JP5744905B2 - 生体試料調製方法 - Google Patents
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Description
本発明は、生体組織を一切断面によって薄切する薄切ステップと、該薄切ステップにより薄切された2つの組織切片の内の一方を染色する染色ステップと、該染色ステップにおいて染色された組織切片の染色画像を取得する染色画像撮影ステップと、前記薄切ステップにより薄切された2つの前記組織切片の内の他方を分割線に沿って分割可能な基板上に設置して撮影することによって、前記他方の組織切片に対して、該組織切片を複数の断片に分割する前記分割線が定義付けられた無染色画像を取得する無染色画像撮影ステップと、該無染色画像撮影ステップにおいて取得された無染色画像と、前記染色画像撮影ステップにおいて取得された染色画像とを対応付ける対応付けステップとを含む生体試料調製方法を提供する。
上記発明においては、前記対応付けステップが、前記無染色画像および前記染色画像から、同一の特徴点を複数抽出する特徴点抽出ステップと、該特徴点抽出ステップにより抽出された特徴点の位置を一致させるように前記無染色画像と前記染色画像を重畳する重畳ステップとを含んでもよい。
このようにすることで、別々の画像内の組織切片を容易にかつより正確に対応付けることができる。
このようにすることで、複数の断片の中から、例えば操作者によって指定された断片を選択的に回収することができる。
このようにすることで、染色画像から判断した所望の組織形態を有する断片のみを選択的に回収することができる。
このようにすることで、他方の組織切片を分割して回収した後であっても、染色ステップ、染色画像撮影ステップおよび対応付けステップを行うことにより、回収された各断片がどのような組織形態を有するかを、位置情報に基づいて染色画像を参照して知ることができる。これにより、例えば、変性しやすい生体分子を解析したい場合など、他方の組織切片の処理を一方の組織切片の処理よりも優先して迅速に進めることができる。
本実施形態に係る生体試料調製方法は、図1に示されるように、生体組織から2枚の組織切片1,2を切り出す薄切ステップS1と、一方の組織切片1を染色する染色ステップS2と、染色された一方の組織切片1を撮影する染色画像撮影ステップS3と、分割線3を有する基板4上に他方の組織切片2を貼り付けた状態で撮影する無染色画像撮影ステップS4と、取得された染色画像5および無染色画像6のそれぞれから組織切片1,2の輪郭7,8を抽出する輪郭抽出ステップ(対応付けステップ)S5と、染色画像5および無染色画像6を重畳する重畳ステップ(対応付けステップ)S6と、重畳された画像に基づいて組織切片2から採取すべき位置を指定する指定ステップS7と、他方の組織切片2から指定された位置を回収する回収ステップS8とを備えている。
分割線3は、例えば、予め分割されて粘着シート上に整列された複数の小片4a同士の隙間によって構成されていてもよい。このようにすることで、操作者が基板4を表面方向に引っ張ったときにより確実に基板4を分割することができる。
2 解析用切片
2a 断片
3 分割線
4 基板
4a 小片
5 染色画像
6 無染色画像
7,8 輪郭
9 マルチウェルプレート
10 リスト
S1 薄切ステップ
S2 染色ステップ
S3 染色画像撮影ステップ
S4 無染色画像撮影ステップ
S5 輪郭抽出ステップ(対応付けステップ)
S6 重畳ステップ(対応付けステップ)
S7 指定ステップ
S8 回収ステップ
Claims (6)
- 生体組織を一切断面によって薄切する薄切ステップと、
該薄切ステップにより薄切された2つの組織切片の内の一方を染色する染色ステップと、
該染色ステップにおいて染色された組織切片の染色画像を取得する染色画像撮影ステップと、
前記薄切ステップにより薄切された2つの前記組織切片の内の他方を分割線に沿って分割可能な基板上に設置して撮影することによって、前記他方の組織切片に対して、該組織切片を複数の断片に分割する前記分割線が定義付けられた無染色画像を取得する無染色画像撮影ステップと、
該無染色画像撮影ステップにおいて取得された無染色画像と、前記染色画像撮影ステップにおいて取得された染色画像とを対応付ける対応付けステップとを含む生体試料調製方法。 - 前記対応付けステップが、前記無染色画像および前記染色画像から2つの前記組織切片の輪郭をそれぞれ抽出する輪郭抽出ステップと、該輪郭抽出ステップにより抽出された2つの前記輪郭を一致させるように前記無染色画像と前記染色画像とを重畳する重畳ステップとを含む請求項1に記載の生体試料調製方法。
- 前記対応付けステップが、前記無染色画像および前記染色画像から、同一の特徴点を複数抽出する特徴点抽出ステップと、該特徴点抽出ステップにより抽出された特徴点の位置を一致させるように前記無染色画像と前記染色画像を重畳する重畳ステップとを含む請求項1に記載の生体試料調製方法。
- 前記対応付けステップの後に、前記組織切片から採取すべき前記断片を指定する指定ステップと、
前記組織切片を前記分割線に沿って複数の断片に分割し、前記指定ステップにおいて指定された前記断片を回収する回収ステップとを含む請求項1から請求項3のいずれかに記載の生体試料調製方法。 - 前記指定ステップが、前記染色画像に基づいて、前記組織切片から採取すべき位置を特定する特定ステップと、前記無染色画像に基づいて、該特定ステップにより特定された採取すべき位置に対応付けられた断片を決定する決定ステップとを含む請求項4に記載の生体試料調製方法。
- 前記組織切片を前記分割線に沿って複数の断片に分割し、その前記組織切片における位置情報を付して各前記断片を回収する回収ステップを含む請求項1から請求項3のいずれかに記載の生体試料調製方法。
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