JP5877854B2 - 酵素処理バニラエキスの製造方法 - Google Patents
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Description
ラエキスであるバニラエキスの製造方法を提供するものである。
マダガスカル産バニラビーンズ(レッドビーンズ)を短軸方向に1cmの長さにカットして、細断物を得た。このバニラビーンズ裁断物100gを2Lの4つ口フラスコに仕込み、10質量%エタノール水溶液300gおよびリパーゼAY(天野エンザイム(株)製)を1g加え、40℃で16時間、回転速度100rpmで攪拌し、酵素処理を行った。酵素処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液を得た。濾過により分離された分離液を70℃達温にて酵素を加熱失活させ、遠沈処理により加熱失活物中の不溶物を除去することにより、バニラエキス180g(本発明品1)を得た。
実施例1において、リパーゼAYをリパーゼMER(天野エンザイム(株)製)に変更した以外は、すべて実施例1と同様に処理することにより、バニラエキス170g(本発明品2)を得た。
実施例1において、リパーゼAYを添加しない以外は、すべて実施例1と同様に処理することにより、バニラエキス170g(比較品1)を得た。
実施例1において、リパーゼAYを加えた酵素処理時の温度を40℃から70℃に変更した以外は、すべて実施例1と同様に処理することにより、バニラエキス180g(比較品2)を得た。
実施例1において、溶媒を10質量%エタノール水溶液から30質量%エタノール水溶液に変更した以外は、すべて実施例1と同様に処理することにより、バニラエキス170g(本発明品3)を得た。
実施例1において、溶媒を10質量%エタノール水溶液から60質量%エタノール水溶液に変更した以外は、すべて実施例1と同様に処理することにより、バニラエキス170g(比較品3)を得た。
マダガスカル産バニラビーンズ(レッドビーンズ)を短軸方向に1cmの長さにカットして、細断物を得た。このバニラビーンズ裁断物100gを2Lの4つ口フラスコに仕込み、10質量%エタノール水溶液300gおよびリパーゼAY(天野エンザイム(株)製)を1g加え、40℃で16時間、回転速度100rpmで攪拌し、酵素処理を行った。酵素処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液1を170g得た。抽出残渣を1Lの4つ口フラスコに仕込み、60質量%エタノール水溶液150gを加え、60℃で4時間、回転速度100rpmで攪拌抽出を行なった。抽出処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液2を160g得た。分離液1及び分離液2を混合し、混合した分離液を70℃達温にて酵素を加熱失活させ、遠沈処理により加熱失活物中の不溶物を除去することにより、バニラエキス330g(本発明品4)を得た。
マダガスカル産バニラビーンズ(レッドビーンズ)を短軸方向に1cmの長さにカットして、細断物を得た。このバニラビーンズ裁断物100gを2Lの4つ口フラスコに仕込み、10質量%エタノール水溶液300gおよびリパーゼAY(天野エンザイム(株)製)を1g加え、40℃で16時間、回転速度100rpmで攪拌し、酵素処理を行った。酵素処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液1を170g得た。抽出残渣を1Lの4つ口フラスコに仕込み、80質量%エタノール水溶液150gを加え、60℃で4時間、回転速度100rpmで攪拌抽出を行なった。抽出処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液2を170g得た。分離液1及び分離液2を混合し、混合した分離液を70℃達温にて酵素を加熱失活させ、遠沈処理により加熱失活物中の不溶物を除去することにより、バニラエキス340g(本発明品5)を得た。
実施例5において、リパーゼAYをリパーゼMER(天野エンザイム(株)製)に変更した以外は、すべて実施例5と同様に処理することにより、バニラエキス330g(本発明品6)を得た。
実施例5において、リパーゼAYを添加しない以外は、すべて実施例5と同様に処理することにより、バニラエキス330g(比較品4)を得た。
実施例5において、リパーゼAYを加えた酵素処理時の温度を40℃から70℃に変更した以外は、すべて実施例5と同様に処理することにより、バニラエキス340g(比較品5)を得た。
実施例5において、抽出残渣の抽出溶媒を80質量%エタノール水溶液から90質量%エタノール水溶液に変更した以外は、すべて実施例5と同様に処理することにより、バニラエキス340g(本発明品7)を得た。
実施例5において、酵素処理時間を4時間から8時間に変更した以外は、すべて実施例5と同様に処理することにより、バニラエキス330g(本発明品8)を得た。
マダガスカル産バニラビーンズ(レッドビーンズ)を短軸方向に1cmの長さにカットして、細断物を得た。このバニラビーンズ裁断物100gを2Lの4つ口フラスコに仕込み、10質量%エタノール水溶液300gおよびリパーゼAY(天野エンザイム(株)製)を1g加え、40℃で16時間、回転速度100rpmで攪拌し、酵素処理を行った。酵素処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液1を170g得た。抽出残渣を1Lの4つ口フラスコに仕込み、80質量%エタノール水溶液150gを加え、60℃で4時間、回転速度100rpmで攪拌抽出を行なった。抽出処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液2を170g得た。さらに、先の抽出操作により、分離液2から除かれた抽出残渣を1Lの4つ口フラスコに仕込み、80質量%エタノール水溶液150gを加え、60℃で3時間、回転速度100rpmで攪拌抽出を行なった。抽出処理後、30℃以下に冷却し、さらし布を用いて抽出残渣の濾過を行うことにより、分離液3を140g得た。分離液1、分離液2及び分離液3を混合し、混合した分離液を70℃達温にて酵素を加熱失活させ、遠沈処理により加熱失活物中の不溶物を除去することにより、バニラエキス480g(本発明品9)を得た。
前記の製造方法により得られたバニラエキスを、よく訓練されたパネラー10名により香気評価を行った。香気評価は、30mLサンプル瓶に前記のバニラエキスを用意し、比較品1を対象として瓶口の香気およびその溶液をにおい紙につけて評価を行った。香気評点は比較品1(酵素未処理品)と比較して、−1:香気が劣化している、0:大差なし、1:わずかながら熟成感のあるバニラ様香気、2:熟成感のあるバニラ様香気、3:著しく熟成感のあるバニラ様香気、として採点した。そのパネラー10名の平均点および平均的な香気評価結果を表3に示す。
以下の表4に示すように、加糖牛乳基材に前記本発明品1〜9および比較品1〜5を配合し、バニラ風味加糖牛乳を調製した。
本発明品1〜9および比較品1〜5に含まれるカプリル酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチルおよびリノール酸エチルの含有率をHPLC法にて測定した。分析結果を表6に示す。
標準液調製
10mLのメスフラスコにカプリル酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチルおよびリノール酸エチル標準品を約0.1g精密に量りとり、アセトニトリルでメスアップした後にさらに50%アセトニトリルで適宜精密に希釈し、標準液を調製した。
HPLC測定試料調製
抽出物約1gを10mLのメスフラスコに精密に量りとり、アセトニトリルでメスアップした後、PVDFメンブランフィルタ(ミリポア社、孔径0.45μm)処理を行った。この調製液をHPLC分析に供した。
HPLC分析条件
機種 :SHIMADZU PROMINENCE(島津製作所)
カラム :INERTSIL C4(ジーエル・サイエンス社製)
内径4.6mm×長さ250mm、粒子径5μm
カラム温度 :40℃
移動相 :A液 水:アセトニトリル:ギ酸=900:100:1
B液 水:アセトニトリル:ギ酸=100:900:1
グラジェント条件:(A):(B)=20:80(0分),20:80(5分),
〜0:100(10分),0:100(25分)
流速 :0.8mL/min
注入量 :10μL
測定時間 :40min.
検出器 :PDA(測定波長:270nm)
本発明品1〜9および比較品1〜5に含まれるバニリンの含有率をHPLC法にて測定した。分析結果を表7に示す。また、実施例12で定量したリノール酸エチルの含有率の実施例13で定量したバニリンの含有率に対する割合についても表7に示す。
標準液調製
10mLのメスフラスコにバニリン標準品を約0.1g精密に量りとり、メタノールでメスアップした後にさらにメタノールで適宜精密に希釈し、標準液を調製した。
HPLC測定試料調製
抽出物約1gを10mLのメスフラスコに精密に量りとり、メタノールでメスアップした後、PVDFメンブランフィルタ(ミリポア社、孔径0.45μm)処理を行った。この調製液をHPLC分析に供した。
HPLC分析条件
機種 :SHIMADZU LC20−T(島津製作所)
カラム :Inertsil ODS−80A(ジーエル・サイエンス社製)
内径4.6mm×長さ250mm、粒子径5μm
カラム温度 :40℃
溶離液 :メタノール:水:酢酸=400:600:5
注入量 :10μL
流速 :0.6ml/min
検出条件 :UV280nm
Claims (5)
- 1質量%〜40質量%濃度の含水エタノール中で、バニラビーンズをリパーゼ処理し、抽出することを特徴とするバニラエキスの製造方法。
- リパーゼ処理時に30℃〜50℃で加熱処理することを特徴とする請求項1に記載のバニラエキスの製造方法。
- リパーゼ処理し、バニラエキスを抽出した後のバニラエキスの抽出残渣を、さらに30質量%〜99質量%濃度の含水エタノールで1回または2回以上抽出することを特徴とする請求項1または2に記載のバニラエキスの製造方法。
- 請求項3に記載の含水エタノールの全部または一部が請求項1または2で得られたバニラエキスであることを特徴とするバニラエキスの製造方法。
- 以下の(1)から(3)の工程を含むバニラエキスの製造方法。
(1)1質量%〜40質量%濃度の含水エタノール中で、バニラビーンズをリパーゼ処理し、バニラエキスを抽出する工程、(2)抽出残渣を、30質量%〜99質量%濃度の含水エタノールでバニラエキスを抽出する工程、(3)工程(1)で得られたリパーゼ処理バニラエキスと工程(2)で得られたバニラエキスを混合する工程。
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