JP6005751B2 - マクロファージの活性化の調節 - Google Patents
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Description
本発明は、広義には、マクロファージの活性化を調節することによる免疫調節の方法に関する。
(i)腫瘍へのTAM動員;
(ii)少なくとも1つのマクロファージ腫瘍誘発機能;
(iii)腫瘍血管新生;
(iv)腫瘍浸潤および転移;
(v)腫瘍成長;
(vi)腫瘍細胞増殖
のうち少なくとも1つを低減する。特定の実施形態によれば、前記患者は、CSF−1R活性に関連する病態にさらに罹患している。
(i)配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列、配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列、もしくは配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列のうちの少なくとも5個の連続するアミノ酸を含んでなる、少なくとも1つのCDR;または
(ii)配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列、配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列、もしくは配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列のうちの少なくとも5個の連続するアミノ酸を含んでなる、少なくとも1つのCDR
を含んでなる抗体である。
・配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列、
・配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列、
・配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列、
・配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列、
・配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列、または
・配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列
のうちの少なくとも5個の連続するアミノ酸を含んでなる抗体である。
・配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列、
・配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列、
・配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列、
・配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列、
・配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列、および
・配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列
で示されるCDRの群から互いに独立に選択される少なくとも1つのCDRを含んでなる抗体である。
・配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列、
・配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列、
・配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列、
・配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列、
・配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列、および
・配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列
で示されるCDRを含んでなる抗体である。
・配列番号5、6、および7で示される3つのCDRを含んでなる可変領域と、
・配列番号8、9、および10で示される3つのCDRを含んでなる可変領域
とを含んでなる抗体である。
・配列番号11、12、および13で示される3つのCDRを含んでなる可変領域と、
・配列番号14、15、および16で示される3つのCDRを含んでなる可変領域
とを含んでなる抗体である。
・配列番号17、18、および19で示される3つのCDRを含んでなる可変領域と、
・配列番号20、21、および22で示される3つのCDRを含んでなる可変領域
とを含んでなる抗体である。
・配列番号3で示される可変領域と、
・配列番号4で示される可変領域
とを含んでなる抗体である。
(i)
・配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列で示されるCDR、
・配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列で示されるCDR、および
・配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列で示されるCDR
を含んでなる重鎖可変領域と
(ii)
・配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列で示されるCDR、
・配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列で示されるCDR、および
・配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列で示されるCDR
とを含んでなる軽鎖可変領域
を含んでなる抗体である。
(a)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号1の45番で始まり54番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有し;
CDR2は、配列番号1の66番で始まり87番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有し;かつ
CDR3は、配列番号1の117番で始まり126番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有する)
により定義される第一の可変領域と、
(b)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号2の44番で始まり56番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有し;
CDR2は、配列番号2の66番で始まり76番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有し;かつ
CDR3は、配列番号2の109番で始まり117番で終わる配列のうち少なくとも5個の連続するアミノ酸を有する)
により定義される第二の可変領域
とを含んでなる抗体である。
(a)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号5、11および17からなる群から選択されるアミノ酸配列を有し;
CDR2は、配列番号6、12および18からなる群から選択されるアミノ酸配列を有し;かつ
CDR3は、配列番号7、13および19からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する)
により定義される第一の可変領域と、
(b)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号8、14および20からなる群から選択されるアミノ酸配列を有し;
CDR2は、配列番号9、15および21からなる群から選択されるアミノ酸配列を有し;かつ
CDR3は、配列番号10、16および22からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する)
により定義される第二の可変領域
とを含んでなる抗体である。
(i)
(a)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号5で示され;
CDR2は、配列番号6で示され;かつ
CDR3は、配列番号7で示される)
により定義される第一の可変領域と、
(b)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号8で示され;
CDR2は、配列番号9で示され;かつ
CDR3は、配列番号10で示される)
により定義される第二の可変領域、または
(ii)
(a)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号11で示され;
CDR2は、配列番号12で示され;かつ
CDR3は、配列番号13で示される)
により定義される第一の可変領域と、
(b)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号14で示され;
CDR2は、配列番号15で示され;かつ
CDR3は、配列番号16で示される)
により定義される第二の可変領域、または
(iii)
(a)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号17で示され;
CDR2は、配列番号18で示され;かつ
CDR3は、配列番号19で示される)
により定義される第一の可変領域と、
(b)下式:
FR1−CDR1−FR2−CDR2−FR3−CDR3−FR4
(式中、
FR1、FR2、FR3およびFR4はそれぞれフレームワーク領域であり;
CDR1、CDR2およびCDR3はそれぞれ相補性決定領域であり;
ここで、
CDR1は、配列番号20で示され;
CDR2は、配列番号21で示され;かつ
CDR3は、配列番号22で示される)
により定義される第二の可変領域。
・配列番号3のアミノ酸配列を含んでなる第一の可変領域と、
・配列番号4のアミノ酸配列を含んでなる第二の可変領域
とを含んでなる抗体である。
・配列番号1のアミノ酸配列を含んでなる第一の可変領域と、
・配列番号2のアミノ酸配列を含んでなる第二の可変領域
とを含んでなる抗体である。
・配列番号24および配列番号25からなる群から選択される重鎖と、
・配列番号26、配列番号27および配列番号28からなる群から選択される軽鎖
とを含んでなる抗体である。
・配列番号29および配列番号30からなる群から選択される第一の可変領域と、
・配列番号31、配列番号32および配列番号33からなる群から選択される第二の可変領域
とを含んでなる抗体である。
(i) 1以上の用量の前記CSF−1Rと結合できる抗体を前記対象に投与すること;
(ii)前記投与の少なくとも1回の後に前記対象の身体のインターロイキン−6、インターロイキン−12、MMP9および/またはMCP−1レベルを測定すること
を含んでなる方法に関する。
バフィーコートは、Etablissement Francais du Sang(EFS、ストラスブール)により提供された。末梢血単核細胞(PBMC)を、フィコール勾配での遠心分離により得た。CD14抗体コーティングビーズ(Miltenyii)を用いた免疫磁気細胞選別により単球を精製した。富化された単球懸濁液は95%を超える純度であった。48ウェルプレート(3×105細胞/ウェル)の、10%熱失活ウシ胎児血清および1%三種抗生剤混合物(ペニシリン、ストレプトマイシン、ネオマイシン)を添加したRPMI−Glutamax(商標)培地中で6日間、単球を分化させた。GM−CSF(10ng/ml)を0日目〜3日目まで細胞培養培地中に加えた。H27K15、他の抗体または内部対照GW2580(LC Labs)を0日目に加えた。単離後3日目に、単球をPBSで洗浄し、抗体またはGW2580の存在下または不在下、CSF−1(10ng/ml)およびGM−CSF(2ng/ml)を添加した培地中でさらに培養した。6日目に、上清を回収し、−20℃で保存した。細胞をプラスチックから解離させ、3反復のプールを、細胞サイズならびにFcγRおよびCD86の発現に関してIC/FC(免疫細胞化学/フローサイトメトリー)により分析した。サイトカインおよびケモカインをマルチプレックス(Bioplex、Bio−Rad)またはELISAによりその培養上清にて定量した。
抗CD115 mAb H27K15はマクロファージに対して細胞傷害性はないが、それらの分化をM1型に偏向させる。
腫瘍関連マクロファージは、細胞外マトリックスを分解することによる腫瘍細胞転移と腫瘍微小環境中へのVEGF放出を誘導することによる新血管新生の両方を促進するMMP−9(マトリックス−メタロプロテアーゼ9)を産生することが知られている。マクロファージにより産生されるMMP−9は、腫瘍における血管新生スイッチの主要なレギュレーターである。
参照文献
Claims (2)
- ヒトCSF−1Rと結合できる抗体を含んでなる、M2マクロファージ活性化プールの減少および/またはM1マクロファージプールを増加させるための組成物であって、前記ヒトCSF−1Rと結合できる抗体が、(a)配列番号24を有する重鎖と、(b)配列番号28を有する軽鎖とを含んでなる、組成物。
- 癌、喘息、アレルギーおよび進行性線維性疾患からなる群から選択される疾患の治療に用いられる、請求項1に記載の組成物。
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