JP5976826B2 - Btk活性阻害剤としての8−フルオロフタラジン−1(2h)−オン化合物 - Google Patents
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Description
米国特許法施行規則第1.53(b)条に従って出願された本非仮出願は、その全体が出典明示により本明細書に援用される、2011年11月3日出願の米国特許仮出願第61/555398号の米国特許法第119条(e)項に基づく優先権を主張する。
I
II
を有する、ブルトン型チロシンキナーゼ(Btk)調節活性を備えた8−フルオロフタラジン−1(2h)−オン化合物である、その立体異性体、互変異性体又は薬学的に許容可能な塩を含む式I及びIIの化合物に関する。様々な置換基は本明細書中以下に定義される。
置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素1個から全水素の置換基による置換までを指す。「置換基」なる用語は親分子上の水素原子と置き換えられる原子又は原子群を示す。「置換された」なる用語は、特定の基が一又は複数の置換基を有していることを意味する。任意の基が複数の置換基を有している場合があり、様々な可能な置換基が提供される場合、置換基は独立して選択され、同じである必要はない。「非置換の」なる用語は、特定された基が置換基を有していないことを意味する。「置換されていてもよい」なる用語は、特定された基が非置換であるか、又は可能な置換基の群から独立して選択される一又は複数の置換基で置換されていることを意味する。置換基の数を示す場合、「一又は複数」なる用語は、一置換から最も多い可能な置換数までの範囲、つまり、水素1個から全水素の置換基による置換までを指す。
本発明は、Btkキナーゼによって調節される疾患、状態及び/又は障害の治療において潜在的に有用な、式Ia〜Ifを含む、式I:
I
[式中、
X1はCR1又はNであり;
X2はCR2又はNであり;
X3はCR3又はNであり;
ここでX1、X2及びX3の1つ又は2つはNであり;
R1、R2及びR3は、H、F、Cl、CN、−CH3、−CH2CH3、−CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CH2CH2OH、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから独立して選択され;
R4は、H、F、Cl、CN、−CH2OH、−CH(CH3)OH、−C(CH3)2OH、−CH(CF3)OH、−CH2F、−CHF2、−CH2CHF2、−CF3、−C(O)NH2、−C(O)NHCH3、−C(O)N(CH3)2、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−NHC(O)CH3、−OH、−OCH3、−OCH2CH3、−OCH2CH2OH、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、1−ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、3−ヒドロキシ−オキセタン−3−イル、オキセタン−3−イル及びアゼチジン−1−イルから選択され;
R5は、−CH3、−CH2CH3、−CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CN及び−CH2CH2OHから選択されるか;又は
2つのR5基は、3員、4員、5員もしくは6員炭素環もしくは複素環を形成するか;又は
R5基とR7基は、3員、4員、5員もしくは6員炭素環もしくは複素環を形成し;
nは0、1、2、3又は4であり;
R6は、H、−CH3、−CH2CH3、−CH2CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから選択され;
R7は、H、−CH3、−S(O)2CH3、シクロプロピル、アゼチジン−3−イル、オキセタン−3−イル及びモルホリン−4−イルから選択され;
Z1はCR8又はNであり、ここでR8は、H、F、Cl、−CH3、−CH2CH3、−CH2CH2OH、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから選択され;
Z2はCR9又はNであり、ここでR9は、H、−CH3、−CH2CH3及び−CH2CH2OHから選択され;並びに
Y1及びY2は、CH及びNから独立して選択され、ここでY1及びY2は各々Nではない]
の8−フルオロフタラジン−1(2h)−オン化合物、又はその立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容可能な塩、並びにそれらの薬学的組成物を提供する。
の化合物を含む。
II
[式中、
X1はCR1又はNであり;
X2はCR2又はNであり;
X3はCR3又はNであり;
ここでX1、X2及びX3の1つ又は2つはNであり;
Y1及びY2は、CH及びNから独立して選択され、ここでY1及びY2は各々Nではなく;
R1、R2及びR3は、H、F、Cl、CN、−CH3、−CH2CH3、−CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CH2CH2OH、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから独立して選択され;
R4は、H、F、Cl、CN、−CH2OH、−CH(CH3)OH、−C(CH3)2OH、−CH(CF3)OH、−CH2F、−CHF2、−CH2CHF2、−CF3、−C(O)NH2、−C(O)NHCH3、−C(O)N(CH3)2、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−NHC(O)CH3、−OH、−OCH3、−OCH2CH3、−OCH2CH2OH、−OP(O)(OH)2、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、1−ヒドロキシシクロプロピル、イミダゾリル、ピラゾリル、3−ヒドロキシ−オキセタン−3−イル、オキセタン−3−イル及びアゼチジン−1−イルから選択され;
R6は、H、−CH3、−CH2CH3、−CH2CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから選択され;
R8は、C6−C20アリール、C3−C12カルボシクリル、C2−C20ヘテロシクリル、C1−C20ヘテロアリール、−(C6−C20アリール)−(C2−C20ヘテロシクリル)、−(C1−C20ヘテロアリール)−(C2−C20ヘテロシクリル)、−(C1−C20ヘテロアリール)−(C2−C20ヘテロシクリル)−(C2−C20ヘテロシクリル)、−(C1−C20ヘテロアリール)−(C2−C20ヘテロシクリル)−(C1−C6アルキル)、−(C1−C20ヘテロアリール)−(C1−C6アルキル)及び−(C1−C20ヘテロアリール)−C(=O)−(C2−C20ヘテロシクリル)から選択され;ここでアリール、カルボシクリル、ヘテロシクリル及びヘテロアリールは、F、Cl、Br、I、CN、−CH3、−CH2CH3、−CH(CH3)2、−CH2CH(CH3)2、−CH2OH、−CH2OCH3、−C(CH3)2OH、−CH(OH)CH(CH3)2、−C(CH3)2CH2OH、−CH2CH2SO2CH3、−CH2OP(O)(OH)2、−C(CH3)2CONH2、−CH2OCH3、−CH2CH2OH、−CH2CH2OCH3、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CH2CF3、−CH2CHF2、−CH(CH3)CN、−C(CH3)2CN、−CH2CN、−CO2H、−CO2CH3、−CO2C(CH3)3、−COCH(OH)CH3、−C(O)CH3、−C(O)CH2CH3、−C(O)CH(CH3)2、−C(O)NH2、−C(O)NHCH3、−C(O)N(CH3)2、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−NHC(O)CH3、−N(CH3)COCH3、−NHS(O)2CH3、−N(CH3)C(CH3)2CONH2、−N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3、−NO2、=O、−OCH2CH2N(CH3)2、−OP(O)(OH)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3、−OCH2CH2OCH3、−OCH2CH2OH、−S(O)2N(CH3)2、−SCH3、−S(O)2CH3、−S(O)3H、シクロプロピル、オキセタニル、アゼチジニル、1−メチルアゼチジン−3−イル)オキシ、N−メチル−N−オキセタン−3−イルアミノ、アゼチジン−1−イルメチル及びモルホリノから選択される一又は複数の基で置換されていてもよい]
の8−フルオロフタラジン−1(2h)−オン化合物、又はその立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容可能な塩も提供する。
ピリミジニル、
6,7−ジヒドロ−4H−チアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−イル、
5−(モルホリン−4−カルボニル)−2−ピリジル、
ピラゾリル、
チアゾリル、
6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル、
オキサゾリル、
イソオキサゾリル、
イミダゾリル、
5−(6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イル、
1,2,3−トリアゾリル、
4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン、
ピラジニル、及び
5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−イル
から選択されるものを含む。
[式中、R9は、H、−CH3、−CH2OCH3、−CH2CH3、−CH(CH3)2、−CH2CH2OH、−CH2CH2OCH3、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CH2CF3、−CH2CHF2、−CH(CH3)CN、−C(CH3)2CN、−CH2CN、−CH2CH2CN、−C(O)CH3、−C(O)CH2CH3、−C(O)CH(CH3)2、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3、−OCH2CH2OH、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、オキセタニル及びオキセタニルメチルから選択される]
であるものを含む。
酵素活性(又は他の生物学的活性)の阻害剤としての式Iの化合物の相対的効果は、各々の化合物が活性を所定の程度まで阻害する濃度を決定し、その結果を比較することによって確認することができる。典型的には、好ましい決定は、生化学アッセイで活性の50%を阻害する濃度、すなわち50%阻害濃度又は「IC50」である。IC50値の決定は当分野で公知の従来技術を用いて達成できる。一般に、IC50は、様々な濃度の被験阻害剤の存在下で所与の酵素の活性を測定することによって決定できる。実験的に得られた酵素活性の値を、次に、使用した阻害剤濃度に対してプロットする。50%酵素活性(いかなる阻害剤も存在しない場合の活性と比較して)を示す阻害剤の濃度をIC50値とする。同様に、他の阻害濃度は活性の適切な測定を介して定義することができる。例えば、一部の状況では90%阻害濃度、すなわちIC90等を確立することが望ましいと考えられる。
本発明の化合物は、治療される状態に適した任意の経路によって投与し得る。適切な経路には、経口、非経口(皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、髄腔内及び硬膜外を含む)、経皮、直腸、経鼻、局所(口腔及び舌下を含む)、膣、腹腔内、肺内及び鼻腔内が含まれる。局所免疫抑制治療に関しては、化合物を、移植前に阻害剤を灌流すること又は移植片を阻害剤と接触させることを含む、病巣内投与によって投与し得る。好ましい経路は、例えば受容者の状態によって異なり得ることが認識される。化合物を経口投与する場合は、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と共に丸剤、カプセル、錠剤等として製剤化し得る。化合物を非経口投与する場合は、薬学的に許容可能な非経口ビヒクルと共に、及び、以下で詳述するように、注射用単位投薬形態で製剤化し得る。
本発明の式I及びIIの化合物は、免疫障害、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝/内分泌機能障害又は神経障害などのBtkキナーゼに関連する細胞増殖、機能又は挙動の異常から生じる疾患又は障害に罹患しており、従って上記で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療され得る、ヒト又は動物患者を治療するために有用である。癌に罹患しているヒト又は動物患者も、上記で定義された本発明の化合物の投与を含む方法によって治療され得る。患者の状態は、それにより改善又は軽減され得る。
ヒトを含む哺乳動物の治療処置に本発明の化合物を使用するために、本発明の化合物は通常、標準的な医薬慣例に従って薬学的組成物として製剤化される。本発明のこの態様によれば、本発明の化合物を薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と共に含有する薬学的組成物が提供される。
式I及びIIの化合物は、炎症又は過増殖性障害(例えば癌)などの本明細書で述べる疾患又は障害の治療のために、単独で又は他の治療剤と組み合わせて使用し得る。特定の実施態様では、式I又はIIの化合物を、医薬配合製剤又は併用療法としての投与レジメンにおいて、抗炎症もしくは抗過剰増殖特性を有するか又は炎症、免疫応答障害もしくは過増殖性障害(例えば癌)を治療するために有用な、付加的な第二の治療化合物と組み合わせる。付加的な治療化合物は、抗炎症薬、免疫調節薬、化学療法剤、アポトーシス促進剤、向神経因子、心臓血管疾患を治療するための薬剤、肝疾患を治療するための薬剤、抗ウイルス薬、血液障害を治療するための薬剤、糖尿病を治療するための薬剤、及び免疫不全障害を治療するための薬剤であり得る。第二治療剤はNSAID抗炎症薬であり得る。第二治療剤は化学療法剤であり得る。医薬配合製剤又は投与レジメンの第二の化合物は、互いに悪影響を及ぼさないように、好ましくは式I又はIIの化合物に対して補完的な活性を有する。そのような化合物は、意図する目的のために有効な量で組み合わせて適切に存在する。1つの実施態様では、本発明の組成物は、NSAIDなどの治療剤と組み合わせて、式I又はIIの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグを含有する。
本明細書で述べる式I及びIIの化合物のインビボ代謝産物も本発明の範囲に含まれる。そのような産物は、例えば投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素切断等から生じ得る。従って、本発明は、本発明の化合物を、その代謝産物を生じさせるのに十分な期間哺乳動物と接触させることを含む工程によって生成される化合物を含む、式I及びIIの化合物の代謝産物を包含する。
本発明の別の実施態様では、上記で述べた疾患及び障害の治療のために有用な物質を含む製造品又は「キット」が提供される。1つの実施態様では、キットは、式I又はIIの化合物、又はその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、代謝産物、又はその薬学的に許容可能な塩もしくはプロドラッグを含有する容器を含む。キットは、容器上に又は容器に付随してラベル又は添付文書を更に含み得る。「添付文書」という用語は、そのような治療剤の使用に関する適応症、用法、用量、投与、禁忌及び/又は警告についての情報を含む、治療剤の市販包装に慣例的に含まれる指示書を指すために用いられる。適切な容器には、例えばビン、バイアル、注射器、ブリスターパック等が含まれる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、状態を治療するために有効な式IもしくはIIの化合物又はその製剤を保持することができ、無菌アクセス口を有し得る(例えば、容器は、皮下注射針によって貫通できる栓を有する静脈内溶液バッグ又はバイアルであり得る)。組成物中の少なくとも1つの活性薬剤は式I又はIIの化合物である。ラベル又は添付文書は、組成物が癌などの選択された状態を治療するために使用されることを示す。加えて、ラベル又は添付文書は、治療される患者が、過増殖性障害、神経変性、心肥大、疼痛、片頭痛又は神経外傷性疾患もしくは事象などの障害を有する患者であることを示し得る。1つの実施態様では、式I又はIIの化合物を含有する組成物が異常な細胞増殖から生じる障害を治療するために使用できることを示す。ラベル又は添付文書はまた、組成物が他の障害を治療するために使用できることも示し得る。あるいは、又は加えて、製品は、薬学的に許容可能な緩衝液、例えば注射用静菌水(BWFI)、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液及びデキストロース溶液を含む第二の容器を更に含み得る。第二の容器は、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針及び注射器を含む、商業的及び使用者の見地から望ましい他の物質を更に含み得る。
式I及びIIの化合物は、特に本明細書に含まれる説明に照らして、化学分野において周知のプロセス、及び、各々が明白に出典明示により本明細書に援用される、Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, 例えば第3巻;Liebigs Annalen der Chemie, (9):1910-16, (1985);Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60, (1958);Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990)に記載されている他の複素環に関する工程と類似のプロセスを含む合成経路によって合成され得る。出発物質は、一般にAldrich Chemicals(Milwaukee, WI)などの商業的供給源から入手可能であるか、又は当業者に周知の方法を用いて容易に調製される(例えば、Louis F. Fieser 及び Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, 第1-23巻, Wiley, N.Y. (1967-2006 ed.), 又は Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl編. Springer-Verlag, Berlin, 補遺を含む(Beilsteinオンラインデーターベースからも利用可能)を使用して容易に調製される)。
一般手順:鈴木カップリング
鈴木型カップリング反応は、炭素−炭素結合を形成して式I及びIIの化合物及び中間体A−3の環に結合するために有用である(Suzuki (1991) Pure Appl. Chem. 63:419-422;Miyaura and Suzuki (1979) Chem. Reviews 95(7):2457-2483;Suzuki (1999) J. Organometal. Chem. 576:147-168)。鈴木カップリングは、B−2又はB−4などのヘテロアリールハロゲン化物と、A−1又はA−2などのボロン酸とのパラジウム媒介性クロスカップリング反応である。例えば、B−2を約1.5当量の4,4,4’,4’,5,5,5’,5’−オクタメチル−2,2’−ビ(1,3,2−ジオキサボロラン)と組み合わせ、水中の1モル溶液として約3当量の炭酸ナトリウム及び等容量のアセトニトリル中に溶解し得る。触媒量又はそれ以上の低原子価パラジウム試薬、例えばビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)ジクロリドを添加する。一部の場合は、水層のpHを調整するために酢酸カリウムを炭酸ナトリウムの代わりに使用する。次に反応物をマイクロ波反応器(Biotage AB, Uppsala, Sweden)中で加圧下に約140〜150℃で10〜30分間加熱する。内容物を酢酸エチル又は別の有機溶媒で抽出する。有機層の蒸発後、ボロンエステルA−1をシリカで又は逆相HPLCによって精製し得る。置換基は定義されるとおりであるか、又はその保護された形態もしくは前駆体である。同様に、臭化物中間体B−4をボロニル化してA−2を得ることができる。
ブッフバルト反応は、6−ブロモ中間体B−1をアミノ化するのに有用である(Wolf and Buchwald(2004)Org.Synth Coll.Vol.10:423;Paul et al(1994)Jour.Amer.Chem.Soc.116:5969−5970)。DMF中のハロ中間体B−1の溶液に、適切なピペラジニル−ピリジニル又はピペラジニル−ピリミジニルアミン(200mol%)、Cs2CO3(50mol%)、Pd2(dba)3(5mol%)及び4,5−ビス(ジフェニルホスフィノ)−9,9−ジメチルキサンテン(キサントホス、CAS登録番号161265−03−8、10mol%)を添加する。反応物をマイクロ波反応器(Biotage AB,Uppsala,Sweden)中で加圧下に約110℃に約30分間加熱する。生じた溶液を減圧下で濃縮し、B−2を得る。他のパラジウム触媒及びホスフィン配位子も有用であり得る。
式I及びIIの化合物を調製する方法において、反応生成物を互いに及び/又は出発物質から分離することは好都合であり得る。各段階又は一連の段階の所望生成物を、当分野で一般的な技術によって所望の程度の均質性まで分離及び/又は精製する。典型的には、そのような分離は、多相抽出、溶媒もしくは溶媒混合物からの結晶化、蒸留、昇華又はクロマトグラフィを含む。クロマトグラフィには、例えば逆相及び順相クロマトグラフィ;サイズ排除クロマトグラフィ;イオン交換クロマトグラフィ;高、中及び低圧液体クロマトグラフィ法及び装置;小規模分析クロマトグラフィ;疑似移動床(SMB)クロマトグラフィ及び分取薄層又は厚層クロマトグラフィを含む多くの方法、並びに小規模薄層及びフラッシュクロマトグラフィの技術が含まれ得る。
4−tert−ブチルベンゾイルクロリド 101a
二塩化硫黄(1.5L)中の4−tert−ブチル安息香酸(1000g、5.6mol)の混合物を3時間還流した。次に混合物を減圧下で濃縮し、粗101aを、更に精製することなく次の段階で使用した。
4−tert−ブチル−N−(2−ヒドロキシ−1,1−ジメチル−エチル)−ベンズアミド 101b
DCM(200mL)中の101aの溶液を、0〜10℃でCH2Cl2(2000mL)中の2−アミノ−2−メチル−1−プロパノール(1000g、10.5mol)の溶液に滴下した。最初の添加の5分後に白色沈殿物が形成された。生じたスラリーを室温で一晩撹拌した。固体をろ過によって除去し、CH2Cl2(1000mL)で洗浄した。ろ液を回転蒸発によって濃縮し、101bを明黄色樹脂として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。
2−(4−tert−ブチル−フェニル)−4,4−ジメチル−4,5−ジヒドロ−オキサゾール 101c
塩化チオニル(1.5L)中の101b(1000g、粗生成物)の混合物を1時間還流した。反応混合物を室温に冷却し、撹拌Et2O 500mLに注ぎ入れて、この時間中に白色沈殿物が形成された。沈殿物をろ過によって収集し、Et2Oで洗浄して、水500mLに溶解し、25%NaOHで中和した。黄色水溶液をEtOAC(3×500mL)で抽出し、合わせた有機相をブライン500mLで洗浄して、Na2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮し、101c(530g、3段階で40.8%)を白色固体として得た。1HNMR (300 MHz,CDCl3) δ 7.87 (d,J=8.4 Hz,2 H),7.41 (d,J=8.4 Hz,2 H),4.08 (s,2 H),1.37 (s,6 H),1.33 (s,9 H).
5−tert−ブチル−2−(4,4−ジメチル−4,5−ジヒドロ−オキサゾール−2−イル)−ベンズアルデヒド 101d
無水THF(750mL)中の101c(50g、0.22mol)の溶液に、窒素雰囲気下に−78℃でヘキサン中のn−ブチルリチウムの2.4M溶液(225mL)を添加した。透明な琥珀色溶液を−20℃に温め、4時間撹拌した。反応混合物は赤琥珀色になり、混濁した。混合物を再び−78℃に冷却し、速やかに撹拌した後、DMF 72mLを、温度が−60℃以下に制御される速度で滴下した。添加後、反応混合物を−78℃で15分間、次に−20℃で1時間及び室温で1時間撹拌した。反応混合物を0.5M KHSO4水溶液200mLでクエンチングした。pHが4〜5に調整されるまで更なるKHSO4溶液を添加した。水相をEtOAc(3×500mL)で抽出し、合わせた有機相をブライン400mLで洗浄して、Na2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮し、101d(35g、62%)を黄色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。LCMS、ESI、m/z 260(M+1)+。
2−(4−tert−ブチル−2−1,3−ジオキシナン−2−イル−フェニル)−4,4−ジメチル−4,5−ジヒドロオキサゾール 101e
トルエン(500mL)中の101d(60g、0.23mol)、p−トルエンスルホン酸ピリジニウム(4g、0.02mol)及び1,3−プロパンジオール(60mL)の混合物を一晩加熱還流し、LCMSによって決定した反応完了後に室温まで冷却した。反応混合物を50%NaHCO3水溶液200mL、水200mL及びブライン200mLで洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮し、残留物を得て、これを、EtOAc/石油エーテル=1:5を溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィによって精製し、101e(16g、21.7%)を透明な黄色ゴム状物質として得た。LCMS(ESI)318(M+H)+。1HNMR (300 MHz,CDCl3) δ 7.79 (s,1 H),7.67 (d,J=8.0 Hz,1 H),7.36 (dd,J=1.6,8.4 Hz,1 H),6.32 (s,1 H),4.23 (dd,J=5.2,11.2 Hz,2 H),4.06 (s,2 H),4.04−3.98 (m,2 H),2.27−2.21 (m,1 H),1.48−1.38 (m,1 H),1.38 (s,6 H),1.32 (s,9 H).
2−(4−tert−ブチル−2−1,3−ジオキシナン−2−イル−6−フルオロ−フェニル)−4,4−ジメチル−4,5−ジヒドロ−オキサゾール 101f
無水THF(400mL)中の101e(20g、63mmol)の溶液に、N2雰囲気下に−78℃でヘキサン中のn−ブチルリチウムの2.4M溶液(65mL)を添加した。透明な黄色溶液を−17℃で3時間撹拌し、この時点で溶液は深い赤橙色を示した。反応溶液を再び−78℃に冷却し、速やかに撹拌して、無水THF(100mL)中のN−フルオロベンゼンスルホンイミド(29g、92mmol)の溶液を10分間かけて滴下した。反応混合物を−78℃で5分間、−20℃で30分間、次に室温で1時間撹拌した。反応混合物を50%NH4Cl水溶液150mLに注ぎ入れ、EtOAc 300mLで抽出した。分離した有機相を水150mL及びブライン150mLで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮して、残留物を得、これを、EtOAc/CH2Cl2=1:5を溶離液として用いるシリカゲルクロマトグラフィによって精製して、101f(7g、33%)を黄色固体として得た。LCMS(ESI)m/z 336(M+H)+。1HNMR (300 MHz,CDCl3) δ 7.53 (d,J=1.6 Hz,1 H),7.08 (dd,J=2.0,12.0 Hz,1 H),5.90 (s,1 H),4.24 (dd,J=5.2,10.8 Hz,2 H),4.06 (s,2 H),3.98−3.91 (m,2 H),2.26−2.19 (m,1 H),1.45−1.42 (m,1 H),1.42 (s,6 H),1.30 (s,9 H).
5−tert−ブチル−7−フルオロ−3−メトキシイソベンゾフラン−1(3H)−オン 101g
101f(68.8g、205.4mmol)、メタノール(1340mL)及び50%硫酸水溶液(881mL)の混合物を一晩還流撹拌した。反応混合物を水400mLに注ぎ入れ、DCM(3×1000mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン400mLで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、濃縮乾固して、101g(43g)をオフホワイト色固体として得、これを更に精製することなく次の段階で使用した。LCMS(ESI)m/z 225(M+H)+。
6−tert−ブチル−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 101h
氷酢酸(360mL)中の101g(40g、168mmol)の溶液に、N2保護下に0〜10℃でヒドラジン一水和物(240mL)を添加した。生じたスラリーを窒素下に50℃で1時間半撹拌した。反応混合物を、絶えず撹拌しながら水300mLに注ぎ入れた。水相をDCM(2×500mL)で抽出し、合わせた有機相をNa2SO4で乾燥して、ろ過し、濃縮して、残留物を得、これをDMC及びEt2O中での再結晶化によって精製して、101h(17g、2段階で37.6%)をオフホワイト色固体として得た。1HNMR (300 MHz,CDCl3) δ 8.11 (d,J=2.7 Hz,1 H),7.46 (m,2 H),1.39 (s,9 H). LCMS (ESI) m/z 221 (M+H)+.
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−6−クロロベンズアルデヒド 101i
10mL丸底フラスコに、6−tert−ブチル−8−フルオロ−2H−フタラジン−1−オン 101h(640mg、2.9mmol)、2−クロロ−6−フルオロベンズアルデヒド(506mg、3.2mmol)及び炭酸セシウム(488mg、1.5mmol)を添加した。フラスコを排気し、窒素を3回戻し充填して、次にエトキシトリメチルシラン(684mg、5.8mmol)及びDMF(5mL)を反応フラスコに添加した。生じた混合物を60℃に加熱した。4時間撹拌した後、溶液を周囲温度まで放置冷却し、H2O 2mLを滴下して反応物をクエンチングした。所望生成物がDMFと水の混合物から沈殿し始めた。5℃に冷却した後、固体をろ過によって収集し、DMF/水(2/1、2mL、あらかじめ6℃に冷却)及びH2O(2mL)で洗浄した。ろ過ケークを真空オーブン下に65℃で一晩乾燥し、101i 519mg(52%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+:359。
6−tert−ブチル−2−(3−クロロ−2−(ヒドロキシメチル)フェニル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 101j
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソ−1H−フタラジン−2−イル)−6−クロロ−ベンズアルデヒド 101i(519mg、1.4mmol)を、室温で撹拌しながらDCM(2mL)に溶解し、次にiPA 1mLを溶液に添加した。生じた溶液を4℃に冷却し、NaBH4(27mg、0.7mmol)を一度に添加した。30分間撹拌した後、H2O(2mL)を添加して反応物をクエンチングした。水層をCH2Cl2(2×5mL)で抽出し、ブラインで洗浄して、MgSO4で乾燥した。ろ液を濃縮し、残留物を得て、これを0〜20%EtOAc/CH2Cl2で溶出するシリカゲルクロマトグラフィによって精製し、101jを白色固体(385mg、72%)として得た。MS:[M+H]+:361。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(2−(ヒドロキシメチル)−3−(1−メチル−5−(5−(4−メチルピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)フェニル)フタラジン−1(2H)−オン 101
10mLフラスコに、6−tert−ブチル−2−(3−クロロ−2−ヒドロキシメチル−フェニル)−8−フルオロ−2H−フタラジン−1−オン 101j(100mg、0.27mmol)、1−メチル−3−[5−(4−メチル−ピペラジン−1−イル)−ピリジン−2−イルアミノ]−5−(4,4,5,5−テトラメチル−[1,3,2]ジオキサボロラン−2−イル)−1H−ピリジン−2−オン(141mg、0.33mmol)、PCy3(6mg)、Pd(dba)2(6mg)及びK2CO3(112mg、0.8mmol)を順番に添加した。フラスコを排気し、窒素を戻し充填した。この順番を3回反復した。次に、20%1,4−ジオキサン水溶液を反応混合物に添加した。生じた混合物を、穏やかな還流のために90℃に加熱し、窒素雰囲気下で1時間半撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、珪藻土ろ過剤パッド(CELITE(登録商標))でろ過して、濃縮し、残留物を得て、これを分取TLC(CH2Cl2中10%MeOH)によって精製し、101(80mg、46%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+624。1H NMR (400 MHz,DMSO−d6) δ 8.53 (d,J=2.0 Hz,1 H),8.50 (d,J=1.6 Hz,1 H),8.36 (s,1 H),7.87 (d,J=3.2 Hz,2 H),7.73 (d,J=12.8 Hz,1 H),7.51 (t,J=7.6 Hz,1 H),7.41 (d,J=3.2 Hz,1 H),7.39 (d,J=3.6 Hz,1 H),7.35 (dd,J=2.8,9.2 Hz,1 H),7.28 (d,J=2. Hz,1 H),7.20 (d,J=9.2 Hz,1 H),4.58 (t,J=4.8 Hz,1 H),4.36 (s,2 H),3.58 (s,3 H),3.04 (m,4 H),2.44 (m,4H),2.21 (s,3 H),1.38 (s,9 H).
2,6−ジブロモ−4−フルオロベンズアルデヒド 102a
−35℃に冷却した無水トルエン(300mL)中の1,3−ジブロモ−5−フルオロ−2−ヨードベンゼン(50g、132mmol)の溶液を、内部温度を−25℃以下に維持しながら30分間かけてイソプロピルマグネシウムクロリド(84mL、171mmol、ジエチルエーテル中2.0M)に添加した。透明な褐色溶液を得た。撹拌を1時間半続けた。次に無水DMF(34mL、436mmol)を30分間かけて添加した。反応混合物の温度が−19℃に上昇した。反応混合物を1時間かけて10℃(室温)に温め、この温度で1時間半撹拌した。飽和NH4Cl水溶液(100mL)で反応物をクエンチングし、ろ過して、減圧下で蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ(石油エーテル/酢酸エチル:50:1から20:1で溶出する)によって精製し、102a(20g、収率54%)を黄色固体として得た。
2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 102b
ジオキサン(50mL)中の102a(767mg、2.72mmol)、6−tert−ブチル−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 101h(300mg、1.36mmol)の溶液に、KOAc(267mg、2.72mmol)、CuI(259mg、1.36mmol)及び4,7−ジメトキシ−1,10−フェナントロリン(327mg、1.36mmol)を添加した。生じた溶液に窒素を30分間通気した後、混合物を90℃で10時間撹拌した。これを室温まで放置冷却し、H2O(100mL)を添加した。水層を分離し、酢酸エチル(2×200mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をPE/EA(15:1)で溶出するフラッシュカラムで精製し、102b(172mg、30%)を得た。LCMS:[M+H]+421。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 10.20 (s,1 H),8.20 (s,1 H),7.49−7.51 (m,3 H),7.25 (m,1 H),1.36 (s,9 H).
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロ−6−(1−メチル−5−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ベンズアルデヒド 102c
丸底フラスコに、2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 102b(100mg、0.24mmol)、1−メチル−3−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(131mg、0.28mmol)、PdCl2(dppf)(25mg、0.03mmol)、K3PO4・3H2O(149mg、0.56mmol)、THF(10mL)及びH2O(5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を70℃で6時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 石油/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィで精製し、102cを黄色固体(98mg、60%)として得た。LCMS:[M+H]+682。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(1−メチル−5−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 102
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロ−6−(1−メチル−5−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロ−ピリジン−3−イル)ベンズアルデヒド 102c(98mg、0.14mmol)、NaBH4(17mg、0.43)及びCH3OH(10mL)の混合物を25℃で1時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮し、水(10mL)を添加した。生じた混合物をCH2Cl2(10mL×2)で抽出した。合わせたCH2Cl2抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCで精製して、102(45mg、46%)を得た。LCMS:[M+H]+684。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6) δ 8.52−8.56 (m,2 H),8.40 (s,1 H),7.88 (d,J=6.0 Hz,2 H),7.74−7.77 (m,1 H),7.34−7.40 (m,3 H),7.29 (d,J=3.0 Hz,1 H),7.22 (d,J=9.5 Hz,1 H),4.54−4.56 (m,2 H),4.44−4.47 (m,2 H),4.32 (s,2 H),3.58 (s,3 H),3.43 (s,1 H),3.06−3.08 (m,4 H),2.36−2.39 (m,5 H),1.38 (s,9 H).
2−ブロモ−4−クロロニコチンアルデヒド 103a
−70℃に冷却した無水テトラヒドロフラン(40mL)中の2−ブロモ−4−クロロピリジン(1.6g、8.0mmol)の溶液に、リチウムジイソプロピルアミドの溶液(5.0mL、10.0mmol、2.0M)を5分間かけて添加し、−70℃で更に1時間撹拌した。無水DMF(1.3g)を3分間かけて導入し、混合物を更に30分間撹拌した。次にこれを飽和NH4Cl(30mL)でクエンチングし、酢酸エチル(20mL×3)で抽出した。合わせた有機層を無水Mg2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(20:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、103aを黄色固体(900mg、48%)として得た。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 10.21 (s,1H),8.52 (d,J=5.5 Hz,1H) ,7.79 (d,J=5.0 Hz,1H).
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b
ジオキサン(50mL)中の2−ブロモ−4−クロロニコチンアルデヒド 103a(446mg、2.05mmol)、6−tert−ブチル−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 101h(300mg、1.36mmol)の溶液に、KAcO(267mg、2.72mmol)、CuI(259mg、1.36mmol)及び4,7−ジメトキシ−1,10−フェナントロリン(327mg、1.36mmol)を添加した。生じた溶液に窒素を30分間通気した後、混合物を90℃で10時間撹拌した。これを室温まで放置冷却し、H2O(100mL)を添加した。水層を分離し、酢酸エチル(2×200mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を10:1 PE/EAで溶出するフラッシュカラムで精製し、103b(120mg、25%)を得た。LCMS:[M+H]+360。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 10.36 (s,1H),8.69 (d,J=5.5,1H),8.28 (d,J=2.0,1H),7.28−7.56 (m,3H),1.49 (s,9H)
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 103c
103b(100mg、0.28mmol)、1−メチル−3−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(131mg、0.28mmol)、PdCl2(dppf)(25mg、0.03mmol)及びK3PO4・3H2O(149mg、0.56mmol)の混合物をTHF(10mL)/H2O(5mL)に懸濁した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を70℃で6時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 石油/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィで精製し、103cを黄色固体(150mg、60%)として得た。LCMS:[M+H]+665。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(1−メチル−5−(5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)−フタラジン−1(2H)−オン 103
103c(120mg、0.18mmol)、NaBH4(21mg、0.54)及びCH3OH(10mL)の混合物を25℃で1時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮し、水(10mL)を添加した。生じた混合物をCH2Cl2(10mL×2)で抽出した。合わせたCH2Cl2抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCで精製して、103(45mg、38%)を得た。LCMS:[M+H]+667。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 8.66−8.68 (m,2H),8.35 (s,1H),7.96 (d,J=3.0,1H),7.81 (s,1H),7.65 (d,J=2.5,1H),7.55−7.59 (m,3H),6.83 (d,J=8.5,1H),4.71−4.74 (m,4H),4.51−4.52 (m,2H),4.07−4.08 (m,1H),3.73 (s,3H),3.56 (s,1H),3.20−3.22 (m,4H),2.56−2.58 (m,4H),1.59 (s,9H)
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロ−6−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ベンズアルデヒド 104a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 102b(100mg、0.24mmol)、(S)−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 105f(115mg、0.24mmol)、PdCl2(dppf)(22mg、0.03mmol)、K3PO4 (102mg、0.48mmol)、酢酸ナトリウム(39mg、0.48mmol)、THF(15mL)及び水(5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を40:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、104aを黄色固体(82mg、49%)として得た。MS:[M+H]+696.3。
(S)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(5−フルオロ−2−(ヒドロキシメチル)−3−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)フェニル)フタラジン−1(2H)−オン 104
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロ−6−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ベンズアルデヒド 104a(80mg、0.12mmol)、NaBH4(14mg、0.36)及びメタノール(20mL)の混合物を25℃で1時間撹拌した。次に反応混合物を水(10mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(2×30mL)で抽出し、合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、104(46mg、55%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+698.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ8.54 (d,J=2.0 Hz,1H),8.52 (d,J=2.0 Hz,1H),8.42 (s,1H),7.88 (s,1H),7.86 (d,J=3.0 Hz,1H),7.77−7.74 (m,1H),7.40−7.34 (m,3H),7.30 (dd,J=2.5,9.5 Hz,1H),7.23 (d,J=9.0 Hz,1H),4.57−4.54 (m,2H),4.49−4.45 (m,1H),4.43−4.40 (m,1H),4.34−4.29 (m,2H),3.70−3.65 (m,1H),3.58 (s,3H),3.40−3.38 (m,2H),3.12−3.06 (m,1H),2.97−2.91 (m,1H),2.36−2.29 (m,3H),2.19−2.15 (m,1H),1.38 (s,9H),0.93 (d,J=6.5 Hz,3H),
(3S)−tert−ブチル3−メチル−4−(6−ニトロピリジン−3−イル)ピペラジン−1−カルボキシレート 105a
DMSO(350mL)中の5−ブロモ−2−ニトロピリジン(30g、148mmol)の溶液に、K2CO3(14g、104mmol)及び(3S)−tert−ブチル−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート(10.0g、50mmol)を添加した。混合物を65℃で一晩撹拌し、次に室温まで冷却した後、水(700mL)に注ぎ入れた。固体沈殿物を収集し、減圧下で乾燥した。これを、20:1 石油エーテル/酢酸エチル、次にCH2Cl2で溶出するフラッシュカラムで更に精製し、105aを黄色固体(8.05g、50%)として得た。LCMS:[M+H]+323。
(3S)−tert−ブチル4−(6−アミノピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 105b
500mLビンを窒素でパージし、105a(5.8g、18mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、2.0g)及びエタノール(200mL)を充填した。これを排気し、水素ガスを充填して、室温で16時間撹拌した。次に水素を減圧下で除去し、窒素に置き換えた。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、105bを褐色固体(4.9g、96%)として得た。LCMS:[M+H]+293。
(3S)−tert−ブチル−4−(6−(5−ブロモ−1−メチル−2−オキソ−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 105c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(50mL)、105b(4.0g、13.7mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(5.5g、20.8mmol)及び炭酸セシウム(11g、35mmol)を充填した。生じた混合物に窒素を30分間通気した後、キサントホス(272mg、0.47mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(430mg、0.47mmol)を添加し、反応混合物を3時間加熱還流した。この時間後、反応物を室温に冷却し、酢酸エチル(300mL)と水(300mL)に分配して、ろ過した。水層を分離し、酢酸エチル(150mL×2)で抽出した。有機層を合わせ、ブライン(150mL)で洗浄して、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を50:1 CH2Cl2/メタノールで溶出するフラッシュカラムで精製し、105cを黄色固体(5.4g、83%)として得た。LCMS:[M+H]+478。
(3S)−5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(2−メチルピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 105d
105c(3.1g、6.5mmol)と4.0M HCl/ジオキサン(10mL)の混合物を室温で5時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮した。残留物を1.0M NaOH水溶液で塩基性化し、CH2Cl2で2回抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、減圧下で濃縮して、105dを黄色固体(2.3g、95%)として得た。LCMS:[M+H]+380。
(3S)−5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 105e
メタノール(125mL)中の105d(2.35g、6.2mmol)、オキセタン−3−オン(0.49g、6.8mmol)、NaBH3CN(4.75g、22.5mmol)及び塩化亜鉛(3g、22.7mmol)の混合物を50℃で5時間撹拌した。混合物を水に添加し、CH2Cl2で3回抽出した。有機層を減圧下で濃縮した。残留物を25:1 CH2Cl2/メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィによって精製し、105eを黄色固体(2.6g、98%)として得た。LCMS:[M+H]+434。
(3S)−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 105f
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、105e(1.0g、1.0当量、2.3mmol)、Pin2B2(1.46g、2.50当量、5.75mmol)、Pd2(dba)3(105mg、0.05当量、0.125mmol)、キサントホス(93mg、0.1当量、0.23mmol)、KOAc(676mg、3.0当量、6.9mmol)及びジオキサン(50mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を90℃で4時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を3:1 石油エーテル/酢酸エチル(80mL)で洗浄して、105fを黄色固体(1.0g、90%)として得た。MS:[M+H]+482。
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 105g
丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(100mg、0.28mmol)、105f(135mg、0.28mmol)、PdCl2(dppf)(25mg、0.03mmol)、K3PO4・3H2O(149mg、0.56mmol)、THF(10mL)及びH2O(5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を70℃で6時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 石油/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィで精製し、105gを黄色固体(113mg、60%)として得た。LCMS:[M+H]+679。
(S)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(1−メチル−5−(3−メチル−5−(4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 105
105g(100mg、0.15mmol)、NaBH4(17mg、0.45)及びCH3OH(10mL)の混合物を25℃で1時間撹拌した。混合物をCH2Cl2(10mL×2)で抽出した。合わせたCH2Cl2抽出物を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、105(65mg、65%)を得た。LCMS:[M+H]+681。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6) δ 8.62 (d,J=2.0,1H),8.53−8.57 (m,1H),8.42 (s,2H),7.90 (d,J=1.5,1H),7.85 (d,J=2.0,1H),7.76−7.79 (m,1H),7.52 (d,J=5.0,1H),7.46 (d,J=2.0,1H),7.36−7.38 (m,1H),7.24−7.26 (m,1H),4.54−4.57 (m,2H),4.46−4.48 (m,1H),4.40−4.41 (m,3H),3.68−3.70 (m,1H),3.57 (s,3H),3.37−3.40 (m,1H),3.09−3.11 (m,1H),2.93−2.95 (m,1H),2.52−2.54 (m,2H),2.32−2.36 (m,2H),2.18 (s,1H),1.39 (s,9H),0.93 (d,J=6.0,3H)
(R)−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 106a
ジオキサン(50mL)中の(R)−5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン(2.0g、4.60mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’−オクタ−メチル−2,2’−ビ(1,3,2−ジオキサボロラン)(3.50g、13.80mmol)の溶液に、PdCl2(dppf)(377.10mg、0.46mmol)及びKOAc(2.70g、27.80mmol)を添加した。図6参照。混合物をアルゴン下に100℃で12時間撹拌した。混合物をろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物をCH2Cl2/メタノール(15:1)で溶出するカラムクロマトグラフィによって精製し、106a(1.10g、49%)を褐色固体として得た。MS:[M+H]+482.3。
(R)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 106b
アセトニトリル(30mL)中の106a(260.0mg、0.56mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(200.0mg、0.56mmol)、PdCl2(dppf)(50.0mg、0.056mmol)、NaOAc(90.0mg、1.1mmol)、K3PO4(300mg、1.1mmol)の混合物を100℃で3時間加熱した。溶媒を減圧下で蒸発させた。残留物をCH2Cl2/メタノール(10:1)で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、106b(120mg、34%)を褐色固体として得た。LCMS:[M+H]+679.3。
(R)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 106
MeOH(10mL)中の106b(90.0mg、0.13mmol)の溶液をNaBH4(15.0mg、0.39mmol)に添加した。混合物を20℃で2時間撹拌した。次にこれを蒸発させ、残留物を逆相HPLCによって精製して、106(7.3mg、8%)を白色固体として得た。LCMS:(M+H)+681.4。1H NMR (500 MHz,DMSO)δ 8.63 (d,J=2.5,1H),8.57 (d,J=5.0,1H),8.54 (d,J=2.0,1H),8.47 (s,1H),7.91 (s,1H),7.86 (d,J=3.0,1H),7.78 (d,J=12.5,1H),7.53 (d,J=5.0,1H),7.47 (d,J=2.0,1H),7.36−7.39 (m,1H),7.25 (d,J=9.5,1H),4.90 (s,1H),4.54−4.58 (m,2H),4.47 (t,J=6.0,1H),4.39−4.43 (m,3H),3.69 (s,1H),3.61 (s,3H),3.37−3.42 (m,1H),3.09−3.11 (m,1H),2.95 (t,J=9.0,1H),2.54−2.56 (m,1H),2.30−2.37 (m,2H),2.19 (t,J=8.0,1H),1.39 (s,9H),0.94−0.93 (d,J=6.5,3H)
(R)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロ−6−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロ−ピリジン−3−イル)ベンズアルデヒド 107a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、(R)−1−メチル−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(173mg、1.0当量、0.36mmol)、2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 101i(152mg、1.0当量、0.36mmol)、K3PO4(152mg、2.0当量、0.72mmol)、PdCl2(dppf)(26mg、0.1当量、0.036mmol)、NaOAc(59mg、2.0当量、0.72mmol)、CH3CN(20mL)及びH2O(0.8mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を80℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を40:1 DCM/EtOHで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、107aを黄色固体(77mg、31%)として得た。MS:[M+H]+696.3。
(R)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(5−フルオロ−2−(ヒドロキシメチル)−3−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)フェニル)フタラジン−1(2H)−オン 107
磁気撹拌機を備えた50mLの一首丸底フラスコに、107a(77mg、1.0当量、0.11mmol)、NaBH4(21mg、5.0当量、0.55mmol)及びMeOH(10mL)を充填した。混合物を室温で1時間撹拌した。次にこれをろ過し、ろ液を濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、107(38mg、49%)を得た。MS:[M+H]+698.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.59 (d,J=2.0 Hz,1H),8.29 (d,J=2.5 Hz,1H),7.98(d,J=2.5 Hz,1H),7.81 (s,1H),7.56−7.54 (m,2H),7.40 (s,1H),7.31−7.27 (m,2H),7.11−7.10 (m,1H),6.81 (d,J=9.0 Hz,1H),4.71−4.62 (m,4H),4.35 (s,2H),3.73−3.70 (m,4H),3.53−3.46 (m,2H),3.08 (t,J=5.0 Hz,2H),2.56−2.46 (m,3H),2.22−2.18 (m,1H),1.43 (s,9H),0.98 (d,J=6.5 Hz,3H).
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−6−(5−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 108a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 102b(84mg、0.20mmol)、3−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(99mg、0.20mmol)、Pd(dppf)Cl2(15mg、0.02mmol)、K3PO4(127mg、0.6mmol)、酢酸ナトリウム(49mg、0.6mmol)、アセトニトリル(5mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を2時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、108aを白色固体(54mg、38%)として得た。MS:[M+H]+710.3。
6−tert−ブチル−2−(3−(5−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−5−フルオロ−2−(ヒドロキシメチル)フェニル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 108
0℃で、メタノール(5mL)中の2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−6−(5−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 108a(54mg、0.076mmol)の溶液に水素化ホウ素ナトリウム(9.0mg、0.23mmol)を添加した。混合物を60分間撹拌した。次にこれを水(1.0mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、108(12mg、22%)を得た。MS:[M+H]+712.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.63 (d,J=2.5 Hz,1H),8.31 (d,J=2.0 Hz,1H),8.05 (d,J=2.5 Hz,1H),7.87 (s,1H),7.58−7.55 (m,2H),7.44 (d,J=2.0 Hz,1H),7.36 (s,1H),7.30 (d,J=2.0 Hz,1H),7.12 (dd,J=2.5,8.5 Hz,1H),6.82 (d,J=8.5 Hz,1H),4.76−4.73 (m,2H),4.68−4.61 (m,2H),4.38−4.36 (m,2H),3.74−3.72 (m,2H),3.72 (s,3H),3.22−3.20 (m,1H),2.94−2.92 (m,1H),2.74−2.72 (m,2H),2.50−2.48 (m,1H),1.98−1.96 (m,1H),1.45 (s,9H),0.93−0.91 (m,6H).
3−ブロモ−5−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソ−1,2−ジヒドロフタラジン−2−イル)ピリジン−4−カルボアルデヒド 109a
磁気撹拌機を備えた封管に、6−tert−ブチル−8−フルオロ−1,2−ジヒドロフタラジン−1−オン 101h(220mg、1.0mmol)、3,5−ジブロモピリジン−4−カルボアルデヒド(530mg、2.0mmol)、CuI(190mg、1.0mmol)、4,7−ジメトキシ−1,10−フェナントロリン(244mg、1.0mmol)、Cs2CO3--(652mg、2.0mmol)及びジオキサン(8mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を110℃で5時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を酢酸エチル/石油エーテル(1:3、V/V)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、109a(118mg、29.3%)を固体として得た。LCMS:[M+H]+406。
3−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソ−1,2−ジヒドロフタラジン−2−イル)−5−[1−メチル−5−({5−[(2S)−2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル]ピリジン−2−イル}アミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロ−ピリジン−3−イル]ピリジン−4−カルボアルデヒド 109b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、109a(118mg、0.29mmol)、1−メチル−3−({5−[(2S)−2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル]ピリジン−2−イル}アミノ)−5−(テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)−1,2−ジヒドロピリジン−2−オン 105f(140mg、0.29mmol)、Pd(dppf)Cl2(24.8mg、0.03mmol)、KOAc(58.9mg、0.60mmol)、K3PO4・3H2O(159.8mg、0.60mmol)、アセトニトリル(6mL)及び水(3 d)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を110℃で2時間加熱した。次に反応混合物を室温に冷却し、ろ過して、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物をジクロロメタン/メタノール(20:1、V/V)で展開する分取TLCによって精製し、109b(95mg、36%)を赤色固体として得た。MS:[M+H]+679。
(S)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(4−(ヒドロキシメチル)−5−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)フタラジン−1(2H)−オン 109
メタノール(5mL)中の0℃の109b(95mg、0.106mmol)の懸濁液に水素化ホウ素ナトリウム(24mg、0.636mmol)を添加し、混合物を30分間撹拌した。次に反応混合物を水(1.0mL)でクエンチングし、濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、109(13.5mg、18.7%)を得た。LCMS:[M+H]+681。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.76 (s,1H ),8.65 (d,J=2.0,1H),8.61 (s,1H),8.32 (d,J= 2.5,1H),7.96 (d,J=3.0,1H),7.82 (s,1H),7.56−7.58 (m,2H),7.40 (d,J=2.0,1H),7.28−7.31 (m,1H),6.81 (d,J=9.0,1H),4.61−4.70 (m,4H),4.43 (s,2H),3.95 (s,1H),3.72 (s,3H),3.45−3.53 (m,2H),3.07 (t,J=5.25,2H),2.43−2.56 (m,3H),2.18−2.22 (m,1H),1.43 (s,9H),0.99 (d,J=6.5,3H)
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 110a
100mLの一首丸底フラスコに、CH3CN(80mL)中の2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(216mg、0.6mmol)、3−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5−トリメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(360mg、0.72mmol)、Pd(dppf)Cl2(30mg、0.03mmol)、K3PO4(270mg、1.2mmol)及びNaOAc・3H2O(180mg、1.2mmol)を充填した。この系を排気し、N2を再充填した。反応混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を25:1のCH2Cl2/MeOHで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、110a(160mg、42%)を黄褐色固体として得た。MS:[M+H]+693.3。
6−tert−ブチル−2−(4−(5−(5−((2S,5R)−2,5−ジメチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−3−(ヒドロキシメチル)ピリジン−2−イル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 110
MeOH(30mL)中の110a(100mg、0.15mmol)とNaBH4(20mg、0.45mmol)の混合物を30℃で2時間撹拌した。混合物を水でクエンチングし、EtOAc(10mL×3)で抽出した。合わせたEtOAc抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、110(80mg、80%)を得た。MS:[M+H]+695.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 8.72 (d,J=2,1H),8.67 (d,J=5,1H),8.35 (d,J=2.5,1H),8.05 (d,J=3,1H),7.88 (s,1H),7.68(d,J=2.5,1H),7.58−7.55 (m,3H),7.38−7.36 (m,1H),6.82 (d,J=8.5,1H),4.78−4.71 (m,2H),4.67−4.61 (m,2H),4.50 (s,2H) ,4.07 (t,J=6,1H),3.78−3.74 (m,4H),3.22−3.20 (m,1H) ,2.92 (d,J=3,1H ),2.77−2.71 (m,2H),2.51−2.48 (m,1H),1.20−1.95 (m,1H),1.45 (s,9H),0.93−0.90 (m,6H)
(S)−tert−ブチル3−エチル−4−(6−ニトロピリジン−3−イル)ピペラジン−1−カルボキシレート 111a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(50mL)、5−ブロモ−2−ニトロピリジン(2.02g、10mmol)、(S)−tert−ブチル3−エチルピペラジン−1−カルボキシレート(2.14g、10.0mmol)、Pd2(dba)3(458mg、0.50mmol)、キサントホス(576mg、1.0mmol)及び炭酸セシウム(6.52g、20mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で一晩加熱した。この時間後、反応混合物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を3:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、111a(700mg、22%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+336。
(S)−tert−ブチル4−(6−アミノピリジン−3−イル)−3−エチルピペラジン−1−カルボキシレート 111b
100mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、111a(0.7g、2.08mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、208mg)及びメタノール(40mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、室温で6時間撹拌した。次に水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、111b(568mg、89%)を得た。MS:[M+H]+306。
(S)−tert−ブチル4−(6−(5−ブロモ−1−メチル−2−オキソ−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ピリジン−3−イル)−3−エチルピペラジン−1−カルボキシレート 111c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(50mL)、111b(568mg、1.86mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(498mg、1.86mmol)、Pd2(dba)3(85mg、0.093mmol)、キサントホス(107mg、0.186mmol)及び炭酸セシウム(1.198g、3.72mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で6時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、111c(502mg、55%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+492。
(S)−5−ブロモ−3−(5−(2−エチルピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 111d
111c(502mg、1.02mmol)、ジクロロメタン(2mL)及び4.0M HCl/ジオキサン(4mL)の混合物を室温で5時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮し、粗111dを黄色固体(263mg、66%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS:[M+H]+392。
(S)−5−ブロモ−3−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 111e
メタノール(10mL)中の111d(263mg、0.67mmol)、オキセタン−3−オン(96mg、1.34mmol)、NaBH3CN(104mg、1.68mmol)及び塩化亜鉛(227mg、1.68mmol)の混合物を50℃で5時間撹拌した。次に水(10mL)を反応物に添加した。生じた混合物を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、111e(203mg、68%)を得た。MS:[M+H]+448。
(S)−3−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 111f
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、111e(3219mg、7.20mmol)、Pin2B2(9072mg、36.0mmol)、Pd2(dba)3(329mg、0.36mmol)、キサントホス(302mg、0.72mmol)、酢酸カリウム(2117mg、21.6mmol)及びジオキサン(50mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を60℃で16時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を8:1 石油エーテル/酢酸エチル(80mL)で洗浄して、111fを黄色固体(3.0g、84%)として得た。
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−6−(5−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 111g
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、2−ブロモ−6−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−フルオロベンズアルデヒド 102h(168mg、0.40mmol)、111f(198mg、0.40mmol)、Pd(dppf)Cl2(15mg、0.02mmol)、K3PO4(170mg、0.8mmol)、酢酸ナトリウム(66mg、0.8mmol)、アセトニトリル(5mL)及び水(0.8mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を2時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、111gを白色固体(100mg、35%)として得た。MS:[M+H]+710.3。
(S)−6−tert−ブチル−2−(3−(5−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イル−アミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−5−フルオロ−2−(ヒドロキシメチル)フェニル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 111
メタノール(5mL)中の0℃の111g(100mg、0.14mmol)の溶液に水素化ホウ素ナトリウム(16.0mg、0.42mmol)を添加した。混合物を60分間撹拌した。次にこれを水(1.0mL)でクエンチングし、濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、111(32mg、32%)を得た。MS:[M+H]+712.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.57 (d,J=2.0 Hz,1H),8.30 (d,J=2.0 Hz,1H),7.94 (s,1H),7.80 (s,1H),7.58 (s,2H),7.41 (d,J=2.0 Hz,1H),7.31−7.28 (m,2H),7.12 (dd,J=2.5,8.5 Hz,1H),6.82 (d,J=9.0 Hz,1H),4.73−4.70 (m,4H),4.37 (s,2H),3.74−3.72 (m,1H),3.71 (s,3H),3.56−3.54 (m,1H),3.34−3.32 (m,1H),3.15−3.13 (m,2H),2.58−2.36 (m,4H),1.45 (s,9H),1.44−1.43 (m,2H),0.83 (t,J=7.5 Hz,3H).
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 112a
50mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(150mg、0.43mmol)、(S)−3−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン(206mg、0.43mmol)、PdCl2(dppf)(33mg、0.04mmol)、K3PO4(202mg、0.86mmol)、NaOAc(71mg、0.86mmol)及びCH3CN(10mL)、H2O(2mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 石油/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、112aを黄色固体(146mg、49%)として得た。LCMS:[M+H]+693。
(S)−6−tert−ブチル−2−(4−(5−(5−(2−エチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−3−(ヒドロキシメチル)ピリジン−2−イル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 112
112a(140mg、0.20mmol)、NaBH4(21mg、0.60)及びCH3OH(8mL)の混合物を25℃で1時間撹拌した。次に反応混合物を水(10mL)でクエンチングし、混合物をCH2Cl2(15mL×2)で抽出した。合わせたCH2Cl2抽出物を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCで精製し、112(70mg、50%)を得た。LCMS:[M+H]+695。1H NMR (500 MHz,DMSO)δ 8.50−8.60 (m,2H),8.44 (s,1H),7.90 (d,J=1.5,1H),7.82 (d,J=3.0,1H),7.75−7.78 (m,1H),7.51−7.53 (m,1H),7.45 (d,J=2.5,1H),7.33−7.35 (m,1H),7.22−7.24 (m,1H),4.47−4.59 (m,2H),4.36−4.45 (m,4H),3.60 (s,3H),3.46−3.50 (m,1H),3.38−3.41 (m,3H),3.14−3.17 (m,1H),2.96−3.00 (m,1H),2.60−2.64 (m,1H),2.50−2.55 (m,1H),2.14−2.17 (m,1H),2.06−2.10 (m,1H),1.66−1.69 (m,1H),1.39 (s,9H),1.21−1.28 (m,1H),0.77−0.80 (m,3H)
5−ブロモ−1−メチル−3−(ピリミジン−4−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 113a
磁気撹拌機及び窒素注入口を備えた100mLの一首丸底フラスコに、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(2.00g、21.0mmol)、2−アミノピリミジン(5.61g、21.0mmol)、炭酸セシウム(13.7g、42.1mmol)、DMF(5mL)及び1,4−ジオキサン(70mL)を充填した。生じた懸濁液に窒素を30分間通気した後、キサントホス(1.10g、1.89mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(963mg、1.05mmol)を添加した。還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を100℃で4時間加熱した。この時間後、混合物を室温に冷却し、90:10 塩化メチレン/メタノール(150mL)及び水(100mL)で希釈して、層を分離した。水層を90:10 塩化メチレン/メタノール(50mL)で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄して、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ(シリカ、90:10 塩化メチレン/メタノール)によって精製して、113aを58%の収率で(3.42g)非晶質明緑色固体として得た:融点217〜219℃; 1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ9.29 (s,1H),8.77 (s,1H),8.72 (d,J=2.5 Hz,1H),8.36 (d,J=6.0 Hz,1H),7.69 (d,J=2.5 Hz,1H),7.37 (dd,J=5.5,1.0 Hz,1H),3.53 (s,3H);MS (ESI+) m/z 281.0 (M+H).
1−メチル−3−(ピリミジン−4−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 113b
磁気撹拌機及び冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、113a(4.0g、14mmol)、キサントホス(400mg、0.7mmol)、Pd2(dba)3(635mg、0.7mmol)、酢酸カリウム(7.3mg、28mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’−オクタメチル−2,2’−ビ(1,3,2−ジオキサボロラン)(10.6g、42mmol)及び1,4−ジオキサン(100mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、反応混合物を60℃で8時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を5:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、113bを淡黄色固体(3.8mg、82%)として得た。MS:[M+H]+329.5。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−6−オキソ−5−(ピリミジン−4−イルアミノ)−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 113c
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(110mg、0.31mmol)、113b(100mg、0.31mmol)、PdCl2(dppf)(25mg、0.030mmol)、K3PO4(241mg、0.93mmol)、NaAcO(76mg、0.93mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:20 メタノール/ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製し、113cを赤色固体(80mg、51%)として得た。MS−ESI:[M+H]+526.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−6−オキソ−5−(ピリミジン−4−イルアミノ)−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 113
113c(80mg、0.14mmol)、NaBH4(27mg、0.70mmol)及びメタノール(10mL)の混合物を室温で半時間撹拌した。混合物を水(2mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCで精製し、113(57mg、71%)を得た。MS−ESI:[M+H]+528.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.26 (s,1H),8.76 (d,J=2.5 Hz,1H),8.67 (s,1H),8.59 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.31 (d,J=6.0 Hz,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.79−7.76 (m,1H),7.69 (d,J=2.0 Hz 1H),7.54 (d,J=5.0,Hz 1H),7.34−7.32 (m,1H),4.94 (t,J=5.0 Hz,1H),4.42−4.40 (m,2H),3.62 (s,3H),1.39 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(2−メチルピリミジン−4−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 114a
実施例113aの手順に従い、2−メチルピリミジン−4−アミン(2.0g、18.3mmol)及び3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(9.6g、36mmol)から出発して、114aを黄色固体(2.3g、43.4%)として得た。MS:[M+H]+295。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.20 (s,1H),8.78 (s,1H),8.26 (d,J=4.5 Hz,1H),7.68 (s,1H),7.18 (d,J=4.5 Hz,1H),3.59 (s,3H),2.52 (s,3H).
1−メチル−3−(2−メチルピリミジン−4−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 114b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、ビス(ピナコラト)ジボロン(689mg、2.61mmol)、1,4−ジオキサン(30mL)、114a(307mg、1.04mmol)、Pd2(dba)3(47mg、0.050mmol)、キサントホス(48mg、0.10mmol)及び酢酸カリウム(305mg、3.12mmol)を充填した。混合物を65℃で6時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させて、114b(300mg、84%)を褐色固体として得た。MS:[M+H]+342.2。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(2−メチルピリミジン−4−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 114c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、114b(236mg、0.69mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(250mg、0.69mmol)、PdCl2(dppf)(29mg、0.035mmol)、K3PO4(296mg、1.39mmol)、酢酸ナトリウム(114mg、1.39mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(1mL)を充填した。この系を排気し、N2を再充填した。反応混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、114c(134mg、36%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+540.2。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(2−メチルピリミジン−4−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 114
0℃で、メタノール(20mL)中の2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(2−メチルピリミジン−4−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 114c(130mg、0.24mmol)の懸濁液に水素化ホウ素ナトリウム(27mg、0.72mmol)を添加した。反応混合物を20分間撹拌し、その後水(10mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、114(20mg、15%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+542.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)8.97 (d,J=2.5 Hz,1H),8.71 (d,J=5.0 Hz,1H,8.36 (d,J=2.0 Hz,1H),8.28 (d,J =5.5 Hz,1H),8.09−8.06 (m,1H),7.86 (d,J=2.5 Hz,1H),7.60−7.56 (m,3H),6.61 (d,J =6.0 Hz,1H),4.54−4.43 (m,2H),4.16−4.13 (m,1H),3.75 (s,3H),2.62 (s,3H),1.46 (s,9H).
5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロチアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−アミン 115a
2−プロパノール(80mL)中の1−メチル−4−ピペリドン(11.3g、100mmol)の溶液を50℃に加熱した。この溶液に、2−プロパノール(25mL)中のシアナミド(4.2g、100mmol)の溶液及び硫黄粉末(3.2g、100mmol)を連続的に添加した。触媒量のピロリジン(1.3mL)を添加した後、生じた混合物を50℃で2時間撹拌した。反応混合物を室温まで放置冷却し、一晩撹拌した。次にこれを氷水浴中で10℃又はそれ以下に冷却し、同じ温度で1時間撹拌した。沈殿した結晶をろ過によって収集し、2−プロパノール(20mL)で洗浄した。湿結晶を減圧下で乾燥し、115a(10g、59%)を得た。MS:[M+H]+170。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 6.70 (s,2H),3.31 (s,2H),2.61 (t,J=5.5 Hz,2H),2.45 (m,2H),2.33 (s,3H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロチアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 115b
化合物113aについて述べた手順に従い、115a(4.0g、23.5mmol)及び3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(3.0g、17.8mmol)から出発して、115bを黄色固体(2.8g、44%)として得た。MS:[M+H]+357。
1−メチル−3−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロチアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 115c
化合物115b(997mg、2.8mmol)をジオキサン(50mL)に溶解し、次いでビス(ピナコラト)ジボロン(3.0g、12.0mmol)、Pd2(dba)3(128mg、0.14mmol)、キサントホス(134mg、0.28mmol)及び酢酸カリウム(823mg、8.4mmol)を添加した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を65℃で2時間加熱した。混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテル(2×10mL)で洗浄して、115cを黄色固体(968mg、86%)として得、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+403.2。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロチアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 115d
還流冷却器を備えた丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(144mg、0.40mmol)、115c(240mg、0.60mmol)、PdCl2(dppf)(20mg、0.020mmol)、K3PO4(180mg、0.80mmol)、酢酸ナトリウム三水和物(120mg、0.80mmol)及びアセトニトリル/水(15mL/1mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を25:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製し、115dを黄色固体(100mg、42%)として得た。MS−ESI:[M+H]+600.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−チアゾロ[5,4−c]ピリジン−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 115
メタノール(6mL)中の115d(100mg、0.15mmol)の混合物にNaBH4(18mg、0.45mmol)を添加した。混合物を30℃で1時間撹拌し、その後水(10mL)でクエンチングした。これをジクロロメタン(3×30mL)で抽出し、合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、115(35mg、36%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+602.2。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.68 (d,J=5.0 Hz,1H),8.42 (d,J=2.5 Hz,1H),8.35 (d,J=2.5 Hz,1H),8.30 (s,1H),7.77 (d,J=2.0 Hz,1H),7.58−7.53 (m,3H),4.49−4.45 (m,2H),4.10 (bs,1H),3.73 (s,3H),3.58 (s,2H),2.83−2.79 (m,4H),2.52 (s,3H),1.45 (s,9H).
6−tert−ブチル−2−(4−クロロ−3−(ヒドロキシメチル)ピリジン−2−イル)−8−フルオロフタラジン−1(2H)−オン 116a
メタノール(30mL)中の2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(2.0g、5.5mmol)の溶液に、NaBH4(700mg、16.5mmol)を室温で添加した。反応混合物を1時間撹拌し、水(30mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタン(3×30mL)で抽出した。合わせた有機相を無水Na2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で蒸発させ、116aを白色固体(1.8g、90%)として得た。MS:[M+H]+362.3。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロピリジン−3−イル)メチルアセテート 116b
磁気撹拌機を備えた50mLの一首丸底フラスコに、116a(1.6g、4.4mmol)、無水酢酸(10mL)及びトリエチルアミン(1mL)を充填した。反応混合物を室温で1時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、116bを褐色固体(1.4g、82%)として得た。MS:[M+H]+404.3。
3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、116b(1.0g、2.5mmol)、Pin2B2(3.2g、12.5mmol)、Pd(dppf)Cl2(75mg、0.125mmol)、キサントホス(75mg、0.25mmol)、酢酸カリウム(750mg、7.5mmol)及びジオキサン(60mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を65℃で15時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を3:1 石油エーテル/酢酸エチル(10mL)で洗浄し、116cを黄色固体(1.0g、LCMS純度:75%)として得た。MS:[M+H]+414.2。
6−クロロ−2−メチル−4−({5−[(モルホリン−4−イル)カルボニル]ピリジン−2−イル}アミノ)−2,3−ジヒドロピリダジン−3−オン 116d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(40mL)、(6−アミノピリジン−3−イル)(モルホリノ)メタノン(2.07g、10.0mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(3.35g、15.0mmol)、Pd2(dba)3(915mg、1.0mmol)、キサントホス(578mg、1.0mmol)及び炭酸セシウム(6.52g、20mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で8時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×20mL)で洗浄した。合わせたろ液を無水Na2SO-4で乾燥し、減圧下で濃縮して、116d(2.45g、51%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+350.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(モルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 116e
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、116d(175mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(300mg、0.75mmol)、Pd(dppf)Cl2(25mg、0.025mmol)、K3PO4(220mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム三水和物(150mg、1.0mmol)及びアセトニトリル/水(20/1mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を25:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、116eを黄色固体(150mg、45%)として得た。MS−ESI:[M+H]+683.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−(モルホリン−4−カルボニル)−2−ピリジル]アミノ]−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 116
THF/i−プロパノール(5/3mL)及び水(2mL)中の116e(150mg、0.20mmol)及び水酸化リチウム(85mg、2.0mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(3×20mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、116(80mg、80%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+641.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 8.78 (s,1H),8.75 (d,J=5.0 Hz,1H),8.47 (s,1H),8.45 (d,J=2.0 Hz,1H),8.34 (d,J=3.0 Hz,1H),7.79 (dd,J=2.0,8.0 Hz,1H),7.64 (d,J=4.5 Hz,1H),7.57 (s,1H),7.52 (dd,J=1.5,12.5 Hz,1H),7.02 (d,J=8.5 Hz,1H),4.57−4.55 (m,2H),3.94 (s,3H),3.81−3.75 (m,6H),1.64−1.62 (m,2H),1.44 (s,9H).
(S)−tert−ブチル4−(6−(6−クロロ−2−メチル−3−オキソ−2,3−ジヒドロピリダジン−4−イルアミノ)ピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 117a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、(S)−tert−ブチル4−(6−アミノピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 105b(2.5g、8.5mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(2.2g、10.0mmol)、キサントホス(240mg、0.40mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(360mg、0.40mmol)、Cs2CO3(5.5g、17mmol)及び1,4−ジオキサン(100mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間半加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(40:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、117aを淡黄色固体(3.2g、86%)として得た。MS−ESI:[M+H]+435.1。
(S)−6−クロロ−2−メチル−4−(5−(2−メチルピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 117b
117a(3.0g、6.9mmol)と4.0M HCl/エタノール(20mL)の混合物を室温で2時間撹拌した。次に混合物を減圧下で濃縮し、粗117bを黄色固体(2.5g、98%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+335.1。
(S)−6−クロロ−2−メチル−4−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 117c
メタノール(20mL)中の117b(2.3g、6.8mmol)、オキセタン−3−オン(1.4g、20.0mmol)、NaBH3CN(620mg、10mmol)及び塩化亜鉛(1.36g、10mmol)の混合物を50℃で3時間撹拌した。混合物を水(40mL)に添加し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機層を乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、117c(2.0g、75%)を得た。MS−ESI:[M+H]+391.2。
(S)−(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 117d
還流冷却器を備えた丸底フラスコに、117c(200mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(300mg、0.75mmol)、Pd(dppf)Cl2(25mg、0.025mmol)、K3PO4(220mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム三水和物(150mg、1.0mmol)及びアセトニトリル/水(20/1mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させ、残留物を25:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製して、117dを黄色固体(110mg、42%)として得た。MS−ESI:[M+H]+724.4。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−[(2S)−2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル]−2−ピリジル]アミノ]−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 117
THF/i−プロパノール(5/3mL)及び水(2mL)中の117d(110mg、0.15mmol)及び水酸化リチウム(65mg、1.5mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(2×20mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、117(100mg、95%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+682.4。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 8.73 (d,J=5.0 Hz,1H),8.60 (s,1H),8.33 (d,J=2.5 Hz,1H),8.24 (s,1H),8.07 (s,1H),7.65 (d,J=5.0 Hz,1H),7.56−7.51 (m,2H),7.34 (s,1H),6.96 (d,J=9.0 Hz,1H),4.73−4.55 (m,5H),3.92 (m,4H),3.73−3.74 (m,1H),3.55−3.53 (m,1H),3.16−3.15 (m,2H),2.64−2.39 (m,4H),1.44 (s,9H),1.09−1.07 (m,3H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 118a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(15mL)、5−メチル−1H−ピラゾール−3−アミン(1g、10mmol)(1)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(4g、15mmol)(2)及び炭酸セシウム(6.4g、20mmol)を充填した。キサントホス(400mg、0.8mmol)及びPd2(dba)3(700mg、0.8mmol)を添加し、反応混合物を100℃で5時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタン:メタノール(20:1)で溶出するフラッシュカラムで精製して、118a(1.0g、35%)を得た。MS:[M+H]+283。
5−ブロモ−3−(1−エチル−5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 118b
100mLの丸底フラスコに、118a(800mg、2.83mmol)、ブロモエタン(216mg、1.98mmol)、K2CO3(780mg、5.66mmol)及びDMF(20mL)を充填した。混合物を85℃で一晩加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:20 メタノール/ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、118bを赤色固体(298mg、37%)として得た。MS−ESI:[M+H]+311.0。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6) δ 8.28 (s,1H),7.99 (d,J=2.5 Hz,1H),7.35 (d,J=2.5 Hz,1H),5.85 (s,1H),3.98−3.94 (m,2H),3.48 (s,3H),2.19 (s,3H),1.27 (t,J=7.0 Hz,3H).
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(1−エチル−5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 118c
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、118b(103mg、0.33mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(136mg、0.33mmol)、PdCl2(dppf)(27mg、0.033mmol)、K3PO4(171mg、0.66mmol)、酢酸ナトリウム(54mg、0.66mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下に置いた。残留物を1:20 メタノール/ジクロロメタンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、118cを黄色固体(80mg、41%)として得た。MS−ESI:[M+H]+600.2。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(1−エチル−5−メチル−ピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 118
118c(80mg、0.13mmol)、水酸化リチウム(13mg、0.53mmol)、THF(6mL)、i−プロパノール(4mL)及び水(2mL)の混合物を室温で半時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、水(5mL)で希釈した。次にこれをジクロロメタン(2×10mL)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCで精製して、118(20mg、26%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+558.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6) δ 8.56 (d,J=5.0 Hz,1H),8.53 (d,J=2.5 Hz,1H),8.10 (s,1H),8.05 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=2.0 Hz,1H),7.79−7.76 (m,1H),7.50 (d,J=5.0 Hz,1H),7.40 (d,J=2.5 Hz,1H),5.88 (s,1H),4.92 (t,J=5.0 Hz 1H),4.46−4.45 (m,2H),3.91 (q,J=7.5 Hz,2H),3.59 (s,3H),2.19 (s,3H),1.40 (s,9H),1.27 (t,J=7.0 Hz,3H).
5−ブロモ−3−(1,5−ジメチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 119a
無水DMF(10mL)中の5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 118a(2.8g、9.9mmol)の溶液を、窒素下で撹拌しながら鉱油中のNaH(0.51g、13mmol)の60%分散で処理した。生じた発泡が停止した後、反応物を更に30分間撹拌した。この時点で反応物を、窒素下で2時間撹拌を続けながらヨードメタン(0.98g、7.0mmol)で処理した。水(50mL)を緩やかに添加し、混合物をろ過した。ろ液を酢酸エチル(3×30mL)で抽出した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を3:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、119a(0.70g、24%)を得た。MS:[M+H]+297。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(1,5−ジメチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 119b
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、119a(180mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(207mg、0.50mmol)、Pd(dppf)Cl2(41mg、0.050mmol)、K3PO4(212mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム(82mg、1.0mmol)、水(0.5mL)及びアセトニトリル(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を2時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、119bを白色固体(175mg、60%)として得た。MS−ESI:[M+H]+586.4。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(1,5−ジメチルピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 119
i−プロパノール/THF(1:1、4mL)及び水(1mL)中の119b(150mg、0.26mmol)及び水酸化リチウム(61.4mg、2.6mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(2×10mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、119(75.0mg、54%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+544.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.0 Hz,1H),7.97 (d,J=2.0 Hz,1H),7.59−7.53 (m,4H),7.37 (s,1H),5.74 (s,1H),4.51 (s,2H),4.07 (s,1H),3.72 (s,3H),3.70 (s,3H),2.25 (s,3H),1.46 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチルチアゾール−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 120a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(50mL)、5−メチルチアゾール−2−アミン(2.28g、20.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(5.34g、20.0mmol)、炭酸セシウム(13.0g、40.0mmol)、キサントホス(1.16g、2.0mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(916mg、1.0mmol)を充填した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、5時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(3×50mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で濃縮し、残留物をアセトニトリル(30mL)で洗浄して、120a(5g、粗生成物、83%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+300.1。
1−メチル−3−(5−メチルチアゾール−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 120b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの丸底フラスコに、120a(5.0g、16.6mmol)、Pin2B2(21.1g、83.0mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(760mg、0.83mmol)、キサントホス(810mg、1.7mmol)、酢酸カリウム(4.9g、50mmol)及び1,4−ジオキサン(80mL)を充填した。反応混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、65℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を石油エーテルで洗浄して、120b(20.0g、粗生成物)を褐色固体として得、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+348.2。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルチアゾール−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 120c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、120b(174mg、0.50mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(180mg、0.50mmol)、K3PO4(212mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム(82mg、1.0mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(18mg、0.025mmol)、アセトニトリル(8mL)及び水(0.5mL)を充填した。反応混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(50mL)及び水(30mL)で希釈した。水層をジクロロメタン(2×30mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、120c(150mg、55%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+545.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルチアゾール−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 120
メタノール/ジクロロメタン(3/3mL)中の120c(98mg、0.18mmol)の溶液にNaBH4(21mg、0.55mmol)を室温で添加した。反応物を1時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。混合物を水(5mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、120(30mg、31%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+546.7。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.92 (s,1H),8.58 (d,J=5.5 Hz,1H),8.56 (d,J=2.5 Hz,1H),8.54 (d,J=2.0 Hz,1H),7.91 (d,J=2.0 Hz,1H),7.78 (d,J=13.0 Hz,1H),7.56 (d,J=2.0 Hz,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),6.96 (d,J=1.0 Hz,1H),4.91 (bs,1H),4.42−4.41 (m,2H),3.60 (s,3H),2.28 (d,J=1.0 Hz,3H),1.40 (s,9H).
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 121a
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 118a(142mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(310mg、0.75mmol)、Pd(dppf)Cl2(18mg、0.025mmol)、K3PO4(212mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム(82mg、1.0mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を25:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、121aを褐色固体(100mg、35%)として得た。MS−ESI:[M+H]+572.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 121
THF/i−プロパノール(5:3、8mL)及び水(2mL)中の121a(86mg、0.15mmol)及び水酸化リチウム(36mg、1.5mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(2×10mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、121(24mg、30%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+530.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3) δ 8.65 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.0 Hz,1H),8.04 (d,J=2.5 Hz,1H),7.58−7.53 (m,4H),7.44 (s,1H),5.78 (s,1H),4.51−4.49 (m,2H),3.73 (s,3H),2.03 (s,3H),1.45 (s,9H).
5−ブロモ−3−(5−エチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 122a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(80mL)、5−エチル−1H−ピラゾール−3−アミン(3.33g、30.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(9.6g、36mmol)及び炭酸セシウム(19.5g、60mmol)を充填した。この懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(1.73mg、3.0mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(1.36mg、1.5mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、2時間加熱還流した。その後直ちにこれをろ過した。固体をジオキサン(3×30mL)で洗浄し、合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(2:1から1:2)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、122a(3.8g、43%)を赤色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+297.0。
5−ブロモ−3−(5−エチル−1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 122b
DMF(10mL)中の122a(598mg、2.0mmol)の混合物にNaH(64mg、1.6mmol)を0℃で添加し、混合物を半時間撹拌した。この混合物にDMF中のヨードメタン(227mg、1.6mmol)を0℃で滴下した。混合物を半時間撹拌し、水(20mL)でクエンチングした。次にこれをジクロロメタン(3×30mL)で抽出した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテル/酢酸エチル(5:1から2:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製して、122b(360mg、58%)を明黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+311.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−エチル−1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 122c
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、122b(310mg、1.0mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(1.24g、3.0mmol)、K3PO4(424mg、2.0mmol)、酢酸ナトリウム(164mg、2.0mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(73mg、0.10mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.5mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で2時間半加熱した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(50mL)及び水(50mL)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物を60:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製し、122c(150mg、25%)を黄色油として得た。MS−ESI:[M+H]+600.0。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(5−エチル−1−メチル−ピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 122
THF/i−プロパノール/水(2.5/1/0.5mL)中の122c(150mg、0.25mmol)の溶液に35℃で水酸化リチウム(70mg、2.5mmol)を添加した。反応物を3時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。混合物を水(15mL)に注ぎ入れ、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留固体を逆相分取HPLCによって精製し、122(49mg、35%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+557.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.59 (d,J=5.0 Hz,1H),8.51 (d,J=2.5 Hz,1H),7.92 (d,J=2.0 Hz,1H),7.88 (d,J=1.5 Hz,1H),7.73 (m,1H),7.64 (d,J=5.0 Hz,1H),7.41 (d,J=1.5 Hz,1H),5.92 (s,1H),4.59 (s,2H),3.72 (s,3H),3.68 (s,3H),2.64 (m,2H),1.47 (s,9H),1.27 (t,J=2.5,3H)
1−エチル−4−ニトロ−1H−ピラゾール 123a
無水DMF(100mL)中の4−ニトロ−1H−ピラゾール(5.0g、44.2mmol)の溶液に、窒素下に−25℃で撹拌しながらNaH(油中60%)(1.94g、48.6mmol)を添加した。混合物を30分間撹拌した後、ブロモエタン(5.30g、48.6mmol)を添加した。混合物を窒素下に−25℃で6時間撹拌し続けた。溶液を酢酸エチル(100mL)で希釈し、水(2×50mL)及びブライン溶液(50mL)で洗浄して、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、粗123a(5.0g、80%)を得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+142.0。
1−エチル−1H−ピラゾール−4−アミン 123b
100mLの一首丸底フラスコを水素でパージし、123a(4.5g、31.9mmol)、10%パラジウム炭素(10%湿潤品、2.0g)及びメタノール(50mL)を充填した。混合物を室温で6時間撹拌した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、123b(3.3g、93%)を得た。MS−ESI:[M+H]+112.0。
5−ブロモ−3−(1−エチル−1H−ピラゾール−4−イルアミノ)−1−メチルピラジン−2(1H)−オン 123c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、123b(500mg、4.5mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピラジン−2(1H)−オン(2.40g、9.0mmol)、DIP酢酸エチル(3mL)及びイソプロパノール(50mL)を充填した。混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、123c(802mg、60%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+298.0。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(6−(1−エチル−1H−ピラゾール−4−イルアミノ)−4−メチル−5−オキソ−4,5−ジヒドロピラジン−2−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 123d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、123c(151mg、0.51mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(206mg、0.50mmol)、PdCl2(dppf)(22mg、0.030mmol)、K3PO4(216mg、1.02mmol)、酢酸ナトリウム(84mg、1.02mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 石油/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、123dを黄色固体(158mg、53%)として得た。MS−ESI:[M+H]+587.2。
6−tert−ブチル−2−[4−[6−[(1−エチルピラゾール−4−イル)アミノ]−4−メチル−5−オキソ−ピラジン−2−イル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 123
i−プロパノール/THF(1:1、10mL)及び水(3mL)中の123d(152mg、0.26mmol)及び水酸化リチウム(61mg、2.56mmol)の混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を酢酸エチル(2×10mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、123(55mg、39%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+545.2。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.72 (s,1H),8.58 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.18 (s,1H),7.90 (d,J=2.0 Hz,1H),7.80−7.75 (m,1H),7.74 (s,1H),7.71 (d,J=5.0 Hz,1H),7.51 (s,1H),4.90 (t,J=5.0 Hz,1H),4.61−4.53 (m,2H),4.09 (q,J=7.5 Hz,2H),3.54 (s,3H),1.41 (s,9H),1.35 (t,J=6.0 Hz,3H).
(3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−イル)メタノール 124a
磁気撹拌機、添加漏斗及び窒素注入口を備えた3Lの三つ口丸底フラスコを窒素でパージし、3−ニトロピラゾール−5−カルボン酸(28.0g、178mmol)及びTHF(420mL)を充填して、氷/アセトン浴を用いて−5℃に冷却した。ボラン−THF複合体溶液(1.0M、535mL、535mmol)を、内部反応温度を5℃以下に維持する速度で添加した。添加が完了した後、冷却浴を取り除き、反応物を室温で18時間撹拌した。この時点後、氷/アセトン浴を用いて反応物を−5℃に冷却し、ボラン複合体をピラゾールで分解するために水(70mL)及び4N塩酸(70mL)を添加して、反応物を1時間還流撹拌した。反応物を室温に冷却し、減圧下で約30mLの容量に濃縮した。酢酸エチル(175mL)を添加し、混合物を15分間撹拌した。水層を分離し、酢酸エチル(4×200mL)で抽出した。合わせた有機層を飽和重炭酸ナトリウム水溶液(2×50mL)、ブライン(50mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して、乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、124aを94%の収率で(24.0g)明黄色固体として得た: 1H NMR (300 MHz,DMSO−d6) δ 13.90 (br s,1H),6.87 (s,1H),5.58 (t,1H,J=5.4 Hz),4.53(d,2H,J=5.1 Hz); MS (ESI+) m/z 144.0 (M+H)
(1−(2−ブロモエチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−イル)メタノール 124b
機械撹拌器及び温度調節器を備えた1Lの三つ口丸底フラスコを窒素でパージし、124a(25.0g、175mmol)、DMF(250mL)及び炭酸セシウム(70.0g、215mmol)を充填して、104℃で5分間加熱した。次に氷/アセトン浴を用いて反応混合物を0℃に冷却し、ジブロモエタン(329g、1.75mol)を少しずつ添加した(発熱なし)。反応物を0℃で1時間、次に室温で4時間撹拌した。この時間後、水(400mL)中のKH2PO4(40g)の溶液を緩やかに添加した。反応混合物を室温で30分間撹拌した。酢酸エチル(450mL)を添加し、水層を分離して、酢酸エチル(2×100mL)で抽出した。合わせた有機層を水(200mL)、ブライン(200mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して、乾燥剤をろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮し、86%収率で粗124b(37.5g)を橙色油として得た: 1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 6.85 (s,1H),4.82 (d,2H,J=5.4 Hz),4.66 (t,2H,J=6.3 Hz),3.83 (t,2H,J=6.3 Hz); MS (ESI+) m/z 249.9 (M+H).
1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール 124c
磁気撹拌機、窒素注入口及び還流冷却器を備えた500mLの三つ口丸底フラスコを窒素でパージし、124b(37.0g、148mmol)及びクロロホルム(160mL)を充填した。氷/アセトン浴を用いて反応物を−5℃に冷却し、三臭化リン(40.0g、148mmol)を少しずつ添加した。冷却浴を取り除き、反応物を2時間還流撹拌した。この時間後、反応物を−5℃に冷却し、pHが8.5に達するまで飽和重炭酸ナトリウム水溶液(250mL)を添加した。混合物を酢酸エチル(3×150mL)で抽出し、合わせた有機層を飽和炭酸ナトリウム水溶液(2×50mL)、ブライン(75mL)で洗浄して、硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤をろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮し、黄色残留物を得て、これを穏やかに加熱しながら塩化メチレン(60mL)に溶解した。ヘキサン(約20mL)を添加すると、溶液は混濁した。固体沈殿物が形成されるまで混合物を加熱し、塩化メチレン(9mL)を添加すると、溶液は透明になった。溶液を室温まで放置冷却し、4時間後、生じた結晶を減圧ろ過によって収集した。ろ過ケークを塩化メチレン:ヘキサンの氷冷1:2混合物(2×20mL)で洗浄し、1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール(19.7g)を得た。合わせたろ液を蒸発させ、手順を再び実施して、更なる9.70gの1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾールを得た。固体を合わせ、高真空下で18時間乾燥して、57%収率で124c(26.0g)を白色結晶として得た:融点95〜97℃; 1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 6.93 (s,1H),4.63 (t,2H,J=6.0 Hz),4.54 (s,2H),3.86 (t,2H,J=6.0 Hz).
2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 124d
磁気撹拌機を備えた250mLの一首丸底フラスコに、THF(35mL)中の124c(3.0g、9.64mmol)及びアンモニア水(135mL、25〜28%)を充填した。混合物を窒素下に室温で72時間撹拌した。次に反応混合物を減圧下で濃縮し、生じた残留物を酢酸エチル(100mL)と水(100mL)に分配した。水層を酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層を10%炭酸カリウム(2×100mL)、ブライン(200mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、124dを黄色固体(1.23g、76%)として得た。MS:[M+H]+169。
1−(2−ニトロ−6,7−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−5(4H)−イル)エタノン 124e
ジクロロメタン(20mL)中の124d(672mg、4.0mmol)の溶液に、塩化アセチル(936mg、12.0mmol)及びK2CO3(1104mg、8.0mmol)を添加した。混合物を一晩撹拌した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、124eを白色固体(500mg、60%)として得た。MS:[M+H]+211.2。
1−(2−アミノ−6,7−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−5(4H)−イル)エタノン 124f
50mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、124e(492mg、2.34mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、234mg)及びメタノール(20mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、室温で2時間撹拌した。次に水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、124f(380mg、80%)を得た。MS:[M+H]+181.1。
3−(5−アセチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−5−ブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 124g
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、124f(270mg、1.5mmol)、1,4−ジオキサン(20mL)、Pd2(dba)3(137mg、0.15mmol)、キサントホス(173mg、0.30mmol)及び炭酸セシウム(978mg、3.0mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で6時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、124g(540mg、89%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+368.0。
3−(5−アセチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 124h
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、124g(365mg、1.0mmol)、Pin2B2(1.26g、5.0mmol)、Pd2(dba)3(91mg、0.10mmol)、キサントホス(92mg、0.20mmol)、酢酸カリウム(294mg、3.0mmol)及びジオキサン(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を60℃で16時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を50:1 塩化メチレン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、124hを褐色固体(330mg、80%)として得た。MS:[M+H]+414.2。
4−(5−(5−アセチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ニコチンアルデヒド 124i
実施例123dで述べた手順に従い、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(200mg、0.57mmol)及び124h(343mg、0.83mmol)から出発して、124iを黄色固体(300mg、86%)として得た。MS−ESI:[M+H]+611.3。
2−[4−[5−[(5−アセチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−6−tert−ブチル−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 124
実施例120の手順に従い、124i(200mg、0.33mmol)から出発して、124を白色固体(54mg、27%)として得た。MS−ESI:[M+H]+613.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6,T=80oC)δ 8.53 (d,J=8.0 Hz,1H),8.47 (d,J=5.0 Hz,1H),7.94−7.92 (m,2H),7.84 (d,J=2.0 Hz,1H),7.67 (dd,J=2.5,22.0 Hz,1H),7.46 (d,J=8.5 Hz,1H),7.34 (d,J=4.0 Hz,1H),5.98 (s,1H),4.63−4.57 (m,3H),4.44 (d,J=8.0 Hz,2H),3.98 (bs,2H),3.89−3.86 (m,2H),3.58 (s,3H),2.08 (s,3H),1.41 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチルオキサゾール−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 125a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、5−メチルオキサゾール−2−アミン(276mg、2.82mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(753mg、2.82mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(256mg、0.28mmol)、キサントホス(324mg、0.56mmol)、Cs2CO3(1.8g、5.64mmol)及び1,4−ジオキサン(30mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を92℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、125aを白色固体(702mg、88%)として得た。MS−ESI:[M+H]+284.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルオキサゾール−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 125b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、125a(150mg、0.53mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(438mg、1.06mmol)、Pd(dppf)Cl2(39mg、0.053mmol)、K3PO4(225mg、1.06mmol)、酢酸ナトリウム(87mg、1.06mmol)、水(0.5mL)及びアセトニトリル(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を90℃で1時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(100:1から50:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、125bを黄色固体(120mg、40%)として得た。MS−ESI:[M+H]+573.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルオキサゾール−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 125
i−プロパノール/THF/水(2:2:1、10mL)中の125b(114mg、0.20mmol)及び水酸化リチウム(120mg、5.0mmol)の混合物を35℃で30分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物を水(5mL)で希釈した。生じた混合物をジクロロメタンで3回抽出した。次に合わせた有機層を減圧下で濃縮し、生じた残留物を逆相分取HPLCによって精製して、125(52mg、49%)を得た。MS−ESI:[M+H]+530.9。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.25 (s,1H),8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.53 (d,J=3.0 Hz,1H),8.25 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=1.0 Hz,1H),7.78 (dd,J=1.0,13.0 Hz,1H),7.61 (d,J=2.0 Hz,1H),7.50 (d,J=5.0 Hz,1H),6.64 (d,J=1.5 Hz,1H),4.92 (bs,1H),4.40 (d,J=7.0 Hz,2H),3.60 (s,3H),2.22 (s,3H),1.39 (s,9H).
3−シクロプロピル−3−オキソプロパンニトリル 126a
N2保護下に−78℃でTHF(3mL)中のアセトニトリル(0.34mL、6.58mmol)の溶液にリチウムジ−i−プロピルアミド(3.3mL、THF中2M、6.58mmol)を滴下した。反応混合物を−78℃で3時間撹拌した。次にTHF(2mL)中のシクロプロパンカルボン酸エチル(0.50g、4.38mmol)を添加し、混合物を1時間放置して室温に温めた。水(2mL)を添加し、溶媒を減圧下で除去した。ジクロロメタン(2mL)を添加し、2N HClで混合物のpHを5に調整した。次にこれをジクロロメタン(5mL×2)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濃縮して、126aを黄色油として得、これを更に精製することなく次の段階で使用した。
3−シクロプロピル−1H−ピラゾール−5−アミン 126b
メタノール(5mL)中の126a(477mg、4.38mmol)の溶液にヒドラジン水和物(5mL、80%)を添加した。反応混合物を75℃で15時間加熱した。メタノールを減圧下で除去し、残留物をジクロロメタン(2×8mL)で抽出した。合わせた抽出物をNa2SO4で乾燥し、濃縮した。残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するフラッシュカラムによって精製し、126bを黄色油(250mg、2段階で46%)として得た。MS:[M+H]+124。
tert−ブチル5−アミノ−3−シクロプロピル−1H−ピラゾール−1−カルボキシレート 126c
THF(5mL)中の126b(0.25g、2.0mmol)及びK2CO3(0.828g、6.0mmol)の混合物に、THF(5mL)中の(Boc)2O(0.436g、2.0mmol)を添加した。反応混合物を室温で15時間撹拌した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を6:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するフラッシュカラムによって精製し、126cを白色固体(240mg、54%)として得た。MS:[M−Boc]+124。
5−ブロモ−3−(3−シクロプロピル−1H−ピラゾール−5−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 126d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(15mL)、126c(455mg、1.95mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(0.40g、1.5mmol)及び炭酸セシウム(1.22g、3.75mmol)を充填した。生じた混合物に窒素を30分間通気した後、キサントホス(87mg、0.15mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(70mg、0.075mmol)を添加した。反応混合物を15時間還流した。この時間後、反応物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を酢酸エチル(30mL)と水(30mL)に分配した。水層を分離し、酢酸エチル(2×50mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(50mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムで精製し、126dを黄色固体(320mg、70%)として得た。MS:[M+H]+309。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6) δ 11.85 (s,1H),8.23 (s,1H),8.02 (d,J=2.5 Hz,1H),7.35 (d,J=2.5 Hz,1H),5.77 (d,J=2.0 Hz,1H),3.46 (s,3H),1.84−1.82 (m,1H),0.92−0.90 (m,2H),0.65−0.64 (m,2H).
5−(3−シクロプロピル−1H−ピラゾール−5−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルボロン酸 126e
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、126d(205mg、0.665mmol)、4,4,4’,4’,5,5,5’,5’−オクタメチル−2,2’−ビ(1,3,2−ジオキサボロラン)(1.0g、4.0mmol)、ジオキサン(16mL)、PdCl2(dppf)(54.3mg、0.066mmol)及び酢酸カリウム(0.39mg、4.0mmol)を充填した。生じた混合物にアルゴンを30分間通気した後、これをアルゴン雰囲気下に105℃で4時間撹拌した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させ、粗126eを得て、これを更に精製することなく使用した。MS:[M+H]+275。
5−ブロモ−3−(5−シクロプロピル−1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 126f
0℃で、DMF(6mL)中の126e(500mg、1.6mmol)の溶液にNaH(油中60%)(80mg、2.0mmol)を添加した。反応混合物を0℃で1時間撹拌した。ヨードメタン(213mg、1.5mmol)を導入し、生じた混合物を室温で更に2時間撹拌した。次に水(10mL)を混合物に添加した。生じた懸濁液をろ過し、水で洗浄して、減圧下で乾燥し、126fを白色固体(350mg、68%)として得た。MS−ESI:[M+H]+323.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−シクロプロピル−1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 126g
磁気撹拌機を備えた封管に、126f(200mg、0.62mmol)、(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 116c(268mg、0.65mmol)、Pd(dppf)Cl2(18mg、0.025mmol)、酢酸ナトリウム(74mg、0.90mmol)、K3PO4(191mg、0.90mmol)及びアセトニトリル/水(5mL/0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を10:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、126g(100mg、26%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+612.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(5−シクロプロピル−1−メチル−ピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 126
i−プロパノール/THF(1:1、4mL)及び水(1mL)中の126g(100mg、0.16mmol)及び水酸化リチウム(72mg、3.0mmol)の混合物を50℃で2時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させた。残留物を逆相コンビフラッシュによって精製し、126(32mg、35%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+570.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.63 (d,J=5.0 Hz,1H),8.33 (d,J=2.0 Hz,1H),7.94 (d,J=1.5 Hz,1H),7.56−7.55 (m,2H),7.53−7.51 (m,2H),7.33 (s,1H),5.53 (s,1H) 4.49−4.48 (m,2H),4.04−4.02 (m,1H),3.79 (s,3H),3.69 (s,3H),1.69−1.65 (m,1H),1.43 (s,9H),0.97−0.94 (m,2H),0.68−0.65 (m,2H).
6−クロロ−2−メチル−4−(5−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 127a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(20mL)、5−エチル−1H−ピラゾール−3−アミン(971mg、10.0mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(2.46g、11.0mmol)及び炭酸セシウム(6.52g、20.0mmol)を充填した。この懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(1.74g、3.0mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(1.37g、1.5mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、2時間加熱還流した。その後反応混合物がまだ熱い間に直ちにこれをろ過した。固体をジオキサン(3×30mL)で洗浄し、合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物を6:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィによって精製し、127a(1.8g、75%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+239.9。
6−クロロ−4−(1,5−ジメチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン 127b
無水DMF(10mL)中の127a(480mg、2.0mmol)の混合物に0℃でNaH(純度60%)(64mg、1.6mmol)を添加し、生じた混合物を半時間撹拌した。この混合物に0℃でDMF(5mL)中のヨードメタン(227mg、1.6mmol)を滴下した。反応混合物を更に1時間半撹拌し、水(20mL)でクエンチングした。次にこれをジクロロメタン(3×20mL)で抽出し、合わせた有機層を減圧下で蒸発させた。残留物を逆相コンビフラッシュ(A:2%NH4HCO3水溶液、B:アセトニトリル)によって精製し、127b(120mg、24%)を明黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+254.3。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(1,5−ジメチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 127c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、127b(120mg、0.47mmol)、(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 116c(536mg、1.3mmol)、Pd(dppf)Cl2(34mg、0.047mmol)、K3PO4(199mg、0.94mmol)、酢酸ナトリウム(77mg、0.94mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(100:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、127c(180mg、65%)を黒色油として得た。MS−ESI:[M+H]+587.1。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(1,5−ジメチルピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 127
プロパン−2−オール(4mL)、テトラヒドロフラン(4mL)及び水(1.0mL)中の127c(176mg、0.30mmol)の溶液に水酸化リチウム(72mg、3.0mmol)を添加した。混合物を30℃で2時間撹拌した。次にこれを減圧下で蒸発させ、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、127(30mg、18%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+544.8。1H NMR (500 MHz,MeOD)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.51 (d,J=2.5 Hz,1H),7.88 (s,1H),7.88 (s,1H) ,7.76−7.72 (m,2H),5.97 (s,1H),4.68 (s,2H),3.89 (s,3H),3.75 (s,3H),2.29 (s,3H),1.47 (s,9H)
5−メチル−2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 128a
磁気撹拌機及び窒素注入口を備えた1Lの一首丸底フラスコに、THF(350mL)、124c(10.0g、32.2mmol)、THF中の2Mメチルアミン溶液(113mL、225mmol)を充填し、室温で72時間撹拌した。この時間後、反応物を減圧下で濃縮乾固し、生じた固体を、酢酸エチル(75mL)と10%炭酸カリウム水溶液(75mL)の混合物と共に撹拌した。水層を分離し、酢酸エチル(2×75mL)で抽出した。合わせた有機抽出物を10%炭酸カリウム水溶液(75mL)、次いでブライン(50mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、128aを97%の収率で(5.70g)黄色固体として得た。1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 6.62 (s,1H),4.28 (t,2H,J=5.4 Hz),3.67 (s,2H),2.95 (t,2H,J=5.4 Hz),2.52 (s,3H); MS (ESI+) m/z 183.0 (M+H)
5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 128b
500mLのパール反応器ボトルを窒素でパージし、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、800mg乾燥重量)及びエタノール(160mL)中の128a(4.00g、2.20mmol)の溶液を充填した。ボトルをパール水素化装置に取り付け、排気して、水素ガスを45psiの圧まで充填し、2時間振とうした。この時間後、水素を排気し、窒素をボトルに充填した。CELITE(登録商標)521(1.0g)を添加し、混合物をCELITE(登録商標)521のパッドでろ過した。ろ過ケークをエタノール(2×75mL)で洗浄し、合わせたろ液を減圧下で濃縮乾固して、99%の収率で128b(3.31g)を橙色固体として得た。1H NMR (300 MHz,CDCl3) δ 5.34 (s,1H),3.98 (t,2H,J=5.4 Hz),3.52 (s,3H),2.84 (t,2H,J=5.7 Hz),2.45 (s,3H); MS (ESI+) m/z 153.1 (M+H)
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 128c
磁気撹拌機を備えた封管に、128b(1.02g、6.7mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(2.15g、8.1mmol)、Pd2(dba)3(610mg、0.67mmol)、2,2−ビス(ジフェニルホスフィノ)−1,1−ビナフチル(775mg、1.34mmol)、炭酸セシウム(4.37g、13.6mmol)及び1,4−ジオキサン(30mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を110℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物をジクロロメタン/メタノール(15:1、V/V)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、128c(380mg、14%)を白色固体として得た。LCMS:[M+H]+338。
1−メチル−3−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 128d
磁気撹拌機及び冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、128c(1.0g、3mmol)、Pin2B2(3.8g、15mmol)、Pd(dppf)Cl2(137mg、0.15mmol)、キサントホス(143mg、0.3mmol)、酢酸カリウム(88mg、9mmol)及び1,4−ジオキサン(50mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、反応混合物を60℃で15時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を石油エーテルで洗浄して、128dを黄色固体(0.87g、75%)として得た。MS:[M+H]+386。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 128e
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、128d(193mg、0.50mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(180mg、0.50mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(17mg、0.025mmol)、K3PO4(212mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム(82mg、1.0mmol)、アセトニトリル(6mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への変換が完了したことを示した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(20mL)及び水(10mL)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、128e(190mg、65%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+583.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 128
メタノール/ジクロロメタン(5/5mL)中の128e(158mg、0.27mmol)の溶液にNaBH4(31mg、0.82mmol)を室温で添加した。反応物を1時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。反応物を水(10mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、128(95mg、60%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+585.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.0 Hz,1H),8.00 (d,J=2.5 Hz,1H),7.58−7.54 (m,overlap,4H),7.44 (s,1H),5.70 (s,1H),4.52−4.39 (m,2H),4.10−4.09 (m,3H),3.70 (s,3H),3.59 (s,2H),2.88−2.86 (m,2H),2.47 (s,3H),1.43 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 129a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、5−メチルイソオキサゾール−3−アミン(1.0g、10.2mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(4.09g、15.3mmol)、Pd2(dba)3(467mg、0.51mmol)、キサントホス(598mg、1.02mmol)、Cs2CO3(6.65g、20.4mmol)及びジオキサン(50mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、反応混合物を100℃で3時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への変換が完了したことを示した。混合物がまだ熱い間にろ過した。ろ液を室温に冷却し、生じた沈殿物をろ過によって収集して、129a(1.6g、55%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+284.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 129b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(438mg、1.06mmol)、129a(150mg、0.60mmol)、Pd(dppf)Cl2(19mg、0.026mmol)、K3PO4(224mg、1.06mmol)、酢酸ナトリウム(87mg、1.06mmol)、水(5滴)及びアセトニトリル(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、反応混合物を100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、129b(300mg、87%)を暗色油として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+573.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルイソオキサゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 129
THF(4mL)、i−プロパノール(4mL)及び水(2mL)中の129b(280mg、0.49mmol)の溶液に水酸化リチウム(24mg、0.98mmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌した。これを減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、129を白色固体(85mg、33%)として得た。MS−ESI:[M+H]+531.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.03 (s,1H),8.58 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=3.0 Hz,1H),7.99 (d,J=2.0 Hz,1H),7.91 (d,J=1.0 Hz,1H),7.78 (dd,J=1.0,13.0 Hz,1H),7.56 (d,J=2.0 Hz,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),6.26 (s,1H),4.92 (s,1H),4.43 (d,J=6.0 Hz,2H),3.61 (s,3H),2.32 (s,3H),1.40 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(1−メチル−1H−イミダゾール−4−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 130a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(50mL)、1−メチル−1H−イミダゾール−4−アミン(1.1g、11.3mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(3.0g、11.3mmol)、Pd2(dba)3(1.0g、1.13mmol)、キサントホス(1.3g、2.26mmol)及び炭酸セシウム(7.3g、22.6mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を92℃で4時間半加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(100:1から50:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、130a(2.4g、76%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+283.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(1−メチル−1H−イミダゾール−4−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 130b
磁気撹拌機を備えた50mLの丸底フラスコに、130a(150mg、0.53mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(438mg、1.06mmol)、PdCl2(dppf)(43mg、0.053mmol)、K3PO4(225mg、1.06mmol)、酢酸ナトリウム(87mg、1.06mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.2mL)を充填した。混合物に窒素を10分間通気した後、還流冷却器をフラスコに取り付け、反応混合物を90℃で2時間半加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させ、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(50:1から20:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、130bを黄色固体(120mg、40%)として得た。MS−ESI:[M+H]+572.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(1−メチルイミダゾール−4−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 130
i−プロパノール/THF/水(2:2:1、10mL)中の130b(100mg、0.18mmol)及び水酸化リチウム水和物(189mg、4.5mmol)の混合物を35℃で30分間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)に添加した。次にこれをジクロロメタン(3×10mL)で抽出した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、130(41.1mg、44.4%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+530.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.56−8.53 (m,2H),7.90 (d,J=2.0 Hz,1H),7.78 (dd,J=2.0,12.5 Hz,1H),7.61 (s,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),7.41−7.39 (m,2H),7.37 (d,J=2.0 Hz,1H),6.97 (d,J=1.5 Hz,1H),5.04−5.02 (m,1H),4.41−4.39 (m,2H),3.59 (s,3H),3.58 (s,3H),1.39 (s,9H).
2−ニトロ−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン 131a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール 124c(3.00g、9.59mmol)及び4M臭化水素酸水溶液(120mL)を充填し、生じた混合物を24時間加熱還流した。この時間後、反応混合物を減圧下で約6mL容量に濃縮し、残留物を2M水酸化ナトリウム水溶液(40mL)中で2時間撹拌した。この時間後、塩化メチレン(40mL)を添加し、混合物を15分間撹拌した。水層を分離し、塩化メチレン(2×50mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン(100mL)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、62%の収率で131a(1.01g)を白色固体として得た:融点110〜112℃; 1H NMR (300 MHz,CDCl3) 6.68 (s,1H),4.87 (s,2H),4.28 (t,2H,J=5.4 Hz),4.20 (t,2H,J=5.1 Hz); MS (ESI+) m/z 170.0 (M+H).
6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−アミン 131b
500mLのパール水素化ボトルを窒素でパージし、131a(1.01g、5.92mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、125mg乾燥重量)及びエタノール(50mL)を充填した。ボトルを排気し、水素ガスを25psiの圧まで充填して、パール水素化装置で2時間振とうした。次に水素を排気し、窒素をボトルに充填した。触媒をCELITE(登録商標)521のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を、シリカゲル400ccを用いて、塩化メチレン中3%メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィによって精製した。画分を収集し、減圧下で濃縮した後、73%の収率で131b(601mg)を黄色固体として得た:融点74〜76℃; 1H NMR (300 MHz,CDCl3)δ5.37 (s,1H),4.72 (s,2H),4.07 (t,2H,J=5.1 Hz),3.98 (t,2H,J=5.1 Hz),3.57 (br s,2H); MS (ESI+) m/z 140.4 (M+H).
5−ブロモ−3−(6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 131c
磁気撹拌機、還流冷却器及び窒素注入口を備えた50mLの三つ口丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(20mL)、131b(600mg、4.31mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(1.44g、5.40mmol)及び炭酸セシウム(3.08g、9.48mmol)を充填した。生じた溶液に窒素を30分間通気した後、キサントホス(300mg、0.52mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(320mg、0.35mmol)を添加し、反応混合物を2時間加熱還流した。この時間後、反応物を室温に冷却し、酢酸エチル(75mL)と水(75mL)に分配して、ろ過した。水層を分離し、酢酸エチル(2×25mL)で抽出した。有機層を合わせ、ブライン(50mL)で洗浄して、硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤をろ過によって除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を、シリカゲル500ccを用いて、塩化メチレン中1%メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィによって精製した。画分を収集し、減圧下で濃縮した後、31%の収率で131c(433mg)を緑色固体として得た:融点195〜197℃; 1H NMR (300 MHz,CDCl3) 7.92 (d,1H,J=2.4 Hz),7.44 (s,1H),6.90 (d,1H,J=2.4 Hz),5.65 (s,1H),4.80 (s,2H),4.13 (s,2H),3.61 (s,5H); MS (ESI+) m/z 324.9 (M+H).
3−(6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 131d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの丸底フラスコに、131c(1.3g、4.0mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(2.03g、8.0mmol)、PdCl2(dppf)(439mg、0.60mmol)、酢酸カリウム(784mg、8.0mmol)及び1,4−ジオキサン(60mL)の混合物を充填した。混合物に窒素を30分間通気した後、これを15時間加熱還流した。反応の完了後、混合物を室温に冷却し、ろ過した。固体を酢酸エチル(100mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で蒸発させ、残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するカラムクロマトグラフィによって精製して、131d(446mg、30%)を得た。MS:[M+H]+373。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 131e
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(216mg、1当量、0.60mmol)、131d(446mg、2当量、1.2mmol)、Pd2(dba)3(55mg、0.1当量、0.060mmol)、Cy3P(67mg、0.4当量、0.24mmol)、Cs2CO3(395mg、2当量、1.2mmol)、水(0.5mL)及びジオキサン(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、反応混合物を100℃で2時間撹拌した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させ、生じた残留物を4:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、131e(272mg、80%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+569.8。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−(6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 131
磁気撹拌機を備えた50mLの一首丸底フラスコに、131e(220mg、1.0当量、0.39mmol)、NaBH4(73mg、5.0当量、1.90mmol)及びメタノール(10mL)を充填した。混合物を室温で1時間撹拌し、水(5mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、131(105mg、47%)を得た。MS−ESI:[M+H]+571.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.5 Hz,1H),8.03 (d,J=2.5 Hz,1H),7.59−7.53 (m,4H),7.48 (s,1H),5.73 (s,1H),4.81 (s,2H),4.51 (bs,2H),4.12−4.05 (m,overlap,5H),3.73 (s,3H),1.46 (s,9H).
(R)−(6−アミノピリジン−3−イル)(3−メチルモルホリノ)メタノン 132a
エタノール(25mL)中の(R)−3−メチルモルホリン(2.02g、20mmol)の溶液に、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDCI)(3.33g、17.4mmol)、ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)(2.35g、17.4mmol)及び6−アミノニコチン酸(2.0g、14.5mmol)を添加した。室温で18時間撹拌した後、反応懸濁液をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を3:1 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、132aを白色固体(1.6g、36%)として得た。MS−ESI:[M+H]+222.3。
(R)−5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 132b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、132a(332mg、1.5mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(H−001)(480mg、1.8mmol)及び炭酸セシウム(978mg、3.0mmol)を充填した。懸濁液に窒素を3分間通気した後、キサントホス(87mg、0.15mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(69mg、0.075mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、2時間半加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×50mL)で洗浄し、合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(2:1から1:2)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、132b(430mg、70%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+407.3。
(R)−1−メチル−5−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルボロン酸 132c
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、132b(580mg、1.42mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(1.2g、4.5mmol)、Pd2(dba)3(137mg、0.15mmol)、キサントホス(71mg、0.15mmol)、酢酸カリウム(294mg、3.0mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を70℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテルで洗浄し、132c(500mg、94%)を白色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+373.1。
(R)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 132d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、132c(260mg、0.70mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(180mg、0.50mmol)、K3PO4(297mg、1.4mmol)、酢酸ナトリウム(114mg、1.4mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(57mg、0.070mmol)及びアセトニトリル/水(10/0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を100℃で1時間半加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(20mL)及び水(20mL)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物を60:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、132d(120mg、37%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+652.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−[(3R)−3−メチルモルホリン−4−カルボニル]−2−ピリジル]アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 132
メタノール/ジクロロメタン(4/4mL)中の132d(120mg、0.18mmol)の溶液をNaBH4(15mg、0.60mmol)に添加した。混合物を室温で1時間撹拌し、水(2mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で蒸発させ、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、132(60mg、50%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+654.3。1H NMR (500 MHz,MeOD−d4)δ 8.94 (d,J=2.5 Hz,1H),8.61 (d,J=5.0 Hz,1H),8.51 (d,J=2.5 Hz,1H),8.35 (d,J=2.0 Hz,1H) 7.88 (d,J=1.5 Hz,1H),7.75 (d,J=1.5 Hz,1H),7.72−7.69 (m,1H),7.65 (d,J=5.0 Hz,1H),7.61 (d,J=2.5 Hz,1H),7.13 (d,J=7.5 Hz,1H),4.62−4.58 (m,2H),4.36−4.31 (m,1H),3.61−3.84 (m,2H),3.71−3.67 (m,overlap,5H),3.56−3.47 (m,2H),1.47 (s,9H),1.39 (d,J=7.0 Hz,3H).
5−(2−メトキシエチル)−2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 133a
アセトニトリル(10mL)中の2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 124d(190mg、1.13mmol)の溶液に、K2CO3(311.9mg、2.26mmol)及び1−ブロモ−2−メトキシエタン(188.3mg、1.36mmol)を添加した。反応混合物をマイクロ波照射下に80℃で17時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、133aを白色固体(230mg、90%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+227.0。
5−(2−メトキシエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 133b
メタノール(10mL)中の133a(286mg、1.26mmol)の溶液にPd/C(28.6mg)を添加した。この系を排気し、その後H2を再充填した。室温で2時間撹拌した後、混合物をろ取した。ろ液を減圧下で濃縮し、133bを黄色固体(240mg、97%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+197.0。
5−ブロモ−3−(5−(2−メトキシエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 133c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、133b(230mg、1.17mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(468.4mg、1.76mmol)、Pd2(dba)3(53.5mg、0.0585mmol)、キサントホス(67.6mg、0.117mmol)、Cs2CO3(762.8mg、2.34mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を40:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、133cを暗色固体(380mg、85%)として得た。MS−ESI:[M+H]+382.2。
3−(5−(2−メトキシエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 133d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、133c(330mg、0.86mmol)、Pin2B2(329mg、1.30mmol)、Pd2(dba)3(40mg、0.043mmol)、キサントホス(41mg、0.086mmol)、酢酸カリウム(169mg、1.726mmol)及びジオキサン(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を70℃で2時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテルで洗浄し、133dを暗色油(240mg、80%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+348.3。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−(2−メトキシエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 133e
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(100mg、0.28mmol)、133d(144.4mg、0.42mmol)、Pd(dppf)Cl2(11.3mg、0.0139mmol)、K3PO4(117.8mg、0.556mmol)、酢酸ナトリウム(45.6mg、0.556mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(3滴)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物をN2保護下に100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を40:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、133eを黄色固体(140mg、80%)として得た。MS−ESI:[M+H]+627.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[5−[[5−(2−メトキシエチル)−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 133
ジクロロメタン(5mL)及びメタノール(5mL)中の133e(180mg、0.287mmol)の溶液にNaBH4(21.7mg、0.574mmol)を添加した。室温で1時間撹拌した後、これをNH4Cl水溶液(5mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、減圧下で濃縮し、逆相分取HPLCによって精製して、133(50mg、27%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+629.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.57 (d,J=5.5 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.22 (s,1H),8.04 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.78 (dd,J=1.5,13.5 Hz,1H),7.51 (d,J=5.5 Hz,1H),7.39 (d,J=2.0 Hz,1H),5.89 (s,1H),4.90−4.88 (m,1H),4.42 (s,2H),3.92 (t,J=5.5 Hz,2H),3.61 (s,2H),3.59 (s,3H),3.50 (t,J=5.0 Hz,2H),3.25 (s,3H),2.90 (t,J=5.5 Hz,2H),2.67 (t,J=5.0 Hz,2H),1.40 (s,9H).
2−ニトロ−5−(2,2,2−トリフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 134a
磁気撹拌機を備えた封管に、1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール 124c(632mg、2.0mmol)、2,2,2−トリフルオロエタンアミン(594mg、6.0mmol)及びDMSO(5mL)を充填し、120℃で2時間加熱した。混合物を室温に冷却し、水(20mL)で希釈した。生じた混合物を酢酸エチル(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、134a(392mg、78%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+250.9。
5−(2,2,2−トリフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 134b
エタノール(20mL)中の134a(390mg、1.56mmol)の溶液にPd/C(約200mg)を添加した。反応物に水素ガスを充填し(バルーンを介して)、室温で2時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をCELITE(登録商標)のプラグでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、134bを黄色固体(308mg、90%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+221.1。
5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(2,2,2−トリフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 134c
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、134b(300mg、1.36mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(364mg、1.36mmol)、炭酸セシウム(887mg、2.7mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(78mg、0.136mmol)及びPd2(dba)3(62mg、0.068mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、5時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(30mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で濃縮した。固体残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、134c(420mg、76%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+406.0。
1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)−3−(5−(2,2,2−トリフルオロ−エチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 134d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、134c(400mg、0.98mmol)、Pin2B2(750mg、2.96mmol)、Pd2(dba)3(45mg、0.05mmol)、キサントホス(48mg、0.1mmol)、酢酸カリウム(294mg、3.0mmol)及び1,4−ジオキサン(15mL)を充填した。反応混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、65℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を石油エーテルで洗浄し、134d(400mg、90%)を褐色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+453.9。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−6−オキソ−5−(5−(2,2,2−トリフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 134e
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、134d(200mg、0.44mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(159mg、0.44mmol)、K3PO4(186mg、0.88mmol)、酢酸ナトリウム(72mg、0.88mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(16mg、0.022mmol)及びアセトニトリル/水(8/0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物をN2保護下に100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン(30mL)及び水(15mL)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(2×15mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、134e(128mg、45%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+651.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−6−オキソ−5−[[5−(2,2,2−トリフルオロエチル)−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル]アミノ]−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 134
メタノール/ジクロロメタン(4/4mL)中の134e(110mg、0.169mmol)の溶液にNaBH4(19mg、0.51mmol)を室温で添加した。反応物を1時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。混合物を水(20mL)でクエンチングし、ジクロロメタン(3×30mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、134(50mg、45%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+653.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.5 Hz s,1H),8.00 (d,J=2.5 Hz,1H),7.59−7.58 (m,1H),7.56−7.55 (m,1H),7.53−7.52 (m,2H),7.45 (s,1H),5.73 (s,1H),4.51−4.49 (m,2H),4.11−4.08 (m,2H),4.05−4.03 (m,1H),3.94 (s,2H),3.73 (s,3H),3.24−3.18 (m,4H),1.45 (s,9H).
5−(2,2−ジフルオロエチル)−2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 135a
磁気撹拌機を備えた封管に、1−(2−ブロモエチル)−5−(ブロモメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール 124c(632mg、2.0mmol)、2,2−ジフルオロエタンアミン(486mg、6.0mmol)及びDMSO(5mL)を充填した。これを120℃で2時間加熱した。混合物を室温に冷却し、水(20mL)で希釈した。生じた混合物を酢酸エチル(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、135a(371mg、80%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+233.2。
5−(2,2−ジフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 135b
エタノール(20mL)中の135a(370mg、1.59mmol)の溶液をPd/C(約200mg)に添加した。反応物に水素ガスを充填し(バルーンを介して)、室温で2時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をCELITE(登録商標)のプラグでろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、135bを黄色固体(293mg、91%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+203.2。
5−ブロモ−3−(5−(2,2−ジフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 135c
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、135b(290mg、1.43mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(383mg、1.43mmol)、炭酸セシウム(932mg、2.86mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(82mg、0.143mmol)及びPd2(dba)3(65mg、0.072mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、5時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(30mL)で洗浄した。合わせた有機ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、135c(400mg、72%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+387.8。
3−(5−(2,2−ジフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 135d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、135c(400mg、1.03mmol)、Pin2B2(785mg、3.1mmol)、Pd2(dba)3(45mg、0.050mmol)、キサントホス(48mg、0.10mmol)、酢酸カリウム(294mg、3.0mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。反応混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、65℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を石油エーテルで洗浄し、135d(412mg、92%)を褐色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+436.0。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−(2,2−ジフルオロエチル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 135e
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、135d(200mg、0.46mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(166mg、0.46mmol)、K3PO4(195mg、0.92mmol)、酢酸ナトリウム(75mg、0.92mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(17mg、0.023mmol)及びアセトニトリル/水(8/0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、ジクロロメタン(30mL)及び水(15mL)で希釈した。水層をジクロロメタン(2×15mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、135e(110mg、38%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+633.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[[5−(2,2−ジフルオロエチル)−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 135
メタノール/ジクロロメタン(4/4mL)中の135e(100mg、0.158mmol)の溶液にNaBH4(18mg、0.475mmol)を室温で添加した。反応物を1時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。反応混合物を水(20mL)でクエンチングし、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、135(60mg、60%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+635.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.35 (d,J=2.5 Hz,1H),8.00 (d,J=2.5 Hz,1H),7.59−7.58 (m,1H),7.56−7.55 (m,1H),7.53−7.52 (m,2H),7.45 (s,1H),6.07−5.83 (m,1H),5.72 (s,1H),4.51−4.49 (m,2H),4.11−4.08 (m,2H),4.05−4.03 (m,1H),3.94 (s,2H),3.73 (s,3H),3.13−3.10 (m,2H),3.00−2.94 (m,2H),1.45 (s,9H).
(S)−(6−アミノピリジン−3−イル)(3−メチルモルホリノ)メタノン 136a
エタノール(20mL)中の(S)−3−メチルモルホリン(1.5g、15.0mmol)の溶液に、EDCI(3.33g、17.4mmol)、HOBt(2.35g、17.4mmol)及び6−アミノニコチン酸(2.07g、15.0mmol)を室温で添加した。18時間撹拌した後、生じた懸濁液をろ過した。固体を2:1 石油エーテル/酢酸エチルから100%酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、136a(1.0g、30%)を白色固体として得た。MS−ESI:222.3(M+H)+。
(S)−5−ブロモ−1−メチル−3−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 136b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、136a(222mg、1.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(320mg、1.2mmol)、炭酸セシウム(652mg、2mmol)及び1,4−ジオキサン(10mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(58mg、0.10mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(46mg、0.050mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、2時間半加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×30mL)で洗浄し、合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(2:1から1:2)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、136b(280mg、69%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+407.3。
(S)−1−メチル−5−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イルボロン酸 136c
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、136b(600mg、1.5mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(1.2g、4.5mmol)、Pd2(dba)3(137mg、0.15mmol)、キサントホス(71mg、0.15mmol)、酢酸カリウム(294mg、3.0mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を70℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテルで洗浄し、136c(520mg、93%)を白色固体として得て、これを更に精製することなく直接使用した。MS−ESI:[M+H]+373.1。
(S)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(3−メチルモルホリン−4−カルボニル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 136d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、136c(260mg、0.70mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(180mg、0.50mmol)、K3PO4(297mg、1.4mmol)、酢酸ナトリウム(114mg、1.4mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(57mg、0.07mmol)及びアセトニトリル/水(10/0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を100℃で1時間半加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(20mL)及び水(10mL)で希釈した。水層を分離し、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物を60:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、136d(140mg、43%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+652.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−[(3S)−3−メチルモルホリン−4−カルボニル]−2−ピリジル]アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 136
メタノール/ジクロロメタン(4/4mL)中の136d(140mg、0.21mmol)の溶液をNaBH4(16mg、0.63mmol)に添加した。混合物を室温で1時間撹拌し、水(2mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で蒸発させ、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、136(40mg、28%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+654.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.00 (s,1H),8.77 (d,J=8.0 Hz,1H),8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.53 (d,J=2.5 Hz,1H),8.25 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.78 (d,J=1.0 Hz,1H),7.65−7.63 (m,1H),7.59 (d,J=2.5 Hz,1H),7.53 (d,J=5.0 Hz,1H),7.37 (d,J=8.5 Hz,1H),4.91−4.89 (m,1H),4.45−4.39 (m,2H),4.17−4.13 (m,1H),3.79−3.67 (m,2H),3.58−3.53 (m,overlap,5H),3.41−3.36 (m,1H),3.29−3.25 (m,1H),1.39 (s,9H),1.22 (d,J =7.5 Hz,3H).
(S)−tert−ブチル4−(6−(5−クロロ−2−メトキシピリジン−3−イルアミノ)ピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 138a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(40mL)、(S)−tert−ブチル4−(6−アミノピリジン−3−イル)−3−メチルピペラジン−1−カルボキシレート 105b(2.04g、7.0mmol)、3−ブロモ−5−クロロ−2−メトキシピリジン(2.8g、12.6mmol)、Pd2(dba)3(640mg、0.70mmol)、キサントホス(404.6mg、0.70mmol)及び炭酸セシウム(4.56g、14.0mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で4時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:3 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、138a(1.7g、57%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+434.2。
(S)−5−クロロ−3−(5−(2−メチルピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 138b
ジオキサン/HCl(30mL)中の138a(1.0g、2.3mmol)の溶液を100℃で2時間撹拌した。次にこれを減圧下で蒸発させ、138b(1.48g、粗生成物)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+320.3。
(S)−5−クロロ−3−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 138c
メタノール(35mL)中の138b(1.0g、3.1mmol)の溶液に、オキセタン−3−オン(669.6mg、9.3mmol)、NaBH3CN(585.9mg、9.3mmol)及びZnCl2(1.26g、9.3mmol)を添加した。反応物を30℃で2時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(20mL)で希釈した。次にこれをジクロロメタン(3×30mL)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を40:1 酢酸エチル/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、138c(291mg、25%)を赤色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+376.3。
(S)−6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(5−(5−(2−メチル−4−(オキセタン−3−イル)ピペラジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 138
磁気撹拌機を備えた封管に、138c(150mg、0.40mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(495.6mg、1.2mmol)、Pd2(dba)3(36.6mg、0.040mmol)、P(cy)3(44.6mg、0.16mmol)、Cs2CO3(391.2mg、1.2mmol)、ジオキサン(8mL)及び水(0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を120℃で4時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を40:1 酢酸エチル/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、逆相分取HPLCによって更に精製して、138(48mg、18%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+667.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 12.05 (s,1H),8.65 (d,J=2.0 Hz,1H),8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.55 (d,J=3.0 Hz,1H),8.44 (s,1H),7.91 (d,J=2.0 Hz,1H),7.87 (d,J=2.5 Hz,1H),7.79 (dd,J=1.0 Hz,13.0 Hz,1H),7.54 (d,J=5.0 Hz,1H),7.39 (dd,J=2.5 Hz,9.0 Hz,1H),7.26−7.23 (m,2H),4.97−4.95 (m,1H),4.58−4.54 (m,2H),4.48−4.46 (m,1H),4.43−4.41 (m,1H),4.38−4.37 (m,2H),3.69−3.68 (m,1H),3.41−3.39 (m,1H),3.11−3.09 (m,1H),2.97−2.93 (m,1H),2.56−2.54 (m,1H),2.35−2.32 (m,2H),2.21−2.17 (m,1H),1.40 (s,9H),0.94 (d,J=6.5 Hz,3H),
(3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−イル)メタノール 139a
3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(4.71g、30mmol)、BH3/THF(75mL、1mol/L、75mmol)の混合物を60℃で2時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、4M HCl(19mL、75mmol)を添加した。これを70℃で2時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチルとブライン(100:100mL)に分配した。水相を酢酸エチル(4×50mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(5:1から1:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、139a(3.5g、79%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+144.2。
1−(5−(ヒドロキシメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)−2−メチルプロパン−2−オール 139b
封管に139a(2.145g、15mmol)、Cs2CO3(978mg、3.0mmol)及び2,2−ジメチルオキシラン(15mL)を充填した。混合物を70℃で3時間撹拌した。室温に冷却した後、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテル/酢酸エチル(5:1から1:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、139b(1.2g、38%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+216.2。
6,6−ジメチル−2−ニトロ−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン 139c
DMF(10mL)中の139b(1.1g、5.1mmol)の溶液に0℃でNaH (鉱油中60%分散、246mg、6.14mmol)を添加した。生じた懸濁液を30分間撹拌し、次いでp−トルエンスルホニルクロリド(1169mg、6.14mmol)を添加した。混合物を60℃で一晩撹拌した。室温に冷却した後、飽和塩化アンモニウム溶液を添加し、混合物をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテル/酢酸エチル勾配(9:1から2:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、139c(228mg、22%)を得た。MS−ESI:[M+H]+198.3。
6,6−ジメチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−アミン 139d
50mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、139c(0.21g、1.25mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、125mg)及びメタノール(10mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、室温で2時間撹拌した。次に水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、139d(167mg、93%)を得た。MS−ESI:[M+H]+168.1。
5−ブロモ−3−(6,6−ジメチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 139e
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(10mL)、139d(167mg、1.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(320mg、1.2mmol)、Pd2(dba)3(91mg、0.10mmol)、キサントホス(116mg、0.20mmol)及び炭酸セシウム(652mg、2.0mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、139e(210mg、60%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+352.9。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(6,6−ジメチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 139f
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、139e(177mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(207mg、0.50mmol)、Pd(dppf)Cl2(41mg、0.050mmol)、酢酸ナトリウム(82mg、1.0mmol)、K3PO4・三水和物(266mg、1.0mmol)、水(6滴)及びアセトニトリル(5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、139f(161mg、50%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+642.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(6,6−ジメチル−4,7−ジヒドロピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 139
i−プロパノール/THF(1:1、4mL)及び水(1mL)中の139f(160mg、0.25mmol)及び水酸化リチウム(60mg、2.5mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(3×10mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、139(60mg、40%)を明黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+599.8。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.34 (s,1H),8.08 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.79−7.76 (m,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),7.39 (d,J=2.0 Hz,1H),5.95 (s,1H),4.92 (bs,1H),4.73 (s,2H),4.42 (s,2H),3.80 (s,2H),3.60 (s,3H),1.40 (s,9H),1.26 (s,6H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 140a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(100mL)、1−メチル−1H−ピラゾール−3−アミン(970mg、10.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2−(1H)−オン(2.9g、11mmol)及び炭酸セシウム(6.5g、20.0mmol)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(457mg、0.50mmol)及びキサントホス(587mg、1.0mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、2時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×50mL)で洗浄し、合わせた有機ろ液を濃縮した。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、140aを黄色固体(900mg、32%)として得た。MS−ESI:[M+H]+283.1。
1−メチル−3−(1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 140b
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、140a(564mg、2.0mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(1.5g、6.0mmol)、Pd2(dba)3(183mg、0.20mmol)、キサントホス(95mg、0.20mmol)、酢酸カリウム(392mg、4.0mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。3サイクルの減圧とアルゴンフラッシュの後、混合物を70℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテルで洗浄し、140b(600mg、91%)を褐色固体として得て、これを更に精製することなく使用した。MS−ESI:[M+H]+331.0。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(1−メチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 140c
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(359mg、1.0mmol)、140b(660mg、2.0mmol)、K3PO4(424mg、2.0mmol)、1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセンジクロロパラジウム(II)(82mg、0.10mmol)、酢酸ナトリウム(164mg、2.0mmol)及びアセトニトリル/水(15/0.2mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を100℃で1時間半加熱した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(30mL)及び水(30mL)で希釈した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から50/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、140c(280mg、53%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+528.1。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(1−メチルピラゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 140
THF(5mL)、プロパン−2−オール(5mL)及び水(2mL)中の140c(270mg、0.50mmol)の溶液に水酸化リチウム(36mg、1.5mmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(20mL)及び水(10mL)で希釈した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、140(53mg、20%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+530.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.56 (d,J=5.0 Hz,1H),8.53 (d,J=2.0 Hz,1H),8.21 (s,1H),8.03 (d,J=2.5 Hz,1H),7.89 (s,1H),7.78−7.5 (m,1H),7.51−7.48 (m,2 H),7.39 (d,J=2.5 Hz,1H),6.07 (d,J=2.0 Hz,1H),4.91 (s,1H),4.42 (s,2 H),3.71 (s,3 H),3.58 (s,3 H),1.39 (s,9 H)
6−クロロ−2−メチル−4−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 141a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(40mL)、5−メチルイソオキサゾール−3−アミン(559mg、5.7mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(1.89g、8.55mmol)、Pd2(dba)3(521mg、0.57mmol)、キサントホス(329mg、0.57mmol)及び炭酸セシウム(3.72g、11.4mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次に混合物を80℃に冷却し、ろ過した。ろ液を室温に冷却した。その後これをろ過し、141a(600mg、44%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+241.0。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 141b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、141a(288mg、1.2mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソ−フタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(1.49g、3.6mmol)、Pd(dppf)Cl2(99mg、0.12mmol)、酢酸カリウム(235mg、2.4mmol)、K3PO4(523mg、2.4mmol)、アセトニトリル(20mL)及び水(10滴)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を95℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を1:1 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、141b(220mg、32%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+574.2。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルイソオキサゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 141
i−プロパノール/THF(1:1、8mL)及び水(1mL)中の141a(117.3mg、0.20mmol)及び水酸化リチウム一水和物(84mg、2.0mmol)の混合物を35℃で半時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水(10mL)とジクロロメタン(10mL)に分配した。水相をジクロロメタン(3×10mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、141(70mg、66%)を淡黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+532.2。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.92 (s,1H),8.65 (d,J=5.5 Hz,1H),8.55 (d,J=2.5 Hz,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.85 (s,1H),7.80−7.77 (m,1H),7.62 (d,J=5.0 Hz,1H),6.33 (s,1H),4.85 (s,1H),4.56−4.53 (m,1H),4.45−4.42 (m,1H),3.80 (s,3H),2.36 (s,3H),1.40 (s,9H).
3−ブロモ−5−ヨードピリジン−2−オール 142a
磁気撹拌機を備えた100mLの一首丸底フラスコに、アセトニトリル(50mL)、TFA(10mL)、3−ブロモピリジン−2−オール(4.0g、11.56mmol)、N−ヨードスクシンイミド(5.2g、11.56mmol)を充填した。混合物を室温で15時間撹拌した。混合物を水(100mL)で希釈し、生じた白色固体をろ過によって収集して、142a(6.6g、96%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+300。
3−ブロモ−5−ヨード−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 142b
磁気撹拌機を備えた100mLの一首丸底フラスコに、DMF(50mL)、142a(6.0g、20.0mmol)、CH3I(4.26g、30.0mmol)及びK2CO3(5.52g、40.0mmol)を充填した。混合物を室温で2時間撹拌し、水(200mL)で希釈した。生じた白色固体をろ過によって収集し、142b(5.97g、95%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+314。
(4−(5−ブロモ−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 142c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、142b(1.37g、4.38mmol、1.0当量)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(2.07mg、5.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(179mg、0.219mmol、0.050当量)、酢酸ナトリウム(718mg、8.76mmol、2.0当量)、K3PO4(1.86g、8.76mmol、2.0当量)、アセトニトリル(20mL)及び水(1mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を30℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物を100:1 ジクロロメタン/エタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、142c(800mg、32%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+555.2。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.66 (d,J=5.0 Hz,1H),8.56 (d,J=2.5 Hz,1H),8.14 (d,J=2.5 Hz,1H),8.08 (d,J=2.0 Hz,1H),7.91 (d,J=1.5 Hz,1H),7.82−7.79 (m,1H),7.62 (d,J=6.5 Hz,1H),5.02 (s,2H),3.59 (s,3H),1.78 (s,3H),1.40 (s,9H).
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(1−エチル−1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 142d
1ドラムのバイアルに、無水1,4−ジオキサン(0.2M)中の142c(40mg、0.074mmol)、1−エチル−1H−ピラゾール−3−アミン(1.2当量)、炭酸セシウム(1.5当量)、キサントホス(10mol%)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(5mol%)を添加した。次に、反応物を80℃で3時間撹拌した。室温に冷却した後、反応物をジクロロメタン(3mL)で希釈し、水(2×3mL)で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。次に粗生成物142dを、更に精製することなくその後の段階に進めた。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(1−エチルピラゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 142
1ドラムのバイアルに、THFと水の4:1混合物(1mL)中の142d(1当量)を添加した。次に水酸化リチウム(1.5当量)を混合物に添加し、反応物を室温で16時間撹拌した。その後反応物をジクロロメタン(3mL)で希釈し、水(2×3mL)で洗浄した。有機層を収集し、硫酸マグネシウムで乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗物質を逆相クロマトグラフィによって精製し、142(7.6mg、19%収率)を得た。1H NMR (400 MHz,DMSO−d6) δ 8.55 (s,1H),8.52 (d,J=2.5 Hz,1H),8.16 (s,1H),8.06 (d,J=2.5 Hz,1H),7.89 (m,1H),7.75 (dd,J=13.1,1.9 Hz,1H),7.53 (d,J=2.2 Hz,1H),7.51 (d,J=12.6 Hz,1H),7.40 (d,J=2.1 Hz,1H),6.07 (s,1H),4.46 (br s 1H),4.00 (q,J=7.2 Hz,2H),3.60 (s,3H),3.17 (s,2H),1.39 (s,9H),1.34 (t,J=7.2 Hz,3H). ES−MS m/z 544.3 [M+1].
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[5−[[5−(メトキシメチル)−1−メチル−ピラゾール−3−イル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 143
実施例142の手順に従い、1−エチル−1H−ピラゾール−3−アミンの代わりに5−(メトキシメチル)−1−メチル−1H−ピラゾール−3−アミンを使用して、143を調製した(11.2mg、54%収率)。1H NMR (400 MHz,DMSO−d6) δ 8.56 (d,J=5.0 Hz,1H),8.53 (d,J=2.5 Hz,1H),8.19 (s,1H),8.03 (d,J=2.4 Hz,1H),7.89 (d,J=1.8 Hz,1H),7.76 (dd,J=13.2,1.7 Hz,1H),7.50 (d,J=5.0 Hz,1H),7.39 (d,J=2.4 Hz,1H),6.11 (s,1H),4.43 (d,J=5.4 Hz,2H),4.38 (s,2H),3.66 (s,3H),3.59 (s,3H),3.26 (s,3H),1.39 (s,9H). ES−MS m/z 574.3 [M+1].
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[1−メチル−5−(ピロリジン−1−カルボニル)ピラゾール−3−イル]アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 144
実施例142の手順に従い、1−エチル−1H−ピラゾール−3−アミンの代わりに(3−アミノ−1−メチル−1H−ピラゾール−5−イル)(ピロリジン−1−イル)メタノンを使用して、144を調製した(14.6mg、65%収率)。1H NMR (400 MHz,DMSO−d6) δ 8.59 - 8.50 (m,2H),8.28 (s,1H),8.04 (d,J=2.3 Hz,1H),7.89 (d,J=1.8 Hz,1H),7.76 (dd,J=13.1,1.7 Hz,1H),7.51 (d,J=5.1 Hz,1H),7.42 (d,J=2.3 Hz,1H),6.46 (s,1H),4.87 (t,J=5.1 Hz,1H),4.47 - 4.40 (m,2H),3.79 (s,3H),3.60 (s,3H),3.48 (dd,J=19.0,6.7 Hz,4H),1.91 - 1.82 (m,4H),1.39 (s,9H). ES−MS m/z 627.4 [M+1].
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[[1−(2,2−ジフルオロエチル)−5−メチル−ピラゾール−3−イル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 145
実施例142の手順に従い、1−エチル−1H−ピラゾール−3−アミンの代わりに1−(2,2−ジフルオロエチル)−5−メチル−1H−ピラゾール−3−アミンを使用して、145を調製した(11mg、26%収率)。1H NMR (400 MHz,DMSO−d6) δ 8.55 (d,J=5.0 Hz,1H),8.52 (d,J=2.7 Hz,1H),8.20 (s,1H),8.11 (d,J=2.4 Hz,1H),7.90 (d,J=1.6 Hz,1H),7.75 (dd,J=13.1,1.8 Hz,1H),7.50 (d,J=5.0 Hz,1H),7.42 (d,J=2.4 Hz,1H),5.97 (s,1H),4.88 (t,J=5.0 Hz,1H),4.46 - 4.33 (m,5H),3.59 (s,3H),2.21 (s,3H),1.39 (s,9H). ES−MS m/z 594.3 [M+1].
エチル2−(5−(ヒドロキシメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)アセテート 146a
磁気撹拌機を備えた100mLの一首丸底フラスコに、アセトニトリル(30mL)、(3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−イル)メタノール(1.43g、10.0mmol)、Cs2CO3(490mg、1.5mmol)及びエチル2−ブロモアセテート(2.00g、12mmol)を充填した。混合物を40℃で5時間撹拌した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、146a(1.65g、72%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+229.9。
エチル2−(5−(クロロメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)アセテート 146b
0℃で冷却したCHCl3(60mL)中の146a(1.50g、6.55mmol)の混合物に、内部温度を5℃以下に維持しながらSOCl2(2.34g、19.6mmol)を緩やかに添加した。この反応混合物を50℃に温め、この温度で3時間撹拌した。次にこれを0℃に冷却し、水でクエンチングした。有機層を分離し、減圧下で蒸発させた。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、146b(1.1g、68%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+247.9。
5−メチル−2−ニトロ−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 146c
ジクロロメタン(30mL)中の146b(1.0g、4.0mmol)の溶液にCH3NH2(1.07g、12.0mmol、メタノール中35%)の溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間撹拌し、水(30mL)で希釈した。有機層を分離し、Na2SO4で乾燥して、減圧下で濃縮した。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、146c(450mg、57%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+196.9。
2−アミノ−5−メチル−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 146d
エタノール(30mL)中の146c(450mg、2.3mmol)の溶液をPd/C(10%、400mg)に添加した。反応物に水素ガスを充填し(バルーンを介して)、室温で2時間撹拌した。反応が完了した後、混合物をCELITE(登録商標)のプラグでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して、146dを黄色固体(320mg、84%)として得、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+167.1。
2−(5−ブロモ−1−メチル−2−オキソ−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)−5−メチル−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 146e
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、146d(300mg、1.8mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(482mg、1.8mmol)、炭酸セシウム(1.17g、3.6mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(104mg、0.18mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(82mg、0.090mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、5時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×30mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、146e(390mg、61%)を黄色固体として得た。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチル−6−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 146f
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(165mg、0.40mmol)、146e(141mg、0.40mmol)、K3PO4(170mg、0.80mmol)、酢酸ナトリウム(66mg、0.80mmol)、Pd(dppf)Cl2(15mg、0.020mmol)及びアセトニトリル/水(8/0.2mL)を充填した。混合物を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(30mL)及び水(30mL)で希釈した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン(2×30mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80/1から30/1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、146f(115mg、45%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+641.4。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチル−6−オキソ−4,7−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 146
THF/i−プロパノール/水(4/2/2mL)中の146f(110mg、0.172mmol)の溶液に水酸化リチウム(21mg、0.86mmol)を添加した。混合物を30℃で1時間撹拌した。反応が完了した後、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水(10mL)で希釈し、酢酸エチル(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層を乾燥し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、146を白色固体(45mg、44%)として得た。MS−ESI:[M+H]+599.2。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.41 (s,1H),8.08 (d,J=2.5 Hz,1H),7.91 (d,J=1.5 Hz,1H),7.78 (d,J=13.0 Hz,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),7.42 (d,J=2.5 Hz,1H),6.08 (s,1H),4.91−4.89 (m,1H),4.62 (s,2H),4.57 (s,2H),4.45−4.43 (m,2H),3.61 (s,3H),2.98 (s,3H),1.40 (s,9H).
1−(6−ニトロピリジン−3−イル)アゼチジン−3−オール 147a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、アセトニトリル(50mL)、5−フルオロ−2−ニトロピリジン(1.2g、7.9mmol)、K2CO3(2.1g、15.8mmol)及びアゼチジン−3−オール塩酸塩(1.3g、11.9mmol)を充填した。混合物を60℃で1時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物をジクロロメタン/メタノール(50:1から20:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、147a(1.1g、73%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+196.0。
1−(6−アミノピリジン−3−イル)アゼチジン−3−オール 147b
100mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、147a(1.0g、5.1mmol)、10%パラジウム炭素(10%湿潤品、100mg)及びエタノール(40mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、室温で5時間撹拌した。次に水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、147bを黄色固体(792mg、85%)として得た。MS−ESI:[M+H]+166.1。
5−ブロモ−3−(5−(3−ヒドロキシアゼチジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 147c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、147b(792mg、4.8mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(1.9g、7.2mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(440mg、0.48mmol)、キサントホス(555mg、0.96mmol)、Cs2CO3(3.1g、9.6mmol)及び1,4−ジオキサン(40mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を90℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(50:1から20:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、147cを黄色固体(1.5g、89%)として得た。MS−ESI:[M+H]+351.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−(3−ヒドロキシアゼチジン−1−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 147d
還流冷却器を備えた100mLのフラスコに、147c(285mg、0.81mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(669mg、1.62mmol)、Pd(dppf)Cl2(66.2mg、0.081mmol)、K3PO4(343.4mg、1.62mmol)、酢酸ナトリウム(132.8mg、1.62mmol)、水(0.5mL)及びアセトニトリル(15mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(50:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、147dを褐色固体(140.0mg、27%)として得た。MS−ESI:[M+H]+640.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[4−[5−[[5−(3−ヒドロキシアゼチジン−1−イル)−2−ピリジル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 147
i−プロパノール/THF/水(2:2:1、10mL)中の147d(140mg、0.22mmol)及び水酸化リチウム(132mg、5.5mmol)の混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、水(10mL)で希釈した。生じた混合物をジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、生じた残留物を逆相分取HPLCによって精製して、147(40mg、31%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+598.2。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.57−8.53 (m,3H),8.32 (s,1H),7.90 (s,1H),7.77 (d,J=13.0 Hz,1H),7.51−7.49 (m,2H),7.43 (s,1H),7.19 (d,J=8.5 Hz,1H),6.88 (dd,J=3.0,8.5 Hz,1H),5.57−5.56 (m,1H),4.89−4.87 (m,1H),4.55−4.52 (m,1H),4.43−4.41 (m,2H),4.05−4.02 (m,2H),3.60 (s,3H),3.45−3.42 (m,2H),1.39 (s,9H).
2−メチル−1−(2−ニトロ−6,7−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−5(4H)−イル)プロパン−1−オン 148a
ジクロロメタン(10mL)中の2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 124d(160mg、0.952mmol)の溶液にトリエチルアミン(197mg、1.90mmol)を添加した。室温で5分間撹拌した後、ジクロロメタン(2mL)中の塩化イソブチリル(111.0mg、1.047mmol)の溶液を添加し、混合物を1時間撹拌した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。次にこれを減圧下で濃縮し、148aを白色固体(220mg、97%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+239.0。
1−(2−アミノ−6,7−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−5(4H)−イル)−2−メチルプロパン−1−オン 148b
メタノール(20mL)中の148a(220mg、0.924mmol)の溶液にPd/C(22mg)を添加した。この系を排気し、H2を再充填した。室温で2時間撹拌した後、混合物をろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、148bを黄色固体(190mg、98%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+209.1。
5−ブロモ−3−(5−イソブチリル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 148c
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、148b(190mg、0.913mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(365.6mg、1.37mmol)、Pd2(dba)3(41.7mg、0.0456mmol)、キサントホス(52.8mg、0.0913mmol)、Cs2CO3(595.3mg、1.826mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で3時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をアセトニトリル(2mL)で洗浄し、148cを暗色固体(240mg、67%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+394.2。
3−(5−イソブチリル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 148d
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、148c(220mg、0.558mmol)、Pin2B2(212.6mg、0.837mmol)、Pd2(dba)3(25.5mg、0.0279mmol)、キサントホス(26.6mg、0.0558mmol)、酢酸カリウム(109.4mg、1.12mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に70℃で2時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテルで洗浄し、148dを暗色油(200mg、81%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+442.4。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−イソブチリル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 148e
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(150mg、0.42mmol)、148d(278mg、0.63mmol)、Pd(dppf)Cl2(17.1mg、0.021mmol)、K3PO4(178.1mg、0.84mmol)、酢酸ナトリウム(68.9mg、0.84mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(5滴)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物をアセトニトリル(0.5mL)で洗浄し、148eを白色固体(100mg、37%)として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+638.8。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−(2−メチルプロパノイル)−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル]アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 148
ジクロロメタン(5mL)及びメタノール(5mL)中の148e(90mg、0.141mmol)の溶液にNaBH4(10.7mg、0.282mmol)を添加した。室温で1時間撹拌した後、反応混合物をNH4Cl水溶液でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、148(40mg、44%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+640.8。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.57 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.35−8.28 (m,1H),8.06 (s,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.78 (dd,J=1.0,13.0 Hz,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),7.40 (d,J=2.5 Hz,1H),6.01 (s,1H),4.90−4.88 (m,1H),4.78−4.76 (m,1H),4.64−4.62 (m,1H),4.42−4.41 (m,2H),4.03−3.92 (m,4H),3.59 (s,3H),3.00−2.96 (m,1H),1.40 (s,9H),1.04−1.01 (m,6H).
1−メチル−4−ニトロ−1H−1,2,3−トリアゾール 149a
0℃で4−ニトロ−2H−1,2,3−トリアゾール(2.0g、17.5mmol)及びTHF(10mL)を含む100mLの一首丸底フラスコにNaH(1.7g、35.0mmol、2.0当量)を添加した。混合物を0℃で15分間撹拌した。アセトン(40mL)中のCH3I(3.68g、26.3mmol、1.5当量)の溶液を添加し、生じた反応混合物を室温で2時間撹拌した。この時間後、反応物を0℃で水(20mL)によってクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(100mL)で希釈した。次にこれをブラインで洗浄し、無水Na2SO4で乾燥して、減圧下で濃縮した。残留物を6:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、1−メチル−5−ニトロ−1H−1,2,3−トリアゾール(1.34g、60%)を白色固体として、及び149a(800mg、35%)を微黄色固体として得た。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.34 (s,1H),4.26 (s,3H).1−Methyl−5−nitro−1H−1,2,3−triazole:1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.16 (s,1H),4.31 (s,3H).
1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−4−アミン 149b
実施例148bの手順に従い、149a(800mg、6.25mmol)及び10%パラジウム炭素(50%湿潤品、160mg)から出発して、149bを黄色固体(600mg、98%)として得た。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 6.91 (s,1H),3.97 (s,3H),3.65 (brs,2H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−4−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 149c
実施例148cの手順に従い、149b(500mg、5.10mmol、1.0当量)及び3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(2.04g、7.65mmol、1.5当量)から出発して、149cを黄色固体(760mg、52%)として得た。MS−ESI:[M+H]+283.9。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−4−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 149d
実施例147dの手順に従い、149c(120mg、0.42mmol、1当量)及び3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸(116c)(485mg、1.18mmol、2.8当量)から出発して、149dを黄色固体(120mg、50%)として得た。MS−ESI:[M+H]+573.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(1−メチルトリアゾール−4−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 149
実施例147の手順に従い、149c(90mg、0.16mmol)から出発して、149を白色固体(32mg、38%)として得た。MS−ESI:[M+H]+530.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.65 (d,J=5.0 Hz,1H),8.37 (d,J=1.5 Hz,1H),7.69−7.67 (m,3H),7.60−7.57 (m,2H),7.50 (d,J=5.0 Hz,1H),7.34 (d,J=1.5 Hz,1H),4.53 (s,2H),4.27 (s,1H),4.10 (s,3H),3.74 (s,3H),1.46 (s,9H).
N−メトキシ−N−メチル−3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド 150a
磁気撹拌機を備えた500mLの一首丸底フラスコに、3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(15.7g、1.0当量、100mmol)、N,O−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(19.5g、2.0当量、200mmol)、HATU(76.0g、2.0当量、200mmol)、トリエチルアミン(40.4g、4.0当量、400mmol)及びジクロロメタン(300mL)を充填した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。生じた残留物を100:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、150a(16.0g、80%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+201.1。
3−アミノ−N−メトキシ−N−メチル−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド 150b
250mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、150a(16.0g、1.0当量、80.0mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、800mg)及びメタノール(100mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、水素雰囲気下に室温で一晩撹拌した。その後水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去した。ろ液を減圧下で濃縮し、150b(11.0g、81%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+171.1。
3−(2,5−ジメチル−1H−ピロール−1−イル)−N−メトキシ−N−メチル−1H−ピラゾール−5−カルボキサミド 150c
磁気撹拌機及びディーンスタークトラップを備えた250mLの丸底フラスコに、150b(11.0g、1.0当量、64.7mmol)、ヘキサン−2,5−ジオン(11.1g、1.5当量、97.2mmol)、p−トルエンスルホン酸一水和物(558mg、0.05当量、3.24mmol)及びトルエン(100mL)を充填した。反応混合物を一晩還流した。生じた混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。生じた残留物を1:2 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、150c(10.4g、65%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+249.0。
1−(3−(2,5−ジメチル−1H−ピロール−1−イル)−1H−ピラゾール−5−イル)エタノン 150d
磁気撹拌機を備えた250mLの丸底フラスコに、150c(7.44g、1.0当量、30.0mmol)及びTHF(100mL)を充填した。N2保護下に、MeMgBrの溶液(エーテル中3.0M)(25mL、2.5当量、75.0mmol)を0℃で添加した。混合物を室温で5時間撹拌し、飽和NH4Cl溶液(30mL)でクエンチングした。混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で蒸発させ、残留物を4:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、150dを白色固体(5.40g、89%)として得た。MS−ESI:[M+H]+204.0。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 6.74 (s,1H),5.92 (s,2H),2.61 (s,3H),2.15 (s,6H).
1−(1−(2−ブロモエチル)−3−(2,5−ジメチル−1H−ピロール−1−イル)−1H−ピラゾール−5−イル)エタノン 150e
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの丸底フラスコに、150d(5.4g、1.0当量、26.6mmol)、1,2−ジブロモエタン(20.0g、4.0当量、106.4mmol)、K2CO3(7.34g、2.0当量、53.2mmol)及びアセトニトリル(100mL)を充填した。反応混合物を5時間還流した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を6:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、150e(7.5g、91%)を無色の油として得た。MS−ESI:[M+H]+309.9。
1−(1−(2−ブロモエチル)−3−(2,5−ジメチル−1H−ピロール−1−イル)−1H−ピラゾール−5−イル)エタノール 150f
磁気撹拌機を備えた100mLの丸底フラスコに、150e(2.1g、1.0当量、6.8mmol)、NaBH4(1.29g、5.0当量、34.0mmol)及びメタノール(50mL)を充填した。混合物を室温で2時間撹拌し、水(30mL)でクエンチングした。次にこれを減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタン(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、粗150fを得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+311.9。
2−(2,5−ジメチル−1H−ピロール−1−イル)−4−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン 150g
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、150f(2.0g、1.0当量、6.4mmol)、K2CO3(1.77g、2.0当量、12.8mmol)、アセトニトリル(50mL)を充填した。反応混合物を一晩還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を4:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、150g(550mg、2段階で37%)を無色の油として得た。MS−ESI:[M+H]+232.3。
4−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−アミン 150h
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、150g(550mg、1.0当量、2.38mmol)、ヒドロキシルアミン塩酸塩(827mg、5.0当量、11.9mmol)及びエタノール(30mL)を充填した。混合物を2日間還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、150h(30mg、8%)を黄色油として得た。MS−ESI:[M+H]+154.1。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 5.37 (s,1H),4.73 (q,J=7.0 Hz,1H),4.26−4.23 (m,1H),4.08−4.03 (m,1H),3.91−3.90 (m,1H),3.90−3.87 (m,1H),1.65 (d,J=7.0 Hz,3H).
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(4−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 150i
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、150h(25mg、1.0当量、0.16mmol)、(4−(5−ブロモ−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 142c(181mg、2.0当量、0.32mmol)、Pd2(dba)3(15mg、0.1当量、0.016mmol)、キサントホス(19mg、0.2当量、0.032mmol)、Cs2CO3(105mg、2.0当量、0.32mmol)及びジオキサン(10mL)を充填した。混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、100℃で2時間撹拌した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。生じた残留物を20:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、150iを褐色固体(48mg、48%)として得た。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(4−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[5,1−c][1,4]オキサジン−2−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 150
磁気撹拌機を備えた25mLの丸底フラスコに、150i(48mg、1.0当量、0.077mmol)、水酸化リチウム(9.2mg、5.0当量、0.38mmol)、i−プロパノール/THF(4/4mL)及び水(1mL)を充填した。混合物を室温で1時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、150を黄色固体(6.8mg、15%)として得た。MS−ESI:[M+H]+585.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.66 (d,J=4.5 Hz,1H),8.35 (d,J=2.0 Hz,1H),8.03 (d,J=1.5 Hz,1H),7.59−7.53 (m,4H),7.47 (s,1H),5.72 (s,1H),4.82−4.78 (m,1H),4.52−4.49 (m,2H),4.33−4.30 (m,1H),4.30−4.27 (m,1H),4.02−3.98 (m,3H),3.73 (s,3H),1.54 (d,J=7.0 Hz,3H),1.48 (s,9H).
エチル2−(5−(ヒドロキシメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)アセテート 151a
磁気撹拌機を備えた100mLの一首丸底フラスコに、アセトニトリル(30mL)、(3−ニトロ−1H−ピラゾール−5−イル)メタノール(1.43g、10.0mmol)、Cs2CO3(490mg、1.5mmol)及びエチル2−ブロモアセテート(2.00g、12mmol)を充填した。混合物を40℃で5時間撹拌した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、151a(1.65g、72%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+229.9。
エチル2−(5−(クロロメチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)アセテート 151b
0℃で冷却したCHCl3(60mL)中の151a(1.50g、6.55mmol)の混合物に、内部温度を5℃以下に維持しながらSOCl2(2.34g、19.6mmol)を緩やかに添加した。この反応混合物を50℃に温め、この温度で3時間撹拌した。次にこれを0℃に冷却し、水でクエンチングした。有機層を分離し、減圧下で蒸発させた。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、151b(1.1g、68%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+247.9。
エチル2−(5−((イソプロピルアミノ)メチル)−3−ニトロ−1H−ピラゾール−1−イル)アセテート 151c
151b(500mg、2.04mmol)、プロパン−2−アミン(180mg、3.06mmol)及びジクロロメタン(20mL)の混合物を室温で2時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、151c(400mg、74%)を黄色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+271.1。
5−イソプロピル−2−ニトロ−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 151d
151c(400mg、1.48mmol)とメタノール(30mL)の混合物を50℃で16時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水(80mL)で希釈し、酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、減圧下で濃縮して、151d(300mg、90%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+225.3。
2−アミノ−5−イソプロピル−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 151e
エタノール(20mL)中の151d(220mg、1.0mmol)の溶液にPd/C(10%、22mg)を添加した。反応混合物に水素ガスを充填し(バルーンを介して)、室温で1時間撹拌した。反応混合物をCELITE(登録商標)のプラグでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮して、151eを黄色固体(180mg、92%)として得、これを更に精製することなく使用した。MS−ESI:[M+H]+195.3。
2−(5−ブロモ−1−メチル−2−オキソ−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)−5−イソプロピル−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 151f
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、151e(200mg、1.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(268mg、1.0mmol)、Pd2(dba)3(50mg、0.050mmol)、キサントホス(58mg、0.10mmol)、Cs2CO3(652mg、2.0mmol)及び1,4−ジオキサン(20mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、100℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(2×10mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン/メタノール(80:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、151f(300mg、79%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+380.2。
5−イソプロピル−2−(1−メチル−2−オキソ−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)−4,5−ジヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−6(7H)−オン 151g
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、151f(200mg、0.52mmol)、Pin2B2(330mg、1.3mmol)、Pd2(dba)3(25mg、0.026mmol)、キサントホス(25mg、0.052mmol)、酢酸カリウム(150mg、1.5mmol)及び1,4−ジオキサン(10mL)を充填した。混合物を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、65℃で4時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を石油エーテルで洗浄し、粗151g(300mg、純度:50%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+428.2。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−イソプロピル−6−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 151h
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソイソキノリン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(108mg、0.30mmol)、151g(256mg、0.60mmol)、K3PO4(127mg、0.60mmol)、酢酸ナトリウム・水(82mg、0.60mmol)、Pd(dppf)Cl2(12mg、0.015mmol)、水(0.5mL)及びアセトニトリル(8mL)を充填した。反応混合物を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に80℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(20mL)及び水(10mL)で希釈した。有機層を分離し、水層をジクロロメタン(2×10mL)で抽出した。合わせた有機抽出物をNa2SO4で乾燥し、ろ過して、減圧下で濃縮した。暗色残留物をジクロロメタン/メタノール(80:1から30:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、151h(90mg、48%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+625.2。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(5−(5−イソプロピル−6−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 151
25mLの一首丸底フラスコに、151h(90mg、0.14mmol)、NaBH4(18mg、0.42mmol)及びメタノール(5mL)を充填した。混合物を室温で1時間撹拌し、減圧下で濃縮した。生じた残留物に水(10mL)を添加し、混合物をジクロロメタン(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、151(50mg、55%)を得た。MS−ESI:[M+H]+626.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.67 (d,J=5.0 Hz,1H),8.36 (d,J=2.5 Hz,1H),8.02 (d,J=2.0 Hz,1H),7.59−7.58 (m,3H),7.55−7.52 (m,2H),5.90 (s,1H),5.07−5.05 (m,1H),4.74 (s,2H),4.50−4.47 (m,4H),4.09−4.06 (m,1H),3.73 (s,3H),1.45 (s,9H),1.26 (d,J=7.0 Hz,6H).
tert−ブチル3−アミノ−1H−ピラゾール−1−カルボキシレート 152a
1,4−ジオキサン(35mL)中の3−アミノピラゾール(3.0g、36mmol)及びトリエチルアミン(7.6g、75mmol)の混合物に(Boc)2O(7.8g、36mmol)を添加した。反応混合物を25℃で2時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮した。残留物を3:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムによって精製し、152aを白色固体(3.4g、52%)として得た。MS−ESI:[M+H]+184.1。
3−(1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−5−ブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 152b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、152a(2.2g、12mmol)、キサントホス(0.69g、1.2mmol)、Pd2(dba)3(1.1g、1.2mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(6.4g、24mmol)、Cs2CO3(15.6g、48mmol)及び1,4−ジオキサン(50mL)を充填した。生じた混合物に窒素を10分間通気した後、これを105℃で15時間加熱した。混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留混合物をメタノール(8mL)で洗浄して、152bを淡黄色固体(1.2g、37%)として得た。MS−ESI:[M+H]+269.1。
(4−(5−(1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 152c
磁気撹拌機を備えた封管に、152b(200mg、0.74mmol)、(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 116c(370mg、0.74mmol)、Pd(dppf)Cl2(30mg、0.035mmol)、酢酸ナトリウム(74mg、0.90mmol)、K3PO4(191mg、0.90mmol)及びアセトニトリル/水(5mL/0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を10:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、152c(100mg、25%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+558.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−6−オキソ−5−(1H−ピラゾール−3−イルアミノ)−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 152
THF(8mL)、i−プロパノール(8mL)及び水(2mL)中の152c(100mg、0.18mmol)及び水酸化リチウム水和物(84mg、2.0mmol)の混合物を40℃で半時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(2×10mL)で抽出した。合わせた抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、152(6.5mg、7%)を淡黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+515.8。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.62−8.61 (m,1H),8.32 (s,1H),8.04 (m,1H),7.55−7.53 (m,4H),7.50−7.49 (m,1H),7.44 (s,1H),6.01(s,1H),4.49−4.48 (m,2H),3.71 (s,3H),1.45 (s,9H).
6−クロロ−2−メチル−4−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 153a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(30mL)、5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 128b(1.70g、11.2mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(2.68g、12.0mmol)及び炭酸セシウム(7.30g、22.4mmol)を充填した。懸濁液に窒素を30分間通気した後、キサントホス(0.59g、1.02mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(467mg、0.51mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュに供し、90℃で2時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を30:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、153a(1.9g、60%)を褐色固体として得た。LCMS:[M+H]+295.1。
1−メチル−5−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イルボロン酸 153b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、153a(200mg、0.68mmol)、ビス(ピナコラト)ジボロン(Pin2B2、863mg、3.40mmol)、Pd2(dba)3(55mg、0.060mmol)、キサントホス(60mg、0.12mmol)、酢酸カリウム(60mg、1.36mmol)及び1,4−ジオキサン(10mL)を充填した。この系を排気し、その後N2を再充填した。次にこれを50℃で2時間加熱した。反応の完了後、混合物をろ過し、固体を酢酸エチル(10mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で蒸発させ、153bを淡黄色固体として得て、これを次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+305.1。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチル−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 153c
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、153b(200mg、0.66mmol)、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(240mg、0.66mmol)、PdCl2(dppf)(54mg、0.066mmol)、K3PO4(250mg、1.2mmol)、酢酸ナトリウム(100mg、1.20mmol)、アセトニトリル(10mL)及び水(0.5mL)を充填した。この系を排気し、その後N2を再充填した。次にこれを100℃で1時間加熱した。混合物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を20:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムで精製して、153cを淡黄色固体(170mg、42%)として得た。MS−ESI:[M+H]+584.3。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチル−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル)アミノ]−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 153
メタノール(5mL)中の153c(170mg、0.29mmol)及びNaBH4(20mg、0.50mmol)の混合物を室温で半時間撹拌した。その後反応混合物を水(7mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン(2×10mL)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCで精製して、153を淡黄色固体(35mg、21%)として得た。MS−ESI:[M+H]+586.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.39 (s,1H),8.63 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.0 Hz 1H),7.93 (s,1H),7.90 (d,J=2.0 Hz,1H),7.77 (dd,J=1.5,12.5 Hz,1H),7.60−7.59 (m,1H),6.03 (s,1H),4.82−4.81 (m,1H),4.51−4.45 (m,2H),4.01−3.98 (m,2H),3.77 (s,3H),3.62−3.60 (m,2H),2.90−2.86 (m,2H),2.42−2.40 (m,3H),1.34 (s,9H).
1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−5−アミン 154a
50mLの丸底フラスコを窒素でパージし、実施例149aからの1−メチル−5−ニトロ−1H−1,2,3−トリアゾール(0.78g、6.09mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、160mg)及びメタノール(20mL)を充填した。フラスコを排気し、水素ガスを充填して、室温で4時間撹拌した。次に水素を排気し、窒素をフラスコに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、154a(418mg、70%)を黄色固体として得た。MS:[M+H]+99.3。
5−ブロモ−1−メチル−3−(1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−5−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 154b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(20mL)、154a(500mg、5.10mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(1362mg、5.10mmol)及び炭酸セシウム(3.325g、10.2mmol)を充填した。懸濁液に窒素を20分間通気した後、キサントホス(0.59g、1.02mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(467mg、0.51mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、5時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、154b(220mg、15%)を褐色固体として得た。LCMS:[M+H]+284.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(1−メチル−1H−1,2,3−トリアゾール−5−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 154c
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、154b(100mg、0.35mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(174mg、0.42mmol)、Pd(dppf)Cl2(29mg、0.035mmol)、酢酸ナトリウム(57mg、0.70mmol)、K3PO4三水和物(186mg、0.70mmol)、水(6滴)及びアセトニトリル(6mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を25:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、154c(85mg、42%)を褐色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+573.4。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(3−メチルトリアゾール−4−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 154
i−プロパノール/THF(1:1、4mL)及び水(1mL)中の154c(85mg、0.15mmol)及び水酸化リチウム(36mg、1.5mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(5mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(2×10mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、表題化合物(11mg、16%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+531.4。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.54−8.53 (m,2H),8.03 (s,1H),7.91 (d,J=1.5 Hz,1H),7.80−7.76 (m,1H),7.75 (s,1H),7.55 (d,J=2.5 Hz,1H),7.52 (d,J=5.0 Hz,1H),6.89 (d,J=2.5 Hz,1H),5.04 (t,J=5.0 Hz,1H),4.34 (d,J=5.0 Hz,2H),3.88 (s,3H),3.63 (s,3H),1.40 (s,9H).
2−ニトロ−5−(オキセタン−3−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 155a
メタノール(10mL)中の2−ニトロ−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン 124d(238mg、1.40mmol)、オキセタン−3−オン(252mg、3.5mmol)、NaBH3CN(260mg、4.2mmol)及び塩化亜鉛(567mg、4.2mmol)の混合物を50℃で6時間撹拌した。混合物を水に添加し、ジクロロメタンで3回抽出した。合わせた有機層を減圧下で濃縮し、残留物を50:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、155a(200mg、64%)を得た。MS:[M+H]+225.3。
5−(オキセタン−3−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−アミン 155b
50mLの一首丸底フラスコを窒素でパージし、155a(0.20g、0.89mmol)、10%パラジウム炭素(50%湿潤品、89mg)及びメタノール(10mL)を充填した。混合物を排気し、水素ガスを充填して、室温で2時間撹拌した。その後水素を排気し、窒素をビンに充填した。触媒をCELITE(登録商標)のパッドでろ過することによって除去し、ろ液を減圧下で濃縮して、155b(140mg、81%)を得た。MS:[M+H]+195.1。
6−クロロ−2−メチル−4−(5−(オキセタン−3−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)ピリダジン−3(2H)−オン 155c
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(25mL)、155b(640mg、3.3mmol)、4−ブロモ−6−クロロ−2−メチルピリダジン−3(2H)−オン(1.1g、4.95mmol)、Pd2(dba)3(302mg、0.33mmol)、キサントホス(381mg、0.66mmol)及び炭酸セシウム(2.15g、6.6mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を酢酸エチルで洗浄し、155c(754mg、68%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+337.3。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−(オキセタン−3−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリダジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 155d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、155c(367mg、1.1mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(908.6mg、2.2mmol)、Pd2(dba)3(100.6mg、0.11mmol)、P(cy)3(122.8mg、0.44mmol)、Cs2CO3(717mg、2.2mmol)、ジオキサン(20mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を110℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を35:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、155d(120mg、16%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+669.8。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[[5−(オキセタン−3−イル)−6,7−ジヒドロ−4H−ピラゾロ[1,5−a]ピラジン−2−イル]アミノ]−6−オキソ−ピリダジン−3−イル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 155
i−プロパノール/THF(1:1、8mL)及び水(1mL)中の155d(117mg、0.175mmol)及び水酸化リチウム・水(73.5mg、1.75mmol)の混合物を35℃で半時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(6mL)で希釈した。次にこれをジクロロメタン(3×50mL)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、155(30mg、27%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+628.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.40 (s,1H),8.64 (d,J=5.5 Hz,1H),8.55 (d,J=2.0 Hz,1H),7.94 (s,1H),7.90 (d,J=1.5 Hz,1H),7.79−7.77 (m,1H),7.61 (d,J=4.5 Hz,1H),6.04 (s,1H),7.61−7.60 (m,1H),4.61−4.59 (m,2H),4.50−4.45 (m,4H),4.01−3.99 (m,2H),3.78 (s,3H),3.69−3.65 (m,1H),3.54 (s,2H),2.79−2.76 (m,2H),1.39 (s,9H).
5−フルオロ−N,N−ビス(4−メトキシベンジル)ピリジン−2−アミン 156
100mLの丸底フラスコに、25℃で5−フルオロピリジン−2−アミン(1.12g、10.0mmol)、NaH(288mg、12.0mmol)及びTHF(20mL)を充填した。4−メトキシベンジルクロリド(1.87g、12.0mmol)を添加し、25℃で2時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮した。水(30mL)を残留物に添加し、生じた混合物をジクロロメタン(3×80mL)で抽出した。合わせた抽出物をNa2SO-4で乾燥し、ろ過して、減圧下で蒸発させた。残留物を1:9 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、156a (620mg、18%)を黄色液体として得た。MS−ESI:[M+H]+353.0。
2−(6−(ビス(4−メトキシベンジル)アミノ)ピリジン−3−イル)−2−メチルプロパンニトリル 156b
磁気撹拌機を備えた25mLの封管に、156a(528mg、1.5mmol)、KHMDS(15mmol、15mL、1mol/L THF)及びイソブチロニトリル(1.03g、15mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を85℃で8時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、水でクエンチングした。混合物を減圧下で濃縮し、残留物を酢酸エチル(3×20mL)で抽出した。合わせた抽出物をNa2SO-4で乾燥し、ろ過して、減圧下で蒸発させ、156b(514mg、85%)を黄色液体として得た。MS−ESI:[M+H]+402.0。
2−(6−アミノピリジン−3−イル)−2−メチルプロパンニトリル 156c
CF3COOH(15mL)中の156b(514mg、1.28mmol)の溶液を60℃で2時間撹拌した。この時間後、反応物を室温に冷却した。次にこれを減圧下で蒸発させ、残留物を石油エーテル及び酢酸エチルで洗浄して、156c(600mg、粗生成物)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+162.3。
2−(6−(5−ブロモ−1−メチル−2−オキソ−1,2−ジヒドロピリジン−3−イルアミノ)ピリジン−3−イル)−2−メチルプロパンニトリル 156d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、1,4−ジオキサン(35mL)、156c(483mg、3.0mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(1.6g、6.0mmol)、Pd2(dba)3(274.5mg、0.30mmol)、キサントホス(346.8mg、0.60mmol)及び炭酸セシウム(4.59g、15mmol)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で3時間加熱した。この時間後、反応物を室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を1:1 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、156d(400mg、38%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+347.0。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−(2−シアノプロパン−2−イル)ピリジン−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 156e
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた100mLの一首丸底フラスコに、156d(346mg、1.0mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(1.65g、4.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(82.5mg、0.10mmol)、酢酸カリウム(196mg、2.0mmol)、K3PO4(424mg、2.0mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(0.5mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を95℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を10:1 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、156e(210mg、33%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+635.8。
2−[6−[[5−[2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2−イル)−3−(ヒドロキシメチル)−4−ピリジル]−1−メチル−2−オキソ−3−ピリジル]アミノ]−3−ピリジル]−2−メチル−プロパンニトリル 156
i−プロパノール/THF(1:1、8mL)及び水(2mL)中の156e(191mg、0.30mmol)及び水酸化リチウム・1水(126mg、3.0mmol)の混合物を35℃で半時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、水(10mL)で希釈した。次にこれをジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、156(30mg、17%)を淡黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+594.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 8.83 (s,1H),8.77 (d,J=2.0 Hz,1H),8.59 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.5 Hz,1H),8.34 (d,J=2.5 Hz,1H),7.91 (s,1H),7.79−7.74 (m,2H),7.57−7.53 (m,2H),7.40 (d,J=9.0 Hz,1H),4.92 (bs,1H),4.43 (s,2H),3.62 (s,3H),1.67 (s,6H),1.39 (s,9H).
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソチアゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 157a
25mLの封管に、(4−(5−ブロモ−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 142c(155mg、0.28mmol)、4−フルオロ−2−(1−オキソ−5−メチルイソチアゾール−3−アミン塩酸塩(55mg、0.33mmol)、Cs2CO3(183mg、0.56mmol)、Pd2(dba)3(27mg、0.030mmol)、キサントホス(35mg、0.060mmol)及びDMF(10mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物をマイクロ波照射下に110℃で1時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、減圧下で蒸発させた。残留物を20:1 塩化メチレン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムによって精製し、157aを黄色固体(64mg、39%)として得た。MS−ESI:[M+H]+589.2。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルイソチアゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 157
THF/i−プロパノール/水(4mL/4mL/1mL)中の157a(60mg、0.10mmol)の溶液に水酸化リチウム(24mg、1.0mmol)を添加した。反応混合物を室温で半時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残留物を水(10mL)で希釈し、酢酸エチル(3×15mL)で抽出した。合わせた有機層をNa2SO4で乾燥し、濃縮して、黄色固体を得、これを逆相分取HPLCによって精製して、157を黄色固体(27mg、50%)として得た。MS−ESI:[M+H]+546.7。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6 )δ 9.28 (s,1H),8.60−8.54 (m,3H),7.90 (s,1H),7.78 (d,J=16.0 Hz,1H),7.55−7.50 (m,2H),7.04 (s,1H),4.89 (t,J=6.5 Hz,1H),4.43−4.41 (m,2H),3.61 (s,3H),2.48 (s,3H),1.40 (s,9H).
5−ブロモ−3−(5−エチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 158a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの一首丸底フラスコに、5−エチルイソオキサゾール−3−アミン(250mg、2.23mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(893mg、3.35mmol)、Pd2(dba)3(102mg、0.112mmol)、キサントホス(129mg、0.223mmol)、Cs2CO3(1.45g、4.46mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で3時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、158a(300mg、45%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+297.8。
3−(5−エチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 158b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、158a(250mg、0.839mmol)、Pin2B2(320mg、1.26mmol)、Pd2(dba)3(38.4mg、0.042mmol)、キサントホス(48.5mg、0.0839mmol)、酢酸カリウム(164.4mg、1.678mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に70℃で2時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮した。残留物を石油エーテルで洗浄し、158b(330mg、粗生成物)を暗色固体として得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+346.0。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5−エチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 158c
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(160mg、0.44mmol)、158b(228mg、0.66mmol)、Pd(dppf)Cl2(18mg、0.022mol)、K3PO4(187mg、0.88mmol)、酢酸ナトリウム(72.2mg、0.88mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(5滴)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、N2保護下に100℃で1時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を40:1 ジクロロメタン/メタノールで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、158c(210mg、88%)を黄色油として得た。MS−ESI:[M+H]+543.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[(5−エチルイソオキサゾール−3−イル)アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 158
ジクロロメタン(5mL)及びメタノール(5mL)中の158c(190mg、0.35mmol)の溶液にNaBH4(26.5mg、0.70mmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間撹拌し、NH4Cl水溶液でクエンチングした。次にこれを減圧下で濃縮し、残留物をジクロロメタンで抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を逆相分取HPLCによって精製し、158(70mg、37%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+545.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.01 (s,1H),8.58 (d,J=5.0 Hz,1H),8.54 (d,J=2.0 Hz,1H),8.01 (d,J=2.0 Hz,1H),7.90 (s,1H),7.79 (d,J=13 Hz,1H),7.57 (d,J=2.5 Hz,1H),7.51 (d,J=5.0 Hz,1H),6.26 (s,1H),4.90 (s,1H),4.44−4.43 (m,2H),3.61 (s,3H),2.69−2.65 (m,2H),1.40 (s,9H),1.19 (t,J=8.0 Hz,3H)
2−(ジフルオロメチル)−4−ニトロ−2H−1,2,3−トリアゾール 159a
4−ニトロ−2H−1,2,3−トリアゾール(500mg、4.38mmol、1.0当量)、2−クロロ−2,2−ジフルオロ酢酸ナトリウム(1310mg、8.76mmol、2.0当量)、K2CO3(1140mg、8.76mmol、2.0当量)及びアセトニトリル(20mL)を含む100mLの一首丸底フラスコを5時間還流撹拌した。室温に冷却した後、反応混合物をろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物を4:1 石油エーテル/酢酸エチルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、159a(350mg、48%)を褐色液体として得た。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.38 (s,1H),7.39 (t,J=57.5 Hz,1H).
2−(ジフルオロメチル)−2H−1,2,3−トリアゾール−4−アミン 159b
実施例151eの手順に従い、159a(300mg、1.83mmol)及び10% パラジウム炭素(50%湿潤品、60mg)から出発して、159bを黄色液体(200mg、81%)として得た。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 7.24 (s,1H),7.14 (t,J=58.5 Hz,1H),4.08 (brs,2H).
5−ブロモ−3−(2−(ジフルオロメチル)−2H−1,2,3−トリアゾール−4−イルアミノ)−1−メチルピリジン−2(1H)−オン 159c
実施例151fの手順に従い、159b(170mg、1.25mmol、1.0当量)及び3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(504g、1.89mmol、1.5当量)から出発して、159cを明黄色固体(280mg、70%)として得た。MS−ESI:[M+H]+320.1。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(2−(ジフルオロメチル)−2H−1,2,3−トリアゾール−4−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 159d
実施例152cの手順に従い、159c(150mg、0.46mmol、1.0当量)及び3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸(116c)(285mg、0.69mmol、1.5当量)から出発して、159dを黄色固体(90mg、32%)として得た。MS−ESI:[M+H]+609.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−[[2−(ジフルオロメチル)トリアゾール−4−イル]アミノ]−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 159
実施例152の手順に従い、159d(80mg、0.13mmol)から出発して、159を白色固体(29mg、40%)として得た。MS−ESI:[M+H]+567.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.70 (d,J=5.0 Hz,1H),8.36 (d,J=2.0 Hz,1H),8.15 (d,J=2.0 Hz,1H),7.84 (s,1H),7.74 (d,J=2.0 Hz,1H),7.62−7.53 (m,4H),7.25 (t,J=59.0 Hz,1H),4.50 (s,2H),4.09 (t,J=6.5 Hz,1H),3.75 (s,3H),1.45 (s,9H).
5−ブロモ−1−メチル−3−(ピラジン−2−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 160a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた250mLの一首丸底フラスコに、ピラジン−2−アミン(1.0g、10mmol)、3,5−ジブロモ−1−メチルピリジン−2(1H)−オン(2.7g、10mmol)、Pd2(dba)3(460mg、0.50mmol)、キサントホス(600mg、1.0mmol)、炭酸セシウム(6.52g、20mmol)及び1,4−ジオキサン(150mL)を充填した。3サイクルの減圧/アルゴンフラッシュ後、混合物を100℃で2時間加熱した。次にこれをろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた。残留物をメタノールで再結晶化することによって精製し、160a(1.3g、47%)を明緑色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+281.0。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−6−オキソ−5−(ピラジン−2−イルアミノ)−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 160b
還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、160a(140mg、0.50mmol)、3−(アセトキシメチル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−4−イルボロン酸 116c(410mg、1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(25mg、0.025mmol)、K3PO4(220mg、1.0mmol)、酢酸ナトリウム三水和物(136mg、1.0mmol)、アセトニトリル(15mL)及び水(0.5mL)を充填した。この系を排気し、N2を再充填した。反応混合物を100℃で1時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、生じた残留物をジクロロメタン/メタノール(100:1から25:1)で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して、160b(150mg、52%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+570.2。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−[3−(ヒドロキシメチル)−4−[1−メチル−6−オキソ−5−(ピラジン−2−イルアミノ)−3−ピリジル]−2−ピリジル]フタラジン−1−オン 160
THF/i−プロパノール(4:2、6mL)及び水(2mL)中の160b(120mg、0.21mmol)及び水酸化リチウム一水和物(88mg、2.1mmol)の混合物を30℃で1時間撹拌した。混合物を減圧下で蒸発させ、残留物を水(10mL)で希釈した。次にこれを酢酸エチル(2×20mL)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、160(50mg、45%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+527.8。1H NMR (500 MHz,CHCl3)δ 8.78 (d,J=2.5 Hz,1H),8.71 (d,J=5.0 Hz,1H),8.36 (d,J=2.0 Hz,1H),8.31 (s,1H),8.19 (s,1H),8.14 (s,1H),8.05 (d,J=2.0 Hz,1H),7.81 (d,J=2.5 Hz,1H),7.59 (s,1H),7.56−7.55 (m,2H)
1−メチル−3−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−5−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2−イル)ピリジン−2(1H)−オン 161a
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた50mLの丸底フラスコに、5−ブロモ−1−メチル−3−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)ピリジン−2(1H)−オン 129a(330mg、1.16mmol)、Pin2B2(442mg、1.74mmol)、Pd2(dba)3(53mg、0.058mmol)、キサントホス(55mg、0.116mmol)、酢酸カリウム(227mg、2.32mmol)及びジオキサン(20mL)を充填した。3サイクルの減圧/N2フラッシュ後、混合物を70℃で2時間加熱した。LCMSによる反応混合物の分析は、所望生成物への完全な変換を示した。これを室温に冷却し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を石油エーテルで洗浄して、161a(300mg、78%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+332.3。
2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ニコチンアルデヒド 161b
還流冷却器を備えた100mLの丸底フラスコに、2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−クロロニコチンアルデヒド 103b(390mg、1.08mmol)、161a(537mg、1.62mmol)、炭酸セシウム(704mg、2.16mmol)、1,4−ジオキサン(30mL)及び水(3mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、Cy3P(121mg、0.43mmol)及びPd2(dba)3(99mg、0.11mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、3時間加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(3×20mL)で洗浄した。合わせたろ液を減圧下で濃縮し、残留物を20:1 酢酸エチル/石油エーテルで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製して、161b(300mg、52%)を得た。MS−ESI:[M+H]+528.8。
6−tert−ブチル−8−フルオロ−2−(3−(ヒドロキシメチル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−2−イル)フタラジン−1(2H)−オン 161c
メタノール(10mL)中の161b(300mg、0.57mmol)の溶液に室温でNaBH4(108mg、2.85mmol)を添加した。反応物を6時間撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。次にこれを水(10mL)でクエンチングし、減圧下で濃縮した。生じた残留物をジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(20mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留固体を石油エーテル/酢酸エチル(1:20から100%酢酸エチル)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、161c(164mg、54%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+530.8。
ジベンジル(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルホスファイト 161d
アセトニトリル中の161c(100mg、0.19mmol)、ジベンジルジイソプロピルホスホルアミダイト(85mg、0.25mmol)、1H−テトラゾール(27mg、0.38mmol)の混合物を室温で1時間撹拌した。LCMSは更なる反応を示さなかった。161dを含む混合物を、更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+775.3。
ジベンジル(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(1−メチル−5−(5−メチルイソオキサゾール−3−イルアミノ)−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルホスフェート 161e
アセトニトリル中の161dの混合物にm−クロロ過安息香酸(49mg、0.28mmol)を添加した。反応混合物を室温で5分間撹拌し、ろ過した。ろ液を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、161e(15mg、2段階で10%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+791.3。
[2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソ−フタラジン−2−イル)−4−[1−メチル−5−[(5−メチルイソオキサゾール−3−イル)アミノ]−6−オキソ−3−ピリジル]−3−ピリジル]メチル二水素ホスフェート 161
トリフルオロ酢酸(297mg、2.60mmol)中の161e(10mg、0.013mmol)の混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相分取HPLCによって精製して、161(6.7mg、84%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+611.3。1H NMR (500 MHz,DMSO−d6)δ 9.00 (s,1H),8.61 (m,1H),8.50 (bs,1H),8.02 (s,1H),7.87−7.72 (m,3H),7.53 (m,1H),6.27 (s,1H),4.61−4.56 (m,2H),3.46 (s,3H),2.33 (s,3H),1.31 (s,9H).
5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−カルボン酸 162a
還流冷却器を備えた25mLの丸底フラスコに、エチル5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−カルボキシレート(540mg、3.0mmol)、2N水酸化ナトリウム水溶液(3.5mL)及び1,4−ジオキサン(3.0mL)を充填した。この系を65℃で2時間半加熱した。次にこれを室温に冷却し、濃塩酸でpHを2〜3に調整した。固体をろ過によって収集し、162a(260mg、57%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+153.3。
tert−ブチル5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−イルカルバメート 162b
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、162a(197.6mg、1.3mmol)、tert−ブタノール(5.0mL)、トリエチルアミン(262.6mg、2.6mmol)及びDPPA(550mg、2.0mmol)を充填した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、85℃で5時間加熱した。次にこれを室温に冷却し、コンビフラッシュ(A:1%NH4HCO3/水、B:アセトニトリル)で精製して、162b(45mg、15.5%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H−56]+168.3。
5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−アミン 162c
ジクロロメタン(1.5mL)中の162b(45mg、0.20mmol)の溶液に室温でトリフルオロ酢酸(1mL)を添加した。溶液を5時間撹拌した。次にこれを減圧下で濃縮し、162cを得て、これを更に精製することなく次の段階で使用した。MS−ESI:[M+H]+124.3。
(2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)−4−(5−(5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 162d
磁気撹拌機及び還流冷却器を備えた25mLの一首丸底フラスコに、(4−(5−ブロモ−1−メチル−6−オキソ−1,6−ジヒドロピリジン−3−イル)−2−(6−tert−ブチル−8−フルオロ−1−オキソフタラジン−2(1H)−イル)ピリジン−3−イル)メチルアセテート 142c(166.2mg、0.30mmol)、162c(24.6mg、0.20mmol)、炭酸セシウム(130mg、0.40mmol)及び1,4−ジオキサン(4.0mL)を充填した。懸濁液に窒素を10分間通気した後、キサントホス(23mg、0.040mmol)及びトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0)(14mg、0.020mmol)を添加した。この系を3サイクルの減圧/窒素フラッシュに供し、2時間半加熱還流した。次にこれを室温に冷却し、ろ過した。固体をジクロロメタン(3×10mL)で洗浄した。合わせた有機層を減圧下で濃縮した。残留物をジクロロメタン/メタノール(100:1から50:1)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィによって精製し、162d(50mg、42%)を黄色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+598.3。
6−tert−ブチル−2−[4−[5−(5,6−ジヒドロ−4H−ピロロ[1,2−b]ピラゾール−2−イルアミノ)−1−メチル−6−オキソ−3−ピリジル]−3−(ヒドロキシメチル)−2−ピリジル]−8−フルオロ−フタラジン−1−オン 162
THF/i−プロパノール/水(1/1/0.5mL)中の162d(50mg、0.080mmol)の溶液に室温で水酸化リチウム(19mg、0.80mmol)を添加した。反応物を2時間半撹拌した後、LCMSは反応が完了したことを示した。次に混合物を水(15mL)に注ぎ入れ、ジクロロメタン(3×20mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(30mL)で洗浄し、Na2SO4で乾燥して、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留固体を逆相分取HPLC(A:1%NH4HCO3/水、B:アセトニトリル)によって精製し、162(15mg、33.3%)を白色固体として得た。MS−ESI:[M+H]+556.3。1H NMR (500 MHz,CDCl3)δ 8.62 (d,J=5.0 Hz,1H),8.32 (s,1H),7.93 (d,J=2.0 Hz,1H),7.55−7.47 (m,4H),7.26 (s,1H),5.74 (s,1H),4.47 (d,J=4.0 Hz,2H),4.07 (t,J=2.0 Hz,2H),3.70 (s,3H),2.87 (t,J=6.5 Hz,2H),2.55−2.52 (m,2H),1.45 (s,9H).
式I及びIIの化合物を試験するのに使用できる標準的な生化学的Btkキナーゼアッセイのための一般手順は以下の通りである。1×細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液(25mM トリス−HCl、pH7.5、5mM β−グリセロリン酸、2mMジチオトレイトール、0.1mM Na3VO4、10mM MgCl2)、0.5μM Promega PTKビオチン化ペプチド基質2、及び0.01%BSAを含有するマスターミックスマイナスBtk酵素を調製する。1×細胞シグナル伝達キナーゼ緩衝液、0.5μM PTKビオチン化ペプチド基質2、0.01%BSA、及び100ng/ウェル(0.06mU/ウェル)Btk酵素を含有するマスターミックスプラスBtk酵素を調製する。Btk酵素は以下のように調製する:C末端にV5及び6×Hisタグを有する完全長ヒト野生型Btk(受託番号NM−000061)を、このエピトープタグBtkを担持するバキュロウイルスを作製するためにpFastBacベクターにサブクローニングした。バキュロウイルスの作製は、Invitrogenの公表されているプロトコル「Bac−to−Bac Baculovirus Expression Systems」(カタログ番号10359−016及び10608−016)において詳述されるInvitrogenの指示書に基づいて行う。第3継代のウイルスを使用してSf9細胞に感染させ、組換えBtkタンパク質を過剰発現させる。次にNi−NTAカラムを使用してBtkタンパク質を均一に精製する。最終タンパク質調製物の純度は、高感度Sypro−Ruby染色に基づき95%を上回る。200μM ATPの溶液を水中で調製し、1N NaOHでpH7.4に調整する。5%DMSO中1.25μLの量の化合物を96ウェル1/2面積Costarポリスチレンプレートに移す。化合物を個別に、11点の用量−応答曲線で試験する(出発濃度は10μM;1:2希釈である)。18.75μL量のマスターミックスマイナス酵素(陰性対照として)及びマスターミックスプラス酵素を96ウェル1/2面積Costarポリスチレンプレート中の適切なウェルに移す。200μM ATP 5μLを96ウェル1/2面積Costarポリスチレンプレート中の前記混合物に添加し、最終ATP濃度を40μMにする。反応物を室温で1時間インキュベートする。30mM EDTA、20nM SA−APC及び1nM PT66 Abを含有するPerkin Elmer 1×検出緩衝液で反応を停止させる。励起フィルタ330nm、発光フィルタ665nm及び第二発光フィルタ615nmを使用して、Perkin Elmer Envisionによる時間分解蛍光法を用いてプレートを読み取る。その後IC50値を計算する。あるいは、Lanthascreenアッセイを使用して、Btkのリン酸化ペプチド生成物の定量を介してBtk活性を評価することができる。ペプチド生成物上のフルオレセインと検出抗体上のテルビウムとの間で起こるFRET(蛍光共鳴エネルギー転移)は、ペプチドのリン酸化を減少させるBtkの阻害剤の添加と共に減少する。25μLの最終反応物容量中、Btk(h)(0.1ng/25μL反応物)を50mM Hepes pH7.5、10mM MgCl2、2mM MnCl2、2mM DTT、0.2mM NaVO4、0.01%BSA、及び0.4μMフルオレセインポリ−GATと共にインキュベートする。ATPを25μM(ATPのKm)まで添加することによって反応を開始させる。室温で60分間インキュベートした後、60mM EDTA中最終濃度2nMのTb−PY20検出抗体を室温で30分間添加することによって反応を停止させる。検出値を、340nM励起並びに495nm及び520nm発光を用いてPerkin Elmer Envisionで決定する。例示的なBtk阻害のIC50値を表1、2及び3に示す。
式I及びIIの化合物を試験するのに使用できる標準的な細胞Btkキナーゼアッセイのための別の一般手順は以下の通りである。ラモス細胞を、0.5×107細胞/mlの密度で試験化合物の存在下に37℃で1時間インキュベートする。次に10μg/ml抗ヒトIgM F(ab)2と共に37℃で5分間インキュベートすることによって細胞を刺激する。細胞をペレット化し、溶解して、透明溶解物に関してタンパク質アッセイを実施する。各々の試料の等しいタンパク質量を、Btk自己リン酸化を評価するための抗ホスホBtk(Tyr223)抗体(Cell Signaling Technology No.3531;Epitomics、カタログ番号2207−1)もしくは抗ホスホBtk(Tys551)抗体(BD Transduction Labs No.558034)、又は各溶解物中のBtkの総量を制御するための抗Btk抗体(BD Transduction Labs No.611116)のいずれかを用いたSDS−PAGE及びウェスタンブロット法に供する。
式I及びIIの化合物を試験するのに使用できる標準的なB細胞増殖アッセイのための一般手順は以下の通りである。B細胞単離キット(Miltenyi Biotech、カタログ番号130−090−862)を用いて8〜16週齢のBalb/cマウスの脾臓からB細胞を精製する。試験化合物を0.25%DMSOに希釈し、2.5×105精製マウス脾臓B細胞と共に30分間インキュベートした後、10μg/mlの抗マウスIgM抗体(Southern Biotechnology Associates、カタログ番号1022−01)を100μlの最終容量で添加する。24時間のインキュベーション後、1μCi 3H−チミジンを添加し、プレートを更に36時間インキュベートした後、SPA[3H]チミジン取り込みアッセイシステム(Amersham Biosciences No.RPNQ 0130)についての製造者のプロトコルを使用して回収する。SPAビーズに基づく蛍光をマイクロベータカウンタ(Wallace Triplex 1450,Perkin Elmer)で計数する。
式I及びIIの化合物を試験するのに使用できる標準的なT細胞増殖アッセイのための一般手順は以下の通りである。汎T細胞単離キット(Miltenyi Biotech、カタログ番号130−090−861)を用いて8〜16週齢のBalb/cマウスの脾臓からT細胞を精製する。試験化合物を0.25%DMSOに希釈し、各々10μg/mlの抗CD3抗体(BD No.553057)及び抗CD28抗体(BD No.553294)を用いて37℃で90分間プレコーティングした平底透明プレートにおいて100μlの最終容量で2.5×105精製マウス脾臓T細胞と共にインキュベートする。24時間のインキュベーション後、1μCi 3H−チミジンを添加し、プレートを更に36時間インキュベートした後、SPA[3H]チミジン取り込みアッセイシステム(Amersham Biosciences No.RPNQ 0130)についての製造者のプロトコルを使用して回収する。SPAビーズに基づく蛍光をマイクロベータカウンタ(Wallace Triplex 1450,Perkin Elmer)で計数した。
式I及びIIの化合物を試験するのに使用できるB細胞活性の阻害についての標準的なアッセイのための一般手順は以下の通りである。全マウス脾細胞を、8〜16週齢のBalb/cマウスの脾臓から赤血球溶解(BD Pharmingen No.555899)によって精製する。試験化合物を0.5%DMSOに希釈し、平底透明プレート(Falcon 353072)において200μlの最終容量で1.25×106脾細胞と共に37℃で60分間インキュベートする。次に15μg/ml IgM(Jackson ImmunoResearch 115−006−020)を添加して細胞を刺激し、37℃、5%CO2で24時間インキュベートする。24時間のインキュベーション後、細胞を円錐底透明96ウェルプレートに移し、1200×gで5分間の遠心分離によってペレット化する。細胞をCD16/CD32(BD Pharmingen No.553142)によって予備ブロッキングし、次いでCD19−FITC(BD Pharmingen No.553785)、CD86−PE(BD Pharmingen No.553692)及び7AAD(BD Pharmingen No.51−68981E)で三重染色する。細胞をBD FACSCaliburで選別し、CD19+/7AAD−群をゲーティングする。ゲーティングした群でのCD86表面発現のレベルを試験化合物濃度に対して測定する。
以下は、生細胞数を測定するのにXTT読み出しを用いる標準的なB−ALL(急性リンパ芽球性白血病)細胞生存試験のための手順である。このアッセイは、式I及びIIの化合物を、培養下のB−ALL細胞の生存を阻害するそれらの能力に関して試験するために使用できる。使用できる1つのヒトB細胞急性リンパ芽球性白血病株は、ATCCから入手可能なヒトプレB細胞ALL株、SUP−B15である。
以下の制限を加えて健常志願者からヒト血液を入手する:薬物を1週間服用していない非喫煙者。血液(8つの化合物を試験するための約20ml)を、静脈穿刺によってヘパリンナトリウムを含むVacutainer(登録商標)(Becton,Dickinson and Co.)チューブ中に収集する。
式I及びIIの化合物の効果を、以下のプロトコル(Mendoza et al(2002)Cancer Res.62:5485−5488)を使用した細胞増殖アッセイによって測定する。試薬及びプロトコルを含む、CellTiter−Glo(登録商標)発光細胞生存アッセイは市販されている(Promega Corp.,Madison,WI,Technical Bulletin TB288)。このアッセイは、細胞に入り込み、細胞増殖を阻害する化合物の能力を評価する。アッセイの原理は、均質アッセイにおいて存在するATPを定量化することによって存在する生細胞数を決定することに基づき、この均質アッセイでは、Cell−Titer Glo試薬の添加が細胞溶解及びルシフェラーゼ反応を介した発光シグナルの生成をもたらす。発光シグナルは存在するATPの量に比例する。
1.培地中に約104細胞を含有する細胞培養物100μlのアリコートを384ウェルの不透明な壁のあるプレートの各ウェルに入れる。
2.培地を含有し、細胞を含有しない対照ウェルを調製する。
3.化合物を実験ウェルに添加し、3〜5日間インキュベートする。
4.プレートを約30分間室温に平衡させる。
5.各ウェル中に存在する細胞培養培地の容量に等しい容量のCellTiter−Glo試薬を添加する。
6.培養物をオービタルシェーカーで2分間混合し、細胞溶解を誘導する。
7.プレートを室温で10分間インキュベートし、発光シグナルを安定化する。
8.発光を記録し、RLU=相対発光量としてグラフで報告する。
Claims (29)
- 式I:
I
[式中、
X1はCR1又はNであり;
X2はCR2又はNであり;
X3はCR3又はNであり;
ここでX1、X2及びX3の1つ又は2つはNであり;
Y1及びY2は、CH及びNから独立して選択され、ここでY1及びY2は各々Nではなく;
Z1はCR8又はNであり、ここでR8は、H、F、Cl、−CH3、−CH2CH3、−CH2CH2OH、−NH2、−NHCH3、−N(CH3)2、−OH、−OCH3、−OCH2CH3及び−OCH2CH2OHから選択され;
Z2はCR9又はNであり、ここでR9は、H、−CH3、−CH2CH3及び−CH2CH2OHから選択され;
R1、R2及びR3は、H、F、Cl、CN、−CH3、及び−CH2CH3から独立して選択され;
R4は、H、F、Cl、CN、−CH2OH、−CH(CH3)OH、−C(CH3)2OH、−CH(CF3)OH、−CH2F、−CHF2、−CH2CHF2、及び−CF3から選択され;
R5は、−CH3、−CH2CH3、−CH2OH、−CH2F、−CHF2、−CF3、−CN及び−CH2CH2OHから選択されるか;又は
2つのR5基は、3員、4員、5員もしくは6員炭素環もしくは複素環を形成するか;又は
R5基とR7基は、3員、4員、5員もしくは6員炭素環もしくは複素環を形成し;
nは0、1、2、3又は4であり;
R6は、H、−CH3、−CH2CH3、−CH2F、−CHF2、及び−CF3から選択され;
R7は、H、−CH3、−S(O)2CH3、シクロプロピル、アゼチジン−3−イル、オキセタン−3−イル及びモルホリン−4−イルから選択され;
ここで、複素環は、少なくとも1個の環原子が窒素、酸素、及び硫黄から選択されるヘテロ原子であり、残りの環原子がCである飽和又は部分不飽和炭素環式基を示す]
から選択される化合物又はその立体異性体、互変異性体もしくは薬学的に許容可能な塩。 - X1がNであり、X2がCR2であり、及びX3がCR3である、請求項1に記載の化合物。
- X1がCR1であり、X2がNであり、及びX3がCR3である、請求項1に記載の化合物。
- X1がCR1であり、X2がCR2であり、及びX3がNである、請求項1に記載の化合物。
- X1及びX3がNであるか、X1及びX2がNであるか、又はX2及びX3がNである、請求項1に記載の化合物。
- X2がCR2であり、及びR2がFである、請求項1に記載の化合物。
- X1及びX3がCHである、請求項6に記載の化合物。
- R4が−CH2OHである、請求項1に記載の化合物。
- 以下の構造:
を有する式Ia〜Ifから選択される、請求項1に記載の化合物。 - R5が−CH3であり、及びnが1又は2である、請求項1に記載の化合物。
- R7がオキセタン−3−イルである、請求項1に記載の化合物。
- Y1がCHである、請求項1に記載の化合物。
- Y2がCHである、請求項1に記載の化合物。
- Z1がCHである、請求項1に記載の化合物。
- Z2がCHである、請求項1に記載の化合物。
- 以下の表:
から選択される化合物。 - 以下の表:
から選択される化合物。 - 請求項1から17のいずれか一項に記載の化合物と薬学的に許容可能な担体、流動促進剤、希釈剤又は賦形剤を含んでなる薬学的組成物。
- 治療剤を更に含有する、請求項18に記載の薬学的組成物。
- 請求項1から17のいずれか一項に記載の化合物を薬学的に許容可能な担体と組み合わせることを含む、薬学的組成物を作製するための方法。
- 治療有効量の請求項18に記載の薬学的組成物を含む、免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝/内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する疾患又は障害を治療するための医薬。
- 前記疾患又は障害が免疫障害である、請求項21に記載の医薬。
- 前記免疫障害が関節リウマチである、請求項22に記載の医薬。
- 前記疾患又は障害が、全身及び局所炎症、関節炎、免疫抑制に関連する炎症、臓器移植拒絶反応、アレルギー、潰瘍性大腸炎、クローン病、皮膚炎、喘息、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、多発性硬化症、強皮症/全身性硬化症、特発性血小板減少性紫斑病(ITP)、抗好中球細胞質抗体(ANCA)血管炎、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、乾癬である、請求項21に記載の医薬。
- 前記疾患又は障害が、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、尿生殖路癌、食道癌、喉頭癌、グリア芽細胞腫、神経芽細胞腫、胃癌、皮膚癌、角化棘細胞腫、肺癌、類表皮癌、大細胞癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺腫、膵臓癌、腺癌、甲状腺癌、濾胞状癌、未分化癌、乳頭状癌、精上皮腫、黒色腫、肉腫、膀胱癌、肝臓癌及び胆道癌、腎臓癌、膵臓癌、骨髄障害、リンパ腫、へアリーセルの癌、口腔癌、鼻咽頭癌、咽頭癌、口唇癌、舌癌、口の癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、脳及び中枢神経系の癌、ホジキン病、白血病、気管支癌、甲状腺癌、肝臓及び肝内胆管の癌、肝細胞癌、胃癌、神経膠腫/グリア芽細胞腫、子宮内膜癌、黒色腫、腎臓及び腎盂の癌、膀胱癌、子宮体癌、子宮頸癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病(CLL)、骨髄性白血病、口腔及び咽頭の癌、非ホジキンリンパ腫、黒色腫、並びに絨毛結腸腺腫から選択される癌である、請求項21に記載の医薬。
- 抗炎症薬、免疫調節薬、化学療法剤、アポトーシス促進剤、向神経因子、心臓血管疾患を治療するための薬剤、肝疾患を治療するための薬剤、抗ウイルス薬、血液障害を治療するための薬剤、糖尿病を治療するための薬剤、及び免疫不全障害を治療するための薬剤から選択される付加的な治療剤が更に投与される、請求項21に記載の医薬。
- 請求項18に記載の薬学的組成物を含む、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する状態を治療するためのキット。
- 免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝/内分泌機能障害及び神経障害から選択され、ブルトン型チロシンキナーゼに起因する疾患又は障害を治療する際に医薬として使用するための、請求項18に記載の薬学的組成物。
- 免疫障害、癌、心臓血管疾患、ウイルス感染、炎症、代謝/内分泌機能障害及び神経障害の治療のための薬剤であって、ブルトン型チロシンキナーゼを介して作用する医薬の製造における、請求項18に記載の薬学的組成物の使用。
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UA111756C2 (uk) * | 2011-11-03 | 2016-06-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Сполуки гетероарилпіридону та азапіридону як інгібітори тирозинкінази брутона |
KR102091894B1 (ko) * | 2012-05-03 | 2020-03-20 | 제넨테크, 인크. | Lrrk2 조절제로서의 피라졸 아미노피리미딘 유도체 |
US9714450B2 (en) | 2012-08-31 | 2017-07-25 | New York University | Methods for diagnosing and treating schizophrenia |
JP6088063B2 (ja) * | 2012-11-16 | 2017-03-01 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | ブルトン型チロシンキナーゼの阻害剤 |
CN104177338B (zh) * | 2013-05-22 | 2018-04-03 | 南京勇山生物科技有限公司 | 一类布鲁顿激酶抑制剂 |
EP3016943B1 (en) | 2013-07-03 | 2019-08-21 | F. Hoffmann-La Roche AG | Heteroaryl pyridone and aza-pyridone amide compounds |
EP3048102A1 (en) * | 2013-09-20 | 2016-07-27 | Carna Biosciences Inc. | Novel triazine derivative |
JP2016535764A (ja) * | 2013-10-04 | 2016-11-17 | ビヨンド オンコロジー ファーマシューティカル エルエルシー | ブルトンのチロシンキナーゼの阻害剤 |
WO2015082583A1 (en) | 2013-12-05 | 2015-06-11 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Heteroaryl pyridone and aza-pyridone compounds with electrophilic functionality |
CN106922146B (zh) * | 2014-10-02 | 2020-05-26 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于治疗由布鲁顿酪氨酸激酶(btk)介导的疾病的吡唑甲酰胺化合物 |
CN104370833A (zh) * | 2014-10-26 | 2015-02-25 | 湖南华腾制药有限公司 | 一种1,4-二取代三唑衍生物的制备方法 |
MY196130A (en) * | 2015-03-10 | 2023-03-16 | Aurigene Discovery Tech Ltd | 1,2,4-Oxadiazole and Thiadiazole Compounds as Immunomodulators |
WO2017070708A1 (en) | 2015-10-23 | 2017-04-27 | Array Biopharma, Inc. | 2-aryl- and 2-heteroaryl-substituted 2-pyridazin-3(2h)-one compounds as inhibitors of fgfr tyrosine kinases |
CA3115526A1 (en) | 2018-10-15 | 2020-04-23 | Nurix Therapeutics, Inc. | Bifunctional compounds for degrading btk via ubiquitin proteosome pathway |
JP2022526713A (ja) | 2019-03-21 | 2022-05-26 | オンクセオ | がんの処置のための、キナーゼ阻害剤と組み合わせたDbait分子 |
EP3953346A1 (en) | 2019-04-09 | 2022-02-16 | Nurix Therapeutics, Inc. | 3-substituted piperidine compounds for cbl-b inhibition, and use of a cbl-b inhibitor in combination with a cancer vaccine and/or oncolytic virus |
EP3969447A1 (en) | 2019-05-17 | 2022-03-23 | Nurix Therapeutics, Inc. | Cyano cyclobutyl compounds for cbl-b inhibition and uses thereof |
CN114761006A (zh) | 2019-11-08 | 2022-07-15 | Inserm(法国国家健康医学研究院) | 对激酶抑制剂产生耐药性的癌症的治疗方法 |
US20230024442A1 (en) * | 2019-11-08 | 2023-01-26 | Nurix Therapeutics, Inc. | Bifunctional compounds for grading btk via ubiquitin proteosome pathway |
JP2023504147A (ja) | 2019-12-04 | 2023-02-01 | ニューリックス セラピューティクス,インコーポレイテッド | ユビキチンプロテオソーム経路を介したbtkの分解のための二官能性化合物 |
WO2021148581A1 (en) | 2020-01-22 | 2021-07-29 | Onxeo | Novel dbait molecule and its use |
BR112022016432A2 (pt) | 2020-02-20 | 2022-11-16 | Hutchison Medipharma Ltd | Compostos heterocíclicos de heteroarila e usos dos mesmos |
MX2022012469A (es) | 2020-04-06 | 2022-10-27 | Basf Se | Compuestos de imidazo-pirimidona como plaguicidas. |
KR20230104125A (ko) | 2020-09-21 | 2023-07-07 | 허치슨 메디파르마 리미티드 | 헤테로아릴 헤테로사이클릭 화합물 및 이의 용도 |
Family Cites Families (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
US5583024A (en) | 1985-12-02 | 1996-12-10 | The Regents Of The University Of California | Recombinant expression of Coleoptera luciferase |
US5543523A (en) | 1994-11-15 | 1996-08-06 | Regents Of The University Of Minnesota | Method and intermediates for the synthesis of korupensamines |
JPH08336393A (ja) | 1995-04-13 | 1996-12-24 | Mitsubishi Chem Corp | 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法 |
US6602677B1 (en) | 1997-09-19 | 2003-08-05 | Promega Corporation | Thermostable luciferases and methods of production |
US7405295B2 (en) | 2003-06-04 | 2008-07-29 | Cgi Pharmaceuticals, Inc. | Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds |
WO2005005429A1 (en) | 2003-06-30 | 2005-01-20 | Cellular Genomics, Inc. | Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of bruton’s tyrosine kinase by such compounds |
AU2005304473A1 (en) | 2004-11-10 | 2006-05-18 | Cgi Pharmaceuticals, Inc. | Imidazo[1 , 2-a] pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity |
TW200716551A (en) | 2005-03-10 | 2007-05-01 | Cgi Pharmaceuticals Inc | Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof |
NZ567140A (en) | 2005-10-07 | 2011-09-30 | Exelixis Inc | Azetidines as MEK inhibitors for the treatment of proliferative diseases |
PE20080839A1 (es) | 2006-09-11 | 2008-08-23 | Cgi Pharmaceuticals Inc | Determinadas amidas sustituidas, metodo de elaboracion y metodo de uso de las mismas |
US7838523B2 (en) | 2006-09-11 | 2010-11-23 | Cgi Pharmaceuticals, Inc. | Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof |
AR063946A1 (es) | 2006-09-11 | 2009-03-04 | Cgi Pharmaceuticals Inc | Determinadas pirimidinas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden. |
SG10202107066WA (en) * | 2007-03-28 | 2021-07-29 | Pharmacyclics Llc | Inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
CL2008002793A1 (es) | 2007-09-20 | 2009-09-04 | Cgi Pharmaceuticals Inc | Compuestos derivados de amidas sustituidas, inhibidores de la actividad de btk; composicion farmaceutica que los comprende; utiles en el tratamiento del cancer, trastornos oseos, enfermedades autoinmunes, entre otras |
US8426441B2 (en) | 2007-12-14 | 2013-04-23 | Roche Palo Alto Llc | Inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
US7683064B2 (en) | 2008-02-05 | 2010-03-23 | Roche Palo Alto Llc | Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase |
EP2297105B1 (en) | 2008-05-06 | 2015-09-02 | Gilead Connecticut, Inc. | Substituted amides, method of making, and use as btk inhibitors |
JP5536049B2 (ja) | 2008-06-24 | 2014-07-02 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 新規な置換ピリジン−2−オン及びピリダジン−3−オン |
PT2300459E (pt) | 2008-07-02 | 2013-07-04 | Hoffmann La Roche | Novas fenilpirazinonas utilizadas como inibidores de cinase |
CN102066370B (zh) | 2008-07-15 | 2014-05-14 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 苯基-咪唑并吡啶类和哒嗪类 |
JP5341187B2 (ja) * | 2008-07-18 | 2013-11-13 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 新規なフェニルイミダゾピラジン類 |
EP2365970B1 (en) | 2008-11-12 | 2018-03-21 | Gilead Connecticut, Inc. | Pyridazinones and their use as btk inhibitors |
US8299077B2 (en) * | 2009-03-02 | 2012-10-30 | Roche Palo Alto Llc | Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase |
WO2010122038A1 (en) * | 2009-04-24 | 2010-10-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
US8765754B2 (en) * | 2009-04-29 | 2014-07-01 | Locus Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolotriazine compounds |
AR078320A1 (es) * | 2009-09-04 | 2011-11-02 | Biogen Idec Inc | Derivados nitrogenados heterociclicos inhibidores de tirosinquinasas de bruton(btk), formulaciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos en el tratamiento de enfermedades autoinmunes, inflamatorias y canceres. |
MY160349A (en) | 2010-05-07 | 2017-02-28 | Gilead Connecticut Inc | Pyridone and aza-pyridone compounds and methods of use |
AR082590A1 (es) * | 2010-08-12 | 2012-12-19 | Hoffmann La Roche | Inhibidores de la tirosina-quinasa de bruton |
AU2012257802A1 (en) | 2011-05-17 | 2013-10-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase |
TW201311669A (zh) * | 2011-08-17 | 2013-03-16 | Hoffmann La Roche | 布魯頓氏酪胺酸激酶(bruton’s tyrosine kinase)之抑制劑 |
AR088643A1 (es) * | 2011-11-03 | 2014-06-25 | Genentech Inc | Compuestos de 8-fluoroftalazin-1(2h)-ona |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016029046A (ja) * | 2011-11-03 | 2016-03-03 | エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト | Btk活性阻害剤としての8−フルオロフタラジン−1(2h)−オン化合物 |
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