞培養装置に接続されたフィルタに気体送出部を接続することによって、細胞および培地を含む気体透過性の細胞培養装置内の液体培地の容量を減らすステップと、流体検出部を培地除去導管に接続するステップと、気体送出部からの気体の送出を開始するステップとを備え、
それによって気体が細胞培養装置内に移動し、その気体が細胞培養装置を加圧し、培地を細胞培養装置から培地除去開口を通じて培地除去導管に接続された細胞回収容器に移し、流体検出部が、気体透過性の細胞培養装置の底部から離れた位置にある培地除去導管を通って移動する流体が液体から気体に変化したときを検出し、その検出をするとすぐに流体検出部が流体流動制御部へと信号を送信し、流体流動制御部がその信号を受信するとすぐに培地除去導管を流れる流体の流れを停止させ、
気体透過性の培養装置の底部から培地除去開口部までの距離を小さくすることによって気体透過性の細胞培養装置から細胞を除去するステップと、気体送出部からの気体送出を開始するステップとを備え、
それによって気体が細胞培養装置内に移動し、細胞培養装置を加圧し、その気体が培地を細胞培養装置から培地除去導管に接続された細胞回収容器へと移し、流体検出部が、培地除去導管を通って移動する流体が液体から気体に変化したときを検出し、その検出をすると同時に、流体検出部が流体流動制御部に信号を送り、その信号を受け取るとすぐに、流体流動制御部が培地除去導管を流れる流体の流れを停止させることを特徴とする方法。 - 請求項2に記載の方法であって、流体流動制御部が細胞除去導管を通る流体の流れを停止させた後、細胞培養装置が大気に通気されることを特徴とする方法。
- 請求項3に記載の方法であって、細胞培養装置が大気に通気された後、流体流動制御部が開かれて培地が培地除去導管を流れるようにし、培地が培地除去導管を通って細胞培養装置へと移動され、流体流動制御部が閉じられ、細胞培養装置内の培地が攪拌されて、細胞をその培地内に移動させることを特徴とする方法。
- 請求項4に記載の方法であって、気体が気体送出部から細胞培養装置内に送出されて、細胞培養装置を加圧し、培地と細胞とを細胞培養装置から、培地除去導管に接続された細胞回収容器へと移し、流体検出部が、気体透過性の細胞培養装置の底部から離れた位置にある培地除去導管を通って移動する流体が液体から気体に変化したときを検出し、その検出をするとすぐに、流体検出部が流体流動制御部に信号を送り、流体流動制御部がその信号を受け取るとすぐに、流体流動制御部が培地除去導管を通る流体の流れを停止させることを特徴とする方法。
- 細胞と培地とを含む気体透過性の細胞培養装置内の培地の体積を減らす方法であって、
細胞培養装置を加圧する働きをする気体送出部をフィルタに接続することによって、培地1ミリリットルあたりの細胞濃度を高めるために培地の体積を減らすステップと、気体送出部から気体を送出して気体の移動を開始するステップとを備え、
フィルタは、気体透過性の底部を有する細胞培養装置に接続され、細胞培養装置は培養面上に第1容量の培地と細胞を含み、細胞培養装置の底部から離れた位置にある培地除去開口部を有する培地除去導管を含み、
それらのステップによって気体を細胞培養装置に移動させ、細胞培養装置を加圧し、その気体が培地除去導管を経由して培地を細胞培養装置から培地回収容器へと移し、細胞培養装置内に残った培地と細胞の体積を残して、1ミリリットルあたりの細胞によって決定される残留体積内の細胞の濃度が、第1容量を培地の残留量で割った割合で増加することを特徴とする方法。 - 請求項2または6に記載の方法であって、培地の容量を減らす前の、細胞培養装置の底部から培地除去開口部までの距離が1.0cm〜25cmの範囲であることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、培地の容量を減らす前の、細胞培養装置の底部から培地除去開口部までの距離が1.0cm〜20cmの範囲であることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、培地の容量を減らす前の、細胞培養装置の底部から培地除去開口部までの距離が1.0cm〜15cmの範囲であることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、培地の容量を減らす前の、細胞培養装置の底部から培地除去開口部までの距離が2.0cm〜10cmの範囲であることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、培養面が疎水性であることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、培養面がシリコーンであることを特徴とする方法。
- 請求項12に記載の方法であって、シリコーンの厚さが0.0254mm(0.001インチ)と0.6096mm(0.024インチ)の間の厚さであることを特徴とする方法。
- 請求項2または6に記載の方法であって、細胞が非接着性細胞であることを特徴とする方法。
- 請求項14に記載の方法であって、細胞がT細胞を含むことを特徴とする方法。
- 請求項15に記載の方法であって、T細胞がCAR T細胞を含むことを特徴とする方法。
- 請求項1に記載の装置であって、気体送出部がダイアフラムポンプであることを特徴とする装置。
- 請求項2に記載の方法であって、培地除去開口部までの距離を小さくした後の、底部と培地除去開口部との間の距離が0.20cm〜1.0cmの範囲であることを特徴とする方法。
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