JP6453897B2 - 遅消化性持続型エネルギー補給剤 - Google Patents
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Description
(1)下記(A)、(B)、(C)および(D)を満たす糖質組成物を含んでなる、遅消化性持続型エネルギー補給剤:
(A)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60%以上である、
(B)重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量が9質量%以下である、
(C)重合度3〜30の糖質の全糖質に対する含有量が41質量%以上である、および
(D)重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が50質量%以下である。
(2)糖質組成物が重合度3〜9の糖質を全糖質に対して3質量%以上含有する、前記(1)に記載のエネルギー補給剤。
(3)糖質組成物が重合度10〜30の糖質を全糖質に対して10質量%以上含有する、前記(1)または(2)に記載のエネルギー補給剤。
(4)糖質組成物がデキストラン分解物またはその分画処理物である、前記(1)〜(3)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(5)(A)において、(A−1)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が90%以上である、前記(1)〜(4)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(6)糖質組成物がデキストラン生成酵素反応産物またはその分画処理物である、前記(1)〜(3)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(7)(A)において、(A−2)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60〜99%であり、かつ、α−1,6結合以外のグリコシド結合に対するα−1,4結合の比率が80%以上である、前記(1)〜(3)および(6)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(8)血中グルコース値の変化を緩徐にしつつエネルギー補給するための、前記(1)〜(7)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(9)炭水化物由来のエネルギーを必要とするが、該エネルギー摂取による血中グルコース値の変化を緩徐にする必要がある者に摂取させるための、前記(1)〜(8)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(10)下記(A)、(B)、(C)および(D)を満たす糖質組成物:
(A)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60%以上である、
(B)重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量が9質量%以下である、
(C)重合度3〜30の糖質の全糖質に対する含有量が41質量%以上である、および
(D)重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が50質量%以下である。
(11)糖質組成物が重合度3〜9の糖質を全糖質に対して3質量%以上含有する、前記(10)に記載の糖質組成物。
(12)糖質組成物が重合度10〜30の糖質を全糖質に対して10質量%以上含有する、前記(10)または(11)に記載の糖質組成物。
(13)デキストラン分解物またはその分画処理物である、前記(10)〜(12)のいずれかに記載の糖質組成物。
(14)(A)において、(A−1)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が90%以上である、前記(10)〜(13)のいずれかに記載の糖質組成物。
(15)デキストラン生成酵素反応産物またはその分画処理物である、前記(10)〜(12)のいずれかに記載の糖質組成物。
(16)(A)において、(A−2)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60〜99%であり、かつ、α−1,6結合以外のグリコシド結合に対するα−1,4結合の比率が80%以上である、前記(10)〜(12)および(15)のいずれかに記載の糖質組成物。
(17)前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物を含んでなる、飲食品。
(18)飲食品100キロカロリーあたり前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物を6〜25g含有する、前記(17)に記載の飲食品。
(19)遅消化性持続型エネルギー補給用の、前記(17)または(18)の飲食品。
(20)前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物を有効成分として含んでなる、血中グルコース値の変化を緩徐にすることがその治療または予防に有効である疾患または症状の治療および予防剤。
(21)前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物または前記(17)〜(19)のいずれかに記載の飲食品を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、エネルギー補給方法。
(22)前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物または前記(17)〜(19)のいずれかに記載の飲食品を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、血中グルコース値の変化を緩徐にすることがその治療または予防に有効である疾患または症状の治療および/または予防方法。
(23)遅消化性持続型エネルギー補給剤または遅消化性持続型エネルギー補給用飲食品としての前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物の使用。
(24)遅消化性持続型エネルギー補給剤または遅消化性持続型エネルギー補給用飲食品の製造のための前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物の使用。
(25)血中グルコース値の変化を緩徐にすることにより治療および/または予防できる疾患の治療および/または予防用医薬の製造のための、前記(10)〜(16)のいずれかに記載の糖質組成物の使用。
(101)下記(A)、(B)、(C)および(D)を満たす糖質組成物を含んでなる、遅消化性持続型エネルギー補給剤:
(A)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60%以上である、
(B)重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量が9質量%以下である、
(C)重合度3〜30の糖質の全糖質に対する含有量が41質量%以上である、および
(D)重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が50質量%以下である。
(102)糖質組成物が重合度3〜9の糖質を全糖質に対して3質量%以上含有する、前記(101)に記載のエネルギー補給剤。
(103)糖質組成物が重合度10〜30の糖質を全糖質に対して10質量%以上含有する、前記(101)または(102)に記載のエネルギー補給剤。
(104)糖質組成物がデキストラン分解物またはその分画処理物である、前記(101)〜(103)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(105)糖質組成物が澱粉分解物にデキストラン生成酵素を作用させて得られる生成物またはその分画処理物である、前記(101)〜(103)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(106)炭水化物由来のエネルギーを必要とするが、該エネルギー摂取による血中グルコース値の変化を緩徐にする必要がある者に摂取させるための、前記(101)〜(105)のいずれかに記載のエネルギー補給剤。
(107)前記(101)〜(106)のいずれかに記載のエネルギー補給剤を配合してなる、飲食品。
(108)デキストラン分解物またはその分画処理物あるいは澱粉分解物にデキストラン生成酵素を作用させて得られる生成物またはその分画処理物からなる糖質組成物(但し、重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量は9質量%以下であり、かつ、重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が50質量%以下である)を、炭水化物原料の全部または一部として配合してなる、遅消化性持続型エネルギー補給用飲食品。
試料1の調製
デキストラン70(名糖産業社製)を25質量%となるように水に溶解し、45mMとなるように塩酸を添加し、80℃で反応を行った。HPLCでDP31以上の消失を確認し、水酸化ナトリウムで中和した。常法により精製し、DP1−30を主成分とするデキストラン分解物(試料1)を得た。
試料1の20質量%水溶液を50℃とし、エタノールを70v/v%となるように撹拌しながらゆっくりと添加した。4℃で3時間保持後、上清および沈殿を回収し、HPLCにより上清画分にDP10以上が含まれていないことを確認した。沈殿を再び水に溶解し、同様の操作を上清画分が十分量得られるまで繰り返した。得られた上清画分を回収してゲルろ過クロマトグラフィーに供し、DP3−9の溶出した画分を回収し、濃縮しDP3−9を主成分とするデキストラン分解物(試料2)を得た。
試料1をゲルろ過クロマトグラフィーに供し、DP10−30の溶出した画分を回収し、濃縮しDP10−30を主成分とするデキストラン分解物(試料3)を得た。
デキストラン70(名糖産業社製)を10質量%となるように水に溶解し、デキストラナーゼ(デキストラナーゼL「アマノ」、天野エンザイム社製)を0.04mg/基質g添加し、pH6、60℃で反応を行った。HPLCでDP150を超える糖質の消失を確認後、煮沸失活により反応を停止し、デキストラン分解物を得た。
澱粉部分分解物(パインデックス#1、松谷化学工業社製)を30質量%となるように水に溶解し、グルコノバクター・オキシダンス(Gluconobacter oxydans)由来のデキストリンデキストラナーゼを7U/基質g、α―アミラーゼ(クライスターゼL−1、天野エンザイム社製)を0.01mg/基質g、マイロイデス・オドラータス(Myroides odoratus)由来イソアミラーゼを200U/基質g、プルラナーゼ(プルラナーゼ「アマノ」3、天野エンザイム社製)を0.2mg/基質gを添加し、pH5、53℃で72時間反応後、常法により精製を行った。前記作業により試料5を得た。
試料5をゲルろ過クロマトグラフィーに供し、DP1およびDP2以外の画分を回収、濃縮し、試料5からDP1およびDP2を除去した試料6を得た。
30%(w/w)DE6.5コーンスターチ液化液を温度53℃、pH6.0に調整し、これにパエニバシルス・エスピー(Paenibacillus sp.)のシクロデキストリン生成酵素を2U/基質g、マイロイデス・オドラータスのイソアミラーゼを200U/基質g、プルラナーゼ「アマノ」3を0.2mg/基質g、アスペルギルス・ニガー(Aspergillus niger)のα−グルコシダーゼを2.5U/基質g添加して48時間糖化した。これを80℃に加温し、クライスターゼL1を0.05mg/基質g添加してヨード反応が消失するまで作用させた。これを常法により精製、濃縮した後、ゲルろ過クロマトグラフィーに供し、DP1およびDP2以外の画分を回収、濃縮することで試料7を得た。
分岐オリゴ糖(バイオトース#50、日本食品化工社製)を、ゲルろ過クロマトグラフィーに供し、DP1以外の画分を回収、濃縮することで試料8を得た。
デキストリン(パインデックス#2、松谷化学工業社製)を試料9として用いた。
糖組成は、HPLCを用いて算出した。グリコシド結合組成は、1HNMRのピーク面積から算出した。なお、NMRはサンプルを重水に溶解し、測定を行った。各試料の糖組成分析結果およびα−1,6結合比率分析結果は、それぞれ表1および表2に示される通りである。
カラム: MCI GEL CK02AS (20×250 mm、三菱化学社製)
カラム温度:80℃
流速:0.7ml/分
溶離液:精製水
デキストリンデキストラナーゼ
精製水にて希釈した酵素溶液0.5mlに50mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.2)に溶解した2w/v%マルトテトラオース0.5mlを添加し、35℃に保持した。反応5分と60分で反応液0.5mlをとり、煮沸して反応を停止した。これをHPLCに供してマルトトリオース生成量を測定した。酵素活性1Uを1分間に1μmolのマルトトリオースを生成する酵素量と定義した。
HPLC条件は以下の通りであった。
カラム: Ultron PS-80N.L (8.0x500mm、信和化工社製)2本連結
カラム温度:80℃
流速:0.6ml/分
溶離液:精製水
反応は、20mM塩化カルシウムを含む50mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH6.0)100μlに5mg/mlワキシーコーンスターチ(日本食品化工社製)350μlを添加し、45℃に5分間保持したものに同緩衝液にて適宜希釈した酵素溶液100μl添加して45℃に15分間保持した。これに反応失活用ヨウ素液(6.35mg/mlヨウ素および83mg/mlヨウ化カリウムからなる溶液2mlと0.1N塩酸8mlを混合したもの)500μlを添加して反応を停止した。この反応停止液を室温に15分間保持し、これに純水10ml添加したものの610nmの吸光度を測定した。酵素活性1Uを上述のイソアミラーゼの活性測定方法の条件下において610nmの吸光度を0.01増加させる酵素量と定義した。
酵素反応は、50mMリン酸カリウム緩衝液(pH6.0)に溶解した1%可溶性デンプン(ナカライテスク社)0.9mlに適宜水で希釈した酵素溶液0.1mlを添加し、40℃に10分間保持した。これに40mM水酸化ナトリウム水溶液を2.5ml添加して反応を停止した。生成したβ−シクロデキストリンをフェノールフタレイン法により測定した。すなわち、0.1mg/mlフェノールフタレインおよび2.5mM炭酸ナトリウムからなる溶液0.3mlを前記溶液に添加し、攪拌後550nmの吸光度を測定した。0〜0.1mg/mlの範囲で作成したβ−シクロデキストリンの標準曲線に基づき生成したβ−シクロデキストリン量を求めた。シクロデキストリン生成酵素1単位とは、前記条件下において、1分間に1mgのβ−シクロデキストリンを生成するのに必要な酵素量と定義した。
酵素反応は、50mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.2)に溶解した0.25%マルトース80μlに0.05%トリトンX−100を含む10mM酢酸ナトリウム緩衝液(pH4.2)で適宜希釈した酵素溶液20μlを添加し、37℃に10分間保持した。反応10分で反応液50μlを抜き出し、2Mトリス塩酸緩衝液(pH7.0)100μlと混合して反応を停止した。これにグルコースCII−テストワコー(和光純薬工業社)を40μl添加した後、室温に1時間保持して発色させ、490nmの吸光度を測定した。生成したグルコース量を0〜0.01%の範囲で作成したグルコースの標準曲線に基づき算出した。α−グルコシダーゼ1単位とは前記条件下において、1分間に1μmolのマルトースを加水分解するのに必要な酵素量と定義した。
インビトロ消化性試験方法
ラット小腸アセトンパウダー(シグマ社製)2gを45mMマレイン酸ナトリウム緩衝液(pH6.6)20mlに懸濁後、遠心分離(19000g,10分間)して上清を回収した。得られた溶液の活性を測定し、酵素溶液として下記のインビトロ消化性試験に用いた。
週齢8〜11のSDラット(雄)を一晩絶食させ、空腹時の体重および血糖値から類似個体を選別した。選別した個体(n=5)を2時間絶水させた後、各試料を3g/kg体重にてゾンデで経口投与し、投与後30、60、90および120分後の血糖値を簡易血糖測定器により分析した。対照として消化性糖質であるデキストリン(DE=14、松谷化学工業社製。本明細書および図面において「対照糖質」または「対照糖質(デキストリン投与群)」という。)を用いた。
種々の重合度のデキストラン分解物(試料1〜4)およびデキストリン(試料9)についてインビトロ消化性試験を行った。反応180分までの結果を図1、反応24時間までの結果を図2に示した。反応180分までの分解率を見ると試料9が90%程度まで分解しているのに対して、試料1〜4はいずれも35%以下となった(180分後の結果:試料1が33.5%、試料2が33.5%、試料3が21.3%、試料4が12.2%)。反応を24時間まで伸ばしたところ、試料1〜3が70%以上分解されたのに対して、試料4は30%程度の分解に留まった(24時間後の結果:試料1が86.1%、試料2が93.1%、試料3が71.3%)。本結果から主にα−1,6結合で構成されたDP1−30の糖質は、主としてα−1,4結合で構成されたデキストリン(試料9)と比較してすみやかに消化されず、かつ、持続的に十分消化されることが示された。また、試料4の結果からDP31以上となると分解速度がより大きく低下することから、十分な量が消化されないことが明らかとなった。なお、試料4の糖質には重合度150を超える糖質が含まれていないが、インビトロ消化性試験により重合度150を超える糖質も試料4と同様に十分な量が消化されないことを確認した(データ省略)。
澱粉を原料として製造したα−1,6結合を有した種々の糖質(試料5〜8)およびデキストリン(試料9)についてインビトロ消化性試験を行った。反応180分までの結果を図3、反応24時間までの結果を図4に示した。反応180分までの分解率を見ると試料9が90%程度まで分解しているのに対して、試料5および6は40%以下となった(180分後の結果:試料5が36.9%、試料6が26.1%))。試料7および8は50%程度が分解されていた(180分後の結果:試料7が50.7%、試料8が50.7%)。反応を24時間まで伸ばしたところ、試料5〜8はいずれも60%以上分解された(24時間後の結果:試料5が77.0%、試料6が64.4%、試料7が84.1%、試料8が95.4%)。試料7の結果から、α−1,6結合比率が50%未満の糖質はすみやかに消化されることが示された。また、試料8の結果からα−1,6結合比率が十分であってもDP2の含有量が多いとすみやかに消化されることが示された。そして、試料5および試料6の結果から、α−1,6結合比率が60%以上であり、DP1および2の糖質の含有量が比較的少ない場合において、主としてα−1,4結合で構成されたデキストリン(試料9)と比較してすみやかに消化されず、かつ、持続的に十分消化されることが示された。
試料1〜8と対照糖質(デキストリン投与群)についてインビボ消化性試験を行った。投与後120分までの血糖値を図5〜12に示した。また、対照糖質(デキストリン投与群)の最大血糖値を100としたときの各試料の最大血糖値を相対最大血糖値として算出した。結果は表3に示される通りである。
Claims (21)
- 下記(A)、(B)、(C)、(D)および(E)を満たす糖質組成物を含んでなる、遅消化性持続型エネルギー補給剤:
(A)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60%以上である、
(B)重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量が9質量%以下である、
(C)重合度3〜30の糖質の全糖質に対する含有量が41質量%以上である、
(D)重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が40質量%以下であるおよび
(E)重合度10〜30の糖質の全糖質に対する含有量が20質量%以上である。 - 糖質組成物が重合度3〜9の糖質を全糖質に対して3質量%以上含有する、請求項1に記載のエネルギー補給剤。
- 糖質組成物がデキストラン分解物またはその分画処理物である、請求項1または2に記載のエネルギー補給剤。
- (A)において、(A−1)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が90%以上である、請求項1〜3のいずれか一項に記載のエネルギー補給剤。
- 糖質組成物がデキストラン生成酵素反応産物またはその分画処理物である、請求項1または2に記載のエネルギー補給剤。
- (A)において、(A−2)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60〜99%であり、かつ、α−1,6結合以外のグリコシド結合に対するα−1,4結合の比率が80%以上である、請求項1、2および5のいずれか一項に記載のエネルギー補給剤。
- 血中グルコース値の変化を緩徐にしつつエネルギー補給するための、請求項1〜6のいずれか一項に記載のエネルギー補給剤。
- 炭水化物由来のエネルギーを必要とするが、該エネルギー摂取による血中グルコース値の変化を緩徐にする必要がある者に摂取させるための、請求項1〜7のいずれか一項に記載のエネルギー補給剤。
- 下記(A)、(B)、(C)、(D)および(E)を満たす糖質組成物:
(A)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60%以上である、
(B)重合度1および2の糖質の全糖質に対する含有量が9質量%以下である、
(C)重合度3〜30の糖質の全糖質に対する含有量が41質量%以上である、
(D)重合度31以上の糖質の全糖質に対する含有量が40質量%以下であるおよび
(E)重合度10〜30の糖質の全糖質に対する含有量が20質量%以上である。 - 糖質組成物が重合度3〜9の糖質を全糖質に対して3質量%以上含有する、請求項9に記載の糖質組成物。
- (A)において、(A−1)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が90%以上である、請求項9または10に記載の糖質組成物。
- (A)において、(A−2)全グリコシド結合に対するα−1,6結合の比率が60〜99%であり、かつ、α−1,6結合以外のグリコシド結合に対するα−1,4結合の比率が80%以上である、請求項9または10に記載の糖質組成物。
- 請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物を含んでなる、飲食品。
- 飲食品100キロカロリーあたり請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物を6〜25g含有する、請求項13に記載の飲食品。
- 遅消化性持続型エネルギー補給用の、請求項13または14の飲食品。
- 請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物を有効成分として含んでなる、血中グルコース値の変化を緩徐にすることがその治療または予防に有効である疾患または症状の治療および予防剤。
- 請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物または請求項13〜15のいずれか一項に記載の飲食品を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、エネルギー補給方法(但し、ヒトに対する医療行為を除く)。
- 請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物または請求項13〜15のいずれか一項に記載の飲食品を哺乳動物に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、血中グルコース値の変化を緩徐にすることがその治療または予防に有効である疾患または症状の治療および/または予防方法(但し、ヒトに対する医療行為を除く)。
- 遅消化性持続型エネルギー補給剤または遅消化性持続型エネルギー補給用飲食品としての請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物の使用(但し、ヒトに対する医療行為を除く)。
- 遅消化性持続型エネルギー補給剤または遅消化性持続型エネルギー補給用飲食品の製造のための請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物の使用。
- 血中グルコース値の変化を緩徐にすることにより治療および/または予防できる疾患の治療および/または予防用医薬の製造のための、請求項9〜12のいずれか一項に記載の糖質組成物の使用。
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