JP5719800B2 - アデノウイルスおよびそれをコードしている核酸の新たな使用 - Google Patents
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Description
a)YB−1核陽性細胞内で、E1B−55K、E3ADPおよびE4orf6およびE4orf3を含む群から選ばれる少なくとも1つのウイルス遺伝子がトランス活性化されること;および
b)核内、特にウイルス発癌遺伝子タンパク質が存在している細胞の核内でのYB−1の誘導を欠くこと。
型プラスミノーゲン活性化因子を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、耐性関連因子は、P−糖タンパク質、MRPおよびGSTを含む、およびそれらをコードする核酸を含む群より選ばれるのが好ましい。実施態様の一つでは、抗アポトーシス因子は、BCL2を含み、更にそれをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、発癌遺伝子はRas、特に突然変異型Ras、RbおよびMycを含み、またそれらをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、血管新生因子はVEGFおよびHMGタンパク質を含む、ならびにそれらをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、DNA合成酵素はテロメラーゼを含む、ならびにそれをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、DNA修復酵素はKu−80を含み、またそれをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、成長因子はPDGF、EGFおよびM−CSFを含み、またそれらをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、レセプターは特には成長因子に関するレセプターであり、この場合の成長因子はPDGF、EGFおよびM−CSFを含み、またそれらをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、転写因子はYB−1を含み、またそれをコードする核酸も含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、金属プロテアーゼはマトリックス金属プロテアーゼであることが好ましい。好適実施態様では、金属プロテアーゼはMMP−1およびMMP−2を含み、またそれらをコードする核酸を含む群より選ばれる。実施態様の一つでは、ウロキナーゼ型プラスミノーゲン活性化因子は、uPa−Rを含み、またそれをコードする核酸を含む群より選ばれる。
−腫瘍組織のサンプルを検査するステップ、および
−YB−1が細胞周期とは無関係に核内に局在しているか決定するステップ、を含む方法に関する。
図1はAdE1/E3マイナス、即ちE1/E3欠失アデノウイルスと野生型アデノウイルスおよびアデノウイルスdl520の構造デザインを示している。
図2はp300,p107およびp105の結合に関係するE1Aタンパク質の結合ドメインを示している。P300およびP107は、細胞質結合タンパク質である。腫瘍抑制タンパク質である網膜芽細胞腫タンパク質(pRb)の結合は、CR1およびCR2を通じて媒介される。研究からpRbおよびp107/p300は細胞転写因子E2Fと組み合わさり効率的に転写制御することが示されている。野生型E1Aタンパク質はE2FのRbへの結合を妨害する。即ち放出されたE2FはE2初期プロモータに結合して、アデノウイルスの複製を誘導する。
100,000個のU2OS細胞をウエルに播いた。翌日細胞に図3に示すような各種アデノウイルスを感染させた。感染は無血清DMEM培地500μl中で、37℃で1時間行った。続いて感染培地を取り除き、完全培地(10%FCS/DMEM)2mlと交換した。3日後にクリスタルバイオレット染色で分析を行った。
100,000個の257RDB細胞をウエルに播いた。翌日細胞に図4に示すような各種アデノウイルスを感染させた。感染は無血清DMEM培地500μl中で、37℃で1時間行った。続いて感染培地を取り除き、完全培地(10%FCS/DMEM)2mlと交換した。3日後にクリスタルバイオレット染色で分析を行った。
図5に示すように、E1Aタンパク質のアミノ酸4〜138およびそれをコードする核酸を欠失しており、さらにアミノ酸218の後に停止コドンを含むために発現する断頭型(truncate)E1Aタンパク質が完全なE1Aタンパク質のCR3領域を含んでいるアデノウイルスdl1119/1131をYB−1核陰性U2OS細胞に感染した場合、20pfu/細胞のMOIでは溶解は起きなかった。陰性コントロールには非感染細胞層を用いた。
本実施例は核内YB−1が転写因子としてmdr1プロモータ(多剤耐性プロモータ)内にあるY−ボックス(CAAT配列)に結合しなければならないという考察に基づいている。これを検出するために、いわゆるEMSA分析(電気泳動移動度シフトアッセイ)を行った。これに関連して、核タンパク質を単離し、続いてタンパク質1〜10μgを短いDNA鎖(オリゴ)と共の37℃でインキュベーションした。核内YB−1を決定するために以下のオリゴヌクレオチドを使用した;U2O3と反対のmdr1プロモータ(位置−86〜−67):TGAGGCTGATTGGCTGGGCA(Xボックスには下線を付した)。
本実施例は初期ウイルス遺伝子E1B−55KおよびE4orf6をプラスミドpE4orf6によるトランスフェクションおよびE1/E3欠失アデノウイルスAd−55Kによる感染で置換えられることを示す。Ad−55KはE1B−55KをE1にクローニングし、CMVの制御下に置いたE1/E3欠失ウイルスである。この置換は、AdYB−1、即ちYB−1を発現するアデノウイルスがこれら初期遺伝子を発現していないという事実、および本発明者が核内にYB−1を含む複製系でのこれら初期遺伝子を置換することで複製効率および粒子形成能率をそれぞれ野生型アデノウイルスであるAd5型のそれと同程度まで上げることができることを認識していたという事実より必要であった。
リポフェクタミンを用いた各105個のU2OS細胞へのプラスミドpE4orf6のトランスフェクション。プラスミドpEorf6はCMV制御下にある初期ウイルス遺伝子E4orf6をコードするDNA配列を保持している。プラスミドpE4orf6をトランスフェクションした24時間後に、細胞にYB−1発現E1/E3欠失アデノウイルスAdYB−1(50pfu/細胞)およびE1/E3欠失E1B−55KアデノウイルスAd−55K(50pfu/細胞)を感染させた。Ad−55KはCMV制御下にあるウイルス遺伝子E1B−55Kをトランス遺伝子として保持するE1/E3欠失ウイルスである。
各種細胞増殖抑制薬の添加がヒト転写因子YB−1の核内局在化を誘導することは、先行技術において知られていた。本発明者が見出したように、核内に局在したYB−1は、アデノウイルスのE2−後期プロモータの活性化によりアデノウイルスの複製をコントロールする。両効果の組み合わせを利用すれば特異的な腫瘍溶解を得ることができる。
本インビボ試験で使用したHeLa(YB−1核陰性)および257RDB(YB−1核陽性)細胞は、無菌細胞培養条件にて拡大した。細胞をマウス(系統CD1NuNu)に注射して皮下腫瘍を形成させる前に、細胞をトリプシン処理して集め、DMEM培地(10%FCS)に加え、細胞数を測定してからPBSで1回洗浄した。続いて細胞を遠心分離してPBSを除き、細胞を希望数する細胞数になるよう新鮮PBS中に分配した。本研究で皮下注射した細胞の数は両細胞系統とも5×106細胞であった。注射は動物の一方の側腹部に行い、より区別し易いようにHeLa細胞は右側に、そして257RDB細胞は左側に注射した。腫瘍の増殖を週2回調べ、ノギスを使って腫瘍の長さおよび幅を測定した。その結果を用い、次式より腫瘍の容積を計算した:
3/4π*a/2*(b/2)2 a=長さ、b=幅
実施例9に於いて、発生中の腫瘍の中央部から採取した腫瘍サンプルよりDNAを抽出した。抽出にはQiagen社のDneasy Tissueキットを用いた。DNAの単離は製造元の指示書に従い実施した。それによれば、DNAは細胞からアルカリ溶解により放出された。続いて単離したDNAはカラムを使って精製される。次に単離したDNAの濃度を260nmの光度測定より決定した。分析はDNAサンプル2μgを用いて行い、サンプルは制限酵素Kpn I、10単位で消化した。次にサンプルを0.8%のアガロースゲルを用いて電気泳動により分離した。続いてDNAをナイロン膜上にブロッティングした(Schleicher & Schuell社のシステムを用いて実施)。膜上にブロッティングされたDNAを特異的な1501bpのDNAプローブとハイブリダイゼーションさせた。上記1501bpのDNAプローブは、Ad5配列をコードするE2A内にある3369bpのKpn I断片と特異的に結合する。プローブはPCR(プライマー:5’−GTC GGA GAT CAG ATC CGC GT、5’−GAT CCT CGT CGT CTT CGC TT)により準備し、32Pを用いて射線標識した。次に膜を洗い、フィルムに感光した。
100、000〜200、000個の各細胞を6個のウエルを持つプレート(6ウエルプレート)、FCSを10%含むL15培地(耐性細胞)およびDMEM(非耐性細胞)に接種した。24時間後にdl520および野生型アデノウイルスを感染させた(10pfu/細胞)。感染3日後(インフェクション後)、凍結と融解を3回繰り返して細胞浮遊液よりウイルス粒子を放出させた。次に293細胞を使ってプラークアッセイを行い、形成した感染粒子(プラーク形成単位/ml(pfu/ml))を決定した。結果を図15に示す。プラークアッセイの結果は、dl520がYB−1核陽性細胞(257RDBおよび181RDB)では野生型アデノウイルスの場合と同様に複製することを示した。この限りにおいて、本発明に従ってここに記載のアデノウイルスを使用する場合には、野生型アデノウイルスと同様の複製効率が観察できた。
図16はアデノウイルスベクターXvir03の構造デザインを示す。アデノウイルスXvir03は、いわゆるE1/E3欠失アデノウイルスである。このことは、アデノウイルス複製に機能するE1A、E1BおよびE3タンパク質が作られないことを意味する。E1領域の欠失は342〜3528の範囲である;アミノ酸位置27865〜30995のE3領域の欠失。本明細書で使用する場合、用語「E1欠失ウイルス」とは、E1がもはや機能的に作用しないウイルスを意味する。これは、その他の核酸配列およびアミノ酸配列は未変性な状態で不活性化することにより達成できるが、しかしこのことは欠失したE1領域がコードするタンパク質が様々なサイズを持つことを意味することにもなる。E1AおよびE1Bタンパク質およびそれらをコードする核酸を欠くことにより、E4orf6の様なE4領域は弱くにしか発現されないか(野生型アデノウイルスの1〜5%)、または全く発現されない。ウイルス遺伝子E1B55kおよびE4orf6はXvir03内に導入された異種のCMVプロモータ(Clontech: Plasmid pShuttle)によりE1領域内で発現する。上記CMVプロモータに代わって、E1Aの発現に関連して明細書中に開示したその他プロモータを用いることができる。両遺伝子のオープンリーディングフレームは、いわゆるIRES配列(内部リボソーム進入部位)(Plletier, J.およびSonenberg, N.Nature、1988年、334、320〜325)により互いに連結している。このエレメント(Novagen:pCITE)は1種類のmRNAから2種類のタンパク質を発現させる。
プラスミドE1B55k−pShuttleを、M.Dobelstein(マールブルグ大学)のpCGNE1Bより、XbaIおよびBfrIを用いてE1B55kのオープンリーディングフレームをClontech社製のpShuttleベクター内にクローニングして作製した。続いてpShuttle内のE1B55kをApaIを使って直線化し、末端を平滑末端とし、NheIを使って切断した。
図17から分かるように、Xvir03/01はXvir03を更に発展させたものである。例えばここに記した遺伝子の様な治療目的の遺伝子やトランス遺伝子をE3領域内にクローニングできる。さらに、E4領域内に欠失を導入してXvir03の発現カセットに由来するE4orf6との間で相同的組換えが起こるのを回避した。これによってより大型のトランス遺伝子をこの構築体内にクローニングすることが可能になった。欠失型のE3領域にはカセット導入に適したSacI、NdeIおよびNheI制限部位があり、ここに例えば治療用トランス遺伝子をクローニングすることができる。
Clontech社製pAdenoX−Plasmidには3’ITR領域の後に野生型アデノウイルスには無いSfuI向けの制限部位がある。E3〜E4領域をSpeI(位置23644)およびSfuIを使ってpAdenoX(Clontech)から取り出し、pcDNA3.1(+)(Invitrogen)内にトランスフェクションした=pcDNA3.1−E3Δ27865−30995−E4。E4ORF6の大部分、即ち33241〜33875をPstIを用いて取り出した=pcDNA3.1−E3Δ27865−30995、E4Δ33241−33875。Xvir03を更に発展させるために、pcDNA3.1−E3Δ27865−30995、E4Δ33241−33875由来の欠失E3/E4領域をSfuIおよびSpeIを使ってプラスミドpAdenoX内にクローニングした=pAdnoXE3Δ27865−30995、E4Δ33241−33875。
100、000個の細胞(257RDBおよび181RDB)を6個のウエルを持つプレート(6ウエルプレート)の各ウエルに接種した。翌日細胞に、図18に示すようにAd312(20pfu/ml)およびXvir03(5pfu/ml)を感染させた。感染は無血清DMEM培地500μl中で、37℃、1時間実施した。次に感染培地を取り除き、完全培地(10%FCS/DMEM)2mlと交換した。5日後にクリスタルバイオレット染色による分析を行った。結果を図18Aおよび18Bに示す。
Claims (25)
- 腫瘍を患う患者がアデノウイルスを用いて処置され得るかどうかを決定するインビトロ方法であって、ここでアデノウイルスは核内にYB−1がない細胞では複製できないが、核内にYB−1を有する細胞では複製し、ここでアデノウイルスは発癌遺伝子タンパク質をコードしており、それが少なくとも1つのアデノウイルス遺伝子をトランス活性化し、ここでアデノウイルス遺伝子はE1B55kDa、E4orf6、E4orf3およびE3ADPを含む群から選ばれ、ここで発癌遺伝子タンパク質はE1Aであり、アデノウイルスは、AdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520を含む群より選ばれ、そして方法は、
− 腫瘍のサンプルを検査するステップ、および
− YB−1が腫瘍細胞の細胞周期とは無関係に腫瘍細胞の核内に局在しているかどうかを決定するステップ、
を含む方法。 - アデノウイルスを用いて処置され得る腫瘍患者をスクリーニングするインビトロ方法であって、ここでアデノウイルスは核内にYB−1がない細胞では複製できないが、核内にYB−1を有する細胞では複製し、ここでアデノウイルスは発癌遺伝子タンパク質をコードしており、それが少なくとも1つのアデノウイルス遺伝子をトランス活性化し、ここでアデノウイルス遺伝子はE1B55kDa、E4orf6、E4orf3およびE3ADPを含む群から選ばれ、ここで発癌遺伝子タンパク質はE1Aであり、アデノウイルスは、AdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520を含む群より選ばれ、そして方法は、
− 腫瘍のサンプルを検査するステップ、および
− YB−1が腫瘍細胞の細胞周期とは無関係に腫瘍細胞の核内に局在しているかどうかを決定するステップ、
を含む方法。 - 核内のYB−1の存在が、YB−1に対する抗体、YB−1に対するアプタマー、YB−1に対するシュピーゲルマーおよびYB−1に対する抗カリンを含む群より選ばれる作用物質によって決定される、請求項1〜2のいずれか1項に記載の方法。
- 作用物質がYB−1に対する抗体である、請求項3記載の方法。
- アデノウイルスがdl520およびdl1119/1131からなる群より選ばれる、請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
- アデノウイルスがdl520である、請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
- アデノウイルスがAdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520からなる群より選ばれ、さらにE1B19kDaを欠失している、請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法。
- E1AがE1A12Sである、請求項1〜7のいずれか1項に記載の方法。
- 細胞が細胞周期と無関係にYB−1を核内に有する、請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 腫瘍またはその一部を形成する細胞が、医薬的活性作用物質に対し耐性である、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
- 細胞が、膜結合輸送タンパク質であるP糖タンパク質の過剰発現を示す、請求項1〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 医薬的活性作用物質が抗癌剤である、請求項10〜11のいずれか1項に記載の方法。
- 医薬的活性作用物質が細胞増殖抑制薬である、請求項12記載の方法。
- 腫瘍をアデノウイルスと接触させるべきか、および/またはそれらにより処置するかどうかを決定するために、腫瘍細胞を特徴付けするための方法における、YB−1に結合する抗体、YB−1に結合するアプタマーおよびYB−1に結合するシュピーゲルマーからなる群より選ばれる化合物のインビトロでの使用であって、ここでアデノウイルスは核内にYB−1がない細胞では複製できないが、核内にYB−1を有する細胞では複製し、ここでアデノウイルスは発癌遺伝子タンパク質をコードしており、それが少なくとも1つのアデノウイルス遺伝子をトランス活性化し、ここでアデノウイルス遺伝子はE1B55kDa、E4orf6、E4orf3およびE3ADPを含む群から選ばれ、ここで発癌遺伝子タンパク質はE1Aであり、アデノウイルスは、AdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520を含む群より選ばれ、そして方法は、
− 化合物に腫瘍のサンプルを暴露させるステップ、および
− YB−1が腫瘍細胞の細胞周期とは無関係に腫瘍細胞の核内に局在しているかどうかを決定するステップ、
を含む、使用。 - 患者をアデノウイルスより処置するかどうかを決定するために、腫瘍を患う患者の細胞を特徴付けするための方法における、YB−1に結合する抗体、YB−1に結合するアプタマーおよびYB−1に結合するシュピーゲルマーからなる群より選ばれる化合物のインビトロでの使用であって、ここでアデノウイルスは核内にYB−1がない細胞では複製できないが、核内にYB−1を有する細胞では複製し、ここでアデノウイルスは発癌遺伝子タンパク質をコードしており、それが少なくとも1つのアデノウイルス遺伝子をトランス活性化し、ここでアデノウイルス遺伝子はE1B55kDa、E4orf6、E4orf3およびE3ADPを含む群から選ばれ、ここで発癌遺伝子タンパク質はE1Aであり、アデノウイルスは、AdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520を含む群より選ばれ、そして方法は、
− 化合物に腫瘍のサンプルを暴露させるステップ、および
− YB−1が腫瘍細胞の細胞周期とは無関係に腫瘍細胞の核内に局在しているかどうかを決定するステップ、
を含む、使用。 - 作用物質がYB−1に対する抗体である、請求項14または15記載の使用。
- アデノウイルスがdl520およびdl1119/1131からなる群より選ばれる、請求項14〜16のいずれか1項記載の方法。
- アデノウイルスがdl520である、請求項14〜16のいずれか1項記載の方法。
- アデノウイルスがAdΔ24、dl922−947、E1Ad/01/07、d1119/1131、CB016およびdl520を含む群より選ばれ、さらにE1B19kDaを欠失している、請求項14〜18のいずれか1項に記載の方法。
- E1AがE1A12Sである、請求項14〜19のいずれか1項に記載の使用。
- 細胞が細胞周期と無関係にYB−1を核内に有する、請求項14〜20のいずれか1項に記載の使用。
- 腫瘍またはその一部を形成する細胞が、医薬的活性作用物質に対し耐性である、請求項14〜23のいずれか1項に記載の使用。
- 細胞が、膜結合輸送タンパク質であるP糖タンパク質の過剰発現を示す、請求項14〜22のいずれか1項に記載の使用。
- 医薬的活性作用物質が抗癌剤である、請求項14〜23のいずれか1項に記載の使用。
- 医薬的活性作用物質が細胞増殖抑制薬である、請求項24記載の使用。
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US6080578A (en) | 1996-12-31 | 2000-06-27 | Onyx Pharmaceuticals, Inc. | Cytopathic adenoviral E1B mutated viruses for therapy and prophylaxis of neoplasia |
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ATE376062T1 (de) | 1997-08-04 | 2007-11-15 | Cell Genesys Inc | Enhancer des menschlichen glandulären kallikreingens, vektoren die ihn enthalten und methoden für seine verwendung |
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DE69838340T2 (de) | 1997-10-09 | 2008-05-21 | Wellstat Biologics Corp. | Behandlung von neoplasmen mit interferonempfindlichen, klonalen viren |
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US6649158B1 (en) | 1998-10-15 | 2003-11-18 | Canji, Inc. | Methods and compositions to induce antitumor response |
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