JP7425100B2 - 気体透過性細胞培養作業のための閉鎖系装置および方法 - Google Patents
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Description
本出願は、2013年6月24日に出願された「気体透過性細胞培養作業のための閉鎖系装置および方法」という名称の米国仮出願第61/838,730号(その全体を参照により本出願に組み込む)の利点を請求する。更に、同時係属米国特許出願第10/961,814号(以下、「814」)、米国特許出願第11/952,848号(以下、「848」)、米国特許出願第12/963,597号(以下、「597」)、米国特許出願第13/475,700号(以下、「700」)および米国特許出願第13/493768号(以下、「768」)は、その全体を参照により本出願に組み込む。
T細胞療法、養子免疫療法および養子細胞療法は、in vitroで免疫系の細胞を増殖させ、次いで増殖細胞を患者内に投与して病気と闘うことを含み、様々な病気を治療するために効果のある方法を指す。これらの療法形態が幅広く社会に行き渡るには、細胞集団の増殖と当該細胞の回収作業が、費用対効果が高く、実用的で、細胞損失を引き起こしにくく、汚染リスクが最小か全くないものとする必要がある。
細胞および残量の培地を細胞回収容器内へ移す前に、気体が初期容量の培地の一部を廃液容器内へ移すことを可能にする特定の実施例を開示する。
Claims (17)
- 細胞培養装置から培地を除去するための装置であって、
気体送出部と、圧力安全弁と、第1流体検出部とを備え、
気体送出部は、気体透過性細胞培養装置に接続された気体フィルタに接続することができ、気体送出部は、そのフィルタを通して気体を気体透過性細胞培養装置に送出することができ、かつ、細胞培養装置の内容物を加圧するために用いることができ、
圧力安全弁は気体送出部と気体フィルタとの間に配置されており、内容物の圧力を下げるように作動させることができ、
第1流体検出部は、気体透過性細胞培養装置に接続された培地除去導管内を移動する流体が液体から気体へと変化したときを検出でき、第1流体検出部は培地除去導管に近接して配置されており、かつ、培地除去導管を通る流体の流れを停止させることができる第1流体流動制御部に信号を送ることができる、装置。 - 請求項1に記載の装置であって、第2流体検出部を含み、第2流体検出部は、気体透過性細胞培養装置に接続された細胞除去導管内を移動する流体が液体から気体へと変化したときを検出することができ、第2流体検出部は細胞除去導管に近接して配置されており、かつ、細胞除去導管を通る流体の流れを停止させることができる第2流体流動制御部へ信号を送ることができる、装置。
- 請求項1に記載の装置内の細胞を濃縮する方法であって、
培地1ミリリットルあたりの細胞の濃度を高めるために、気体送出部を気体透過性細胞培養装置に接続された気体フィルタに接続することによって、細胞と培地とを含む気体透過性細胞培養装置内の液体培地の体積を減らすステップを備え、
気体送出部と気体フィルタとの間に圧力安全弁が配置されており、細胞培養装置は培地除去導管を含み、第1流体検出部を培地除去導管に接続し、第1流体流動制御部を培地除去導管に接続し、気体送出部からの気体送出を開始し、それによって気体が細胞培養装置内に移動し、気体が細胞培養装置の内容物を加圧し、培地を細胞培養装置から培地除去導管に接続された培地回収容器へと移し、第1流体検出部が、培地除去導管を通る流体が液体から気体に変化したときを検出し、その検出をした後すぐに、第1流体検出部が第1流体流動制御部に信号を送り、その信号を受け取るとすぐに、第1流体流動制御部が培地除去導管を通る流体の流れを停止させ、圧力安全弁が内容物の圧力を下げるように作動する、方法。 - T細胞の濃度を高めてそれを回収するための装置を用いて気体透過性細胞培養装置からT細胞を回収する方法であって、
ある培地高さの液体培地を含む気体透過性細胞培養装置に接続された気体フィルタに対して気体送出部を接続することによって、気体透過性細胞培養装置内の培地1ミリリットルあたりのT細胞の数を増やす第1ステップを備え、
圧力安全弁が気体送出部と気体フィルタとの間に配置されており、第1ステップが完了する前の培地高さが1cm~25cmであり、非接着性細胞のうちの少なくとも一部が、細胞培養装置内の疎水性の気体透過性材料からなる培養面と接触しており、細胞培養装置が培地除去導管と細胞除去導管とを含み、第1流体検出部を培地除去導管に接続し、第1流体流動制御部を培地除去導管に接続し、気体送出部からの気体送出を開始し、それによって気体が細胞培養装置内に移動し、かつ、細胞培養装置の内容物を加圧し、その気体が培地を細胞培養装置から培地除去導管に接続された培地回収容器へと移し、第1流体検出部が、培地除去導管を通る流体が液体から気体に変化したときを検出し、その検出をした後すぐに、第1流体検出部が第1流体流動制御部に信号を送り、その信号を受け取るとすぐに第1流体流動制御部が培地除去導管を通る流体の流れを停止させ、培地が残留培地高さとなり、
気体透過性細胞培養装置からT細胞を除去する第2ステップを備え、第2流体検出部を細胞除去導管に接続し、第2流体流動制御部を細胞除去導管に接続し、細胞培養装置を攪拌して細胞を培養面から取り外し、気体送出部からの気体送出を開始し、それによって気体が細胞培養装置内に移動し、かつ、細胞培養装置を加圧し、その気体が培地と細胞とを、細胞培養装置から細胞除去導管に接続された細胞回収容器へと細胞除去導管を通して移し、第2流体検出部が、細胞除去導管を通る流体が液体から気体へと変化したときを検出し、それが検出されたときに、第2流体検出部が第2流体流動制御部に信号を送り、その信号を受け取るとすぐに第2流体流動制御部が細胞除去導管を通る流体の流れを停止させる、方法。 - 請求項4に記載の方法であって、圧力安全弁が作動した後、第1流体流動制御部が開かれて培地除去導管を流体が流れるようにし、培地が培地除去導管を通って細胞培養装置へと移動し、第1流体流動制御部が閉じられ、培地が攪拌されて細胞を培地内に移動させ、
細胞培養装置が大気に通気されないようにし、気体が気体送出部から細胞培養装置へと送出されて細胞培養装置を加圧し、かつ、培地と細胞とを、細胞培養装置から細胞除去導管に接続された細胞回収容器へと移し、第2流体検出部が、細胞除去導管を通る流体が液体から気体へと変化したときを検出し、その検出をした後すぐに、第2流体検出部が第2流体流動制御部に信号を送り、その信号を受け取るとすぐに、第2流体流動制御部が細胞除去導管を通る流体の流れを停止させる、方法。 - 細胞と培地とを含む気体透過性細胞培養装置の培地の体積を減らす方法であって、
培地1ミリリットルあたりの細胞の濃度を高めるために、細胞培養装置を加圧する役割を果たす気体送出部を、第1容量の培地と培養面上にある細胞とを含む気体透過性細胞培養装置に接続することによって培地の体積を減らすステップを備え、
細胞培養装置が培地除去導管を含み、第1流体検出部を培地除去導管に接続し、第1流体流動制御部を培地除去導管に接続し、気体送出部からの気体の送出を開始し、それによって気体が細胞培養装置内に移動し、かつ、細胞培養装置を加圧し、気体が培地を細胞培養装置から培地除去導管を経由して培地除去導管に接続された培地回収容器へと移し、第1流体検出部が、培地除去導管を通る流体が液体から気体へと変化したときを検出し、その検出をした後すぐに、第1流体検出部が第1流体流動制御部に信号を送り、第1流体流動制御部がその信号を受け取った後すぐに、培地除去導管を通る流体の流れを停止させ、残留容量の培地と細胞とを細胞培養装置内に残し、培地の残留容量が培地の第1容量未満であり、気体送出部と気体フィルタとの間に配置された圧力安全弁が作動されて内容物の圧力を下げる、方法。 - 請求項6に記載の方法であって、細胞を回収するステップを含み、
培地除去導管を通る流体の流れが停止された後、培地が培地除去導管の培地除去開口部に接触した状態で、気体送出部から送出された気体が細胞培養装置内に移動し、かつ、細胞培養装置を加圧し、残留培地と細胞とを培地除去導管を通して細胞回収容器へと移し、培地除去導管を通る流体が液体から気体へと変化したとき、培地除去導管を通る流体の流れが停止される、方法。 - 請求項1に記載の装置であって、細胞がT細胞を含む、装置。
- 請求項4に記載の方法であって、T細胞がCAR T細胞を含む、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、気体透過性材料がシリコーンである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、細胞培養装置が培養面支持体を含む、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、当該ある培地高さが1cm~15cmである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、当該ある培地高さが2cm~11cmである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、残留培地高さが0.2cm~2cmである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、残留培地高さが0.2cm~1.0cmである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、残留培地高さが0.2cm~0.5cmである、方法。
- 請求項4に記載の方法であって、細胞除去導管を通る流体の流れが停止された後、細胞培養装置および/または細胞除去導管に残された可能性のある細胞をさらに集めるために細胞培養装置を濯ぐ付加的なステップを含み、細胞培養装置が大気に通気される際に、培地除去導管に液体を流し始めるステップをさらに備え、液体が培地除去導管を通って細胞培養装置内に移動し、その液体を攪拌させて細胞培養装置内で細胞を液体中に移動させ、
気体送出部から細胞培養装置内への気体送出を開始し、その気体が細胞培養装置を加圧し、その気体が液体と細胞とを、細胞培養装置から細胞除去導管を介して細胞回収容器へと移し、細胞除去導管を通る流体が液体から気体へと変化したとき、細胞除去導管を通る流体の流れが停止される、方法。
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